4.Pemeriksaan GlukosaMetode GOD-PADPrinsip MetodeGlukosa ditentukan setelah oksidasi enzimatik dengan adanya oksidasi glukosa. Hidrogen peroksida yang terbentuk bereaksi dalam katalisis peroksidase dengan fenol dan 4-aminophenazone warna merah-violet quinoneimine sebagai indikator.Prinsip ReaksiGlukosa + + O Glukonic acid + 2 + 4-aminophhenazone + phenol quinoneimine + 4

RGTenzimatik reagentBuffer posfat (pH 7.5)100 mmol/I4-Aminophenazone 0,25mmol/IFenol 0,75mmol/IOksidase glukosa .15 KU/IPeroksida .15 KU/IMutarotase .2.0 KU/INatrium azide 0.095 StabilizersSTD standarGlukosa100 mg/IPersiapan ReagenRGT dan STD siap untuk digunakan Stabilitas Reagen Reagen tetap stabil setelah dibuka sampai dengan tanggal kadaluarsa. Bila disimpan pada suhu 2-8. Hindari kontaminasi. Pada suhu 15..25 rgt stabil selama 2 minggu Spesimen Serum, Plasma .Glukosa stabil selama 24 jam pada suhu 2-8 . Pada serum atau plasma dalam waktu 30 menit. Setelah diperiksa.PemeriksaanPanjang gelombang: Hg 546 nmCeelah optik:1 cmSuhu: 2025 atau 37Pengukuran: terhadap blanko reagen hanya satu blanko reagen digunakan untuk satu kali seri pemeriksaan.

Skema pemipetanPipet kedalam tabungMakroReagen blankoStandarSampel

serum--20 ml

STD-20 ml-

RGT2000 ml2000 ml2000 ml

MikroReagen blankoStandarSampel

serum--10 ml

STD-10 ml-

RGT1000 ml1000 ml1000 ml

Campur, inkubasi selama 10 menit, pada suhu 20-25 atau 5 menit pada suhu 37Absorben standar dan sampel terhadap blanko reagen dalam waktu 60 menit.PerhitunganC = X C. St (100 mg/dl)C = X C. St (5,55 mmol/L)LinearitasTes linear glukosa pada konsentrasi glukosa 400mg / dl atau 22,2 mmol / I. encerkan sampel 1 + 2 dengan aquadest. konsentrasi sample diatas batas limit kalikan dengan 3.

Nilai NormalSerum, plasma : 75-115 mg/dl atau 4.2 6.4

5.PEMERIKSAAN UREA

Metode Enzymatic kolorimetri dengan modifikasi berthelot

Prinsip Urea dihidrolisis dengan adanya air dan urease untuk menghasilkan amonia dan karbon dioksida. Dengan modifikasi Berthelot ion amonium direaksikan dengan hipoklorit dan salisilat untuk yang berwarna hijau. Peningkatan absorbansi pada panjang gelombang 546 nm atau 578 nm sebanding dengan kadar urea dalam sampel.

Komposisi ReagenRGT1 Reagen 1Fosfat buffer (pH 7.0)120 mmol/lNatrium salisilat 60 mmol/lNatrium nitroprusside 5 mmol/lEDTA 1 mmol/l

RGT2 Reagen 2Fosfat buffer (pH < 13)120 mmol/lHipoklorit0.6 g/l clIritasi mata dan kulit. jauhkan dari jangkauan anak-anak. setelah kontak dengan mata, bilas dengan air dan berkonsultasi dengan dokter.ENZ EnzymUrease> 500 KU/l

STDStandarUrea80 mg/dl atau 13.3 mmol/lSetara dengan BUN 37.28 mg/dl atau 6.2 mmol/dlNatrium azida 0.095 %

Persiapan ReagenRGT2 dan STD siap pakai.Enzim reagen 1a campuran dari isi botol ENZ dengan botol RGT1:Contoh:1 ml ENZ+ 100 ml RGT1 atau 1000 l ENZ+100.000 l RGT1100 l ENZ+10.000 l RGT1 10 l ENZ+1000 l RGT1

Stabilitas ReagenReagen stabil sampai pada masa expayer dengan penyimpan pada suhu 2...8oC.RGT1, RGT2, dan ENZ stabil setelah dibuka selama 6 minggu pada 2...8oC atau 2 minggu di 15...25oC.STD stabil sampai pada masa expayer.Enzim reagen 1a stabil setelah dibuka selama 4 minggu pada suhu 2...8oC atau 2 minggu di 15...25oC.Hindari kontaminasi setelah dibuka.

