5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

1/35

SERUM PROTEINELEKTROFORESIS

(SPE)

Dwi Retnoningrum

Moderator: dr. Janti Marbun

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

2/35

ELEKTROFORESIS

Pemisahan partikel-partikel dengan muatan

listrik yang berbeda, dengan cara

mengalirkan arus listrik melalui campuran

partikel yang diletakkan pada suatu mediumpenyangga

Molekul bergerak dengan kecepatan yang berbeda-beda

kearah elektrode sesuai muatan dan konfigurasinya juga

ditentukan oleh sifat media penyangga yang dipakai

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

3/35

PRINSIP ELEKTROFORESIS

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

4/35

SERUM PROTEIN ELEKTROFORESIS

SERUM kertas khusus yg dilapisi gelagarosedan dialiri arus listrik

BERDASARKAN UKURAN & MUATAN LISTRIK

Albumin

-1 globulin -2 globulin globulin

globulin

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

5/35

TUJUAN PEMERIKSAAN

Menunjang diagnosis penyakitterutama penyakit yang disertai dengankelainan abnormal protein

- Penyakit Peradangan

- Keganasan

- Sindroma Nefrotik- Penyakit Hati Kronik

- Status Nutrisi

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

6/35

Serum Protein Electrophoresis

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

7/35

PRA ANALITIK

Persiapan Pasien :

Tidak perlu persiapan khusus

Hindari obat yang meningkatkan protein total serum

(steroid, androgen, digitalis, insulin, kontrasepsi oral)

Hindari obat yang menurunkan protein total serum

(laksansia, rifampisin, dekstran, estrogen)

Persiapan Sampel :

Hindari pemakaian sampel yang ikterik dan lipemik Hindari hemolisis dan torniquet yang lama : hasil

peningkatan palsu

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

8/35

PRA ANALITIK

PRINSIP

+ -

pH 8,6

(4,6)

(4,8) (5,2)

(6,4)

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

9/35

PRA ANALITIK

ALAT

1. Komponen elektroforesis dan power supply

2. Komponen densitometer

3. Aplikator

4. Bak pewarna (untuk proses staining, destaining, dan

dehydration)

5. Bak/ kotak kaca (untuk proses clearing)

6. Oven/hair dryer

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

10/35

PRA ANALITIK

BAHANBAHAN :

1. Sampel serum

2. Kertas selulosa asetat

3. Larutan bufer : Tris boric acid EDTA dengan I (Ionstreng) 0,03-0,12

4. Zat pewarna (Ponceau S)

5. Destaining solutio : asam asetat 5% yang dibuat dariasam asetat glasial 5 ml ditambah akuades 5 ml

6. Dehidration solutio : etanol 96%7. Clearing solutio : campuran 7 bagian volume asam

asetat + 3 bagian volume etil asetat

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

11/35

ANALITIK

1. Kertas /strip yang dilapisi agarose di rendam padalarutan buffer

2. Ambil sampel cairan serum dari tabung.

3. Tuang sampel pada strip berjejer secara melintang

4. Letakan strip pada bridge secara mendatar &sambungkan dengan alat elektrophoresis,

5. Pemisahan selesai, kemudian dengan pemulasanprotein (Hasil berupaprotein staining), dan dilakukan

penilaian dengan densitometer yang dihubungkanelektrophoretogram, hasil berupa kurva dan hasilprosentase masing-masing fraksi protein.

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

12/35

PROSEDURPersiapan membran dan sampel

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

13/35

PROSEDURAplikasi sampel & Elektroforesis

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/Serum_Protein_Electrophoresis_Procedure.flv

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

14/35

PROTEIN STAININGSAS2ElectrophoresisCAT 3041

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/Materi%203/SAS1-SAS2brochure.pdfhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/Materi%203/Spe%20cat%203041.pdf

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

15/35

QUANTIFICATION /PEMBACAAN

POLYSCAN

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

16/35

ELEKTROFORESIS PROTEIN

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/Serum_Protein_Electrophoresis_Procedure.flv

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

17/35

Skema representasi dari protein

Elektroforesis dengan gel agarose

Pemisahan protein dilihat

Dengan densitometer

POST ANALITIK

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

18/35

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

19/35

NILAI RUJUKAN

Fraksi % g/dl

Albumin

Alfa 1 globulin

Alfa 2 globulin

Beta globulin

Gamma globulin

58-74

2,0-3,5

5,4-10,6

7,4-14

8,0-18,0

3,3-5,0

0,1-0,4

0,5-1,0

0,7-1,2

0,5-1,6

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

20/35

Protein Total ( Normal 6,3- 8,3 g/ dl)

MENINGKAT MENURUN

Inflamasi kronik

misalnya arteritis

Dehidrasi,Makroglobulinemia

DM asidosis, Leukemia

monositik

Multipel mieloma Sarkoidosis

Gangguan hati,

Malabsorbsi

Malnutrisi , Nefrosis Luka bakar, DM

Toksemia gravidarum

Glomerulonefritis

kronik

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

21/35

ALBUMIN

Berfungsi mempertahankan tekanan osmotik plasma yang di

sintesa dalam hati.

