Title 腎細胞癌におけるE-カドヘリンの発現と病理組織学的特性

Author(s) 金, 鉄雄; 筧, 善行; 諸井, 誠司; 吉田, 修

Citation 泌尿器科紀要 (1995), 41(9): 653-657

Issue Date 1995-09

URL http://hdl.handle.net/2433/115579

Right

Type Departmental Bulletin Paper

Textversion publisher

Kyoto University

泌 尿紀 要41:653-657,1995 653

腎細胞 癌 におけ るE一 カ ドヘ リンの発現 と病理組 織学的特性

京都大学医学部泌尿器科学教室(主 任:吉 田 修教授)

金 鉄 雄*,筧 善 行,諸 井 誠 司,吉 田 修

E-CADHERIN EXPRESSION AND HISTOPATHOLOGICAL

FEATURES IN RENAL CELL CARCINOMAS

Tie-Xing Jin, Yoshiyuki Kakehi, Seiji Moroi and Osamu Yoshida

From the Department of Urology, Faculty of Medicine, Kyoto University

E-cadherin, a member of the cadherin family, plays a major role in cell-cell adhesion of nor-mal epithelium. Recent studies have demonstrated that heterogeneous expression, reduction or loss of E-cadherin is involved in invasion and metastasis of cancer cells. In this study, the localization of E,cadherin in the normal human kidney and the relationship between E-cadherin expression and histopathological features in renal cell carcinomas was examined immunohistochemically. Renal cell carcinoma tissues and normal kidney counterparts were obtained from 20 patients. E-cadherin

in the normal kidney was detected in the cell-cell border of the distal tubules, collecting duct and Bowman's capsule but not in the proximal tubules. E-cadherin expression was reduced in all the clear cell type renal cell carcinomas with compact or cystic configuration (n=15), while it was well

preserved in all the papillary type (n=3) and chromophobe cell type (n=1) renal cell carcinomas. Different expression patterns between primary site and metastasis, i.e., homogeneously weak in

primary tumor and heterogeneously positive in metastatis, was observed in a case of clear cell type renal cell carcinoma. Different patterns of expression between clear and non-clear cell type, or between papillary and non-papillary type, together with strong expression in chromophobe type might reflect the origin of each type of renal cell carcinoma. Further studies will clarify whether the change in expression of E-cadherin is associated with the prognosis of renal cell carcinoma.

(Acta Urol. Jpn. 41: 653-657, 1995)

Key words: E-cadherin, renal cell carcinoma, histopathological features

緒 言

カルシウム依存性 の細胞間接着因子 の一 つであ るE一

カ ドヘ リンは正常上皮細胞での細胞間接着 に重要な役

割 を果たすほか,個 体の発生 ・分化段階においても重

要 な役割を演 じていることが知 られてい るD.一 方,

癌化 の過程での発現 の減弱 ・消失 などの異常が癌細胞

の浸 潤 ・転移に関連す る可能性 が胃癌 ・食道癌 ・乳癌

・膀胱癌な どで報告 されている2-4).今 回,わ れわれ

は抗 ヒ トE一 カ ドヘ リン抗体を用 いて,正 常腎実質お

よび腎細胞癌に対す る免疫組織学的解析を行い,特 に

腎細胞癌の病理組織学的亜分類 とE一 カ ドヘ リンの発

現様式 との関連について興味あ る知見 をえたので報告

す る.

*現=中 国吉林省延辺医学院付属病院

対 象 お よ び 方 法

対 象 は1994年3月 か ら1995年1月 の間 に,京 都大 学

甕学 部 附 属病 院 また は 関連 施 設 に て 腎全 摘 除 術 ま た は

部分 切 除 術 を うけ た 腎 細 胞 癌20症 例 で あ る.男 子16

例,女 子4例 で年 齢 は20～90歳(平 均54.9歳)で,う

ち2症 例 はvonH三ppelLindau病 に 合併 した 腎細

胞 癌 で あ った.新 鮮 手 術 標本 をOCTcompound

(Milesscientific)に 包 埋 し一80℃ に 冷 却 したn一 ヘ

キ サ ン中 で 凍結 した.こ れ を3～4μmに 薄 切 し60分

間 風 乾 後,IO分 間 ア セ トン固 定 した 後,酵 素抗 体 法 に

よ り免疫 組 織 染 色 を行 った.一 次 抗 体 と して使 用 した

抗 ヒ トE一 カ ドヘ リ ソモ ノ ク ロー ナ ル 抗 体HECD-1

は,J・A・Schalken(Nijmegen大 学,オ ラ ソダ)よ

り供 与 さ れ た も の を用 い た.酵 素 抗体 法 はLSAB

法5)(DAKO社 製 キ ッ ト)に よ り行 い,洗 浄 液 は0.1

654 泌尿紀要41巻9号1995年

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Immunohistochemicalstaining

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3.Immunohistochemicalcadherininalymphtumorofclearcellcinoma.E-cadherinispositive(

