Mycoplasma pneumoniaey

Mycoplasma fermentansMarlene Rubí Pérez Martínez

BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE PUEBLAFACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIABACTERIOLOGIA I

C l a s i f i c a c i o n t a x o n o m i c a

Especie:

M. pneumoniae M. fermentans

Genero: Mycoplasma

Familia: Mycoplasmataceae

Orden: Mollicutes

G e n e r a l i d a d e s• Carecen de pared celular• Aerobios estrictos*• Aerobios y anaerobios facultativos*• Tienen membrana plasmática• Capsulados• Altamente pleomorfos• Móviles• Extremadamente sensibles• Genoma pequeño• Se reproducen por fisión binaria

Figura 1: Microfotografía que muestra dos Mycoplasma pneumoniae

E s t r u c t u r a b a c t e r i a n a

Figura 2: Un esquema longitudinal que representa la arquitectura celular de Mycoplasma pneumoniae. La imagen no está a escala

F a c t o r e s d e v i r u l e n c i a

• Ausencia de pared celular• Proteína P1• Evasión de respuesta inmune• Intercambio de antígenos con la célula hospedera• Variación de antígenos• Evasión de la fagocitosis• Ineficiencia para producir la producción de anticuerpos

• Producción de grandes cantidades de ácido del metabolismo de la glucosa• Producción de peróxido de hidrogeno

M e c a n i s m o d e p a t o g e n i c i d a d

• Se adhiere al epitelio mediante una estructura de anclaje (adhesina P1) con los receptores de la glucoproteína de acido salicílico en la base de los cilios de las células epiteliales• Ciliostasis tras la que son destruidos en primer lugar los cilios y

posteriormente las células del epitelio ciliar• Contaminación de vías aéreas inferiores e irritación mecánica • Actúa como un superantigeno y estimula la migración de células

inflamatorias al lugar de la infección

Especies de Mycoplasmas estudiadasGenero y especie

Lugar de aislamiento Implicación patológica

M. fermentans Genito urinario , sangre, tejidos, orofaringe

Enfermedad multisistemica

M. Pneumoniae Vías respiratorias Infección respiratoria superior

P a t o g e n i a M. pneumoniae

Neumonía atípica ( periodo de incubación 2-3 semanas)• Cefalea y malestar general• Tos paroxística • Dolor ardoso de garganta• Fiebre • Esputo de escaso a abundante• Estertores roncantes o silbantes

Mecanismo de trasmisión directa por gotas de esputo y secreciones nasales

Figura 3:radiografía del tórax posterior en el curso de una infección por Mycoplasma pneumoniae.

P a t o g e n i a M. fermentans

• Microbiota normal del tracto urogenital• Patologías del tracto genital

humano• Esclerosis múltiple• Lupus • Artritis• Fibromialgia (síndrome de

fatiga crónica)

E p i d e m i o l o g í aM. pneumoniae

• Distribución cosmopolita • Causa epidemias esporádicamente• Endémico en áreas urbanas y rurales • brotes epidémicos cada 4 a 7 años.

En el pasado se consideraba que la incidencia en el grupo de menores de 5 años era muy baja, pero actualmente debe considerarse como agente etiológico importante en este grupo de edad

M y c o p l a s m a p n e u m o n i a e

Rango de edad < 6 meses < 5 años 5-9 años 10-14 añosIncidencia de

casos Infrecuente + +++ ++

E p i d e m i o l o g í a M. fermentans

• Afecta principalmente a personas con SIDA

• Cosmopolita

• Oportunista61%

39%

Incidencia de M. fermentans en pacientes con SIDA

No infectados Infectados

20 %

80%

T o m a d e m u e s t r a Toma de muestra orofaríngea

Toma de muestra de cérvix y uretra

Toma de muestra sanguínea venosa

Biopsia

LCR

Liquido sinovial

T r a n s p o r t e • Las muestras deben mantenerse en un medio apropiado

El Medio de Transporte de Vircell

• El tiempo de transporte no debe exceder las 4 horas. • Sin embargo, cuando el traslado se prolonga, la viabilidad de mycoplasma se puede

mantener con temperaturas de aproximadamente 4°C.

