uji aktivitas antibakteri
DESCRIPTION
Laporan Praktikum Uji Aktivitas Antibakteri Mata Kuliah Teknologi Bahan AlamTRANSCRIPT
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 1/12
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 2/12
PENDAHULUAN
Pengujian aktivitas anti/akteriadala teknik untuk mengukur /era,a
/esar ,otensi atau konsentrasi suatu
senya!a da,at mem/erikan e(ek /agi
mikroorganisme. Berdasarkan si(at
toksisitas selekti( ada 8at yang /ersi(at
mengam/at ,ertum/uan /akteri yang
dikenal se/agai /akteriostatik dan yang
/ersi(at mem/unu /akteri yang dikenal
se/agai /akterisida.
Untuk metode ,engujian
anti/akteri suatu 8at metode yang sering
digunakan diantaranya metode di(usi.
4etode ini da,at dilakukan dengan
menggunakan ,a,er disk atau kertas
+akram yang ke dalamnya dimasukkan
anti/akteri dalam gelas tertentu dan
ditem,atkan dalam media ,adat yang tela
diinokulasikan dengan /akteri indikator
setela diinku/asi akan terjadi daera
jenu di sekitar sumuran atau disk dan
diameter am/atan meru,akan ukuran
kekuatan am/atan dari su/stansi
antimikro/ia. 9erada, /akteri yang
digunakan. :e/arnya 8ona yang ter/entuk
yang juga ditentukan ole konsentrasi
senya!a e(ekti( yang digunakan
meru,akan dasar ,engujian kuantitati( al
ini mengindikasikan /a!a senya!aterse/ut /isa /e/as /erdi(usi ke seluru
medium. Pengam/atan ,ertum/uan
/akteri melalui mekanisme ,engam/atan
sintesis dinding sel meli/atkan gangguan
,ada sintesis ,e,tidoglikan. Padaal
,e,tidoglikan meru,akan kom,onen
utama dinding sel seingga /akteri
menjadi lisis.
4ekanisme daya kerja antimikro/a
terada, sel da,at di/edakan atas /e/era,a
kelom,ok se/agai /erikut diantaranya
merusak dinding sel mengganggu
,ermea/iitas sel merusak molekul ,rotein
dan asam nukleat mengam/at aktivitas
en8im mengam/at sintesa asam nukleat.
7ktivitas antimikro/a yang da,at diamati
se+ara langsung adala
,erkem/ang/iakannya. ;le karena itu
antimikro/a di/agi menjadi dua ma+am
yaitu anti/ioti+ dan disin(ektan. 7nti/iotik
adala senya!a yang diasilkan ole
mi+roorganisme tertentu yang mem,unyai
kema,uan mengam/at ,ertum/uan
/akteri atau /akan mem/unu /akteri
!alau,un dalam konsentrasi yang renda.
7nti/iotik digunakan untuk mengentikan
aktivitas mikro/a ,ada jaringan tu/u
makluk idu, sedangkan desin(ektan
/ekerja dalam mengam/at atau
mengentikan ,ertum/uan mikro/a ,ada
/enda tak idu, se,erti meja alat gelas
dan lain se/againya. Pem/agian kedua
2
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 3/12
kelom,ok antimikro/a terse/ut tidak
anya didasarkan ,ada a,likasi
,enera,annya melainkan juga terada,
konsentrasi mikro/a yang digunakan
Soekardjo 1<<#.
7nti/akteri adala senya!a yang
digunakan untuk mengendalikan
,ertum/uan /akteri yang /ersi(at
merugikan. Pengendalian ,ertum/uan
mikroorganisme /ertujuan untuk
men+ega ,enye/aran ,enyakit dan
in(eksi mem/asmi mikroorganisme ,ada
inang yang terin(eksi dan men+ega
,em/usukan serta ,erusakan /aan ole
mikroorganisme. 7ntimikro/ia meli,uti
golongan anti/akteri antimikotik dan
antiviral. 4ekanisme ,engam/atan
terada, ,ertum/uan /akteri ole
senya!a anti/akteri da,at /eru,a
,erusakan dinding sel dengan +ara
mengam/at ,em/entukannya atau
mengu/anya setela selesai ter/entuk
,eru/aan ,ermea/ilitas mem/ran
sito,lasma seingga menye/a/kan
keluarnya /aan makanan dari dalam sel ,eru/aan molekul ,rotein dan asam
nukleat ,engam/atan kerja en8im dan
,engam/atan sintesis asam nukleat dan
,rotein. i /idang (armasi /aan
anti/akteri dikenal dengan nama
anti/iotik yaitu suatu su/stansi kimia yang
diasilkan ole mikro/a dan da,at
mengam/at ,ertum/uan mikro/a lain.
