uji aktivitas anti hiperurisemia dari ekstrak etanol ...repository.ump.ac.id/8848/1/intan rizka nur...

i

UJI AKTIVITAS ANTI HIPERURISEMIA DARI EKSTRAK ETANOL,

FRAKSI DIKLORMETAN DAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN

ROSELLA (Hibiscus sabdariffa L.)

SKRIPSI

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar

Sarjana Farmasi (S.Farm)

INTAN RIZKA NUR FAUZAH

1408010158

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2018

ii

Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah, Fakultas Farmasi UMP, 2018

iii


iv


v

MOTTO

Lakukan sesuatu karena ALLAH SWT agar hatimu lebih

tenang & ikhlas

“Di Jalani, Di Nikmati, Di Syukuri”.

(Hamba Allah)


vi

PERSEMBAHAN

Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang. Skripsi

ini akan dipersembahan untuk:

1. Bapak Slamet M dan Mamah Herowati yang telah memberikan kasih

sayang, semangat, dukungan baik materil dan non materil serta do‟a yang

dipanjatkan tiada henti kepada Allah AWT.

2. Kakak-kakak tercinta yaitu Khaerul Anam Al-Mahbubi, Imam Maulida

Alfaroqi, Faizan Rizki Zumaro serta seluruh keluarga besar yang telah

memberikan dukungan dan do‟a disetiap langkah penulis.

3. Dosen pembimbingku (Ibu Diniatik dan Pak Zainur) yang selama ini

dengan sabar membimbing, mengarahkan dan memotivasi, terima kasih

banyak.

4. Semua sahabat dan temen seperjuanganku yang tak dapat disebutkan satu

persatu disini


vii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis haturkan kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, sehingga dapat menyelesaikan proposal

skripsi ini dengan judul “UJI AKTIVITAS ANTI HIPERURISEMIA DARI

EKSTRAK ETANOL, FRAKSI DIKLORMETAN DAN FRAKSI ETIL

ASETAT DAUN ROSELLA (Hibiscus sabdariffa L.)”.

Penulis proposal skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat

untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1 Farmasi, Fakultas

Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Dalam penyusunan proposal skripsi ini tidak lepas dari bantuan dan

bimbingan dari berbagai pihak, oleh karena itu penulis ingin menyampaikan

ucapan terimakasih kepada yang terhormat :

1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H, M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. Selaku Dekan Farmasi yang telah

memberikan berbagai informasi dan bimbingan tentang tatalaksana

penyusunan skripsi.

3. Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt. Selaku ketua Program Studi S1

Farmasi yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan tentang

tatalaksana penyusunan skripsi.

4. Dr. Diniatik, M.Sc., Apt. Selaku pembimbing I telah menyediakan waktu,

tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan dalam penyusunan skripsi ini.

5. Zainur Rahman Hakim, M.Farm., Apt. Selaku pembimbing II telah

menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan dalam

penyusunan skripsi ini.

6. Segenap dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhhamadiyah Purwokerto yang telah membagikan ilmunya dengan

penuh dedikasi dan melayani dengan sepenuh hati.


