predtransplantaciona imunološka testiranja bolesnika na ... · primena transplantacije i kod abo...
TRANSCRIPT
Predtransplantaciona imunološka testiranja bolesnika na programu transplantacije bubrega Doc.dr Svetlana Vojvodić
Zavod za transfuziju krvi Vojvodine
Odeljenje za tipizaciju tkiva
IMUNOLOŠKA PRIPREMA
BOLESNIKA cilj sticanje uvida u
imunološki rizik od postupka primene transplantacije
presudna su u izboru odgovarajuće terapijske strategije
vreme i broj testova koji se vrše moţe da varira u zavisnosti od specifiĉnosti transplantacionog programa, duţine ĉekanja na transplantaciju, broja i vrste imunizacijskih događaja kod svakog pojedinaĉnog pacijenta i drugih faktora
Tri grupe testiranja:
-određivenje imunogenetskih faktora (ABO, HLA,MICA/MICB sistema)
-detekcija i identifikacija anti-HLA antitela,anti-MICA/B antitela
-detekcija donor specifiĉnih antitela-CROSS MATCH
ODREĐIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - ABO sistem
Tri grupe gena
determinišu krvne
grupe ABO sistema:
ABO, Hh i Sese geni
Prisustvo izoaglutinina
anti-A i anti-B
PRIMENA TRANSPLANTACIJE I
KOD ABO INKOPATIBILIJE Plazmafereze - da fiziĉki uklone antitela
Imunoadsorpcija-otklanja samo anti A ili anti-B antitela
Imunoglobulin –koji putem vezivanja za antitela smanjuje destruktivnu aktivnost antitela
Splenektomija - slezina koncentriše B limfocite oko svojih krvnih sudova u borbi protiv infekcije, pa njeno uklanjanje, kod osoba sa visokim nivoom antitela spreĉava odbacivanje grafta
Anti-CD20 antitela (Rituksimab) – smanjuje nivo CD20 proteina, koji se nalazi na zidu većine B ćelija
ODREĐIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - HLA sistem
na 6. hromozomu u
regionu p21.3
prostor od 4
centimograma
0,1% humanog
genoma
redak crossing over
neravnoteţa vezivanja
alela:
A1B8,A2B5,A3B7,
A2B12,A33B14
METODE DETEKCIJE U HLA
SISTEMU Serološke
Ćelijske:
mešana limfocitna kultura, ćelijski posredovana limfoliza, izo-elektrofokusiranje
Molekulske:
-RFLP(Restriction Fragment Lenght Polymorphism)
-PCR (Polimerase Chain Reaction):
SSP,SSO,PCR-RFLP, SBT,RT-PCR,PCR in situ, cDNK
CROSS-REACTIONS
SPLIT-ovi
SUPERTIPOVI
DISEKVILIBRIJUM LINKAŢE
IZBOR DONORA
ţivi srodni i podudarni u ABO i HLA sistemu
roditelji ili braća sestre
manje od 17% bolesnika ima srodnog donora:
hipertenzija (visok krvni pritisak)
bolesti bubrega
bolesti zavisnosti
Dijabetes
Trudnoća
kardiovaskularne bolesti
HIV
ekstremna gojaznosti
lista ĉekanja na
kadaveriĉnu Tx
Priprema:
-I HLA klasa serološkim testovima
-II HLA molekuleskim, PCR niske rezolucije
-RETIPIZACIJA IZ 2. uzorka
-match -DR,-B,-A
ANTI-HLA ANTITELA
Senzibilizacija alogenim HLA antigenima putem:
- trudnoća,
- transfuzija krvi,
- prethodnim transplantacijama
Preformisana anti-HLA antitela su udruţena sa:
- akutnim odbacivanjem bubrega i ostalih organa(jetra,pluća),
- neefektivnim transfuzijama trombocita,
- hroniĉnim odbacivanjem organa i
- transfuzijom udruţenim oštećenjem pluća (TRALI)
KLINIĈKI ZNAĈAJ ANTI-HLA
ANTITELA
Funkcionalnost
grafta
Pacijenti bez
anti-HLA
antitela
Pacijenti sa anti-
HLA antitelima
5 godina 85% 65%
10 godina 76% 53%
15 godina 56% 25%
Lee P.C., et al. Transplant Proceedings 2009;41:121-123.
METODE DETEKCIJE ANTI-
HLA ANTITELA
ANTIGEN SPECIFIĈNE
ELISA
Luminex tehnologija
protoĉna citometrija putem primene perli
ANTIGEN NON-SPECIFIĈNE
CDC
AHG-CDC PRA (anti-human globulin enhanced cytotoxicity PRA determination)
ćelijska protoĉna citometrija
KREIRANJE ISTORIJE HLA
ALOSENZIBILIZACIJE Identifikacija pacijenata koji imaju ili
nemaju aloantitela na antigene HLA klase I
i klase II
Određivanje specifiĉnosti antitela kod
pacijenata sa detektovanim cirkulišućim
antitelima
Praćenje razvoja antitela kod pacijenata koji
nemaju antitela
Svaka 3 meseca (mart, jun, septembar,
decembar), pohranjivanje svih seruma
CROSS-MATCH
Detekcija donor-specifiĉnih anti-HLA antitela I ili II klase
Metode:
-CDC
-AHG-CDC
-ELISA
-Luminex tehnologija
-Protoĉna citometrija
STRATEGIJA PRIMENE CROSS
MATCH-a
Odabir tehnike
prema senzitivnosti
Odabir seruma
Vreme primene Tx
Ţivi srodni donori :
-prospektivni
-finalni (unutar 48h od Tx)
Kadaveriĉni donori:
-serum unutar 48h od Tx
-istorijski serum
PRIMENA PROTOKOLA
DESENZIBILIZACIJE KOD
POZITIVNOG CROSS-MATCH-a Visoke doze IV imunoglobulina (2g/kg TT)
Izmene plazme (pre i posle Tx)
Imunoadsorpcija proteinom A
Primena anti-CD20 antitela
Primena antitimocitnog globulina
Splenektomija
Blokada komponente C5 komplementa (Eculizumab) ili anti-C5 antitelom
Primena proteazomne inhibicije plazma ćelija putem bortezomib-a
Gloor, J. & Stegall, M. D. Nat. Rev. Nephrol. 2010;6: 297–306.