penjelasan praktikum mikrobiologi

PRAKTIKUMMEKANISME DASAR

PENYAKIT

Bagian MikrobiologiFakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin

2010

ASISTEN MIKR08IOLOGI 

ANDI WIJA INDRAWAN P KLP 1, 9AHMAD IBRAHIM RUM KLP 2, 10ARLEN RESNAWALDI KLP 3, 11, 17AMMAR ABDURRAHMAN HASYIM KLP 4, 12, 18FATHLINA KLP 5, 13DIAH GEMALA IBRAHIM KLP 6, 14SARNISYAH DWI MARTIANI KLP 7, 15YUNIALTHY DWIA PERTIWI KLP 8, 16

BAKTERI

Bakteri adalah mahluk hidup, bersel tunggal kecil dengan dimeter kira-kira 1 m, yang

masuk dalam golongan protista rendah, Prokariotik, Inti hanya brp lmbaran kromosom

tanpa membran inti

Sel Bakteri

STRUKTUR BAKTERI

• Dinding Sel• Membran Sel• Sitoplasma• Nucleosid• Kapsul• Flagel• Pili/Fimbriae• Spora

Flagel

Morfologi Bakteri

coccus

bacilli

diplococci

streptococci

Ex:Strep.pyogenesSrtep.viridans

Ex:Neisseria gonorrhoeaDiplococcus pneumonia

Ex:Plasmodium spp.

Ex:Entamoeba

sarcina

Lanjutan…

staphylococci tettraden

coccobacilli

Ex:Stap. AureusStap.Epidermidis

Ex:• E.Coli• Haemophi

lus influenzae

Ex:Sarcina luten

Lanjutan…

Filamentous form

vibrio

Fusiform bacilli

spiral

Ex:Treponema Pallidum (sipilis)

Ex:Vibrio Cholera

Diagnosing in Microbiology

• Specimen : Depend on symptoms and timing– Urine, blood, pus, spinal fluid, sputum, or stool

• PEWARNAAN• Cultures (Blood Agar,Nutrient agar, BHIA,

MacConkey, SS Agar, TCBS)• Biochemical Tests (TSI, SIM, VP, Methyl

Red, Citrat, Urea, KH test)• Nucleic Acid Methods (PCR, hybridization,

blots)• Antibody Mediated (ELISA, slide/latex

agglutination, Widal reaction, tagged fluorescence, titer)

PEWARNAAN BAKTERI

Pewarnaan SederhanaDikatakan sederhana karena hanya menggunakan 1 zat pewarna. . Zat warna basic yang paling sering digunakan untuk pewarnaan sederhana adalah methylen blue, crystal violet, dan carbol fuchsin.Tujuan:• Morfologi• Koloni

Prinsip:Bakteri=latar=warna sama

--warna bakteri lebih gelap

Fuchsin/Safranin

Methylen Blue

Air Fuchin

Methylen Blue

PEWARNAAN NEGATIF• Praktis tidak perlu fiksasi dengan

panas dan tidak ada pengaruh bahan kimia

• Zat warna acidic dgn chromogen bermuatan negatif tidak bisa penetrasi ke dalam sel

• Latar belakang berwarna• Tujuan : morfologi dan koloni• Zat warna :

– Tinta India (negrosin)

Pewarnaan NegatifKenapa bisa latar hitam???

Karena yang digunakan adalah tinta cina/india ink yang tdk mampu berdifusi ke dalam bakteri

streptobasilcoccus

Tinta India

Pewarnaan Differensial

• Pewarnaan Gram• Pewarnaan Tahan Asam• Pewarnaan Kapsul• Pewarnaan Spora

PEWARNAAN GRAM

• Merupakan pewarnaan diferensiasi• Tujuan : Morfologi, koloni, dan sifat gram• 4 reagensia

– Zat warna primer : Crystal Violet– Mordant : Lugol atau Gram’s Iodin– Peluntur : Ethyl Alkohol 96%– Zat warna kontras : safranin atau larutan

Fuchin

PEWARNAAN GRAM

• Gram Positif Dinding peptidoglikannya tebal Mengikat zat Warna Pimer (diperkuat oleh mordant) tidak luntur oleh peluntur tidak terpengaruh zat warna kontras

• Gram Negatif Tidak bisa mengikat kuat zat warna primer warna primer luntur dengan alkohol Zat warna kontras mendominasi

Contoh bakteri :

Gram+ Gram-

Streptococcus Pyogenes

E.Coli

Staphylococcus Aureus

Salmonella spp.

Bacillus Cereus Shigella spp

Gram Positif

Gram Negatif

PEWARNAAN KAPSUL- Untuk melihat kapsul dari bakteri

- Ada 2 metode : Burry-Gins dan Tyler

Burry-GinsTujuan:• Morfologi• Koloni• Sifat=untuk melihat kapsulBakteri berkapsul bakteri patogen

2 reagensia:Zat warna primer : Tinta India / NegrosinZat warna kontras : Safranin / air fuchin

PEWARNAAN TAHAN ASAM(ZIEHL – NEELSEN)

• Tujuan : morfolgi, koloni, sifat tahan asam

• Bakteri tahan asam:– Mycobacterium tuberculosis– Mycobacterium leprae

• Pewarna:– Primer : Carbol Fuchin (dipanaskan)– Peluntur : Alkohol asam ( Ethanol

95% + HCl 3%)– Kontras : Methylen Blue

PEWARNAAN SPORA

• Untuk melihat spora bakteri• Pewarna:

– Primer : Malachite Green pemanasan– Zat peluntur : Air– Konras : Safranin atau larutan fuschin

• Contoh basil berspora:– Bacillus cereus– Bacillus anthracis

TERIMA KASIH