Specifická imunita humorální

M.Průcha

B lymfocyt

• Buněčný substrát specifické humorální imunity

• Antigenní stimulace B lymfocytu vede v součinnosti se signály Th2 T lymfocytů k jeich klonální expanzi a terminální diferenciaci do stadia plasmatické buňky

• Plasmatická buňka je pak zdrojem protilátek, kterí mají stejnou specifictu jako receptor BcR původního B lymfocytu

B lymfocyt

• Vývoj B lymfocytu je mnohastupňový proces regulovaný cytokiny a interakcemi s buňkami kostního stromatu

• Celý proces aktivace vrcholí aktivací transkripčních faktorů, která regulují přepis významných genů

• V negativním případě- diferenciační krok je neúspěšný, tak B ly je usmrcen apoptózou

B lymfocyt

• Kooperace s T lymfocyty• Prostřednictvím protilátek ovlivňují

regulační a efektorové mechanismy přirozené imunity

• Zralé B ly jsou v sekundárních lymfatických orgánech – lamina propria sliznic, lymfatické uzliny a slezina

• Periferní krev – 10-20% lymfoidních buněk

Receptor pro antigen

• 1011 různých specifit protilátek• Vznik řetězů BcR a následně solubilních molekul

protilátek je obdobná procesu na T lymfocytech• Přeskupení genových segmentů pomocí

enzymatického aparátu• Somatická hypermutace – úprava vazebných míst

pro antigen po expozici B ly antigennímu podnětu• Izotypové přepnutí – zajištění produkce protilátek

různých izotypů se stejnou variabilní oblastí, která váže antigen

BcR a přenos signálu s následnou proliferací a diferenciací

Imunoglobuliny - protilátky

• Solubilní forma receptorů pro antigen na B lymfocytech (BcR)

• Jsou produkovány plasmatickou buňkou tj. terminální stadium diferencovaného B lymfocytu

• Po stránce funkční regulují funkce přirozené imunity

Protilátky - imunoglobuliny

• B ly Fabriciova bursa• U lidí – fetální játra, kostní dřeň, slezina• Receptor pro antigen – BcR• Po dělení vznikají klony plasmatických buněk

s produkcí protilátek proti danému antigenu• Diferenciace B ly v kostní dřeni, antigenní

stimulace v sekundárních orgánech a a konečné stadium diferenciace B lymfocytů – plasmatické buňky produkují protilátky opět v kostní dřeni

Imunoglobuliny – membránově vázané a solubilní

receptory

Imunoglobuliny

• Tiselius a Kabat 1939• Imunizovali králíky ovlabuminem a poté

pomocí elektroforezy identifikovali Ig• První – albumin, alfa, beta a gama globuliny

Základní struktura imunoglobulinů

Fig. 2.2

2 lehké řetězce-lambda ()-kappa (κ)

2 těžké řetězce

Základní struktura imunoglobulinů

Fig. 2.2Fig. 2.2

Fyzikální vlastnosti imunoglobulinů

IgM

• Membránově vázaný monomer a sekretovaný pentamer.

• První třída protilátek syntetizovaná během ontogeneze a při imunitní odpovědi

• Aktivace komplementu; aglutinace.• Může být transportována na slizniční

povrch

IgG

• Nejvyšší koncentrace v séru• 4 podtřídy: IgG1 - 4• Aktivace komplementu• Binds to Fc -receptors on neutrophils,

macrophages and NK cells

IgA

• Obvykle dimer• Sekreční IgA je dimer se sekreční

komponentou• 2 podtřídy: IgA1 and IgA2• Nejčastější imunoglobulin ve slizničních

sekretech • Neutralizace; Zabraňuje vazbě

mikroorganismů na receptory• Není efektivní v aktivaci komplementu

IgD

• Velmi nízká koncentrace v séru• Primárně nalézána spolu s IgM na naivních B

buňkách • Neznámá funkce

Funkce imunoglobulinů

Funkce imunuglobulinů

Vyšetření počtu B lymfocytů

• Průtoková cytometrie, předtím KO a diff.

• CD19

• Brutonova agamaglobulinémie x CVID

• CLL

Funkční testy B lymfocytů

• Nepřímé stanovení – sleduje se produkce protilátek proti proteinovýcm nebo polysacharidovým antigenům

• Protilátky proti tetanu a proti pneumokokům• Test stimulace mitogenem – PWM• Koncentrace Ig v supernatantu kultury

stimulovaných lymfocytů

Protilátky – klinické aplikace

• Protilátky – základní parametr humorální imunity

• Problematika infekčních chorob, autoimunitních onemocnění, imunopatologické stavy

• Stanovení kvalitativní a kvantitativní• Sledování dynamiky

Protilátky – metody stanovení

• Nefelometrie, turbidimetrie• RID – IgD• Aglutinace• ELISA• NIF• WB• Specif. IgE protilátky – RAST – Radio Allergo

Sorbent Test, chemiluminiscence – AlaSTAT a IMMUNLITE 2000

Protilátky – indikace vyšetření

• Imunopatologické stavy – prim. A sek. ID• Dynamika protilátek – infekční serologie, ale

také u imunopatol.stavů• Hyper IgD sy – hereditární periodická

horečka• Alergická onemocnění – specif. IgE,

odpovědˇ na léčbu• Autoimunitní onemocnění – jednak kvalita –

specificita protilátek, jednak dynamika