826 Archives Internationales de Physiologie ef de Biochimie, 1965, 73 ( 5 ) .

R e p le 6 octobre 1965.

L’EFFET ADIPOKINfiTIQUE DU CHOC ANAPHYLACTIQUE

CHEZ LE COBAYE

PAR

M. GRUNSPAN e t L&lia RUSOVICI (Instifut de Physiologie normale et pathologique a D. Danielopolu n

de I’Acaddmie de la Rdpublique populaire Roumaine, Bucarsst. Directeur : Prof. Dr. Gr. Benetato)

C’est SMITH (1962) qui a effectue pour la premibre fois le dosage quantitatif de certains lipides lib6rBs au niveau du poumon de cobaye lors d’une reaction anaphylactique in uitro, provoquke en perfusant I’antigbne par l’artere pulmonaire. Vu que cet auteur a observi! des differences entre le contenu lipidique du poumon de cobaye non-perfuse par Tyrode et celui perfusk par Tyrode, il est d’avis que dans la technique d’anaphylaxie in uitro interviennent certains facteurs qui pro- voqiient des variations dans le taux lipidique mBme du poumon normal. Dans des recherches plus poussees, GOADBY e t SMITH (1962) ont provoque l’anaphylaxie in viuo par un antigbne aerosolisk et ont constate des modifications importantes dans le contenu lipidique du poumon. Cependant, des modifications similaires ont pu Btre provoqukes aussi chez les animaux de contrble ayant r e p de l’eau distillbe sous forme d’abrosols.

Les experiences faites dans les conditions dkcrites plus haut ne sont pas concluantes, vu qu’il est difficile de se rendre compte si les modifications du taux lipidique survenues sont dues a l’intervention de certains facteurs libs 4 la technique d’anaphy- laxie in uitro ou dans le cas de I’akrosolisation de I’antigbne, au stress reprksente par celle-ci.

Les modifications du contenu lipidique du poumon observees chez le cobaye abrosolise pourraient Btre attribubes a une serie d’hormones adipokinetiques, liberees par le stress constituk par I’akrosolisation : ACTH, a-MSH, P-MSH, vasopressine, (( Lipid Mobilising Factor )) (SEIFTER, 1957), fraction H, etc. Lorsqu’ils ont evaluk les variations des lipides pulmonaires pendant une reaction antigkne-anticorps, les auteurs n’ont pas envisage

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EFFET ADIPOKINETIQUE DIJ C H O C ANAPHYLACTIQUE 827

aussi 1’6ventualit6 d’un effet adipokinktique de l’antigkne per se (GORDON, 1955).

Ces faits ont constitub des arguments sufisants pour nous inciter a ktudier si au COWS du choc anaphylactique in uivo ne se produisent pas des modifications des lipides pulmonaires e t si elIes n’intkressent aussi lcs lipides du foie e t du cerveau.

Materiel et methode

Nos recherches portent sur des cobayes de 250-300 g, sensi- bilisks passivement A I’ovalbumine par I’administration intra- phitonbale de 0.5 ml de serum anti-ovalburnine de lapin. Le choc anaphylactique a Cti: declenche a p r h 24 heures par l’injection intra-cardiaquc de 0.4 ml de solution d’ovalbumine 10 %. AussitBt aprhs la mort survenue 2 a 3 minutes apres I’administration de I’antighne, les animaux ont kt6 dkcapites e t le corps mis en position dkclive pour emp$cher le sang de p6nCtrer dans les voies respiratoires. On a prelevk le poumon, le foie e t le cerveau, qui, aprbs dcs lavages r6pktErs par du solute physiologique refroidi a +40, ont 6t6 enveloppks ensuite dans du staniol e t refroidis entre de petits blocs de glace. On n’a choisi pour l’experience que les organes provenant des animaux dont le poumon prbsentait l’aspect caractbristique de broncho- constriction anaphylactique. Chez les tbmoins, la sacrification et le prklevement des organes ont 6tB faits dans les mQmes conditions que pour Ies animaux soumis au choc anaphylac- tique. Dix-huit heurcs avant l’experience, les animaux ont 6te privks d’alimentation, except6 l’eau.

