departamento de laboratorios

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Guía práctica de operación, calibración y descripción de los instrumentos analíticos del laboratorio de Análisis Instrumental

Cd. Obregón, Sonora. 23 de Abril del 2009 Responsable: M. en C. Roberto García Rodríguez

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS

Hojas de Operación, calibración y descripción general de los instrumentos analíticos del Laboratorio LV-512. Contenido 1. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTRONIC 20 Y 21 D 2. Descripción. Spectronic 20 3. Descripción : ESPECTRONIC 21 D 4. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 20 5. Descripción. GENESYS 20 6. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 5 7. Descripción. ESPECTROFOTÓMETRO GENESYS 5 8. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: REFRACTOMETRO DE ABBÉ 9. Descripción. Refractómetro Abbè 3L 10. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POLARÍMETRO SR-6 11. Descripción: POLARÍMETRO SR-6 12. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: CONDUCTIMETRO YSI 31 13. Descripción. CONDUCTIMETRO YSI 31 14. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: CONDUCTIMETRO YSI 32 15. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POTENCIOMETRO 16. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POTENCIOMETRO HI991003 HANNA 17. Descripción. Medidor de pH portátil HI 991003 HANNA 18. Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA SPECTR AA 50 / 55 VARIAN. 19. Descripción. Espectrómetro de Absorción Atómica. SPECTR AA 50 / 55 VARIAN Anexos. Relación y número de instrumentos Tarjetas indicadoras de servicio

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTRONIC 20 Y 21 D

MANEJO

1. Conectar el enchufe con la corriente de laboratorio. 2. Encender el botón de corriente oscura (B), girando hacia la derecha. 3. Seleccionar la longitud de onda en la escala, con el botón de longitud de onda (D). 4. Girar el control de corriente oscura (B), para llevar la aguja a cero en la escala de transmitancia. 5. Colocar la cubeta con la solución testigo en el receptáculo (A), colocar la cubierta del receptáculo. 6. Girar el control de ajuste del 100% de transmitancia (C) para llevar la aguja al 100% de transmitancia. 7. Sacar la cubeta de la solución testigo y sustituirla por la cubeta de la solución problema. Llevar a cabo la

lectura. 8. Para apagar el aparato girar el botón de corriente oscura hacia la izquierda y desconectar el enchufe.

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Descripción. Spectronic 20

Estos espectrofotómetros cubren una variedad de propósitos generales y aplicaciones de control de calidad ideales para bioquímica, química medioambiental, control de calidad en alimentos, y todo tipos de agua que se realizan en laboratorios El auto ajuste a cero ahorra tiempo entre las muestras y reduce errores potenciales. El control de ajuste de longitud de onda ofrece que el extremo de rango previene mantener calibración y evitar daño. filtros internos automáticamente ajustan el interruptor para seleccionar la longitud de onda. Incluye: doce tubos de prueba de 1mm de diámetro, adaptador de cuveta, manual, tapa cubre polvo, y cordón de 7 ft de longitud. Para operar a 115 VAC.

Especificaciones Espectronic 20

Rango de longitud de onda 335 a 1000 nm

Exactitud de longitud de onda ±2 nm

Rango fotométrico Transmitancia: 0 a 125% T

Absorbancia: 0 a 2 A

Ancho de banda 20 nm

Demanda de luz <0.5%T en 340 nm y 400 nm

Pantalla unidades de A y %T

Lámpara fuente Tungsteno

Detector Silicon estado solido

Salida 0 a 1.0 VDC

Voltaje de trabajo 115/230VAC ajustable

50/60 Hz

Dimensiones 16-1/4"W x 7-1/8"H x 12-1/8"D

Peso 19 lb (8.7 kg)

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Descripción : ESPECTRONIC 21 D

Los filtros ópticos incluidos reducen la selección de la longitud de onda de la característica de la luz externa SPECTRONIC® 21, la perilla de power/zeroing, y el control de T/A. La salida análoga es ajustable a partir de la 0 a 1.0 VDC-UTILIZA con un registrador de carta o un dispositivo digital de la lectura. Los espectrofotómetros incluyen doce 1/2"cubetas del tubo de prueba del diámetro y adaptadores de la muestra, el manual operador, el protector contra el polvo, y 6-pie de cuerda con el enchufe (ESTADOS UNIDOS estándares o europeos). Especificaciones: Spectronic 21D

TIPO Análogo Detector Sólido-estado silicio

Modelo SPECTRONIC 20+ Salida 0 a 1.0 VDC

Gama de long. De onda

340 to 950 nm VAC/Hz 220 VAC/ 50/60 Hz

Exactitu de la long. De oda

±2.5 nm cerca 525 nm Dimensiones 16-1/4"W x 8-1/2"H x

13"D

Rango fotométrico Transmitancia: 0 a

100% T Absorbancia: 0 a 2 A

Anchura de banda 20 nm

Luz externa <0.5% cuando el filtro de luz es el apropiado

para utilizarse

Exhibición 5-1/2" escala reflejada

Lámpara de la fuente Tungsteno

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 20

1. Encender el instrumento, en la parte posterior tiene el botón de encendido. 2. Colocar el blanco dentro del compartimiento de muestra en un tubo de 10 mm 3. Seleccionar la longitud de onda en el botón gto n n= 325 a 1100 nm 4. Seleccionar el modo de lectura en el botón A/%T/C (Absorbancia, % Transmitancia y

Concentración). 5. Ajuste a cero con el blanco; oprimir la tecla “zer” y A=0 ; %T= 100 6. Oprimir el botón “medir” y tomar la lectura correspondiente. 7. Correr la curva estándar y muestras. Hacer los cálculos correspondientes.

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Descripción. GENESYS 20

ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 20

Rango de longitud de onda

325 a 1100 nm

Longitud de onda de trabajo

±2.0 nm

Rango fotométrico 0 to 125% T, -0.1 to

2.5 A, 0 to 1999 C

Precisión fotométrica

0.003 A from 0.0 to 0.3 A, 1.0% from 0.301 A to 2.5 A

Ruido fotométrico <0.001 A at 0

A,<0.002 A at 2 A

Corriente fotométrica dispersa

<0.003 A/hour

Ancho de banda 8 nm

Desviación de la luz <0.1% T at 340 and

400 nm

Desviación de la luz <0.1% T at 340 and

400 nm

Presentación en pantalla

Two-line, twenty-character LCD

Fuente de lámpara TungstenO

Detector Solid-state

Salida Bidirectional RS-232, Centronics® printer

port

Dimensión 12"W x 13"D x 7"H

Voltaje de operación 110 VAC ±10%, 60 Hz,

±2 Hz

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 5

Manejo

1. Encendido. Botón del lado derecho del instrumento 2. El instrumento hace un escaneo en forma automática, donde valida los parámetros de cada una de sus

unidades electrónicas, ajuste de lámparas, alineación del portamuestras de 8 posiciones. 3. En la pantalla aparece una longitud de onda por de manera automática, misma que puede ser