viii


ix

RIWAYAT HIDUP

Nama : Intan Rizka Nur Fauzah

Tempat, Tanggal Lahir : Pemalang, 21 November 1996

Jenis Kelamin : Perempuan

Agama : Islam

Alamat : Kalitorong 03/01 Randudongkal Pemalang

Nama Orang Tua : Slamet M & Herowati

Pendidikan

1. TK Muslimat Kalimas 2002

2. SD Negeri 2 Kalitorong 2008

3. SMP Negeri 2 Randudongkal 2011

4. MAN Pemalang 2014

Pengalaman

2017 Asisten Praktikum Farmakokinetika

Organisasi

PIKMA-YC Universitas Muhammadiyah Purwokerto


x


xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PERSETUJUAN ii

LEMBAR PENGESAHAN iii

LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS iv

MOTTO v

PERSEMBAHAN vi

KATA PENGANTAR vii

RIWAYAT HIDUP ix

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI x

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiii

DAFTAR GAMBAR xiv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

ABSTRAK xvii

ABSTRACT xviii

BAB I. PENDAHULUAN 1

A. Latar Belakang 1

B. Perumusan Masalah 4

C. Tujuan Penelitian 4

D. Manfaat Penelitian 4

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 5


xii

A. Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) 6

B. Hiperurisemia 12

C. Xantine Oksidase (XO) 15

D. Spektroskopi UV-Vis 18

E. Kerangka Konsep 20

F. Hipotesis 20

BAB III. METODE PENELITIAN 21

A. Jenis dan Rancangan Penelitian 21

B. Variabel Penelitian 21

C. Waktu dan Tempat Penelitian 21

D. Alat dan Bahan Penelitian 21

E. Cara Penelitian 22

F. Analisis Hasil 27

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 29

A. Deteminasi Tanaman 29

B. Ekstraksi Etanol Daun Rosella 29

C. Hidrolisis 31

D. Fraksinasi 31

E. Identifikasi Flavonoid 32

F. Uji Antihiperurisemia 37

G. Analisis Data 42

H. Spektroskopi Ultraviolet 43

I. Keterbatasan Penelitian 47

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN 48

A. Kesimpulan 48

B. Saran 48

DAFTAR PUSTAKA 49

LAMPIRAN 57


xiii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Hasil fraksisinasi ekstrak etanol daun

rosella (Hibiscus sabdariffa L.).................................................... 32

Tabel 4.2 Hasil KLT dan identifikasi flavonoid........................................... 36

Tabel 4.3 Nilai aktivitas xantin oksidase....................................................... 38

Tabel 4.4 Hasil uji penghambatan aktivitas xantin oksidase......................... 38

Tabel 4.5 Nilai % inhibisi dari ekstrak etanol, fraksi

diklormetan, fraksi etil asetat daun rosella

(Hibiscus sabdariffa L.) dan Allopurinol..................................... 39

Tabel 4.6 Nilai IC50 Allopurinol, ekstrak etanol, fraksi

diklormetan dan fraksi etil asetat................................................. 40

Tabel 4.7 Perubahan λ Beserta Perkiraan Gugus pada

Struktur Flavonoid dengan Pereaksi diagnostik........................... 46


xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa L.)................................. 7

Gambar 2.3 Rumus struktur asam urat........................................................... 10

Gambar 2.4 Metabolisme purin...................................................................... 12

Gambar 2.5 Perubahan xantin menjadi asam urat.......................................... 15

Gambar 2.6 Kerangka konsep ........................................................................ 20

Gambar 4.1 Ekstraksi daun rosella (Hibiscus sabdariffa L.)

menggunakan pelarut etanol 70% hingga didapatkan

ekstrak kental daun rosella.......................................................... 31

Gambar 4.2 Mekanisme hidrolisis.................................................................. 31

Gambar 4.3 Hasil hidrolisis ekstrak cair berwarna hijau kehitaman................. 31

Gambar 4.4 Profil KLT dengan fase diam selulosa dan

fase gerak asam asetat glasial 30% diamati pada sinar UV

366, A:sebelum diuapi amonia, B : sesudah diuapi amonia

E (ekstrak etanol), DKM (fraksi diklormetan), EA

(fraksi etil asetat), K (kuersetin).................................................. 33

Gambar 4.5 Reaksi antara asam sitroborat dengan gugus orto dihidroksi

Pada flavonoid............................................................................ 34

Gambar 4.6 Profil KLT dengan fase diam selulosa dan

fase gerak asama asetat glasial 30 % diamati pada sinar UV

366 A : sebelum di semprot sitroborat, B: setelah disemprot

Sitroborat E (ekstrak etanol), DKM (fraksi diklormetan), EA

(fraksi etil asetat), K (kuersetin)................................................. 35

Gambar 4.7 Grafik nilai IC50 allopurinol, Fraksi etil asetat,

ekstrak etanol dan fraksi diklormetan........................................ 40


xv

Gambar 4.8 Struktur senyawa (a) struktur dasar flavonoid (b) kuersetin ..... 42

Gambar 4.9 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan pelarut MeOH............... 43

Gambar 4.10 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan

Pereaksi geser NaOH.................................................................. 44


Pereaksi geser AlCl3................................................................... 44


Pereaksi geser AlCl3 + HCl........................................................ 45


Pereaksi geser Na Asetat.......................................................... 45


Pereaksi geser Na Asetat + Asam Borat.................................. 46

Gambar 4.15 Dugaan struktur flavonoid fraksi etil asetat daun

rosella 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-

4H-chromen-4-one................................................................... 47


xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Determinasi Tanaman.............................................................. 58

Lampiran 2. Perhitungan bahan .................................................................. 60

Lampiran 3. Perhitungan rendemen ekstrak etanol daun rosella

(Hibiscus sabdariffa L.) ...................................................... 65

Lampiran 4. Perhitungan nilai Rf ............................................................... 66

Lampiran 5. Perhitungan dalam identifikasi flavonoid dengan

Spektrofotometri UV-Vis ................................................... 67

Lampiran 6. Perhitungan nilai uji aktivitas antihiperurisemia .................... 68

Lampiran 7. Uji statistik ............................................................................. 85

Lampiran 8. Kegiatan penelitian ................................................................ 88


xvii

Uji Aktivitas Antihiperurisemia Dari Ekstrak Etanol, Fraksi Diklormetan dan

Fraksi Etil Asetat Daun Rosella (Hibiscus sabdariffa L.)