P r u e b a s d i a g n o s t i c a sPrueba valoración

Microscopia La prueba no es útil para los microrganismos debido a que no tienen pared celular y no se tiñen con los reactivos convencionales

Cultivo La prueba es lenta (2-6 semanas para dar un resultado positivo) y no es sensible, la mayoría de los laboratorios no disponen

Diagnostico molecular Las pruebas de identificación basadas en PCR disponen de una alta sensibilidad

Serología

Fijación delComplemento

Títulos de anticuerpos frente antígenos glucolípidos alcanzan un valor máximo tras 4 semanas y se mantienen durante 6-12 meses; bajas en sensibilidad y especifidad

Enzimonoimunoanálisis Se dispone de un gran número de pruebas dotadas unas de sensibilidad y especifidades variables, las pruebas frente a la proteína adhesina P1 podrían ser las mas especificas

Aglutinas frías La sensibilidad y la especifidad son bajas y se producen reacciones cruzadas con otros patógenos respiratorios, aunque se trata de la prueba mas utilizada no se recomienda su aplicación

PCR (reacción en cadena de la polimerasa)

PCRObtención de muestras en

medio adecuado

Inactivación por hervido durante 20 min

En muestras viscosas se somete a tratamiento con

N-acetil cisteína en un medio alcalino con

agitación a Temperatura ambiente durante 30 min

El ADN se extrae usando un kit comercial Wisar

Genomics

Se cuantifica el ADN mediante la medición de la

absorvancia

Se amplifican las regiones de los genes 16SrRNA

empleando primer específicos y condiciones de ciclado descritos por

mejuto

Se realiza electroforesis en gel de agarosa al 2% y

tinción de bromuro de etilo para visualizar los

productos

Figura 7: amplificación del gen 16SrRNA de M. pneumoniae en el carril 1 se muestra el marcador molecular 100pb en el carril 2 el control negativo, del 3-11 se muestran diluciones seriadas de ADN de M. pneumoniae

M e d i o s d e c u l t i v oLa muestra se puede inocular e medios especiales complementados con sueros, extractos de levadura, glucosa, indicador de pH*

Los organismo crecen lentamente, su tiempo de duplicación es 6 h

Caldo SP4 (pH 7.5), Caldo PPLO**

Agar SP4 (pH 7.5) Agar PPLO**

*Adicionalmente**con extracto de levadura y suero de caballo

D i a g n o s t i c o d i f e r e n c i a l

Cultivo bacteriano

Medio liquido y solido

Pruebas bioquímicas

Fermentación de la glucosa

Hemadsorción

Β-hemolisina

Reducción aeróbica del cloruro de trifeniltetrazolio

Inhibición del crecimiento en presencia del antisuero homologo

Protocolo para el aislamiento de M. pneumoniae de muestras respiratorias

B i b l i o g r a f í a de Mycoplasma pneumoniae

Molina López J. (2010) Mycoplasma. En Tay Zavala (editor) del libro Microbiología y parasitología médica pp. 169-172 México: Méndez editores

Escobar M.F.,Pilar Delgado M., Jaramillo C., (2005) Detección de Mycoplasma pneumoniae mediante PCR–hibridación in vitro en niños con infección respiratoria. Revista del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, volumen (18)

Carreazo Pariasca J. (2003) Fisiopatología de las infecciones por Mycoplasma pneumoniae. Paediatrica (5) 101-108

Bago (2003) Laboratory Diagnosis of Mycoplasma pneumoniae Infection recuperado el 24 de octubre del 2016 de: http://www.bago.com/BagoArg/Biblio/neumoweb211.htm

B i b l i o g r a f í a de Mycoplasma fermentans

Facultad de medicina de la UNAM (2009) Micoplasmas patógenos para el humano, departamento de microbiología y parasitología Vol 52. Mexico: Media grapic

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Washington C., Stephen D., William M., Elmer W., Gary W. Paul C. Schrenckenberger, Gail L. Woods (2008) Koneman: Diagnóstico Microbiológico.(6ta ed.) Editorial Médica Panamericana

León Tello G. (1997)Tesis de maestría determinación de la capacidad migratoria de Mycoplasma fermentans en conejos infectados experimentalmente no publicado universidad autónoma de puebla