1

Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat (BAL) yang diisolasi dari feses Orangutan (Pongo

pygmaeus) terhadap Penghambatan Pertumbuhan Bakteri Enterik Patogen secara In Vitro.

In Vitro Test of Antimicrobial Activity of Lactic Acid Bacteria Isolated from

Orangutan (Pongo Pygmaeus) Feces toward Enteric Pathogen

Wahyuni E. Septiarini, Masdiana C. Padaga, Dyah A. Oktaviane

Program Studi Pendidikan Dokter Hewan, Program Kedokteran Hewan

Universitas Brawijaya

wahyuni.ub@gmail.com

ABSTRAK

Bakteri Asam Laktat (BAL) merupakan probiotik yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri

patogen. Bakteri patogen yang sering menginfeksi orangutan yaitu Shigella, E. coli, dan Salmonella. Bakteri

Asam Laktat memproduksi substansi penghambat seperti asam laktat, diasetil, asetidehid, hidrogen peroxida

(H2O2), karbon dioksida (CO2) dan bakteriosin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan aktivitas

antimikroba yang dihasilkan oleh isolat BAL yang diisolasi dari feses orangutan yang dapat menghambat

pertumbuhan bakteri enterik patogen dan mengetahui konsentrasi penghambatan minimum substrat antimikroba

yang dihasilkan BAL terhadap bakteri enterik patogen. Penelitian ini dilakukan dengan uji aktivitas antimikroba

secara In Vitro dengan metode well diffusion assay dan perhitungan konsentrasi penghambatan minimum

(Minimum Inhibitory Concentration). Hasil penelitian menunjukkan BAL yang diisolasi dari feses orangutan

memiliki aktivitas antimikroba yang bervariasi pada 14 isolat. Zona hambat dari BAL terhadap E.coli yang

terbentuk adalah 3,43 mm hingga 8,57 mm, terhadap Salmonella 3,9 mm hingga 6,9 mm, dan terhadap Shigella

3,77 mm hingga 7,63 mm. Konsentrasi penghambatan minimal oleh BAL terhadap Shigella adalah 70% serta

E.coli dan Salmonella adalah 90%. Dari hasil analisa statistik BAL memiliki perbedaan penghambatan terhadap

bakteri enteric patogen (P

2

PENDAHULUAN

Bakteri Asam Laktat (BAL) merupakan

golongan mikroorganisme yang bermanfaat

dengan sifat tidak toksik bagi inangnya dan

mampu menghasilkan senyawa yang dapat

membunuh bakteri patogen (Klaenhammer,

2005). Menurut Food and Agriculture

Organization/World Health Organization

(Anonimous, 2001) untuk menjadi probiotik,

BAL harus memiliki aktivitas antimikroba

dengan memproduksi substansi penghambat

seperti asam laktat, diasetil, hidrogen peroxida

(H2O2), karbondioksida (CO2) dan senyawa

peptida antimikroba yang bernama bakteriosin.

Senyawa-senyawa ini tidak hanya dapat

menghambat pertumbuhan bakteri tetapi dapat

mempengaruhi metabolisme bakteri atau produksi

toksin (Rolfe, 2000). Bakteri Asam Laktat dapat

diberikan pada hewan maupun manusia. Salah

satu contoh hewan yang dapat diberikan BAL

adalah orangutan. Orangutan merupakan spesies

prioritas (flagship species) sebagai lambang

konservasi yang termasuk kedalam jenis satwa

liar dilindungi dengan status terancam punah

(Endangered Spesies) sesuai dengan IUCN Red

List tahun 2002. Salah satu penyebab kepunahan

orangutan yaitu infeksi bakteri patogen. Bakteri

patogen yang sering menginfeksi orangutan yaitu

Shigella, E. coli dan Salmonella (Aieolo, 2000).

Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan untuk

menguji aktivitas antimikroba BAL yang diisolasi

dari feses orangutan (Pongo pygmaeus) dan

mengetahui Minimum Inhibitory Consentration

(MIC) BAL terhadap bakteri enterik patogen

Escherichia coli, Salmonella dan Shigella

dysentrieae secara in vitro.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui

aktivitas antimikroba dan konsentrasi

penghambatan minimum (Minimum Inhibitory

Concentration) yang dihasilkan oleh isolat BAL

dari feses orangutan (Pongo pygmaeus) terhadap

bakteri enterik patogen. Penelitian ini diharapkan

dapat memberikan informasi tentang isolat BAL

asal orangutan sebagai kandidat probiotik yang

memiliki efek antimikroba terhadap bakteri

enterik patogen dan dapat dijadikan dasar teori

penggunaan BAL sebagai terapi gangguan

pencernaan pada orangutan sehingga dapat

dijadikan salah satu upaya pelestarian satwa.

MATERI DAN METODE

Alat dan Bahan

Bahan yang digunakan: Isolat BAL yang

diisolasi dari feses orangutan, Bakteri enterik

patogen (E.coli, Shigella dysenteriae, dan

Samonella), media de Mann, Rogosa, Sharpe

Agar (MRSA)(Merck,VWR, International,

Darmstadt, Germany), media de Mann, Rogosa,

Sharpe Broth

(MRSB)(Merck,VWR,International,Darmstadt,G

ermany), media Nutrient Broth (NB)(Himedia,

Mumbai, India), media Nutrient Agar (NA)

(Oxoid, England), Pepton Water 0,1%, aquades,

dan blank disk (Oxoid), sedangkan alat yang

digunakan: cawan petri, tabung reaksi (Pyrex),

tabung sentrifus 15 ml, beaker glass (pyrex),

erlenmeyer (pyrex), inkubator (Mmm

medcenter), jangka sorong, neraca analitik

(Metter Toledo), autoclave, spektrofotometer

(Ganesys 20), sentrifuge dan laminar air flow (

Nuaire labgard class II).

Prosedur Penelitian

Persiapan Bakteri Uji

Sebanyak 14 Isolat BAL diinokulasi pada

MRSB dan diinkubasi pada suhu 37C. Isolat

pada media MRSB disentrifugasi dengan

kecepatan 6000 rpm selama 15 menit untuk

diambil supernatan (Al-rawi, et al., 2009). Isolat

Bakteri enterik patogen diinokulasi pada NB dan

diinkubasi pada suhu 37C (Bromberg et al,

2004).

Uji In Vitro Aktivitas Antimikroba BAL

Uji aktivitas antimikroba BAL terhadap

bakteri patogen dilakukan dengan metode well

diffusion assay sesuai dengan metode Bromberg,

et al. (2004) dan Saranya & Hemashenpagam

(2011). Metode menggunakan pour plate dengan

Nutrient Agar 20 ml serta 0,1 ml bakteri patogen

dan diatasnya diberikan blank disk yang berisi 50

l BAL kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam. Penghambatan ditunjukkan

dengan adanya zona hambat di sekitar blank disk.

3

Penghitungan Minimum Inhibitory Concentration

(MIC)

Minimum Inhibitory Concentration (MIC)

digunakan untuk mengetahui konsentrasi terendah

senyawa antimikroba yang dihasilkan oleh isolat

BAL yang dapat menghambat pertumbuhan

bakteri patogen. Metode yang digunakan dalam

penghitungan MIC adalah tube dilution

technique sesuai metode yang digunakan Kubo

(1993). Konsentrasi yang digunakan yaitu 10%,

20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% dan

100%. Konsentrasi tersebut berisi BAL, media

pengenceran dengan volume hingga 100 ml dan

bakteri patogen 1 ml. Kemudian dilakukan

pengukuran OD (Optical Density) sebelum dan

setelah inkubasi 37oC selama 24 jam.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Isolat BAL yang digunakan berjumlah 14

isolat dan 3 spesies Bakteri Enterik Patogen

dengan populasi sesuai pada Tabel 1.

