proje daniġmanliĞi eĞĠtĠmĠ Çaliġtayi Çanakkale...

69
PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012 Birsen DEMİRATA ÖZTÜRK

Upload: others

Post on 17-Oct-2019

15 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI

ÇANAKKALE 2012

Birsen DEMİRATA ÖZTÜRK

Page 2: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidanlar

Antioksidanların birçok tanımı yapılmakla beraber

en genel tanımı, insan vücundaki ve gıdalardaki

serbest radikallerin olumsuz etkilerini ve

oluĢumunu durduran veya yok eden maddelerdir.

Serbest radikal, atomik ya da moleküler yapılarda

çiftlenmemiĢ tek elektron bölümlerine verilen

isimdir. BaĢka moleküller ile çok kolayca elektron

alıĢveriĢine girebilen bu moleküllere "oksidan

moleküller" veya "reaktif oksijen partikülleri" de

denmektedir

Page 3: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidanlar hücrelere zarar veren bu reaksiyon

sistemlerini inhibe ederek toksik olmayan ürünlere

çevirmektedir.

Antioksidan takviyesi ve antioksidanca zengin bir

beslenme ile serbest radikallerin ve aktif oksijenin

meydana getirdiği oksidatif hasar engellenebilmektedir.

Antioksidanlar, yağların oksidasyonunu önlemeyi

ve/veya yavaĢlatmayı sağlarlar. Gıdalardaki

antioksidanlar, serbest radikal oluĢumunu engelleyici

veya mevcut olan serbest radikalleri etkisiz hale

getirici özelliğe sahiptir.

Page 4: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Reaktif oksijen türleri (ROS)

ROO.

H2O2

ROOH

1O2

.OH

(O2-.)

ROS

Reaktif azot türleri (RNS)

.NO2 ONOO-

NO

RNS

Reaktif klor türleri

HOCl

Page 5: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Oksidatif Stres

Dengelenmemiş serbest radikal saldırısıve hücre zarının tahribatı “oksidatifstres” olarak adlandırılır.

Antioksidanlar serbest radikallerlereaksiyona girerek (onlarla bağkurarak) hücrelere zarar vermeleriniönler.

Page 6: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidanların Etkileri

1) Toplayıcı etki

2) Bastırıcı etki

3) Zincir Kırıcı Etki

4) Onarıcı Etki

Page 7: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidanların Etkileri; Oluşan serbest radikalleri toplayıcı ve gidericietkileri ile bağlamak ve kararlı hale getirmek

Zincir kırıcı etki; serbest radikal üreten kimyasalreaksiyonları durdurarak, serbest oksijen radikallerinikendilerine bağlayarak zincirlerini kırıpfonksiyonlarını engelleyici etkiye zincir kırıcı etkidenir.

ROO. + AH → LOOH + A.

RO. + AH → LOH + A.

R. + AH → RH + A.

OH. + AH → H OH + A.

Page 8: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Baskılayıcı etki; reaksiyon hızını azaltarak, serbest oksijenradikalleri ile etkileşip onlara bir hidrojen aktararakaktivitelerini azaltan veya inaktif şekle dönüştüren olayabastırıcı etki denir. Vitaminler bu tarz bir etkiyesahiptirler.

Onarıcı etki ; lipit, protein ve DNA gibi yapılardaoluşmakta olan biyolojik moleküler hasarı rejenere ederler.

Enzimatik etki; organizmadaki SOD (süperoksitdismutaz) gibi antioksidan enzimler ile enzimatik olmayanantioksidanların sentezini arttırarak etkilerini gösterirler

Page 9: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidan Çeşitleri

Doğal veya sentetik

Kimyasal bileşimlerine göre

Etki mekanizmalarına göre

Page 10: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidanların sınıflandırılması

a) Doğal ve yapay antioksidanlar

b) Antioksidanların kimyasal bileĢimlerine göre

sınıflandırılması

Fenolik yapıdaki antioksidanlar

Aromatik amino antioksidanlar

Organik sülfür bileĢikleri

c) Etki mekanizmasına göre sınıflandırılması

Primer Antioksidanlar

Sekonder Antioksidanlar

Page 11: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Doğal Antioksidanlar