Senya!a anti/akteri da,at /ekerja se+ara
/akteriostatik /akteriosidal dan
/akteriolitik Pel+8ar dan =an 1<)).
4enurut 4adigan dkk. 2000
/erdasarkan si(at toksisitas selekti(nya
senya!a antimikro/ia mem,unyai $
ma+am e(ek terada, ,ertum/uan
mikro/ia yaitu'
1. Bakteriostatik mem/erikan e(ek
dengan +ara mengam/at ,ertum/uan
teta,i tidak mem/unu. Senya!a
/akterostatik seringkali mengam/at
sintesis ,rotein atau mengikat ri/osom.
5al ini ditunjukkan dengan
,enam/aan antimikro/ia ,ada kultur
mikro/ia yang /erada ,ada (ase
logaritmik. Setela ,enam/aan 8at
antimikro/ia ,ada (ase logaritmik
dida,atkan jumla sel total mau,un
jumla sel idu, adala teta,.
2. Bakteriosidal mem/erikan e(ek dengan
+ara mem/unu sel teta,i tidak terjadi
lisis sel atau ,e+a sel. 5al ini
ditunjukkan dengan ,enam/aan
antimikro/ia ,ada kultur mikro/ia
yang /erada ,ada (ase logaritmik.
Setela ,enam/aan 8at antimikro/ia
,ada (ase logaritmik dida,atkan jumla
sel total teta, sedangkan jumla sel
idu, menurun.
$. Bakteriolitik menye/a/kan sel menjadi
lisis atau ,e+a sel seingga jumla sel
/erkurang atau terjadi kekeruan
setela ,enam/aan antimikro/ia. 5al
3
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 4/12
ini ditunjukkan dengan ,enam/aan
antimikro/ia ,ada kultur mikro/ia
yang /erada ,ada (ase logaritmik.
Setela ,enam/aan 8at antimikro/ia
,ada (ase logaritmikjumla sel total
mau,un jumla sel idu, menurun.
4ekanisme ,engam/atan anti/akteri
da,at dikelom,okkan menjadi lima yaitu
mengam/at sintesis dinding sel mikro/ia
merusak keutuan dinding sel mikro/ia
mengam/at sintesis ,rotein sel mikro/ia
mengam/at sintesis asam nukleat dan
merusak asam nukleat sel mikro/ia
Sulistyo 1<>1.
aya antimikro/ia diukur se+ara in
&itro agar da,at ditentukan kemam,uan
suatu 8at anti/akteri. 7danya (enomena
ketaanan tum/uan se+ara alami terada,
/akteri menye/a/kan ,engem/angan
sejumla senya!a yang /erasal dari
tanaman yang mem,unyai kandungan
anti/akteri dan anti(ungi ?ri((in 1<)1.
Uji aktivitas anti/akteri da,at dilakukan
dengan metode di(usi dan metode
,engen+eran. Disc diffusion test atau uji
di(usi disk dilakukan dengan mengukur
diameter 8ona /ening 'clear zone( yang
meru,akan ,etunjuk adanya res,on
,engam/atan ,ertum/uan /akteri ole
suatu senya!a anti/akteri dalam ekstrak.