cambiada. 4. Selección de longitud de onda de análisis. Seleccionar λ en el teclado, y dice “go to” , luego escribir el

número de longitud de onda correspondiente. Goto WL limites 200 a 1100 nm. 5. Oprimir la tecla que dice ID es para identificar la posición del blanco, muestras etc. 6. Oprimir en MODE A, %T/C 7. Colocar el blanco en su posición, colocar las muestras en orden ascendente de concentración de las

soluciones estándares y al final la o las muestras 8. Oprimir Medir (measure). Si desea oprimir Menú principal y seleccionar , fecha, lámpara de uso, apagar

lámpara que no use, etc.. 9. Intercambiar lámpara. . Solo especificar la longitud de onda deseada y esta se selecciona

automáticamente la lámpara de tungsteno o de halógeno, luego presionar enter y luego exit. 10. Si se usan tarjetas, ír a File manager, con el disco que contiene el software de cinética, análisis de

bebidas (color, fosfatos, azúcar…. Estos archivos contienen todos los parámetros a medir y sus valores. 11. Utilería. Utility.- Funciones que aparecen en pantalla.(intercambio de lámpara UV/VIS, fecha, hora,

lenguaje , gráfica, imprimir. Seguir las instrucciones de pantalla.. Observaciones. Si los estándares o las muestras se salen de los valores límites de absorbancia ( 0-2 ), se tiene que hacer diluciones para que estos datos, sean graficados.

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Descripción. ESPECTROFOTÓMETRO GENESYS 5

Descripción Maneja una amplia gama de aplicaciones de rutina y para investigación. Da medidas en absorbancia, transmitancia y en concentración. Las lámparas de tungsteno y de halógeno, son alineadas de manera automática al encender el instrumento, Análisis preciso, automatizado de muestras múltiples. Incluyen a un sujetador de multiceldas de ocho-posiciones que acepta a ocho tubos de10 mm. El teclado pequeño confirma entradas con toque y tono. La pantalla LCD despliega los parámetros de la prueba, datos, gráficos, prueba resultado y estado del instrumento completo, Utiliza programas de software “SoftCard” programa que permite el arreglo rápido de parámetros para las pruebas específicas; obteniendo curvas de control, absorbancia, cinéticas avanzadas en bioquímica, viendo en pantalla el avance de una cinética, imprimir los datos obtenidos, ver la gráfica obtenida junto con el valor de la muestra o muestras.. Características Ancho de apertura del espectro: 5 nm Pantalla LCD: grafico monocromático Ruido (a 0A): ±0.0015A a 340nm · Velocidad de detección: 300 nm/min. (1pt/1nm) o 900 (1pt/3 nm) el · Rango de Longitud de onda: 200 - 1100 nm Opciones disponibles Incluye: 2 Tarjetas Milton Roy Aplicación (Cat. No. 33-60-90-02) · Tarjeta de Memoria Milton Roy 128K (Gato. No. 33-60-90-20)· 4 Células Cilíndricas de Vidrio : 4" la longitud, 0.88" de Diámetro

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Especificaciones técnicas Sistema óptico Split-Beam (doble haz) Célula-sujetador 8-posiciones, controlada por el Microprocesador Puertos de comunicación RS-232-C (Serie) / Centronics-compatible (Paralelo) Longitud de onda Rango 200 - 1100nm Exactitud ±1nm Precisión ±0.5nm (ASTM E 275-83) Fotométrico Lectura Absorbancia, %Transmitancia y Concentración Rango -0.1 a +3.0A; 0 a 125%T; 0.001 a 9999 Exactitud ±0.003A de 0 a 0.3A, ±1% de Lectura de 0.3 a 2A, ±2%

de Lectura de 2 a 3A Ruido eléctrico 0.002A/hora a 340nm Pérdida de Energía Radiante 0.05%T a 220, 340, y 400nm

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS

Guía práctica de operación y calibración del instrumento: REFRACTOMETRO DE ABBÉ

MANEJO

1. Asegurase que el instrumento este limpio y en condiciones de trabajo. Comprobar que los prismas estén limpios y secos.

2. Poner a funcionar el dispositivo de control de la temperatura y ajustarse a 20º C 1º C. encender la lámpara (L) esperar 15 minutos.

3. Girar la cabeza moleteada (A) para separar los prismas (B). Colocar una gota de la muestra problema en el prisma inferior y cerrar los prismas. Se deben tomar precauciones especiales para no tocar o rayar los prismas.

4. Ajustar el tornillo de dispersión del telescopio (C) de tal manera que la línea divisora entre las mitades iluminadas y oscuras sean tan definidas como se pueda. Si la línea que divide al campo no resulta definida y no es posible distinguir fácilmente las 2 zonas, colocar una hoja de papel blanco cerca de la lámpara.

5. Mover el brazo de telescopio de lectura (D) hasta que la línea divisora corte la intersección del retículo (E). Girar el botón de enfoque del ocular (F) de tal forma que el retículo se observe con claridad.

6. Accionar el botón (G) para observar la escala en el ocular. Leer el índice de refracción, estimando la cuarta cifra decimal.

7. Desconectar el elemento de calentamiento si es que se esta usando, y suspender el flujo de agua. 8. Abrir los prismas y limpiar con un paño suave y humedecido con un poco de alcohol. No se debe verter

directamente alcohol sobre los prismas. 9. Cerrar los prismas y poner la cubierta del instrumento. (El polvo es muy dañino al sistema óptico).

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Descripción. Refractómetro Abbè 3L

Estos refractómetros Abbè le permiten una lectura exacta del índice refractivo de líquidos y sólidos. El modelo 02940-02 normal y el modelo de alta precisión 02940-04 permiten lecturas de escalas RI y "% Brix permitiendo ver ambas balanzas al mismo tiempo a través de la mirilla. Ponga su muestra en el prisma principal cubierto con acero limpio para prevenir corrosión. El prisma secundario escarchado dirige luz uniformemente al prisma principal, y se levanta para la colocación fácil de sólidos y líquidos viscosos en el prisma principal. Construir-en iluminador la luz estable, monocroma proporciona (589.3 nm), haciendo fácil de leer las líneas negras en el campo verde. El control de color del compensador le permite ajustar la línea del límite para mejorar la claridad. Usar el control de compensación de color en el refractómetro y la tabla de conversión para medir la dispersión (la variación de RI con longitudes de onda diferentes de luz). Modelo de alta-precisión 02940-04 rasgos de exactitud de ±0.05% (% Brix) y ±0.0001 (RI). Un control dual en el refractómetro permite el enfoque rápidamente la línea límite, ajuste a punto para la mejor resolución Incluye: Unidad de despliegue de temperatura de 43/8"W x 33/16"H x 4"D, solución normal (4-mL de monobromonaftaleno), un desarmador para el ajuste de la balanza (modelo 02940-04 incluye una llave allen), y un cordón de 5-ft con tapón tres-dientes.

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Especificaciones Refractómetro ABBÉ 3L

Rango 0 a 95.0% Brix.

