mohos y levaduras

INTRODUCCION

Los hongos y levaduras se encuentran en el medio ambiente pueden encontrarse como flora normal en los alimentos o como contaminantes en equipos mal sanitizados.El presente trabajo nos informar acerca de los mohos y levaduras que se encuentran en los alimentos expuestos al medio ambiente sin buena prctica de manufactura o los alimentos de consumo diario.Se menciona tambin una norma con la que se debe cumplir cuando laboramos con una fbrica de alimentos para evitar este tipo de contaminantes que podran causar serias enfermedades a los clientes o consumidores de los productos de dicha empresa por lo tanto es recomendable aprender ms sobre ella.La prevencin de los hongos y levaduras es lo primordial para evitar su desarrollo y crecimiento.Acompaenos a estudiar y revisar mas sobre el tema, esperamos sea de su agrado .

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:Diferenciar los mohos y levaduras de acuerdo a sus caractersticas y propiedades de los mismos.OBJETIVOS ESPECIFICOSAmpliar mas nuestros conocimientos acerca de los mohos y levaduras en cuanto a los daos que causaran en nuestro organismo al momento de consumirlos.Comprender el fundamento de todas las etapas del mtodo de deteccin y cuantificacin de mohos y levaduras en alimentos.

MARCO TEORICO

Mtodo para la cuenta de mohos y levaduras en alimentos.

GENERALIDADES

Los hongos y las levaduras se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente, pueden encontrarse como flora normal de un alimento, o como contaminantes en equipos mal sanitizados. Ciertas especies de hongos y levaduras son tiles en la elaboracin de algunos alimentos, sin embargo tambin pueden ser causantes de la descomposicin de otros alimentos. Debido a su crecimiento lento y a su baja competitividad, los hongos y levaduras se manifiestan en los alimentos donde el crecimiento bacteriano es menos favorable. Estas condiciones pueden ser bajos niveles de pH, baja humedad, alto contenido en sales o carbohidratos, baja temperatura de almacenamiento, la presencia de antibiticos, o la exposicin del alimento a la irradiacin. Por lo tanto pueden ser un problema potencial en alimentos lcteos fermentados, frutas, bebidas de frutas, especias, oleaginosas, granos, cereales y sus derivados y alimentos de humedad intermedia como las mermeladas, cajetas, especias, etc.

Los hongos y levaduras pueden utilizar ciertos sustratos como pectinas, carbohidratos como polisacridos, cidos orgnicos, protenas y lpidos. Tambin pueden causar problemas a travs de:(a) sntesis de metabolitos txicos (micotoxinas),(b) resistencia al calor, congelamiento, antibiticos o irradiacin y(c) habilidad para alterar sustratos no favorables permitiendo el crecimiento de bacterias patgenas. Pueden tambin causar malos olores y sabores y la decoloracin de las superficies de alimentos.

El trmino moho se suele aplicar para designar aciertos hongos filamentosos multicelular es cuyo crecimiento en la superficie delos alimentos sesuelereconocer fcilmenteporsuaspectoaterciopeladooalgodonoso,avecespigmentado. Generalmente todo alimento enmohecido se considera no apto para el consumo. La identificacin y clasificacin de los mohos se basa en observaciones macroscpicas y microscpicas.

HifasymicelioE ltalo de los mohos est formado por una masa de filamentos ramificados, llamados hifas, llamndose micelio al conjunto de las hifas. Las hifas pueden ser sumergidas o areas. Tambin se pueden clasificar en hifas vegetativas o en crecimiento, las cuales se encargan de la nutricin del moho, y en hifas frtiles o hifas que producen los rganos reproductores. Los mohos se dividen en dos grupos: septados, es decir, provistos de tabiques transversales que dividen a las hifas, y no septadoscenocticos,cuyashifasestnformadasporcilindrossintabiques transversales. Este tipo de hifas posee ncleos diseminados a lo largo del cilindro y se les denomina multicelular. Determinadas estructuras del micelio o determinados rganos ayudan a identificar a los mohos. Por ejemplo los rizoides o anclajes de los gneros Rhizopuso Absidia, la clula basada al del gnero Aspergillusy la ramificacin dicotmica, o en forma de Y, del gnero Geotrichum.

rganos o estructuras reproductorasLos mohos se reproducen principalmente por medio de esporas asexuales. Algunos mohos tambin producen esporas sexuales. A tales hongos se les denomina perfectos, los cuales se dividen en Oomycetesy Zygomycetes sino son septados, obienen Ascomycetes y Basidiomycetes si son septados, en contraposicin a los mohos imperfectos, FungiImperfecti, los cuales slo poseen esporas asexuales.

