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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 1 Introduccin Al Estudio de la Micologa Medica

    Samuel Reyes UNEFM

    1) La Micologa Mdica y sus Generalidades

    La palabra micologa proviene de las palabras griegas mykes que significa miceto, hongo; y logos qu

    significa estudio o tratado.

    La micologa se puede definir como el estudio de los hongos y actinomicetos que afectan al hombre y los

    animales.

    Por su parte la micologa mdica es una rama de la microbiologa, interrelacionada con todas laespecialidades de la medicina, y tiene por objeto estudiar las enfermedades producidas por hongos y lo

    hongos que las producen.

    1.1) Definicin de Hongo:

    es un organismo eucaritico, perteneciente al reino fung.

    Tambin puede definirse como un parsito eucariota simple que, careciendo de clorofila, no es capaz d

    fabricar su propio alimento y depende de otras formas vivas.

    Por lo general crecen en forma de filamento, y su desarrollo puede tener formas variables

    1.2) Definicin de Actinomiceto: es un organismo procariota, perteneciente al reino protista. Y que sparecen a los hongos por su crecimiento atpico, presencia de filamentos y ramificaciones en tejidos o

    cultivos y produccin de enfermedades crnicas.

    En realidad constituyen un grupo heterogneo de bacterias que en algn momento de su ciclo de

    crecimiento desarrollan fi lamentos ramificados que fragmentan en elementos cocoides y/o bacilares.

    1.3) Otras Definiciones Bsicas:

    Espora es el trmino con que se designa a una clulareproductora generalmente haploide. La reproduccin poresporas permite al mismo tiempo la dispersin y la

    supervivencia por largo tiempo (dormancia) en condicionesadversas. La espora produce un nuevo organismo al dividirsepor mitosis sin fusin con otra clula, produciendo un

    gametofito pluricelular. El trmino tambin puede referirse ala etapa inactiva de algunas bacterias, lo que se denominams correctamente endosporas y no son esporas en el sentidoconsiderado aqu. La mayora de los hongos producen esporas;aquellos que no lo hacen se denominan hongos asporgenos.

    Gametofito En Botnica, en las plantas con ciclo de vida haplodiplonte (es decir, con generacionealternadas de individuos haploides y diploides)

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    Un conidio introduccin) es una espora asexual inmvil formada directamente a partir de una hifo clula conidiogena o esporgena. Aparecen en hongos:Zygomycetes, Ascomycetes y algunos Basidiomycetes. El trminoDeuteromycetes est en desuso pues la tendencia actual es referirsea estos hongos mediante los grupos principales mencionados a losque pertenecen. Aunque muchas especies de hongos han perdido lacapacidad de producir estructuras sexuales y se reproducen slo

    asexualmente, es posible ubicarlos en alguno de los grandes gruposde hongos mencionados anteriormente, mediante anlisismorfolgico o molecular.El trmino conidio o conidia se utiliza tambin para las esporas de las bacterias del grupo de los

    Actinomycetes, como las del gnero Streptomyces.

    2) Caractersticas Generales de los Hongos

    Los hongos anteriormente eran considerados plantas actualmente son clasificados en un reino propio, y s

    caracterizan por:

    Son organismos eucariotas.

    Carecen de clorofila

    De vida libre, habitan naturalmente en agua suelo y aire.

    SonQuimio hetertrofos: es decir usan compuestos orgnicos como fuentes de carbono y energa.

    Pueden ser Pluricelulares o unicelulares

    Formadores de esporas y conidias

    Se reproducen sexual o asexualmente

    2.1) Clasificacin de los Hongos segn su nutricin y su forma de vida

    Saprofitos:

    llamados as por su forma de Sapo este tipo de hongo seencuentra en casi todos los medios naturales y artificiales. Sondegradadores, viven de los desperdicios de plantas principalmente, a lasque llega a desintegrar. No aportan ningn tipo de ayuda a la plantasuperior, pero tampoco la perjudican. Acostumbra a atacar las partesmuertas de la madera. Pueden ser tanto comestibles como venenosos, entpico ejemplo de hongo saprofito es el Champin de los prados

    (Agaricus campestris) que acostumbra a crecer en terrenos abonados.

    Parsitos: aunque todos los hongos son parsitos por naturaleza, sueleemplearse el termino de hongo parasito para aquel que parasita a losanimales o a las personas, estos son los que pueden crear algunapatologa en el organismo, aunque solo un pequeo porcentaje de estos

    hongos pueden llegar a ser patgenos hay ms de 70.000 especies y solocerca de 100 son patgenas para mamferos.

    Simbiticos:

    suele emplearse este trmino para los hongos similares a lossaprofitos que se encuentran cerca de plantas y que crean una simbiosiscon las mismas.

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    2.2) Clasificacin de los Hongos segn su Morfologa

    Muchos hongos tienen la capacidad de desarrollarse de las dos formas (como mohos y como levaduras), esta capacidad se le conoce como dimorfismo, y depende de la temperatura en la que se desarrolle el hongolos mohos se desarrollan a temperatura ambiente (20-25C) y las levaduras se desarrollan a temperatur

    corporal (37C)

    Todos los hongos poseen una pared celular,

    formada de polisacridos, polipeptidos y quitina,ya que la pared es rgida, solo la pueden atravesarnutrientes simples y/o solubles.

    Los hongos adems poseen una estructuraconocida como talo o micelio, este es un complejo

    que puede estar constituido de dos formas frecuentes que son:

    Por mltiples filamentos o hifas, en el caso de los hifomicetos, los cuales son tambin conocidocomo mohos, las hifas pueden ser septadas o no.

    Por estructuras unicelulares,en el caso de los blastomicetos o levaduras.

    Los hongos estn presenteen la vida cotidiana, los qutienen un aspecto mohosson los que suelenapreciarse en el pan viejo recubriendo frutas viejas y/

    en descomposicin.

    Las levaduras, soutilizadas comnmente parcocinar, un lugar comdonde estas se encuentra

    es en la cerveza.

    3) Caractersticas Morfolgicas de los Mohos

    Los mohos son hongos que como ya se mencion suelen crecer a temperatura ambiente (entre 20 y 25 C).

    3.1) Talo:ya se mencion que es la estructura principal del hongo, es tambin conocido como cuerpo dehongo.

    Los Mohos, tienen un talo pluricelular, o tambin llamado filamentoso, debido a la mltiple cantidad defilamentos que posee, esta caracterstica le da el nombre de Hongos Filamentosos, a los hongos quepresentan esta morfologa, los filamentos son conocidos como Hifa.

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    a) Las Hifas:

    Son estructuras filamentosas tubulares, y caractersticas fundamentales de los hongo

    filamentosos.

    Las hifas son elementos filamentosos cilndricos caractersticos de la mayora de los hongos que conformansu estructura vegetativa. Estn constituidos por una fila de clulas alargadas envueltas por la parecelular que, reunidas, forman el micelio (en sentido amplio) termina en punta, misma que constituye lzona de extensin y representa la regin de crecimiento.

    Se originan por: gemacin de las esporas.

    La gemacin (del latn geminus "gemelo") es un tipo de reproduccin asexual. Es una divisin desigualconsistente en la formacin de prominencias sobre el individuo progenitor, y que al crecer y desarrollarsorigina nuevos seres que pueden separarse del organismo parental o quedar unidos a l, iniciando as una

    colonia

    Pueden ser de dos tipos:

    a.1) Hifas Sifonadas (Aseptadas o Cenocticas):

    No poseen septos que separen la estructura dela Hifa, por lo general la estructura interna deestas hifas es desordenada, los organelos estndispersos. Estas hifas son comunes en hongos inferiores,estos pueden llegar a presentar septos, pero solo para

    separar partes viejas o reproductoras.

    a.2) Hifas Tabicadas (Septadas): Presentes en los hongossuperiores, estas hifas son ms organizadas, ya que estndivididas en mltiples compartimientos, cada tabique(septo) posee un poro septal (Corpsculo de Woronin), que

    permite la continuidad citoplasmtica.

    De las dos hifas,los ncleos

    tienen membrana doble y nuclolo;los organelos citoplsmicos

    incluyemitocondrias, retculo endoplsmico, vacuolas, ribosomas 80S (las bacterias tienen 70S) y aparato de Golgrelacionado con la produccin de vesculas secretoras, cuerpos lipdicos, inclusiones cristalinas (ergosteroly micro cuerpos; tambin puede haber hileras de microtbulos

    y glucgeno.

    b) Unin de Hifas Micelio)

    : Como ya se mencion elcrecimiento entrelazado de mltiples hifas es conocida como

    micelio. Segn su funcin el micelio puede ser:

    b.1) Vegetativo o Sumergido:que sirve de nutricin y sostn al

    micelio reproductor.

    b.2) Reproductivo (Areo):Origina unidades de reproduccin(las conidias o las esporas)

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    Los hongos presentan variaciones, en su forma y constitucin, importantes para diferenciarlos:

    Dilataciones o vesculas

    rganos de resistencia o clamidosporas

    rganos de fijacin como rizoides y appressorium

    Hifas en espiral o tirabuzn: rganos nodulares formados por hifas torcidas en forma de nudo

    Hifas en raqueta, con un ensanchamiento en un extremo

    Candelabros fvicos (hifas en cuerno o asta) que estn dados por varias ramificaciones al final duna hifa

    Hifas pectinadas o en forma de peine

    Hifas peridiales, que son ensanchadas y multiseptadas con terminacin en espiral y acumulacin dmuchas hifas (esclerocioesclerote), cuyo objetivo es almacenar sustanciasde reserva.

    Otras agregaciones miceliales son: Los coremios y sinemas (con rganos de fructificacin y sin ellos, respectivamente) Estromas redondeados frtiles y asexuados, como los picnidios, o sexuados como el apotecio

    (aspecto de copa), peritecio y cleistotecio Hay la tendencia actual a llamar todas las agregaciones micelianas con el trmino ascomata

    4.2) Forma de Reproduccin

    :

    Conidiogenesis talica (se explicara ms adelante)

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    4) Caractersticas Morfolgicas de las Levaduras

    4.1) Talo:El talo de las levaduras se caracteriza por ser un talo unicelular.

    Esta es la unidad fngica ms simple, al igual que los anteriores se reproducen por gemacin, formand

    estructuras conocidas como blastoconidias, a diferencia de los mohos que generan esporas.

    Las levaduras no forman hifas, si no estructuras con forma similar, formadas por la unin de mltiple

    levaduras, debido al aspecto similar a las hifas se llaman Pseudohifas

    Por fuera de la diferencia durante la reproduccin se puede apreciaque las levaduras tienen estructuras algo similar a los mohos, ambapresentan mltiples organelos en comn

    5.2) Forma de Reproduccin:Conidiogenesis blastica (blastoconidias) (se explica mas adelante).

