plagiat merupakan tindakan tidak terpuji - core.ac.uk filerekan-rekan penelitian tim macaranga,...
TRANSCRIPT
i
EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PENDEK EKSTRAK
METANOL - AIR DAUN Macaranga tanarius L. TERHADAP
TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi
Diajukan Oleh:
M. R. Biri Koni Tiala
NIM : 098114088
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PERSETUJUAN PEMBIMBING
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PENGESAHAN SKRIPSI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
PERSEMBAHAN
“Dont wait for the perfect moment, just take the moment
and make it perfect”
Kupersembahkan skripsi ini untuk……
Tuhan Yesus dan Bunda Maria yang selalu menjaga dan memberiku kekuatan, berkat
dan jalan keluar dari segala persoalan,
Papa Mamaku, adik dan kakak serta keluarga besarku,
Aloysius Gonzaga Jati Panantya,
yang selalu memberiku dukungan dan doa,
Sahabat-sahabat dan teman-temanku tersayang,
Almamaterku tercinta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas
berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga
tanarius L. Terhadap Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida” ini dengan baik. Skripsi
ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Penyelesaian skripsi ini tentunya tidak lepas dari bantuan dari berbagai pihak,
baik secara langsung maupun secara tidak langsung. Oleh karena itu penulis hendak
mengucapkan terima kasih kepada :
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing skripsi ini atas
segala kesabaran untuk selalu membimbing, memberi motivasi, dan memberi
masukan kepada penulis dalam menyusun skripsi ini.
3. Ibu dr. Fenty, M. Kes., Sp. PK, selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan
masukkan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.
4. Bapak Prof., Dr. CJ Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan
dan masukkan, kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.
5. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt., selaku Kepala Penanggung Jawab Laboratorium
Fakultas Farmasi yang telah memberi izin dalam penggunaan fasilitas
laboratorium Farmakologi-Toksikologi, Farmakognosi-Fitokimia dan Farmasi
Fisika demi terselesaikannya skripsi ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Pak Parjiman selaku laboran Laboratorium Farmakologi-Toksikologi, Pak Heru
selaku laboran Laboratorium Biofarmasetika-Farmakokinetika, Pak Kayat selaku
laboran Laboratorium Biokimia dan Pak Ratijo selaku laboran Laboratorium
Hayati, Pak Wagiran, selaku laboran Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia, Pak
Agung selaku laboran Laboratorium Farmasi Fisika, serta Pak Andri selaku
laboran di kebun obat, atas segala bantuan dan kerja sama selama di
laboratorium.
7. Papa, mama, kakak, adik, dan saudara yang telah membantu dari awal sampai
akhir penelitian ini, atas doa, dukungan semangat dan perhatiannya.
8. Aloysius Gonzaga Jati Panantya sebagai teman seperjalanan, sahabat setia, yang
tak pernah kurang dan tak pernah habis, atas doa, kasih sayang, perhatian,
bantuan, motivasi dan waktunya yang telah membantu dari awal sampai akhir
penelitian ini.
9. Rekan-rekan penelitian tim macaranga, Nanda Chris Nurcahyanti, Theresia Garri
Windrawati, Fransisca Devita Risti W., Christine Herdyana Febrianti, Bernadetta
Amilia, A.M. Inggrid Silli dan Luluk Rahendra Martha atas bantuan, kerjasama,
perjuangan dan suka duka yang telah kita alami bersama selama penelitian.
10. Teman-teman FKK B atas kebersamaan kita.
11. Pihak-Pihak lain yang turut membantu penulis namun tidak dapat disebutkan
satu persatu.
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh
karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik, saran dan masukan demi kemajuan
di masa yang akan datang. Semoga tulisan ini dapat memiliki manfaat sekecil apapun
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian, serta semua
pihak, baik mahasiswa, lingkungan akademis, maupun masyarakat.
Yogyakarta, 19 Desember 2012
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .................................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH.. v
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................ vi
PRAKATA ............................................................................................................ vii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ................................................................................................. xiv
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xvi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xvii
INTISARI .............................................................................................................. xviii
ABSTRACT .......................................................................................................... xix
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1
A. Latar Belakang......................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ................................................................................... 4
C. Keaslian Penelitian .................................................................................. 4
D. Manfaat Penelitian ................................................................................... 5
E. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ................................................................... 7
A. Tanaman Macaranga tanarius L. ........................................................... 7
1. Sinonim................................................................................................ 7
2. Nama daerah ....................................................................................... 7
3. Taksonomi ........................................................................................... 7
4. Kandungan tanaman ........................................................................... 7
B. Hepar ....................................................................................................... 10
1. Anatomi dan fisiologi hati ................................................................. 10
2. Kerusakan hati .................................................................................... 12
C. Hepatotoksin ............................................................................................ 15
D. Karbon Tetraklorida ................................................................................ 17
E. Metanol .................................................................................................... 20
F. Metode Ekstraksi ..................................................................................... 20
G. Pengukuran Serum ALT dan AST .......................................................... 22
H. Landasan Teori ........................................................................................ 23
I. Hipotesis .................................................................................................. 24
BAB III. METODE PENELITIAN ....................................................................... 25
A. Jenis dan Rancangan Penelitian............................................................... 25
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional.......................................... 25
1. Variabel Penelitian .............................................................................. 25
2. Definisi Operasional ............................................................................ 26
C. Bahan Penelitian ...................................................................................... 27
1. Bahan Utama ....................................................................................... 27
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
2. Bahan Kimia ........................................................................................ 27
D. Alat Penelitian ......................................................................................... 29
E. Tata Cara Penelitian ................................................................................. 30
1. Determinasi daun M. tanarius ............................................................. 30
2. Pengumpulan bahan............................................................................. 30
3. Pembuatan serbuk ............................................................................... 30
4. Pembuatan ekstrak metanol : air daun M. tanarius ............................. 30
5. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak ................................................... 30
6. Pembuatan dosis ekstrak metanol : air daun M. tanarius .................... 32
7. Pembuatan larutan karbon tetraklorida dalam olive oil ....................... 32
8. Uji pendahuluan .................................................................................. 32
9. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji ........................................... 33
10. Pengukuran aktivitas ALT dan AST serum ...................................... 34
11. Perhitungan efek hepatoprotektif ...................................................... 35
F. Tata Cara Analisis Hasil .......................................................................... 35
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 36
A. Penyiapan Bahan ..................................................................................... 36
1. Hasil determinasi tanaman .................................................................. 36
2. Pembuatan serbuk daun M. tanarius .................................................. 37
3. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius ..................................... 37
B. Hasil Penimbangan Bobot Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius ....... 38
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
C. Uji Pendahuluan ...................................................................................... 40
1. Penentuan dosis hepatotoksik ............................................................. 40
2. Penentuan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius ...................... 40
3. Penentuan waktu pencuplikan darah .................................................. 40
D. Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun
M. tanarius Terhadap Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida ..... 45