Les 101 cobayes sur lesquels on a travaillk, ont et6 repartis en trois lots :

Lot A (27 animaux). 12 cobayes non-sensibilisks, ont bt6 sacrifiks 60 minutes

aprbs les avoir apportks dans le laboratoire. 15 cobayes non-sensibilisbs ont Ctk sacrifiks 5 minutes apres

leur immobilisation sur la planchette e t aprks l’injection intra- cardiaque de 0.5 ml de solute physiologique. Ce lot a servi de temoins, pour contrbler I’eventuelle action adipokinktique du stress auquel on soumet les animaux conjointement a l’admi- nistration de l’antigkne.

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Lot B (34 animaux). 15 cobayes, sensibilisks passivement a l’ovalbumine depuis

24 heures, ont r e p une injection intra-cardiaque de 0.4 ml de soluti! physiologique et sacrifies 5 minutes aprks I’injection.

19 cobayes sensibilises passivement B l’ovalbumine 24 heures auparavant, ont e t B sacrifies 5 minutes aprBs l’immobilisation sur la planchette et aprbs l’injection intra-cardiaque de 0.5 ml de sbrum de cheval.

Le lot B a servi pour contrbler l’kventuelle action adipo- kinbtique du skrum de cheval p r o t h e hetkrologue indiffkrente).

Lot C (40 animaux). 10 cobayes sensibilises passivement a l’ovalburnine 24 heures

auparavant, ont eti: immobilises pendant 5 minutes sur la plan- chette et ensuite sacrifiks.

Chez 30 cobayes sensibilisks passivement a l’ovalbuminc 24 heures auparavant, on a administre 0.4 ml d’ovalbumine par voie intra-cardiaque; ils ont Btb sacrifies 3 A 4 minutes aprbs l’administration de l’antigkne, c’est-A-dire au moment m6me de leur mort imminente.

Technique d’extraction des lipides. - On a pese rapidement, sur une balance analytique, 1 g de chaque organe appartenant aux animaux des trois lots, en prelcvant en m6me temps 1’Bchan- tillon respectif pour determiner le contenu en eau. Les tissus ont B t B hachks aussitbt et extraits pendant 24 heures dam un melange de chlorophormc mbthanol 2 : 1, ajoutk en proportion de 20 ml/g de tissu, suivant la technique de FOLCH (1957).

Les resultats individuels ont 6ti! exprimes en mg de lipides pour 1 g de tissu sec et la signification des differences entre les valeurs moyennes obtenues chez les trois lots a ete apprecike par le test t a un p < 0.05.

RBsultats

Les valeurs des lipides du poumon, du foie et du cerveau de cobaye, sous l’action de I’antighne specifique, de l’antighe non-specifique et du stress, sont portkes dans le tableau no 1.

On observe que chez les cobaycs non-sensibilisks, le taux lipidique du poumon est de 180 mg, du foie - de 226 mg e t du cerveau - de 426 mg/g de tissu sec (tableau I).

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830 M . GRUNSPAN ET LBLIA RUSOVICI

En utilisant pour I’extraction une technique analogue, SMITH (1962) trouve : 186 mg Iipides/g de tissu sec provenant du poumon non-perfuse d’un cobaye non-sensibilisk.

L’administration intra-cardiaque de 0.4 ml ovalbumine dkter- mine chez les cobayes du lot C une baisse importante des lipides pulmonaires, par rapport aux tkmoins ( p < 0.01).

Les variations des lipides du foie e t du cerveau pendant le choc anaphylactique, sont non-significatives.

L’administration intra-cardiaque de serum de cheval chez 19 cobayes sensibilisks, appartenant au lot B, ne modifie pas le taux des lipides dans le pounion, le foie ou lc ccrveau. Pas de modifications aussi chez les animaux du lot A soumis au stress reprksenti. par l’immobilisation e t la ponction cardiaque.