SpesimenSerum, plasma, plasma heparin, dan urin. Urin encer 1 + 100 dengan aqua bidest..Jangan menggunakan serum lipemic.Serum atau plasma dapat disimpan sampai 3 hari pada suhu 4oC, untuk waktu yang lama mereka harus terus dibekukan pada suhu -20oC.

Pemeriksaan Panjang gelombang:Hg 578 nm, Celah optic:1 cmSuhu:20-25oC atau 37 oCPengukuran: Terhadap blanko reagen. Hanya menggunakan satu blanko reagen untuk satu seri pemeriksaan.

Skema PemipetanPipet ke dalam tabung reaksiBlankoStandarSampel

Serum------10 l

Standar ---10 l---

Enzim reagen 1a1000 l1000 l1000 l

Campur dan inkubasi selama 5 menit. pada 20-250C atau selama 3 menit pada 370C

RGT21000 l1000 l1000 l

Campur, inkubasi selama 10 menit. pada 20-250C atau 5 menit. di 370C. Mengukur absorbansi sampel dan STD terhadap reagen blanko dalam waktu 60 menit.

Perhitungan Urea Dan Konsentrasi BUNC = Faktor Konversi Untuk BUN, UreaC (BUN) = 0.466 C (urea)C (Urea) = 2.14 C (BUN)

Karakteristik KinerjaLinearitasserum/plasma:sampai 400 mg/dl atau 6.66 mmol/l (urea)Urin :sampai 400 g/l atau 6600 mmol/l (urea)Sampel dengan pengenceran tertinggi harus diencerkan 1 + 1 dengan aqua bidest. Hasil kalikan dengan 2.

Nilai NormalSerum (urea):10 50 mg/dl atau 1.7 8.3 mmol/lUrin (urea):20 35 g/latau333 583 mmol/24 h

7.PEMERIKSAAN ASAM URATMetode PAPTes enzim koorimetri asam urat dengan factor pembersih lemakPrinsip MetodePenentuan asam urat oleh reaksi dari uricase bereaksi dengan H2O2 bereaksi di bawah katalis peroksidase dengan 3,5 dikloro 2 hidroxy benzene-sulfat (DCHBS) dan 4 aminopherazone (PAP) untuk memberikan warnah merah-pink dengan pewarna quinoneimine sebagai indikator.Prinsip ReaksiAsam urat + O2 + 2 H2O uricase allantion + CO2 + H2O2

2 H2O2 + DCHBS + PAP peroksidase quinoneimine + HCL + 4H2O

Komposisi ReagenRGT : 4 x 30 ml atau 4 x100 reagen enzimPhosphate buffer50 mmol/liter4 aminophenazone0,3 mmol/literDCHBS4 mmol/literUricase 200 u/literPeroxidase 1000 u/liter

STD : 3 ml standar

Asam urat8 mg/liter atau 476 mmol/literSodium azide0,095 %

Persiapan ReagenRGT dan STD siap untuk digunakan.Stabilitas ReagenReagen stabil bahkan setelah dibuka sampai tanggal kadaluarsa dinyatakan bila disimpan pada suhu 2-80C. Kontaminasi reagen harus benar-benar dihindari. Disimpan pada suhu 15-25oC. RGT stabil selama 2 minggu.Spesimen Serum, plasma EDTA, plasma heparin, urine Encerkan urine 1:10 dengan aqua bidest. Catatan : specimen lofomic biasanya menghasilkan kekeruhan campuran reagen yang mengarah kehasil palsu melalui faktor pembersih lemak tersebut akan menghasilkan kekeruhan yang disebabkan oleh kekeruhan lipemik.

