Dr M. ToukamFMSB/HGY

OBJECTIFSI- Définir l’hemoculture et decrire les

conditions de sa realisationII- Développer les principes de l’analyse des

résultats d’hemoculture

PLAN1. Definition et Generalites2. Indications d’une hemoculture3. Techniques de l’hemoculture4. Interpretation des resultats d’une

hemoculture

1. Définition et Généralités• L’hémoculture est la culture du sang pour

rechercher les germes.

• C’est un examen essentiel dans la recherche étiologique des maladies infectieuses a dissémination sanguine.

• EIle consiste en un prélèvement aseptique de sang veineux dans des milieux spécifiques monophasiques (liquide seule) ou diphasiques (liquide + solide) de préférence qui sont ensuite incubés pendant plusieurs jours a plusieurs semaines dans des conditions favorables a la croissance des germes.

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• Elle est effectuée si possible avant la mise en route d'une antibiothérapie.

• L'hémoculture permet également de réaliser un

antibiogramme sur le germe isolé, et oriente ainsi le médecin dans le choix du traitement antibiotique.

• On réalise en général 3 prélèvements différents, à quelques heures d'intervalle, effectués si possible au moment d'un pic d'hyperthermie ou d'hypothermie ou lors de frissons qui signent une décharge bactériémique.

Une hémoculture positive signe une bactériémie.

Une bactériémie accompagnée d'un syndrome infectieux est une septicémie.

Le choc septique est la forme grave de septicémie; le pronostic vital est souvent en jeu.

• Les renseignements cliniques doivent parfois orienter le laboratoire sur le germe recherché comme Listeria monocytogenes, les mycobactéries, les bactéries à croissance lente ou difficile (Brucella, Campylobacter, Legionella, Mycoplasmes, Leptospira, Groupe HACEK, Streptocoques déficients, Bartonella), les champignons … pour permettre de choisir les milieux de culture adaptes (Bactec, Isolator …).

2. Indications de l’hemocultureFievres au long coursHypothermieSuspicion d’endocarditeChoc infectieux

3. Techniques de l’hémoculturePrélèvementLe prélèvement de sang veineux se fait le

plus souvent dans la veine située au pli du coude.

1 a 2 ml pour l’enfant 5 a 10 ml pour l’ adulteLes conditions d‘asepsie rigoureuses doivent

être respectées pour éviter une contamination (germes de la peau le plus souvent).

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EnsemencementLe sang prélevé est ensemencé dans deux

types de flacons: - un flacon aérobie pour les germes aérobies

et aéroanaérobies - un flacon anaérobie (sans oxygène) pour les

germes anaérobies et les germes aéroanaérobies.

• Ces flacons sont ensuite incubés dans une étuve à 37 °C, si l’on ne dispose pas d’automate.

• leur aspect (recherche d'un trouble, de petites colonies sur le tapis de globules rouges au fond, disque moiré sous la surface, etc.) sera régulièrement vérifié pour rechercher la présence de germe.

• En général, on « repique » également ces flacons, c'est-à-dire qu'on en ensemence quelques gouttes sur des géloses nutritives riches, généralement 24 et / ou 48 h après le prélèvement. On garde les cultures en moyenne une quinzaine de jours.

Si l’on utilise un automate, les flacons sont testés a intervalles de quelques minutes pour déceler des signes de croissance bactérienne (acidification, diminution de l'oxygène ou présence de CO2). En cas de détection de bactéries une alerte est donnée pour que les flacons soient rapidement traités par un technicien.

4. Interpretation des résultatsRésultat négatif• Les différentes hémocultures sont stériles, aucun germe n‘a

poussé. - Une hémoculture négative ne permet pas forcement de

conclure a une absence d'infection, mais simplement qu'à l'instant précis où le prélèvement a été effectué il n'y avait pas de germes dans le sang.

- Le germe responsable de l'infection a des exigences culturales très particulières et qu'il ne pousse pas dans les milieux de cultures usuels. Le résultat est alors faussement négatif.

- Il peut s’agir d’une infection virale: Seules les bactéries et les champignons sont isolés dans les flacons usuels d’hémocultures.

- Une antibiothérapie avant hémoculture peut également donner un résultat faussement négatif (infection décapitée).

Résultat positif• Les cultures ne sont pas stériles, un germe est

retrouvé. • En cas de culture positive, il faut effectuer des

repiquages pour identifier précisément le germe incriminé.

• Les cultures sont positives au bout de quelques jours, mais parfois les germes poussent plus lentement, soit parce que le patient a été traité par des antibiotiques avant le prélèvement, soit parce qu'il s'agit de germes à croissance lente.

• Une fois isolé, il faut faire l’antibiogramme: tester la sensibilité de ce germe à différents antibiotiques.

• Devant des hémocultures positives, on se retrouve devant plusieurs cas de figures qui nécessitent la prise en compte de la clinique :

- Hémocultures positives avec un seul germe retrouvé : si c'est une bactérie pathogène spécifique, le résultat n'est significatif que si l'on retrouve le germe sur un ou plusieurs flacons.

- Hémocultures positives avec un seul germe retrouvé : si c'est une bactérie pathogène opportuniste, le résultat sera significatif si on le retrouve sur plusieurs flacons, mais on conclura à une contamination probable si on ne le retrouve que sur un flacon.

- Hémocultures positives avec isolement de plusieurs

germes : terrain débilité (déficit immunitaire, cirrhose ...), foyer infectieux digestif ou cutané, cholécystite (polymicrobisme habituel), souillure lors du prélèvement à cause d'une mauvaise technique (très fréquent).