REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD DEL ZULIAFACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA DE BIOANÁLISIS

.

• .

DEFINICIÓN:

Sustancia extraña que inducen respuesta

inmunitaria específica y son dianas de tales respuesta

Sustancia que es capaz de unirse específicamente a

un anticuerpo ó a un receptor de la célula T.

A N T Í G E N O S

.

• ANTÍGENOS DE DIFERENTES GRUPOS SANGUÍNEOS QUE

INCLUYE PROTEÍNAS, GLICOPROTEÍNAS, GLICOLÍPIDOS Y

OLIGOSACÁRIDOS

• ALGUNOS DE ELLOS SON PRODUCTOS GÉNICOS

• OTROS SON COMPLEJOS DE SUSTANCIAS PRECURSORAS Ej:

Sustancia P Sustancia H (ABH)

• OTROS SISTEMAS DE ANTIGENOS SON PRODUCTOS

PROTEICOS PLASMÁTICOS ADSORBIDOS SOBRE CÉLULAS

ROJAS

Estructuras de antígenos de membrana eritrocitaria con función de grupos sanguíneos

.

• .

DEFINICIÓN:

Son proteínas plasmáticas producidas en

respuesta a la presencia de un antígeno extraño y

tienen la propiedad de combinarse

específicamente con la sustancia que provocó su

formación (antígeno).

A N T I C U E R P O S

MgSc Ana Ruiz

ANTICUERPOS

M O N O M E R O

MgSc Ana Ruiz

ANTICUERPOS

CLASES DE ANTICUERPOS

ALGUNAS CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES

DE LOS ANTICUERPOS DE GRUPOS SANGUÍNEOS

IgG IgM

LONGITUD 250 Aº 1000Aº

PM 160.000 900.000 Aº

ATRAVIEZA

BARRERA SI NO

PLACENTARIA

TEMPERATURA 37ºC 22 – 24ºC

DE REACCIÓN (ACS CALIENTES) (ACS FRÍOS)

ACTIVA

COMPLEMENTO SI (2 IgG) SI

(VÍA CLÁSICA)

DENOMINADOS INCOMPLETOS COMPLETOS

ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO

POR IgG o IgM

Sistema GenesEstructura y loc.

Cromosómica

Posible

Función

ABO

MNS

P

Rh

Lutheran

Kell

Lewis

Duffy

Kidd

Diego

Yt

Xg

Scianna

Dombrock

Landsteiner-Wiener

ABO

GPA,GPB

P

RHD,RHCE

LU

KEL

FUT3

FY

SLC 14A1

SLC4AE1

ACHE

XG,MIC2

ERMAP

DQ

LW

Carbohidratos 9q

Sialoglicoprot. 4q

Carbohidratos 22q

PROTEINAS POLITÓPICAS

1p36

Glicoproteínas Ig like

19q

Enzima 7q

Carbohidratos 19p

Proteína G 1q

Glicoproteína Politopica 18q

Glicoproteína politópica 17q

Enzima 7q

Sialiglicoproteínas Xp

Glicoproteínas Ig like

Enzima Glicop. 12p

Glicoproteínas Ig like 19p

Glicocálix

Glicocálix

Desconocida Receptor de

PB19

Transportador NH4+

Canal de O2/CO2

Adhesina Receptor de

Laminina

Endopeptidasa Endotelina 3

Descoconocida

Receptor Quimokina

Transportador de Úrea

Transporte de aniones Canal

de O2/CO2Citoe

Acetilcolinesterasa

Receptor

Adhesina 1p

ADP-ribosiltransfer.

Adhesina-receptor, integrina

Sistemas de Grupos Sanguíneos (IBST)

Sistema GenesEstructura y loc.

Cromosómica

Posible

Función

Cotton

Chido/Rogers

H

Kx

Gerbich

Cromer

Knopps

Indian

Ok

Raph

JMH

I

Globósido

Gill

AQP1

C4A,C4B

FUT1

XK

GYPC

DAF

CR1

CD44

CD147

CD151

SEMA7A

GCNT2

B3GALT3

AQP3

Glicoproteína Politópica 7p

Proteína 6p Complemento

Carbohidratos 19q

Proteína Politópica Xp

Sialoglicoproteínas 2q

Regulador del C` 1q

Control del C´ 1q

Glicoproteína 11p

Glicoproteínas Ig like

Tetraspanina

Semaforina

CHO

CHO

Glicoproteína Pol.

Canal de Agua

Comp. C4 del complemento

Glicocálix

Neurotransmisor

Transportador

Anclaje al citoesq.