PemeriksaanPanjang gelombang: Hg 546 nmCelah optic: 1 cmSuhu: 20-25oC atau 37oCPengukuran: terhadap reagen kosong per seri yang diperlukan.Skema Pemipetan

BlankoStandarSampel

Serum--20ul

Standar-20ul-

RGT1000ul1000ul1000ul

Campurkan, inkubasi 10 menit dengan suhu 20-25oC, dan 5 menit dengan suhu 37oC.Baca absorben sampel dan standar terhadap blanko reagen dengan panjang gelomabng 546 nm.PerhitunganKalkulasi dari konsentrasi asam urat, serum, plasma.C : Abs Sampel x C.Standar (8 mg/dl) Abs standarC: Abs sampel x C. standar (476 Mmol/liter)

UrinC : Abs sampel x C. Standar (88 mg/dl) Abs standarC : Abs sampel x C.standar (5235 mg/Mmol/liter Abs standarKarakteristik KinerjaLinearitas: tes linearty ini sampai dengan konsentrasi asam urat 20mg/liter atau 1190 mmol/liter. Encerkan sampel sampai dengan konsentrasi yang lebih tinggi 1:1 dengan garam fisiologis (NaCl 0,9%).Nilai RujukanLaki-laki: 3,4-7,0 mg/liter atau 200-400 Mmol/literPerempuan:2,4-5,7 mg/liter atau 140-340 Mmol/literUrin :250-750 mg/liter atau 1,5-4,5 Mmol/24 jam

8.Pemeriksaan BilirubinMetodeMetode jendrassik Untuk direct (D) dan total bilirubinUji fotometrik untuk langsung dan total bilirubin Prinsip MetodeBillirubin bereaksi dengan diazotigasi asam sulphanilic untuk menghasilkan warna merah azo. Absorbansi pewarna ini 546 nm berbanding lurus dengan konsentrasi billirubin dalam sampel. Reaksi Glucuronies billirubin larut dalam air bereaksi secara langsung dengan DSA sedangkan albumin billirubin tidak langsung terkonjugasi hanya akan bereaksi dengan DSA dengan akselerator : Total bilirubin = direct + indirect billirubin

Prinsip reaksiAsam sulphanilic + natrium nitric DSA

Billirubin + DSA direct Azobillirubin

Billirubin + DSA + Accelerator total azobillirubin

TBRKomposisi Reagen

1 X 100 ML (Total Billirubin reagent) Asam sulphanilic= 14 mmol /L Asam klorida= 300 mmol/L Kafcin (Akselerator)= 200 mmol/L Natrium benzoate= 420 mmol/L

TNRDBR1 x 9 ml (Total- Nitrit reagent ) = 390 mmol/L ,untuk menentukan total billirubin natrium nitric ( , R 22) 1 x 100 ml ( Direct billirubin reagen ) Asam sulphanilic= 14 mmol/L DNRAsam klorida= 300 mmol/L 1 x 9 ml ( Direct-Nitrik reagen ) Untuk penentuan direct bilirubin natrium nitrit.Persiapan Reagen dan StabilitasKedua reagen dan solusi nitric siap untuk digunakan stabil, bahkan setelah pembukaan, naik tanggal kadaluwarsa diberikan bila disimpan pada suhu 15-25C. Hindari kontaminasiSpesimenSerum atau plasma heparin Menghindari hemolitik dan sampel lipemic harus dilindungi dari cahaya langsung. Stabilitas : Billirubin stabil selama 3 hari bila disimpan cahaya di proteksi pada suhu 2-8CPemeriksaan Panjang gelombang : 546 nm Celah optic : 1 cm Suhu: 20-25 C Pengukuran : terhadap blanko sampelProsedurTotal bilirubinPipet ke dalam kuvetBlanko sampelSampel

TBRTNR1000 l----1000 l1 tetes

Campur secara menyeruruh , inkubasi selama 5 menit

sampel100 l100 l

Campuran , inkubasi pada suhu kamar selama 10 sampai 30 menit. Mengukur absorbansi sampel terhadap metode blanko sampel ( A 546 )

1 Tetes = 40 lDirect bilirubin Pipet ke tabungSampel kosongSampel

DBRDNR1000 L----1000 L1 Tetes

Campuran secara menyeluruh, inkubasi sampel dalam waktu 2 menit

Sampel100 l100 l

Campuran , inkubasi pada suhu kamar secara tepat 5 menit . mengukur absorbansi sampel terhadap blanko sampel .

