Dao oxidativo, radicales libres y antioxidantesCap. Justo R. Venereo Gutirrez1

ResumenSe realiz una revisin bibliogrfica sobre el tema de los radicales libres del oxgeno, las especies reactivas del oxgeno y el estrs oxidativo, con el objetivo de acercar a los diferentes especialistas de las ciencias mdicas al interesante y cada vez ms importante mundo de los radicales libres, tema que en la actualidad es de gran inters para bioqumicos, fisilogos y otros especialistas de las ciencias bsicas de la medicina. En este trabajo se presenta una visin general de los principales aspectos del tema, se mencionan conceptos, clasificaciones y caractersticas de los radicales libres y de los diferentes sistemas de defensa antioxidante; se explican brevemente los mecanismos por los cuales se producen los daos de estas especies qumicas sobre el organismo y se brindan recomendaciones desde el punto de vista higinico-diettico para mantener un adecuado equilibrio prooxidante/antioxidante.DeCS: RADICALES LIBRES/anlisis; RADICALES LIBRES/efectos adversos; ESTRES OXIDATIVO; ANTIOXIDANTES.

Los adelantos cientficos y especficamente en la medicina son realmente sorprendentes tanto en el conocimiento de las enfermedades y su tratamiento como de sus complicaciones, no obstante quedan an muchas dudas que aclarar con respecto al origen de estas. En los ltimos 30 a viene desarrollndose cada da un inters mayor por los problemas relacionados con el estrs oxidativo, los radicales libres, las especies reactivas del oxgeno y los antioxidantes, todo esto dado por la importancia que poseen en la bioqumica, la biologa y la medicina.1 Las ciencias mdicas estn dando un paso de avance significativo en el conocimiento de muy variadas enfermedades, en su fisiopatologa, su tratamiento y ms importante aun, en su prevencin.Ya en 1981 Berg,2 al recibir el Premio Nobel, dijo... Tendremos que tener mdicos que dominen la anatoma molecular y la fisiologa de los cromosomas y los genes, de la misma forma que el cirujano cardiaco domina la lectura y funcionamiento del rbol coronario. Existen varios trabajos en los cuales se expone la relacin existente entre el estrs oxidativo y algunas enfermedades, N.F. Boyd y V.Mc Guire realizaron un estudio en 37 450 mujeres que tenan el diagnstico de displasia mamaria y encontraron elevacin de los niveles de lpidos peroxidados. El Linxian General Population Study realizado en una poblacin china de 30 000 personas mostr una reduccin significativa del cncer de estmago en aquellos que ingirieron suplementos de antioxidantes. El estudio MONICA de la OMS mostr una correlacin inversa entre los niveles de vitamina E y la mortalidad por infarto del miocardio en 16 ciudades europeas. El Cambridge Heart Antioxidant Study (CHAOS) agrup a 2 000 pacientes con enfermedad coronaria comprobada por coronariografa, que fueron divididos en 2 grupos: a uno se le administr un placebo y al otro 800 UI de vitamina E; despus de un seguimiento de 510 d se observ una disminucin de la mortalidad por infarto del miocardio en el grupo tratado.3Cuba da sus primeros pasos en este campo de la investigacin, varios son los logros obtenidos por los cientficos, y se destaca la obtencin del VIMANG, un producto teraputico con propiedades antioxidantes comprobadas. Ya en 1999 se celebr en Cuba el Simposio Internacional Estrs Oxidativo en Biomedicina, que estuvo caracterizado por un gran nivel cientfico y de actualidad.Hoy da en todo el mundo este tema ha dejado de ser solo inters de bioqumicos y fisiolgicos para convertirse en un arma ms en la comprensin y origen de las enfermedades que afectan actualmente a la humanidad.4Todos los elementos sealados hasta aqu han motivado la realizacin de esta revisin. Dao o estrs oxidativoDe manera habitual, el oxgeno se encuentra en su forma ms estable (O2), con los electrones que forman el enlace (p), antienlazante con el mismo espn, es decir, en lo que se conoce como estado triplete, as el oxgeno es poco reactivo con una velocidad de reaccin a temperatura fisiolgica baja; sin embargo por reacciones puramente qumicas, por acciones enzimticas o por efecto de las radiaciones ionizantes, se pueden producir una serie de especies qumicas o sustancias prooxidantes (molculas o radicales libres altamente reactivos) que son capaces de dar lugar a mltiples reacciones con otros compuestos presentes en el organismo, que llegan a producir dao celular. Por lo anteriormente expuesto se comprende que, si bien el oxgeno es imprescindible para el metabolismo y las funciones del organismo, no se deben olvidar los muchos efectos txicos que posee.5-7El dao o estrs oxidativo se ha definido como la exposicin de la materia viva a diversas fuentes que producen una ruptura del