„kuh“- und „umweltassoziierte“ .„kuh“- und „umweltassoziierte“ mastitiserreger –

„Kuh“- und „umweltassoziierte“ Mastitiserreger

– Klassische Nachweismethoden, Vorkommen, Resistenzentwicklung,

Therapieansätze –*

* Gefördert aus Mitteln des Freistaates Bayern durch das Bayerische Staatsministerium für Landwirtschaft und Forsten

sowie die Bayerische Tierseuchenkasse

Klaus Fehlings

Fachabteilung Eutergesundheitsdienst und Milchhygiene

des Tiergesundheitsdienstes Bayern e.V.

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top agrar, 07/2008

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Tierarzneimittelmarkt in Deutschland

147 158

172 184

201

135 146 151 155

164 142 136 139 138 145

85 88

139

100 116

2003 2004 2005 2006 2007

Eu ro

Antiinfektiva

Pharmazeutische Spezialitäten Biologika

Antiparasitika

Wachstum (2003 - 2007) Biologika 6,9% Antiparasitika 26,4% Pharm. Spezialitäten 13,4% Antiinfektiva 26,9%

BfT, 2008

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„Kuh“- und „umweltassoziierte“ Mastitiserreger

– Klassische Nachweismethoden, Vorkommen, Resistenzentwicklung, Therapieansätze –

I. Diagnostik II. Mastitiserreger III. Resistenzteste IV. Empfehlungen für die Praxis

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„Die exakte klinische Untersuchung ist die Grundlage

tierärztlichen Handelns“

- Götze -

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Fachgerechte Mastitisdiagnostik

Exakte klinische Untersuchung Stallproben Labordiagnostik - Erregernachweis aus Viertelanfangsgemelkproben - Nachweis entzündlicher Veränderungen

o Diagnostik auf Einzeltierebene o Diagnostik auf Herdenbasis o Diagnostik unter AMV-Bedingungen

Foto: TGD

Einhaltung der GVP gemäß den Leitsätzen der Antibiotika Leitlinien (2002) „Tierärztliche Kompetenz und Krankheitsdiagnose nach den Leitsätzen von Götze“

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Prinzip: Viskositätsänderung (Präzipitation zellulärer DNS nach Zugabe einer oberflächenaktiven Testreagenz)

Der California Der California -- ((Schalm)Schalm)--MastitisMastitis--TestTest

43210 +++++++/--

Übliche SMT-Klassen

Entwickelt von Schalm u. Norlander (1957)

Semiquantitatives Verfahren = indirekte Zellzahlbestimmung (Einteilung in Befundklassen)

Farbveränderung (ph-Indikator; Testreagenz als Farbindikator)

mod. Redetzky und Fehlings, 2003

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2241,8%98,2%> 400 551,8%98,2%300 - 400

1043,8%96,2%200 - 300

1829,9%90,1%100 - 200 Davon:

„Kranke“Falsch Negativ

Richtig Positiv

5654,8%95,2%> 100

„Gesunde“Richtig Negativ

Falsch positiv

86168,4%31,6%≤ 100

nNegativPositiv[Zellen/ml Milch x 1.000]

VAGCMT (SMT)EZZ

Redetzky, Hamann und Fehlings, 2005

gestörte Sekretion

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Normbereich: 4,8 – 6,2 mS/cm

Indikator für die Eutergesundheit absoluter Grenzwert:

> 6,5 mS/cm

Inter Quarter Ratio: Differenz zwischen Vierteln

mit dem höchsten und niedrigsten Messwert ist > 15 %

Elektrische Leitfähigkeit (ELF)

Differenz = 16,4% Verdacht auf Mastitis:

Viertel VR

5,7 HR

5,8 HL

6,4 VR

5,5 VL

mod. Redetzky und Fehlings, 2003

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Laktationsstadium Rasse Gemelksfraktion Melkintervall Fütterung Brunst Allgemeinerkrankung

ELF

Hamann und Krömker, 2000

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Darstellung: Direkte Zellzahlbestimmung

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DCC - Messungen (DCC 3 vs. Fossomatic)

DCC vs Fossomatic, single count

y = 0,9553x + 13,787 sy ,x = 149 76 datapairs

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

0 1000 2000 3000 4000 5000 6000

Fossomatic 18, single count (*1000/ml)

D C

C 3

, s in

gl e

co un

t ( *1

00 0/

m l)

Darstellung:

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Mastitisdiagnostik

• Milchproben auf der Euterviertelebene - Fraktionsproben

- Viertelanfangsgemelke - Viertelendgemelke - Viertelgesamtgemelke

Milchproben für mikrobiologische Untersuchungen

Grundsätzlich Viertelanfangsgemelke DVG, 2000, 2009

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Mastitis- diagnostik

• Sterile Probengefäße • Dicht schließende Verschlüsse • Reinigungstupfer

- 70%-iger Alkohol (Ethylalkohol) • ggf. Konsrvierungsmittelzusatz

- z.B. flüssige Borsäure, Lyophilisat

Fotos: Fehlings

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Methoden o Bebrütung auf Agarplatten (Zusatz

10% Blut und 0,1% Äsculin) o Bebrütungszeit 36 h bei 36±10C o Bestimmung der minimalen

Hemmkonzentration (MHK; Breakpoint-Methode; Mikronaut® System, Fa. Merlin)

o Bestimmung der Penicillinsensibilität mittels des Penicillinase- Reduktionstestes (mod. n. Rosselet)

o Sensivitätsprüfung im Agar-Diffusionstest (ADT, Basis DIN-Norm 58.940)

Referenz: Leitlinien zur Entnahme von Milchproben unter antiseptischen Bedingungen und Leitlinien zur Isolierung und Identifizierung von Mastitiserregern. DVG, 2000

Fotos: TGD, Fehlings

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Untersuchungszeitraum 2000 - 2008 Entnahme durch Techniker des EGD Externe Einsendungen

- 59.486 Bestandsbesuche - 908.750 Kühe - 4.309.901 Viertelanfangsgemelkproben - 640.456 externe Einsendungen - 499.088 Penicillinasenachweise - 145.078 MHK-Bestimmungen Fotos: TGD, Fehlings

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Material Auswertung von 1.341.072 Milchproben 527.429 Milchproben waren SMT-positiv (Ø 32,8%) 402.719 dieser Proben waren mikrobiologisch positiv (Ø 24,6%)

- Auswertung von 195.738 (ca. 39,2%) Penicillinsensitivitätsprüfungen

- Auswertung von 46.597 (ca. 32,1%) MHK-Bestimmungen

Fotos: TGD, Fehlings

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18

35,8

22,2

3,5

10,1

27,6 25,0

1,9 0,7

32,6

4,0

"Kuh-assoziiert"

S.aureus

S. agalactiae

Streptokokken äsk. neg.

"Umwelt-assoziiert"

Streptokokken äsk. pos.

E. coli

sonst. Enterobacteriaceae

KNS

Sonstige

Auswertung mikrobiologischer Untersuchungen in Bayern, 2000 - 2008 (n = 1.341.072)

Fehlings, 2009

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Penase-Test (mod. n. Rosselet)

Fotos: TGD

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20 Fehlings, 2009

32,6

20,9 25,9

67,4

79,1 74,1

Penicillinsensibilität: Untersuchungen 2008 (n = 411.322) S.aureus P+

KNS P + alle Staph. P+

S.aureus P- KNS P- alle Staph. P-

Anzahl (n): Auswertung von 38.920 Untersuchungen S.aureus Penicillinase p