PerhitunganMenghitung konsentrasi total dan langsung bilirubin dengan menggunakan factor 13.0 konsentrasi bilirubin (mg/dl)= A546 X 13.0 (mg/dl) x 17.1 = (mol/L). Konsentrasi Bilirubin total = absorbansi sampel X F (13,O mg/dl ) Bilirubin direct =absorbansi sampel X F (13.0 mg/dl ) Bilirubin indirect = X F (13.0 mg/dl) LinearitasLinearitas : pengujian kadar logam adalah linear hingga 25 mg/dl. Konsentrasi bilirubin melebihi 25 mg/dl. Encerkan sampel 1:4 dengan fisiologis (0.9 %) dan ulangi pengujian tersebut. Kalikan hasilnya dengan 5.

Nilai normalTotal bilirubin(mg/dl)( mol/I)

bayi baru lahirberusia 5 hariberusia 1 bulanorang dewasa5121.51.185.5205.025.618.8

Bilirubin direct

Dewasa0.254.3

9.PEMERIKSAAN KOLESTEROLMetode CHOD-PAP (Kolesterol Oxidase posfat Amino Penazon)Tes kolometri enzimatik untuk kolesterol dengan faktor kliring lipidPrinsip MetodeKolesterol ditentukan setelah hidrolisis enzimatik dan oksidase indikator quinoneimine terbentuk dari hidrogen peroksida dan 4 eminophenazone dengan adanya fenol dan peroksidase.Prinsip ReaksiCHE (Cholestreol esterase)Cholesterolester + O cholesterol + fatty Acid

CHO (Cholesterol Oxidase)Cholesterol + cholestene-3-one +

POD (Posfat Oxidase)2 + 4-amino cholesterol + 4O Phenazone + phenol

Komposisi ReagenRGT4x30 ml, 3x250 ml atau 4x100, ml reagen enzimBuffer posfat100 mmol/l4-aminophenazone0,3 mmol/lFenol5 mmol/lPeroksidase >5 KU/lCholesterolesterase>150 U/lCholesteroloxidase>100 U/lNatrium oxida0,05 %STD 3 ml standar Cholesterol 200 mg/dl atau 5,17 mmol/lPersiapan ReagenRGT dan STD siap untuk dipakai.Stabilitas ReagenReagen yang stabil setelah dibuka di buka dan sampai dengan masa expayer bahkan setelah pembukaan, disimpan pada 2- C. Reagen yang telah dibuka akan stabil selama 2 minggu disuhu 15-. Hindari kontaminasi.Spesimen Serum, plasma heparinist, atau EDTA plasmaCatatan : serum lipemic jika menghasilkan kekeruhan dari campuran sampel/larutan reagen yang mengarah ke hasil palsu meningkat. Tes koleterol liquicolor menghindari peningkatan hasil ketinggian palsu melalui built-in faktor kliring lipid (LCF) . LCF membersihkan secara total kekruhan yang disebabkan oleh spesimen lipemic dapat dihindari.

PemeriksaanPanjang gelombang : Hg 546 nmCelah optik : 1 cm Suhu : 20... / CPengukuran : dengan blanko reagen, hanya satu blanko reagen untuk 1 seri pemeriksaan.Skema Pemipetan Pipet kedalam tabung reaksiPipet ke kuvvets Blanko Standar Sampel

Sampel ....... ...... 10 ml

Standar ..... 10 ml ........

RGT 1000 ml 1000 ml 1000 ml

Perhitungan Konsentrasi KolesterolDengan faktorPanjang Gelombang C (mg / dl) C (mmol/l)

Hg 546 840 x A 21,7 x A

500 nm 553 x A 14,3 x A

Dengan standar Hanya standar yang direkomendasikan oleh manusia (tertutup dalam kit / tersedia secara terpisah, REF 10015) harus digunakan.