1.3000 a 1.7000 RI

Resolución 0.5% Brix. 0.001 RI

Exactitud ±0.1%, ±0.0002

Despliegue 3-digitos LCD

Volumen de muestra 0.2 mL

Voltaje 115 VAC, 50/60 Hz

Exactitud de Temp. ±0.2ºC

Dimensiones 7-1/16"W x 9-1/16"H

x 5-1/8"D

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS

Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POLARÍMETRO SR-6

MANEJO 1. Conectar a la corriente eléctrica y encender la lámpara (L) y esperar que esta emita una radiación

constante. 2. Girar el vernier (A) hasta que el cero quede opuesto al cero de la escala semicircular (B). 3. Ajustar el campo visual (C) hasta que aparezca una línea divisora a mitad del campo

perfectamente enfocada. 4. Si al realizar el paso anterior no coincide el cero de la escala semicircular con el cero del vernier,

anotar la desviación observada para efectuar la compensación apropiada en posteriores determinaciones.

5. Colocar el tubo con la muestra en la cámara de medición (D) con la parte ancha hacia arriba. Proteger con la cubierta la cámara.

6. Observar el campo visual a través del ocular y determinar la dirección del giro del rayo de luz. Si la parte oscura aparece a la derecha entonces la muestra es dextrorrotatoria; si aparece a la izquierda es levorrotatoria.

7. Girar el vernier en la misma dirección de la rotación, hasta que se iguale la brillantez en el campo visual.

8. Leer el grado de rotación óptica en la escala semicircular, tomando en cuenta la escala del vernier.

*Llenado del tubo de muestra Llenar el tubo completamente con la muestra por el extremo angosto, teniendo cuidado de no formar burbujas de aire. Cuando el tubo este lleno, deslizar el disco protector que deberá estar limpio y seco; cerrar este extremo sin apretar demasiado. Es esencial que el tubo no sea introducido húmedo en la cámara de medición por lo que se recomiendo usar un trapo seco para limpiar el tubo y el disco. Además el tubo con la muestra no deberá permanecer en la mano por mucho tiempo, ya que puede interferir en la capacidad para desviar la luz.

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Descripción: POLARÍMETRO Especificaciones Polarímetro

Rango +90º a -90º

Resolución 0.1º

Exactitud ±0.1°

Longitud del Tubo 220 mm (un tubo

incluido de 100 mm)

Fuente de Luz Lámpara de halógeno

Dimensiones 5"W x 15"H x 15"D

Voltaje de operación 110 VAC, 50/60 Hz

Las piezas de visión inclinados hacen más cómodas y fáciles las lecturas

Ideal para laboratorio general o los propósitos de capacitación

Use el polarímetro manuales de Schmidt & Haensch para determinar concentraciones de azúcares, perfumes, y muchas otras soluciones ópticamente activas. Escoja de dos longitudes de onda de luz polarizada: sodio (589 nm) o mercurio (546 nm). la luz de la longitud de onda De sodio es ideal para medida de azúcar o las aplicaciones generales; la luz de longitud de onda de mercurio es más específica para las aplicaciones farmacéuticas.

Se ajustan los prismas polarizador y analizador con sus filtros. El filtro es un disco de cuarzo de dos pedazos delgados que produce un campo dividido de vista a través del ocular. El ocular está unido al analizador. El polarímetro se inclina 15° de lo horizontal qué hace mejor funcionamiento y cómodo. El tipo de luz usado en el analizador determina el ángulo de la media sombra: la luz de sodio tiene un 8° ángulo y la luz del mercurio tiene un 9.5° ángulo.

El polarímetro vienen con una lámpara de halógeno de larga vida que está inmediatamente lista para usar que cuando la unidad se cambia que no necesita tiempo del precalentamiento. El polarímetro acepta tubos para la muestra de hasta 220 mm. De longitud

Cada polarímetro incluye una unidad de la iluminación, lámpara de halógeno, tapa de polvo de plástico, celdas de varias medidas, filtro de la interferencia, y un cordón de 5 ft de longitud.

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS

Guía práctica de operación y calibración del instrumento: CONDUCTIMETRO YSI 31

MANEJO

1. Conectar a la corriente y encender con el botón (A).

2. Verificar que las celdas estén conectadas.

3. Dejar que el aparato alcance la temperatura de operación.

4. Abrir la sensibilidad a lo máximo con el botón (B).

5. Calibrar el aparato con una solución de cloruro de potasio 0.01 N, sumergiendo la celda hasta el nivel señalado. Colocar la escala correspondiente con el botón (C), de acuerdo a la máxima abertura de la sombra en el ojo mágico (O), definir bien esa abertura con el botón (D). Tomar la lectura en la escala la cual debe tener a 25º C una conductividad específica de (0.0014118 mhos/cm); 1.4118 milimhos; 1411.80 micromhos/cm (

6. Cuando se ha verificado que la conductividad específica de la solución es correcta a la temperatura indicada, se procede a enjuagar la celda con agua destilada y posteriormente 2 a 3 veces con la muestra problema. Se procede a efectuar la lectura siguiendo los pasos anteriores.

7. Si no se obtiene abertura en el ojo, puede ser que la conductividad específica sea inferior a 0.15mmhos/cm o mayor a 15 mmhos/cm, en el primer caso se procede a tomar la lectura girando el botón (A) y colocándolo en la función (Line). En el segundo caso se recomienda diluir la muestra.

8. Realizadas todas las lecturas se cierra toda la sensibilidad con el botón (B), se apaga con (A) y se desconecta el aparto.

9. La conductividad es determinada por la multiplicación de la conductancia de la solución medida y la constante de la celda. Tener cuidado de observar la constante de la celda.

Solución de 0.01 N KCl (0.07456g de KCl en 1000 ml de agua)

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Descripción. CONDUCTIMETRO YSI 31

DESCRIPCION GENERAL. El Puente de conductividad YSI Modelo 31A, es un instrumento para laboratorio diseñado para medidas de precisión de ambas resistencias eléctricas y de la conductancia de las soluciones. Rango de medición: 0.2 ohms a 2.5 megohms (Resistencia) 0.2 micromhos a 2.5 mhos (Conductancia) Voltaje: 95 a 125 VCA , 50 – 60 Hz, 0.125 amp, 10 wats.

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Guía práctica de operación y calibración del instrumento: CONDUCTIMETRO YSI 32

Celdas con K= 0.1, 1.0, 1.5, 2.0

MANEJO

1. Conectar a la corriente y encender con el botón a un lado del equipo. 2. Verificar que las celdas estén conectadas. En conectores azules + y - 3. Dejar que el aparato alcance la temperatura de operación. 20 minutos 4. Calibrar el aparato con una solución de cloruro de potasio 0.01 N, sumergiendo la celda hasta el

nivel señalado. Colocar la escala correspondiente (200 micromhos/cm) con el botón (C), Tomar la lectura digital. Debiendo tener a 25º C una conductividad específica de (0.0014118 mhos/cm); 1.4118 milimhos; 1411.80 micromhos/cm (

5. Cuando se ha verificado que la conductividad específica de la solución es correcta a la temperatura indicada, se procede a enjuagar la celda con agua destilada y posteriormente 2 a 3 veces con la muestra problema. Se procede a efectuar la lectura en la muestra siguiendo los pasos anteriores.