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    5) Crecimiento In vitro de los Mohos y Levaduras

    En el cultivo in vitro de los hongos, estos suelen agruparse en aglomeraciones fngicas conocidas comcolonias, cada colonia de hongos debe tener caractersticas especficas tales como:

    CARACTERSTICAS

    MACROSCPICAS

    HONGO

    FILAMENTOSO

    HONGO

    LEVADURIFORME

    COLOR

    ColoniaReverso

    Pigmento del medio

    TAMAO DE LA

    COLONIA Dimetro

    ASPECTO

    Aterciopelada,Algodonosa,Pulverulenta

    Cremosa/ Mucoide

    CARACTERSTICAS

    MICROSCPICAS

    HONGO

    FILAMENTOSO

    HONGO

    LEVADURIFORME

    MICELIO

    HIALINO

    SEPTADO

    OBSERVACIN DEBLASTOCONIDIAS,SEUDOHIFAS YCLAMIDOSPORAS

    ASEPTADO

    DEMATIACEOSEPTADO

    ASEPTADO

    GRUESO

    DELGADO

    PRODUCCIN,

    TAMAOY

    DISPOSICIN DE

    LAS CONIDIAS

    DEPENDIENDO DE LA ESPECIE

    De las caractersticas microscpicas y macroscpicas de los hongos en general se profundiza en la prctic

    #1.

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    6) Caractersticas Diferenciales de Relevancia

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    7) La Taxonoma de los Hongos y Sus Generalidades

    La taxonoma (del griego , taxis, ordenamiento, y , nomos, norma o regla) es, en su sentido

    ms general, la ciencia de la clasificacin. Habitualmente, se emplea el trmino para designar a lataxonoma biolgica, la ciencia de ordenar la diversidad biolgica en taxones anidados unos dentro d

    otros, ordenados de forma jerrquica, formando un sistema de clasificacin.

    Es necesario saber que como reglas de Taxonoma el nombre se debe escribir en letra cursiva, el gnero

    debe escribirse con la primera letra en mayscula y la especie debe comenzar en minsculas ejemplo:

    Cndida pseudotropicalis

    En el caso de que existan mltiples especies de un mismo gnero se puede abreviar el gnero con la inicia

    en maysculas seguido de un punto ejemplo:

    C. guilliermondii, C. krusei

    Y por ltimo en dado caso que no se conozca la especie o las especies se utiliza sp o spp respectivamente.

    Cndida sp/spp.

    (Segn el arenas)

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    La taxonoma empleada en clase fue la siguiente:

    Reino: Fungae

    Divisin: Eumycota

    Subdivisin:

    a)

    Zygomycotina:Clase: Zygomycetes / TrichomycetesOrden: Mucorales /Etomophtorales

    b) Ascomycotina: (80% de los hongos patgenos)

    Clase: Endomycetes/ Evascomycetesc) Basidimycotina:

    Clase: Heterobasidomycetes

    d) Deutoromycotina: (Hongos imperfectos)

    Clase: Blastomycetes/ Hyphomycetes/ Coelmycetes

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    8) Reproduccin de Los Hongos

    8.1) Sexual o Telomorfo:

    consiste en la unin de dos ncleos compatibles, este tipo de reproduccin no efrecuente en hongos patgenos humanos, se produce por los fenmenos de:

    Plasmogamia- Cariogamia y meiosis.

    La reproduccin sexual es difcil de observar en un laboratorio, ya que este tipo de reproduccin es rara l

    vez que se produce en los hongos, hay especies de hongos que se reproducen sexualmente solamente unvez cada 30 aos.

    Cuando se culmina se logra un estado perfecto o Telomorfo.

    Esta reproduccin depende de esporas sexuadas propias de las especies:

    ZigosporasZigomycota

    BasidiosporasBasidiomycota

    Ascosporas

    Ascomycota8.2) Asexual o Anamorfa:en este tipo de reproduccin no hay unin de ncleos, clulas u rganos sexualeses la reproduccin ms comn dentro del mundo de los hongos, y por lo tanto la ms importante, este tip

    de reproduccin es frecuente en hongos patgenos.

    El resultado de una reproduccin asexuada es un hongo imperfecto o

    anamorfo.

    Suele llevarse a cabo por medio de esporas generadas por una clula

    especializada o conidigena, las cuales son externas y se llaman

    conidios, y slo en los zigomicotas son internas y se llamanendosporas o esporangiosporas.

    Las esporas asexuadas se encuentran dentro de la clasificacin de

    deutoromycota.

    Las siguientes son esporas de reproduccin asexual o anamorfas:

    a) Esporangiosporos:

    Son esporas asexuales de carcter endgeno (endosporas), producidas dentro destructuras cerradas llamadas esporangios, que a su vez son

    sostenidas por hifas especializadas de micelio areo, o reproductivodenominado esporangioforos. Comunes en los hongos aceptados

    (Zygomycetes) No estn presentes en hongos patgenos.b) Conidias: Esporas asexuales de origen exgeno, caractersticas de

    hongos con hifas septadas, se forman a partir de una clulaconidiogena (hifa reproductiva especializada) llamada conidiforo.Este medio de reproduccin es el usado por hongos patgenos.

    A menudo, se observa una estructura diferenciada que sostiene una oms clulas conidigenas y se llama conidiforo. En tal sentido se

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    puede hacer el siguiente esquema:Conidiforo Clula conidiogena ConidiaHay dos modelos bsicos deconidiognesis: tlico y blstico.

    Conidiogenesis Blastica: pequeobrote en la clula conidigena que

    da lugar al conidio. Conidiogenesis Talica: toda la

    clula conidiogena se convierte enuno o ms conidios.

    Los tipos de conidias ms comunes son:I. Arttroconididas:stas son conidios que se producen por la simple separacin de tabiques en

    la hifa; el aspecto recuerda los vagones de un ferrocarril.II. Aleuriosporas: Se forman por simple ensanchamiento de la extremidad de la clul

    conidigena, que da lugar a un solo conidio. Pueden ser:

    Unicelulares: microaleuriosporas o microconidios. Pluricelulares (macroaleuriosporas o macroconidios)

    III. Blastosporas: Conidios formados por gemacin o blastognesis de la clula conidigena, qu

    permanece fija; stos se observan aislados, en racimos o cadenas, como en las levaduras

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    9) Enfermedades en las que los Hongos se ven Involucrados:

    9.1) Alergias:

    Reaccin de hipersensibilidad frente a antgenos intrnsecamente no nocivos, la mayora delos cuales son ambientales. Las alergias se clasifican en tipos I, II, III y IV. En los tipos I, II y IIIparticipan diferentes inmunoglobulinas, que interactan con diversos antgenos. La alergia de tipo IV sasocia con dermatitis de contacto y est mediada por clulas T, que reaccionan directamente con e

    antgeno produciendo inflamacin local.

    9.2) Micotoxicosis:Intoxicacin sistmica producida por las toxinas elaboradas por los organismos fngicos

    9.3) Micetismos:

    Intoxicacin por setas.

    9.4) Micosis: Cualquier enfermedad producida por hongos. Algunos tipos de micosis son: candidiasis

    coccidiodomicosis y el conocido vulgarmente pie de atleta.

    A lo largo de esta unidad se van a estudiar los diversos tipos de micosis:

    Superficiales

    Subcutneas

    Profundas

    Oportunistas

    10) Ecologa de los Hongos

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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 2 Mecanismo de Defensa Frente a los hongos Patgenos

    Samuel Reyes UNEFM

    1) Las Micopatias

    La palabra miopata proviene de las palabras griegas mykes que significa miceto, hongo; y ptheia, qu

    significa sufrimiento o dolor.

    Las Micopatias ms comunes son de tres tipos:

    Alergnicas:como alergias.

    Toxicas:como la micotoxicosis (consumo de granos) y el micetismo (Amanita phalloides).

    Micosis: son enfermedades especficas producidas por hongos, el presente tema se centra endescribir cmo influyen los mecanismos de defensa en una enfermedad producida por hongos, ascomo tambin, cmo saber qu tipo de rastros dejan las micosis en el organismo.

    2) Factores determinantes en el desarrollo de una infeccin fngica.

    Por lo general las micosis tienen una baja incidencia debido a la actividad delsistema inmune para controlar distintos hongos comunes en el medio

    ambiente como elAspergillus spp o Cndida spp.

    Para que una micosis se desarrolle con efectividad es necesario que los 3elementos de la triada epidemiolgica estn en relacin: ambiente, husped y

    parasito.

    2.1) Factores Ambientales

    Vegetacin

    Suelo pH - sales minerales

    Humedad

    Temperatura

    Vientos

    Zoonosis

    2.2) Factores propios del Hongo

    Dimorfismo

    Adhesinas: estas son protenas o glicoprotenas que se unen a receptores del hospedador dnaturaleza similar. Ej.: Cndida albicans. Se adhiere a materiales plsticos como prtesis ycatteres.

    Enzimas: Facilitan multiplicacin del hongo, favoreciendo la diseminacin por los tejidos dehospedador. Por ejemplo:

    Peptidasas que rompen enlaces peptdicos de las protenas. Fosfolipasas de Cndida albicans. Queratinasasde los dermatofitos (parsitos de queratina).

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    Elastasas deAspergillus fumigatus.

    Produccin de endo y exo toxinas estas pueden terminar en tumores hepticos y dao renaejemplo de estas toxinas son: aflatoxinas, fumonisinas yocratoxinas. Algunas hongos capaces de producir estetipo de toxinas son: Aspergillus spp, Fusarium sp,Penicillium sp

    Matriz extracelular cementante

    Presencia de capsula en las clulas fngicas.

    Produccin de melanina,comn en los hongos causantesde la cromoblastomicosis.

    Diferencias de cepas.

    Tamao de la clula.

    Componentes de pared.

    2.3) Factores del Husped

    En el husped existirn dos tipos de factores de susceptibilidad y de resistencia.

    2.3.1) Factores de Susceptibilidad

    Genticos

    Raza, edad, sexo

    Hormonales

    Alteraciones metablicas

    Enfermedades:oncohematolgicas, hepticas, renales, diabetes, infecciones virales

    Trasplantes y deficiencias inmunes:(VIH)

    Ocupacin

    Grupo sanguneo

    Antgenos de histocompatibilidad

    Otras menos determinantes:

    Carencias nutricionales

    Quemaduras

    Traumatismos extensos

    Irradiaciones

    Alcoholismo

    Toxicomana

    Uso de prtesis

    Catteres

    Tratamientos con: antibiticos, corticoesteroides, radioterapia, inmunosupresores Edades extremas

    Anomalas anatmicas

    2.3.2) Factores de Resistencia

    Inmunidad natural (inespecfica) e inmunidad adquirida (humoral e inmunidad mediada por clulas).