Intan Rizka Nur Fauzah1, Diniatik

2, Zainur Rahman Hakim

3

ABSTRAK

National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) menyatakan pada

tahun 2007-2008 di Amerika Serikat, terdapat prevalensi kejadian hiperurisemia

sebesar 21,2 % pada wanita dan 21.6 % pada laki-laki. Prevalensi hiperurisemia

terus meningkat secara cepat pada beberapa dekade terakhir. Penggunaan obat

sintetik yang biasa dikonsumsi allopurinol, obat ini memberikan banyak efek

samping sehingga diperlukan pengobatan alternatif yang lebih aman dengan efek

samping yang lebih rendah, dengan menggunakan tanaman rosella yang memiliki

kandungan flavonoid. Penelitian ini bertujuan mengetahui potensi ekstrak etanol,

fraksi diklormetan dan fraksi etil asetat daun rosella (Hibiscus sabdariffa L.)

sebagai anti hiperurisemia, mengetahui pola kromatogram dan pola spektrum

fraksi aktif. Metode penelitian dengan pengumpulan daun rosela, determinasi

tanaman, ekstraksi, hidrolisis, fraksinasi, identifikasi menggunakan kromatografi

lapis tipis (KLT) dan uji antihiperurisemia untuk mengetahui penghambatan

enzim xantin oksidase dengan spektroskopi UV-Vis. Hasil KLT menunjukan pada

fraksi etil asetat mempunyai nilai Rf 0,1 sama dengan kuersetin. Pola spektrum

fraksi aktif menunjukan pita 1 370 nm dan pita II 257 nm yaitu golongan flavonol

(3-OH bebas). Hasil penelitian menunjukan potensi penghambatan aktivitas

xantin okisdase pada ekstrak etanol dengan nilai IC50 30,01 µg/ml, fraksi

diklormetan 39,53 µg/ml dan fraksi etil asetat 15,29 µg/ml daun rosella (Hibiscus

sabdariffa L.) sedangkan IC50 Allopurinol 5,89 µg/ml. Diduga struktur flavonoid

fraksi etil asetat yaitu 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-4-

one. Uji One Way Anova menunjukan nilai p 0,000

xviii

Antihyperuricemia Activity Test of Ethanol Extract, Diclormethane Fraction and

Ethyl Acetate Fraction of Rosella Leaf (Hibiscus sabdariffa L.)

Intan Rizka Nur Fauzah1, Diniatik

2, Zainur Rahman Hakim

3

ABSTRACT

The National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) states that in

2007-2008 in the United States, there was a prevalence of hyperuricemia at 21.2%

in women and 21.6% in men. The prevalence of hyperuricemia continues to

increase rapidly in the last few decades. The use of synthetic drugs commonly

consumed by allopurinol, these drugs provide many side effects so that safer

alternative treatments are needed with lower side effects, using rosella plants that

contain flavonoids. This study aims to determine the potential of ethanol extract,

dichormate fraction and ethyl acetate fraction of rosella leaves (Hibiscus

sabdariffa L.) as anti hyperuricemia, knowing the chromatogram pattern and

active fraction spectrum pattern. The research method was collecting roselle

leaves, plant determination, extraction, hydrolysis, fractionation, identification

using thin layer chromatography (TLC) and antihyperuricemia test to determine

the inhibition of xanthine oxidase enzyme by UV-Vis spectroscopy. The results of

TLC showed that the ethyl acetate fraction had a Rf value of 0.1 which was the

same as quercetin. The spectrum pattern of the active fraction shows the band 1

370 nm and the band II 257 nm which is the flavonol (3-OH free) group. The

results showed the potential inhibitory activity of xanthine okisdase in ethanol

extract with IC50 value of 30.01 μg / ml, the dichormate fraction was 39.53 μg /

ml and the ethyl acetate fraction was 15.29 μg / ml of rosella leaves (Hibiscus

sabdariffa L.) while IC50 Allopurinol 5.89 μg / ml. The structure of ethyl acetate

fraction of flavonoids is 2- (3,4-dihydroxyphenyl) -3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-

4-one. One Way Anova test shows p value 0,000

uji aktivitas anti hiperurisemia dari ekstrak etanol ...repository.ump.ac.id/8848/1/intan rizka nur...

Documents