Esporas asexuales Los mohos producen gran cantidad de esporas asexuales, son pequeas, ligeras y resistentes a la desecacin. Se diseminan fcilmente por la atmsfera para sedimentar y originar el talo de un nuevo moho. Los tres tipos principales de esporas asexuales son:(1)conidios,(2)artrosporasuoidiosy (3) esporangiosporas. Losconidios se separan ,o crecen, en determinadas hifas frtiles denominadas conidiforos y generalmente son libres, es decir, no se encuentran dentro de ningn receptculo, en contraposicin a las esporangiosporas, las cuales se encuentran dentro de un esporangio o receptculo, situado en el extremo de una hifa frtil, el esporangiforo. Las artrosporas se forman por fragmentacin de una hifa. El extremo en grosado del esporangiforo se denomina columnelay adopta formas tpicas encada una delas distintas especies demohos. Algunos mohos poseenconidios comprimidos uno contra otro, dispuestos en cadenas, y que nacen de una clula especializada, el este rigma o filide situada en el extremo del conidiforo.

Propiedades fisiolgicasEn comparacin con la mayora de las levaduras y de las bacterias, la mayora de los mohos necesitan menor cantidad de humedad disponible. Un porcentaje total de humedad por debajo del 14 al 15 por ciento en la harina o en algunos frutos secos impedir o retardar mucho el crecimiento de los mohos. Los mohos podran considerarse mesfilos, es decir, que son capaces de crecer biena temperaturas normales. La temperatura ptima de la mayora se encuentra alrededor delos25a30C,aunque algunos son psicrtrofos y algunos son termfilos. Son aerobios, esto es cierto por lo menos en los mohos que crecen en la superficie de los alimentos. Casi todos los mohos son capaces de crecer dentro de un amplio intervalo de pH(pHcomprendidoentre2y 8.5),aunque la mayora crece mejora pH cido. Son capaces de utilizar muchos tipos de alimentos, que van desde sencillos a complejos. Poseen enzimas hidrolticas, y de aqu que algunos se utilicen para la produccin industrial delas amilasas, pectinasas, proteasas y lipasas.

Algunos gneros de mohos importantes en alimentos

Mucor. Intervienen en la alteracin de algunos alimentos y se utilizan en la fabricacin de otros. M.rouxii se utiliza para la sacarificacin del almidn, para la maduracin de quesos y para la fabricacin de algunos alimentos orientales.

Rhizopus. Laespecie R. stolonifer, omohodelpan, es muy comn e interviene en la alteracin de algunos alimentos: bayas, frutas, hortalizas, pan, etc.

Aspergillus. Los aspergilos son mohos muy abundantes. Algunas especies intervienen en las alteraciones que experimentan los alimentos, mientras que otros son de utilidad parapreparardeterminadosalimentos.A.nigerseutilizaparalaproduccinindustrial de cido ctrico y glucnico y de algunas enzimas.A.flavus se utiliza para la fabricacin de ciertos alimentos orientales y en la obtencin de enzimas.

Se han reportado casi 50 especies de Aspergillus como productores de metabolitos txicos denominados en general micotoxinas. Las de mayor importancia son: las denominadas aflatoxinas (producidas por A. flavus, A. parasiticusyA.nomius);la ocratoxina A producida por A. ochraceus, A. carbonarius y A. niger; sterigmatocistina producida principalmente por A. ver si color; el cido ciclopiaznico producidas por A. flavus y A. tamarii. La citrinina, patulinay cido peniclico tambin son producidas por especies de Aspergillus, las txinas tremorgnicas son producidas por A. terreus (territremas), A. fumigatus (fumitremorgenas) y A. clavatus (triptoquivalina).La saflatoxinas son derivados de la difurancumarina. Las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 se producen en la naturaleza por los mohos ya mencionados. Las letras B y G se refieren a los colores de flurescencia por sus nombres en ingls (azulyverde, respectivamente) observados bajo longitudes de onda en la regin UV ,y los subndices1 y 2 se refieren a sus patrones de separacin cromatogrficos. Las aflatoxinas M1 y M2 se producen por la hidroxilacin de las respectivas aflatoxinas B. La aflatoxina B1 talvez sea el carcingeno de hgado ms potente para animales incluyendo al humano. La ocratoxina A y la citrinina afectan la funcin renal. Las toxinas tremorgnicas afectan el sistema nervioso central.