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    3) Inmunidad Natural o Inespecfica Principios Bsicos)

    Es un sistema de defensa con el cual las personas nacen y que protege contra todos los antgenos. Lainmunidad innata consiste en barreras que impiden que los materiales dainos ingresen en el cuerpo.

    Estas barreras forman la primera lnea de defensaque se ve manifestada entre otras cosas por:

    La piel

    Mucosas

    Microbiata autctona normal.

    El cido estomacal

    La segunda lnea de defensa, del organismo tambin se verepresentada por esta inmunidad, en esta lnea de defensa sedesencadena la cascada de la derecha.

    4) Inmunidad Especfica Principios Bsicos).

    Es un sistema de defensa que constituye la tercera lnea de defensa

    del organismo, esta inmunidad se ve representada por dos tipos declulas:

    Por linfocitos T en el caso de la inmunidad celular.

    Por linfocitos B en el caso de la inmunidad humoral

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    4.1) Inmunidad Celular

    En la inmunidad celular las clulas presentadoras de antgenos (macrfagos, clulas dentricas y clula

    LB), se encargan de presentar los antgenos a los linfocitos T (CD4+).

    Las clulas T disponen en su membrana celular de lugares de reconocimiento de antgeno (o receptores dlas clulas T). A travs de ellos, se unen a los antgenos que llegan al organismo, rechazando cualquier otr

    fragmento proteico que lleve unido un MHC (Complejo mayor de histocompatibilidad).

    El reconocimiento del antgeno representa el primer paso en esta inmunidad mediada por clulas. Ademslas clulas T necesitan de un co-estimulador para ponerse en marcha. Este puede ser una de la

    citoquinas.

    Las citoquinas

    son pequeos polipptidos con actividad hormonal que son sintetizadas y excretadas ponumerosas clulas (linfocitos, monocitos, fibroblastos, clulas endoteliales, etc). Muchas de ellas sonautocrinas, aunque la mayora son endocrinas. Cuando son producidas por los linfocitos, se llamaninterleucinas, monoquinas cuando son producidas por los monocitos y factores de crecimiento o d

    inhibicin segn el lugar donde acten.

    Una vez que se une a la citoquina el linfocito T queda activado y comienza a proliferar rpidamenteproducindose un gran nmero de clones y otras clulas afines, entre las que se encuentran las clula

    colaboradores (T Helpers), las clulas citotxicas, las clulas de memoria y las clulas supresoras.

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    a) Clulas colaboradoras T Helpers o TH):

    llamadas comnmente T4 estas clulas llevan una protenCD4. Al ser activadas segregan una variedad de citoquinas que ayudan a la proliferacin de los linfocitos By T. Una de las ms importantes es la interleucina IL-2 que es fundamental para poner en marcha multiplicacin de las clulas T. Adems, la IL-2 acta como cofactor para activar ms clulas TH, la

    clulas citotxicas y las NK.

    b) Clulas citotxicas T CT):

    estas clulas llevan la protena CD8 y actan como clulas citolticas. Par

    lisar las clulas extraas requieren de la activacin por IL-2 u otras citoquinas producidas por las TH.

    c) Clulas T supresoras TS):estas clulas no son bien conocidas pero se cree que producen sustanciacomo el TGF-b que inhibe la proliferacin de las clulas T y B y actuaran para contrarrestar la activacinproducida por las otras

    d) Clulas de memoria:

    estn programadas para reconocer el antgeno invasor original. Si el mismo tipo dpatgeno vuelve a invadir el organismo, las clulas de memoria son capaces de reaccionar con enormrapidez de modo que el invasor es destruido antes de que comience a causar cualquier dao y antes de qu

    aparezca cualquier sntoma

    Otras clulas derivadas de los linfocitos T son las llamadas clulas de hipersensibilidad retardada qullevan en su membrana protenas CD4 o CD8 y que segregan interferones cuando son activadas. E

    interfern activa a los macrfagos los cuales, a su vez, destruyen al invasor.

    Las clulas T citotxicas son, quizs, las ms importantes en la lucha contra los invasores. Tan prontestos son recocidos, dejan el tejido linfoide y emigran al lugar de la infeccin o de la inflamacin. All, seunen a las clulas invasoras quellevan el mismo antgeno que"dispar" su proliferacin y las

    eliminan mediante dos mecanismos:

    segregando una citoquina, laperforina capaz de haceragujeros en las membranasde los invasores produciendola lisis

    segregando la citotoxina, unaprotena capaz de fijarse aalgunas enzimas que regulan

    la sntesis del DNA delinvasor.

    Adems las clulas citotxicasproducen interfern g que, a su vez,activa neutrfilos y macrfagos,actuando en particular sobre sus

    efectos fagocticos.

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    e) Las clulas NK

    (por las siglas de su denominacin en ingls, natural killer, "asesina natural" enespaol) son un tipo de linfocito pertenecientes al sistema inmunitario. Tambin se las conoce como clulanulas. Las clulas asesinas tiene la capacidad de diferenciar las clulas infectadas por un virus, o laclulas tumorales que han sufrido transformaciones malignas. Son capaces de identificar qu clulas sonpropias del hospedador y cuales son forneas. Esto pasa gracias a que los receptores de membrana de lclula asesina detectan la presencia de las MHC de clase 1 o molculas de histocompatibilidad en este tip

    de clulas daadas y receptores inhibidores en clulas sanas.

    Estas clulas NK no tienen una actividad reconocida en la defensa contra hongos.

    En el caso de defensa contra Micosis son importantes:IL 1 a 10, TNF, IFN

    4.2) Inmunidad Humoral

    La inmunidad humoral o inmunidad mediada por linfocitos B es un tipo de inmunidad en el que loLinfocitos B se encargan de sintetizar anticuerpos (inmunoglobulinas), cuando estn en presencia de un

    antgeno especfico.

    Las Clulas B Clulas de Memoria)

    Cuando el lactante tiene unos pocos meses de edad, sus clulas pre-B han terminado la primera fase ddesarrollo llamndose entonces clulas B inactivas. Estas clulas inactivas sintetizan anticuerpos perprcticamente no segregan ninguno. En lugar de ello introducen en una membrana unas 100.00molculas de anticuerpos cuya parte extracelular actuar como receptor de un antgeno especfico si ellofuera necesario. Despus de liberadas de la mdula sea, las clulas B inactivas se acumulan en loganglios linfticos, el bazo, el timo y otras estructuras linfoides.

    Las clulas B se activan

    cuando sencuentra con alguno de sus antgenos especficos, se decir con uno cuyos epitopos encajen con los puntode reconocimiento de ligandos de los anticuerpos situados en la membrana de esta clula. La uninantgeno-anticuerpo activa la clula B desencadenando una rpida serie de divisiones mitticas. De esta

    manera, una nica clula B puede originar un gran nmero de clones o clulas idnticas. Algunas de estaclulas se diferencian y pasan a ser clulas plasmticas que sintetizan y excretan gran cantidad deanticuerpos. Otras, por el contrario no se diferencian sino que permanecen en el tejido linfticoconstituyendo las llamadas clulas B de memoria. La misin de estas clulas de memoria no es sintetizaanticuerpos sino permanecer como reserva por si en otra ocasin se ven expuestas al antgeno que provocsu formacin, en cuyo caso producirn nuevamente clulas plasmticas. Las clulas plasmticas viven

    pocos das pero son capaces de sintetizar y segregar unas 2.000 molculas de anticuerpos por segundo.

    La opzonizacion favorece la fagocitosis, este es el proceso por el que se marca a un patgeno para suingestin y destruccin por un fagocito.

    5) Respuesta Inmunitaria en una Infeccin Fngica

    Durante una infeccin fngica, se van a liberar dos tipos de TH dependiendo de la fase en la que s

    encuentre la infeccin:

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    5.1) Al Inicio de la Infeccin

    Entran en accin principalmente loslinfocitos TH1, estos linfocitos se encargande sintetizar IFNg, e IL2, estas citoquinasfavorecen la proliferacin y la actividad delos macrfagos y los Neutrfilos (PMN), lo

    que conlleva a una inhibicin delcrecimiento fngico es decir una

    resistencia.

    5.2) En el desarrollo de la infeccin

    Entran en accin principalmente loslinfocitos TH2, los cuales liberan IL 4 a la1, estas interleucinas inhiben a los TH1esto favorece el crecimiento fngico, es

    decir hay susceptibilidad.

    6) Inmunodiagnostico de las Micosis

    El diagnstico de las micosis se realiza mediante el estudio micolgico, el cual consiste en la realizacidel examen directo de muestras clnicas y el aislamiento e identificacin de los agentes etiolgicos en lomedios de cultivos.

    Sin embargo, en ausencia de una muestra clnica representativa, como es el caso de algunos pacientes conmicosis sistmicas, es de gran ayuda los datos epidemiolgicos y la aplicacin de otras tcnicadiagnsticas, tales como estudios inmunolgicos, los mismos evalan tanto la respuesta celular y humora

    del paciente.

    6.1) Inmunidad Celular

    Se estudia mediante pruebas de hipersensibilidad:

    La hipersensibilidad clsicamente se refiere a una reaccin inmunitaria exacerbada que produce uncuadro patolgico causando trastornos, incomodidad y a veces, la muerte sbita. Tiene muchos puntos encomn con la autoinmunidad, donde los antgenos son propios. Las reacciones de hipersensibilidadrequieren que el individuo haya sido previamente sensibilizado, es decir, que haya sido expuesto al meno

    una vez a los antgenos en cuestin. La clasificacin en cuatro grupos distintos fue propuesta por P. H. GGell y Robn Coombs en 1963.1 En la dcada de 1930 Coombs sistematiz estas reacciones de acuerdo atiempo que demoraba la aparicin de los sntomas y la dosis de desafo. Esta clasificacin no solamentapuntaba a la cintica de las reacciones, sino tambin a los mecanismos involucrados, y ha sido

    fundamental para orientar la terapia y conocer los mecanismos.

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    La reaccin de la hipersensibilidad retardade tipo IV, es la utilizada para diagnstico de micosis, estas soreacciones inflamatorias las cuales se caracterizan por una infiltracin principalmente con fagocitos.

    Estas reacciones se estudian haciendo uso de:

    Intradermorreaccin IDR)

    Para hacer esta prueba son necesarios antgenos, los cuales sonobtenidos a partir de diferentes formas (micelial o levaduriforme) de

    los hongos causantes de las micosis.

    El antgeno se inyecta en volumen de 0,1 c.c., por va intradrmica,en la cara anterior del antebrazo y la reaccin se observa a las 48horas.

    Se considera positiva si se obtiene una induracin igual o mayor demm. De dimetro. Este proceso es conocido como Tcnica de Sokal

    La IDR se utiliza bsicamente en estudios epidemiolgicos, parainvestigar la existencia de infeccin subclnica en una poblacin y raravez como orientacin diagnstica, ya que una reaccin positiva de 5mm de dimetro o ms, significa que la respuesta inmunitaria delpaciente est intacta y slo seala exposicin al agente.