equilibrio que debe existir entre las sustancias o factores prooxidantes y los mecanismos antioxidantes encargados de eliminar dichas especies qumicas, ya sea por un dficit de estas defensas o por un incremento exagerado de la produccin de especies reactivas del oxgeno. Todo esto trae como consecuencia alteraciones de la relacin estructura-funcin en cualquier rgano, sistema o grupo celular especializado; por lo tanto se reconoce como mecanismo general de dao celular, asociado con la fisiopatologa primaria o la evolucin de un nmero creciente de entidades y sndromes de inters mdico-social, involucrado en la gnesis y en las consecuencias de dichos eventos.8Radicales libresDesde el punto de vista qumico, los radicales libres son todas aquellas especies qumicas, cargadas o no, que en su estructura atmica presentan un electrn desapareado o impar en el orbital externo que les da una configuracin espacial generadora gran inestabilidad, sealizado por el punto situado a la derecha del smbolo. Poseen una estructura birradiclica, son muy reactivos, tienen una vida media corta, por lo que actan cercano al sitio en que se forman y son difciles de dosificar.9-11 Desde el punto de vista molecular son pequeas molculas ubicuitarias y difusibles que se producen por diferentes mecanismos entre los que se encuentran la cadena respiratoria mitocondrial, la cadena de transporte de electrones a nivel microsomal y en los cloroplastos, y las reacciones de oxidacin, por lo que producen dao celular (oxidativo) al interactuar con las principales biomolculas del organismo. No obstante lo expresado anteriormente, los radicales libres del oxgeno tienen una funcin fisiolgica en el organismo como la de participar en la fagocitosis, favorecen la sntesis de colgeno, y la sntesis de prostaglandinas, activan enzimas de la membrana celular, disminuyen la sntesis de catecolaminas por las glndulas suprarrenales, modifican la biomembrana y favorecen la quimiotaxis.Existe un trmino que incluye a los radicales libres y a otras especies no radiclicas, pero que pueden participar en reacciones que llevan a la elevacin de los agentes prooxidantes y son las especies reactivas del oxgeno (EROS).12,13Las principales especies reactivas del oxgeno o sustancias prooxidantes son: Radical hidroxilo (HO)+ Perxido de hidrgeno (H2O2) Anin superxido (O2) Oxgeno singlete (1O2) Oxgeno ntrico (NO) Perxido (ROO) Semiquinona (Q) OzonoLos radicales libres del oxgeno se clasifican de la forma siguiente:1. Radicales libres inorgnicos o primarios. Se originan por transferencia de electrones sobre el tomo de oxgeno, representan por tanto distintos estados en la reduccin de este y se caracterizan por tener una vida media muy corta; estos son el anin superxido, el radical hidrxilo y el xido ntrico.2. Radicales libres orgnicos o secundarios. Se pueden originar por la transferencia de un electrn de un radical primario a un tomo de una molcula orgnica o por la reaccin de 2 radicales primarios entre s, poseen una vida media un tanto ms larga que los primarios; los principales tomos de las biomolculas son: carbono, nitrgeno, oxgeno y azufre.3. Intermediarios estables relacionados con los radicales libres del oxgeno. Aqu se incluye un grupo de especies qumicas que sin ser radicales libres, son generadoras de estas sustancias o resultan de la reduccin o metabolismo de ellas, entre las que estn el oxgeno singlete, el perxido de hidrgeno, el cido hipocloroso, el peroxinitrito, el hidroperxidos orgnicos.14Los radicales libres se generan a nivel intracelular y extracelular. Entre las clulas relacionadas con la produccin de radicales libres del oxgeno tenemos los neutrfilos, monocitos, macrfagos, eosinfilos y las clulas endoteliales. Las enzimas oxidantes involucradas son la xantin-oxidasa, la indolamindioxigenasa, la triptofano-dioxigenasa, la mieloperoxidasa, la galactosa oxidasa, la ciclooxigenasa, la lipoxigenasa, la monoamino-oxidasa y la NADPH oxidasa.15,16 Y entre las sustancias y agentes es conocida ampliamente la relacin de los productos cclicos de naturaleza redox como son el paraquat, diquat, alloxano, estreptozozina y doxorubicina, con los radicales libres. Tambin se producen radicales libres por la administracin de paracetamol, tetracloruro de carbono y furosemida; por ltimo no se puede olvidar agentes como el humo de cigarrillos, las radiaciones ionizantes, la luz solar, el shock trmico y las sustancias que oxidan el glutatin (GSH) como fuentes de radicales libres.17-19Existen algunas circunstancias en que tambin se producen radicales libres como son: Dieta hipercalrica. Dieta insuficiente en antioxidantes. Procesos inflamatorios y traumatismos. Fenmenos de isquemia y reperfusin. Ejercicio extenuante.