6. Si no se obtiene la lectura y aparecen error, puede ser que la conductividad específica sea inferior a la escala del dial, cambiar a la siguiente escala 20 micromhos y en su caso cambiar a la escala de 200; esto es con el fin de encontrar la conductividad real de la solución problema. Se recomienda hacer una o dos diluciones de la muestra en caso de salirse del rango de medición.

7. La conductividad es determinada por la multiplicación de la conductancia de la solución medida y la constante de la celda. Tener cuidado de observar la constante de la celda, (K)

Solución de 0.01 N KCl (0.07456g de KCl en 1000 ml de agua)

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS

Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POTENCIOMETRO

MANEJO 1. Conectar a la corriente. 2. Dejar que el aparato alcance la temperatura de operación. 3. Inspeccionar que los electrodos, vidrio y colomel (o uno sólo si el aparato posee el electrodo de

combinación), estén correctamente conectados. 4. Se sumergen los electrodos en solución buffer. 5. Tomar la temperatura de la solución buffer. 6. Ajustar ese valor en el control de temperatura (B). 7. Cambiar el control principal (A) a la función pH. 8. Leer el valor de pH del buffer en la escala del medidor (C). 9. Si no se obtiene en la lectura anterior el valor de pH especificado del buffer, calibrar con el control

de calibración (D) hasta obtener ese valor. 10. Cambiar el control principal (A) a la función (Stand by). 11. Limpiar los electrodos con agua destilada, secarlos y sumergirlos en la muestra problema. 12. Tomar la temperatura y ajustar ese valor con el control de temperatura (B) 13. Cambiar el control principal (A) a la función pH. 14. Leer el valor de pH de la muestra problema en la escala del medidor (C), colocar el control principal

(A) en la función Stan by, seguir con las otras muestras como se indico anteriormente. 15. Una vez terminadas esas lecturas, colocar el control principal (A) en el stand by, lavar los

electrodos, los cuales deben quedar sumergidos en agua destilada. Desconectar el aparato.

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DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS Guía práctica de operación y calibración del instrumento: POTENCIOMETRO HI991003

HANNA

1. Encendido y apagado. Switch ON/OFF: presionar ON/OFF/MODE 2. Para seleccionar el rango, pH/pHmV/ORP(mV): presionar SET/HOLD 3. Para liberar , presionar SET/HOLD hasta que aparezca HOLD en la pantalla 4. Tomar lectura. Conectar electrodo cuando el medidor de pH esté apagado, remover

la capa protectora, encienda el equipo, colocar el electrodo en la muestra (buffer), agitar suave, y esperar hasta que el símbolo del reloj en pantalla se inactive.

5. Modo de calibración: Con el rango de pH seleccionado, presionar ON/OFF/MODE hasta que aparezca CAL en pantalla. Libere la presión en el botón y un mensaje aparece en pantalla “pH 7.01 USE” (or “pH 6.86 USE).

Procedimiento de calibración del pH. Procedimiento para dos puntos.

1. Colocar el electrodo en un buffer de pH 7.01 o 6.86 2. Después de que el primer punto es aceptado, un mensaje aparece “pH 4.01 USE” 3. Colocar el electrodo en el buffer de pH 4.01 o 10.01 4. Cuando el segundo punto es aceptado, el mensaje “OK 2” aparece y el medidor

regresa a su modo normal. 5. Cuando los valores de pH de calibración han sido aceptados, el botón

ON/OFF/MODE debe ser presionado para retornar al modo normal..

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Descripción. Medidor de pH portátil HI 991003 con comprobación en el sensor

El HI 991003 es un medidor portatil de pH / pH-mV / ORP / temperatura con función de comprobación en el sensor que permite al usuario determinar el estado del electrodo antes de realizar las mediciones.

A través de su pantalla de LCD el usuario puede visualizar las mediciones en pH / temperatura u, ORP / temperatura asÍ como el porcentaje de batería al encender el equipo, indicador de estabilidad, entre otros.

Su electrodo de pH/ORP cuenta con un sensor de temperatura interconstruído para lecturas de pH/temperatura ó mV/temperatura, con tan sólo pulsar un botón de selección de intervalo. Además contiene un miniamplificador para proporcionar lecturas inmunes al ruido. El cuerpo metálico de este electrodo reduce la interferencia electromagnética.

Carcasa Impermeable. Pantalla grande de LCD con dos líneas de caracteres Intervalo extendido para pH, mV y temperatura

Especificaciones HI 991003

Intervalo pH -2.00 a 16.00

pH(en mV) ±825 mV

ORP ±1999 mV

°C 5.0 a 105.0 °C

Resolución pH 0.01

pH(en mV) 1 mV

ORP 1 mV

°C 0.1

Exactitud pH ±0.02

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pH(en mV) ±1 mV

ORP ±2 mV

°C ±0.5ºC hasta 60ºC; ±1ºC hasta 105ºC

Desviación EMC Típica pH ±0.02

pH(en mV) ±2 mV

ORP ±2 mV

°C ±0.2

Calibración de pH Automática a 1 ó 2 puntos con 2 soluciones estandarizadas (4.01, 7.01, 10.01,ó 4.01, 6.86, 9.18)

Compensación de Temperatura

Automática de -5.0 hasta 105ºC

Condiciones de Trabajo 0 a 50ºC; RH 100%

Dimensiones 150 x 80 x 36 mm

Peso 245 g

HI 991003 se suministra con electrodo pH/ORP/Temperatura HI 1297D, 3 baterias 1.5V AA, maletín de transporte y manual de instrucciones.

Nueva cubierta de Titanio que proporciona mayor resistencia mecánica al sistema, en aplicaciones de campo.

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Descripción. Espectrómetro de Absorción Atómica. SPECTR AA 50 / 55 VARIAN La espectroscopia de absorción atómica usa la absorción de la luz para medir la concentración de la fase gaseosa de átomos. Ya que la mayoría de las muestras son sólidas o líquidas, los átomos o iones de los analitos deben ser vaporizados a la flama o en un horno de grafito. Los átomos absorben luz visible o ultravioleta y hacen transiciones a niveles de energía más altos. La concentración del analito es determinada por la cantidad de absorción. Aplicando la ley de Beer-Lambert directamente en la espectroscopia AA es difícil debido a la eficiencia de la atomización de la muestra de la matriz y a la no-uniformidad de la concentración, y a la longitud de la trayectoria de los átomos del analito. Las mediciones de concentración son generalmente determinadas de una curva de calibración, después de haber calibrado el aparato con los estándares de concentración conocida.