    Por el contrario, una reaccin negativa no necesariamente excluye infeccin y se puede observar en

    pacientes con casos de micosis diseminadas, lo que indica un estado de anergia de la respuestinmunitaria celular.

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    La IDR se considera una prueba auxiliar en el diagnstico, pronstico y valoracin del estado inmunitari

    de los pacientes con micosis sistmicas.

    Las pruebas intradrmicas ms utilizadas en nuestro medio son las siguientes:

    Candidina:Antgeno obtenido a partir de la levadura Cndida albicans. Resulta positiva en quienes hantenido contacto previo con el hongo; no indica enfermedad; en adultos la positividad es de 60%. En casos

    diseminados puede ser negativa.

    Esporotriquina: Antgeno obtenido a partir de la forma levaduriforme de Sporothrix schenckii. Epresencia de lesiones clnicas la esporotriquina es diagnstica en un alto porcentaje de los casos. Lapruebas positivas perduran por aos en sujetos que viven en zonas endmicas; un resultado positivo enpersonas sin antecedentes de enfermedad sugiere contacto previo con el hongo, probablemente por vpulmonar, por lo que es til en estudios epidemiolgicos. Resulta negativa en ausencia de infeccin o en

    pacientes anrgicos.

    Histoplasmina:Glicoprotena que se prepara a partir de la forma micelial de Histoplasma capsulatumUna respuesta positiva indica infeccin presente o pasada. Es positiva en 50 a 80% en personas quhabitan reas endmicas. Una respuesta negativa a la histoplasmina puede traducir una ausencia dinfeccin o un estado anrgico del paciente, ya sea por una histoplasmosis diseminada o por la presencia d

    alguna enfermedad intercurrente.

    Paracoccidioidina: Se prepara a partir de la forma micelial y levaduriforme de Paracoccidioidebrasiliensis. Se utiliza en estudios epidemiolgicos y para evaluar la respuesta del organismo atratamiento sobre todo en aquellos casos en los cuales la respuesta a la paracoccidioidina antes de

    tratamiento fue negativa.

    Coccidioidina: Existen dos tipos de antgenos fabricados a partir de Coccidioides posadasii o C. immitiutilizados en el estudio de hipersensibilidad retardada. La esferulina, fabricada a partir de las esfrulas yla coccidioidina a partir de la forma filamentosa o micelial del hongo. Es positiva 2 a 3 semanas despudel inicio de los sntomas y puede persistir durante aos. En pacientes sintomticos la positividad a la IDRse considera de buen pronstico; mientras que su negatividad se traduce en una inadecuada respuesta

    celular, anergia y por lo tanto, mal pronstico.

    6.2) Inmunidad Humoral

    La inmunidad humoral en las micosis se estudia mediante tcnicas ideadas con el fin de revelar in vitro

    las interacciones especficas que tienen lugar cuando se mezclan antgenos y anticuerpos homlogos enproporciones adecuadas. Por lo tanto este tipo de inmunidad se estudia mediante pruebas serolgicas tale

    como:

    Aglutinacin

    Fijacin de Complemento

    Inmunoanlisis enzimtico (ELISA)

    Inmunodifusin Doble

    Inmunoelectroforsis

    Inmunofluorescencia

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    Radioinmunoanlisis (RIA

    Las tcnicas de laboratorio usadas en la seccin de micologa para el estudio de la inmunidad humoral de

    paciente son:

    Pruebas de inmunoprecipitacin, tales como inmunodifusin doble (IDD), inmunoelectroforesis contrainmunoelectroforesis.

    Pruebas de aglutinacin de partculas de ltex, fijacin de complemento (FC) e inmunoanlisi

    enzimtico (IAE).

    La Inmunodifusion Doble

    Descripcin:

    La tcnica IDD se fundamenta en los principios de doble difusin descritos por Oudin y Ouchterlony.

    Consiste en la determinacin de anticuerpos especficos contra extractos antignicos de los hongo

    causantes de micosis, los cuales migran hasta un punto, en el que interaccionan originando bandas dprecipitacin, que son evidenciadas mediante tincin de protenas.

    La especificidad de esta banda se corrobora comparando la banda producida por el suero del paciente conla originada por el suero de referencia; si ambas se fusionan formando un arco continuo, se produce lallamada lnea de identidad, que se traduce en un resultado positivo, poniendo en evidencia que el pacientposee anticuerpos especficos contra el antgeno en estudio.

    Si la banda del suero del paciente se contina con la del suero control pero sin fusionarse por completo, sedenomina banda de identidad parcial, originada porque los anticuerpos del suero de paciente reaccionan

    en una forma incompleta con los antgenos fngicos y puede deberse a reacciones cruzadas con fraccionesantignicas comunes a varios hongos. La banda de identidad parcial no se interpreta como positiva, perdebe considerarse realizar otras pruebas complementarias como la fijacin de complemento

    inmunoanlisis enzimtico para evaluar la especificidad de los anticuerpos.

    Por otra parte, si no se produce banda de precipitacin en el suero del paciente o si esta se entrecruza conla del suero de referencia (banda de no identidad), constituye un resultado negativo.

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    Procedimiento de la IDD:

    1 Enumerar lminas portaobjetos limpias y secas (25x75mm) con lpiz de diamante.

    2 Adicionar a cada lmina 3 ml de agarosa fundida al 1% (preparada con agua destilada) y dejasolidificar a temperatura ambiente.

    3 Labrar en el gel el diagrama para IDD, orificio central de un (1) mm de dimetro para el antgeno y seiorificios perifricos de cuatro (4) mm de dimetro para los sueros a ensayar.

    4.Agregar 40 l segn la profesora Jessica 15-20 l de los sueros controles y sueros de los pacientes

    evaluar, seguidamente agregar 8-10 l de antgeno, en los pozos correspondientes.

    5 Colocar las lminas en cmara hmeda (placa de Petri con papel de filtro humedecido con aguadestilada), por 24 horas a temperatura ambiente y luego por 24 horas a 4 C. Luego de transcurrido este

    tiempo realizar la lectura preliminar.

    6 Sumergir las lminas en solucin de Citrato Trisdico al 5% por 90 minutos.

    7 Lavar las lminas con agua de chorro y sumergirlas en placas de Petri conteniendo Solucin SalinFisiolgica 0,85% (volumen suficiente que cubra por completo la lmina) durante 48 horas (cambiando l

    solucin tres veces al da).

    1 12 2 2

    3 3 3

    4 4 4

    5 5 5

    666

    1

    Diagrama para Inmunodifusin Doble con sueros de referencia en el estudiode micosis subcutneas y sistmicas. 1,4: Suero control positivo para elantgeno a evaluar. 2,3,5 y 6: Suero de paciente. O antgeno a evaluar.

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    8 Lavar las lminas con agua destilada y cubrirlas con papel de filtro humedecido con agua destilada

    Colocarlas en estufa a 50-60 C hasta obtener una deshidratacin total.

    9 Colorear las lminas con solucin colorante de protenas (Amidoschwarz) durante 5 a 10 minutos

    decolorarlas con cido Actico Glacial al 4% hasta obtener visualizacin de las bandas.

    A continuacin una muestra de los pasos en imgenes:

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    Lectura e interpretacin de resultados:

    Un resultado es considerado positivo al observar bandas de identidad. Las muestras que resulten conbandas de identidad parcial deben ser verificadas mediante otras pruebas complementarias comInmunoanlisis enzimtico o la tcnica de fijacin de complemento. Si no se produce banda dprecipitacin en el suero del paciente o si esta se entrecruza con la del suero de referencia (banda de n

    identidad), se interpreta como negativo.

    Al ser positivo el resultado es importante que el suero del paciente sea sometido a la pruebsemicuantitativa de la IDD para determinar el ttulo de anticuerpos presentes en ese suero.

    En la IDD semicuantitativa se emplean los mismos antgenos que para la IDD y la tcnica es similarvariando en lo siguiente: Se coloca en el pozo N 1 el suero control o de referencia, en el N 2 el suero depaciente sin diluir y en los N 3, 4, 5 y 6 el suero diluido con solucin salina a 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, etc. En ehoyo central se coloca el antgeno especfico de la micosis a evaluar. El resto del procedimiento se continigual al de la IDD (Figura 9). El ttulo del suero del paciente va a ser la ltima dilucin donde se observ

    la lnea de identidad.

    Diagrama para IDD semicuantitativa. Evaluacin de ttulos de anticuerpos. C: Suero control. S: Suero problema sin diluir. 1/21/16 diluciones dsuero. O: Antgeno

    Correlacin E Interpretacin De La IDR E IDD En El Inmunodiagnstico Micolgico.

    Los resultados de la IDD deben ser estudiados en coorelacion con los de la IDR, el resultado se simplificaen la siguiente tabla:

    1/2

    1/4

    1/8

    1/16 S

    1/2

    1/4

    1/8

    1/16 S

    1/2

    1/4

    1/8

    1/16 SC C C

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    Y se explica detalladamente en la siguiente tabla:

    ESTUDIO

    MICOLGICO

    IDR IDD RESULTADO

    Directo y

    cultivo:

    POSITIVO

    Positivo:

    Estuvo en contacto con el

    hongo

    Positivo:

    Presenta anticuerpos

    precipitantes frente a

    los antgenos fngicos

    Presenta la enfermedad

    Directo y

    cultivo:

    Positivo

    Negativo:

    No estuvo en contacto con

    el hongo o se encuentra

    en estado anrgico

    (inmunosuprimido).

    Positivo:

    Presenta anticuerpos

    frente a los antgenos

    fngicos

    Presenta la enfermedad

    Directo y

    cultivo:

    Positivo

    Positivo:

    Estuvo en contacto con el

    hongo

    Negativo:

    No presenta

    anticuerpos frente a los

    antgenos fngicos

    Estuvo expuesto al

    hongo. Presenta la

    micosis puesto que se

    hizo la observacin

    microscpica del hongo

    y aislamiento del mismo

    en el medio de cultivo

    Directo y

    cultivo:

    Negativo

    Positivo:

    Estuvo en contacto con el

    hongo

    Negativo:

    No presenta

    anticuerpos frente a los

    antgenos fngicos

    Estuvo expuesto al

    hongo ms no presenta

    la enfermedad.

    Directo y

    cultivo:

    Negativo

    Negativo:

    No estuvo en contacto con

    el hongo o se encuentra

    en estado anrgico

    (inmunosuprimido).

    Negativo:

    No presenta

    anticuerpos frente a los

    antgenos fngicos

    El paciente puede:

    1. No presentar

    enfermedad mictica.

    2. Estar

    inmunosuprimido y

    presentar enfermedad

    por otro agente.