1. Kontrol negatif.................................................................................... 46
2. Kontrol hepatotoksin .......................................................................... 48
3. Kontrol perlakuan ............................................................................... 49
4. Perlakuan Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius
Terhadap Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida ............................... 50
E. Rangkuman Pembahasan ......................................................................... 57
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 59
A. Kesimpulan .............................................................................................. 59
B. Saran ........................................................................................................ 59
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 60
LAMPIRAN .......................................................................................................... 65
BIOGRAFI PENULIS ...................................................................................... 84
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis
2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 ........................................... 41
Tabel II. Aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis
2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 ........................................... 43
Tabel III. Perbedaan kenaikan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada waktu pencuplikan darah jam ke 0,
24 dan 48 ................................................................................................. 44
Tabel IV. Perbedaan kenaikan aktivitas serum AST setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada waktu pencuplikan darah jam ke 0
24 dan 48 ................................................................................................. 45
Tabel V. Pengaruh perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air daun M. tanarius
3840 mg/kg BB berdasarkan aktivitas serum ALT dan AST pada
beberapa variasi waktu terhadap hepatotoksin karbon tetraklorida ........ 46
Tabel VI. Perbandingan aktivitas serum ALT jam ke-0 dengan perlakuan
kontrol negatif olive oil ........................................................................... 47
Tabel VII. Perbandingan aktivitas serum AST jam ke-0 dengan perlakuan
kontrol negatif olive oil ........................................................................... 47
Tabel VIII. Perbandingan aktivitas serum ALT kontrol perlakuan dengan
kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif................................................. 50
Tabel IX. Perbandingan aktivitas serum AST kontrol perlakuan dengan
kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif................................................. 50
Tabel X. Perbandingan data berbeda bermakna dan berbeda tidak bermakna
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
pada perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air daun M. tanarius
3840 mk/kg BB berdasarkan aktivitas serum ALT pada beberapa
variasi waktu ........................................................................................... 51
Tabel XI. Perbandingan data berbeda bermakna dan berbeda tidak bermakna
pada perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air daun M. tanarius
3840 mk/kg BB berdasarkan aktivitas serum AST pada beberapa
variasi waktu ........................................................................................... 51
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur senyawa yang terdapat pada daun M. tanarius................... ... 8
Gambar 2. Struktur dasar lolubus hati memperlihatkan lempeng sel hati............. 11
Gambar 3. Struktur kimia karbon tetraklorida....................................................... 17
Gambar 4. Kenaikan relatif aktivitas serum ALT dan AST.................................. 18
Gambar 5. Mekanisme biotrasformasi dan oksidasi karbon tetrakloria................. 19
Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT serum sel hati tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu
0, 24 dan 48 jam................................................................................... 42
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas AST serum sel hati tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu
0, 24 dan 48 jam................................................................................... 43
Gambar 8. Diagram batang rata-rata pengaruh perlakuan jangka pendek
pemberian ekstrak metanol-air terhadap hepatotoksin karbon
tetraklorida dilihat dari aktivitas serum ALT....................................... 51
Gambar 9. Diagram batang rata-rata pengaruh perlakuan jangka pendek
pemberian ekstrak metanol-air terhadap hepatotoksin karbon
tetraklorida dilihat dari aktivitas serum AST....................................... 52
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius ....................................................................... 66
Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius ....................................... 66
Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius ......................... 67
Lampiran 4. Surat Etikal Clearance ....................................................................... 68
Lampiran 5. Hasil Uji Kolmogorov-Smirnov dilanjutka Anova One-Way data
ALT pada orientasi waktu pengambilan pencuplikan darah setelah
pemberian karbon tetraklorida dengan dosis 3840 mg/kgBB............ 69
Lampiran 6. Hasil Uji Kolmogorov-Smirnov dilanjutka Anova One-Way data
AST pada orientasi waktu pengambilan pencuplikan darah setelah
pemberian karbon tetraklorida dengan dosis 3840 mg/kgBB............ 76
Lampiran 7. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius .................... 82
Lampiran 8. Perhitungan kadar air gravimetri ...................................................... 83
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian jangka pendek
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., untuk menurunkan aktivitas ALT
dan AST serum sehingga dapat digunakan sebagai hepatoprotektor. Dari penelitian
ini juga dapat diketahui lama waktu efektif yang diperlukan untuk memberikan efek
hepatoprotektif.
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap
pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan,
dan berat ± 150-200 gram. Kelompok I merupakan kontrol hepatotoksin CCl4 dengan
dosis 2,8 ml/kg BB secara intra peritonial. Kelompok II merupakan kontrol negatif
yaitu pemberian olive oil 2 ml/kg BB secara intra peritonial. Kelompok III merupakan
kontrol perlakuan yaitu pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 5 g/kg
BB secara per oral. Kelompok IV-VIII diberikan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius dengan dosis 3840 mg/kg BB, kemudian secara berturut-turut pada ½, 1, 2, 4
dan 6 jam setelah perlakuan diberikan dosis hepatotoksik CCl4 dengan dosis 2 ml/kg
BB. Pada jam ke-24 setelah diberi CCl4, semua kelompok diambil darahnya pada
daerah sinus orbitalis di mata tikus. Data ALT dan AST serum yang didapat,
dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya kemudian
dilanjutkan analisis dengan uji Scheffe untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT
dan AST serum antar kelompok.
Dari data pengukuran aktivitas serum ALT dan AST yang diperoleh waktu
paling efektif menunjukkan efek hepatoprotektif adalah pada jam ke-½.
Kata Kunci: M. tanarius, ekstrak metanol-air, jangka pendek, ALT, AST,
karbon tetraklorida
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
ABSTRACT
This study is aimed to determine the effects of short-term administration of
methanol-water extract of Macaranga tanarius L. leave; to decrease the activity of
ALT and AST serum, as a result, it can be used as a hepatoprotector. This study also
measures the effective time allocation in providing effective hepatoprotective effects.
This is pure experimental study using completely randomized design. This
study uses male Wistar rats, attain the age of 2-3 months and ±150-200 grams weight.
Group I was the hepatotoxins CCl4 control at a dose of 2.8 ml/kg body weight which
was injected intraperitoneally. Group II was the negative control which was given
olive oil 2 ml/kg body weight intraperitoneally. Group III was the control treatment
given methanol-water extract of M. tanarius leave orally at a dose of 5 g/kg body
weight. Group IV-VIII were given the methanol-water extract of M. tanarius leave at
a dose of 3840 mg/kg, afterward, the treatment was given hepatotoxic dose of CCl4 at
a dose of 2 ml/kg at ½, 1, 2, 4 and 6 hours successively. At the 24th hour after being
given CCl4, all groups have blood drawn at the orbital sinus region in the rats’ eyes.
ALT data and AST serum which were obtained were analyzed using Kolmogorov-
Smirnov test to look at the data distribution, after that, the data were analyzed using
Scheffe test to determine the differences in ALT activities and AST serum in each
group.
From the data measurement of serum ALT activities and serum AST
activities which were obtained, the most effective time showing hepatoprotective
effect was shown at the beginning of the ½ hour.
Keywords: M. tanarius, methanol-water extracts, short-term, ALT, AST, carbon
tetrachloride
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang Penelitian
Hati merupakan organ vital yang berfungsi vaskuler untuk menyimpan dan
menyaring darah, metabolisme dan sekresi atau eksresi, yang berperan dalam
pembentukan empedu yang mengalir melalui saluran empedu ke pencernaan, serta
fungsi pertahanan tubuh melalui detoksifikasi dan fungsi perlindungan (Guyton
dan Hall, 2010). Adanya kerusakan pada hati dapat disebabkan oleh
mikroorganisme maupun senyawa kimia (obat-obatan) (Donatus, 1992). Menurut
WHO (2012), kanker hati yang disebaban oleh adanya virus (mikoorganisme)
seperti virus HBV dan HCV menyebabkan kematian sebesar 20% di negara maju
dan negara berkembang, sedangkan di negara dengan kondisi menengah kebawah
memiliki tingkat resiko kematian lebih besar, sekitar 70%. Pada tahun 2008,
Kanker hati memiliki tingkat kematian ketiga setelah kanker paru dan lambung.
Obat dan zat beracun dapat menyebabkan sekitar 10% dari seluruh kasus hepatitis,
atau sekitar 20-30% dari kasus penyakit hati akut (Cadman, 2000).