Askorbik asit

Tokoferoller

Karetonoidler

Polifenoller

Flavonoidler

Hidroksi benzoik asitler

Sinnamik asit ve türevleri

FlavanolFlavonol Flavon Izoflavon

Enzimatik antioksidanlar

Peptidler

Page 12: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Yapay Antioksidanlar

BHA (ButillenmiĢ hidroksianizol)

BHT (ButillenmiĢ hidroksitoluen)

TBHQ (Tersiyer butil hidrokinon)

NDGA (Nordihidroguayaretik asit)

Alkil gallatlar

Page 13: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Toplam Antioksidan Tayin Yöntemleri

Page 14: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon mekanizmasına

göre sınıflandırılması

elektron transferine (ET)

dayalıantioksidan kapasite

tayin yöntemleri

hidrojen atom transferine (HAT)

dayalı antioksidan kapasite tayin

yöntemleri

Bir redoks reaksiyonu üzerine

temellenir. Bu yöntemler elektron

transfer reaksiyonuna

dayanmaktadir

Hidrojen verme yoluyla serbest

radikallerin giderilmesinin

ölçümüne dayanır

prob(yükseltgen) + e- (antioksidandan) →

indirgenmiş prob + yükseltgenmiş

antioksidan

ROO* + AH → ROOH + A*

ROO* + LH → ROOH + L*

Antioksidan (AH), lipid(LH)

peroksidasyonu engellemek için

kullanılır

Page 15: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ANTĠOKSĠDAN KAPASĠTE ÖLÇÜM YÖNTEMLERĠ

FRAP (Demir(III) Ġndirgeme Antioksidan Kapasitesi) Yöntemi

Orijinal Ferrisiyanür Yöntemi

SDS Katkılı Ferrisiyanür Yöntemi

Orto-fenantrolin Yöntemi

Bato-fenantrolin Yöntemi

CUPRAC (Cu(II) Ġndirgenme Antioksidan Kapasitesi) Yöntemi

CERAC (Ce(IV) Ġndirgenmesi Esaslı Antioksidan Kapasite

Yöntemi)

ORAC (Oksijen Radikal Absorbans Kapasitesi Yöntemi)

DPPH (2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil radikal süpürme kapasitesi)

Yöntemi

ABTS/TEAC (Troloks EĢdeğer Antioksidan Kapasite) Yöntemi

Folin- Ciocalteu Yöntemi

Page 16: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Antioksidan Analiz Yöntemleri

Spektrofotometrik Metodlar

• TEAC(ABTS+) Yöntemi ( Trolox Equivalent Antioxidant Capacity)

• ORAC Yöntemi (Oxygen Radical Absorbance Capacity)

• TRAP Yöntemi ( Total Peroxide Radical Antioxidant Potential)

• FRAP Yöntemi ( Ferric Reducing Antioxcidant Capacity)

Page 17: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

AMAÇ

Ġnsan sağlığı ve gıda maddeleri için önemli

olan doğal antioksidanlardan flavonoidlerin

analizi için basit, tekrarlanabilirliği yüksek,

reaksiyon basamakları az, ucuz ve spesifik

olmayan cihazlarla yapılan bir yöntem

geliĢtirilmek istenmiĢtir.

Page 18: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

GeliĢtirilen Toplam Flavonoid Miktarı

Analiz Yöntemleri

• Spektrofotometrik Yöntem

Sulfat asitli ortamda Ce(IV)’ün maksimum dalgaboyundaki (320 nm) absorbans değeri, Ce(IV)’ünflavonoidler ile reaksiyonu sonucu azalmaktadır.Ce(IV)’ün maksimum dalga boyundaki bu azalmadanyararlanarak indirekt olarak toplam flavonoid miktarınıhesaplayabilmekteyiz.