Tabel 1. Bakteri yang digunakan dalam penelitian

Jenis

Bakteri Spesies Populasi Waktu

inkubasi

BAL

Patogen

Aerococcus&

Pediococcus

107cfu/ml 18 jam

Lactobacillus

E.coli

Salmonella

Shigella

109cfu/ml

107cfu/ml

1011

cfu/ml

1011

cfu/ml

18 jam

14 jam

14 jam

14 jam

Populasi bakteri yang digunakan dalam

penelitian sesuai dengan kurva pertumbuhan,

dimana waktu inkubasi disesuaikan pada fase

stasioner. Menurut Djide dan Sartika (2000),

bakteri menghasilkan senyawa metabolit primer

pada fase stasioner. Menurut Arief, et al. (2010),

BAL bermanfaat bagi tubuh dan bekerja sebagai

probiotik pada jumlah populasi 107 cfu/ml sampai

109 cfu/ml. Menurut Kothary and Babu (2001)

bahwa jumlah bakteri (E.coli, Salmonella dan

Shigella) bersifat patogen lebih dari populasi 106

cfu/ml.

Selanjutnya Bakteri Asam Laktat tersebut

diuji aktivitas antimikroba terhadap Bakteri

Enterik Patogen dengan pengukuran zona hambat

yang tersaji pada Tabel 2.

Tabel 2. Rerata diameter zona hambat BAL terhadap bakteri patogen

Isolat Bakteri Bakteri uji

E.coli (mm)* Salmonella (mm)* Shigella (mm)*

1 (Pediococcus) 7,0 + 1,0c

6,9 + 0,72g

6,77 + 1.75o

2 (L. brevis) 5,77 + 0,81e

5,9 + 1,31i

7,63 + 1,53l

3 (L. acidophilus) 5,87 + 2,21e

6,23 + 0,50h

6,2 + 1,15o

4 (L. brevis) 5,10 + 1,82e

3,9 + 3,38k

7,53 + 1,66m

5 (L. brevis) 5,33 + 0,35e

5,7 + 1,0i

6,9 + 2,47n

6 (L. plantarum) 5,53 + 0,40e

4,87 + 0,51j

5,87 + 0,51p

7 (L. plantarum) 5,33 + 0,65e

5,9 + 1,05i

3,77 + 3,28q

8 (L. plantarum) 5,67 + 0,91e

5,77 + 0,92i

6,57 + 1,5o

9 (Aerococcus sp/Enterococcus faecalis) 8,57 + 2,73a

4,53 + 3,96j

6,1 + 0,98o

10 (L. acidophilus) 7,53 + 1,33b

6,57 + 1,02h

6,2 + 1,15o

11(L. plantarum) 6,90 + 1,01d

5,67 + 1,45i

6,8 + 1,85o

12 (L. plantarum) 6,10 + 6,15d

4,67 + 4,05j

6,33 + 0,35o

13 (L. plantarum) 4,23 + 4,35f

6,33 + 1,35h

5,57 + 0,35p

14 (L. plantarum) 3,43 + 3,18f

4,0 + 3,48k

5,33 + 0,35p

*Rerata diameter zona hambat dihitung dari duplikasi sampel yang ditanam pada duplikasi cawan

dengan 3 ulangan

Ket: Setiap kolom terdapat superskrip berbeda yang menunjukkan perbedaan yang nyata

(P

4

Data hasil penelitian pada Tabel 2

menunjukkan bahwa 14 isolat BAL mampu

meghambat bakteri E.coli, Salmonella dan

Shigella karena memiliki aktivitas antimikroba.

Diameter zona hambat yang terbentuk bervariasi

yaitu 3,43 mm hingga 8,57 mm. Dari analisis

statistik menunjukkan adanya perbedaan yang

sangat nyata terhadap E.coli dan Shigella serta

terdapat perbedaan yang nyata terhadap

Salmonella (P < 0.05).

Zona hambat BAL terhadap E.coli

bervariasi yang termasuk dalam kategori tinggi

dengan diameter lebih dari 6.10 mm dan kategori

sedang dengan diameter lebih 3.43 mm.

Pengelompokan kategori diameter zona hambat

tersebut berdasarkan Pan, et al. (2009). Isolat 9

yaitu Aerococcus sp./Enterococcus faecalis

memiliki zona hambat tertinggi dengan diameter

8.57 mm. Hal ini membuktikan bahwa isolat 9

memiliki kemampuan menghambat tinggi. Isolat

14 yaitu yaitu Lactobacillus casei/Lactobacillus

plantarum memiliki kemampuan menghambat

dengan diameter 3.43 mm.