Salah satu senyawa yang dapat digunakan sebagai senyawa model yang
dapat menyebabkan kerusakan hati adalah karbon tetraklorida (CCl4). Karbon
tetraklorida merupakan yang biasa digunakan sebagai pelarut, cairan pencuci, dan
digunakan dalam pembuatan bahan-bahan plastik, tinta, bahan semikonduktor
(WHO, 2004). Karbon tetraklorida bersifat toksik terhadap hati dan ginjal,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
karsinogen dan berpengaruh pada penipisan lapisan ozon di atmosfer (Bruckner
dan Warren, 2001).
Banyak orang di dunia ini yang terpapar karbon tetraklorida di lingkungan
kerja. Kazanthis, Bomford, Oxon (1960) melaporkan bahwa 17 karyawan pabrik
pengolahan kuarsa dievakuasi karena terpapar uap karbon tetraklorida dan 15
pekerjanya mengeluhkan gejala mual, anoreksia, muntah perut kembung,
ketidaknyamanan epigastrium, pusing sampai 4 bulan sebelum evaluasi.
Dampak dari terkena paparan karbon tetraklorida jangka panjang ini dapat
menyebabkan terjadinya kerusakan hati. Menurut data yang ada di WHO (2012)
pada tahun 2008 kanker hati mengakibatkan 695.000 kematian. Kanker ini dapat
diakibatkan senyawa kimia karsinogen ataupun karsinogen biologi seperti infeksi
virus, bakteri, maupun parasit. Pada tahun 2008 (WHO, 2008a; 2008b) dilaporkan
kejadian hepatitis akibat virus seperti VHA terjadi 1,4 juta kasus dan 2 milyar
orang terinfeksi VHB dengan 350 juta orang diantaranya menderita hepatitis
kronis.
Dengan adanya tumbuh-tumbuhan dapat menjadi suatu alternatif
pengobatan yang dilakukan untuk mencegah bahkan mengobati penyakit
(Donatus, 1992). Salah satu tumbuhan yang dapat berpotensi sebagai
hepatoprotektor adalah Macaranga tanarius L. Berdasarkan penelitian terakhir
mengenai M. tanarius., dilaporkan oleh Nugraha (2010) dan Mahendra (2010)
bahwa infusa daun M. tanarius dapat digunakan sebagai hepatoprotektor. Pada
penelitian tersebut, digunakan model senyawa hepatotoksin parasetamol dosis
tinggi. Selain itu, Adrianto (2010) melaporkan ekstrak metanol-air daun M.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
tanarius, dapat digunakan untuk sebagai hepatoprotektor dengan senyawa model
yang digunakan adalah parasetamol.
Berdasarkan penelitian Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo,
Otsuka (2006), tanaman M. tanarius, mempunyai aktivitas sebagai antioksidan
yang sangat bermanfaat untuk kesehatan, yaitu macarangiosida A-D, dan
malofenol B yang didapat dari isolasi ekstrak metanol daun M. tanarius, yang
mana mempunyai aktivitas penangkapan terhadap DPPH.
Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Matsunami, dkk (2006) meneliti
bahwa senyawa antioksidan yang dapat didapatkan dari daun M. tanarius adalah
dari hasil isolasi ekstrak metanol yang bersifat polar. Oleh karena itu, maka
metanol-air, diharapkan dapat diperoleh senyawa antioksidan yang mencegah
aktivitas radikal bebas dari karbon tetraklorida. Dari uraian diatas, maka
penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek hepatoprotektif jangka pendek
ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan terinduksi karbon
tetraklorida.
Penelitian efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air daun M.
tanarius terhadap tikus yang terinduksi karbon tetraklorida ini dilakukan untuk
membandingkan dengan penelitian efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak
metanol-air daun M. tanarius terhadap tikus yang terinduksi karbon tetraklorida
(Windrawati, 2012) yang juga dilaksanakan bersamaan. Oleh karena itu,
penelitian ini menarik untuk diteliti karena penelitian menggunakan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius jangka pendek dan belum pernah dilakukan
sebelumnya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
B. Rumusan Masalah
1. Apakah praperlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L. mempunyai efek hepatoprotektif pada tikus yang terinduksi
karbon tetraklorida yang dengan melihat adanya penurunan aktivitas serum
Alanine Aminotransferase (ALT) dan serum Aspartate Transaminase
(AST)?
2. Berapakah waktu paling efektif ekstrak metanol-air daun Macaranga
tanarius L. untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus yang
terinduksi karbon tetraklorida?
C. Keaslian Penelitian
Penelitian yang menggunakan M. tanarius pernah dilakukan oleh Phommart,
Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat, Sutthivaiyakit (2005) dan Matsunami dkk
(2006), Matsunami dkk ( 2009). Phommart, dkk (2005) melaporkan kandungan
tanaman M. tanarius. Mahendra (2010) bahwa infusa daun M. tanarius dapat
digunakan sebagai hepatoprotektor jangka panjang dan Nugraha (2010
melaporkan bahwa infusa daun M. tanarius dapat digunakan sebagai
hepatoprotektor jangka pendek. Selain itu, Adrianto (2010) melaporkan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius, dapat digunakan untuk sebagai hepatoprotektor
dengan senyawa model parasetamol. Kurniawati (2010) melaporkan ekstrak
metanol-air daun M. tanarius sebagai antiinflamasi. Dari hasil penelitian Andini
(2010), ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik. Dari
penelitian terakhir dilaporkan oleh Oktavia (2012) bahwa kombinasi ekstrak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
metanol-air daun M. Tanarius dengan metformin memiliki efek antidiabetik.
Selain itu, berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Windrawati (2013)
bahwa daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotektif jangka panjang.
Berdasarkan penelusuran pustaka, efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak
metanol-air daun M. tanarius terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida belum
pernah dilakukan.
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu
pengetahuan khususnya ilmu kefarmasian mengenai pemberian ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang memiliki efek hepatoprotektif jangka
pendek.
2. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat
mengenai manfaat daun M. tanarius yang memiliki efek hepatoprotektif
jangka pendek.
E. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif pemberian ekstrak
metanol-air jangka pendek daun M. tanarius pada tikus yang terinduksi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
karbon tetraklorida dengan cara melihat adanya pernurunan aktivitas serum
ALT dan serum AST.
2. Tujuan khusus:
Secara khusus penelitian ini bertujuan untuk mengetahui waktu paling efektif
yang dapat memberikan efek hepatoprotektif dari ekstrak metanol-air jangka
pendek daun M. tanarius untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus
yang terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Tanaman Macaranga tanarius L.
1. Sinonim
Ricinus tanarius L., Macaranga molliuscula Kurz, Macaranga tanarius
var. Glabra F. Muell. (Asian Plant, 2012).
2. Nama Daerah
Mara, Tutup merah, Sapat (Plantamor, 2008)
3. Taksonomi
Kingdom : Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Superdevisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)
Subkelas : Rosidae
Ordo : Euphorbiales
Famili : Euphorbiaceae
Genus : Macaranga
Spesies : Macaranga tanarius L. (Plantamor, 2008).
4. Kandungan
Penelitian mengenai tanaman Macaranga tanarius L. sudah banyak
dilakukan, dari penelitian tersebut terdapat kandungan senyawa kimia yang dapat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
diisolasi dan diidentifikasi. Pada penelitian Matsunami dkk. (2006), Matsunami
dkk. (2009) diketahui bahwa dalam daun M. tanarius, yaitu macarangiosida D,
dan laurosida E, metil brevifolin karboksilat, dan larutan hiperin dan isokuercitin,
macarangioside A, macarangioside B, macarangioside C dan mallophenol B
yang diisolasi dari ekstrak metanol. Senyawa ini menunjukkan aktivitas
penangkapan radikal terhadap DPPH.
