Los laboratorios clínicos pueden utilizar suero o plasma para las determinaciones bioquímicas.

El uso del suero es el más difundido para este tipo de determinaciones, se obtiene a partir de una muestra de sangre extraída sin anticoagulante, esperando el tiempo necesario para la formación del coágulo y retracción. El promedio del tiempo de formación Del coágulo es de entre 15 y 30 min,para la mayoría de las especies; en el caso de los rumiantes, el tiempoque se requiere es de entre 1 y 2 horas,por esta razón se pueden enviar allaboratorio muestras de plasma empleando la heparina de litio o heparina de sodio como anticoagulante.

Si se va a obtener suero, es necesario dejar la sangre en reposo a temperatura ambiente, es decir de 15 a 25 °C, para la adecuada formación del coágulo. Una vez formado, debe ser separado de las paredes del tubo o jeringa donde se obtuvo la muestra, esto se puede hacer utilizando un palillo de madera o una pipeta Pasteur; posteriormente, centrifugar a1500 G (3000 rpm) durante 10 min,

transferir dicho suero a otrorecipiente y taparlo. No sedebe tratar de centrifugar nicolocar la muestra enrefrigeración antes de queesté bien formado el coágulo,ya que estos manejos provocarán que se prolongueel tiempo de coagulación y

será inadecuada su evaluación.

Para llevar a cabo análisis bioquímicos (glucosa, Na, K, Cl, P, bicarbonato, actividad de enzimas),

es necesario separar el suero del coágulo o el plasma de las células dentro de un periodo de una hora después de tomada la

muestra, debido a que si el tiempo es mayor,los parámetros a medir variarán como consecuencia

de un intercambio entre las fases celular y líquida de la sangre.

Para los análisis de bioquímica clínica completa es suficiente extraer entre 3 y 5 mL de plasma, éste se obtiene a partir de

7-10 mL de sangre aproximadamente. En los laboratorios que emplean microtécnicas, incluso es suficiente 1.5 mL de plasma.

Las muestras de plasma, suero u orina deben protegerse de la luz cuando se necesite hacer mediciones de bilirrubina total y

bilirrubina directa. La exposición de las muestras ala luz fluorescente o la luz solar disminuye la concentración de

bilirrubina hasta 50% por hora. Si existe el interés de medir los valores del perfil lipémico (ácidos grasos libres, colesterol,

triglicéridos, lípidos totales), su determinación se hará con base en suero, no en plasma.

Para la determinación de glucosa y bicarbonato se debe centrifugar la muestra desangre dentro de 30 a 60 min y transferir

inmediatamente el suero o el plasma al tubo limpio y tapar. El contacto prolongado de los leucocitos y eritrocitos con el suero o

plasma disminuye significativamente las concentraciones de bicarbonato y glucosa (hasta un10% por hora).

Las proteínas plasmáticas (pp) son un grupo heterogéneo de proteínas con diversas funciones, pesos moleculares y densidades de carga eléctrica. Pero, en general, se incluyen principalmente en dos grupos: albúmina y globulinas (en esta última fracción están incluidos fibrinógeno, complemento y anticuerpos, entre otras proteínas).

La concentración de proteínas en el plasma, en determinado momento, está en función del equilibrio hormonal, nutricional, balance hídrico y de otros factores que afectan el estado de salud, así como el estado de renovación de las distintas proteínas. Por lo anterior, la interpretación de las concentraciones de proteínas en la sangre debe considerar los datos generales del paciente, como especie, raza, edad, sexo; así como los datos de historia clínica (tipo y frecuencia de la alimentación, enfermedades previas al problema actual) y datos de anamnesis (información sobre el problema actual).

análisis Rango referencial

Anisocitosis Escaso

CHCM 32 -37

Eritrocitos 5.5-8.5

Eritrocitos nucleados 0

Hemoglobina 12-18

Policromasia Negativo

PROTEINAS 55-75

VCM 60-77

VGA 37-50

El término disproteinemia literalmente se refiere a cualquier alteración en la cantidad de proteínas de la sangre. Este concepto incluye una

anormalidad del contenido de proteínas totales y de proteínas individuales.

Para evaluar esa alteración se requiere determinar:

-la concentración de proteínas plasmáticas totales o proteínas séricas

- concentración de fibrinógeno

- determinación bioquímica de albúmina y globulinas así como la relación albúmina/globulinas.

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

Las proteínas plasmáticas pueden ser determinadas a partir del plasma que se encuentra en la parte superior de un tubo capilar centrifugado para la determinación del hematocrito (Hto). Se rompe el tubo por arriba de la capa leucoplaquetaria, se deposita una gota en el refractómetro clínico y se realiza la lectura en la escala de proteínas o sólidos totales. Ya que, tanto el Hto, como las pp son afectados por el estado de hidratación del paciente, es de utilidad determinar ambos, para evaluar anemias, eritrocitosisy disproteinemias.

ALTERACIONES

EN PP

hiperproteinemias hipoproteinemias

HIPERPROTEINEMIAS

La causa más frecuente de este tipo de alteración se relaciona con:

Hemoconcentración:Algunos signos clínicos que se pueden mencionar en la anamnesis son: vómito, diarrea, poliuria, ascitis, fiebre, sudoración profusa y, en equinos, algunos casos de síndrome abdominal agudo.