stainingofE・

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typerenalce11(三ar一

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reducedfrom×200).

灘難画.,,撃'-s'亀rミ 曜 望

、1∴、ンぞ い}二 斗.く 章1Fig.2.ImmunohistochemicalstainingofE-

cadherin量naclearcelltype/compact

patternrenalcellcarcinoma.E-cadhe-

rin孟sweaklypositive五nthecytoplasmic

membraneoftumorcells(reduced

from×200).

TableI、RelationshipbetweenE℃adherinex-

pressionandce1夏typesorgrowth

patternsinrenalcellcarcまnomas

(primarysites)

灘iFig.4.ImmunohistochemicalstainingofE-

cadherininachromophi!ic(basophilic)

papillarytyperenalcarcinoma.E-cad-

herinexpressionispreserved(reduced

from×200).

Cdl電ypeGrowthtype Ptsno,

E-cadhcrinexpression

PreservedReduced

Clear

Chromophilic

Chromophobe

Compact

Acinar

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Pap皿 且ary

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Fig・5・ ImmunohistochemicaI

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renalcellcarcinoma。

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ofthetumorcells

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chromophobe

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stainingofE曹

celltype

E-cadherin玉s

ce11-ce.11border

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金,ほ か=腎 細 胞 癌 ・E一カ ドヘ リン

mMCaC12とO.05mMMgC12を 添 加 し たPBSを

使 用 し,ヘ マ トキ シ リソで核 染 色 した.当 初 は正 常 膀

胱 上 皮 組 織 お よびgrade1の 乳 頭 状移 行 上 皮 癌 組 織

を陽 性 コ ン トロー ル と した が,腎 の遠位 尿細 管 お よび

集合 管 が選 択 的 に 耳ECD-1と 反応 す る こ と を確 認

後 は,正 常 腎組 織 切 片 を 各 回 の実 験 の コ ソ トロ ール と

した.E一 カ ドヘ リ ソの 発 現 はShiozakiら の分 類2)に

従 い,染 色性 が一 様 で な い ものをheterogeneous,一

様 で あ るが 減 弱 して い る もの をweakandhomoge-

neous,ま った く染 ま らな い も のを10stと し,以 上3

型 を ま とめ てreducedと した,一 様 に 強 く染 ま る も

の はpreservedと 判 定 した.判 定 は2名 の 泌尿 器科

医(T.J.,Y.K.)が 独 立 して行 った.腎 細 胞 癌 の 組 織

学 的 細 胞 型(cytologicalfeatures)お よ び 構 築 型

(9rowthpattern)はThoenesら の分 類5)に 従 い,病

理 組 織 学 的 異 型 度,浸 潤増 殖 様 式,病 期(pT)分 類

は腎 癌 取 り扱 い規 約7)に 従 った.