Dari penelitian lain (Phommart dkk, 2005) yang berhasil diidentifikasi
dilaporkan terdapat tiga kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol,
tanariflavanon C, dan tanariflavanon D bersama dengan tujuh kandungan yang
telah diketahui yaitu nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanone
B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol dan annuionone).
Struktur beberapa senyawa yang terdapat dalam daun M. tanarius dapat dilihat
pada gambar1.
Tanariflavanon C Tanariflavanon D
Nymphaeol A Nymphaeol B
Gambar 1. Struktur senyawa yang terdapat pada daun M. tanarius (Phommart, 2005)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
5. Khasiat dan kegunaan
Daun M. tanarius juga memiliki banyak kegunaan, penelitian yang
dilakukan oleh Phommart dkk. (2005) akar tanaman M. tanarius digunakan
sebagai antipiretik dan antitusif, sedangkan daun M. tanarius memiliki efek
antiinflamasi. Daun M. tanarius yang kaya akan tanin, dapat digunakan sebagai
obat diare, luka dan antiseptik (Lin, Nonaka, Nishioka, 1990).
Berdasarkan penelitian lainnya yang dilakukan oleh Ardianto (2010),
ekstrak metanol-air daun tanaman Macaranga tanarius L. memiliki khasiat
sebagai hepatoprotektif jangka panjang. Infusa infusa daun M. tanarius dapat
digunakan sebagai hepatoprotektor jangka panjang yang dilaporkan oleh
Mahendra (2010). Selain itu, Nugraha (2010) melaporkan bahwa infusa daun M.
tanarius juga memiliki khasiat sebagai efek hepatoprotektif jangka pendek.
Dari penelitian lain, dilaporkan oleh Andini (2010) ekstrak metanol-air
daun M. tanarius memiliki efek analgesik. Selain itu, pada tahun 2010,
Kurniawati melaporkan hasil penelitian bahwa ekstrak metanol-air daun M.
tanarius memiliki efek antiinflamasi. Daun M. tanarius secara tradisional
digunakan untuk fermentasi tempe dan pakan hewan (Puteri dan Kawabata, 2010).
Khasiat lain yang diteliti pada daun M. tanarius adalah melalui penelitian terbaru
mengenai daun M. tanarius, dilaporkan oleh Oktavia (2012), bahwa kombinasi
ekstrak metanol-air daun M. tanarius dengan metformin dapat digunakan sebagai
antidiabetes. Penelitian terbaru yang dilakukan oleh Windrawati (2013) mengenai
efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air daun M. tanarius
terhadap tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
B. Hepar
1. Anatomi dan Fisiologi Hati
Hepar adalah kelenjar yang paling besar dalam tubuh manusia dengan
berat 1500 g (Baradero, Dayrit, Siswadi, 2005). Fungsi hati adalah pembentukan
empedu, penyimpanan karbohidrat, pembentukan benda keton, pengaturan
metabolisme karbohidrat, reduksi dan konjugasi hormon steroid adrenal dan
kelenjar kelamin, detoksikasi obat-obatan dan toksin, membentuk protein-protein
plasma dan banyak fungsi penting dalam metabolisme lemak (Ganong, 2001).
Unit dasar fungsional dasar hati adalah lolubus hati, yang berbentuk
silindris dengan panjang dan diameter tertentu. Hati manusia mengandung 50.000
sampai 100.000 lolubus (Guyton dan Hall, 2007). Hati memiliki dua lobus utama
yaitu kanan dan kiri. Setiap lobus hati terbagi menjadi struktur-struktur yang
disebut sebagai lobulus, setiap lobulus merupakan badan heksagonal yang terdiri
atas lempeng-lempeng sel hati berbentuk kubus, tersusun radial mengelilingi vena
sentralis yang mengalirkan darah dari lobulus (Price dan Wilson, 2005).
Lolubus hati terbentuk mengelilingi sebuah vena sentralis yang mengalir
ke vena hepatika dan kemudian ke vena cava. Lolubus sendiri dibentuk terutama
dari banyak lempeng sel hati yang menyebar dari vena sentralis seperti jeruji roda.
Masing-masing lempeng sel hati tebalnya dua sel, dan diantara sel yang
berdekatan terdapat kanalikuli biliaris kecil yang mengalir ke duktus biliaris di
dalam septum fibrosa yang memisahkan lolubus hati yang berdekatan (Guyton
dan Hall, 2007). Skema dari struktur dasar hati dapat dilihat pada gambar 2.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
Gambar 2. Struktur dasar lolubus hati memperlihatkan lempeng sel hati (Baradero dkk, 2005)
Diantara lempengan sel hati terdapat kapiler-kapiler yang disebut sebagai
sinusoid. Sinusoid dibatasi oleh sel fagositik atau sel Kupffer. Sel Kupffer
merupakan sistem monosit-makrofag, dan fungsi utamanya adalah menelan
bakteri dan benda asing lain dalam darah. Makrofag dalam hati adalah sel
Kupffer, sehingga hati merupakan salah satu organ penting dalam pertahanan
melawan invasi bakteri dan agen toksik (Price dan Wilson, 2005).
Hati dalam kondisi normal memiliki kapasitas fungsional yang besar.
Kemampuan hati di dalam tubuh antara lain untuk sintesis, eksresi dan berfungsi
dalam proses metabolisme. Hati merupakan sumber dari plasma albumin, globulin
dan banyak protein. Pada fungsi eksresi dapat dilihat pada banyak komponen yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
dikeluarkan oleh hati melalui empedu. Komponen utama dari empedu adalah
bilirubin, selain itu kolesterol, urobilinogen dan asam empedu juga terdapat dalam
empedu. Pada fungsi metabolisme, hati memetabolisme lemak, karbohidrat,
protein dan detoksifikasi. Hati memegang peranan penting dalam menawar-
racunkan racun berbahaya turunan senyawa nitrogen yang berasal dari usus, obat-
obatan dan senyawa kimia. (Candrasoma dan Taylor, 1995).
Selain itu, hati memiliki kemampuan untuk mengembalikan dirinya
sendiri setelah kehilangan jaringan hati. Proses ini disebut regenerasi sel hati.
Selama regenerasi sel hati, hepatosoit diperkirakan mengalami replikasi sebanyak
satu sampai dua kali dan setelah tercapai ukuran dan volume hati sebelumnya,
hepatosit kembali kepada keadaan sebelumnya (Guyton dan Hall, 2007).
Peran penting hati dalam eliminasi obat adalah untuk memetabolisme
obat induk dan merubahnya menjadi senyawa metabolit. Kapasitas dari hati untuk
mengubah obat induk menjadi metabolit sangat dipengaruhi oleh aktivitas enzim
pemetabolisme yang terdapat pada retikulum endoplasma halus dan sitosol pada
hepatosit (DiPiro dkk, 2008).
2. Kerusakan Hati
Hati merupakan organ penting yang dapat mengubah struktur dari senyawa
kimia dan obat-obatan. Beberapa hasil dari proses terjadinya metabolisme secara
biologis dapat menjadi tidak aktif, beberpa menjadi metabolit yang aktif dan
adapula yang menjadi racun (Laurence, Bennett, Brown, 1997).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
Konsekuensi klinis paling parah penyakit hati akibat terjadinya kerusakan
hati adalah gagal hati. Hal ini dapat terjadi akibat kerusakan hati yang mendadak
dan masif. Gagal hati umumnya merupakan titik akhir kerusakan progresif hati
sebagai bagian dari penyakit hati kronik. Umumnya, sekitar 80%-90% kapasitas
fungsional hati sudah rusak sebelum gagal hati timbul (Kumar, Abbas, Fausto,
Mitchell, 2007).