Instrumentación Fuente de luz. La fuente de luz usualmente es una lámpara de cátodo con vacío de los elementos a ser medidos. Los láseres son también usados en estos instrumentos. Los láseres son suficientemente intensos para excitar los átomos a mayores niveles de energía, esto permite a las mediciones de AA y fluorescencia atómica en un solo instrumento. La desventaja de estas angostas bandas de luz es que solo se puede medir un elemento a la vez. Los espectrómetros de AA usan monocromadores y detectores de luz visible y UV. El principal propósito de un monocromador es separar la línea de absorción del fondo de la luz debido a las interferencias. Los instrumentos de AA reemplazan a los monocromadores con filtro de interferencia band pass. Los tubos fotomultiplicador son comúnmente usados como detectores de espectroscopia AA. Atomizador. La espectroscopia de AA necesita que los átomos se encuentren en fase gaseosa. Los átomos e iones de la muestra deben sufrir desolvatación y vaporización a altas temperaturas como en el horno de grafito o la flama. La flama de AA solo puede ionizar soluciones analíticas, mientras que el horno de granito puede aceptar soluciones, mezclas o muestras sólidas. La flama de AA usa una hendidura de tipo mechero para incrementar la longitud de la trayectoria y así incrementar la absorbancia total. Las muestras líquidas son aspiradas por un flujo de gas hacia una cámara de nebulación/combinación para formar gotas pequeñas antes de entrar a la flama. Atomización a la flama. En la atomización a la flama la muestra es primero convertida en una suspensión de gotitas de la solución. Esto se logra usando un ensamble nebulizador. La muestra es aspirada en una cámara de spray pasando un vapor a alta presión que consiste de uno o más gases de combustión, pasa al final de un tubo capilar sumergido en la muestra. El impacto de la muestra con el vidrio produce gotas en una solución en aerosol. La suspensión en aerosol se combina con los gases de combustión en la cámara de spray antes de pasar al quemador donde la energía térmica de la flama desolvata la suspensión de aerosol para secar el aerosol a pequeñas, partículas sólidas. Después, la energía térmica volatiliza las partículas, produciendo vapor que consiste de las especies moleculares, especies iónica y los átomos libres. La energía térmica en la atomización a la flama es suministrada por la combinación de una mezcla combustible oxidante. Los combustibles comúnmente usados son aire-acetileno y óxido de nitrógeno-acetileno.

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Normalmente, el combustible y el oxidante son mezclados en proporciones estequiométricas; sin embargo, una mezcla rica puede ser aceptable para que los átomos sean fácilmente oxidables. El diseño más común para el quemador es con una ranura. Este quemador provee una longitud de la trayectoria para monitorear la absorbancia y una flama estable. El quemador es montado en una fase ajustable que permite al quemador ensamblarse para moverse vertical y horizontalmente. El ajuste horizontal es necesario para asegurarse que la flama está alineada con la trayectoria de los instrumentos ópticos. El ajuste vertical es necesario para ajustar la altura dentro de la flama en el que la absorbancia es monitoreada. Esto es importante porque dos procesos que compiten, afectan la concentración de los átomos libres. Un incremento en la residencia del tiempo resulta en una mejor eficiencia de la atomización; entonces la producción de átomos libres se incrementa con la altura. Por otro lado, una residencia muy larga de tiempo, puede conducir a la formación de óxidos metálicos, como Cr, la concentración de los átomos libres es más grande en la cabeza del quemador. Para metales como Ag, que son difíciles de oxidar, la concentración de los átomos libres se incrementa firmemente con la altura. Otros átomos muestran perfiles de concentración que se maximizan a las características de la altura. La manera más común de introducir la muestra en el atomizador de flama es por continua aspiración, en el cual la muestra es pasada continuamente a través del quemador mientras se monitora la absorbancia. La continua aspiración de la muestra, requiere de 2-5 ml de muestra. Se puede también alimentar micro-muestras que es útil cuando el volumen es limitado o cuando la matriz de la muestra no es compatible con el atomizador de flama. Por ejemplo, la continua aspiración de muestra que contiene altas concentraciones de sólidos disueltos, como agua de mar, puede resultar en la acumulación de depósitos de sólidos en la cabeza del quemador. Estos depósitos generalmente obstruyen la flama, bajando la absorbancia. La inmersión de la muestra se logra con un muestreador automáticoLa principal ventaja de la flama por atomización es la reproducibilidad con que la muestra es inyectada en el espectrofotómetro. Una desventaja significante que la eficiencia de la atomización puede ser muy pobre. Esto puede ocurrir por dos razones. Primero, la mayoría del aerosol producido durante la nebulización consiste de gotas que son muy grandes para ser acarreadas hacia la flama por los gases de combustión. Consecuentemente, casi el 95% de la muestra nunca llega a la flama. La segunda razón es que un volumen grande de gases de combustión significativamente diluye la muestra. Juntas, estas contribuciones a la eficiencia de atomización pueden reducir la sensibilidad, si la concentración del analito en la flama, es de 2.5x10-6 en esa solución.

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Guía práctica de operación y calibración del instrumento: ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA SPECTR AA 50 / 55 VARIAN

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DESCRIPCIÓN DE LA OPERACIÓN DEL EQUIPO Y PRECAUCIONES

Recomendaciones generales.

LLLááámmmpppaaarrraaa dddeee cccááátttooodddooo hhhuuueeecccooo EEEnnneeerrrgggíííaaa llluuummmiiinnnooosssaaa... GGGrrreeeiiitttiiinnnggg eeessscccaaalllooonnneeesss dddeeesssdddooobbblllaaannn lllaaa llluuuzzz eeemmmiiitttiiidddaaa pppooorrr lllooosss ppprrroootttooonnneeesss (((eeessspppeeejjjooosss)))... DDDeeettteeeccctttooorrr fffoootttoootttuuubbbooo SSSeeennnsssiiibbbllleee aaa lllaaa llluuuzzz,,, cccaaadddaaa pppaaarrrttt ííícccuuulllaaa dddeee llluuuzzz qqquuueee ccchhhooocccaaa eeennn eeelll dddeeettteeeccctttooorrr,,, aaammmpppllliiifffiiicccaaa eeennn cccaaassscccaaadddaaa lllaaa ssseeeñññaaalll... PPPooorrrtttaaammmuuueeessstttrrraaasss::: (((AAAssspppiiirrraaaccciiióóónnn,,, cccaaapppiiilllaaarrr,,, cccááámmmaaarrraaa dddeee vvvaaapppooorrriiizzzaaaccciiióóónnn)))... TTTrrraaammmpppaaa dddeee aaaggguuuaaa TTTrrriiidddeeessstttiiilllaaadddaaa yyy dddeeesssiiiooonnniiizzzaaadddaaa TTTiiieeennneee uuunnn nnniiivvveeelll óóóppptttiiimmmooo... EEElll aaalllaaammmbbbrrreee pppaaarrraaa llliiimmmpppiiiaaarrr eeelll sssiiisssttteeemmmaaa cccaaapppiiilllaaarrr... EEEsssfffeeerrraaa dddeee iiimmmpppaaaccctttooo SSSeee oooppptttiiimmmiiizzzaaa lllaaa ssseeennnsssiiibbbiiillliiidddaaaddd dddeeelll eeeqqquuuiiipppooo... ---EEEllliiimmmiiinnnaaarrr aaaggguuuaaa dddeee lllaaa tttrrraaammmpppaaa cccuuuaaannndddooo nnnooo ssseee vvvaaa aaa uuusssaaarrr eeelll eeeqqquuuiiipppooo... FFFllluuujjjooo dddeee sssuuucccccciiióóónnn dddeee mmmuuueeessstttrrraaa::: 666---888 mmmlll///mmmiiinnn... QQQuuueeemmmaaadddooorrreeesss::: LLLaaavvvaaarrrlllooosss cccooonnn eeesssooobbbiiillllllóóónnn yyy aaaggguuuaaa dddeeessstttiiilllaaadddaaa dddeeesssiiiooonnniiizzzaaadddaaa pppaaarrraaa qqquuuiiitttaaarrr hhhooollllllííínnn... HHHaaayyy 222,,, dddeeepppeeennndddeee dddeee lllaaa mmmuuueeessstttrrraaa,,, mmmééétttooodddooo ::: aaaiiirrreee---aaaccceeetttiiillleeennnooo YYY oootttrrrooo qqquuueeemmmaaadddooorrr pppaaarrraaa ::: ÓÓÓxxxiiidddooo nnniiitttrrrooosssooo---aaaccceeetttiiillleeennnooo