• Spetroflorometrik Yöntem

Ce(IV) floresans özelliğe sahip değilken Ce(IV)’ünflavonlarla reaksiyonu sonucu oluşan Ce(III) floresansözelliğe sahiptir. Reaksiyon sonucu oluşan Ce(III)’ünfloresansı ölçülerek toplam flavonoid miktarı hesaplanır.

Page 19: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ġekil 3.2. Ce(IV)-quercetin arasındaki reaksiyonun referans saf suya karĢı absorpsiyon

spektrumları

a) 2.10-4 M Ce(IV)

b) 2.10-4 M Ce(IV) + 4.10-6 M quercetin;

c) 2.10-4 M Ce(IV) + 1.10-5 quercetin

d) 1.10-5 M quercetin

Page 20: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

d) 1.10-5 M quercetin

e) 2,5.10-5 M Trolox

f) 2,5.10-5 M Catechin

g) 2,5.10-5 M Gallic Acid

h) 2,5.10-5 MNaringin

i) 2,5.10-5 M Naringenin

j) 1,63 .10-4 M Ascorbic acid

ġekil 3.3. ÇeĢitli flavonların referans saf suya karĢı absorpsiyon spektrumları

Page 21: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Maksimum dalga boyuna asit miktarının etkisi

Örnek

no

[ H+] Absorbans λmax (nm)

1 0,01 0,750 274,0

2 0,03 0,757 296,0

3 0,05 0,769 304,0

4 0,09 0,784 307,0

5 0,13 0,808 311,0

6 0,17 0,845 312,5

7 0,21 0,873 314,0

8 0,41 0,987 318,5

9 0,61 0,996 320,0

10 0,81 1,001 320,0

11 1,01 1,027 319,5

12 1,41 1,021 319,5

13 1,81 1,012 319,0

Page 22: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Ce(IV)’ün Kalibrasyon Grafiği

Optimum sülfirik asit miktarı 0,3 M ve maksimum dalga boyu 320 nm seçilerek 4,0x10-5

-5,0x10-

4M konsantrasyon aralığındaki Ce(IV) çözeltilerinin absorbansı suya karĢı ölçülerek

kalibrasyon grafiği çizildi

Page 23: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Quercetinin Kalibrasyon Grafiği

Başlangıç derişimi 2.10-4 M olan Ce(IV) çözeltisinin 2,12x10-6 M

8,48x10-6 M arasında değişen quercetin çözeltileri ile reaksiyonu

sonucu artan Ce(IV) çözeltilerinin absorbans değerleri okunmuştur.

(kör çözelti:su, λmax=320 nm, [H2 SO4]=0,3 M )

A320 = 0,985 - 103491Cquercetin (R2

= 0,9987)

Page 24: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

• Ce(IV)-quercetin reaksiyonu için çizilen kalibrasyon grafiklerinin

eğimleri ve mol oranları (ε Ce(IV) =5210 L.mol-1.cm-1)

Deney

No

εquercetin

L.mol-1.cm-1

[Quercetin] BaĢlangıç

[Ce (IV)]

[Ce (IV)]/

[Quercetin]

εquercetin /

ε Ce(IV)

1 102128 8,85x10-6 1,85x10-4 20,90 19,60

2 104257 1,2x10-5 2,55x10-4 21,25 20,00

3 104365 2,5x10-5 5,0x10-4 20,00 20,03

4 102000 1,72x10-5 3,3x10-4 19,18 19,57

5 103423 1,56x10-5 3,1x10-4 19,87 19,85

6 103491 9,6x10-6 2,0x10-4 20,83 19,86

ORT 103277 20,34 19,82

ORT [Ce(IV)]/[Quercetin]=

20,08

20Ce+4

+ Quercetin → 20Ce+3

+Semiquinone radical ( o-quinine)

Page 25: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Ce(IV) ile Quercetin deriĢimleri Arasındaki EtkileĢim

ġekil 3.6. Farklı baĢlangıç konsantrasyonlarındaki Ce(IV) çözeltileri ile aynı Ģekilde çizilen

quercetin kalibrasyon grafikleri

Page 26: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Spektrofotometrik Titrasyon

Quercetin ve seryum arasındaki bağıntıyı incelemek amacı ile

spektrofotometrik titrasyon yöntemine de baĢvurulmuĢtur.