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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 3 Micosis Generalidades y Micosis Superficiales ms Comunes

    Samuel Reyes UNEFM

    1) Clasificacin de las Micosis

    Las micosis se clasifican en 5 grupos

    Micosis superficiales

    Micosis cutneas

    Micosis subcutneas

    Micosis profundas, diseminadas o sistmicas

    Micosis oportunistas

    1.1) Micosis Superficiales

    El parasitismo fngico se ubica a nivel del estrato crneo y la porcin suprafolicular del pelo. Se clasifican

    en 3 grupos:

    1.1.1) Dermatomicosis/queratomicosis:

    afectan la dermis y la epidermis principalmente son 4:

    Dermatofitosis (tias)

    Pitiriasis versicolor

    Tia negra

    Onicomicosis no dermatoftica

    1.1.2) Pilonodosis:

    afectan los folculos pilosos principalmente son 3:

    Piedra blanca y piedra negra Candidosis/candidiasis mucocutnea

    Otomicosis

    Segn la OMS el 20% de la poblacin general posee una de las siguientes micosis superficiales:

    Dermatofitosis

    Pitiriasis versicolor

    Candidosis mucocutnea

    1.2) Micosis Cutneas:

    Afectan la piel y sus anexos (Pelos y uas)

    Dermatofitosis o tias

    Dermatomicosis por Scytalidium

    Candidiasis cutnea y de mucosas

    1.3) Micosis Profundas

    El parasitismo fngico se ubica a nivel del estrato crneo. Se clasifican en 3 grupos:

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    Micosis profundas localizadas/ M. subcutneas

    Micosis profundas sistmicas/ M. diseminadas

    Micosis oportunistas

    2) Dermatofitosis Tineas o Tias

    Son infecciones de los tejidos queratinizados (piel, pelos y uas) causadas por un grupo de hongoqueratinoflicos

    denominados dermatofitos

    .

    Afectan piel y anexos. Segn la localizacin se manifiestan por afeccin pilar, engrosamiento ungueal, por placas con eritema y descamacin con bordes activos. Tales micosis son de evolucin subaguda o

    crnica ms o menos pruriginosa. La invasin profunda es excepcional.

    La taxonoma de los dermatofitos y su identificacin rutinaria se basa en criterios morfolgicos

    macroscpicos y microscpicos, relacionados con la fase de reproduccin asexual de estos hongos:

    Macroconidias-microconidias-hifas

    2.1) Agente Causal

    Los dermatofitos comprenden tres gneros anamorfos:

    Microsporum, (Gruby,1843).

    Trichophyton, (Malmsten,1845).

    Epidermophyton, (Sabouraud, 1907).

    Hay ms de 40 especies entre los 3 gneros, pero solo 30 pueden producir dermatofitosis, 10 son las m

    frecuentes y de esas 10 solo 6 estn en ms del 90% de los casos.

    Los hongos dermatofitos segn su hbitat (el ser humano, los animales o el suelo) se clasifican en especies Zooflicas

    Antropoflicas

    Geoflicas

    Aqu los agentes causales ms comunes con su Taxonoma/ ecologa

    Microsporum/ Macroconidias

    M. canis(zooflico)

    M. gypseum(geoflico)

    Trichophyton/Microconidias

    T. rubrum

    T. interdigitale

    T. tonsurans (antropoflico)

    T. mentagrophytes (zooflico).

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    Epidermophyton/

    Macroconidias

    E. floccosum. (antropoflico).

    2.2) Patogenia

    Los dermatofitos germinan y penetran en el estrato crneo formando hifas. Su hbitat son clulamuertas, < 37 C, les gusta la humedad, el hierro y otros nutrientes.

    Poseen queratinasas para hidrolizar los diferentes tipos de queratinas - pelo, cistena, piel-metioninaprotenas.

    Tropismo/ diferentes tipos de queratina

    Microporum: pelos, piel

    Trichophyton: pielpelos - uas

    Epidermphyton: piel, uas

    Las infecciones por dermatofitos se

    denominan de acuerdo a la zona anatmicaafectada:

    Tinea capitis, t. barbae,t. corporis,t. cruris, t,

    pedis, t. unguium, t.faciei.

    2.2.1) Tinea capitis:

    Ubicada en el cuero cabelludo

    Etiologa

    Zooflicos:

    Microsporum canis,

    Trichophyton mentagrophytes

    Gatos, perros, conejos

    Antropoflicos:

    T. tonsurans. Portadores sanos en los adultos

    T. rubrum

    Formas clnicas T. capitisno inflamatoria: pitiriasis capitis, tonsurante.

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    T. capitis inflamatoria: Kerin.

    2.2.2 Tinea faciei: Ubicada en el rostro, comnmente en el vello facial.

    Etiologa

    Predominio en nios y ancianos.

    De difcil diagnostico debido a la larga evolucin

    Fotosensibilidad

    Dermatofitos:

    T. rubrum, T. mentagrophytes zoofilico), M. canis

    zoofilico).

    2.2.3 Tinea corporis

    Ubicada en todo el cuerpo, es llamada Tineaincgnita, se diagnostica por una historia clnica evocadora de tinea.

    El tratamiento con esteroides o cremas polivalentes, la suspensin del tratamiento lleva a recadas

    Etiologa

    T.rubrum (antropofilico) es el ms comn

    Tambin puede ser causada por M. canis

    Altamente frecuente por error diagnstico y automedicacin

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    2.2.4 Tinea cruris:

    Ubicada en la pierna, en el musloy en la ingle, es de difcil diagnostico debido a la zonaque invade (una zona pudorosa), las personas nosuelen acudir al mdico a menos que la micosis sea

    muy insoportable.

    Etiologa

    Comunmente suele ser causada por:

    T.rubrum

    E. floccosum

    2.2.5 Tinea peds: Ubicada en el pie y en algunoscasos puede llegar a las manos debido a que las personas suelen rascarse la zona afectada del pie.

    Etiologia

    T. rubrum

    T. mentagrophytes

    T. interdigitale

    Formas Clinicas

    Tinea pedis interdigital: ubicada entre las uas por logeneral se mantiene en esta zona, es comn que genere unmal olor. Exite una forma clnica de esta Tinea llamadadermatofitoide Que es la que ataca las manos

    Tinea pedis hiperqueratosica: suele atacar las zonas masqueratinizadas del pie como la planta del pie adelante y en los talones, genera una piel escamada spera.

    2.2.6 Tinea ungium Onicomicosis):

    Ubicada en las uas de las manos o de los pies, comnmente suel

    extenderse por ms de una ua del miembro afectado. Genera:

    Hiperqueratosis

    Onicolisis

    Cambio de coloracin de la ua.

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    Etiologa

    T. rubrum

    E. floccosum

    T. mentagrophytes

    Existen casos de onicomicosis no dermatrofitica, ccausadas por hongos del medio ambiente

    Fusarium sp

    Aspergillus sp

    Scytalidium sp

    Formas clnicas:

    Onicomicosis subungueal (O.S) distal y O. S lateral: afecta la porcin distal y lateral de la ua.

    O. S. proximal: afecta la regin de la cutcula.

    O. blanca superficial: solo afecta la parte ms superficial de la ua

    Distrfica total: daa toda la ua es comn en personas de avanzada edad.

    2.3) Diagnostico

    Toma de muestra: Raspado, depilacin, cepillo, onicotoma.

    Examen directo: KOH 10% - 40%. (Diagnstico de enfermedad)

    Cultivo: Lactritmel, Sabouraud. T. A (Identificacin del agente causal) Macroscpicas/ tubo o placa

    Microscpicas/cultivo en lmina

    Los detalles del diagnostico se profundizan en la gua practica.

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    2.4) Prevencion y Control

    Las dermatofitosis son enfermedades infecto-contagiosas. Tratamiento de los enfermos y de los portadores sanos (T.tonsurans) Control de fomites

    3) Candidiasis

    La candidiasis es una infeccin fngica (micosis) de cualquiera de las especies Candida (todas lalevaduras), de las cuales la Candida albicans es la ms comn.

    Tambin comnmente referida como una infeccin por deuteromycetes, la candidiasis tambin etcnicamente conocida como candidosis, moniliasis, y oidiomycosis.

    Es la micosis oportunista ms frecuente.

    La candidiasis abarca infecciones que van desde las superficiales, tales como la candidiasis oral y vaginitishasta las sistmicas y potencialmente mortales, conocidas como candidemias y son usualmente limitadas personas inmunocomprometidasLas infecciones superficiales y de membranas mucosas por la Candida qu

    causan inflamacin y malestar son comunes en la poblacin humana

    3.1) Agente Causal

    Levaduras del gnero Candida, estas son en total 163 especies, de las cuales la ms comn es la Cndidalbican. Para referirse a candidiasis no causada por la C. albicans,se emplea la terminacin especies d

    Candida no albicans

    Ademas existe una especie con caractersticas muy similares a la C. albicans llamada C. dubliniensis, lcual al igual que la C. albicanstiene una distribucin Cosmopolitan, y genera una sintomatologa similar

    y que es comn observar en pacientes con SIDA.

    Factores que favorecen la diferenciacin de las especies del gnero Cndida

    Factores locales: Alteracin de la barrera cutneo-mucosa

    Factores generales: Neoplasias, endocrinopatas, desnutricin, Toxicomanas, inmunodeficiencias.

    Otros: Medicamentos, medios diagnsticos o teraputicos, ciruga. Tecnologa mdica

    3.2) Patogenia

    La candidiosis puede ser clasificada en 2 grupos dependiendo de los sntomas que genere:

    Candidosis cutneo-mucosas: ataca piel y/o mucosas

    Candidosis invasiva /sistmica: ataca rganos internos, cabe destacar que las levaduras del gner

    Candidapueden invadir cualquier rgano.

    Principales fuentes de infeccion

    Endgena: Biota del tubo digestivo, vagina (5-50%)

    Exgena: Infeccin nosocomial (Infeccion en centros de salud)

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    3.2.1) Candidiasis cutnea:

    ubicada en la piel.

    Genera:

    Intertrigo de grandes pliegues.

    Erosin interdigital

    Candidiasis en el rea del paal

    Foliculitis (Solo en pacientes con VIH)

    Onicomicosis candidisica con paroniquia y perionixis

    Es comn en nios y suele llamarse paalitis, debido a que se cree que el paal es la causa deenrojecimiento y picazn, siendo en realidad estos producidos porque el sistema inmune del nio esta enpleno desarrollo, por lo que son vulnerables a manifestar sntomas de Candidiosis, sobre todo porque e

    rea del paal genera una zona ptima para el desarrollo de la Cndida spp.

    Es comn tambin que la Cndida, genere Onicomicosis sobre todo en los pies.

