La diagnostica di laboratorio La diagnostica di laboratorio

nella patologia infettivanella patologia infettiva D.ssa Marina Musumeci

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Malattia Malattia infettivainfettiva

Ogni condizione morbosa che riconosce come causa necessaria della sua insorgenza l’azione di un’agente patogeno appartenente ad uno dei seguenti gruppi:

Virus Batteri Miceti Parassiti

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Infezioni sintomatiche

Infezioni asintomatiche

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DiagnDiagnosiosi

Definizione dell’eziologia e della patogenesi di un processo morboso.

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Ipotesi Ipotesi diagnosticadiagnostica

Utili per confermare o smentire l’ipotesi diagnostica.

Raccolta dei dati anamnestici e clinici con conseguente formulazione di un sospetto o di un orientamento diagnostico.

Indagini di Laboratorio o Indagini di Laboratorio o strumentalistrumentali

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Indagini con metodo Indagini con metodo diretto diretto

Esame microscopicoIsolamento in coltura ed

identificazioneBiologia molecolare

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Indagini con metodo Indagini con metodo indirettoindiretto

Indicatori di flogosi (Emocromo, Ves, PCR, Proteine specifiche)Anticorpi specifici

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AnticorAnticorpipi

Immunoglobuline leganti l’antigene: solubili o di membrana

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IGIGMM

Compaiono più tardivamente, raggiungono il picco 4-6 settimane dopo l’infezione e, spesso, persistono per tempi prolungati

IGIGGG

Normalmente sono transitorie e indicative di infezione acuta in atto.

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Qual’è il principio Qual’è il principio analitico?analitico?

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MetoMetodidi

Agglutinazione

(emoagglutinazione, sieroagglutinazione)RIAELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)CLIA IFI

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Malattia acuta o subacuta a prognosi favorevole

Segni clinici: febbre irregolare, angina, linfoadenopatia latero-cervicale

Agente eziologico: virus di Epstein-Barr Diffusione per via inalatoria o per contatto orale

da portatore sano a persona non infetta

MononucleosiMononucleosi

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Cellule del rinofaringe

Linfociti B Anticorpi eterofili

Attivazione dei linfociti T CD8

MononucleosiMononucleosi

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Periodo di incubazione: da 35 a 45 giorniSuperata la fase acuta, il virus continua ad

essere dismesso dalle cellule orofaringee.Riattivazione di malattia spesso in modo atipico

o asintomatico

MononucleMononucleosiosi

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Esami di Laboratorio

EmocromoAnticorpi eterofiliAnticorpi specifici diretti contro:

Antigeni del capside (VCA IgM e IgG) Antigene precoce (EA) Antigeni nucleari (EBNA IgG)

MononucleoMononucleosisi

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VCA IgM: compaiono precocemente e scompaiono entro 4-6 settimane

VCA IgG: raggiungono il picco a 2 settimane dall’inizio della malattia

EA IgG: sono presenti nella fase acuta, persistono per 3/6 mesi; possono permanere per molti anni; positivi nelle riattivazioni.

EBNA IgG: assenti nella fase acuta, si rilevano 2/4 mesi dopo l’inizio e permangono perennemente.

MononucleMononucleosiosi

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Infezione primaria acuta: VCA IgM, VCA IgG, EA IgGConvalescenza (o riattivazione): VCA IgM, VCA IgG, EBNA IgG, (EA IgG)Infezione pregressa: VCA IgG, EBNA IgG

MononucleoMononucleosisi

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ToxoplasmToxoplasmosiosi

Ciclo vitale: OocistiSporozoitiTachizoitiBradizoiti

Antropozoonosi ubiquitaria da Toxoplasma Gondii

L’infezione viene contratta mediante l’ingestione di carni crude o poco cotte e mediante l’ingestione di verdure crude

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In gravidanza:Il rischio di trasmissione aumenta con lo

sviluppo del circolo placentare.Il rischio di indurre gravi danni al feto è

maggiore se l’infezione congenita è contratta precocemente.

Infezioni congenite contratte durante il terzo trimestre di gravidanza sono generalmente asintomatiche.

ToxoplasmoToxoplasmosisi

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Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus

Famiglia hepesviridaeSpettro d’ospite ristrettoIn vivo ciclo replicativo lento, induce

inclusioni intranucleari, intracitoplasmatiche e latenza nelle cellule mononucleate del sangue e nei progenitori midollari

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Trasmissione: per contatto interumano. Nella popolazione adulta il contatto molto stretto e quotidiano con i bambini gioca un ruolo importante per la diffusione dell’infezione.

Fonti d’infezione: secrezioni oro-fringee, urina, latte materno, sperma, secrezioni vaginali, feci, sangue.

Eliminazione: con le urine protratta nel tempo.

Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus

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In gravidanza: Un’infezione primaria contratta nel primo

trimestre di gravidanza aumenta il rischio di prognosi feto-neonatale più grave.