• Titrant olarak Ce(IV) çözeltisinin kullanılmasıSabit miktarda 8,61x10-6 M ve 2,152x10-5 M quercetin çözeltileri üzerine

gittikçe artan miktarlardaki seryum çözeltileri katıldı. Elde edilen çözeltilerin

320 nm' de absorbansları ölçüldü ve absorbanslarla seryum deriĢimleri

arasında grafik çizildi.

• Titrant olarak quercetin çözeltisinin kullanılmasıSabit miktardaki 3,1x10-4 M ve 1,85x10-4 M Ce(IV) çözeltileri üzerine

gittikçe artan miktarlarda quercetin çözeltileri katıldı. Elde edilen

çözeltilerin 320 nm' de absorbansları ölçüldü ve absorbanslarla quercetin

deriĢimleri arasında grafik çizildi.

Page 27: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Titrant Olarak Ce(IV) Çözeltisinin Kullanılması

-0,20

0,00

0,20

0,40

0,60

0,80

1,00

1,20

0,00E+00 1,00E-04 2,00E-04 3,00E-04 4,00E-04 5,00E-04 6,00E-04

CCe(IV) mol/L

A

ġekil 3.6. 8,61x10-6

M(■) ve 2,152x10-5

M (▲)

quercetin çözeltilerinin standart Ce(IV) çözeltisi ile

titrasyonu (referans: saf su)

-0,20

-0,10

0,00

0,10

0,20

0,30

0,40

0,50

0,60

0,70

0,00000 0,00005 0,00010 0,00015 0,00020 0,00025 0,00030

CCe(IV) mol/L

A

ġekil 3.7. 8,61x10-6

M quercetin’ in standart

Ce(IV) çözeltisi ile titrasyonu

(■)Referans çözelti: su;

(■)Referans çözelti: 8,61x10-6

M quercetin

çözeltisi

Page 28: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Titrant Olarak Quercetin Çözeltisinin Kullanılması

y = -1,0342x + 1,6135

y = -1,0213x + 0,9038

0,00

0,20

0,40

0,60

0,80

1,00

1,20

1,40

1,60

1,80

0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 3,50

Cquercetin (mol/L)/ 105

A

-0,20

0,00

0,20

0,40

0,60

0,80

0,00 1,00 2,00 3,00

Cquercetin (mol/L)/105

A

ġekil 3.8.

3,1x10-4 M(■) ve

1,85x10-4 M (▲) Ce(IV)

çözeltilerinin değiĢen konsantrasyonda quercetin

çözeltisi ile titrasyonu (referans: saf su)

ġekil 3.9. 1,85x10-4 M Ce(IV)

çözeltisi ile değiĢen konsantrasyonda

quercetinin titrasyonu

(■)Referans çözelti: su;

(■)Referans çözelti: quercetin çözelti

Page 29: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

[Quercetin] [Ce(IV)] [Ce(IV)]/[quercetin]

Quercetinin

Ce(IV) ile

titrasyonu

2.152x10-5 M 4.6x10-4 M 21,37

8.61x10-6 M 1.76x10-4 M 20,44

*8.61x10-6 M 1.73x10-4 M 20,10

Ce(IV)’ün

quercetin ile

titrasyonu

1.49x10-5 M 3.1x10-4 M 20,80

8.6x10-6 M 1.85x10-4 M 21,51

8.5x10-6 M *1.85x10-4 M 21,76

Spektrofotometrik Titrasyon Sonuçları

Referans :su, λmax = 320 nm, [H2 SO4] = 0,3 M

( * referans = quercetin çözeltisi)

Page 30: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ÇeĢitli Flavonlarin GeliĢtirilen Yöntemle Analizi ve

