Seconda Università degli Studi di NapoliFacoltà di Medicina e Chirurgia

VIII Chirurgia Generale e Fisiopatologia Gastroenterologica

(Direttore: Prof. Natale Di Martino)

Angelo Cosenza

CHIRURGIA GASTRICA

ASPETTI EMERGENTI:

IL RUOLO DELLA BIOLOGIA MOLECOLARE

(p21-p27-p53)

INTRODUZIONE

•Seconda causa di morte per tumore nel mondo

•Responsabile del maggior numero di decessi tra le neoplasie

dell’apparato digerente

•Rapporto M : F = 2 : 1

•Massima Incidenza: 40-70 aa

Levi et al. 2004;

Sano et al. 2004;

Hartgrink et al.2004.

TERAPIA CHIRURGICA - RISULTATI

INSODDISFACENTISopravvivenza a cinque anni 20-30%

Yamada et al. 1999;Siewert et al. 1997;Everett et al. 1997;

Wu et al. 1997;Adachi et al. 1997.

Diagnosi tardiva per tumori localmente avanzati (T > 2) nella maggioranza dei

pazienti

PROGNOSI INFAUSTA Sano et al. 2004;Hartgrink et al.2004;

Liu et al. 2001;Xiangming et al. 2000;

Kim et al. 2000;So et al. 2000;

Cadman et al. 1997.

CANCRO GASTRICO

Fattori prognostici indipendenti

(T) Invasione parietale (N) Interessamento

linfonodale Tipo istologico

Sopravvivenza a 5 aa

N-: 40%

N+: 10%

CANCRO GASTRICO

Sano et al. 2004;Hartgrink et al.2004.

Tahara et al. 2004;Liu et al. 2001;

Xiangming et al. 2000.

Infezione da H. Pylori CagA+

e Cancro gastrico

Shibata et al. 2002;Yamaoka et al.1997;

Blaser et al. 1995;Kuipers et al.1995.

Flogosi

Gastrite Atrofica

Atrofia

Metaplasia

Displasia

CANCRO

CANCRO GASTRICO

Danneggiamento del DNA

in particolare dei geni regolatori del ciclo cellulare Blaser et al. 1997

CANCRO GASTRICO

Regolata da oncosoppressori quali:

proteine p21, p27, p53

Harper et al. 1995

Progressione cellulare

Proteina p53 contrastata con ematossilina ed immunoperossidasi: Strutture ghiandolari neoplastiche carcinomatose positive alla p53. (Ingrandimento 100X)

Dettaglio di strutture ghiandolari neoplastiche carcinomatose positiva alla p53 (Ingrandimento 250X)

Contemporanea presenza di strutture ghiandolari carcinomatose marcate con p53 (a livello nucleare) [Freccia] ed a mutuo contatto, ghiandole normali negative alla p53 [Testa di freccia]. (Ingrandimento 250X)

Valutare le potenzialità delle proteine p21, p27 e p53 come marcatori

prognostici nei pazienti operati per cancro gastrico.

SCOPO DEL LAVORO

PAZIENTI E METODO

78 pazienti studiati(63M – 15F; Età 61.7±13.2anni – Range

31-82)Follow-up medio 27±20mesi

Determinazione immunoistochimica, su pezzo operatorio,delle proteine p21-p27-p53;

Determinazione sierologica pre-operatoria Ab anti p53.

Suddivisione in Stadi Precoci Avanzati

Ia-Ib II-IIIa-IIIb-IV

24pz (31%) 54pz (69%)

10; 13%14; 18%

8; 10%

35; 45%

3; 4%

8; 10%

Ia Ib I I I I I a I I Ib IV

PAZIENTI E METODO

53.5%

Sopravvivenza globale

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100Pz

Mesi

Perc

ent

surv

ival

PAZIENTI E METODO

Sopravvivenza per stadi

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100IaIbI II I I aI I I bIV

Mesi

Perc

ent

surv

ival

Test di Kaplan-Meier

Test di Mantel-Cox p<0.0001

0%0%

100% 100%

83.3%

29.3%

RISULTATISopravvivenza in base alle proteine p21-p27, in rapporto allo

stadio.

3; 5%8; 14%5; 9%

31; 56%

3; 5%

6; 11%

I a Ib I I I I I a I I I b IV

6; 34%

4; 22%

2; 11%

4; 22%

2; 11%

I a Ib I I I I IA IV

P21.27 -

Sopravvivenza p21- - p27-

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100IaIbIIIIIaIIIbIV

Mesi

Perc

ent

surv

ival

Sopravvivenza p21+- p27+

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100IaIbIIIIIaIV

Mesi

Perc

ent

surv

ival

56 pz (71.7%) 22 pz (28.3%)

0%0%

100%100%

75%

24.8%

100%100%100%100%

0%

P21.27 +

Test di Mantel-Cox p<0.0001 Test di Mantel-Cox p: n.s.