Inflamación:En caso de que ésta sea aguda, la causa de hiperproteinemia puede deberse a un aumento de fibrinógeno; en el caso de inflamación crónica, la elevación de proteínas totales puede ser atribuida al aumento en la síntesis de globulinas.

Neoplasias:Por ejemplo plasmocitoma (conocido también como mieloma múltiple) y linfosarcoma, cuando el valor de las proteínas plasmáticas es igual o mayor a 100 g/L.

HIPOPROTEINEMIAS

Se deben considerar las siguientes causas:

Disminución en la síntesis proteica:provocada por insuficiencia hepática, alimentación con escasa cantidad de proteínas, síndrome de mala digestión (insuficiencia exocrinapancreática), síndrome de mala absorción (enteropatía con pérdida de proteínas) e insuficiencia cardiaca congestiva.

Pérdida de proteínas:por vía renal (glomerulonefropatía), a través del intestino (diarrea con pérdida de proteínas), por quemaduras, hemorragia, secuestro a espacios terceros.

Edad:los animales recién nacidos tienen concentraciones de pp más bajas que los animales adultos. El consumo del calostro provoca una elevación temporal. Luego el total de proteínas plasmáticas se incrementa gradualmente con la edad hasta llegar a los valores de referencia para los animales adultos.

Sobrehidratación (hemodilución):La anamnesis puede mencionar terapia de líquidos previa a la toma de la muestra

FIBRINÓGENO

Es una proteína producida y almacenada en los microsomasde los hepatocitos, hasta que es necesario. Su vida media

va de dos a tres días. Además de participar en la coagulación, sirve como defensa migrando hacia los sitios

de lesión para confinar los procesos patológicos inflamatorios.

ALTERACIONES

EN FIBRINOGENO

Hiperfibrinogenemia. Hipofibrinogenemia

HIPERFIBRINOGENEMIA

Es la elevación del fibrinógeno en la sangre y ocurre duranteprocesos inflamatorios, puede estimarse por una modificaciónde la técnica de pp y microhematocrito.

El fibrinógeno es estimado mediante la diferencia de las lecturasen la concentración de pp entre 2 tubos de microhematocrito. Laprimera lectura es la rutinaria para pp y la segunda lectura serealiza a partir de un tubo de microhematocrito que se hacalentado en un rango de 56 a 58 °C por 3 minutos. Elfibrinógeno es precipitado por el calentamiento y removido porcentrifugación.

La diferencia entre ambas lecturas equivale a la concentraciónde fibrinógeno. La estimación del fibrinógeno es usadamás frecuentemente en bovinos y caballos.

HIPOFIBRINOGENEMIA

Es la disminución en las concentraciones de fibrinógeno y se detecta en:

-muestras de sangre con coágulos-enfermedades hepáticas (los datos de la anamnesis deben ser acordes con coagulopatías) -eliminación rápida del fibrinógeno por fibrinolisinas, como ocurre en choque-neoplasias extensas de vejiga, páncreas o próstata-coagulaciónintravascular diseminada-leucemia granulocítica del perro e infecciones estreptocócicas del caballo y el perro

ALBÚMINAS Y GLOBULINAS

AlbúminaLa albúmina plasmática representa alrededor de los dos tercios de las proteínas del compartimento circulatorio y la mitad de la albúmina total del organismo. Sintetizada por el hepatocito, su vida media es de aproximadamente 20 días. 80% de la presión oncótica del plasma se atribuye a la albúmina, que es la principal responsable de los movimientos acuosos entre el medio intravascular y el medio intersticial. Su segunda función en el plasma es garantizar el transporte de diversas sustancias, entre las que se encuentran: bilirrubina, ácidos grasos, medicamentos (fenilbutazona, fenitoína y otros) y hormonas.

GlobulinasLa concentración de la mayor parte de las proteínas es calculada; a las proteínas séricas seles resta la concentración de albúmina. La prueba de turbidez de sulfato de zinc es utilizada como una prueba tamiz para determinar la absorción de las inmunoglobulinas del calostro en potros y becerros.

ALTERACIONES

EN ALBUMINAS

Hiperalbuminemia Hipoalbuminemia

HIPERALBUMINEMIA

Suele ocurrir básicamente por hemoconcentración, por lo que se asocia a la relación alúmina: globulinas (A :G) normal.

HIPOALBUMINEMIA

Se relaciona con las causas mencionadas en hipoproteinemias, tales como sobrehidratación, dietas deficientes en proteínas, síndrome de mala digestión,

síndrome de mala absorción, disminución en la producción por enfermedad hepática, pérdidas a través del riñón y

pérdida a espacios terceros.

ALTERACIONES

EN GLOBULINAS

Hiperglobulinemia Hipoglobulinemia

HIPERGLOBULINEMIA

Indica proceso inflamatorio crónico. También puede llegarse a observaren neoplasias como linfosarcoma bovino o

plasmocitoma.

HIPOGLOBULINEMIAS

Los animales recién nacidos (que no han tomado calostro) tienen concentraciones menores de globulinas en relación con

las concentraciones de los adultos. En animales adultos se atribuye a inmunodeficiencias.

RELACIÓN ALBÚMINA : GLOBULINAS (A : G)

Es un valor calculado, obtenido de dividir la albúmina entre las globulinas.

Disminución de la relación A : G = Aumento de globulinas por las causas previamente mencionadas, disminución de albúmina.

Elevación de la relación A : G = Hipogammaglobulinemia(frecuente en becerros), inmunodeficiencia congénita, inmunodeficiencia adquirida.