Trolox EĢ Değerlerinin (TEAC) Hesaplanmasi

GeliĢtirilen spektrofotometrik yönetim için verilen iĢlem basamakları sırasıyla takip

edilerek trolox, gallik asid, askorbik asid, kateĢin, naringin ve narigenin'lerin

kalibrasyon grafikleri çizildi ve molar absorpsiyon katsayıları hesaplandı

Standart yöntemle karĢılaĢtırabilmek için her flavonun trolox eĢdeğerlikleri

hesaplandı. Bu nedenle trolox'un Ce(IV) ile reaksiyonu ayrıntılı olarak

ĠncelenmiĢtir:

Ce(IV)- Trolox Reaksiyonunun Ġncelenmesi

♦Trolox Kalibrasyon Grafikleri

♦ Spektrofotometrik Titrasyon

a) Titrant olarak Ce(IV) çözeltisinin kullanılması

b) Titrant olarak standart trolox çözeltisinin kullanılması

Page 31: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Trolox Kalibrasyon Grafikleri

2,3x10-4 M ve 2,0x10-4 M Ce(IV)

çözeltileri üzerine son

konsantrasyonu 2,0x10-5 M -1,0x10-4

M arasında değişen trolox çözeltileri

katıldı ve reaksiyon sonucu oluşan

çözeltilerin absorbansları ölçüldü.

ġekil 3.11. Farklı başlangıç konsantrasyonlarındaki Ce(IV)

çözeltileri ile çizilen trolox kalibrasyon grafikleri

(kör çözelti:su, λmax=320 nm, [H2SO4]=0,3 M )

Page 32: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Spektrofotometrik Titrasyon

ġekil 3.12. 5,0x10-5 M trolox çözeltisinin standart Ce(IV) çözeltisi ile spektrofotmetrik

tirasyonu (●)Referans çözelti: su;

(■)Referans çözelti: 5,0x10-5 M trolox çözeltisi

Titrant olarak Ce(IV) çözeltisinin kullanılması

Page 33: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ġekil 3.13. 2,3x10-4 M Ce(IV) çözeltisinin 320 nm‘de trolox çözeltisi ile spektrofotmetrik tirasyonu

Titrant olarak standart trolox çözeltisinin kullanılması

Spektrofotometrik Titrasyon

Page 34: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

[Ce(IV)] [Trolox] [Ce(IV)]/

[Trolox]

εtroloxL.mol-1.cm-1 εtrolox/ εCe(IV)

2,3x10-4 9,2x10-5 2,5 13202 2,53

2,0x10-4 8,0x10-5 2,5 12972 2,49

1,25x10-4 5,0x10-5 2,5 - -

• Ce(IV)- trolox reaksiyonu için çizilen kalibrasyon grafiklerinin

eğimleri ve mol oranları ( ε Ce(IV) = 5210 L.mol-1.cm-1)

• Spektrofotometrik titrasyon sonuçları ve mol oranları

TROLOX DENEY SONUÇLARI

Page 35: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Askorbik Asit

KateĢin

Gallik Asid

NaringeninNaringin

Caffeic asit

Page 36: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Spektroflorometrik Yöntem

Page 37: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon
Page 38: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

SONUÇ

• Spektroflurometrik yöntemlerin en temel avantajı absorpsiyon

spetrofotometrik yöntemlere göre daha hassas olmasıdır.

• Sadece Ce(IV) iyonları içeren çözeltilerde fluoresans gözlenmemiĢtir.

• Su ekstrakları ve Ce(IV) iyonları arsındaki reaksiyon oda sıcaklığında ve

asidik ortamda hızlı sayılabilir Ģekilde oluĢmaktadır.

• Sonuç olarak geliĢtirilen bu metod basit ve hızlıdır.

• Bu metodla minimum tayin edilebilecek quercetin miktarı 1 ppm dir.