Syarat jumla /akteri untuk uji
ke,ekaan@sensitivitas yaitu 10#-10)
=FU@m: 5erma!an dkk. 200>. 4etode
di(usi meru,akan sala satu metode yang
sering digunakan. 4etode di(usi da,at
dilakukan dengan $ +ara yaitu metode
silinder metode lu/ang@sumuran dan
metode +akram kertas. 4etode
lu/ang@sumuran yaitu mem/uat lu/ang
,ada agar ,adat yang tela diinokulasi
dengan /akteri. Jumla dan letak lu/ang
disesuaikan dengan tujuan ,enelitian
kemudian lu/ang diinjeksikan dengan
ekstrak yang akan diuji. Setela dilakukan
inku/asi ,ertum/uan /akteri diamati
untuk meliat ada tidaknya daera
am/atan di sekeliling lu/ang Kusmayati
dan 7gustini 200>.
Resistensi sel mikro/a adala suatu
si(at tidak terganggunya sel mikro/a ole
antimikro/a Setia/udy dan ?an 1<<#.
Resistensi mikro/ia terada, o/at terjadi
aki/at ,eru/aan genetik dan dilanjutkan
serangkaian ,roses seleksi ole o/at
antimikro/a Ja!et8 , 2001. Faktor yang
memengarui si(at resistensi mikro/a
terada, antimikro/a terda,at ,ada unsur
yang /ersi(at genetik se,erti A7
,lasmid dan kromosom. idasarkan ,ada
lokasi unsur dikenal menjadi $ ma+am
resistensi yaitu'
a. Resistensi kromosomal
9erjadi aki/at mutasi s,ontan
dalam lokus yang mengatur ke,ekaan o/at
antimikro/ia yang di/erikan. 7danya
antimikro/a se/agai mekanisme selekti(
yakni mem/unu /akteri yang ,eka dan
4
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 5/12
mem/iarkan tum/u /akteri yang resisten
Ja!et8 2001.
/. Resistensi ekstra-kromosomal
Bakteri seringkali /erisi materi
genetik yang dise/ut ,lasmid. Faktor R
adala kelom,ok ,lasmid yang mem/a!a
gen resistensi terada, satu atau /e/era,a
o/at antimikro/ia dan logam /erat. ?en
,lasmid untuk resistensi antimikro/ia
mengontrol ,em/entukan en8im yang
mam,u merusak antimikro/ia
Ja!et8 ,2001.
+. Resistensi silang
Keadaan resistensi terada,
antimikro/a tertentu yang juga
mem,erliatkan si(at resistensi terada,
antimikro/a yang lain. Biasanya terjadi
antara antimikro/a yang memiliki struktur
kimia am,ir sama derivat tetrasiklin
atau antara antimikro/a dengan struktur
kimia yang /er/eda dengan mekanisme
aksi yang am,ir sama Setia/udy dan
?an 1<<#.
Resistensi /akteri terada,
anti/iotik meru,akan sala satu masala
seluru dunia di negara maju mau,un
negara /erkem/ang ;keke dkk 200#
,ada ruma sakit dan juga komunitas
:estari dkk 200<. Pengo/atan in(eksi $%
aureus menjadi le/i sangat kom,leks
seu/ungan dengan kemun+ulan /er/agai
jenis anti/iotik resistensi di seluru dunia.
$train 4eti+illin resisten $% aureus
4RS7 menjadi ,usat ,eratian sejak
resisten terada, semua anti/iotik -
la+tam dan juga dalam kasuskasus
anti/iotik gru, lain terutama di ruma
sakit. Pada taun 2001 ;rganisasi
Keseatan unia C5; menyatakan
strategi glo/al ,ertama untuk menangani
(enomena ini sala satu rekomendasinya
yaitu dengan memantau ke+enderungan
,enggunaan o/at antimikro/a dalam
standar mikro/iologi 7nonim 2010+.
Pada ,raktikum ini isolat /akteri
yang digunakan adala isolat/akteri 3i/rio
5arveyii. 3i/rio 5arveyi meru,akan suatu
/akteri gram-negative /akteri /er+aaya
adala sala satu dari agen mikro/ia yang
,enting yang da,at mem/uat kematian
massal larva udang !indu dalam suatu
sistem ,em/esaran. Sejumla /esar udang
di at+eries yang mem,roduksi /eni
udang sering menderita kemunduran dalam
kaitan dengan ,enyakit /akteri
lumines+ent dan menderita kerugian
ekonomi yang sangat /esar. 3i/riosis
adala dise/a/kan ole sejumla 3i/rio
Jenis /akteri termasuk' 3. arveyi 3.
vulni(i+us 3. ,araaemolyti+us 3.
alginolyti+us 3. ,enaei+ida :igtner et al
1<<2D. 9ela dila,orkan /erkali E kali
mengenai vi/riosis yang dise/a/kan ole
3. damsela 3. (luvialis dan 3i/rio lain
yang terde(inisi jenisnya.