Absorbance sampel C = x C ( Standar 200 mg/dl) Absorbance standar

Absorbance sampel C = x C ( Standar 5,17 mmol/l) Absorbance standar

Karakteristik KerjaLinearitasTes linear sampai dengan konsentrasi kolesteroldari 750 mg/dl (19,3 mmol/l), sampai diencerkan dengan ketinggian konsentrasi kolesterol 1+2 dengan garam physiogical (NaCl 0,9 %) dan ulangi determnasi. Hasilnya dikalikan 3.Interpretasi Hasil (Nilai Normal)Diduga Kelebihan220 mg/dl5,7 mmol/l

Peningkatan Kelebihan260 mg/dl6,7 mmol/l

10.PEMERIKSAAN TRIGLISERIDAMetodeTrigliserida dutentukan setelah hidrolisis enzimatik dengan lipases. Idikatornya adalah quinoneimine yang terbentuk dari hydrogen peroksida, 4-amino-antipirin dan 4-klorophenol dibawah pengaruh katalitas dari peroksidasi.Prinsip KerjaTrigliserida lipases Gliserol + Jaringan asam lemakGliserol + ATP GK Gliserol-3-pospat + ADPGliserol-3-pospat-O2 GPOdihidroksiaton pospat + H2O2H2O2 + 4-aminoantipirin POD quinoneimine + HCl + H2O2 + 4-Klorophenol

RGTKomposisi Reagen15 ml; 100 ml atau 250 ml monoreagenPIPES buffer (pH 7,5)50 mmol/l4-klorophenol5 mmol/l4-aminopenazone0,25 mmol/lIon magnesium4,5 mmol/lATP2 mmol/lLipases 1300 U/lPeroksidase 500 U/lGliserol kinase 400 U/lGliserol-3-pospat oksidase 1500 U/lSodium azide0,05%

STD3 ml standarTrigliserida200 mg/dl atau 2,28 mmol/lPersiapan Reagen dan StabilitasRGT dan STD siap untuk digunakan. Reagen tetap stabil setelah dibuka, sampai penentuan tanggal kedaluarsa bila disimpan pada suhu 2-8C. Pada suhu 20-25C RGT stabil dalam waktu 4 mingguPencemaran Yang Harus Dihindari:Melindungi dari cahaya.SpesimenSerum, Plasma heparin atau Plasma EDTA.Keseimbangan: 3 hari pada 2-8C 4 bulan pada suhu -20CCatatan: Lipemic specimen biasanya menghasilkan kekeruhan dari campuran reagen dan sampel yang memimpin untuk menghasilkan hasil yang sangat baik. Pemeriksaan trigliserida diuji untuk memastikan bahwa pemeriksaan ini menghasilkan hasil yag sangat baik sampai selesai, itu dibentuk didalam Lipid Clearing Factor (LCF). LCF membersihkan total kekeruhan yang disebabkan dari spesime lipemic.PemeriksaanPanjang gelombang: 500 nm, Tinggi 546 nmGaris batas pegelihatan: 1 cmSuhu: 20-25C atau 37CUkuran : Berbeda dengan reagen blanko (RB). Hanya satu reagen blanko per rankaian yang diperlukan.PemipetanSilahkan gunakan HUMAN standar trigliserida yang tersedia dengan syarat digunakan per kotak atau terpisah: REF 10163Dipipet kedalam kuvetRBSampel atau STD

Sampel/STD---10 ul

RTG1000 ul1000 ul

Campur dan inkubasi 10menit pada suhu 20-25C atau 5 menit pada suhu 37C. Ukur absorban dari sampel (Asampel) dan standar (Astandar) berbeda dengan reagen blanko dalam 60 menit.

Perhitungan Konsentrasi Trigliserida:C = 200 x [mg/dl] atau C = 2,28 x [mmol/l]SifatLinearitasUji linearitas adalah uji untuk menguji kenaikan konsentrasi trigliserida dari 1000 mg/dl atau 11,4 mmol/l. Sampel degan kosentrasi tinggi memiliki kelemahan 1+4 dengan garam fisiologi (0,9%) dan retested. Mengalihkan hasil yang mendekati 5.

