terapia genetica

Universidad de Guayaquil .Cátedra de Biologia Molecular .

Tema : TERAPIA GENETICA

ANTICUERPOS MONOCLONALESDrs. Jonathan Ortega Jorge Barrezueta Lorena

Sandoya , Norma Castro , Daiana Galan .Medicina Interna .

TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

Este científico argentino fue Premio Nobel de Fisiología y Medicina, nació el 8 de octubre de 1927 en la ciudad de Bahía Blanca (Argentina), donde permaneció hasta 1945, cuando se trasladó a la ciudad capital para estudiar en la Universidad de Buenos Aires.

Estando en Cambridge (INLATERRA) a los 36 años, formó parte del Laboratorio de Biología Molecular y trabajó en el estudio de las inmunoglobulinas.


Junto a G. Kölher desarrolló una técnica para crear anticuerpos con idéntica estructura química, que denominó anticuerpos monoclonales


Los anticuerpos o inmunoglobulinas (Ig) son un tipo de proteínas denominadas glicoproteínas.Funcionan como la parte específica del denominado complejo receptor de células B (BCR) reconociendo al antígeno a nivel de la membranadel linfocito B, y como moléculas circulantes secretadas por las células plasmáticas procedentes de la activación, proliferación y diferenciación de células B.


1. Región Fab2. Región Fc3. Cadena pesada con un dominio variable (VH) seguido por un dominio constante (CH1), una región bisagra, y dos más constantes, los dominios (CH2 y CH3).4. Cadena ligera con un dominio variable (VL) y uno constante (CL)5. Lugar de unión al antígeno (PARATOPO)6. Regiones bisagra.


IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIÓN GALARDONADA:

El sistema inmunitario es extraordinariamente complejo y preciso en su defensa del organismo.

Los anticuerpos monoclonales son sustancias idénticas, producidas por el cruce de un linfocito B y una célula tumoral.

Este cruce se denomina HIBRIDOMA y genera indefinidamente anticuerpos, los cuales son de GRAN TRASCENDENCIA EN LA TERAPÉUTICA.

PRINCIPALES TECNOLOGÍAS DE PRODUCCIÓN Y MEJORA DE ANTICUERPOSMONOCLONALES.


El MEDIO SELECTIVO HAT CONTIENE:AMINOPTERINA COMO INHIBIDOR DE LA SÍNTESIS DE NOVO PURINAS

Hipoxantina y timidina para enriquecer el cultivo.

(solo las células del hibridoma pueden usar HG PRT producir purinas a partir de Hipoxantina y timidina) .

En presencia de aminopterina SÓLO PODRÁN SOBREVIVIR AQUELLAS CÉLULAS QUE EXPRESAN HG PRT((hipoxantil-guanil-fosforribosil-transferasa).

COMO LOS HIBRIDOMAS; las células de mieloma morirán (son HG PRT -) y las células plasmáticas de bazo no se desarrollan en cultivo (no son inmortales)


1) Inmunización de ratones con Ag soluble disuelto en adyuvante incompleto de Freund por vía intraperitoneal o intramuscular, administrando finalmente una dosis de recuerdo de Ag no emulsionado por vía intravenosa, 3 días antes de la fusión.

2) Fusión: se realiza 3 días después de la dosis de recuerdo del Ag, momento de máxima presencia de blastos en el bazo. Como agente fusionante se usa el polietilenglicol (PEG).

3) Selección de los híbridos linfocito-mieloma en medio HAT.


4) Cultivo de hibridomas en un medio que favorezca la división celular y la producción y secreción de Ac (RPMI 1640). El cultivo se realiza en placa de 96 pocillos a 37ºC, en estufa con un 5% de CO2.

5) Monitorización de la producción de Ac: la detección de Ac específicos en el medio de cultivo donde crecen los hibridomas es el punto más importante. Las técnicas deben ser de alta sensibilidad, capaces de detectar mgr/ml y rápidas para descartar cultivos inútiles. EL MÉTODO MÁS UTILIZADO ES EL ELISA.

6) Clonado: los cultivos que dan reacción positiva específica deben ser clonados lo más rápidamente posible para lograr el establecimiento de clones productores de Ac. El método más utilizado es la dilución en medio líquido o método de la dilución límite. Consiste en realizar diluciones de la población original para obtener cultivos que contengan una sola célula capaz de originar el clon correspondiente.


7) Producción de Ac monoclonales en grandes cantidades. Se puede realizar:

· “In vivo”: se inocula intraperitonealmente en ratones histocompatibles con la línea celular y se obtiene el líquido ascítico del animal , en el que se pueden obtener concentraciones de Ac de mgr/ml.· “In vitro”: realizar cultivos celulares de los híbridos a gran escala, obteniéndose concentraciones de mgr/ml en los sobrenadantes.