Penicillium. Es otro gnero de mohos de frecuente incidencia y de importancia en los alimentos, P. expansum produce la podredumbre blanda de las frutas P . digitatumy P italicum producen la podredumbre de frutas ctricas. Las especies P. camemberti,P. roqueforti se utilizan en la maduracin de quesos.Se han reportado ms de 80 especies de Penicillium como productores de micotoxinas. Estas micotoxinas pueden dividirse en dos grupos: las que afectan la funcin del heptica o renal, y las neurotoxinas. Las principales micotoxinas producidas por Penicillium son, ocratoxina A, citrinina, patulina, cido ciclopiaznico, citreoviridina, penitremo A, toxina PR y roquefortina y el cido secalnico. De stas la ocratoxina A es sinduda la ms importante, es un carcingeno renal y es producida por P. citrinum, P. viridicatum, P. verrucosum.La principal fuente de esta toxina es el pandecentenoo

trigo,oatravsdecerdosalimentadosconestoscerealescuyacarnees posteriormente consumida por humanos.

Se recomienda consultar la bibliografa para conocer otros gneros de mohos con importancia en los alimentos.

Levaduras y hongos levaduriformes.

El trminolevaduraserefierea aquellos hongos que generalmente no son filamentosos, sino unicelulares y de forma ovoide o esferoide , y que se reproducen por gemacin o por fisin.

Las levaduras que se encuentran en los alimentos pueden ser benficas o perjudiciales. Las levaduras se utilizan en la elaboracin de alimentos como el pan, la cerveza, vinos, vinagre y quesos, tambin se utilizan en la obtencin de enzimas y alimentos fermentados. Las levaduras son perjudiciales cuando producen la alteracin del sauerkraut, de los zumos de frutas, delos jarabes, de la melaza, de la miel, de las carnes, del vino, de la cerveza y de otros alimentos.

Los caracteres morfolgicos de las levaduras se determinan mediante su observacin microscpica. Su forma puede ser desde esfrica a ovoide, alimonada, piriforme, cilndrica, triangular e incluso alargada. La mayora se reproducen asexualmente por gemacin multicelular o por gemacin polar. Unas pocas especies se reproducen por fisin.

En los cultivos en placas de agar es difcil diferenciar las colonias de levaduras de las colonias bacterianas; la observacin microscpica de los microorganismos es la nica forma segura de diferenciarlas. La mayora de las colonias jvenes de levaduras son hmedas y algo mucosas; la mayora de las colonias son blancuzcas, aunque algunas tienen un color crema o rosado. Son oxidativas, fermentativas, o bien su actividad metablica es a la vez de ambos tipos.

La mayora de las levaduras crecen mejor con un alto contenido de humedad. No obstante, crecen mejor que la mayora de las bacterias en sus tratos que contienen elevadas concentraciones de solutos (por ejemplo carbohidratos o cloruro de sodio), es decir son osmotolerantes. Sin embargo la mayora de las levaduras necesitan mayor humedad que los mohos. Para la mayora de las levaduras la Aw mnima de crecimiento oscila entre 0.88 y 0.94. El intervalo de temperaturas de crecimiento es parecido al de los mohos, con una temperatura ptima entorno a los 25 a 30 C y una temperatura mxima en torno a los 35 a 47C. Crecen mejor en aerobiosis, aunque las especies de tipo fermentativo son capaces de crecer, aunque lentamente, en anaerobiosis. Los azcares son la fuente en ergticams apropiada para las levaduras, aunque las oxidativas, pueden oxidar los cidos orgnicos y el alcohol.Algunos gneros de importancia en alimentos son:

Schizosaccharomyces. Levaduras de este gnero se han encontrado en frutas tropicales, en la melazayenla miel.