Senyawa toksik dapat menyebabkan berbagai jenis efek toksik pada
berbagai organel dalam sel hati. Jenis kerusakannya, antara lain:
1. Steatosis (Perlemakan hati).
Perlemakan hati adalah hati yang mengandung berat lipid lebih dari 5%.
Adanya kelebihan lemak dalam hati dapat dibuktikan secara histokimia (Lu,
1995). Ketika senyawa toksin seperti alkohol masuk ke dalam tubuh dengan
jumlah yang cukup, maka akan menimbulkan terbentuknya lipid yang
terakumulasi dalam hepatosit. Ketika jumlah senyawa toksin yang terpapar ke
dalam tubuh jumlahnya semakin banyak maka lipid akan semakin terakumulasi
dan menciptakan gelembung-gelembung besar, dan meluas hingga ke tepi hati
(Kumar dkk, 2007).
Berbagai macam toksikan menyebabkan terjadinya penimbunan lemak di
dalam hati, mekanisme yang mendasari sangat beragam. Mekanisme yang paling
umum adalah terjadinya pelepasan trigliserid hati ke plasma, karena trigliserid
hati hanya disekresi bila dalam keadaan tergabung dengan lipoprotein.
Penimbunan lipid juga melalui beberapa mekanisme, seperti penghambatan
sintesis protein dari lipoprotein (misalnya disebabkan oleh karbon tetraklorida,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
etionin); penekanan konjugasi trigliserid dengan lipoprotein (misalnya karbon
tetraklorida); rusaknya oksidasi lipid oleh mitokondria (misalnya etanol) (Lu,
1995).
2. Nekrosis hati
Nekrosis hati adalah kematian hepatosit. Nekrosis dapat bersifat fokal
(sentral, tengah dan perifer) atau masif. Biasanya nekrosis merupakan kerusakan
akut. Beberapa zat kimia telah dilaporkan menyebabkan nekrosis akut. Nekrosis
hati merupakan suati manifestasi toksik yang berbahaya tetapi tidak selalu kritis
karena hati mempunyai kapasitas pertumbuhan kembali yang luar biasa. Kematian
sel terjadi bersama dengan pecahnya membran plasma. Perubahan biokimia pada
nekrosis hati bersifat kompleks (Lu, 1995).
3. Sirosis
Sirosis ditandai oleh adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar
hati. Patogenesis terjadinya sirosis hati dalam sebagian kasus tampaknya berasal
dari nekrosis sel tunggal karena kurangnya mekanisme perbaikan sel dari hati.
Keadaan ini menyebabkan aktivitas fibroblastik dan pembentukan jaringan parut.
Karsinogen kimia dan pemberian CCl4 jangka panjang dapat menyebabkan sirosis
hati pada hewan. Pada manusia, terjadinya sirosis hati karena konsumsi kronis
minuman beralkohol (Lu, 1995).
4. Kanker hati
Karsinoma hepatoseluler merupakan terjadinya kerusakan hati yang paling
berat. Sejumlah besar senyawa toksik dapat menyebabkan kanker hati pada hewan
(Lu, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
Kerusakan sel hati dibagi menjadi dua, yaitu:
a. Kerusakan sel hati akut
Kerusakan sel hati akut dapat terjadi karena nekrosis besar pada hati, yang
disebabkan karena infeksi viral, obat-obat yang merusak hati, maupun induksi
senyawa kimia. Kerusakan sel hati akut ditandai dengan adanya penyakit kuning,
hipoglikemia, gangguan elektrolit dan asam-basa, enselophati hati, dan kenaikan
serum enzim (alanin transferase dan aspartate transaminase) pada kasus terjadinya
nekrosis hati (Chandrasoma dan Taylor, 1995).
b. Kerusakan sel hati kronik
Kerusakan sel hati kronik biasanya merupakan hasil dari sirosis yang
merupakan tahap lanjut dari nekrosis, fibrosis, dan regenerasi nodular
(Chandrasoma dan Taylor, 1995). Pada keadaan nekrosis terjadi pemecahan sel
hepatosit sehingga enzim alanin transferase (ALT) yang terdapat dalam sel hati
keluar dan masuk ke aliran darah dan ditandai dengan peningkatan aktivitas ALT
(Zimmerman, 1978).
C. Hepatotoksin
Banyak kerusakan hati seperti yang diuraikan diatas yaitu steatosis,
nekrosis, sirosis yang disebabkan oleh paparan senyawa toksik (hepatotoksin).
Contohnya adalah paparan CCl4, kloroform, aflatoksin dan fosfor (Lu, 1995).
Hepatotoksin merupakan zat toksik yang dapat menyebabkan rusaknya sel hati
(Poppy, Komala, Santoso, Sulaiman, Rienita, Nuswantari, 1998). Obat dan
senyawa yang dapat menyebabkan kerusakan hati dibedakan menjadi dua, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
a. Hepatotoksin teramalkan (tipe A).
Merupakan obat atau senyawa yang bila diberikan dapat mempengaruhi
sebagian besar orang yang menelan senyawa tersebut dalam jumlah yang cukup
untuk menimbulkan efek toksik. Hepatotoksin teramalkan bergantung kepada
dosis pemberian (Forrest, 2006). Contoh hepatotoksin teramalkan adalah racun
jamur (Amanita phalloides), karbon tetraklorida, kloroform, parasetamol
(Chandrasoma dan Taylor, 1995).
Prosesnya dikenal sebagai toksisitas-intrinsik, dan aksinya dapat terjadi
secara langsung atau tidak langsung. Secara langsung, obat induk atau bentuk
metabolitnya langsung berikatan dengan komponen membran sel dan merusak sel
hati beserta seluruh organelnya, seperti ditunjukkan oleh karbon tetraklorida dan
parasetamol. Secara tidak langsung, obat induk atau bentuk metabolitnya dalam
menimbulkan luka hepatik dengan cara mengganggu jalur metabolik-khas atau
mengganggu jalur ekskresi hepatik (Donatus,1992).
b. Hepatotoksin takteramalkan (tipe B).
Merupakan obat atau senyawa yang tidak bersifat toksik pada hati tetapi
jika diberikan kepada orang tertentu akan dapat menimbulkan efek toksik.
Hepatotoksin jenis ini tidak bergantung pada dosis pemberian. Contoh obat-obat
yang tipe ini adalahisoniazid, halothane, dan chlorpromazine (Forrest, 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
D. Karbon tetraklorida
Gambar 3. Struktur kimia karbon tetraklorida (Pustakalaya, 2005)
Karbon tetraklorida merupakan senyawa kimia yang dengan rumus
molekul CCl4 dan memiliki rumus bangun seperti pada gambar 3. Karbon
tetraklorida merupakan cairan bening yang tidak mudah terbakar dan memiliki
bau yang khas, larut dalam etanol, aseton, benzen, karbon disulfida dan memiliki
kelarutan rendah dalam air (Oehha, 2000). Karbon tetraklorida pada masa lalu
digunakan sebagai cairan pemebersih, bahan yang digunakan untuk pemadam
kebakaran (Departement of Health and Human Services, 2005). Karbon
tetraklorida merupakan cairan bening yang sangat mudah menguap dan tidak
mudah terbakar Karbon tetraklorida merupakan senyawa kimia yang
dikhawatirkan dapat menyebabkan karsinogen dan dibuktikan melalui penelitian
terhadap hewan uji (Departement of Health and Human Services, 2011).