TIPOS DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

ANTICUERPOS MURINOS: El 100% del anticuerpo procede del ratón. Por este motivo las aplicaciones terapéuticas de estos anticuerpos se han visto limitadas.El sistema inmune humano reconoce estos anticuerpos como extraños y genera sus propios anticuerpos frente a ellos.


sufijo "-momab"

ANTICUERPOS QUIMÉRICOS:

En este tipo de anticuerpos las regiones variables proceden de ratón y las regiones constantes son humanas. Están construidos gracias a técnicas de ingeniería genética. Con esta estrategia se consiguió reducir larespuesta inmune que se producía frente a los anticuerpos murinos.


RATÓN-HUMANO CON EL SUFIJO "-XIMAB"

ANTICUERPOS HUMANIZADOS: En estos anticuerpos solamente las regiones CDR de las partes variables de los anticuerpos proceden de ratón siendo el resto del anticuerpo de origen humano.


HUMANIZADOS, CON EL SUFIJO "-ZUMAB"

Anticuerpos humanos: Estos anticuerpos son en su totalidad de origen humano, reduciendo así el riesgo de producir una respuesta inmune.


HUMANOS "-MUMAB"

Hasta el desarrollo de los anticuerpos monoclonales en el año 1975, el uso de los anticuerpos en diagnóstico y/o TERAPIA se centraba únicamente en la utilización de sueros inmunes convencionales.

Una mezcla de anticuerpos producidos por ,DISTINTOS CLONES DE LINFOCITOS B, por lo que se , denominaba anticuerpos policlonales , reconocen en mayor o menor medida el antígeno pero con distinta especificidad y afinidad cada uno de ellos.


TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOSMONOCLONALES.

EL RITUXIMAB SE UNE ESPECÍFICAMENTE AL ANTÍGENO CD20, UNA FOSFOPROTEÍNA TRANSMEMBRANARIA NO GLUCOSILADA QUE SE EXPRESA EN LOS LINFOCITOS PRE-B Y B MADUROS. ESTE ANTÍGENO SE EXPRESA EN MÁS DEL 95 % DE LOS LINFOMAS NO-HODGKINS (LNH) DE LINFOCITOS B.

TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOSMONOCLONALES.

El cetuximab se une al antígeno llamado EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico) y lo bloquea. Como consecuencia la célula tumoral no recibe los mensajes bioquímicos que estimulan su propagación y el crecimiento del tumor se enlentece.

TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS MONOCLONALES.

TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS MONOCLONALES.

Se utiliza para el tratamiento del cáncer de colon y otros tipos de canceres de células escamosas que afectan a la cabeza y el cuello, como algunos tumores de la boca o la laringe.

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS

INHIBIDORES DE LA GLUPROTEINA I IB / I I IA ABCIX IMAB

Impide la unión del fibrinógeno y de otros factores en el endotelio.

EJEMPLO CLINICO : INHIBIDORES DE LA GLUPROTEINA IIB/IIIA ABCIXIMAB

USOS CLINICOS DE IGPIIB/IIIA

Abciximab.• Se ha demostrado eficacia en pacientes con: • Síndrome coronario agudo (SCA) sin elevación

del segmento ST de alto riesgo manejados con ICP precoz.

• SCA con elevación del segmento ST (SCACEST) manejados con angioplastia primaria.

• Efecto adverso Hemorragias, sobre todo de tipo mucocutáneoo en el lugar de la punción arterial del cateterismo.

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .- OMALIZUMAB

La inmunoglobulina E (IgE) fue descubierta en 1967 y reconocida como un mediador fundamental

en la alergia.

El omalizumab es un anticuerpo monoclonal humanizado que

reconoce a la IgE como molécula diana uniéndose a su fracción

constante (Fc). Por su acción es capaz de limitar

el desencadenamiento de la respuesta alérgica mediada por

los anticuerpos IgE.

• ASMA GRAVE• POLIPOSIS NASAL• ENFERMEDADES DE LA VÍA

AÉREA ASOCIADAS A ASPERGILLUS FUMIGATUS

• URTICARIAS CRÓNICAS

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .- OMALIZUMAB

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .- ECULIZUMAB

La hemoglobinuria paroxística nocturna es una enfermedad clonal adquirida caracterizada por hemólisis mediada por complemento, insuficiencia medular y enfermedad tromboembólica.

El eculizumab es un anticuerpo monoclonal dirigido contra la fracción C5 del complemento, que bloquea la formación del componente citolítico de este.

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .- ECULIZUMAB

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS INFLIXIMAB

Infliximab se une y neutraliza el factor de necrosis tumoral de tipo alfa (TNFa ), llegando a interrumpir la cascada secuencial de activación de las vias inflamatorias intervenidas por esta citoquina

Por lo tanto, disminuye el efecto del factor de necrosis tumoral , que es una citocina que producen diversas células de nuestro cuerpo y que aumenta los síntomas inflamatorios.

ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS INFLIXIMAB

terapia genetica

Documents