Saccharomyces.LaespecieS.cerevisiaeseempleaenmuchasindustrias alimentarias,comoenlafermentacindelpan,fermentacindelacerveza, fermentacin de los vinos, en la produccin de alcohol, glicerol e invertasa.

Kluyveromyces. K. marxianus (antes Saccharomycesfragilis)se utiliza en la obtencin de productos lcteos por su capacidad de fermentar la lactosa.

Zygosaccharomyces. Las levaduras de este gnero son importantes por su capacidad para crecer en medios con elevadas concentraciones de azcar (osmfilas), intervienen en la alteracin de la miel, jarabes y melazas, y tambin en la fermentacin de las alsa de soya y de algunos vinos.

Pichia.Crecenenlasuperficiedeloslquidosformandounapelcula.P. membranafaciens produce una pelcula en la superficie de las cervezas y vinos.

Debaromyces.Formanpelculaenlasuperficiedelassalmueras.D.kloeckericreceen la superficie de los quesos y de los embutidos.

Hanseniaspora. Estas levaduras tienen forma de limn y crecen en los zumos de frutas.

Torulopsis. Originan problemas en las fbricas de cervezas. T. sphaerica fermenta la lactosa, alterando productos lcteos. Otras especies alteran la leche condensada azucarada, los concentrados de zumos de frutas y los alimentos cidos.

Candida. La especie C. utilisse cultiva para la obtencin de protena unicelular para incorporarla tanto a alimentos destinados al consumo humano como a piensos. La especie C. krusei se utiliza junto con los cultivos iniciadores de productos lcteos. C. lipolytica produce alteracin de la mantequilla y margarina.

Brettanomyces.Producengrandescantidadesdecidoeintervienenenla fermentacin de la cerveza belga de tipo lambic, de las cervezas inglesas y de los vinos franceses.

Trichosporon. Estas levaduras crecen mejor a temperaturas bajas, encontrndose en las fbricas cerveza y en la superficie de vacuno refrigerada.

Rhodotorula. Estas levaduras de color rojo, rosa o amarillo, pueden producir manchas en la superficie de los alimentos como en la superficie de las carnes, ozonas de color rosado en el sauerkraut.

FUNDAMENTOEl mtodo se basa en inocular una cantidad conocida demuestra, en un medio de cultivo selectivo especfico, aprovechando la capacidad de este grupo microbiano de utilizar como nutrientes a los polisacridos que contiene el medio. La hidrlisis de estos compuestosseefectaporenzimasqueposeenestosmicroorganismos.La sobrevivencia de los hongos y levaduras ap Hcidos se pone de manifiesto al inocularlos en el mediodecultivoacidificadoaunpHde3.5.As mismo, la acidificacin permite la eliminacin de la mayora de las bacterias. Finalmente, las condiciones de aerobiosis y la incubacin a unatemperaturade25 1Cdacomoresultadoel crecimiento de colonias caractersticas para este tipo de microorganismos.

MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES1matrazErlenmeyerde250mLdecapacidad, conteniendo90 .0mLde solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2aguapeptonadaal 0.1%, estrila.3tubosde16x 150mm, conteniendo9.0mLde solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2aguapeptonadaal 0.1%, estriles con tapn de algodna.4tubos 22x175 mmcon20.0mLdeagar papa dextrosaa.4tubos 22x175 mmcon20.0mLdeagar extracto de maltaa.

NOTALa Norma Oficial Mexicana utiliza nicamente el agar papa dextrosa para la deteccin y cuantificacin de estos grupos de microorganismos. Sin embargo se sugiere para la cuantificacin de las levaduras, la utilizacin del agar extracto de malta acidificado ya que es un medio ms rico en nutrientes y adecuado para el desarrollo de este grupo microbiano.

SOLUCIONES,REACTIVOS E INDICADORESSolucin colorante de lacto fenol azul de algodnb.Colorantes para tincin de Gramb.Solucin estril de cido tartricoal 10.0%a.

