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UNJFSC INGENIERA AMBIENTAL BIOQUMICA

HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

PRACTICA N 02

INFORME DE LABORATORIO:

HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

DOCENTE : Lic. Hctor H. Toledo Acosta.

INTEGRANTES : Dmazo Glvez, Lizbeth N.

Martnez Gil, Fiorella

Ogura Esteban, Josselyn

Medina Quiroz, Mishell

Taipe Arone, Fortunato

Bulln Guzmn, Danny

Gonzales Chvez, Frank

Lucas Romn, Virna

E.A.P. : INGENIERA AMBIENTAL

GRUPO : II.

FECHA : 13 de Mayo del 2014.

HUACHO - PER

2014

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HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

1. RESUMEN

En el presente informe se da conocer los resultados de la Segunda Sesin de

laboratorio de Bioqumica, la cual trata acerca de la HIDRLISIS DEL ALMIDN

POR LA AMILASA SALIVAL.

Para estudiar la hidrlisis del almidn (desdoblamiento), por accin de la amilasa,

se aprovechara el hecho de que el lugol (especficamente el yodo que contiene el

lugol), se incorpore a la fraccin helicoidal del almidn dando un color azul y a

medida que la hidrlisis progresa, el color azul va desapareciendo y cambia a rojizo

o caf claro. La baja temperatura inhibe el proceso hasta ser capaz de detenerlo.

Un pH muy cido o muy alcalino, tambin puede inhibir el proceso.

Es importante que conozcamos la estructura y propiedades qumicas de los

compuestos que se van a utilizar, por lo que es recomendable acudir a notas de

clase o a un libro de texto de bioqumica general para un mejor entendimiento y

aprovechamiento de la prctica y para presentar y discutir los resultados

obtenidos en el cuaderno de prcticas.

2. OBJETIVOS

2.1. Objetivo General

Demostrar la accin de la amilasa salival sobre el almidn.

2.2. Objetivos Especficos

Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival.

Identificar la accin de la amilasa de la saliva sobre el almidn.

Demostrar que el pH y la temperatura influyen en la accin de la amilasa.

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3. MARCO TERICO

ENZIMAS

3.1. DEFINICIN GENERAL:

Las enzimas son protenas que efectan

una accin cataltica, es decir,

favorecen el que se produzca una

reaccin determinada.

La presencia de las enzimas dentro del

cuerpo de los animales, permite que

muchas reacciones puedan llevarse a

cabo bajo condiciones de temperatura

constante, y un pH con poca variacin.

Existiendo en el cuerpo una gran

cantidad de enzimas y de acorde a la prctica detallaremos de la enzima

amilasa a continuacin:

a. LA AMILASA

Es una enzima que acta en los procesos de digestin de carbohidratos,

especficamente acta sobre el almidn, es una enzima glucoltica.

i. FUNCIN:

Es hidrolizar los enlaces glucosdicos del tipo alfa 1,4 de la fraccin

amilosa de la molcula de almidn. La cual acta desdoblando el almidn

hasta alfa dextrinas, y luego estas hasta maltosa (aunque predominan las

alfa dextrinas), en cierto punto de la hidrlisis, se producen

eritrodextrinas (llamadas as porque se tien de rojo si se usa lugol).

ii. PRODUCCIN

Principalmente en el pncreas, y en el caso del hombre y del cerdo,

se produce en cantidad mucho menor en las glndulas salivales.

Fuera del cerdo, el resto de los animales domsticos, nicamente

producen amilasa de origen pancretico.

iii. MEDIOS PTIMOS PARA LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

La accin de la amilasa se efecta mejor a un pH cercano a neutro.

Adems de la diferencia en concentracin, esta es otra de las causas por

las que la amilasa pancretica es ms activa que la salival, ya que en el

estmago el pH es muy cido, pero a nivel del intestino delgado es

alcalino ligero.

La temperatura que permitir la accin de la amilasa es de 37 C.

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4. MATERIALES 4.1. INSTRUMENTOS Y REACTIVOS DE LABORATORIO

4.1.1. Instrumentos:

1 Cocina elctrica.

1 Gradilla

1 Pizeta.

4 Tubos de ensayo.

2 Vasos de precipitado

de 100 ml.

4 Pipetas de 5 y 1 ml (2 de cada uno).

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4.1.2. Reactivos: 10 gts. (1 ml) de H2SO4

(diluido al10%).

20 gts. de LUGOL (solucin).

10 gts. (1 ml) de NaOH (diluido al 5 %).

8 ml. de SOL. ALMIDN (diluido al 2 %).