Inactivación del complemento

Receptor-inactivación C´

Adhesina une hialuronatos

Adhesina/Receptor

Complejos-Integr.

Adhesina/Receptor

Glicocálix

Desconocida

Canal Agua/glicerol

Sistemas de Grupos Sanguíneos (IBST)

.

• .

.SISTEMA SANGUÍNEO ABO

SISTEMA SANGUÏNEO Rh

PRINCIPIOS GENERALES DE LA REACCIÓN

ANTÍGENO - ANTICUERPO

1.- ESPECIFICIDAD

2.- REACCIONAN MOLÉCULAS ENTERAS

3.- UNIÓN FIRME, PERO REVERSIBLE

4.- FENÓMENO DE SUPERFICIE

5.- LOS AGS Y ACS SE COMBINAN

EN PROPORCIONES VARIABLES

6.- TIEMPO DE REACCIÓN VARIABLE

CONDICIONES DE LA REACCIÓN

ANTÍGENO - ANTICUERPO

CONCENTRACIÓN: Suspensión al 2 - 5 %

(Para evitar el fenómeno de

Prozona)

TEMPERATURA: 37ºC (18 – 37ºC) ó 4ºC (20 –

24ºC)

PH: 6,5 – 7,5

INCUBACIÓN: 15 – 30 min

CONDICIONES DE LA REACCIÓN

ANTÍGENO - ANTICUERPO

MEDIOS DE REACCIÓN:

* SSF,

* Albúmina Bovina,

* Enzimas proteolíticas

(Tripsina,papaína,

Bromelina,Ficina)

* Sol de Fuerza iónica baja

(Sol NaCl 0,2% + glucosa 7%

ó glicina 0,3M)

Lansteiner 1900

Descubierto por Landsteiner en 1900

Sistema clínicamente más importante

La información genética se localiza en elcromosoma 9 y se heredan según leyesMendelianas.

Constituido por los antígenos A, B y H,localizados en la superficie externa delglob. Rojo y en otros tejidos (Se)derivados de una sustancia precursora P

Ags. Asociados a Banda 3 y transportadorde glucosa. Protegen a la membrana deldaño mecánico y microbiano. Muyinmunogénico.

Genes para A y B son dominantes

SISTEMA SANGUÍNEO ABO

.

Gal(1 - 4) GlcNac

Cadena Tipo II

O

Gal(1 - 3) GlcNac

Cadena Tipo I

Gal(1 - 3 o 4) GlcNac

+ Fucosa

H

B TransferasaA Transferasa

Gal(1 - 3) Gal(1-3 o 4)GlcNac

+ Fucosa

B

GalNac(1 - 3) Gal(1-3 o 4)GlcNac

+ Fucosa

A

Vías bioquímicas de la síntesis de los antígenos A,B,H

Fenotipo Genotipo Antígenos Anticuerpos

O OO H Anti A

Anti B

A AO/AA A Anti B

B BO/BB B Anti A

AB AB A+B Ninguno

SISTEMA SANGUÍNEO ABO

TIPOS DE REACCIÓN

AGLUTINACIÓN

ABSORCIÓN

RADIOINMUNOENSAYO

HEMÓLISIS

PRECIPITACIÓN

FLUORESCENCIA

INHIBICIÓN

FIJACIÓN DE COPLEMENTO

ENZIMA INMUNOENSAYO

PRUEBAS EN REVERSA

A B AB A’ B’ANTIGENOS DEL GR ANTICUERPO

ANTICUERPO COMERCIAL GR CONOCIDO

MEZCLAR CADA UNO

CENTRIFUGAR a 1.000 - 2.000 rpm x 2’

MEZCLAR

Y OBSERVAR EN LÁMPARA DE WIENER

INTERPRETACIÓN DE LA

PRUEBA EN REVERSA

A B AB ANTÍGENO A' B' ANTICUERPO

+ - + A - + B

- + + B + - A

+ + + AB - - -

- - - O + + A,B

INTERPRETACIÓN ABO

ALTERACIÓN DE LOS HEMATÍES

.- Fenómeno de Rouleaux

(mieloma,drogas medicamentosas,

aumento fibrinógeno, proteínas

anormales)

.- Poliaglutinación (defecto genético o

ags ocultos)

.- Panaglutinación (aglutinación

bacteriólogica)

.- Doble población de hematíes

MgScAna Ruiz

DISCREPANCIAS

ALTERACIÓN DE LOS HEMATÍES

.- Antígenos A y B débiles

.- Por causa Adquiridas: LeucemiasCarcinoma de colón

.- Por infección de gérmenes gram negativosen personas grupo A: B adquirido

.- Sensibilización de eritrocitos

MgScAna Ruiz

DISCREPANCIAS

ALTERACIÓN EN EL SUERO

.- Hipogammaglobulinemia

.- Ausencia o descenso deAnti A y Anti B

( Inmunodeficiencia, recién nacidos )

.- Anticuerpos irregulares

.- Autoanticuerpos contraotros antígenos( Anti Le, M, I)

MgScAna Ruiz

DISCREPANCIAS

Segundo sistema de grupo sanguíneo más importante luego del ABO en medicina transfusional. Exclusivo del glób. Rojo.