Efecto nocivo de los radicales libresEl dao celular producido por las especies reactivas del oxgeno ocurre sobre diferentes macromolculas:1. Lpidos. Es aqu donde se produce el dao mayor en un proceso que se conoce como peroxidacin lipdica, afecta a las estructuras ricas en cidos grasos poliinsaturados, ya que se altera la permeabilidad de la membrana celular y se produce edema y muerte celular. La peroxidacin lipdica o enranciamiento oxidativo representa una forma de dao hstico que puede ser desencadenado por el oxgeno, el oxgeno singlete, el perxido de hidrgeno y el radical hidroxilo. Los cidos grasos insaturados son componentes esenciales de las membranas celulares, por lo que se cree son importantes para su funcionamiento normal; sin embargo, son vulnerables al ataque oxidativo iniciado por los radicales libres del oxgeno.20-22Los factores que influyen en la magnitud de la peroxidacin lipdica son:a) La naturaleza cualitativa y cuantitativa del agente inicializador.b) Los contenidos de la membrana en cidos grasos poliinsaturados y su accesibilidad.c) La tensin de oxgeno.d) La presencia de hierro.e) El contenido celular de antioxidantes (betacarotenos, alfatocoferoles, glutatin).f) La activacin de enzimas que pueden hacer terminar la cadena de reaccin como es el caso de la glutatin peroxidasa (GSH-Prx).Una vez que se inicia, el proceso toma forma de cascada, con produccin de radicales libres que lleva a la formacin de perxidos orgnicos y otros productos, a partir de los cidos grasos insaturados; y una vez formados, estos radicales libres son los responsables de los efectos citotxicos.232. Protenas. Hay oxidacin de un grupo de aminocidos como fenilalanina, tirosina, histidina y metionina; adems se forman entrecruzamientos de cadenas peptdicas, y por ltimo hay formacin de grupos carbonilos.3. cido desoxirribonucleico (ADN). Ocurren fenmenos de mutaciones y carcinognesis, hay prdida de expresin o sntesis de una protena por dao a un gen especfico, modificaciones oxidativas de las bases, delecciones, fragmentaciones, interacciones estables ADN-protenas, reordenamientos cromosmicos y desmetilacin de citosinas del ADN que activan genes.El dao se puede realizar por la alteracin (inactivacin/prdida de algunos genes supresores de tumores que pueden conducir a la iniciacin, progresin, o ambas de la carcinognesis). Los genes supresores de tumores pueden ser modificados por un simple cambio en una base crtica de la secuencia del ADN.24-28

Sistemas de defensa antioxidanteEl sistema de defensa antioxidante est constituido por un grupo de sustancias que al estar presente en concentraciones bajas con respecto al sustrato oxidable, retrasan o previenen significativamente la oxidacin de este. Como sustrato oxidable se pueden considerar casi todas las molculas orgnicas o inorgnicas que se encuentran en las clulas vivas, como protenas, lpidos, hidratos de carbono y las molculas de ADN.29 Los antioxidantes impiden que otras molculas se unan al oxgeno, al reaccionar-interactuar ms rpido con los radicales libres del oxgeno y las especies reactivas del oxgeno que con el resto de las molculas presentes, en un determinado microambiente -membrana plasmtica, citosol, ncleo o lquido extracelular (tabla 1). La accin del antioxidante es de sacrificio de su propia integridad molecular para evitar alteraciones de molculas -lpidos, protenas, ADN, etc.- funcionalmente vitales o ms importantes.30 Su accin la realizan tanto en medios hidroflicos como hidrofbicos.31 Actan como eliminadoras (Scavengers), con el objetivo de mantener el equilibrio prooxidante/antioxidante a favor de estos ltimos (tabla 2). Los antioxidantes exgenos actan como molculas suicidas, ya que se oxidan al neutralizar al radical libre, por lo que la reposicin de ellos debe ser continua, mediante la ingestin de los nutrientes que los contienen.Tabla 1. Clasificacin de los antioxidantes segn el sitio donde ejercen su accinIntracelular MembranaExtracelular