4.2. INSUMOS Y MATERIALES ADQUIRIDOS POR LOS ESTUDIANTES 4.2.1. Insumos: 15 cubitos de hielo.

1 cojn de agua destilada.

10 ml de saliva.

Gasa mdica.

4.2.2. Materiales: 1 lpiz marcador.

1 cinta masketein.

Toallas de papel.

Cmara fotogrfica.

H2SO4

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5. PROCEDIMIENTO

5.1. Preparar la solucin de almidn:

5.2. Obtencin de muestra de saliva

1 PASO

En una vaso de precipitado de 10 ml aadiir 25 gr de

maizena.

2 PASO

Aadir 40 ml de agua .

3 PASO

Homogenizar la muestra.

4 PASO

una vezz homeginazada esta lista para utilizar.

PASO 1: Colocar la pieza de gasa sobre el vaso de precipitado.

PASO 2: Adicionar la muestra de saliva. La cual pasara a trves de la gasa y ser recepcionada en el vaso de precipitdo.

PASO 3: Complete los 10 ml de saliva. Siemprre teniendo en cuenta que no se forne espuma.

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5.3. Preparar un bao Mara a una temperatura de 40 C.

5.4. Rotule los cuatro tubos y proceda segn el siguiente esquema:

TUBO

SOLUCIN

1 2 3 4

Sol. Almidn 2 ml. 2 ml. 2 ml. 2 ml.

Lugol 3 gts. 7 gts. 3 gts. 3 gts.

Sol. H2SO4 1 ml. ---- ---- ----

Sol. NaOH ---- 3 gts. ---- ----

Saliva 1ml 1ml 1ml 1ml

1 PASO

Coger un vaso de

precipitado de 50 ml.

2 PASO

Adicionar agua de grifo.

3 PASO

Poner a hervir.

4 PASO

Entibiar a temperatura

de 40 C.

ROTULE 4 TUBOS DE ENSAYO

PROCEDA SEGN EL ESQUEMA

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5.4.1. Tubo 1

5.4.2. Tubo 2

OBSERVACIONES: Se torn color azul con mayor intensidad, esto se debe a que el lugol en presencia del almidn cambia de color. Por lo tanto la amilasa fue desnaturalizada.

OBSERVACIONES: A este tubo se adiciono: 4 gts. de lugol y 2 ml. de sol. NaOH (ms de lo indicado). Si se decoloro a causa de que la sol. NaOH no estaba concentrada. Por lo tanto si hubo reaccin enzimtica.

PASO 1

Aadir 2 ml de sol. de almidn.

PASO 2

Adicionar 4 gts. de lugol.

PASO 3

Adicionar 1 ml de H2SO4.

PASO 4

Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

PASO 5

Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

PASO 1

Aadir 3 ml de sol. de almidn.

PASO 2

Adicionar 8 gts. de lugol.

PASO 3

Adicionar 1 ml de NaOH.

PASO 4

Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

PASO 5

Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

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5.4.3. Tubo 3

5.4.4. Tubo 4

PASO 1

Aadir 2 ml de sol. de almidn.

PASO 2

Adicionar 4 gts. de lugol.

PASO 3

Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

PASO 4

Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

OBSERVACIONES: Se decoloro rpido y la intensidad del color fue media. Por lo tanto se realiz la actividad enzimtica ptima y rpida.

PASO 1

Aadir 2 ml de sol. de almidn.

PASO 2

Adicionar 3 gts. de lugol.

PASO 3

Por ultimo adicionar 1 ml. de

saliva.

PASO 4

Colocar en una vaso con precipitado de

hielo picado.

OBSERVAR Y ANOTAR

OBSERVACIONES: Si decoloro pero la intensidad fue nfima, pero al aadir la saliva. Por lo tanto se realiz la actividad enzimtica, pero lentamente por la baja temperatura.

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6. RESULTADOS

7. CUESTIONARIO GENEROSO

Cmo acta la amilasa sobre el almidn?

RPTA:

La enzima amilasa degrada el almidn

Cmo est formado el almidn qumicamente?

RPTA:

El producto formado por la polimerizacin de miles de monmeros de

glucosa es el almidn.

Qu es la amilasa desde el punto de vista qumico?

RPTA:

Una enzima encargada de degradar el almidn.

Cul es el papel que desempea el almidn en los animales?

RPTA:

Los polisacridos que ingerimos son de dos tipos principales: almidn

amilosa y amilo pectina, de vegetales y granos, y glucgeno del tejido

animal. Los polisacridos de la dieta menos la celulosa se hidroliza en la

boca mediante una reaccin catalizada por la enzima amilasa salival. La

velocidad de la hidrlisis catalizada por esta enzima, disminuye en el

estmago por los iones H+1. La glucosa es el principal product