Page 39: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

GeliĢtirilen Yöntemin Gerçek

Örneklere Uygulanması

Page 40: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ANALĠZ YÖNTEMĠNĠN ĠSTATĠSTĠKSEL DEĞERLENDĠRĠLMESĠ

Page 41: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

SONUÇ

Page 42: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Trolox EĢ Değerlerinin (TEAC) Hesaplanması

Flavonoidler

ε

L.mol-1.cm-1

Trolox eĢdeğerlikleri TEAC(mM)

GeliĢtirilen Yöntem *ABST radikal

yöntemiεFlavonoid /

εTrolox

Mol

oranları

Trolox 1,31x104 - - -

Quercetin 1,03x105 7,9 8 4.7

Gallik asid 3,30x104 2.52 2,92

Ascorbic acid 1,42x104 1,08 2 1.0

Catechin 4,50x104 3,44 3,71 2.4

Naringenin 8,59x104 6,56 7,5 1.5

Naringin 0.3

* Rice-Evans, C.A., Miller, N.J., Paganga, G., 1997. Antioksidant

Properties Of Fenolic Compounds, 2(4), 152-159

Page 43: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Sonuç olarak sağlığımız için önemli olan antioksidan

bileĢiklerin tayini için uygulaması kolay, deney süresi kısa,

hassasiyeti yüksek, masrafsız, uçucu organik çözücüler ve

ekstraksiyon gibi iĢlemler gerektirmeyen ve geliĢmiĢ aletler

gerektirmeyen indirek bir yöntem geliĢtiri lmiĢtir.

Ayrıca reaksiyon sonucu oluĢan ürünün fluoresans

özelliğinden yararlanarak florimetrik bir yöntemde

ö n e r i l m i Ģ t i r .

Page 44: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

DOKTORA TEZ ÖNERİSİ

FLOROMETRİK ANTİOKSİDAN TAYİN

YÖNTEMİ GELİŞTİRİLMESİ

VE

UYGULAMALARI

Dilek ÖZYURT

Page 45: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İÇERİK

Oksidatif Stres

Serbest Radikaller

Antioksidanlar

Antioksidan Maddelerin Özellikleri

Toplam Antioksidan Tayin Yöntemleri

Amaç ve Öneri

Yöntem

Çalışma Planı

Page 46: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

NAR’DA ANTĠOKSĠDAN

MĠKTARI TAYĠNĠ

Page 47: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

TÜRKİYE’DEKİ YENİLEBİLİR SOĞANSI BİTKİLERİN TOPLAM ANTİOKSİDAN

İÇERİKLERİNİN ARAŞTIRILMASI

Tez DanıĢmanı: Prof. Dr. Birsen DEMĠRATA ÖZTÜRK

Binnur GÖÇ

04.06.2009

Page 48: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Amaç;

Türkiye’de bol miktarda bulunan ve

tüketilen bazı yenilebilir soğansı bitkilerin

(Allium türleri) farklı çözücü ortamlarındaki

toplam antioksidan miktarını üç farklı

yöntemle belirlemek. Ayrıca,

soğanlara(sarı, kırmızı, beyaz, yeĢil soğan-

yaprak, yeĢil soğan-kök) farklı kurutma

prosesleri (etüv de ve mikrodalga da)

iĢlemleri uygulanarak, toplan antioksidan

miktarlarındaki değiĢim incelemek.

Page 49: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

MĠKRODALGA FIRINLARDA

ISITMANIN GIDALARIN

ANTĠOKSĠDAN ĠÇERĠĞĠNE

ETKĠSĠ

Hazırlayan: Ufuk Özacar

DanıĢman: Prof.Dr.Birsen Demirata Öztürk

Page 50: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İÇİNDEKİLER

• KuĢburnu

• Antioksidanlar

• Askorbik asit

• Antioksidan Kapasite Tayininde Kullanılan Yöntemler

• Deneysel Kısım

• SONUÇ

Page 51: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ĠSTANBUL TEKNĠK ÜNĠVERSĠTESĠ

BİTKİ ÇAYLARINDA TOPLAM

ANTİOKSİDAN KAPASİTESİ TAYİNİ

Sezen ÇALIġKANTÜRK

090030227

Danışman Öğretim ÜyesiProf. Dr. Birsen DEMİRATA ÖZTÜRK

Page 52: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İçindekiler Antioksidan nedir