Superxido dismutasaVitamina E Ceruloplasmina

Catalasa BetacarotenosTransferinas

PeroxidasaUbiquinol-10Lactoferinas

DT-deafarasa Albminas

GSHHaptoglobinas

Protenas que ligan metalesVitamina C

Sistemas proteolticoscido rico

Vitamina CVitamina E

Tabla 2. Clasificacin de los antioxidantes, segn origenOrigen Accin

1. Exgenos

Vitamina E- Neutraliza el oxgeno singlete

- Captura radicales libres hidroxilo

- Captura O2

- Neutraliza perxidos

Vitamina C- Neutraliza el oxgeno singlete

- Captura radicales libres de hidroxilo

- Captura O2

- Regenera la forma oxidada de la vitamina E

BetacarotenosNeutraliza el oxgeno singlete

Flavonoides, Licopenos

2. Endgenos

EnzimticosCofactor

Superxido dismutasa (SOD)Cobre, sodio, manganeso

Catalasa (CAT)Hierro

Glutatin peroxidasa (GPx)Selenio

3. No enzimticos

Glutatin Barreras fisiolgicas que enfrenta el oxgeno a su paso desde el aire hasta las clulas

Coenzima Q

cido TiocticoTransportadores de metales (transferrina y ceruloplasmina)

Caractersticas de las enzimas antioxidantes321. Catalasa (CAT). Tiene una amplia distribucin en el organismo humano, alta concentracin en hgado y rin, baja concentracin en tejido conectivo y epitelios, prcticamente nula en tejido nervioso y se localiza a nivel celular: mitocondrias, peroxisomas, citosol (eritrocitos); presenta 2 funciones fundamentales: cataltica y peroxidativa y forma parte del sistema antioxidante CAT/SOD que acta en presencia de altas concentraciones de perxido de hidrgeno.2. Glutatin peroxidasa (GPx). Es una enzima selenio-dependiente, cataliza la reduccin de perxido de hidrgeno a lipoperxido (L-OOH), usa como agente reductor el glutatin reducido (GSH) y se localiza en: citosol (eritrocitos), lisosomas (neutrfilos, macrfagos y otras clulas del sistema inmune). Existen 3 formas de GPx: GPx-c o forma celular, tiene mayor afinidad por el perxido de hidrgeno que por el lipoperxido; GPx p o forma extracelular, presenta afinidad semejante para ambos sutratos; GPx-PH, tiene afinidad especfica para los lipoperxidos.Las formas GPx-c y GPx-p no son capaces de utilizar los lipoperxidos.3. Superxido dismutasa. Su distribucin es amplia en el organismo, est formada por un grupo de enzimas metaloides: Cu-SOD y Zn-SOD que contienen cobre y cinc en su sitio activo y se encuentran en el citosol y en el espacio inter-membranoso mitocondrial; Mn-SOD que contiene manganeso y se localiza en la matriz mitocondrial; Fe-SOD que contiene hierro y se localiza en el espacio periplasmtico de la E. Coli. Estas enzimas dismutan el oxgeno para formar perxido de hidrgeno y su principal funcin es la proteccin contra el anin superxido.

