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  • UNJFSC INGENIERA AMBIENTAL BIOQUMICA

    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    PRACTICA N 02

    INFORME DE LABORATORIO:

    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    DOCENTE : Lic. Hctor H. Toledo Acosta.

    INTEGRANTES : Dmazo Glvez, Lizbeth N.

    Martnez Gil, Fiorella

    Ogura Esteban, Josselyn

    Medina Quiroz, Mishell

    Taipe Arone, Fortunato

    Bulln Guzmn, Danny

    Gonzales Chvez, Frank

    Lucas Romn, Virna

    E.A.P. : INGENIERA AMBIENTAL

    GRUPO : II.

    FECHA : 13 de Mayo del 2014.

    HUACHO - PER

    2014

  • UNJFSC INGENIERA AMBIENTAL BIOQUMICA

    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    1. RESUMEN

    En el presente informe se da conocer los resultados de la Segunda Sesin de

    laboratorio de Bioqumica, la cual trata acerca de la HIDRLISIS DEL ALMIDN

    POR LA AMILASA SALIVAL.

    Para estudiar la hidrlisis del almidn (desdoblamiento), por accin de la amilasa,

    se aprovechara el hecho de que el lugol (especficamente el yodo que contiene el

    lugol), se incorpore a la fraccin helicoidal del almidn dando un color azul y a

    medida que la hidrlisis progresa, el color azul va desapareciendo y cambia a rojizo

    o caf claro. La baja temperatura inhibe el proceso hasta ser capaz de detenerlo.

    Un pH muy cido o muy alcalino, tambin puede inhibir el proceso.

    Es importante que conozcamos la estructura y propiedades qumicas de los

    compuestos que se van a utilizar, por lo que es recomendable acudir a notas de

    clase o a un libro de texto de bioqumica general para un mejor entendimiento y

    aprovechamiento de la prctica y para presentar y discutir los resultados

    obtenidos en el cuaderno de prcticas.

    2. OBJETIVOS

    2.1. Objetivo General

    Demostrar la accin de la amilasa salival sobre el almidn.

    2.2. Objetivos Especficos

    Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival.

    Identificar la accin de la amilasa de la saliva sobre el almidn.

    Demostrar que el pH y la temperatura influyen en la accin de la amilasa.

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    3. MARCO TERICO

    ENZIMAS

    3.1. DEFINICIN GENERAL:

    Las enzimas son protenas que efectan

    una accin cataltica, es decir,

    favorecen el que se produzca una

    reaccin determinada.

    La presencia de las enzimas dentro del

    cuerpo de los animales, permite que

    muchas reacciones puedan llevarse a

    cabo bajo condiciones de temperatura

    constante, y un pH con poca variacin.

    Existiendo en el cuerpo una gran

    cantidad de enzimas y de acorde a la prctica detallaremos de la enzima

    amilasa a continuacin:

    a. LA AMILASA

    Es una enzima que acta en los procesos de digestin de carbohidratos,

    especficamente acta sobre el almidn, es una enzima glucoltica.

    i. FUNCIN:

    Es hidrolizar los enlaces glucosdicos del tipo alfa 1,4 de la fraccin

    amilosa de la molcula de almidn. La cual acta desdoblando el almidn

    hasta alfa dextrinas, y luego estas hasta maltosa (aunque predominan las

    alfa dextrinas), en cierto punto de la hidrlisis, se producen

    eritrodextrinas (llamadas as porque se tien de rojo si se usa lugol).

    ii. PRODUCCIN

    Principalmente en el pncreas, y en el caso del hombre y del cerdo,

    se produce en cantidad mucho menor en las glndulas salivales.

    Fuera del cerdo, el resto de los animales domsticos, nicamente

    producen amilasa de origen pancretico.

    iii. MEDIOS PTIMOS PARA LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

    La accin de la amilasa se efecta mejor a un pH cercano a neutro.

    Adems de la diferencia en concentracin, esta es otra de las causas por

    las que la amilasa pancretica es ms activa que la salival, ya que en el

    estmago el pH es muy cido, pero a nivel del intestino delgado es

    alcalino ligero.

    La temperatura que permitir la accin de la amilasa es de 37 C.

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    4. MATERIALES 4.1. INSTRUMENTOS Y REACTIVOS DE LABORATORIO

    4.1.1. Instrumentos:

    1 Cocina elctrica.

    1 Gradilla

    1 Pizeta.

    4 Tubos de ensayo.

    2 Vasos de precipitado

    de 100 ml.

    4 Pipetas de 5 y 1 ml (2 de cada uno).

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    4.1.2. Reactivos: 10 gts. (1 ml) de H2SO4

    (diluido al10%).

    20 gts. de LUGOL (solucin).

    10 gts. (1 ml) de NaOH (diluido al 5 %).

    8 ml. de SOL. ALMIDN (diluido al 2 %).

    4.2. INSUMOS Y MATERIALES ADQUIRIDOS POR LOS ESTUDIANTES 4.2.1. Insumos: 15 cubitos de hielo.

    1 cojn de agua destilada.