Zona hambat BAL terhadap Salmonella

termasuk dalam kategori tinggi dengan diameter

lebih dari 6.23 mm dan kategori sedang dengan

diameter lebih dari 3.9 mm. Zona hambat

tertinggi dimiliki oleh isolat 1 yaitu Pediococcus

sp. dengan diameter 6.9 mm. Hal ini

membuktikan bahwa isolat 1 memiliki

kemampuan menghambat tinggi.

Zona hambat yang dihasilkan oleh BAL

terhadap Shigella termasuk dalam kategori tinggi

dengan diameter lebih dari 6.1 mm dan kategori

sedang dengan diameter lebih dari 3.77 mm. Zona

hambat tertinggi dimiliki oleh Isolat 2 yang

merupakan Lactobacillus

delbrueckii/Lactobacillus brevis dengan diameter

7.63 mm. Lactobacillus sp. memiliki aktivitas

antimikroba yang mampu menghambat bakteri

patogen tinggi daripada BAL yang lain.

Penghambatan BAL terhadap E.coli,

Salmonella dan Shigella dilakukan dengan

merusak dinding sel sehingga mengakibatkan lisis

atau menghambat pertumbuhan dinding sel pada

sel bakteri yang sedang tumbuh, merubah

permeabilitas membran sitoplasma yang

menyebabkan kebocoran nutrien didalam sel,

penghambat sintesis protein dan asam nukleat

dengan cara mendenaturasikan protein dan asam

nukleat, menghambat kerja enzim intraselluler

sehingga mengganggu metabolisme sel (Pelezar

and Chan, 2008).

Menurut Abdelbasset, et al. (2008),

Lactobacillus memiliki senyawa antimikroba

seperti asam organik, hidrogen peroksida, diasetil

dan bakteriosin yang menghambat pertumbuhan

bakteri patogen. Aktivitas antimikroba BAL

disebabkan terutama oleh asam organik yang

diproduksi sebagai hasil metabolisme glukosa

seperti asam laktat dan asam asetat (Bogaert and

Naidu 2000). Bakteri Asam Laktat juga

memproduksi hidrogen peroksida (H2O2) melalui

transport elektron melalui enzim flavin dengan

peroksida lipid membran dan meningkatkan

permeabilitas membran. Lactobacillus sp

memiliki mekanisme kerja dengan tidak dapat

mendisosiasi asam organik yang masuk kedalam

sel bakteri dan mendisosiasi sitoplasma,

penurunan pH intraselluler secara berkala atau

akumulasi interseluler dari ionisasi asam organik

sehingga menghambat pertumbuhan bakteri

patogen (Markas and De vyust, 2006). Menurut

OMahony, et al. (2000), Aerococcus sp mimiliki kemampuan penghambatan dengan menghasilkan

senyawa antimikroba seperti bakteriosin yang

bekerja menembus membran sel. Menurut

Soomro, et al. (2002), Pediococcus sp

menghasilkan senyawa antimikroba seperti

bakteriosin (Pediosin) sehingga pertumbuhan

bakteri terganggu.

Hal ini sesuai dengan penelitian dari Pan,

et al. (2009) menyatakan bahwa L. acidophilus

mampu menghambat E. coli dan S.typmurium

dibandingkan dengan Clostridium difficile.

Nupar, et al. (2008) menyatakan bahwa L.

acidophilus, L. paracasei, L. rhamnosus, L. casei

menghambat Salmonella. Arief, et al. (2008)

melaporkan bahwa Lactobacillus sp yang

diisolasi dari daging sapi dapat menghambat

E.coli, Salmonella dan S.aureus. dan Santoso

(2008) yang menyatakan bahwa S. thermophillus,

L. plantarum, L. acidophilus, L. fermentum, Leuc.

Paramesentroides dan Pediococcus pentosaeceus

dapat menghambat E.coli, Shigella dan

Morganella.