Hal ini dibuktikan dengan adanya beberapa penelitian. Frezza dkk (1994)
meneliti bahwa sekelompok tikus galur Sprague Dawley yang diinduksi karbon
tetraklorida mengalami kematian dan terjadi kanker hati. Pada tahun 1995,
penelitian mengenai hepatotoksin karbon tetraklorida dilakukan oleh Rosnalini
yang meneliti mengenai optimasi dosis hepatoprotektif kurkuminoid pada tikus.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Penelitian lainnya mengenai karbon tetraklorida sebagai hepatotoksin dilaporkan
oleh Bulan, Pramono (2009) yang meneliti adanya perubahan kadar SGOT dan
SGPT setelah diberikan rebusan daun putri malu (Mimosa pudica, Linn) pada
tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.
Karbon tetraklorida telah diketahui sebagai senyawa model yang dapat
menimbulkan nekrosis hepar dan perlemakan hati pada berbagai macam spesies.
Senyawa ini mudah larut dalam komponen lemak, yang mengakibatkan senyawa
ini terdistribusi ke seluruh tubuh, meskipun begitu efek utama ketoksikannya
adalah di hepar dengan cara pemberian apapun (Timbrell, 2008). Kerusakan hati
yang ditimbulkan oleh karbon tetraklorida dapat menaikkan aktivitas serum ALT
dan AST sebesar sekitar 4 kali dan 3 kali dari aktivitas serum normal. Berikut
adalah tingkat kenaikan relatif dari beberapa serum enzim dari terjadinya
keracunan hati.
Gambar 4. Kenaikan relatif aktivitas serum ALT dan AST (Zimmerman, 1999)
Karbon tetraklorida merupakan senyawa yang bersifat toksik karena akan
mengalami reaksi reduksi dehalogenasi membentuk radikal bebas yaitu radikal
triklormetil (CCl3). Radikal ini kemudian akan bereaksi dengan oksigen dan
membentuk radikal triklorometil peroksi (OOCCl3) yang lebih reaktif (Hippeli
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
dan Elstner, 1999). Kemudian radikal tersebut menginisiasi terjadinya radikal
lipid yang menyebabkan terbentuknya lipid hidroperoksidase (LOOH) dan radikal
lipid alkoksil (LO). Melalui proses fragmentasi, radikal lipid alkoksi tersebut
akan diubah menjadi malondialdehid (Gregus dan Klaaseen, 2001). Senyawa
aldehid inilah yang akan menyebabkan kerusakan pada membran plasma dan
meningkatkan permeabilitas membran (Bruckner dan Warren, 2001).
Senyawa radikal ini juga mengakibatkan kerusakan pada organela lain
yang akan menyebabkan nekrosis (kerusakan hati) (Zimmerman, 1978). Berikut
ini akan digambarkan skema biotransformasi terjadinya reaksi reduksi
dehalogenasi dan reaksi oksidasi dari karbon tetraklorida.
C
Cl
HCl
Cl
Cl
Carbon tetrachloride
O
e-
CYP2EICCl
Cl
Cl
O2CCl
Cl
Cl
O O-
Trichloromethylradical
Trichloromethylperoxide radical
protein or lipid
covalentbinding
C
Cl
Cl
Cl
H
Chloroform
RH
R+
Lipid peroxidation
O2
GSH
GSSG
CCl3OH
CCl Cl
O
Phosgene
Toxicity Toxicity Toxicity
Gambar 5. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida (Timbrell, 2008)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
E. Metanol
Metanol (metil alkohol) yang memiliki struktur molekul CH3OH. Metanol
bersifat racun dan dapat mematikan bila ditelan. Kebutaan dapat pula terjadi
karena kontak dengan kulit atau penghirupan uapnya terlalu lama. Kebutaan orang
yang mencerna metanol disebabkan terbentuknya formaldehid (H2CO) yang dapat
merusakkan retina (Keenan, 1992).
Metanol adalah golongan senyawa alkohol yang paling sederhana, yang
berisi satu atom karbon. Kharakteristik dari metanol adalah berupa cairan, tidak
berwarna dan memiliki bau khas alkohol (Environmental Protection Agency,
1994). Metanol memiliki nilai indeks polaritas sebesar 5,1 dan termasuk senyawa
yang bersifat polar (Byers, 2003). Metanol banyak digunakan sebagai larutan
penyari yang digunakan pada saat maserasi. Pelarut ini diduga mampu melarutkan
hampir semua komponen, baik yang bersifat polar, semi polar maupun non polar
(Al-Ash’ary, Supriyanti, Zackiyah, 2010).
F. Metode Ekstraksi
Ekstraksi cair-cair digunakan sebagai cara untuk praperlakuan sampel
untuk memisahkan analit-analit dari komponen-komponen matriks yang mungkin
mengganggu pada saat pendeteksian analit. Disamping itu, ekstraksi pelarut juga
digunakan untuk memekatkan analit yang ada di dalam sampel dengan jumlah
kecil sehingga tidak menyulitkan proses pendeteksiannya. Analit-analit yang
mudah terekstraksi dalam pelarut organik adalah molekul-molekul netral yang
berikatan secara kovalen dengan substituen yang bersifat non polar atau agak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
polar. Sementara itu, senyawa-senyawa polar dan juga senyawa-senyawa yang
mudah mengalami ionisasi akan tertahan dalam fase air (Sudjadi, 2007).
Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat
aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai,
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang
tersisa diperlakukan sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah
ditetapkan (Departemen Kesehatan RI , 1995).
Metode ekstraksi memilik beberapa metode ekstraksi, yang paling
sederhana adalah ekstraksi dingin. Dengan cara ini bahan kering hasil gilingan
diekstraksi pada suhu kamar secara berturut-turut dengan pelarut yang
kepolarannya makin tinggi: pertama heksana (atau petroleum eter), kemudian
kloroform (atau diklorometana), etil asetat, aseton, metanol dan akhirnya air
(Heinrich dan Barnes, 2009).
Keuntungan utama metode ini merupakan metode ekstraksi yang mudah
karena ekstrak tidak dipanaskan sehingga kemungkinan kecil bahan alam menjadi
terurai. Penggunaan pelarut dengan peningkatan kepolaran secara berurutan
memungkinkan pemisahan bahan-bahan alam berdasarkan kelarutannya
(polaritasnya) dalam pelarut ekstraksi. Ekstraksi dingin memungkinkan banyak
senyawa terekstraksi, meskipun beberapa senyawa memiliki kelarutan terbatas
dalam pelarut ekstraksi suhu kamar (Heinrich dan Barnes, 2009).
Metode maserasi merupakan cara penyarian sederhana yang dilakukan
dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama beberapa
hari pada temperatur kamar dan terlindung dari cahaya. Metode maserasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
digunakan untuk menyari simplisia yang mengandung komponen kimia yang
mudah larut dalam cairan penyari tidak mengandung benzoin, tiraks dan lilin.
(Sudjadi, 1986).
G. Pengukuran Serum ALT dan AST
Sejumlah pemeriksaan sering digunakan untuk menilai cedera hati.
Aspartat aminotransferase (AST) dan alanin aminotransferase (ALT) serum, yang
sering disebut uji fungsi hati, merupakan pengukuran kadar enzim-enzim yang
normalnya terletak di dalam hepatosit. Oleh karena itu keberadaan keduanya
dalam serum adalah tanda nekrosis sel hati dan bukan merupakan indikasi sejati
fungsi hati (McPhee dan Ganong, 2010).
Kerusakan sel-sel hati dapat dilihat dari peningkatan serum
aminotransferase secara signifikan yang mendahului terjadinya kenaikan jumlah
bilirubin total dan alkaline phospatase. Kebanyakan dari kerusakan hati dapat
terjadi satu tahun setelah pemaparan agen hepatotoksik (DiPiro dkk.,2008).