Discussion I1 ressort de ccs rcchcrchcs que l’administration de l’anti-

gene specifique in viuo chez le cobaye passivement sensibilisk, ne modifie que le taux lipidique du Lissu pulmonaire. Cette dimi- nution a 6t6 niise en Bvidcnce 2 A 3 minutes apres l’administra- tion intra-cardiaque de l’antigene, moment qui coi’ncide d’ailleurs avec le maximum d’intonsitk dcs manifestations cliniques anaphylactiques, qui ont determink la mort de l’animal.

L’absence de modification dans le contenu lipidique du foie c t du cerveau pendant le choc anaphylactique, constitue une preuve en faveur de la specificit6 de l’effet adipokinetiquc au niveau du poumon, qui est l’unique organe de choc dans la rkaction anaphylactique chez cette esphce. Lc manque d’effet adipokin6tique in vivo au niveau du foic va de pair avec l’abscnce de la libkration du S.R.S.A. dans le foie des animaux lors de la rkaction antigkne-anticorps produite in vitvo avec des fragments de foie provenant d’un cobaye scnsibilisk (BROKLEHURST, 1960).

Une autre preuve en faveur de la prksomption que I’efTet arlipokinktique cst dQ spkcifiqucmcnt a la rkaction antigkne- anticorps e t non pas A l’action d’unc: protkine etrangbre, est le fait que le si.rum de cheval scul ne modifie pas lc taux lipidique du poumon de cobaye.

On n’a pu mettre en evidence pendant Ics 5 minutes de stress (immobilisation ct injection intra-cardiaque de soluti. physio- logiquc) , stress analogue A cclui dhtcrmink par I’administration intra-cardiaque de l’antigbne, des modifications du taux lipi-

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dique du poumon. C’cst pour cela qu’on n’a pu incriminer un m6canisme adipokin6tiquc hormonal non sp6cifique dans les modifications des lipides pulmonaires, survenucs au cows du choc anaphylactique.

Ainsi qu’il ressort de nos expkrienccs in uiuo, la liberation de lipides pulmonaires au cours du choc anaphylactique, est due probablcment a la reaction antigkne-anticorps, ct tkmoigne que les lipides jouenl un r61e important clans la pathoghie du choc anaphylactique. Il’ailleurs le S.R.S.A. libkrk a partir du poumon de cobaye par diverses techniques d’anaphylaxie in uitro (ANGAARD, BERGQUIST, HOGBERG, JOHANSSON, THON and UVNAS, 1 9 5 3 ; BROKLEHURST, 1960 ; CHAKRAWARTY, 1 9 5 9 ) est une substance de nature lipidique. Les substanccs lipidiques, et spkialement les phospholipides, dont le poumon est riche, ont en outre la propriBt6 de licr l’histamine (LINDHALL, 1 9 5 5 ) .

Summary

By means of the tcchnic of Folch we have stated the changes in the total amount of the lipids of the lung, liver and brain for the ovalbumin scnsitized guinea pigs.

We have noted that in uiuo administration of the specific antigen rriodifirs significantly tlic lipid content of the lung only.

The stress constituted by immobilisation, handling of the ani- mal, the cardiac punction, and the cardiac injection of a hetero- logous protcin does not modify the lipid content of the guinea pig lung.

I t is concluded tha t anaphylaclic reactions lrad to changes in the lipid content of the lungs. Since such changes occur during anaphylactic shok provoked in vivo they may have important pathogenic implications.

BIBLIOGR4PIIIE

1 . ANGAARD, E., BERGQUIST, U., IIBGRERG, R., JOHANSSON, K.,THoN, I . L.and

2. BROKLEHURST, W. E. (1960). - J . of Phys io l . , 151, 416. 3. CEIACR~WARTY, N. (1959). - Aeta Physiol. Stand., 46, 2998. 4. FOLCH, J., LEES, % I . and ST~JXI.AY, 1-1. S. (1957). - J . R i d . Chem., 226, 497. 5. GOADRY, P. and SMITI~ , W. G. (1962). - J . Pharrn. a Pharrnacol., 14, 739.

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