5

Dari hasil uji aktivitas antimikroba,

diketahui bahwa isolat 3 mampu menghambat

Salmonella dan Shigella dengan diameter zona

hambat tertinggi dan memiliki potensi probiotik.

Isolat 9 mampu menghambat E.coli dengan

diameter zona hambat tertinggi serta memiliki

potensi probiotik. Dari hasil tersebut dilakukan uji

konsentrasi penghambatan minimal terhadap

bakteri patogen yang tersaji pada Tabel 4.

Tabel 4. Rerata nilai OD untuk uji konsentrasi penghambatan minimal Konsentrasi

BAL(%)

Bakteri Patogen

E.coli* Salmonella* Shigella*

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

1.666+0.015

1.583+0.058

0.998+0.025

0.714+0.048

0.544+0.058

0.268+0.048

0.143+0.015

0.090+0.053

-0.073+0.031

-0.010+0.017

1.343+0.850

1.070+0.435

0.770+0.075

0.467+0.032

0.297+0.211

0.967+0.035

0.567+0.108

0.533+0.100

-0.023+0.074

-0.003+0.124

1.330+0.036

1.143+0.081

0.910+0.096

0.553+0.666

0.440+0.173

0.157+0.379

-0.010+0.361

-0.010+0.010

-0.023+0.021

-0.007+0.006

*Rerata nilai OD dihitung dari duplikasi sampel yang ditanam pada duplikasi tabung dengan 3 ulangan, isolat 3 untuk Salmonella, Shigella dan isolat 9 untuk E.coli

Data hasil penelitian pada Tabel 4

menunjukkan bahwa BAL isolat 9 menghambat

E.coli pada konsentrasi minimal 90% ditunjukkan

dengan nilai selisih optical density (OD) bernilai

negatif yaitu -0.073 yang berarti terjadi

penurunan nilai Optical Density (OD) setelah

inkubasi yang menunjukkan adanya

penghambatan BAL terhadap E.coli dengan

terjadinya penurunan jumlah sel. Hal ini dapat

disimpulkan bahwa pada konsentrasi 90% BAL

mampu menghambat E.coli. Bakteri Asam Laktat

(BAL) isolat 3 menghambat Salmonella pada

konsentrasi minimal 90% ditunjukkan dengan

nilai selisih optical density (OD) adalah -0,023,

artinya terjadi penurunan nilai optical density

(OD) setelah inkubasi 24 jam yang menandakan

kultur memiliki penurunan kekeruhan. Hal ini

dapat disimpulkan bahwa terjadi penurunan

jumlah sel setelah inkubasi, sehingga adanya

hambatan oleh BAL terhadap pertumbuhan

Salmonella. Hal ini sesuai dengan pernyataan

Purwono (2007) Semakin keruh suatu kultur,

semakin banyak jumlah selnya. Kekeruhan

dikarenakan BAL menghasilkan senyawa

antimikroba yang menghambat bakteri patogen.

Penelitian Triani (2008) menyatakan bahwa

konsentrasi penghambatan minimal BAL

terhadap E.coli adalah 80% dan Salmonella

adalah 90%. Bakteri Asam Laktat (BAL) isolat

3 juga mampu menghambat Shigella pada

konsentrasi minimal 70% ditunjukkan dengan

nilai selisih optical density (OD) negatif yaitu -

0.010, artinya terjadi penurunan nilai OD setelah

inkubasi yang menunjukkan terjadi

penghambatan oleh BAL. Hal ini membuktikan

bahwa BAL isolat 3 dapat menghambat Shigella

dengan konsentrasi lebih rendah dibandingkan

Salmonella. Hal tersebut menandakan Shigella

lebih sensitif terhadap BAL, sesuai pernyataan

Naufalin (2005) bahwa nilai MIC yang lebih

rendah menunjukkan bakteri patogen lebih

sensitif terhadap BAL. Menurut Prescott et al.