    Etiologa

    C. albicans

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    3.2.2) Candidiasis mucosa:

    ubicada en las mucosas de cualquier parte del organismo. Tiene do

    presentaciones clnicas que son:

    Oral o muguet:es la ms comn, presente sobre todo en pacientes con SIDA origina

    Esofagitis

    Candidiasis de mucosa gastrointestinal no esofgica:

    origina

    Vulvovaginitis

    Balanitis

    3.3) Diagnostico

    Para hacer un diagnstico de candidiasis hay que hacer lo siguiente:

    Toma de muestra de la zona afectada.

    Examen directo/ KOH al 10%: como resultado se van a observar blastoconidias redondeadas tpicade una levadura, y tambin pueden aparecer Pseudohifas, con cualquiera de los dos elementopodra diagnosticarse Candidiasis.

    Cultivo: Sabouraud/ Aislamiento, con la finalidad de identificar la especie.

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    Identificacin de la especie

    Si se hace el cultivo en Sabouraud Lactrimel y se observa Bilis-agar/Clamidosporas. Se diagnostic

    Candidiasispor: C. albicans, C.dubliniensis

    Si no se identifica en este punto, se hace un suero/tubo germinativo, y mediante pruebas de asimilacin y

    fermentacin de azcares, se identifica la especie.

    El estudio inmunolgico es esencial en la candidiasis invasiva, permite la deteccin de antgeno

    (Candidina)

    El examen directo confirma un diagnstico previo, pero escasas veces se detecta si no es lo que se presumque la persona padece, ya que es difcil diferenciar el comensalismo y parasitismo por levaduras del gnerCndida. De la cndida saprofita de la piel.

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    10-20 % portadores de C. albicans es en el tubo digestivo.

    C. parapsilosis, C. tropicalis: Flora saprofita de la piel.

    Igualmente importante es correlacionar examen directo y cultivo con el cuadro clnico

    Adems es necesario corroborar la especie para hacer un diagnstico ms certero.

    Las cepas de Cndida sonresistente a los azoles

    Los mtodos de diagnstico por especie son muy costosos, suele utilizarse un medio ms econmico que dacertero a candidiosis, pero no identifica la especie, este medio es el el fungigramael consiste en colocar lmuestra en varios crculos sobre una placa de Petri, cada circulo lleno con un colorante afn a una azcarespecfica, la cual es nica de un gnero, como resultado se aprecia que si las levaduras estn presentestoman colores diferentes a los crculos de control.

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    4) Pitiriasis versicolor

    Es una micosis superficial crnica producida por levaduras lipoflicas del gnero Malassezia.

    Esta infeccin es cutnea, superficial, se caracteriza por manchas en la piel (mculas hipo

    hiperpigmentadas) y suele ser por dems asintomtica.

    Septicemias en neonatos (nutricin parenteral con emulsiones lipdicas)

    4.1) Agente Causal

    Levaduras lipoflicas del gnero Malassezia

    M. furfur, M. globosa, M. obtusa, M. restricta, M. slooffiae, M. sympodialis.

    Malassezia spp. Es una levadura lipoflica que forma parte de la flora saprofita de la piel.

    La M alassezia es asociada a las siguientes patologas:

    Pitiriasis versicolor:

    M. globosa (84%)

    M. slooffiae

    M. sympodialis

    Dermatitis seborreica:

    M. restricta(64%).

    M. globosa.

    M. sympodialis

    M. furfur.

    Flora normal:

    M. sympodialis

    M. slooffiae.

    4.2) Patogenia

    La Pitiriasis versicolor es un micosis que se caracteriza por cambios de coloracin de la piel y descamacin

    Pitiriasis= descamacin. Versicolor= varios colores.Esta es una micosis con relevancia a nivel Esttico > Patolgico

    No es contagiosa

    Es ms frecuente en climas clidos y hmedos , existiendo una predisposicin individual a padecerla, suaparicin se ha relacionado con la presencia de ciertos aminocidos y con la disminucin del recambi

    epidrmico.

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    4.3) Diagnostico

    Se puede diagnosticar mediante:

    Diagnsticos diferenciales/ Clnicos.

    Lmpara de Wood.

    Toma de muestra: Mtodo de la cinta adhesiva. Escamas

    Examen directo: Acmulos de levaduras e hifas. (Diagnstican de enfermedad)

    Cultivo: Medios de cultivo enriquecidos con lpidos/ Saboraud+ aceite de oliva.

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    5) Pilonodosis

    Son infecciones fngicas localizadas en la cutcula del pelo, caracterizadas por la presencia dndulos duros e irregulares compuestos por agregados fngicos.

    5.1) Piedra negra

    5.2) Piedra blanca

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    6) Tinea nigra

    Causada por Phaeoannellomyces werneckii (Exophiala werneckii)

    Levadura dematicea, dimrfica y saprofita.

    Similar a la Pitiriasis

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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 4 Micosis Subcutneas

    Samuel Reyes UNEFM

    1) Generalidades

    Las micosis se clasifican en 5 grupos

    Micosis superficiales

    Micosis cutneas

    Micosis subcutneas

    Micosis profundas, diseminadas o sistmicas

    Micosis oportunistas

    Hasta este punto de la unidad curricular se han desarrollado las micosis superficiales, las cutneas en est

    tema se desarrollaran las subcutneas.

    2) CromoblastomicosisSon micosis causadas por hongos mielinizados o dematiceos. Caracterizada por la presencia de ndulosverrugosidades y atrofia, de evolucin crnica, que afecta principalmente piel y tejido celular dextremidades inferiores.

    2.1) Etiologa

    Son micosis producidas por hongos negros, melanizados dematiceos.

    Los hongos pertenecen al orden de los Chaetothriales.

    Las especies se clasifican en 2 grupos dependendiendo de su frecuencia:

    Las mas frecuentes son: Fonseca pedrosai Cladophialophora carrionii

    Las menos frecuentes son: Phialophora verrucosa

    Rhinocladiella aquaspersa

    Exophiala dermatitides

    2.2) Epidemiologia

    Son micosis distribuidas en climas tropicales, subtropicales, reas con climas calidos, con temperaturas dentre 25 y 30 C, con una presipitacion pluvial de 800 a 1500 mm/ao como Brasil costarica y republciadominicana, en Venezuela se distribuye por: Falcon, Zulia y Lara, siendo la principal zona endmica la

    pennsula de Paraguan. Es la mas abundante del pas con una incidencia de 65.1% (553 casos)

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    Cladophialophora carrionii:se ubica en bosques xerofitos, de espinar y zonas secas. En el mundo subica en Australia y Madagascar. En Venezuela se tienen como reas endmicas, Falcn, Lara yZulia.

    Fonseca pedrosoi y Phialophora verrucosa: se ubican en en bosques deciduo montano y Zonahmedas. Las reas endmicas para F. pedrosoi,son zonas tropicales y hmedas de america latina

    Y de P. verrucosa(zonas ms fras): como Mexico, Brasil, Moscu, Finlandia y Japon.

    2.3) Patogenia

    Clasificacin de las cromoblastomicosis segn Queiroz-Telles 2009

    Tipo Clnico Descripcin Imagen

    Nodular Moderadamente elevada, eritemato-violacea desuperficie lisa, puede ser verrugosa o escamosa,cuando se hace crnica tiende a hacerse tumoral.

    Tumoral Forma una masa prominente, papilomatosa, a veceslobular (como coliflores), de superficie eritematosa overrugosa.

    Verrugosa Lesiones o placas verrugosas, crnicas y zonas dehiperqueratosis, frecuente en el borde de la piel.

    Cicatrizal Causa lesiones planas, crnicas, a menudo con atrofiacentral, pueden ser anulares, o serpigionosas,

    tienenden a cubrir extensas reas del cuerpo

    En placasuperficial

    Placa eritemato escamosa, roja violcea, infiltradaligeramente elevada, de formas diversas.Frecuente en la parte mas alta de los miembros.

    Pueden existir varios tipos a la vez

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    2.4) Diagnostico

    Se diagnostica fcilmente al observar cuerpos esclerticos (clulas fumagoides) y escamocostras en e

    examen directo con KOH al 10-40%

    El cultivo no es necesario para identificar la micosis, se hace con fines epidemiologicos La siembra serealiza sobre agar Sabouraud o Lactrimel, en placa o tubo, se incuba a temperatura ambiente por 8 1das. (Ver gua practica)

    3) Esporotricosis

    Infeccin subaguda, o crnica, afecta principalmente piel y ganglios linfticos en forma de ndulos

    gomas, raramente afecta a huesos, articulaciones y otros rganos.

    3.1) Etiologa

    Hongos dimorficos (estrictos), del complejo Sporothrix schenkii:

    S. albicans, brasiliensis, globosa, mexicana, lurei y schenkii

    Genticamente se dividen en dos cepas (A y B), siendo la A la mas frecuente en america y la B en asia.

    3.2) Epidemiologia

    Predomina en frica del sur, Japn, y amrica en la zona intertropical (Colombia, Venezuela, Ecuador y

    Uruguay).Es la segunda micosis ms comn en Venezuela con una incidencia de 25.9% (220 Casos entre 1984-2010).

    En Venezuela afecta principalmente a jvenes entre 25 y 45 aos, cuya ocupacin estn relacionadas a l

    agricultura y a la plantacin.

    La forma clnica ms abundante es la cutnea linftica.

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    Hbitat y fuente de infeccin

    Clima templado y hmedo

    Temperatura que vara de 20 a 25C

    Humedad relativa mayor al 90%

    El complejo schenkii vive en el suelo, detritus vegetal. Madera, hojas y ramas (secas o frescas), ascomo pueden ser zoonoticas ya que se han encontrado en: pezuas y dientes de roedores (ratas

    ratones y ardillas) y de gatos.

    Es considerada una enfermedad ocupacional, ya que afecta principalmente a campesinos, amas de casanios en edad escolar, cultivadores, vendedores de flores, cazadores, mineros, pescadores, empacadores d

    vidrio y loza entre otros.

    No tiene distincin de sexo, y ataca en todas las edades principalmente nios en edad escolar (5-15 aos)

    adultos jvenes (16-35 aos).

    Vas de entrada:cutnea, traumatismo, y excoriaciones con material contaminado.

    Respiratoria: casos pulmonares primarios, reas endmicas.

    3.3) Patologa

    Tiene diversas formas clnicas que son:

    Cutnea linftica (70%)

    Cutnea fija

    Cutnea superficial

    Cutanea hematgena o diseminada (2%)

    Osteortacular Pulmonar

    Sistemica

    3.4) Diagnostico

    Para establecer el diagnostico de la esporotricosis se hace necesarioconocer la epidemiologa, impresin clnica y recuperar el agente causal

    de las muestras clnicas.

    En el examen directo usualmente no se observan estructuras micticasy ocasionalmente se observa el cuerpo asteroide. Se realiza haciendo

    uso de la coloracin de Giemsa o histolgicas.

    Aunque las clulas en asteroides son muy difciles de localizar.