Codificado por 2 genes RHD (Ag. Dd) y RHCE (Ag. Cc y Ee)

Se heredan como haplotipos, siendo el D detectado de rutina por ser muy inmunogénico.

Término Rh + indica presencia de D (85 % en caucásicos) y Rh – ausencia D (15 % caucásicos)

Generar Reacción Hemolítica Postransfusional (RHP).

SISTEMA SANGUÍNEO Rh

Término Rh + indica presencia de D (85 % en caucásicos) y Rh – ausencia D (15 % caucásicos)

No tiene Anticuerpos naturales y los inmunes son responsables de RHP y Anemia Hemolítica del recién nacido (AHRN).

Anti E y anti c pueden ser naturales (IgM)y provocar AHRN

Existe una variante D débil (antes Du) de alta frecuencia en Negros (3-4 %) y un D parcial que son Rh +.

Individuos Rh nulo presentan glóbulos rojos frágiles (estomatocito) con alteración de la integridad de la membrana celular.

Tienen función de transportadores de Amonio y canal de intercambio O2/CO2.

SISTEMA SANGUÍNEO Rh

GR 5% LAVADOS

MEZCLAR

` Tº AMB X 2´

ANTISUERO RH

’

CENTRIFUGAR a 1.000 - 2.000 rpm x 2’

MEZCLAR Y OBSERVAR

EN LÁMPARA DE WIENER

NEGATIVO

INCUBAR 37°C x 30’

LAVAR 4 VECES

SUERO DE COOMBS

CENTRIFUGAR A 1.000 - 2.000 x 2’

MEZCLAR Y OBSERVAR

EN LÁMPARA DE WIENER

SISTEMA RH

COOMBS DIRECTO

GR + ACS

HUM

ACS DE CONEJO

ANTI-HUMANOS

AGLUTINACIÓN

ACS HUM GR GRUPO “O”

COOMBS INDIRECTO

AGLUTINACIÓN

ACS DE CONEJO

ANTI-HUMANOSCOMPLEJO Ag-Ac

PRUEBA DE COOMBS

CAUSAS DE ERROR

FALSOS NEGATIVOS

1.- Lavado incorrecto

2.- Contaminación de células y reactivos

3.- Lavado no continúo

4.- Suspensión celular inadecuada

5.- Células o suero envejecido

6.- Poca centrifugación

7.- Tiempo de incubación inadecuado

8.- Reactivo de COOMBS mal preparado.

PRUEBA DE COOMBS

CAUSAS DE ERROR

FALSOS POSITIVOS

1.- Exceso de centrifugación

2.- Contaminación bacteriana de muestras o reactivos

3.- Contaminación de SSF con silice coloidal

4.- Reactivos de COOMBS mal preparados

5.- Material de vidrio mal lavado

USO DE LA PRUEBA DE COOMBS

COOMBS DIRECTO

1.- Diagnóstico de la Eritroblastosis Fetal

2.- Diagnóstico de la AHA

3.- Investigación de reacciones Transfusionales

4.- Diagnóstico de la AH por sensibilización de

de los GR inducidos por drogas (Ej: Penicilina,

Cefalotina, Alfa metil Dopa)

USO DE LA PRUEBA DE COOMBS

COOMBS INDIRECTO

1.- Prueba de Compatibilidad

2.- Detección e Identificación de Acs Atípicos

3.- Detección de Antígenos como: Du, Duffy, Kidd

4.- Estudios de Investigación tales como:

Acs antileucocitarios y antiplaquetarios

Protegen a la membrana del daño mecánico ymicrobiano.

En transfusión.

Predecir descendencia

Descartar paternidad

Tienen función de transportadores de Amonio y canal de intercambio O2/CO2.

NEUTRÓFILOS

MONOCITOS

CUERPO

HIALINO

ATRACCIÓN

FACTOR LE

(IgG ANTI ADN)

FAGOCITOSIS

RUPTURA DE MEMBRANA

CELULAR ( PERLAS)

FENÓMENO LE

+

CUERPO

HIALINO

NÚCLEO

+

CÉLULA LEROSETA

Gracias