(2002), Shigella lebih sensitif terhadap BAL

dikarenakan Shigella memiliki lapisan

peptidoglikan tipis yang menyusun dinding sel

sehingga mudah dihambat oleh BAL pada

konsentrasi yang rendah. Penghambatan BAL

terhadap bakteri patogen dipengaruhi oleh

perbedaan dinding sel dan lapisan peptidoglikan

yang menyusun dinding sel. Peptidoglikan Gram

negatif hanya 1-2% dari berat kering. Membran

luar tersusun atas lipoprotein 30%, fosfolipid 20-

6

25%, protein 40-45% yang berfungsi sebagai

pertahanan terhadap lingkungan luar dan terhadap

antimikroba yang dihasilkan BAL (Prescott et al.,

2002). Semakin tipis lapisan peptidoglikan yang

menyusun dinding sel dan perbedaan dinding sel

bakteri patogen maka bakteri tersebut semakin

sensitif terhadap BAL.

KESIMPULAN

Bakteri asam Laktat (BAL) asal feses

Orangutan (Pongo pygmaeus) mampu

menghambat bakteri entrik patogen (E.coli,

Salmonella dan Shigela), karena memiliki

aktivitas antimikroba yang ditunjukkan dengan

adanya zona hambat pada media pertumbuhan

bakteri. Konsentrasi penghambatan minimum

(Minimum Inhibitory Concentration) BAL asal

feses Orangutan (Pongo pygmaeus) isolat 9

terhadap E.coli yaitu 90% dan isolat 3 terhadap

Salmonella yaitu 90% dan terhadap Shigella yaitu

70%.

UCAPAN TERIMA KASIH

Penelitian ini dibawah payung yang

diketuai oleh drh. Masdiana C. Padaga, M. App.

Sc. Ucapan terima kasih kepada drh. Masdiana C.

Padaga, M. App. Sc dan drh. Dyah Ayu

Oktaviane A. P., M. Biotech selaku pembimbing

atas bimbingan, dukungan dan bantuan dalam

penyelesaian penelitian ini. Terima kasih kepada

Laboratorium Sentral Ilmu Hayati atas fasilitas

yang diberikan dalam penelitian.

DAFTAR PUSTAKA

Abdelbasset, M. and K. Djamila, 2008.

Antimicrobial activity of autochthonous

lactic acid bacteria isolated from Algerian

traditional fermented milk Rab. Afr. J.

Biotechnol., 7: 2908-2914.

Aieolo, E. S. 2000. The merck veterinary manual

(8th

ed.).Usa: merck&co, inc. White house

station.

Arief, I. I., R. A. A. Maheswari dan H. Nuraini.

2008. Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam

Laktat yang Diisolasi dari Daging Sapi.

Makalah Seminar Hasil Penelitian

Departemen IPTP Fakultas Peternakan.

IPB. Bogor

Arief, I. I., B. S. L. Jenie, M. Astawan., and A.

B. Witarto. 2010. Efektivitas probiotik

Lactobacillus plantarum 2c12 dan

Lactobacillus acidophilus 2b4 sebagai

pencegah diarepada tikus percobaan. Med.

Pet. 33: 137-143.

Al-rawi, A. A. M. M and A. T. Al-mola. 2009.

Antimicrobial activity of lactic acid bacteria

isolated from minced beef meat against

some patogenic bacteria. Iraqi J of vet sci,

vol. 23, supplement I, (115-117).

Barrow, G. I., and R. K. A. Fetham. 1993. Cowan

And Steels Manual for the Identification of Medical Bacteria. Cambridge university

press. New York.

Bogaert J. C., and A. S. Naidu. 2000. Lactic acid.

Di dalam: Natural Food Antimicrobial

System. AS.Naidu (editor).Florida : CRC

Press.

Bromberg, R., I. Moreno, C. L. Zagagini, R. R.

Delboni and J. de Oliveira. 2004. Isolation

of bacteriocin producing lactic acid bacteria

from meat and meat products and its

spectrum of inhibitory activity. Braz. J.

Microbiol. 35: 137-144.

[FAO]. Food and Agriculture Organization. 2001.

Health and Nutritional Properties Of

Probiotic In Food Including Powder Milk

With Live Lactic Bacteria.