Serbest radikaller

Antioksidanların etkileri

Antioksidanların çeşitleri

Toplam antioksidan tayin yöntemleri

Deneysel çalışmalar

Bitki çaylarının analizi

Sonuçlar ve tartışma

Page 53: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

KUġBURNU BĠTKĠSĠNDE

SPEKTROFOTOMETRĠK

YÖNTEMLE ASKORBĠK ASĠT

TAYĠNĠ

509041204

Hazırlayan:Ayça KARASAKAL

DanıĢman:Prof.Dr.Birsen Demirata Öztürk

Page 54: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İÇİNDEKİLER

Serbest Radikaller

Antioksidanlar

C Vitamini

Antioksidan Kapasite Tayininde Kullanılan Yöntemler

KuĢburnu

Deneysel Kısım

SONUÇ

Page 55: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

DENEYİN AMACI

KuĢburnu’nun sahip olduğu toplam antioksidan

miktarını askorbik asit cinsinden tayin etmek.

Page 56: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

KÜKÜRT DİOKSİT İÇEREN ŞARAPLARIN TOPLAM ANTİOKSİDAN KAPASİTELERİNİN BELİRLENMESİ

Belkıs Nazlı PELEN

090040241

Page 57: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İÇERİK

Antioksidanlar

Antioksidanların Sınıflandırılması

Toplam Antioksidan Tayin Yöntemleri

Şarap

Şarap Çeşitleri

Şarapta Çokça Bulunan Antioksidanlar

Şarapta Kükürtleme

Deneysel Çalışmalar

Sonuçlar

Page 58: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Amaç

Şarap içerisinden kükürt dioksit uzaklaştırılması vetayini

Kükürt dioksit uzaklaştırılan ve uzaklaştırılmayanşarap içerisindeki toplam antioksidan kapasitesininbelirlenmesi

Page 59: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İ.T.Ü.FEN-EDEBİYAT FAKÜLTESİ

KİMYA BÖLÜMÜ

2010 - 2011 Güz

BAZI GIDA ÖRNEKLERİNDE ANTİOKSİDAN TAYİNİ

CANAN EKŞİ

Danışman Öğretim ÜyesiProf. Dr. Birsen Demirata Öztürk

Page 60: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İÇERİK

ANTİOKSİDANLAR

1. Doğal Antioksidanlar

I. C Vitamini (Askorbik Asit)

II. α-Tokoferol (TOC)

III. Karotenoidler

IV. Flavonoidler

2. Sentetik Antioksidanlar

ANTİOKSİDAN TAYİN YÖNTEMLERİ

1. Hidrojen Atom Transferini (HAT) Temel Alan Analizler

I. ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) Yöntemi

II. TRAP (The Total Radical Trapping Parameter) Yöntemi

2. Elektron Transferini (ET) Temel Alan Analizler

I. FRAP (Ferric Reducing/Antioxidant Power) Yöntemi

II. Ferricyanide / Prusya Mavisi Yöntemi

III. DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) Yöntemi

IV. ABTS (2,2’-Azinobis (3-etil benzothiazoline-6 sülfonik asit)) Yöntemi

V. FCR (Folin-Ciocalteu) Yöntemi

VI. CUPRAC (Cupric İon Reducing Antioxidant Capacity) Yöntemi

VII. CERAC (Cerium Ion Reducing Antioxidant Capacity) Yöntemi

MEYVELERDE ANTİOKSİDAN TAYİNİ

1. Meyve Tohumlarında Antioksidan Tayini

I. Meyve Tohumlarında Örnek Hazırlama

2. Meyve Kabuklarında Antioksidan Tayini

I. Meyve Kabuklarında Örnek Hazırlama

60

Page 61: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

İ.T.ÜFEN EDEBİYAT FAKÜLTESİ

Sunanlar : Deniz PARA, Onur ERDEBİLDönemi : 2006 - 2007Bölümü : Kimya BölümüKolu : Analitik Kimya