Hiperalbuminemia

Dehidrasi, Multiple mieloma

Hipoalbuminemia

Penyakit hati : cirosis hepatis

Penyakit ginjal : sindrom nefrotik Keganasan

Malnutrisi

Inflamasi gastrointestinal

Kehamilan (normal 8 minggu post partum), usia tua

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptx

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

22/35

Gambaran Sindroma Nefrotik

Kehilangan protein dengan BM rendah yang lama (seperti

albumin, IgG) dan retensi protein BM tinggi (seperti alpha-2-macroglobulin)

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

Normal

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptx

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

23/35

ALFA 1 GLOBULIN

Terdiri dari:

- Alfa 1 Antitripsin (AAT)

- Alfa 1 Anti Glikoprotein

(AAG)- Alfa 1 Lipoprotein

- Alfa 1 Fetoprotein (AFP)

- Thyroid Binding

Globulin (TBG)- Transcortin

Infeksi akut

Febris

Kehamilan

Nefrosis

Defisiensi alfa1 antitripsin

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptx

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

24/35

Defisiensi Alpha-1-anti-trypsin

Terdapat pada penyakit paru-paru atau penyakit hati.

Defisiensi alpha-1-anti-trypsin kongenital pada umumnyabanyak berhubungan emphysema, insufisiensipancreatic atau sirosis hati.

Normal

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

25/35

ALFA 2 GLOBULIN

- 2 Haptoglobin (HAP) hemolisis- 2 Macroglobulin (AMG) sindrome nefrotik

- Ceruloplasmin (CER) penyakit wilson

Inflamasi akut

Sirosis bilier

Obstruksi bilier Nefrosis

Multipel

mieloma

Colitis ulseratif

Anemia

hemolitik

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptx

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

26/35

Gambaran pada Inflamasi akut

Terdapat pada pasien wanita 42 tahun dg diagnosapneumonia & pyelonefritis ( Suhu Penderita 40 oC)

Pada Inflamasi akut gambaran albumin dan gamma globulinmenurun dan alpha-2-globulin akan sangat meningkat

Normal

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

27/35

BETA GLOBULIN

- Transferin (TRF) : transport Fe Anemia hipokromik

- Lipoprotein : Transport Lipid

- Fibrinogen

- 2 microglobulin (BMG)

Sirosis bilier Obstruksi bilier

Multipelmieloma

Nefrosis

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/SPE.pptx

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

28/35

Penyakit Hati : Pasien laki-laki, umur 46 tahun dengan penyakit hati

stadium akhir yang disebabkan kecanduan alkohol.

Pada gambaran sirosis, batas lekukan antara beta dangamma kabur dan kadang digambarkan sebagaigambaran jembatan "beta-gamma

Normal

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

29/35

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

30/35

GAMMA GLOBULIN

MENINGKAT MENURUN

Infeksi kronik :

sarcoidosis

Penyakit hati Multipel mieloma

Makroglobulinemia

Waldestrom

Leukemia

Agammaglobulinemia

Hipogamaglobulinemia

Sindrom nefrotik

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

31/35

Polyclonal gammopathy

Biasanya terjadi pada banyak penyakit kronik.Sepertisarcoidosis. Peningkatan tinggi dari fraksi gobulin

menggambarkan "sarcoid stepping.http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

Normal

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

32/35

Gambaran Monoclonal protein

Pasiem umur 72

tahun laki-laki dengan lower back pain.

Penilaian immunoglobulinmemperlihatkan peningkatan

yang sangat tinggi dari serumIgG, tetapi IgA and IgMmenurun.

Gambaran diagnosa multiple

myeloma

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

33/35

Biclonal gammopathy Hasil dari pasien laki-laki

umur 62 tahun yang kurus

dan lemah pada penyakitmultiple myeloma.

Pada penyakit ini, biclonal

gammopathies adalahjarang,terjadi pada 1,7%

pasien.

http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

34/35

5/28/2018 Serum Protein Elektroforesis(Retno)

35/35

Sumber Pustaka

1. Hardjoeno dkk. Interpretasi hasil tes laboratorium

diagnostik. Makasar. Lephas, 2003: 249-64.

2. Jusniati, Benny Rusli, Hardjoeno. Tes Protein Serum. Bagian

Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin

3. OconnellT, Horita T, Kasravi B. Understanding and

Interpreting Serum Protein Electrophoresis. Am Fam

Physician 2005;71:105-12.

4. Interpretive Guide to Clinical Electrophoresis. 2ndEd: 1988.

Helena Laboratories