Saat terjadi nekrosis pada hepatosit, kebocoran pada associated plasma
membran dapat dideteksi secara biokimia dengan cara menganalisa plasma atau
serum untuk melihat enzim turunan sitosol yakni, lactate dehydrogenase (LDH),
alanine aminotransferase (ALT atau SGPT), aspartate aminotransferase (AST atau
SGOT) (Gregus dan Klaaseen, 2001).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
H. Landasan Teori
Di dalam hati, terdapat bermacam-macam bentuk kerusakan hati.
Kerusakan hati akibat induksi obat yang biasa terjadi yaitu nekrosis (Forrest,
2006). Pada keadaan nekrosis terjadi pemecahan sel hepatosit sehingga enzim
ALT yang terdapat dalam sel hati keluar dan masuk ke aliran darah. Kerusakan ini
ditandai dengan adanya peningkatan aktivitas ALT (Zimmerman, 1978).
Karbon tetraklorida telah diketahui sebagai senyawa model yang dapat
menimbulkan toksisitas (Timbrell, 2008). Karbon tetraklorida ini bersifat toksik
karena akan mengalami reaksi reduksi dehalogenasi membentuk radikal bebas
yaitu radikal triklormetil (CCl3) (Gregus dan Klaaseen, 2001). Dengan bereaksi
dengan oksigen akan membentuk radikal triklorometil peroksi menginisiasi
terjadinya radikal lipid. Radikal lipid ini akan menyebabkan terbentuknya lipid
radikal lipid alkoksil (LO). Melalui proses fragmentasi, radikal lipid alkoksi
tersebut akan diubah menjadi malondialdehid (Gregus dan Klaaseen, 2001).
Senyawa aldehid ini yang akan menyebabkan kerusakan pada membran plasma
yang dapat mengakibatkan kerusakan pada sel-sel lainya termasuk sel hati.
Berdasarkan penelitian yang dilakukan Phommart (2005) menemukan
adanya senyawa flavonoid dari ekstrak n-heksana dan kloroform dari daun
Macaranga tanarius L. yang memiliki aktivitas antioksidan terhadap DPPH dan
berfunsi mencegah terjadinya oksidasi. Pada tahun 2010, Adrianto melaporkan
penelitian mengenai M. tanarius bahwa, ekstrak metanol-air daun tanaman M.
tanarius memiliki khasiat sebagai hepatoprotektif dengan senyawa penginduksi
parasetamol. Selain itu infusa daun M. tanarius memiliki khasiat sebagai efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
hepatoprotektif, hal ini berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Mahendra
(2010) yang melaporkan bahwa infusa daun M. tanarius memiliki efek
hepatoprotektif jangka panjang dengan senyawa hepatotoksin parasetamol.
Nugraha (2010) juga melaporkan bahwa infusa daun M. tanarius juga memiliki
khasiat sebagai efek hepatoprotektif jangka pendek dengan menginduksi
parasetamol. Pada tahun 2012, Windrawati meneliti dari ekstrak metanol-air daun
M. tanarius yang memiliki efek hepatoprotektif jangka panjang.
I. Hipotesis
Ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L., memiliki efek
hepatoprotektif jangka pendek pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian mengenai efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun
Macaranga tanarius L., terhadap tikus jantan merupakan jenis penelitian
eksperimental murni diberikan pelakuan terhadap sejumlah variabel penelitian.
Rancangan penelitian ini termasuk rancangan acak lengkap dengan menggunakan
rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
Variabel-variabel yang digunakan pada percobaan ini ialah:
1. Variabel penelitian
a. Variabel utama
1. Variabel bebas
Lama pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius, yaitu
variasi jam pemberian ekstrak.
2. Variabel tergantung
Efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air daun M.
tanarius, terhadap sel hati tikus yang terinduksi karbon tetraklorida,
dengan tolok ukur kuantitatif berdasarkan penurunan aktivitas serum ALT
dan AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
b. Variabel pengacau
1. Variabel pengacau terkendali
Kondisi hewan uji yaitu subyek uji yang digunakan adalah tikus
galur Wistar, jenis kelamin jantan, berat badan 150-200 gram, dan umur 2-
3 bulan. Frekuensi pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius dan
cara pemberian ekstrak secara per oral. Bahan daun M. tanarius yang
dipanen dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta pada bulan Mei 2012, cara penyimpanan serbuk daun M.
tanarius.
2. Variabel pengacau tak terkendali
Kondisi patologis hewan uji.
2. Definisi operasional
Definisi operasional penelitian ini adalah:
a. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Ekstrak daun Macaranga tanarius L. adalah ekstrak kental yang
diperoleh dengan mengekstraksi serbuk kering daun M. tanarius seberat
10,0 gram yang dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 50% secara
maserasi selama 72 jam, dengan putaran 140 rpm. Kemudian disaring
dengan kertas saring dan diuapkan di oven selama 24 jam pada suhu 50 C,
hingga bobot pengeringan tetap dengan susut pengeringan sebesar 0%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
b. Efek hepatoprotektif
Efek hepatoprotektif adalah kemampuan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius pada dosis tertentu dapat melindungi hepar dari hepatotoksin.
c. Jangka pendek, yaitu penelitian dilakukan dalam selang waktu ½, 1, 2, 4,
dan 6 jam.
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan berupa tikus jantan galur Wistar, umur 2-3
bulan dengan berat badan berkisar antara 150-200 gram yang diperoleh
dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
b. Bahan uji berupa daun M. tanarius yang dipanen dari Kebun Obat Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada bulan Mei 2012.
2. Bahan kimia
a. Pelarut ekstrak yang digunakan adalah metanol dan air yang diperoleh dari
Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
b. Karbon tetraklorida (Merck) sebagai hepatotoksin yang berupa cairan,
tidak berwarna, berbau khas yang diperoleh dari Laboratorium Kimia
Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
c. CMC-Na sebagai pelarut ekstrak kental dari daun M. tanarius berupa
sebuk, berwarna putih yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-
Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
d. Bahan pensuspensi karbon tetraklorida adalah olive oil (Bertolli) yang
berupa minyak.
e. Olive oil sebagai kontrol negatif.
f. Blanko pengujian ALT dan AST menggunakan aqua bidestilata (PT.
Ikapharmindo Putramas, Jakarta) yang diperoleh dari Laboratorium Kimia
Dasar Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
g. Reagen DyaSyss untuk mengukur aktivitas serum ALT dan AST berupa
reagen SGPT dan SGOT.
h. Serum ALT
Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum ALT DyaSyss.
Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum ALT adalah sebagai berikut:
R1: TRIS pH 7,15 140 mmol/L
L-Alanine 700 mmol/L
LDH (lactatedehydrogenase) 2300 U/L
R2: 2-Oxoglutarate 85 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate
FS: Good’s buffer pH 9,6 100 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate 13 mmol/L
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
i. Serum AST
Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum AST DyaSyss.
Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum AST adalah sebagai berikut:
R1: TRIS pH 7,65 110 mmol/L
L-Aspartate 320 mmol/L
MDH(malatedehydrogenase) 800 U/L
LDH(lactatedehydrogenase) 1200 U/L
R2: 2-Oxoglutarate 65 mmol/L
NADH 1mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate
FS: Good’s buffer pH 9,6 100 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate 13mmol/L
D. Alat Penelitian
1. Peralatan pembuatan serbuk kering daun M. tanarius antara lain: oven
(Memmert), mesin penyerbuk (Retsch) timbangan elektrik.
2. Peralatan pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius antara lain:
timbangan elektrik, seperangkat alat gelas berupa Erlenmeyer, labu ukur,
Bekker glass, gelas ukur, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrek Iwaki Glass),
cawan porselin, shaker (maserator), kertas saring, corong Buchner, vaccum
pump, vaccum rotary evaporator, oven.