Klaenhammer, T. R., R. Barrangou, B. L. Buck,

M. A. Azcarate-Peril, and E. Altermann.

2005. Genomic Features of Lactic Acid

Bacteria Effecting Bioprocessing and

Health. FEMS Microbiol. Rev. 29: 393409.

Kothary, M. H. and Babu, U. S. 2001. Infective

Dose of Foodborne Pathogens in

Volunteers: a review. J. of Food Safety vol

21, Issue 1, pages 4968. Kubo, I. H., H. Muroi and M. Himejima. 1993.

Antimicrobial Activity against Mutan of

Mute Tea Flavor Component. J. Agric.

Food Chem. 42:107-111.

Markas and De Vyust. 2006. The in vitro

Inhibition of Gram Negatif Pathogen

Bacteria by Bifidobacteria is caused by the

Production of organic acids. Inf.Dairy.J.

16:1049-1057

7

Naufalin, F. 2005. Kajian Sifat Antimikroba

Ekstrak Bunga Kecombrang (Nicolaia

speciosa horan) terhadap Berbagai Mikroba

Patogen dan Perusak Pangan. [Disertasi].

IPB. Bogor.

Nowroozi, J., Mirzaii, M. and Norouzi, M. 2004.

Studi of Lactobacillus as Probiotic

Bacteria. Iranian J. Publ Health 33 : 1-7.

Nupar. G.,Kalpana. D., and Gandhi. 2008.

Antimicrobial Activity of Probiotik

Lactobacillus strains towards Salmonella

enteric scr enteritidis in Whey. J.microbiol

vol 5 numb I.

Oscarriz, J. C. and A. G. Pisabarro. 2001.

Classification and mode of Action of

Membrane-active Bacteriocins Produced by

Gram Positive Bacteria. Int. Microbiol.

4:13-19.

OMahony. A., I. Osullivan, Walsh, Y., Vaughan, A., Maher, M., Fitzgerald, G.F.,

and Van, Sinderen. 2000.Characterization

of Antimicrobial Producing Lactic Acid

Bacteria from Malted Barley. J. The

Institude Brewing 106:6.

Pan, X., Chen, F., Wu, T., Tang, H., and Zhao, Z.

2009. The acid, Bile Tolerance and

Antimicrobial property of Lactobacillus

acidophilus NIT. J. Food Control 20 : 598-

602.

Pelezar, J. M and Chan, E. C. 2008. Dasar-dasar

Mikrobiologi. Jilid 1. Terjemahan.

Universitas Indonesia Press. Jakarta.

Permanasari. 2008. Karakteristik Substrat

Antimikroba Bakteri Asam Laktat Hasil

Isolasi dari Daging Sapi dan Aktivitas

Antagonistiknya terhadap Bakteri Patogen

[Skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Prescott. L. M., Horley. J. P., and Klein. D. A.

2002. Microbiology 5th

ed. Boston: Mc

Graw-Hill.

Purwoko, T. 2007. Fisiologi Mikroba. Bumi

Aksara. Jakarta.

Rolfe. 2000. The Role of Probiotic Cultures in the

control of Gastrointestinal Health. J. of

noutrition. 130,396S-402S.

Saranya, S. and Hemashenpagam, N. 2011.

Antagonistic Activity and Antibiotic

Sensitivity of Lactic acidbacteria from

Fermented Dairy Products. Adv in applied

sci research2 (4):528-534.

Santoso, E. 2008. Bakteri Asam Laktat pada

Cumi-cumi Kering Asin da Aktivitas

Penghambatannya terhadap Bakteri Patogen

dan Bakteri Pembusuk. Fakultas Pertanian.

UNRAM.

Soomro, A. H., T. Masud and K. Anwaar. 2002.

Role of Lactic Acid Bacteria (LAB) in Food

Preservation and Human Health A Review.

Pakistan J. of Nutrition 1 (1):20-24.

Triani, W. 2008. Aktivitas Substrat Antimikroba

Bakteri Asam Laktat yang diisolasi dari

Daging Sapi terhadap Bakteri Patogen dan

Konsentrasi Minimum Penghambatannya

[skripsi]. IPB. Bogor.