MATERIAL Y EQUIPOVaso de licuadora estril o bolsa para Stomachera.Motor para licuadora o Stomachera.Pipetas graduadas estriles de1mLcon tapn de algodna.Pipetas graduadas estriles de10mLcon tapn de algodna.Pipetas Pasteur estrilesa,bPropipetaa,bCajas de Petri estriles (una se utiliza para pesar la muestra)a.Utensiliosestrilesparalamanipulacindemuestras:cuchillos,cucharas, tenedores, etc.aIncubadora con termostato que pueda ser mantenidoa251C a.Bao de agua con control de temperatura y circulacin mecnica mantenida a451C aPortaobjetos, cubreobjetos, diurexb.Microscopio pticob.Asa bacteriolgica y asa micolgicab.Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente amplificador b.

NOTAS

aMaterial necesario para el inicio de la prctica.bMaterial necesario para los 3, 4 y/o 5 das despus de iniciada la prctica.

DETERMINACION DEMOHOSYLEVADURASEN ALIMENTOS

Realizar diluciones decimales empleando tuboscon9.0ml de solucin diluyente

1.0mL1.0mL1.0mL

Pesar 10g de muestra en condiciones

Homogenizar con 90.0mL de solucin

10-110-210-3

10-4

Adicionarde15a20mL de agar papa dextrosa y/ agar extracto de malta acidificados con 0.3mL cido tartrico 10%enfriado a45C en cada placa

Depositarporduplicado 1.0mL de cadadilucin en cajasdePetri

Homogeneizarla muestra con el agar mediante movimientos rotatorios

Incubarlascajasen posicin invertida

3,4 5das/

Contar aquellas placas que tengan entre10a150coloniasde hongos y/olevadurasyreportarpor separado como UFC/g o mLde muestra,indicandotiempode incubacin

PROCEDIMIENTO

1. Pesar10.0gdemuestraenunacajaPetriestrilypasarlaaunmatraz Erlen meyer que contenga 90.0 mL de una solucin amortiguadora de fosfatosdepH7.2aguapeptonadaal0.1%.2. Homogeneizarla muestra con la solucin anterior en un vaso de licuadora estril o pasarla a una bolsa deStomachery homogeneizardurante10.0 segen el caso de la licuadora a velocidad mnima, 30.0 segen el Stomacher a una velocidad normal. Esta es la dilucin primaria.3. De la suspensin o solucin anterior, tomar1.0mLytransferirloauntubo deensayoquecontenga9.0mLdesolucinamortiguadoradefosfatosde pH7.2,agitary repetir esta operacin tantas veces como diluciones sean necesarias. Se debe utilizar una pipeta estril para cada dilucin.

NOTA

Los microorganismos filamentosos forman las colonias a partir de una espora o de un fragmento de hifa o de un cmulo de hifas. Debido a esto, el nmero de UFC/mL puede variar dependiendo de las condiciones de homogeneizacin de la muestra(a mayor tiempo de homogeneizacin mayor ser la ruptura de las hifas y por lo tanto se aumentaran las UFC/ mL), por lo que se debe poner especial cuidado en esta etapa. Los tiempos de homogeneizacin citados en esta metodologa son los recomendados en la Norma Oficial Mexicana para este grupo microbiano.

4. Colocar por duplicado en cajas Petri estriles, 1.0mLde cada una de las diluciones de la muestra, utilizando una pipeta estril.5. Fundirelmediocontenidoenlostubosde22x175mmcon20.0mLde agar papa dextrosa y/o de agar extracto de malta estriles. Enfriarlos y mantenerlosa45C.6. Para lograr acidificarlos medios a un pHde3.5, adicionar por cada100.0mL de agar, 1.4 mL de cido tart ricoal 10% esterilizado por filtracin en membrana, o bien esterilizarla solucina 121C1C durante 15 minutos. Esto significa que a cada tubo conteniendo 20.0mL del medio fundido y mantenido a 45Csele deber adicionar 0.3mL del cido, o colocarlas en la caja de Petri teniendo precaucin de que no toque la muestra antes de agregar el medio de cultivo.7. Despus de la acidificacin, utilizar un tubo de medio acidificado comoTestigo y me direl p H para corroborar que se encuentre a 3.5 utilizando un potencimetro.8. En cada caja de Petri con inculo, verter de 15.0a20.0mLde agar papa dextrosa acidificado y/o a gar extracto de malta acidificado, fundidos y mantenidos a45C. El tiempo transcurrido entre la preparacin de las diluciones y el momento en que es vertido el medio de cultivo no debe de excederde20.0min.9. Mezclar cuidadosamente el medio con seis movimientos de derecha aizquierda, seis en el sentido de las manecillas del reloj, seis en sentido contrario y seis de atrs hacia adelante, sobre una superficie lisa, teniendo