Indicaciones de los antioxidantes Antecedentes hereditarios de enfermedad aterosclertica o tumoral. Tabaquismo. Hipertensin arterial. Prevencin primaria de dislipidemia, diabetes, obesidad, sedentarismo, estrs y menopausia. Prevencin secundaria de angina de pecho, afeccin vascular perifrica, enfermedad cerebrovascular, antecedentes de infarto, tcnicas de revascularizacin previas (bypass, angioplastia, terapias trombolticas), cataratas incipientes, displasias mamarias, trasplante de rganos, cncer, infertilidad masculina y enfermedades neurodegenerativas.33Existen algunas recomendaciones que mejoran la capacidad antioxidante como son:34 Ejercicio regular no extenuante. Supresin del mal hbito de fumar. Evitar dietas hiperproteicas e hipercalricas. Priorizar la ingestin de vegetales en las comidas. Evitar el estrs. Suplementacin con antioxidantes y oligoelementos.35,36 Vitamina E: 100-400 mg. Vitamina C: 200-2 000 mg. Betacarotenos: 2-10 mg. Selenio: 50-100 mg. Manganeso: 1,5 mg. Cobre: 1 mg.

Beta-caroteno: presente en los alimentos de color naranja, como las zanahorias, boniatos, meln cantalupo, albaricoques, calabaza o mangos. Pese a esta primera caracterstica otros alimentos que tambin son ricos en beta-caroteno son las verduras de hoja verde, como las espinacas y coles. Lutena: presentes tambin en verduras de hoja verde como las anteriormente mencionadas. Licopeno: se trata de un potente antioxidante presente en los tomates, sanda, papaya o naranja sanguina. La principal fuente de licopeno de nuestra dieta es el tomate y los productos derivados de l, como salsas y ketchup. Selenio: se trata de un mineral que forma parte de algunos enzimas con actividad antioxidante. Las principales fuentes de selenio son el arroz y el trigo (sobre todo en su versin integral), y su contenido depender del selenio presente en la tierra de cultivo. No hay que olvidar que el selenio est tambin presente en los msculos de los animales, por lo que la carne es otra de las fuentes de este mineral en nuestra dieta. Vitamina A (retinol): los alimentos ricos en esta vitamina incluyen el hgado y yema de huevo. El beta-caroteno es considerado como pro-vitamina A, ya que es precursor de esta vitamina, por lo que los alimentos ricos en beta-caroteno tambin pueden considerarse como importantes para contribuir al aporte de retinol. Vitamina C: se encuentra de forma abundante en muchas frutas y vegetales, como las naranjas, kiwis, fresas, tomates Vitamina E: tambin conocido por el nombre de alfa-tocoferol, est principalmente presente en los aceites de semillas, como girasol, soja, maz, y frutos secos.

Arco reflejo RegresarLos actos reflejos son las respuestas ms simples producidas por el sistema nervioso. Se trata de respuestas innatas, independientes de la voluntad, que ocurren rpidamente y tienen una funcin adaptativa. La extensin de la pierna cuando se golpea el tendn rotuliano, la accin de cerrar los ojos ante el acercamiento de un objeto o de retirar el cuerpo frente a una agresin, son ejemplos de actos reflejos.Las estructuras que intervienen en la produccin de un acto reflejo reciben, en conjunto, el nombre de arco reflejo. Los arcos reflejos ms simples constan de un receptor, una neurona sensitiva, una neurona motora y un efector. Entre las neuronas sensitiva y motora puede interponerse una neurona de asociacin.El siguiente esquema ilustra un arco reflejo somtico que se integra a nivel de la mdula espinal. En este ejemplo, un estmulo doloroso acta sobre un receptor ubicado en la piel. La informacin es conducida por la dendrita de una neurona sensitiva que forma parte de un nervio raqudeo. Los nervios raqudeos tienen dos races: una anterior y otra posterior, que luego se fusionan. Las fibras sensitivas discurren por la raz posterior. El cuerpo de la neurona sensitiva se ubica fuera del SNC, en un ganglio raqudeo, anexo a la raz posterior del nervio. Desde all parte el axn de la neurona sensitiva, que a travs de la raz dorsal, ingresa a la mdula espinal. En la sustancia gris de la mdula, la neurona sensitiva hace sinapsis con una interneurona y sta, con una neurona motora. El axn de la neurona motora emerge por la raz anterior del nervio raqudeo y conduce el impulso nervioso hasta un msculo esqueltico. El msculo esqueltico es el efector. Cuando se produce la sinapsis entre la neurona motora y el msculo, ste ejecuta la respuesta, es decir, se contrae. La contraccin del msculo genera un movimiento: el acto reflejo de retirar la parte del cuerpo que est siendo agredida por el estmulo.