Danni da infezione congenita: severe compromissioni cerebrali con difetti dello sviluppo psicomotorio e ipoacusia neurosensoriale.

Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus

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RosoliRosoliaa

Agente eziologico: RNA virus Il virus penetra nel tratto respiratorio dove

avviene la prima fase di replicazione cui fa seguito una seconda nei linfonodi cervicali.

Incubazione : da due a tre settimane La fase viremica dura per i sette giorni

precedenti la comparsa dell’esantema insieme con l’escrezione virale dal rinofaringe e persiste da sette a dodici giorni dopo il rash.

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Le IgM compaiono prestissimo, raggiungono il picco dopo 7-10 giorni persistono fino a 60 giorni dalla comparsa dell’esantema

Le IgG compaiono dopo 2-5 giorni dalla comparsa delle IgM e persistono indefinitamente conferendo l’immunità

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U.O.C. Patologia Clinica O.V.E. - FerrarottoDirettore Dr. F. Di VincenzoRosoliRosoli

aa

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In gravidanza: Se contratta entro le prime 16-18

settimane, l’infezione può determinare aborto o gravi alterazioni transitorie e/o permanenti definite come “Sindrome della Rosolia Congenita” (SRC)

RosoliaRosolia

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Quadri sierologici Quadri sierologici possibilipossibili

Assenza di immunità: IgG –/IgM -Immunità da infezione pregressa: IgG+

/IgM-Stato immunitario non definibile: IgG indeterminate e IgM negativeSe IgG -/IgM+: infezione in fase iniziale o

risultato falso positivo (da reazione crociata)

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IgG+/IgM+: effettuare una seconda determinazione utilizzando metodo analitico alternativo, ma con la medesima sensibilità.

Test di avidità

Quadri sierologici Quadri sierologici possibilipossibili

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Infezione da Infezione da HIVHIV

HIV: retrovirusCellule bersaglio: linfociti T CD4HIV1 e HIV2

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Infezione primariaFase di latenza clinicaFase clinicamente manifesta

Infezione da Infezione da HIV HIV

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Trasmissione:Per via sessualePer via ematicaPer via materno-fetale

Infezione da Infezione da HIVHIV

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Test di screeningIII generazioneIV generazione

Test di conferma: positivo indeterminato negativo

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Infezione da Infezione da HIVHIV

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Stadiazione e monitoraggio della risposta alla terapia:Linfociti T CD4 Carica virale (HIV RNA)

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Infezione da Infezione da HIVHIV

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EpatiteEpatite

Processo infiammatorio a carico del fegato istologicamente caratterizzato da necrosi parenchimale e infiltrazione flogistica.

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HAVHBVHCVHDVHEV

Epatiti viraliEpatiti virali

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Danno improvviso con aumento significativo delle transaminasi (dieci volte il limite superiore).

Epatite acutaEpatite acuta

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persistenza di ALT elevate per oltre sei mesi dopo l’episodio acuto;

Riscontro di ALT elevate in più di un’occasione per un periodo di oltre sei mesi.

Epatite cronicaEpatite cronica

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Si trasmette per via oro-fecale; ha un periodo di incubazione di 15-50 giorni; può dare epatite acuta, ma non cronica. IgM: indicano la fase acuta della malattiaIgG: persistono per tutta la vita e sono protettive.

Epatite virale da virus AEpatite virale da virus A

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Sospetto di infezione acuta: anamnesi positiva per trasmissione oro-fecale ALT >10x limite di valore superiore confermata da almeno due controlli

IgM anti-HAV

Epatite virale da virus AEpatite virale da virus A

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Si trasmette per via parenterale, sessuale, perinatale;

ha un periodo di incubazione compreso tra 45 e 160 giorni; dà infezioni in forma acuta e cronica; può evolvere in epatocarcinoma.

Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B

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HBsAg: primo marcatore a comparireHBeAg: indice di attiva replicazione viraleAnti-HBcIgM: presenti a titolo elevato nella

fase acutaAnti-HBcIgG: già presenti nella fase acuta,

persistono per tutta la vita.Anti-HBs: sieroconversione

Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B

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Sospetto di infezione acuta: anamnesi positiva per trasmissione parenterale e/o sessuale ALT >10x limite di valore superiore confermata da almeno due controlli

HBsAg IgM anti-HBc

Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B

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Quadro sierologico dell’epatite cronica:HBsAgAnti-HBcIgGAnti-HBe

Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B

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Immunità naturale: Anti-HBs e Anti-HBcIgG Immunità da vaccino: Anti-HBs

Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B

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Si trasmette per via parenterale, sessuale, perinatale, ha un periodo di incubazione di 14-180 giorni; può dare infezioni acute; può evolvere in cirrosi ed epatocarcinoma.

Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C

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Anticorpi anti HCV: rilevabili mediamente dopo circa tre mesi dall’infezione.

Risultato negativo: esclude con elevato grado di probabilità la malattia.

Risultato positivo: infezione in corso o pregressa.

Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C

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Test di conferma: se valore index/cut-off <8.0

HCV RNA

Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C

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