RISULTATI

Sopravvivenza globale in base alle proteine p21-p27

Sopravvivenza globale in rapporto

alle proteine p21- p27

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100

p21- p27+

p21- p27-

Mesi

Perc

ent

surv

ival

Test di Mantel-Cox

p21/p27– vs p21/p27+: p<0.001

Test di Kaplan-Meier

91%

40.3%

6; 10%6; 10%4; 7%

33; 55%

3; 5%

8; 13%

I a Ib I I I I I a I I I b IV

RISULTATI

4; 22%

8; 45% 4; 22%

2; 11%

I a Ib I I I I IA

p53+ p53-

Sopravvivenza in base alla proteina p53, in rapporto allo stadio.

60 pz (76.9%)

18 pz (23.1%)

Sopravvivenza p53+

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100IaIbI II I I aI I I bIV

Mesi

Perc

ent

surv

ival

Sopravvivenza p53-

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100IaIbIIIIIa

Mesi

Perc

ent

surv

ival

100%100%

0%0%

66.6%

29.4%

100%100%100%

50%

Test di Mantel-Cox p: n.s.Test di Mantel-Cox p<0.0001

RISULTATI

Sopravvivenza globale in base alla proteine p53

Test di Mantel-Cox

p53– vs p53+: p<0.001

Test di Kaplan-Meier

42.3%

94.1%

Sopravvivenza globale in rapporto

alla proteina p53

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100

p53+

p53-

Mesi

Perc

ent

surv

ival

RISULTATI

Sopravvivenza globale in rapporto alle possibili combinazioni p21-p27-p53

Ia Ib II IIIa IIIb IV

p21/p27+p53+ 4 (40.%) 2 (14.3%) 1 (12.5%) 4 (11.4%) 0 2 (25%) 13

p21/p27+p53- 3 (30%) 4 (28.6%) 2 (25%) 0 0 0 9

p21/p27-p53+ 2 (20%) 4 (28.6%) 3 (37.5%) 29 (82.8%) 3 (100%) 6 (75%) 47

p21/p27-p53- 1 (10%) 4 (28.6%) 2 (25%) 2 (5.7%) 0 0 9

10 14 8 35 3 8 78

Numero di pazienti (78) suddivisi per stadi in relazione all’associazione tra p21, p27 e p53

0 10 20 30 40 50 600

20

40

60

80

100

p21- p27+/ p53+

p21- p27+/ p53-

p21- p27- / p53+

p21- p27- / p53-

Mesi

Test di Mantel-Cox

p21-p27+/p53+ vs p21-p27+/p53-: n.s.

p21-p27+/p53+ vs p21-p27-/p53+: p<0.05

p21-p27+/p53+ vs p21-p27-/p53-: n.s.

p21-p27+/p53- vs p21-p27-/p53+: p<0.05

p21-p27+/p53- vs p21-p27-/p53-: n.s.

p21-p27-/p53+ vs p21-p27-/p53-: p<0.05

Test di Kaplan-Meier

100%88.9%

84.6%

32.2%

RISULTATI (studio in corso)

Ultimi 12 pazienti: dosaggio degli anticorpi anti p53 (p53 ab) su siero

Solo 2pz erano positivi agli anticorpi anti p53, ed erano in uno stadio IIIa e lo erano anche alla p53 a livello

tissutale

Ia Ib II IIIa IIIb IV

Ab anti p53

- - - 2 - 2

p53+ - - 2 4 - - 6

p53- - 4 2 - - - 6

• Nei pazienti con cancro gastrico esiste una netta prevalenza (77%) di iperespressione della proteina p53 mutata, mentre solo il 28% presenta una espressione delle proteine p21 e p27.

• Iperespressione della proteina p53 mutata, con negatività delle proteine p21 e p27, costituisce un riscontro piuttosto caratteristico degli stadi avanzati e si accompagna ad una bassa sopravvivenza: p21p27-/p53+ (32,2%) vs p21p27+/p53- (100%).

• I pazienti con p53-, presentano una sopravvivenza attuariale del 94.1%.

• La sopravvivenza dei pazienti in stadio precoce può essere influenzata negativamente dalla iperespressione della p53 e dalla negatività di p21/p27 (2 pz Stadio Ib deceduti ad 1 anno).

DISCUSSIONE

• Gli anticorpi anti P53, non possono ancora essere considerati di utilità diagnostica e/o prognostica.

• Tuttavia, come dimostrato da alcuni autori, alti livelli circolanti di p53ab, associati a positività immunoistochimica per la p53, sarebbero correlati a forme di tumore più invasive e a prognosi più severa.

DISCUSSIONE

Lo studio immunoistochimico delle proteine p21, p27, p53 può risultare di grande ausilio nella formulazione della prognosi dei pazienti operati per cancro gastrico, soprattutto se correlati con lo stadio della malattia.

Tale determinazione potrebbe essere usata, su biopsie, nella fase preoperatoria con l’obiettivo finale di poter modulare, sulle caratteristiche del paziente e della neoplasia, la terapia chirurgica e l’eventuale terapia adiuvante?!?

CONCLUSIONI