Chlamydia trachomatis

Chlamydia trachomatis

Familia: Chlamydiaceae

Género: ChlamydiaEspecies: C. trachomatis

C. psittaciC. pneumoniae

Clamidias

• Presentan DNA y RNA• Su envoltura celular es similar a la

pared celular de las bacterias Gram negativas

Como otras bacterias::

• Sintetizan casi todas sus enzimas• Son sensibles a antibacteria-

nos tales como tetraciclina y claritromicina

Clamidias

• No sintetizan hexoquinasa ni ATP (parásitos energéticos obligados)

• Su ciclo celular presenta 2 formas celulares:

El CE es la forma infectante, contiene al “ligando” y es una bacteria esférica de 0.25 a 0.4 μm de Ф, con centro denso (ác. nucleicos + ribosomas)

El CR es la forma metabólicamente activa y su Ф fluctúa entre 0.5 y 1 μm

Características exclusivas:

Clamidias: Ciclo vital

CE-ligando Fijación a la CH

Penetración a la CH

colonia con CRs/CEs

Fisión binaria de

CRs

Conversión a CR; libera fa-golisosomasa

Predominio de CEs

Estallamientode la CH

CE-ligando...

Clamidias: Ciclo vital

C. trachomatis: Patología

C. trachomatis

LGV

TRIC

Neumonía del ratón

Variedades Serotipos Enfermedades

L1, L2, L3 LGV

A, B, Ba, C Tracoma

D a la K IC, UNG, cervicitis,

etc.

C. trachomatis “D” a la “K”

cervicitis

UNG

endometritis

salpingitis

peritonitis

perihepatitis

IC neonatal

neumonía neonatal

prostatitis

epididimitis

mano 1 ó 2IC

Secreciones en albercas

infertilidadfaringitisojos

EIP

Recolección y procesamiento de las muestras

PBS

SED

Cultivo de clamidias 1. Obtención de la monocapa de células

hospederas

Medio Mínimo Esencial de Eagle + 10% de SFB

48-72 h, 37°C

Células McCoy o HeLa

Cubreobjetos

Monocapa de céls McCoy o HeLa

Cultivo de clamidias 2. Cultivo del SED en la monocapa de

células hospederas

10 μL del SED

MMEE + 10%SFB + cicloheximida

Incubación 40 h, 37°C

Tinción con lugol

Inmunofluorescencia Indirecta

1. 20 μL de suero anti-C. trachomatis (conejo)2. Incubar 45 minutos en cámara húmeda3. Lavar 15 minutos con PBS4. Secar con papel filtro5. 20 μL de suero anti-γ globulina de conejo

(cabra) marcado con fluoresceína6. Repetir 3, 4 y 57. Montar la preparación8. Observar con microscopio de fluorescencia

A una preparación del SED fijada con acetona a –20°C:

Inmunofluorescencia Indirecta

Ensayo InmunoenzimáticoSe requiere:

• Esfera de poliestireno 4mm recubierta con Ac´s anti-C. trachomatis, fijados por su Fc

• Suero anti-C. trachomatis, preparado en conejo

• Suero anti-γ globulina de conejo marcado con peroxidasa y preparado en cabra

• [O-fenilendiamina-H2O2]• Placas de poliestireno con pozos• SED

EIA positivo

Diagnóstico Indirecto• No se realiza, dado que no existen

diferencias significativas en los títulos séricos asociados a enfermedad, respecto a los mostrados por personas sanas que han entrado en contacto con el microorganismo

• Sólo es útil para el caso de sospecha de neumonía neonatal