    10 ml de saliva.

    Gasa mdica.

    4.2.2. Materiales: 1 lpiz marcador.

    1 cinta masketein.

    Toallas de papel.

    Cmara fotogrfica.

    H2SO4

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    5. PROCEDIMIENTO

    5.1. Preparar la solucin de almidn:

    5.2. Obtencin de muestra de saliva

    1 PASO

    En una vaso de precipitado de 10 ml aadiir 25 gr de

    maizena.

    2 PASO

    Aadir 40 ml de agua .

    3 PASO

    Homogenizar la muestra.

    4 PASO

    una vezz homeginazada esta lista para utilizar.

    PASO 1: Colocar la pieza de gasa sobre el vaso de precipitado.

    PASO 2: Adicionar la muestra de saliva. La cual pasara a trves de la gasa y ser recepcionada en el vaso de precipitdo.

    PASO 3: Complete los 10 ml de saliva. Siemprre teniendo en cuenta que no se forne espuma.

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    5.3. Preparar un bao Mara a una temperatura de 40 C.

    5.4. Rotule los cuatro tubos y proceda segn el siguiente esquema:

    TUBO

    SOLUCIN

    1 2 3 4

    Sol. Almidn 2 ml. 2 ml. 2 ml. 2 ml.

    Lugol 3 gts. 7 gts. 3 gts. 3 gts.

    Sol. H2SO4 1 ml. ---- ---- ----

    Sol. NaOH ---- 3 gts. ---- ----

    Saliva 1ml 1ml 1ml 1ml

    1 PASO

    Coger un vaso de

    precipitado de 50 ml.

    2 PASO

    Adicionar agua de grifo.

    3 PASO

    Poner a hervir.

    4 PASO

    Entibiar a temperatura

    de 40 C.

    ROTULE 4 TUBOS DE ENSAYO

    PROCEDA SEGN EL ESQUEMA

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    5.4.1. Tubo 1

    5.4.2. Tubo 2

    OBSERVACIONES: Se torn color azul con mayor intensidad, esto se debe a que el lugol en presencia del almidn cambia de color. Por lo tanto la amilasa fue desnaturalizada.

    OBSERVACIONES: A este tubo se adiciono: 4 gts. de lugol y 2 ml. de sol. NaOH (ms de lo indicado). Si se decoloro a causa de que la sol. NaOH no estaba concentrada. Por lo tanto si hubo reaccin enzimtica.

    PASO 1

    Aadir 2 ml de sol. de almidn.

    PASO 2

    Adicionar 4 gts. de lugol.

    PASO 3

    Adicionar 1 ml de H2SO4.

    PASO 4

    Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

    PASO 5

    Llevar a bao Mara a 40 C.

    OBSERVAR Y ANOTAR

    PASO 1

    Aadir 3 ml de sol. de almidn.

    PASO 2

    Adicionar 8 gts. de lugol.

    PASO 3

    Adicionar 1 ml de NaOH.

    PASO 4

    Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

    PASO 5

    Llevar a bao Mara a 40 C.

    OBSERVAR Y ANOTAR

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    5.4.3. Tubo 3

    5.4.4. Tubo 4

    PASO 1

    Aadir 2 ml de sol. de almidn.

    PASO 2

    Adicionar 4 gts. de lugol.

    PASO 3

    Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

    PASO 4

    Llevar a bao Mara a 40 C.

    OBSERVAR Y ANOTAR

    OBSERVACIONES: Se decoloro rpido y la intensidad del color fue media. Por lo tanto se realiz la actividad enzimtica ptima y rpida.

    PASO 1

    Aadir 2 ml de sol. de almidn.

    PASO 2

    Adicionar 3 gts. de lugol.

    PASO 3

    Por ultimo adicionar 1 ml. de

    saliva.

    PASO 4

    Colocar en una vaso con precipitado de

    hielo picado.

    OBSERVAR Y ANOTAR

    OBSERVACIONES: Si decoloro pero la intensidad fue nfima, pero al aadir la saliva. Por lo tanto se realiz la actividad enzimtica, pero lentamente por la baja temperatura.

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    HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

    6. RESULTADOS

    7. CUESTIONARIO GENEROSO

    Cmo acta la amilasa sobre el almidn?

    RPTA:

    La enzima amilasa degrada el almidn

    Cmo est formado el almidn qumicamente?

    RPTA:

    El producto formado por la polimerizacin de miles de monmeros de

    glucosa es el almidn.

    Qu es la amilasa desde el punto de vista qumico?

    RPTA:

    Una enzima encargada de degradar el almidn.

    Cul es el papel que desempea el almidn en los animales?

    RPTA:

    Los polisacridos que ingerimos son de dos tipos principales: almidn

    amilosa y amilo pectina, de vegetales y granos, y glucgeno del tejido

    animal. Los polisacridos de la dieta menos la celulosa se hidroliza en la

    boca mediante una reaccin catalizada por la enzima amilasa salival. La

    velocidad de la hidrlisis catalizada por esta enzima, disminuye en el

    estmago por los iones H+1. La glucosa es el principal product