Interpretasi Klinis Untuk Kemungkinan AtheoscleoritikDicurigai: diatas 100 mg/dl atau 1,71 mmol/lMeningkat: diatas 200 mg/dl atau 2,28 mmol/l.11.PEMERIKSAAN LDL- CHOLESTEROLTujuanParameter pemeriksaan LDL Cholesterol adalah pemeriksaan enzymatic homogeny langsung untuk pengukuran kuantitatif LDL- Cholesterol (LDL). LDL dianggap sebagai komponen lemak yang menaikkan resiko terhadap jantung coroner (CHD).MetodeTest mengkombinasi 2 langkah :1. Dalam langkah pertama chylomicrons, VLDL, dan HDL cholesterol dihilangkan secara khusus melalui reaksi enzymatic2. Dalam langkah kedua LDL- cholesterol yang tertinggal diukur melalui reaksi enzymatic khusus, juga memakai surfactants specific untuk LDL. Kombinasi ini membuat pemeriksaan ini lebih spesifik untuk LDL dari pada metoda lain.Prinsip ReaksiLangkah Pertama CHE + CHOHDL, VLDL dan chylomicrons ---------------------- > cholestenone + H2O2 Kondisi Khusus

2 H2O2 ---------------------- > 2 H2O + O2

Langkah kedua

CHE + CHOLDL------------------------ > cholestenone + H2O2Surfactant khusus

Peroxidase2H2O2 + chromogen------------------------ > zat warna qulnone

Isi, Komposisi reagen dalam test

R1160 ml Enzyme (tutup merah)50 mmol/lBuffer Goods, pH 7,0 (250 C)600 U/lCholesterol esteruse500U/lCholesterol oxidase400 UmlKatalaseN- (2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-5-Dimethoxyaniline (HDAOS)0,56 mmol/lDeterjen0,3 % w/vPengawet0,1 % w/v

R21ml substrat (tutup biru)Peroxidase4000 U/l4- Aminoantipyrin (4- AA)4 mmol/lBuffer goods , pH 7,0 (250C)50 mmol/lNatrium azida0,09%Deterjen> 1 % w/v

31 ml CalibratorCholesterol

Persiapan Reagen dan Stabilitas

R1 dan R2 siap pakai Stabilitas : setelah reagen dibuka stabil sampai 1 bulan bila disimpan pada 2-80C. Hindari kontaminasi. Jangan dibekukan Tutup jangan terbuka

Calibrator

Rekonstitusi isi vial dengan 4 ml tempat air suling segar bebas germ,tutup vial dan putar hati-hati untuk melarutkan semua lyophilisat. Hindari buih. Biarkan selama 30 menit sebelum digunakan.Stabilitas : 10 hari pada 2-8oC. Bila perlu, calibrator segar yang dibuat dapat dibagi dalam beberapa bagian dan disimpan beku pada suhu 20oC selama 30 hari. Membekukan dan mencairkan hanya sekali, campur dengan hati-hati selalu mencairkan.

Spesimen

Serum, plasma Stabilitas : Dianjurkan untuk memeriksa langsung setelah sampling. Serum dapat disimpan pada suhu 2-8oC sampai 5 hari Dalam plasma, konsentrasi anti koagulan berikut tidak boleh lebih :1. EDTA -2 Na < 200 mg/dl;2. Na- sitrat < 1000 mg/dl;3. Heparin < 50 mg/dl;4. NaF < 2000 mg/dl Tidak dipengaruhi trygliserida sampai 1000 mg/dl, hemoglobin sampai 500 mg/dl, bilirubin sampai 30 mg/dl, asam askorbat sampai 50 mg/dl dan sampel yang agak keruh. Sampel dengan triglyserida yang melebihi 1000 mg/dl di encerkan dengan garam fisiologis (0,9 %) 1:1 dan kalikan hasil dengan 2.

Pemeriksaan

Panjang Gelombang: Hg 578 nm Celah Optik: 1 cmSuhu: 37oCPengukuran: terhadap blanko reagen (RB) cukup 1 blanko per seri

Prosedur (manual)

Hangatkan reagen dan cuvet sampai 37oC. Suhu harus dijaga konstan (0,5 oC) selama test.

Pipet kedalam cuvetBlanko StandarSampel

AquabidessSampelStandarR110------750

------10750

---10---

Campur dengan hati-hati, inkubasi selama 5 menit tepat padasuhu 37oC .

