SEMINARIO DE INMUNOLOGÍA

Universidad Central de Venezuela

Facultad de Medicina

Escuela Luis Razetti

Cátedra: Fisiología Normal

Profesora: Dra. Ana Blanco

Integrantes:Anyelina Blanco

Caracas, marzo de 2013

INMUNODIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

En esta técnica el antígeno y el anticuerpo difunden en un medio semisólido hecho de un agar claro. Cuando el antígeno y el anticuerpo están en una proporción óptima, se efectúa un estilo de cruce entre ambos, formando un precipitante insoluble, llamando líneas de precipitación. Estas líneas son utilizadas para visualmente identificar similitudes entre antígenos.

IDENTIDADCOMPLETA

Epítopes en comúnLínea de precipitación

fusionada por completo

IDENTIDADPARCIAL

Algunos Epitopesen común.

Formación de arco discontinuo.

NO-IDENTIDAD

No poseeNingún determinanteantigénico en común.Líneas interceptadas

En forma de X.

INMUNODIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

1 2 3 4 5

6

INMUNODIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

MATERIALES

1.- Albúmina de Cabra anti-humana( Cabra A-H).

2.- Albúmina de Cabra anti-bovina (Cabra A-B).

3.-Suero bovino de Albúmina (BSA).

4.-Suero Humano de Albúmina (HSA).

5.-Antígeno desconocido.

6.-Cápsula de Petri con agar claro.

INMUNODIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

APERTURA DE 5 POZOS: Pozo 1 con la albumina de cabra anti-humana cabra(a-b). Pozo 2 con el suero bovino con albúmina (bsa). Pozo 3 con el suero bovino con albúmina. Pozo 4 con suero humano con albúmina. Pozo 5 con el antígeno desconocido.

Tiempo de espera 16 horas.

InterpretaciónDe resultados

2 – 3 Identidad completa combinación Ag-Ac formando una línea

continua

5-2 3-4Identidad parcial

línea continua con un espolón

No-identidaddos líneas que se

entrecruzan

INMUNODIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

LA CITOMETRÍA DE FLUJO  La citometría de flujo (CMF) es una

técnica de análisis celular multiparamétrico  cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensión de partículas  (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado

¿QUÉ SE PUEDE ANALIZAR POR CITOMETRÍA DE FLUJO?

Proteínas extracelulares Secuencias de ADN o ARN

libres Complejos inmunes

circulantes Liposomas Cromosomas aislados Orgánulos aislados Núcleos aislados Bacterias Hongos unicelulares Células humanas y animales Protoplastos vegetales Organismos pluricelulares

Designación Reconoce Estructura molecular

familia

Funciones conocidas o propuestas

CD71 Receptor de transferrina

Homodimero de cadenas de

95 KD

Reconocer eritrocitos

inmaduros o reticulocitos

CD71+

GRACIAS