BAHAN DAN METODE
5
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 6/12
Alat dan Bahan
7da,un alat yang digunakan dalam
,raktikum ini adala /unsen +a!an ,etri
:-glass mikro,i,et ,inset ta/ung reaksi
vorte. an /aan yang digunakan
diantaranya alkool >0G ekstrak metanol
sam,el /ua ke/en isolat /akteri uji
ibrio har&eyi( media nutrien agar
,elarut aHuades ,a,er disk.
Mt!d Praktiku"
ilakukan ,em/uatan konsentrasi ekstrak
yaitu 1000 ,,m 10.000 ,,m dan 100.000
,,m. Kemudian Isolat /akteri uji yang
tela di kultur dioleskan di ,ermukaan
Autrien 7gar ,ada +a!an ,etri. :alu ,a,er
disk direndam ,ada masing-masing
konsentrasi ekstrak yang selanjutnya
diletakkan ,ada ,ermukaan media
inokulasi dengan menggunakan ,inset.
Setela itu Bakteri diinokulasikan selama
2" jam ,ada suu $>= . iameter 8ona
am/at yang ter/entuk diukur dengan
menggunakan jangka sorong. Semua
,roses dilakukan se+araa se,tis.
HASIL DAN PEMBAHASAN
9a/el 1. Perlakuan dan 5asil Pengamatan Uji 7ktivitas 7nti/akteri
Kl!"#!
k
Shi$t K!n%ntra%i
Ek%trak
Ulan&an Rata'
Rata ) *
1
Kontrol >20 %2> %)2 %>%Kontrol - %"1 %1) %$< %$1
) 100.000 %%# %<% %>0 %>>
* #0.000 20$< 1)$ 1>2% 1)%#
+ 10.000 11"% >1> >$" )%#%
, #.000 )$) >0> 11"" )<%
- 1.000 %%< %<$ >$" %<)
. 100 <#$ 101$ )"0 <$#
/ 10 <$% >%$ 10$0 <0<
Pada ,raktikum uji aktivitas
antioksidan ini /aan yang digunakan
adala ekstrak metanol /iji /ua ke/en
yaitu sa,onin (enol dan tanin. Pada
,raktikum ,erlakuan ,raktikan sangat
mem,engarui asil. 9erutama ke/ersian
,raktikum ini arus dilakukan dengan
/enar /enar /ersi dilakukan dengan
se,tis. Suu o,timum digunakan untuk
mengo,timalkan ,erkem/angan /akteri
suu mem,engarui ,erkem/angan
/akteri. Selain itu ,erendaman paper disk
,ada ekstrak mem,engarui jumla
ekstrak yang tersera,. Berdasarkan teori
searusnya semakin /esar konsentrasi
maka semakin /esar ,ula 8ona am/at
6
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 7/12
yang ter/entuk. Aamun ,ada ,raktikum
yang kelom,ok $ lakukan ,erolean
diameter 8ona am/at +uku, /esar. 5al
terse/ut dikarenakan lama ,erendaman
paper disk ,ada ekstrak yang +uku, lama
seingga kemungkinan /esar jumla
ekstrak yang disera, le/i /anyak.
engan jumla konsentrasi ekstrak
yang kelom,ok $ gunakan yaitu se/anyak
# ml di,erole ulangan satu /erdiameter
20$< ulangan dua /erdiameter 1)$1
ulangan tiga /erdiametr >2%. 4aka
di,erole asil rata rata untuk ketiga
ulangan adala se/esar 1)%# mm.