cuidado de no humedecer con el medio la tapa de la caja de Petri. Permitir que la mezcla en las cajas Petri solidifique, dejndolas reposar sobre una superficie horizontal fra.10.Verificar la esterilidad de los medios acidificados para lo cual se verter enUna caja de Petri sin inculo, de15.0a 20.0mL de la gar papa dextrosa acidificada y/o agar extracto de malta acidificado. Despusdela incubacin estas cajas no debern presentar desarrollo de colonias.11.Invertir las cajas y colocarlas en la incubadora a 251C.12.Contar las colonias de cada placa despus de 3, 4 y 5 das de incubacin.Despus de 5 das, seleccionar aquellas placas que contengan entre 10 y150 colonias. Si alguna de las cajas muestra crecimiento extendido de mohos o si es difcil contar colonias bien aisladas, considerar la cuantificacin de 4 das de incubacin o incluso las de 3 das. En este caso, se informa el perodo de incubacin en los resultados de los anlisis.13.Realizar una tincin hmeda para mohos con colorante del actofenol azul de algodn, para un examen microscpico y una posible identificacin de los mohos que se hayan desarrollado.14.Realizar una tincin de Gram para la observacin microscpica de lasLevadurasobtenidas.15.Contarlas colonias de cada placa representativa, despus de 3, 4 y 5 das de incubacin(a261Coatemperatura ambiente).16.Considerar las cuentas de placas con 10 a 150 colonias como lasAdecuadas para el informe. Multiplicar por el inverso de la dilucin.17.Informar las unidades formadoras de colonias por gramo o mililitro(UFC/go mL)de mohos y levaduras(cada uno en forma independiente),incubadas a251Cdurante 5 das.18.Describir las caractersticas macroscpicas y microscpicas observadas, de los mohos y/o levaduras desarrollados a partir de la muestra analizada.19.Si alguna parte de la caja muestra crecimiento extendido de hongos, o si es difcil contar las colonias, considerar el desarrollo de estos microorganismos a los 4 das de incubacin y an a los 3 das.En este caso se debe informar el periodo de incubacin de 3 4 das, en los resultados del anlisis.

CLCULOS Y EXPRESIN DE RESULTADOS

Para elaborar un informe de resultados se sugiere seguir las indicaciones que a continuacin se expresan:

ANLISIS CUANTITATIVO

Para hacer un reporte de la parte cuantitativa de este anlisis, se deben seleccionarlasplacasquecontenganentre10y150colonias (representatividad estadstica). Posteriormente, contarlas colonias presentes y calcular el nmero de hongos y levaduras por separado. De esta manera se puede calcular las unidades formadoras de colonias por gramo o por mililitro dependiendo del estado fsico de la muestra analizada. Esto se lograMultiplicando el nmero de UFC encontradas en una caja representativa, por el inverso de la dilucin correspondiente a esa caja.

En el caso de las placas que contienen menos de 10colonias(UFC)de hongos y/o levaduras, se debe reportar el nmero obtenido de UFC indicando la dilucin correspondiente.

En el caso de no encontrar colonias caractersticas de hongos y/o levaduras, el resultado a reportar es: menos de10UFC/gbienmenosde10UFC/mL (Sensibilidad del Mtodo)

Para cualquiera de los casos citados se deber reportar el tiempo de incubacin en el que se realiz la cuantificacin.

Para cualquiera de los casos citados se deber reportar por separado el resultado de la cuantificacin de hongos y de levaduras.

Reportar las observaciones macroscpicas y microscpicas de los diferentes tipos de colonias de mohos y levaduras obtenida durante el anlisis. Si es posible reportar el o los gneros probables.

CONCLUSIONES

Se logra diferenciar los hongos y levaduras de acuerdo a sus caractersticas y evaluaciones que se llevan a cabo en el laboratorio.

Identificar los beneficios de tener informacin con respecto a los hongos y levaduras para conocer los riesgos que se tienen al consumirlos en alimentos.

Aprender lo que indica la norma mencionada durante la exposicin.

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