655

Table2。RelationshipbetweenE・cadherinex-

pressionandhistolo9三calgrade,infi1-

trationpatterns(INF)andpathologicaI

T-stages五nrenalcellcarcinomas

Grade INF pT

結 果

123α β γ23

正 常 腎 組 織 に関 して は,腎 細 胞 癌 に対 して腎 摘 除術

が施 行 され た19例 か らえ た担 癌 腎 の正常 部 腎 組 織 の 凍

結 標 本 で のE一 カ ドヘ リンの発 現 を 検 索 した が,す べ

て のサ ン プル で遠 位 尿 細 管 お よび集 合 管 の 特 にcell-

cellborderで 強 く発 現が み ら れ た.Bowman嚢 に

関 して は発 現 のみ られ た標 本 と認 め られ なか った もの

が あ った.近 位 尿細 管 に関 して は 発 現 は認 め られ な か

った(Fig.1).腎 細 胞 癌 に 関 し て は20例21組 織 標 本

(原 発 巣20,リ ソパ 節転 移 巣1)で のE一 カ ドヘ リソの

発 現 を解 析 した 。発 現 の解 析 結果 の点 で2名 の判 定 結

果 は 完 全に 一 致 した.発 現 パ ター ソをThoenesら の

分 類 に よ る細 胞 型 ・構 築型 別 にみ る とclearcelltype

で はE一 カ ドヘ リンの 発 現 が 構築 型 にか か わ らずweak

andhomogeneousな ものが 多 く(Fig・2に 典 型 例

を示 す),15例 す べ て がreducedに 分 類 され た(Ta-

ble1).興 味 深 い 所見 と して,clearcelltypeの 腎細

胞癌 の1例 で,原 発 巣 は10stで あ った の に対 して,リ

ソパ節 転 移 巣 で は一 部 でheterogeneousに 強 く発 現

す る細 胞群 が 散 見 さ れ た(Fig.3).chromophilic

typeは4例 が解 析 しえ た が3例 でpreserved,1例

はreducedで あ ったapreservedで あ った3例 は す

べ てpapillarytypeで あ った ・Fig・4にchromo-

philictypeでpapillarytypeの 腎 細 胞癌 で のE一 カ

ドヘ リソ染 色 を 示 す.細 胞 膜 だ け で な く細 胞 質 も染 色

され て い る よ うに み え る.chromophobetypeに 関

して は1例 が 解 析 しえ た が,細 胞 膜 が きわ め て 明瞭 に

染 色 され た(Fig.5).病 理 組 織 学 的 異 型 度 ・浸 潤 増 殖

E-cadherinexpression

Preserved24042051

Reduoed310185195

様式 ・pT分 類 とE一 カ ドヘ リソの 発 現 との 関 係 を

Table2に 示 す.高 悪性度腫瘍 の症例数が少ないた

め有意 な相関は認め られないが,gradelやINFα

で もreducedの 症例 がそれぞれ60%お よび67%と

高率であ った.

考 察

細胞間接着因子 としてのカ ドヘ リソファ ミリーには

E型,P型,N型 な ど10種類以上のサ プクラスが報告

されている。 カ ドヘ リンの細 胞内 ドメインはカテニン

に よ り裏 打ちされ,さ らに ビソキ ュリソ,α ア クチ ニ

ンを介 してア クチ ソに結合 し強固な細胞接着 を行 って

い ると考 えられている8).E型(上 皮型)カ ドヘ リソ

は正常上皮細胞での細胞間接着 に重要な役割 を果たす

ほか,個 体 の発生 ・分化段階において も重 要な役割を

演 じているが,多 くの癌細胞において も細 胞間接着に

強 く機能 してい るようであ る.食 道癌,胃 癌,乳 癌な

どにおいてE一 カ ドヘ リソの発現 の減弱ない し消失 と

転移 との関連が報告 されている2・3).われ われは 尿路

上皮癌 におけ るE一 カ ドヘ リソの発現を解析 し,high

grade・highstage症 例で高率に発現の減 弱や異常を

認 めてい る9).

さて,腎 でのE一 カ ドヘ リソ の 局在 に 関 して は,

Nouwenら!o)はL-CAM(E一 カ ドヘ リンの 別称),

A-CAMな どの胎児腎お よび成人腎 で の発現を解析

し,LCAM(E一 カ ドヘ リソ)は1!rr児腎では集合管,

S-shapedbodyの 上行脚お よび発育中の遠位尿細 管

に 局在 し,成 熟 腎 で は 集合管,遠 位尿細管 の ほ か

Bowman嚢 に局在を認 めたのに対 し,A-CAMは 近

位 尿細管に限局 していた ど報告 している.今 回のわれ

われ の解析で も成人の腎では集合管お よび遠位尿細 管

で選択的にE一 カ ドヘ リソの発現を認 めた.Bowman

嚢に関 して は全例で はな か ったがや は り発現を認 め

た.