Pengitungan diameter 8ona am/at ini
dilakukan dengan menggunaka jangka
sorong. i/anding dengan kelom,ok lain
kelom,ok $ diameter 8ona am/atnya ,aling le/ar. 5al terse/ut mungkin
dikarenakan adanya sala ,erlakuan ,ada
saat ,elaksanaan ,raktikum.
7nti/akteri atau antimikro/a
adala /aan yang da,at mem/unu atau
mengam/at aktivitas mikroorganisme
dengan /erma+am-ma+am +ara. Senya!a
antimikro/a terdiri atas /e/era,a
kelom,ok /erdasarkan mekanisme daya
kerjanya atau tujuan ,enggunaannya.
Baan antimikro/a da,at se+ara (isik atau
kimia dan /erdasarkan ,eruntukannya
da,at /eru,a desin(ektan antise,tik
sterili8er saniti8er dan se/againya.
7m,isilin da,at mengam/at kerja
en8im trans,e,tidase dengan +ara
mengikat en8im melalui ikatan kovalen
seingga men+ega ,em/entukan dinding
sel /akteri. Pada tingkat molekul
mekanisme kerjanya ditunjukkan ole
serangan nukleo(il dari gugus idroksil
serin en8im trans,e,tidase ,ada kar/onil
kar/on +in+in -laktam yang /ermuatan
,ositi( seingga terjadi am/atan
/iosintesis ,e,tidoglikan. 7ki/atnya
dinding sel menjadi lema dan karena
adanya tekanan turgor dari dalam dinding
sel akan ,e+a atau lisis seingga /akteri
mati.
4ekanisme daya kerja anti/akteri
terada, sel da,at di/edakan atas /e/era,a
kelom,ok se/agai /erikut' 1. 4erusak dinding sel 2. 4engganggu ,ermea/ilitas
sel $. 4erusak molekul ,rotein dan asam
nukleat ". 4engam/at aktivitas en8im #.
4engam/at sintesa asam nukleat
7ktivitas anti mikro/a yang da,at diamati
se+ara langsung adala
,erkem/ang/iakannya. ;le karena itu
mikro/a dise/ut mati jika tidak da,at
/erkem/ang /iak.
4etode ,elaksanaan ,raktikum
dilakukan dengan metode di(usi. 4etode
di(usi meru,akan sala satu metode yang
sering digunakan untuk menguji aktivitas
anti/akteri metode di(usi da,at dilakukan
melalui $ +ara yaitu metode silinder
7
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 8/12
lu/ang dan +akram kertas. 7da,un
meru,akan mekanisme sam,el dari ekstrak
metanol se/agai anti/akteri /aan /ua
ke/en adala se/agai /erikut'
a. 4ekanisme kerja sa,onin
Se/agai anti/akteri yaitu da,at
menye/a/kan ke/o+oran ,rotein dan
en8im dari dalam sel. Sa,onin da,at
menjadi anti /akteri karena 8at akti(
,ermukaannya miri, detergen aki/atnya
sa,onin akan menurunkan tegangan
,ermukaan dinding sel /akteri dan
merusak ,erme/ialitas mem/ran.
Rusaknya mem/ran sel ini sangat
mengganggu kelangsungan idu,
/akteri.11 Sa,onin /erdi(usi melalui
mem/ran luar dan dinding sel yang rentan
kemudian mengikat mem/ran sito,lasma
seingga mengganggu dan mengurangi
kesta/ilan mem/ran sel. 5al ini
menye/a/kan sito,lasma /o+or keluar dari
sel yang mengaki/atkan kematian sel.
7gen antimikro/a yang mengganggu
mem/ran sito,lasma /ersi(at /akterisida.