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GGGrrraaasssaaa sssiiillliiicccóóónnn ooo gggrrraaasssaaa dddeee aaallltttooo vvvaaacccíííooo,,, pppaaarrraaa pppooonnneeerrr eeennn lllaaa sssuuupppeeerrrfffiiiccciiieee dddeeelll eeemmmpppaaaqqquuueee dddeeelll qqquuueeemmmaaadddooorrr... ---CCCooolllooocccaaarrr lllaaa ccchhhiiimmmeeennneeeaaa... ---UUUnnn ssswwwiiitttccchhh dddeee ssseeeggguuurrriiidddaaaddd eeessstttááá eeennn lllaaa pppuuueeerrrtttaaa... LLLááámmmpppaaarrraaa:::

--- NNNooo rrreeecccooommmeeennndddaaabbbllleee vvvooolllttteeeaaarrrlllaaa hhhaaaccciiiaaa aaabbbaaajjjooo yyyaaa qqquuueee eeelll “““hhhuuummmooo””” ssseee dddeeepppooosssiiitttaaarrríííaaa eeennn lllaaa pppaaarrreeeddd dddeee cccuuuaaarrrzzzooo yyy nnnooo eeennntttrrraaarrríííaaa lllaaa iiinnnttteeennnsssiiidddaaaddd aaadddeeecccuuuaaadddaaa...

--- AAAuuunnnqqquuueee nnnooo ssseee uuutttiiillliiiccceeennn lllaaasss lllááámmmpppaaarrraaasss cccaaallleeennntttaaarrrlllaaasss cccaaadddaaa mmmeeesss (((111555 mmmiiinnn...))) yyy ggguuuaaarrrdddaaarrrlllaaasss,,, pppaaarrraaa aaalllaaarrrgggaaarrr sssuuu

pppeeerrríííooodddooo dddeee vvviiidddaaa...

--- DDDeeejjjaaarrr eeessstttaaabbbiiillliiizzzaaarrr lllaaa lllááámmmpppaaarrraaa 111555 mmmiiinnn... AAAnnnttteeesss dddeee uuusssaaarrrlllaaa...

--- PPPaaarrraaa eeefffiiiccciiieeennntttaaarrr lllaaa tttooommmaaa dddeee mmmuuueeessstttrrraaa ssseee ssseeellleeecccccciiiooonnnaaa aaaiiirrreee sssooolllaaammmeeennnttteee... YYY uuunnnaaa vvveeezzz qqquuueee ssseee tttooommmaaa lllaaa llleeeccctttuuurrraaa,,, ssseee tttooommmaaa lllaaa ooopppccciiióóónnn aaaiiirrreee---aaaccceeetttiiillleeennnooo...

FFFlllaaammmaaa::: ÓÓÓxxxiiidddooo nnniiitttrrrooosssooo ––– AAAccceeetttiiillleeennnooo... - El proceso es el mismo que con aire-acetileno, en el encendido y optimizado de la lámpara.

--- PPPrrreeennndddeeerrr eeelll eeeqqquuuiiipppooo... --- CCCaaammmbbbiiiaaarrr lllááámmmpppaaarrraaa... --- TTTeeennneeerrr cccuuuiiidddaaadddooo dddeee cccaaammmbbbiiiaaarrr eeelll qqquuueeemmmaaadddooorrr... --- CCCaaammmbbbiiiaaarrr ooopppccciiióóónnn dddeee tttiiipppooo dddeee ffflllaaammmaaa;;; óóóxxxiiidddooo---aaaccceeetttiiillleeennnooo...

CCCUUUIIIDDDAAADDDOOO::: QQQuuuiiitttaaarrr,,, eeennnjjjuuuaaagggaaarrr yyy tttiiirrraaarrr eeelll aaaggguuuaaa dddeee lllaaa ttt rrraaammmpppaaa dddeee aaaggguuuaaa (((cccááámmmaaarrraaa dddeee mmmeeezzzccclllaaadddooo,,, cccááámmmaaarrraaa dddeee sssuuucccccciiióóónnn)))... --- SSSiii lllaaa pppooosssiiiccciiióóónnn dddeee lllaaa eeesssfffeeerrraaa dddeee iiimmmpppaaaccctttooo dddaaa uuunnnaaa ssseeennnsssiiibbbiiillliiidddaaaddd aaadddeeecccuuuaaadddaaa,,, sssiiimmmiiilllaaarrr,,, nnnooo eeesss rrreeecccooommmeeennndddaaabbbllleee mmmooovvveeerrrlllaaa... PPPaaarrraaa eeennnccceeennndddeeerrr ffflllaaammmaaa (((eeeqqquuuiiipppooo aaauuutttooommmááátttiiicccooo)))::: PPPrrriiimmmeeerrrooo eeennnccciiieeennndddeee lllaaa ffflllaaammmaaa dddeee aaaiiirrreee---aaaccceeetttiiillleeennnooo yyy llluuueeegggooo cccooorrrtttaaa eeelll aaaiiirrreee yyy aaabbbrrreee lllaaa vvvááálllvvvuuulllaaa dddeee óóóxxxiiidddooo nnniiitttrrrooosssooo... PPPaaarrraaa oooppptttiiimmmiiizzzaaarrr lllaaa llleeeccctttuuurrraaa ssseee mmmuuueeevvveee lllaaa eeesssfffeeerrraaa dddeee iiimmmpppaaaccctttooo ooo eeelll fffllluuujjjooo dddeee aaaccceeetttiiillleeennnooo... EEElll cccooolllooorrr vvveeerrrdddeee---aaammmaaarrriiillllllooosssooo dddeee lllaaa ffflllaaammmaaa eeesss rrriiicccaaa eeennn aaaccceeetttiiillleeennnooo,,, pppooorrr lllooo tttaaannntttooo eeesss uuunnnaaa ffflllaaammmaaa rrreeeddduuuccctttooorrraaa... OOOJJJOOO::: LLLaaa ffflllaaammmaaa mmmááásss cccaaallliiieeennnttteee eeesss lllaaa oooxxxiiidddaaannnttteee... EEEnnn eeessstttaaa ffflllaaammmaaa ssseee eeemmmiiittteeennn mmmááásss vvvaaapppooorrreeesss cccooorrrrrrooosssiiivvvooosss pppooorrr lllooo qqquuueee eeesss iiimmmpppooorrrtttaaannnttteee lllaaa ccchhhiiimmmeeennneeeaaa...