R2250 250 250

Campur dengan hati-hati, inkubasi pada suhu 37oC dan baca absorbans calibrator dan sampel terhadap blanko reagen (RB) setelah 5 menit.

Test dapat dijalankan dalam mode kinetic fixed time pada analiser.

Perhitungan

Hitung konsentrasi sampel sebagai berikut : sampelCsampel = ----------------- C (131,6 mg/dl) standarFaktor konversi : C (mg/dl) 0,02586 = C (mmol/l)

Linearitas

Sampai LDL-cholesterol 1000 mg/dl (prosedur manual).Bila digunakan analiser, batas linearitas tergantung pada pemakaian. Jika konsentrasi LDL melebihi range pengukuran, encerkan sampel 1+1 dengan saline (0,9%) dan ulangi pemeriksaan. Kalikan hasil dengan 2.

Nilai Rujukan

Laki-lakiWanitaResiko menurun untuk CHD< 50 mg/dl< 63 mg/dlResiko meningkat untuk CHD> 172 mg/dl> 16si, tiap laboratorium 7 mg/dl

Range ini diberikan hanya sebagai orientasi, tiap laboratorium harus membuat range rujukan sendiri, Sex, diet, umur, lokasi geografi dan factor lain mempengaruhi nilai yang diharapkan.

Kontrol kualitas

Semua serum manusia berdasarkan serum control dengan kadar LDL-cholesterol yang diukur dengan metoda ini dapat dipakai.12.PEMERIKSAAN HDL Kolesterol

PRINSIP METODEKilomikron, VLDL (Veri low density lipoproteins) dan LDL (low density lipoproteins) di endapkan dengan penambahan asam fostotungstat dan magnesium klorida. Setelah disentrifuge cairan supernatan mengandung HDL (High density lipoprotein).bagian, dengan pengujian dengan kolesterol HDL dan tes kit.

PRINSIP REAGENIsi, komposisi reagenPREC4 x 80ml dasar Asam fosfotungstat0,55 mmol/lMagnesium klorida25,00 mmol/lSTD1 x 3 ml standar Kolesterol50 mg/dl or 1,29 mmol/l

PREC aPreparasi reagen Dasar untuk uji makro Gunakan PREC murni Dasar untuk uji semi mikroEncerkan 1 botol PREC dengan 20ml aquabides atau encerkan 4 bagian dalam botol dengan satu bagian aquadest (4 + 1).

STDSTD siap untuk digunakan dan dapat dikerjakan secara langsung dalam tes / uji. Yang dibutuhkan adalah tidak adanya pengendapan. Factor dari kalkulasi terdiri dari pengenceran rasio.

Stabilitas Reagen PREC stabil / tidak berubah, meskipun setelah dibuka, hingga sampai pada tanggal kadaluwarsa bila disimpan pada suhu 2 25oC. di hindarkan dari kontaminasiSPESIMENSerum, plasma heparin atau plasma EDTA

PENGUKURANLihat kit kolesterol1. PengendapanPipet ke dalam tabung sentrifugemakroSemi-mikro

SerumPrec aPrec b500l1000l..200l..500l

Campur, inkubasi selama 10 menit pada suhu kamar. Di sentrifuge sekurang-kurangnya 2 menit jika 10000 gram, dan kemungkinan lain 10 menit jika 4000 gram.

Setelah di sentrifuge, pisahkan supernatant dari endapan dan setelah 1 jam dan gunakan konsentrasi kolesterol untuk pemeriksaan HDL kolesterol dengan reagen kolesterol.2. Ukuran Kolesterol Pipet dalam tabungReagen BlankoStandar Sampel

AquabidestStandarHDL supernatantReagen100l....1000l..100l..1000l.....100l1000l

Campurkan, inkubasi selama 5 menit pada suhu 37oC atau 10 menit pada suhu 20 25oC. ukur absorbance pada sampel dan standar terhadap reagen blanko sekitar 60 menit ( A)