.Reflejo somtico integrado en la mdula espinal Reflejo visceral integrado en el nivel enceflico inferior

Reflejo patelar Reflejo pupilar

Complejidad de tareasLa complejidad de tareas que necesitas tienes que llevar a cabo reflexivamente puede tener un efecto sobre el tiempo que te lleva hacerlas. Cuanto ms complejo sea el objetivo, ms partes de tu sistema tienes que activar y ms tiempo te va a llevar. Cuanto ms movimientos tengas que hacer, ms lenta ser la reaccin.Temperatura corporalEl calor es causado por molculas que se mueven rpido. Si lo estn haciendo, los procesos qumicos (como mandar seales del cerebro a las extremidades) son tambin ms rpidos. Por el contrario, cuando la temperatura es ms fra, los reflejos y los tiempos de reaccin son ms lentos. La temperatura en s misma no es un factor fisiolgico, pero repercute sobre tu sistema.MielinaLos nervios estn cubiertos de una sustancia grasosa que se llama mielina, que es la que hace que las seales vayan a travs de los nervios de modo ms fuerte porque los protegen. Cuanto ms aislados estn, ms rpida y claramente las seales pasarn por los nervios. Cuanta ms mielina tengas, tendrs reflejos ms rpidos. Esta sustancia naturalmente comienza a disminuir despus de alrededor de los 40 aos y las enfermedades neurolgicas, como la esclerosis mltiple, tambin pueden contribuir al deterioro.Uso de drogasAlgunas drogas pueden acelerar o disminuir el tiempo de reaccin y los reflejos. Por ejemplo, el alcohol, al ser un depresivo, reduce la velocidad de reaccin, razn por la que no debes conducir despus de beber. El alcohol ralentiza todos los procesos cerebrales y las reacciones son solo una de las cosas que este rgano lleva a cabo.Qu es el Reflejo MiotticoEn los msculos se encuentran rganos sensibles receptores, que registran el estado de tensin de los mismos, como los husos musculares que actan como controladores del estado de la tensin y extensin de los mismos. Cuando un msculo se estira, tambin se estiran los husos musculares, que en ese instante envan impulsos a la mdula espinal informando sobre dicho estiramiento, en la mdula espinal se produce una sinapsis y como respuesta, se enva la orden al msculo para que este se contraiga

El objetivo de este reflejo es proteger al msculo de una extensin excesiva, es un mecanismo de defensa, para evitar una lesin muscular provocada por dicha extensin brusca y excesiva. Por lo tanto, cuando entrenamos la flexibilidad, debemos evitar los estiramientos producidos por balanceos y rebotes, ya que estos originan el reflejo miottico provocando una contraccin y perjudicado el estiramiento y por ende, el entrenamiento de la flexibilidadAl entrenar la flexibilidad y realizar estiramientos por un lapso prolongado de tiempo, el huso muscular se habita a esta nueva longitud, reduciendo su sealizacin, de esta forma vamos ganando cada vez mayor capacidad de estiramiento, sin que se produzca el reflejo miottico.La sensibilidad del huso muscular puede estar influenciada por los impulsos de los nervios gamma. A mayor actividad gamma mayor sensibilidad de los husos musculares, la actividad gamma es responsable del tono de los msculos, aumenta durante el dolor, nerviosismo, inquietud o miedo, por lo tanto, cuando ms relajados y tranquilos estemos, menor actividad gamma ser registrada y mejor podremos aprovechar la sesin de entrenamiento para lograr los resultados deseados.Qu es el Reflejo Miottico InversoEn los msculos tambin residen los husos tendinosos que tienen lugar durante la contraccin muscular activa y pasiva. El umbral de excitacin de stos es mucho ms alto que el de los husos musculares. Cuando la tensin muscular alcanza un umbral crtico, que puede poner en peligro el msculo y se produce este reflejo miottico inverso, que provoca la relajacin muscular.Ejemplificando este concepto, podemos decir que se produce el Reflejo Miottico Inverso cuando desarrollamos una tensin de magnitud excesiva (una fuerte contraccin). El objetivo de este reflejo es proteger al msculo y sus inserciones y tendones de una posible lesin (distensin, desgarro, o roturas fibrilares) provocados por una sobrecarga demasiado fuerte.http://fmhusmp.blogspot.com/2013/12/fisiologia-practica-todos-las-preguntas.html