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EMISIÓN

QQQuuueeemmmaaadddooorrr::: --- AAAllltttuuurrraaa dddeeelll qqquuueeemmmaaadddooorrr... --- OOOrrriiieeennntttaaaccciiióóónnn (((tttrrraaannnsssvvveeerrrsssaaalll)))... PPPooorrr qqquuueee ssseee mmmiiidddeee lllaaa eeemmmiiisssiiióóónnn yyy aaasssííí eeesss mmmááásss eeefffiiiccciiieeennnttteee...

OOOppptttiiimmmiiizzzaaaccciiióóónnn dddeee lllaaa ssseeeñññaaalll... SSSeee mmmuuueeevvveee lllaaa eeesssfffeeerrraaa dddeee cccooonnntttaaaccctttooo,,, eeelll qqquuueeemmmaaadddooorrr yyy eeelll fffllluuujjjooo dddeee aaaccceeetttiiillleeennnooo...

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PROCEDIMIENTO DE OPERACIÓN DEL INSTRUMENTO AA 1. Encender el Instrumento. ON/OF. Hace una autoevaluación de los parámetros internos.

Introducir o seleccionar datos (Parámetros de medida). Tecleado 2. Opciones Que tipo de medida - Integración (área del pico)

- Promedio (cuántas veces va a leer) Lenguaje Español

3. Parámetros de medida: Seleccionar según indicaciones

Muestra. Número de grupo. Retraso pre-lectura (recomendable 1 seg.) Tiempo de lectura 3 seg. Precisión 5%

4. Optimización:

Ganancia de la lámpara (Recomendable apuntar las ganancias con las que se empieza a trabajar).

Vida de lámpara. Sensibilidad.

5. Ajustar la ganancia de la lámpara con los tornillos negros de la base de la lámpara.

1° tornillo: hasta que en lugar de aumentar la barra superior, decrezca (si se satura la barra, se presiona enter para que aparezca la barra nueva y siga el proceso).

2° tornillo: sigue el mismo procedimiento.

6. Alinear quemador: Altura: usar tarjetas. Posición: alinear de atrás a adelante y botones grandes frontales.

Optimizar señal:

- Se abre el tanque. Acetileno/Aire ó Oxido nitroso/Acetileno - Se prende la flama. - Optimizar con esfera de impacto. (Nota: Para eliminar el ruido en abs. Se teclea Alt read P zero instrumental).

7. Leer flujo de muestra Con probeta de 10 ml. y cronómetro (Óptimo de 6-8 ml/min).

Llenar una probeta a una marca estipulada.

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Contar en 1 minuto qué volumen de muestra se succiona. Importante: Mantener flujo de muestra constante.

Con la esfera de impacto se optimiza la señal a 0.5-0.6 A con una solución estándar de cobre de 5 ppm

Se calibra el flujo de acetileno para optimizar la señal, si la señal no aumenta, no se mueve el acetileno. (El flujo en 1).

Leer: - Teclear Calibración. Es para introducir los estándares y la muestra a la vez. - Introducir las concentraciones de los estándares. Según las indicaciones…. - Situar en el estándar que se va a leer. - Teclear “Lectura”. read - Cambiar estándar para toma de muestra, situar en estándar que se va a leer. - Teclear “Lectura”. read - Se repite el paso anterior con todos los estándares. - Se recomienda lavar con agua el capilar entre muestra y muestra o estándar y

estándar y limpiar con papel. Oprimir tecla “Resultados” y luego…….. - Alt calibrar: da curva de calibración. Con cursor se mueven ejes X y Y para

determinar las coordenadas (o una probable concentración). - Teclear resultados. - Ya que se lava el sistema con agua, se saca la manguera del agua y se deja

succionar aire para que el sistema se seque y luego de unos segundos, se apaga el quemador.

Apagar el equipo.

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BITÁCORA ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA

FFFEEECCCHHHAAA LLLÁÁÁMMMPPPAAARRRAAA GGGAAANNNAAANNNCCCIIIAAA HHHOOORRRAAASSS

TTTRRRAAABBBAAAJJJAAADDDAAASSS FFFLLLUUUJJJOOO DDDEEE

MMMUUUEEESSSTTTRRRAAA TTTIIIPPPOOO DDDEEE FFFLLLAAAMMMAAA FFFLLLUUUJJJOOO DDDEEE ÓÓ

NNNIIITTTRRROOOS

NNNOOOTTTAAA::: PPPrrreeesssiiióóónnn dddeee tttaaannnqqquuueee aaaccceeetttiiillleeennnooo 111111 pppsssiii PPPrrreeesssiiióóónnn dddeee óóóxxxiiidddooo nnniiitttrrrooosssooo 666000 pppsssiii CCCooommmppprrreeesssooorrr aaauuutttooommmááátttiiicccooo 666000 lllbbb

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ITSON. Departamento de Laboratorios. Náinari. Cd. Obregón, Sonora. Mtro. Rodrigo Lara E. Jefe del Departamento de Laboratorios. Presente……………. A continuación de describen las actividades desarrolladas en los instrumentos analíticos del Laboratorio de Análisis Instrumental del Laboratorio LV-512 del ITSON Unidad Náinari. Cantidad

Instrumento Servicio Calibración Etiqueta

3 Spectronic 20 y 20D SÍ SÍ Verde Verde Verde Verde Azul (1) Verde Verde Verde Verde Verde Verde Azul (2) Verde

2 Espectrofotómetros Génesys 5 SÍ SÍ 4 Espectrofotómetros Génesys 20 SÍ SÍ 3 Refractómetros B& L 3L SÍ SÍ 1 Refractómetros B& L 3L SÏ SÏ 2 Refractómetros portátiles0-32 ºBrix SÍ SÍ 4 Polarímetros SR-6 SÍ SÍ 4 Conductímetros YSI 31 SÍ SÍ 4 Conductímetros YSI 32 digital SÍ SÍ 1 Potenciómetro Corning SÍ SÍ 7 Potenciómetros HANNA HI 991003 SÍ SÍ 1 Potenciómetros HANNA HI 991003 SÍ SÍ 1 Espectrómetro de Absorción Atómica SI SI

Total: 37 Instrumentos Etiqueta: Verde: Significa que el instrumento está listo para operarse. Azul (1) : Significa que hay que cambiar de bombilla. Azul (2): Significa que al electrodo se le de un lavado en la solución que viene en el KIT. Ambas operaciones ya se ordenaron.