4ekanisme kerja anti/akteri tanin
mem,unyai daya anti/akteri dengan +ara
mem,re,itasi ,rotein. &(ek anti/akteri
tanin melalui reaksi dengan mem/ran sel
inaktivasi en8im dan inaktivasi (ungsi
materi genetik. 4ekanisme kerja tanin
se/agai anti/akteri adala mengam/at
en8im reverse transkri,tase dan A7
to,oisomerase seingga sel /akteri tidak
da,at ter/entuk. 9anin memiliki aktivitas
anti/akteri yang /eru/ungan dengan
kemam,uannya untuk menginakti(kan
adesin sel mikro/a menginakti(kan
en8im dan menggangu trans,ort ,rotein
,ada la,isan dalam sel. 9anin juga
mem,unyai target ,ada ,oli,e,tida
dinding sel seingga ,em/entukan dinding
sel menjadi kurang sem,urna. 5al ini
menye/a/kan sel /akteri menjadi lisis
karena tekanan osmotik mau,un (isik
seingga sel /akteri akan mati.
Kom,leksasi dari ion /esi dengan tanin
da,at menjelaskan toksisitas tanin.
4ikroorganisme yang tum/u di /a!a
kondisi aero/ik mem/utukan 8at /esi
untuk /er/agai (ungsi termasuk reduksi
dari ,rekursor ri/onukleotida A7. &n8im
reverse transkri,tase dan A7
to,oisomerase sel /akteri tidak da,at
ter/entuk ole ka,asitas ,engikat /esi
yang kuat ole tanin.
/. 4ekanisme anti/akteri senya!a
(enol
alam mem/unu mikroorganisme
yaitu dengan mendenaturasi ,rotein sel.
Ikatan idrogen yang ter/entuk antara
(enol dan ,rotein mengaki/atkan struktur
,rotein menjadi rusak. Ikatan idrogen
terse/ut akan mem,engarui ,ermea/ilitas
dinding sel dan mem/ran sito,lasma se/a/
keduanya tersusun atas ,rotein.
8
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 9/12
Permea/ilitas dinding sel dan mem/ran
sito,lasma yang terganggu da,at
menye/a/kan ketidakseim/angan
makromolekul dan ion dalam sel seingga
sel menjadi lisisSenya!a (enol akti(
se/agai anti/akteri dengan mekanisme
mem/entuk kom,leks dengan ,rotein sel
seingga mengam/at kerja en8im ,ada
sel /akteri. 7ki/atnya struktur dinding sel
akan mengalami denaturasi ,rotein.
iketaui ,ula /a!a ,ada umumnya
dinding sel /akteri ?ram ,ositi( dan ?ram
negati( se/agian /esar tersusun atas
,rotein ?uenter 1<)>. 4ekanisme
kerja tanin se/agai anti/akteri adala
mengam/at en8im reverse transkri,tase
dan A7 to,oisomerase seingga sel
/akteri tidak da,at ter/entuk Ro/inson
1<<#.
+. 4ekanisme Kerja 7nti/akteri
9annin
9anin se/agai anti/akteri dari
ekstrak metanol /ua ke/en em,unyai
daya anti/akteri dengan +ara mem,re,itasi
,rotein. &(ek anti/akteri tanin melalui
reaksi dengan mem/ran sel inaktivasi
en8im dan inaktivasi (ungsi materi genetik.
4ekanisme kerja tanin se/agai anti/akteri
adala mengam/at en8im reverse
transkri,tase dan A7 to,oisomerase
seingga sel /akteri tidak da,at
ter/entuk." 9anin memiliki aktivitas
anti/akteri yang /eru/ungan dengan
kemam,uannya untuk menginakti(kan
adesin sel mikro/a menginakti(kan
en8im dan menggangu trans,ort ,rotein
,ada la,isan dalam sel.2% 9anin juga
mem,unyai target ,ada ,oli,e,tida
dinding sel seingga ,em/entukan dinding
sel menjadi kurang sem,urna. 5al ini
menye/a/kan sel /akteri menjadi lisis
karena tekanan osmotik mau,un (isik
seingga sel /akteri akan mati.2>
Kom,leksasi dari ion /esi dengan tanin
da,at menjelaskan toksisitas tanin.
4ikroorganisme yang tum/u di /a!a
kondisi aero/ik mem/utukan 8at /esi
untuk /er/agai (ungsi termasuk reduksi
dari ,rekursor ri/onukleotida A7. &n8im
reverse transkri,tase dan A7
to,oisomerase sel /akteri tidak da,at
ter/entuk ole ka,asitas ,engikat /esi
yang kuat ole tanin.