Kalkulasi pada HDL kolesterol dengan faktorPanjang GelombangMakro Semi mikro

C = [mg/dl]= A xC= [mmol/l]= A xC= [mg/dl]= A xC= [mmol/l]= A x

Hg 546 nm2747,093208,2

500 nm1804,652105,43

Kalkulasi HDL kolesterol dengan menggunakan STD1. Metode makroC = Abs sampel x 150 mg/dlC = Abs sampel x 3,87 mmol/l Abs standar Abs standar2. Metode semi mikroC = Abs sampel x 175 mg/dl C = Abs sampel x 4,52 mmol/l Abs standar Abs standar

Kalkulasi pada LDL kolesterolMassa LDL kolesterol ( LDL C) adalah akumulasi dari jumlah massa kolesterol (TC). Massa HDL kolesterol (HDL-C) dan massa trigliserida (TG) menurut Friedwald et al.LDL C = TC HDL C TG [mg/dl] 5LDL C = TC HDL C TG [mmol/l] 5INTERPRETASI KLINIS1. HDL KolesterolPriawanita

[ mg/dl][mmol/l][mg/dl][mmol/l]

Perkiraan Terbaik> 55> 1,42> 65> 1,68

Tingkat standar resiko35 550,9 1,4245 651,16 1,68

Resiko indikasi< 35< 0,9< 45< 1,16

2. LDL-KolesterolPrasangka : 150 mg/dl or 3,9 mmol/ltinggi: 190 mg/dl or 4,9 mmol/l

13.PEMERIKSAAN BESIMetodeCAB (Chromazurol B) dengan factor pembersih lipidPrinsipBesi (III) bereaksi dengan Chromazurol B (CAB) dan cetyltrimethylammonium bromide (CTMA) untuk membentuk warna kompleks dengan absorbance maksimum 623 nm. Intensitas warna yang diproduksi sebanding dengan konsentrasi zat besi dalam sampel. Tes ini juga dapat digunakan dalam kombinasi dengan TIBC kit untuk menentukan TIBC.Komposisi

RGT2x30 ml atau 2x100 ml reagen CABCAB0,18 mmol/lCTMA2,2 mmol/lGuanidinium chloride2,6 mmol/lBuffer Sodium Asetat(pH 4,7)45 mmol/l

STD5 ml standar Besi100 g/dlAtau17,9 mol/l

STDRGTPersiapan ReagenDan siap untuk digunakan

RGTStabilitas Reagen Stabil bahkan setelah dibuka sampai tanggal kadaluarsa bila disimpan pada suhu 225oC. kontaminasi reagen benar-benar harus dihindari.SpesimenSerum, plasma heparinJangan menggunakan plasma EDTA, plasma sitrat atau serum hemilotik.Catatan :Specimen lipemic biasanya menghasilkan kekeruhan campuran reagen sampel yang mengarah kehasil palsu tinggi.Tes liquicolor besi menghindarkan dari hasil palsu tinggi dengan lipid factor kliring (LCF). LCF membersihkan kekeruhan yang disebapkan oleh specimen liemic selama inkubasi.PemeriksaanPanjang gelombang: Hg 623 nmSuhu: 2025 oCPengukuran: terhadap blanko reagen (Rb). Cukup menggunakan satu blanko utuk satu seri.

Skema Pemipetan BlankoStandarSampel

Serum --50 l

Standar -50 l-

Aquabidest50 l--

RGT1000 l1000 l1000 l

Campur dengan hati-hati, inkubasi selama 15 menit pada suhu 2025 oC. Ukur absorbance sampel (Asampel) dan standar (ASTD) terhadap reagen blanko selama 60 menit.

Perhitungan Kosentrasi Besi Dengan FactorPanjang gelombangBesi [g/dl]Besi [mol/l]

Hg 623nm830 x Asampel149 x Asampel

Perhitungan Kosentrasi Besi Dengan StandarJika panjang gelombang yang berbeda (620-640 nm) akan digunakan untuk pengukuran standar yang disediakan dengan kit harus digunakan untuk perhitungan.

C = x 100 [g/dl]

C = x 17,9 [mol/l]Linearitas Tes linearitas sampai kosentrasi 500 g/dl atau 89,5 mol/lNilai Rujukan Laki-laki : 59-148 g/dl atau 10,6-28,3 mol/lPerempuan: 37-145 g/dl atau 6,6-26 mol/l14.PEMERIKSAAN TIBC ( Total Iron-Binding Capacity )