ATENTAMENTE:

M. en .C Roberto García Rodríguez Asesor en Métodos Analíticos e Instrumentales ITSON-CINVESTAV/IPN [email protected] [email protected] Tel. part. (644)- 4148124 cel. 6441 496293

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Ubicación: Responsable: Alcances de la medición: Limitaciones de uso: Solo personal autorizado

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MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO Propósito Conocer y manejar las partes y funciones del microscopio óptico. Fundamento teórico El microscopio es un instrumento que nos permite visualizar objetos muy pequeños que el ojo no podría distinguir. Existen diferentes tipos de microscopios:

Fotónico u óptico, permite observar preparaciones fijas o vivas con una menor imagen.

Estereoscópico, utilizado para hacer disecciones de organismos vivos y muertos, permite mejor

manipulación de especímenes, presenta una imagen tridimensional.

Contraste de fases, se pueden hacer observaciones en vivo sin necesidad de matar a las células al

someterlas a la acción de fijadores y colorantes.

Electrónico, utilizado para observar preparaciones fijas de organismos o tejidos con una mejor

imagen.

De barrido, utilizado para observar preparaciones por congelación a una mejor imagen y aumento.

Fluorescencia, utilizado para descubrir la localización de moléculas específicas en las células, a través

de colorantes fluorescentes.

Las partes del microscopio óptico son: 1) Parte mecánica. Apoyo y sostén de las lentes.

Soporte, base o pie, sirve para dar firmeza y estabilidad al aparato.

Columna, une a la platina con la base y sostiene al condensador y al diafragma.

Brazo de potencia, es una estructura vertical, curva situada entre la parte posterior del soporte y el

tubo.

Tubo, proporciona sostén a los oculares y objetivos.

Revolver, es un tambor giratorio situado en la parte inferior del tubo que contiene un sistema de

lentes rotatorios llamado objetivos.

Cremallera, sirve para subir o bajar el tubo.

Tornillo macro métrico, mueve el tubo hacia arriba o hacia abajo y sirve para enfocar con rapidez la

muestra observada.

Tornillo micrométrico o de ajuste fino. Permite mover muy lentamente el tubo para realizar un

enfoque más preciso.

Platina, sostiene a las preparaciones.

2) Parte óptica. Oculares, son las lentes por donde se va a observar.

Objetivos, son las lentes que quedan cerca del objeto a observar.

Los microscopios ÓPTICOS utilizan luz visible, generalmente tienen un ocular que aumenta diez veces el objeto y tres objetivos que son:

1) Objetivo de menor aumento o seco débil, el cual aumenta 10 veces (Objetivo 10X).

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2) Objetivo de mayor aumento o seco fuerte, el cual aumenta 40 veces (Objetivo 40X).

3) Objetivo de inmersión, aumenta 100 veces, aquí se debe usar una gota de aceite de inmersión

(Objetivo 100X).

RECOMENDACIONES

Si algunos de los objetivos o lentes de los oculares se encuentran sucios, limpiarlos con papel de seda

o kleenex, realizando un movimiento circular evitando un movimiento de lado a lado para no rayar el

lente.

10X, 40X, 100X, indican los aumentos que dan los objetivos, pero para calcular el aumento real al que

estamos observando, se realiza una multiplicación del aumento del objetivo que se está usando por el

aumento de la lente del ocular del microscopio, por ejemplo, si estamos observando una preparación

con un objetivo de 10X éste se multiplica por el aumento del ocular el cual es de 10X, la operación nos

da 100 veces más grande, y así sucesivamente.

Ocular 10X por objetivo 10X = 100 veces más grande Ocular 10X por objetivo 40X = 400 veces más

grande Ocular 10X por objetivo 100X = 1000 veces más grande

3) Iluminación. Se encuentra bajo la platina.

Lámpara, es una fuente luminosa separada o integrada al microscopio.

Espejo, el cual dirige la luz hacia el condensador.

Condensador, es el que reúne los rayos de luz y los dirige hacia el objetivo.

Diafragma, es el que regula la cantidad de rayos luminosos que llegan a la preparación.

Material, equipo y recursos que se emplearán

1) 1 microscopio óptico

2) preparaciones fijas

3) Porta objetos

4) Cubreobjetos

5) Navaja

6) Sanitas

Indicaciones para realizar la práctica

Leer y entender las funciones de cada parte del microscopio óptico antes de entrar a práctica.

(tocar y manejar las partes, con mucho cuidado).

Una vez aprendidas y entendidas las partes y funciones, realizar los siguientes pasos:

1. Para trasladar el microscopio de un lugar a otro, agarrar el brazo del microscopio con la mano

derecha y el pie con la mano izquierda, de esta manera se evitará que se desequilibre el

microscopio.

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2. Colocar el microscopio en una de las esquinas de la mesa de trabajo y de frente, cerca del

contacto.

3. Primero revisar que la platina esté totalmente abajo, si no es así bajarlo con el tornillo macro

métrico.

4. El laboratorista, colocará una preparación sobre la platina.

5. Girar el revólver y colocar en forma vertical el objetivo de 10X (siempre se usa primero el

objetivo de menor aumento para enfocar).

6. Prender el microscopio óptico.

7. Por medio del tornillo macro métrico, subir la preparación hasta que choque con el objetivo

(el objetivo presenta un amortiguador el cual evitará romper la preparación o aplastarla).

8. Posteriormente con el tornillo micrométrico girarlo hasta darle visualidad, una vez enfocada la

preparación cada integrante observará (si la imagen no es clara sólo se moverá el tornillo

micrométrico evitando mover el portaobjetos). EVITAR MOVER EL MICROSCOPIO CON LA

PREPARACIÓN COLOCADA, PARA ESTO SE GIRARA EL TUBO OCULAR DONDE OTRO

INTEGRANTE PUEDA OBSERVAR EN OTRA POSICIÓN. Las personas que usan lentes

quitárselos para evitar rayar el lente del ocular.- Las mujeres que tienen cabello largo

amarrárselo para evitar tirar la preparación.

9. Una vez que todos han observado la preparación, girar el revólver y ubicar el objetivo de 400

veces, de nuevo si la imagen no es clara solo mover el tornillo micrométrico.

10. Una vez observado con los dos objetivos, primero bajar la platina, girando el tornillo macro

métrico, una vez abajo retirar la preparación y colocar otra preparación. EVITAR RETIRAR

LA PREPARACIÓN SIN HABER BAJADO LA PLATINA, O DE LO CONTRARIO SE RALLARA EL

OBJETIVO.

11. Cada integrante enfocará una preparación diferente manejando solo el microscopio, de esta

manera obtendrá su calificación.

12. Una vez obtenida una calificación, volver a bajar la platina y retirar la preparación, colocar

otra preparación para otro integrante y realizar la misma indicación.

13. Cuando hayan terminado de observar, ENTREGAR EL MICROSCOPIO CON LA PLATINA ABAJO Y

CUBIERTO.

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