近年,Thoenesら の分類 に よる腎細胞癌の各亜型

が発生母地の違 いを よく反映す ることが免疫組織化学

的 ・細胞遺伝学的に証 明されつつあるため11),本 研究

656 泌尿示己要41巻9号1995年

では細 胞 型 と構 築 型 に関 しこ の分類 法 に従 い 腎細 胞 癌

でのE一 カ ドヘ リソの発 現 を 解 析 した.近 位 尿細 管細

胞 由 来 と考 え られ るclearcelltypeの 腎 細 胞 癌 で は

E一 カ ドヘ リンの発 現 は,構 築 型 に か かわ らず 全 例re-

ducedで あ った のは発 生 母 細 胞 で発 現 が 見 られ ない

こ と と よ く一 致 す る と思わ れ る.同 様 に 近 位 尿細 管細

胞 由 来 と さ れ る.chromophilictypeに 関 して は

compacttypeとpapillarytypeで 対照 的 な結 果 で

あ った ・papillarytypeとnon-papillarytypeで は

染 色 体 異 常 の パ タ ー ソが ま った く違 い,発 生 に 関与 す

る癌 抑 制遺 伝 子 が 異 な る こ と が 指 摘 され て い る12)

papillarytypeで のE一 カ ドヘ リソ の 強 い発 現 との 関

連 に つ い て は予 後 との 関連 を含 め 興味 深 い今 後 の検 討

課 題 と思 わ れ る.1例 で は あ った が,chromoPhobe

typeの 腎 細 胞癌 で細 胞 膜 に 局 在 し た 強 いE一 カ ドヘ

リンの発 現 を 認 め た こ とは このtypeが 皮 質集 合 管 由

来 で あ る との 説11)を 支持 す る所 見 で あ った.悪 性 度 と

E一カ ドヘ リンの発 現 との関 係 に つ い ては ,今 回 の解 析

対 象 の 過 半 数 がclearcclltypeの 腎細 胞 癌 で あ った

た め,10wgradeやIFN一 α の 浸潤 様 式 で も 高 率 に

発 現 の減 弱 を認 め る結 果 とな り有 意 な 相 関 は 認 め な か

った,し か し,過 半 数 の腎細 胞癌 でE一 カ ドヘ リンの

発現 が減 弱 して い る事 実 は,腎 細 胞 癌 の易 転 移 性 とい

う生 物 学 的特 性 を考 え る 上 で 興 味 深 い と 思 わ れ る.

E一カ ドヘ リソの発 現 と転 移 の 形成 と の 関 係 は複 雑 で

動的 な もの と考 え ら れ る.E一 カ ドヘ リンは 原発 巣 か

らの離 脱 に は発 現 の減 弱や 細 胞 接着 装置 全 体 の機 能 低

下 ない し異 常 が必 要 と考 え られ て い る が,転 移 巣 の形

成 過 程 で は逆 に発 現 の 回 復 な い し 上 昇 が 必 要 とされ

る13).こ の点 でclearce11typeの 腎細 胞 癌 リンパ節

転 移 巣 で み られ た不 均一 な発 現 は興 味 あ る所 見 で あ っ

た.

最 近,Xiangら14)は ラ ッ ト腎 細胞 癌cDNAラ イ

ブ ラ リー か ら新 しい タ イ プの 細 胞 間接 着 分 子K一 カ ド

ヘ リンを ク ロー ニ ン グ した .彼 らは ノザ ン プ ロ ッ ト解

析 を行 い,K一 カ ドヘ リン は,胎 児 ラ ッ トで は 腎 と脳

で 発現 がみ られ たが 生 体 で は発 現を ほ とん ど認 め な か

った・ 一 方,ヒ トのclearcellalveolartypeの 腎細

胞 癌 とWilms腫 瘍 で 高 い発 現 を 認 め た と 報 告 して

い る,今 後,腎 細 胞 癌 の各 組織 学 的 亜 型 で のE一 カ ド

ヘ リ ン,K一 カ ドヘ リンの発 現 パ タ ー ン の 差 異 や,浸

潤 ・転 移 形成 過 程 で の カ ドヘ リンと カテ ニ ン分 子 の発

現異 常 の相互 関 係 の解 明 が 明 らか に な る と思 わ れ る,

結 語

ヒ ト腎お よび腎細胞癌組織 におけ るE一 カ ドヘ リン

の発現 を免疫組織学的に解析 した.腎 細胞癌の組織学

的亜型による発現の差違 はその発生母細胞での発現 の

有無に よることが示 唆 され た.

最後に本研究に対しご助言を頂きました,京 都大学医学部

附属病院中央検査部山過博彦先生に深謝いたします.

文 献

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