    Se utilizan adems las pruebas de Intradermorreaccin con esporotriquina para diagnostico

    epidemiologia.

    La fase micelial uso diagnstico y epidemiolgico

    Fase levaduriforme uso epidemiolgico.

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    Las pruebas serolgicas ms usadas son ELISA e IDD

    4) Micetoma

    Enfermedad crnica producida por hongos o actinomicetos aerobios, de origen exgeno, que afectan la puey el tejido celular subyacente, originando deformaciones anatmicas, locales o regionales, con ndulosabscesos, fistulas y formacin de granos.

    4.1) Etiologa

    Hay 27 especies de hongos que producen tres tipos de granos:

    Granos Negros: Madurella mycetomatis Madurella grisea

    Pyrenochaeta romeroi

    Granos Claros: Pseudallescharia boydii

    Acremonium sp Fusarium sp

    Otras 8 especies de granos claros

    Nocardia brasiliensis; asteroides, caviae.

    Actinomadura madurae.

    Streptomyces somaliensis.

    Granos Rojos

    Actinomadura pelletieri

    4.2) Epidemiologia

    Es una micosis presente en africa, asia, america (mexico, Venezuela, Colombia Brasil, argentina

    Guatemala y el salvador). En Venezuela representa el 5,8% con 49 casos.

    En Venezuela los casos de micetomas mas comunes son por actinomicetos (actinomicetomas), y son

    producidos por:

    Actinomadura madurae

    Nocardia brasiliensis

    El resto de los casos son Eumicetomas y son producidos por:

    Madurella grisea

    Pyrenochaeta moreoi

    Habitat y fuente de infeccion

    Tierra

    Detritus vegetal

    Madera

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    Diversas plantas

    Clima: subtropucal y tropical.

    Temperatura: 10-20 y 20-40

    Presipitacion pluvial anual: 500-1000mm

    La va de entrada es cutnea, por traumatismos con espinas, astillas de madera, fibras de plantas, clavospiedras, patadas de animales (burros caballos) y mordedura de reptiles.

    La zona afectada con mayor frecuencia son los pies.

    Ataca principalmente a hombres (relacin 4:1), y principalmente con edades entre 20 y 50aos, eexcepcional en nios.

    Ocupacin: Ataca a campesinos, obreros, mecnicos, amas de casas rurales, personas que trabajan en

    condiciones rudimentarias sin proteccin de zapatos cerrados.

    Periodo de incubacin: es indeterminado, dura entre meses y aos.

    Depende de hongo, respuesta inmunitaria del husped.4.3) Patologa

    Entrada el hongo o bacteria formacin de masas compactas (granos)ataca tejido muscular conjuntiv

    denso deforma el rea afectada produce fistulas.

    Triada del Micetoma

    Aumento de volumen y deformidad del miembro afectado.

    Presencia de fistulas

    Emisin de granos Formacin in vivo de colonias de los agentes causales

    4.4) Diagnostico

    Toma de muestra: secrecin y/o granos

    Examen directo: KOH al 10% Biopsia H-E (Granos)

    Cultivo: medios especiales para hongos y bacterias (identificacin del agente causal).

    Exmenes complementarios (radiologa)

    5) Lacaziosis Lombomicosis)

    Micosis subcutnea, producida por un hongo levaduriforme denominado Lacazia loboi (Loboa loboi)

    caracterizada por producir lesiones cutneas, ndulo-queloideas y verrugosas en el hombre y en el delfn.

    5.1) Etiologa

    Hongo levaduriforme de la divisin de los Ascomycetesy de la clase de los Onygenales, no se ha podid

    cultivar in vitro es considerado dimorfico.

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    5.2) Epidemiologia

    La mayora de los casos han sido reportados en Brasil, en el caso de Venezuela, la zona ms abundante es

    la gran sabana. Representa la micosis subcutnea menos frecuente con 3,2% (27 casos)

    Habitat y fuente de infeccion

    Se sabe poco del hbitat y de la fuente, se presume por estar en delfines que esta presente en agua, y po

    estar presente en humanos que tambin puede vivir en el suelo.

    Vive en climas tropicales, con presipitaciones pluviales que van entre 2000 mm/ao.

    Se encuentra ente 200-250 m sobre el nivel del mar

    La temperatura promedio don de habita es 24C

    Se cree que penetra por traumatismo. Es mas frecuente en hombres, entre 20 y 30 aos.

    Ocupacion: campesinos, agricultores, y pescadores.

    No contagia persona-persona, y existen casos de transmisin de animales a humanos.

    5.3) Patogenia

    Husped:

    Inmunodeficiencia celular parcial.

    Ausencia de HLA-DR7

    Presencia de factor TGF-beta --- Induce, formacin fibrosis.

    Hongo: Baja virulencia

    Dimorfismo

    Termohabil >37(C)

    Crea lesiones en el sitio de inoculasionndulos de aspecto queloides, esta restringida nicamente al T.C

    subcutneo Se disemina por sangre y linfa.

    5.5) Diagnostico

    Toma de muestra: Fragmentos de tejido (cirujia biopsias)

    Examen directo y tinciones: KOH al 20% coloracin grascott PAS

    Cultivo: no se ha podido cultivar, SAB por si el agente causal es otro hongo.

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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 5 Micosis Sistemicas

    Samuel Reyes UNEFM

    1) Generalidades

    Las micosis se clasifican en 5 grupos

    Micosis superficiales

    Micosis cutneas

    Micosis subcutneas

    Micosis profundas, diseminadas o sistmicas

    Micosis oportunistas

    Hasta este punto de la unidad curricular se han desarrollado las micosis superficiales, las cutneas y la

    subcutneas en este tema se desarrollaran las profundas, diseminadas o sistmicas.

    2) Micosis Sistmicas

    Son micosis, que producen lesiones mas all de la membrana basal del epitelio, cuyo mecanismo ddiseminacin es por va linfohematica, con afeccin uni o multiparenquimatosa. De entre este tipo dmicosis las ms endmicas son:

    Histoplasmosis: mundial (amrica)

    Paracoccidioidomicosis: Amrica latina.

    Coccidiodomicosis: Continente americano.

    De entre estas 3 en Venezuela la prevalencia desde 1984 a la actualidad es la siguiente:

    Paracoccidioidomicosis: 674 casos 33,9% de las micosis sistmicas.

    Histoplasmosis: 663 casos 33,3%

    Candidiasis sistmica

    Criptococosis

    Aspergilosis

    Coccidiodomicosis 63 casos (3,1%)

    Zigomicosis.

    Y se distribuyen de la siguiente manera:

    Histoplasmosis: Por todo el pas. Con grandes focos en la zona occidental.

    Paracoccidioidomicosis: En la cordillera de los andes.

    Coccidiodomicosis: En el noroccidente del pas (Falcn, Zulia y Lara).

    Entre el 2012 y el 2013, el estudio del laboratorio de micologa y centro de investigaciones biomdicadetermino que la micosis sistmica ms comn es la histoplasmosis con 21 casos en el ao (87,5) y la

    Paracoccidioidomicosis presento 03 casos (12,5%).

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    3) Fisiopatogenia general.

    Las 3 micosis tienen una patogenia similar consiste en lo siguiente:

    Inhalacin fngica Colonizacin fngica Infeccin:

    Neumona sistmica enfermedad progresiva del pulmn.

    Neumona asintomtica enfermedad crnica del pulmn.

    Ambas neumonas en vez de complicarse podran curarse, luego puede existir una reactivaci

    endgena y finalmente diseminacin extra pulmonar.

    4) Histoplasmosis

    Micosis que afecta al sistema, fagocitico-mononuclear, de los humanos y de algunas especies animales.

    4.1) Etiologa

    Causada por:

    Histoplasma capsulatum var. capsulatum (fase anamorfa) Ajellomyces capsulatus (fase telomorfa, ascomiceto)

    4.2) Epidemiologia

    Amplia distribucin en la naturaleza.

    Crece especialmente en suelos contaminados con excremento de aves y murcilagos (ricos en N)

    Suele encontrarse en cuevas.

    En un pas tropical en cualquier rea geogrfica se puede adquirir Hc.Afecta en el continente americano, a los pases de centro Amrica, la parte central y sur de norte Amrica

    y gran parte de Suramrica (el norte, argentina y Brasil).

    En Venezuela, el 24,3% de los casos provienen del Zulia y el 22% de los casos de Falcn.

    Va de entrada Inhalatoria, aspiracin de conidias, en muy pocos casos se adquiere por va cutnea (0,5%

    de los casos)

    Tiene un periodo de incubacin variable:

    1-3 das, y puede llegar a durar de 1 a 5 meses. El ms comn es un promedio de 7-10 Das.

    Ataca principalmente a hombres (relacin 4:1), es frecuente en personas de la tercera y cuarta dcada, e

    nios no es comn, pero cuando se manifiesta suele tener una alta tendencia a la diseminacin.

    Es ocupacional, ataca principalmente a mineros, espelelogos, topgrafos, guaneros, agricultores, viajeros de ecoturismo.

    Ataca a personas de la raza blanca, ya que son ms susceptibles (25% de los casos) debido a la HLA-B7 HLA-B22.

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    Factores predisponentes, leucemia, linfomas, alcoholismo crnico, VIH-SIDA.

    No se conoce la frecuencia al no ser una enfermedad de reporte obligatorio. IDR 60% en Venezuela.

    4.3) Patogenia

    Caractersticas del hongo: Dimorfismo

    Termotolerancia Melanina Pared celular con alfa-glucanos cido hidroxiamico (sideroforos)

    Desarrollo en el husped:

    El curso de la enfermedad depender del numero de conidias inhaladas, virulencia del hongo y del estad

    de inmunidad del husped.

    En un husped inmunocompetente, se puede presentar:

    Histoplasmosis infeccin: infeccin pulmonar, primaria, asintomtica, la forma clnica mafrecuente (90-95% de los casos), Histopalsmina + calcificaciones pulmonares.

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    Histoplasmosis pulmonar aguda y crnica: enfermedad respiratoria aguda/ obstructiva crnica.

    En el husped inmuno comprometido, se puede presentar:

    Histoplasmosis diseminada: en esta histoplasmosis, hay una diseminacin hematgena del hongo

    hacia el sistema retculo endotelial, produce visceromegalia, pancitopenia, compromiso cutneo.

    Otros casos:

    Histoplasmosis residual: queda luego de superar una histoplasmosis.

    Histoplasmosis, enfermedad mediada inmunolgicamente: Histoplasmas, sndrome mediastina

    coriorretinitis.

    Eliminacin de H. capsulatum var. capsulatum,a partir de ndulos fibrocaseosos presentes en el pulmn.

    4.4) Diagnostico:

    Muestra clnica: esputo lavado bronco alveolar, medula sea, y biopsia de tejidos.