Pada ,elaksanaan ,raktikum
dilakukan kontrol ,ositi( dan kontrol
negati(. Kontrol negati( yaitu dengan
menggunakan aHuades sedangkan kontrol
,ositi( dengan menggunakan am,isilin.
Kontrol ,ositi( /er(ungsi se/agai kontrol
dari 8at uji ekstrak metanol /ua ke/en
dengan mem/andingkan diameter daera
am/at 5 yang ter/entuk. Kontrol
negati( yang digunakan adala aHuadest
steril kontrol negati( /er(ungsi untuk
mengetaui ada tidaknya ,engaru ,elarut
terada, ,ertum/uan /akteri seingga
9
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 10/12
da,at diketaui /a!a yang mem,unyai
aktivitas anti/akteri adala 8at uji /ukan
,elarut.
alam ,elaksanaan ,raktikum
dilaksanakan ,engamatan setela
,enginokulasian 2" jam ,ada suu $>o =.
7ktivitas anti/akteri da,at diliat dengan
tim/ulnya 8ona am/at yaitu dengan
tim/ulnya 8ona am/at yaitu daera
/ening atau terang di sekitar paper disk
yang menunjukan ,ertum/uan /akteri
diam/at ole ekstrak. Selanjutnya diamati
dan diukur diameter 8ona am/at yang
ter/entuk disekeliling paper disk dengan
menggunakan jangka sorong. Pengujian ini
dilakukan untuk masing masing
konsentrasi ektrak dengan $ kali
,engulangan.
Parameter utama yang diamati
dalam ,enelitian ini adala diameter 8ona
am/at yang ter/entuk di sekeliling ,a,er
disk ,ada ,enentuan uji anti/akteri dengan
menggunakan metode di(usi dan
konsentrasi terenda dari ekstrak metanol
yang tidak menunjukan ,ertum/uan
/akteri. Pengukuran dilakukan dengan
menggunakan jangka sorong. Sedangkan
,arameter tam/aan adala ,engujian
kandungan ekstrak yang terda,at dalam
sam,el /iji Barringtonia assiatica%
Pada ,elaksanaan ,raktikum
,erlakuan ase,tik sangatla di,erlukan.
Perlakuan ase,tik sendiri meru,akan
,erlakuan yang /ertujuan ter/e/as dari
mikroorganisme. 7se,tik diim/angi
dengan sterilisasi yang meru,akan u,aya
untuk mengilangkan kontamina
mikroorganisme yang menem,el ,ada alat
atau /aan yang akan di,ergunakan untuk
analisa selanjutnya.
Berdasarkan asil ,raktikum yang
tela dilaksanakan aktivitas senya!a
anti/akteri di,engarui ole ,5 suu
sta/ilitas senya!a terse/ut jumla /akteri
yang ada lamanya inku/asi dan
aktivitas meta/olisme /akteri.
SIMPULAN DAN SARAN
4ekanisme kerja dari senya!a
anti/akteri diantaranya yaitumengam/at sintesis dinding sel
mengam/at keutuan ,ermea/ilitas
dinding sel /akteri mengam/at
kerjaen8im dan mengam/at sintesis asam
nukleat dan ,rotein. Perlakuan ,raktikan
saat melaksanakan ,raktikum sangatla
,erlu di,eratikan arus dilakukan
dengan teliti dan dengan /enar /enar
se,tis. 7ktivitas senya!a anti/akteri
di,engarui ole ,5 suu sta/ilitas
senya!a terse/ut jumla /akteri yang
ada lamanya inku/asi dan aktivitas
meta/olisme /akteri. 7dala 8at
anti/akteri yang memiliki aktivitas
mengam/at ,ertum/uan /akteri
10
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 11/12
7/21/2019 Uji Aktivitas Antibakteri
http://slidepdf.com/reader/full/uji-aktivitas-antibakteri-56da63d7cf12a 12/12
LAMPIRAN
Pemasukan paper disk pada cawanPengambilan
Sterilisasi L glassPengambilanPeng!m!genan
larutan
Perndaman paper
disk pada ekstrak
Pengambilan paper
disk "ang akan