Danışman Öğretim ÜyesiProf. Dr. Birsen DEMİRATA ÖZTÜRK

Page 62: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ÜZÜM VE ÜRÜNLERĠNDE ANTĠOKSĠDAN

MĠKTARLARININ SPEKTROFLOROMETRĠK

OLARAK ĠNCELENMESĠ

Page 63: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

Yasin TaĢtan

2010

Page 64: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ĠÇERĠK

1. GĠRĠġ

2. ALÜMĠNYUM HAKKINDA GENEL BĠLGĠ

2.1. Alüminyum Ġçeren Besinler

2.2. Alüminyumun Sağlık Üzerine Etkileri

2.3. ġebeke Sularında Alüminyum Bulunmasının Sebebi

3. DENEYSEL KISIM

3.1. ġebeke Suyu Numunelerinin Alınması

3.2. Çay Ġnfüzyonlarının Hazırlanması

3.3. Alüminyum PiĢirme Kapları Analizi Ġçin Numunelerin Hazırlanması

4. SONUÇLAR VE DEĞERLENDĠRME

4.1. Lineer Kalibrasyon Doğrusunun OluĢturulması

4.2. ġebeke Suyu, Maden Suyu, Ġçme Suyu ve Çay Örneklerinde Yapılan Analizler

4.3. Alüminyum PiĢirme Kaplarından Suya Geçen Alüminyum Miktarı

4.4. Standart Ekleme Yöntemi ile Yapılan Analiz ÇalıĢması

Page 65: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ATIKSULARDAN BOYA GİDERİMİ

İÇİN YENİ BİR YÖNTEM

Hazırlayan: Ayça Özdemir

DanıĢman: Prof. Dr. Birsen Demirata Öztürk

Page 66: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

ÇalıĢmanın Kapsamı:

ÇalıĢmanın Anlam ve Önemi

Deri Endüstrisi

– Deri Endüstrisi Genel Tanımı

– Deri Endüstrisinde Yer Alan Prosesler

– Deri Endüstrisinde Alt Kategorizasyon

Deri Endüstrisinde Atıksu Karakterizasyonu

– Atıksu Özellikleri

– Standartlar

Boya ve Boyarmadde

Atıksulardan Renk Giderim Yöntemleri

Adsorpsiyon

Deneysel ÇalıĢmalar

Sonuçlar

Sonuçların Değerlendirilmesi

Page 67: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

SÜT TOZUNDAKİ MELAMİNİN FT-NIR SPEKTROSKOPİSİ İLE

TAYİNİ

B. Demirata Öztürk* and C. İnegöllü

* İstanbul Teknik Üniversitesi, Fen-Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölümü, 34469, Maslak-İstanbul, Türkiye

Page 68: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

SÜT TOZUNDAKİ MELAMİNİN FT-NIR SPEKTROSKOPİSİ İLE TAYİNİ

Özet

► Bu çalışmada süt tozundaki melaminin tayini için YakınInfrared spektroskopisi (Near Infrared Spectroscopy –NIRS) kullanılmıştır. Partial Least squares (PLS) modeliseçilerek melamin konsantrasyonlarına ait bir kalibrasyongerçekleştiilmiş ve korleasyon katsayı R2>0.99 olarakbulunmuştur. Bu metod ile çok az bir numune hazırlığınagerek duyulmaktadır. Analiz süresi 1 dakikadan az olarakgerçekleşmektedir.

► ANAHTAR KELİMELER: Melamin; FT-NIR; Süt tozu; HPLC, SPE

Page 69: PROJE DANIġMANLIĞI EĞĠTĠMĠ ÇALIġTAYI ÇANAKKALE 2012maycalistaylari.comu.edu.tr/maycalistaylari/phocadownload/userupload/... · Antioksidan tayin yöntemlerinin reaksiyon

GOZDE M. KAMER

ISTANBUL TECHNICAL UNIVERSITY

2011, APRIL

SUPERVISOR: Prof. Dr. BIRSEN DEMIRATA OZTURK