    Examen directo: con coloracin Giemsa, se detectan levaduras intracelulares.

    Cultivo: se realiza a mas de 25 C con Sabouraud agar, Lactrimel. BHI. Se observan micelio yMacroconidias tuberculadas.

    La prueba con histoplasmina, se prepara a partir de la fase micelial, en ella se evala la inmunidad celula

    del husped, los estudios epidemiolgicos diagnosticas H.infeccion.

    En la IDD, los antgenos son preparados de la fase micelial. Evala la inmunidad humoral, y la deteccin

    de anticuerpos, permite el diagnostico de H.Enfermedad.

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    En la IDD suela apreciarse una doble banda la Banda H y la Banda M

    Forma clnica Estudio Micolgico IDR Serologa IDD

    H. Infeccin - + -

    H. pulmonar -7+ +/- +

    H. diseminada. + - +

    H. residual - + -

    5) Paracoccidioidomicosis

    Micosis sistmica, granulomatosa, de evolucin progresiva, aguda, subaguda o crnica, endmica enregiones subtropicales hmedas de amrica latina causada por el hongo dimorfico

    Paracoccidioides brasiliensis (hay una nueva especie (P.lutzii).

    Es un hongo dimorfico, crece a 25C como un moho, ya 37C como una levadura multigemante.

    5.1) Epidemiologia.

    Se distribuye por toda Amrica latina, (gran parte de centro Amrica y Suramrica), a excepcin de lo

    pases ms al norte y ms al sur.

    En Venezuela el estado con ms incidencia es Carabobo, el cual reporta el 22,8% de los casos.

    El reservorio es desconocido, pero se sabe que el hombre y el armadillo son los nicos hospedadores.

    Va de entrada, es inhalatoria, por aspiracin de conidia, y tambin puede entrar por va cutne

    (traumatismos)

    Tiene un periodo de incubacin indeterminado, pero se sabe que es de largos aos.

    La susceptibilidad de los hombres es grande (13:1), esto se debe a que el paso de la fase micelial

    levaduriforme es inhibido por el beta-estradiol abundante en las mujeres.

    Es frecuente entre los 30 y los 60 aos.

    Ataca principalmente a agricultores, campesinos, y personas rurales.

    5.2) Patogenia

    Caractersticas del husped:

    TBC.

    Alcoholismo

    Desnutricin

    Estado inmunolgico.

    Condicin hormonal.

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    Caractersticas del hongo:

    Dimorfismo

    Pared celular de beta-glucanos.

    Melanina

    Enzimas hidroliticas.

    El hongo tiene una fase saprofita (que es la micelial), la cual infecta al humano; y una fase parasitaria ques la forma levaduriforme.

    Se disemina a piel, mucosas y ganglios linfticos.

    Regulacin del dimorfismo:

    La pared celular: composicin qumica: Lpidos, protenas y polisacridos:

    Quitina Glucan: Forma L alfa 1,3 glucan (Patogenicidad); Forma M Beta 1,3 glucan y

    proteasa (Gp43) (Virulencia) Galactomananos: galactosa y manosa, esto genera reacciones cruzadas d

    diagnostico.

    Influencia hormonal: el 17-beta-estradiol, inhibe el paso de micelio a levadura, debido a que posereceptores citosolicos para la hormona.

    Los factores de resistencia y susceptibilidad son los descritos en el tema II. Dependiendo de las citoquina

    se clasifican las formas clnicas:

    PCM Infeccin: citoquinas de TH1

    Forma juvenil: citoquinas de TH2 Forma Adulta: patrn mixto (1 y2)

    Formas clnicas

    PCM Infeccin

    PCM Enfermedad Aguda/subaguda Crnica

    Unifocal

    Multifocal Residual o latente.

    Subclnica Primaria pulmonar Reinfeccin pulmonar

    Progresiva Pulmonar pura

    Diseminada: mucocutanea, ganglionar visceral mixta.

    En el husped normal: se da la infeccin sub clinica o primaria pulmonar.

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    En el husped anormal: tipo juvenil (aguda pulmonar y subaguda diseminada); tipo adulto (crnica

    pulmonar y diseminada).

    Adems posee una forma oportunista.

    5.3) Diagnostico

    Para el diagnostico se necesita una impresin clnica, un diagnostico epidemiolgico (trayectori

    residencial ocupacional) y un diagnstico de laboratorio.

    Forma clnica Estudio Micolgico IDR Serologa IDD

    PCM Infeccin - + -

    PCM EnfermedadJuvenil

    Adulto

    + +/- +

    PCM Residual - + -

    6) Coccidiodomicosis

    Es una micosis sistmica producida por:

    Coccidioides immitis, Rixford y Gilchrist 1896 california USA.

    Coccidioides posadasii (Fisher 2002) en el resto de las reas endmicas.

    6.1) Epidemiologia

    Presente en toda amrica, en Venezuela el estado con ms casos es Falcncon 38,1%.

    El hongo vive en ambientes secos, con temperaturas mayores a 25C, Precipitaciones entre 0-600 mm, conhumedad menor al 50%, con vegetacin Xerofita y con altura menor a 500 m

    Este ambiente es ptimo para cromomicosis, micetoma y coccidioidosis.

    Todas las personas que viven en rea endmica son propensas, en USA es comn la diseminada.

    Esta es una micosis racial, ataca a: Negros, filipinos y mexicanos.

    Las mujeres embarazadas tambin son susceptibles.

    El grupo sanguneo A es comn con micosis sintomtica, y el B en diseminada.Las personas con predisposicin gentica suelen padecer la diseminada: HLA Clase II DRB1*1301

    Se ha observado en: bovino, caprinos, ovinos, roedores, porcinos, llamas, primates, perros y animale

    marinos.

    El periodo de incubacin es de 15 a 20 das.

    (BUSCAR DESPUES)

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    6.2) Patogenia

    -Primaria pulmonar asintomtica (60% de los casos):coccidioidina positiva.

    -Primaria pulmonar sintomtica (40% de los casos):la persona presenta sndrome gripal.

    Neumona, acompaada o no de alergia, eritema modoso, eritema multiforme, arreglas, artritis.

    -Pulmonar progresiva y cavitaria o coccidiodomas.-Coccidiomicosis diseminada aguda o crnica (1-7% de los casos): granulomas coccidioidales perifricas, conlocalizaciones Oseas y cutnea.

    -Coccidiomicosis cutnea primaria (excepcional en cara brazos y piernas)

    6.3) Diagnostico

    -Muestra clnica:esputo, lavado, biopsia de tejidos, y lquidos (LCR).

    -Examen directo:

    KOH al 10% coloraciones histolgicas, se observa Esporulacin con o sin Endosporas.

    -Cultivo:a 25C con Sabouraud agar, Lactrimel. Se observan artroconidias. Peligroso.

    La IDR, se hace con coccidioidina y esferulina.

    La ser logia: IDD y detencin de anticuerpos.

    Forma clnica Estudio Micolgico IDR Serologa IDD

    CDM Infeccin - + -

    Pulmonar -7+ +/- +

    Diseminada. + - +Residual - + -

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    Microbiologa I

    Unidad Micologa

    Tema 6 Micosis Oportunistas

    Alejandra Alvarado. UNEFM Medicina Semestre III.

    1) Consideraciones Generales

    Las micosis oportunistas son infecciones fngicas que se presentan en pacientes inmunocomprometidos

    causadas por hongos que viven como saprofitos en la naturaleza o en cavidades de seres humanos.

    Cualquier hongo saprofito puede transformarse en patgeno secundario en el huspe

    inmunocomprometido.

    El principal factor de virulenciade estos hongos es que son termotolerantes, pueden crecer a temperaturacorporal 37; condicin necesaria para que puedan

    producir la enfermedad.

    Los hongos que producen las micosis oportunistas ms

    comunes son:

    Candida spp

    Cryptococcus neoformans

    Aspergillus spp

    Zygomicetos

    Pneumocystis jirovecci

    Malassezia sppen neonatos.

    1) Factores influyentes para el establecimiento de una micosis oportunista

    Deficiencia en la inmunidad celular (VIH) Deficiencia en la inmunidad humoral (leucemia, mieloma) Alteracin fagocitica (lupus, diabetes) Granulocitopenia Pacientes transplantados (uso de glucocorticoides) Quemaduras graves Personas con hiperalimantacin parenteral y con catteres intravasculares Edades extremas de la vida Uso de antibiticos de amplio espectro Tcnicas modernas.

    2) Candidosis

    Tambin conocida como moniliasis, candidiasis, muguet, algodoncillo. Es una micosis primaria secundaria ocasionada por levaduras endgenas y oportunistas del gnero Candida, que pueden afecta

    piel, mucosas, estructuras profundas y rganos internos.

    2.1) Agente Etiolgico

    La Candida se clasifica dentro de la subdivisin Deuteromycotina (anamorfo) y Ascomycotina (teleomorfa)

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    Candida albicans, la especie ms importante, forma parte de la flora normal de las vas gastrointestinalesla mucosa oral (31 a 55%) y vaginal (13% de las mujeres), as como tambin de la piel periorificial deindividuos sanos (25 a 50%).Candidavive en equilibrio con otros microorganismos del cuerpo humano

    coexistiendo como comensal pero cuando este balance se pierde, ya sea por:

    - Alteraciones de la inmunidad celular, como en inmunodeficientes;- A consecuencia de cambios fisiolgicos de la flora normal, por ejemplo durante la instalacin de l

    flora Residente en recin nacidos- Eliminacin de la flora bacteriana habitual; por cambios en el metabolismo de carbohidratos;- Incluso se agrega a una dermatitis irritativa iniciada por oclusin cutnea.

    se torna patgena causando afeccin mucocutnea. En las embarazadas les da la micosis es por locambios hormonales experimentados.

    Se han descrito 81 especies (163 actualmente), siendo las principales especies patgenas:

    C. albicansy todas las dems son especies de C. no albicans: C. dubliniensis

    C. (Torulopsis) glabrata, C. krusei y, su teleomorfo, Issatchen-kia orientalis; Candida kefyr y su teleomorfoKluyveromyces marxianus, C. guillermondii y su teleomorfo Pichia guilliermondii;

    C. parapsilosis,

    C. tropicalis,

    C. lusitaniae y su teleomorfo Clavispora lusitaniae.

    Candidaes una levadura con habilidad para producir filamentos, en sentido amplio es un hongo dimorf

    Candida glabratano es dimrfica

    2.2) Hbitat

    Algunos son comensales de la mucosa gastrointestinal y genitourinario del hombre y de animalede sangre caliente.

    Son hongos geoflicos, se pueden encontrar en el suelo Objetos inanimados Alimentos Ambientes hospitalarios

    2.3) Aspectos Epidemiolgicos

    Cosmopolita Infeccin oportunista ms frecuente en seres humanos Afecta a individuos de cualquier edad, raza o se