3. Peralatan uji hepatoprotektif antara lain: peralatan gelas, seperti Bekker glass,
labu ukur, batang pengaduk, gelas ukur, tabung reaksi, timbangan elektrik,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
pipa kapiler, effendorf, spuit injeksi per oral 5 ml dan 10 ml untuk tikus, spuit
injeksi intra peritonial 3 ml, stopwatch, vortex, sentrifuge, mikro pipet, mikro
vitalab (Microlab 200, Merck).
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi Tanaman Macaranga tanarius L.
Determinasi tanaman M. tanarius dilakukan dengan mencocokan ciri-
ciri tanaman M. tanarius dengan buku acuan batang yang dilakukan secara
benar sesuai dengan buku acuan. Determinasi tanaman dilakukan di
Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta.
2. Pengumpulan bahan
Bahan uji yang digunakan adalah daun M. tanarius yang masih segar
dan berwarna hijau, tidak berlubang yang dipetik dari Kebun Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada bulan Mei 2012.
3. Pembuatan serbuk
Daun M. tanarius dicuci bersih dibawah air mengalir. Setelah bersih
daun diangin-anginkan hingga daun tidak tampak basah kemudian dilakukan
pengeringan menggunakan oven pada suhu 50° C selama 24 jam. Setelah
kering daun dibuat serbuk dan diayak dengan ayakan nomor 40 supaya
kandungan fitokimia yang terkandung dalam daun M. tanarius lebih mudah
terekstrak karena luas permukaan serbuk yang kontak dengan pelarut semakin
besar.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
4. Pembuatan ekstrak metanol : air daun M. tanarius
Sebanyak 10 gram serbuk kering daun M. tanarius diekstraksi secara
maserasi dengan melarutkan serbuk dalam 100 ml pelarut metanol 50% pada
suhu kamar selama 3x24 jam dengan kecepatan 140 rpm. Setelah dilakukan
perendaman, hasil maserasi disaring dengan kertas saring. Larutan hasil
saringan dipindahkan dalam cawan porselen yang telah ditimbang
sebelumnya, agar mempermudah perhitungan randemen ekstrak yang akan
diperoleh. Cawan porselen yang berisi larutan hasil maserasi, dimasukkan
dalam vaccum rotary evaporator untuk menguapkan metanol dan
mendapatkan ekstrak kemudian dimasukkan dalam oven untuk diuapkan
selama 24 jam dengan suhu 50° C untuk mendapatkan ekstrak metanol-air
daun M. tanarius yang kental dengan bobot pengeringan ekstrak yang tetap
agar mendapatkan ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang kental dengan
bobot pengeringan ekstrak yang tetap yaitu sebesar 3,77 g.
5. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak
Menghitung rata-rata rendemen enam replikasi ekstrak metanol : air
daun M. tanarius kental yang telah dibuat.
Rendemen ekstrak = berat cawan ekstrak kental – berat cawan kosong
𝑅𝑎𝑡𝑎 − 𝑟𝑎𝑡𝑎 𝑟𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 =𝑟𝑒𝑝. 1 + 𝑟𝑒𝑝. 2 + 𝑟𝑒𝑝. 3 + 𝑟𝑒𝑝. 4 + 𝑟𝑒𝑝. 5 + 𝑟𝑒𝑝. 6
6
Konsentrasi ekstrak didapat dari hasil rata-rata rendemen ekstrak.
percawannya yaitu 3,77 g dalam labu ukur terkecil dengan pelarut yang
sesuai. Konsentrasi yang dapat digunakan adalah konsentrasi pekat yang
dapat dibuat dimana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
dikeluarkan dari spuit oral. Cara pembuatannya adalah dengan melarutkan
ekstrak percawannya (gram) dalam labu ukur dengan pelarut yang sesuai
CMC Na 1%. Labu ukur terkecil yang tersedia adalah labu ukur 5 ml
sehingga konsentrasi ekstrak dapat ditetapkan yaitu sebesar 0,384 g/ml atau
384 mg/ml atau 38,4%b/v (Andini, 2010).
6. Penetapan dosis ekstrak metanol : air daun M. tanarius
Dasar penetapan peringkat dosis adalah bobot tertinggi tikus dan pemberian
cairan secara peroral separuhnya yaitu 2,5 ml. Penetapan dosis tertinggi
ekstrak metanol : air daun M. tanarius adalah :
D x BB = C x V
D x BB tertinggi tikus ( kg/BB) = C ekstrak (mg/ml) x 2,5 ml
D = x mg/kg BB
Dua dosis lainnya diperoleh dengan menurunkan 3 dan 6 kalinya dari dosis
tertinggi.
7. Pembuatan larutan karbon tetraklorida dalam olive oil
Larutan karbon tetraklorida dalam olive oil dibuat dengan cara
mengambil volume karbon tetraklorida secara seksama, kemudian diencerkan
dengan olive oil dengan perbandingan 1:1 sampai volume tertentu sehingga
diperoleh konsentrasi akhir sebesar 50%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
8. Uji pendahuluan
a. Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida
Pemilihan dosis karbon tetraklorida dilakukan untuk mengetahui pada
dosis berapa karbon tetraklorida mampu menyebabkan kerusakan hati
tikus yang ditandai dengan peningkatan aktivitas GPT-serum paling tinggi
tetapi tidak menimbulkan kematian. Dosis hepatotoksik yang digunakan
dalam penelitian ini mengacu pada penelitian Janakat, Al-Merie (2003),
bahwa dosis 2 ml/kg BB karbon tetraklorida dalam olive oil dengan
perbandingan karbon tetraklorida : oilve oil 1:1, terbukti mampu
meningkatkan aktivitas ALT-AST serum pada tikus bila diberikan secara
intra peritonial (i.p).
b. Penetapan waktu pencuplikan darah
Berdasarkan penelitian Janakat, Al-Merie (2003) meunjukkan bahwa
aktivitas GPT serum tikus terangsang karbon tetraklorida 2 mg/kg BB
mencapai maksimal pada jam ke-24 setelah pemberiannya, kemudian pada
jam ke-48 berangsur-angsur menurun. Pengukuran ada jam ke-24
dilakukan untuk mengetahui profil kenaikan serum GPT sebelum jam ke-
48.
c. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol : air daun M. tanarius
Lama waktu pemejanan ekstrak metanol : air daun M. tanarius dilakukan
pada waktu jam ke-½, 1, 2, 4 dan 6 kemudian setelah ½, 1, 2, 4 dan 6 jam
dipejankan senyawa hepatotoksin karbon tetraklorida, kemudian diukur
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
aktivitas ALT dan AST-nya sesuai hasil orientasi waktu penetapan
pencuplikan darah.
9. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji
Hewan percobaan yang dibutuhkan sebanyak 40 ekor tikus jantan
dibagi secara acak dalam delapan kelompok sama banyak. Kelompok I
merupakan kontrol negatif yaitu pemberian olive oil secara intra peritonial.
Kelompok II merupakan kontrol negatif yaitu hepatotoksin karbon
tetraklorida dengan dosis 3840 mg/kg BB secara intra peritonial. Kelompok
III merupakan kontrol perlakuan yaitu pemberian ekstrak metanol-air daun M.
tanarius dosis 3840 mg/kg BB secara per oral. Kelompok IV-VIII diberikan
ekstrak metanol-air daun M. tanarius dengan dosis 3840 mg/kg BB,
kemudian secara berturut-turut pada ½, 1, 2, 4, dan 6 jam setelah perlakuan
diberikan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida dengan dosis 2 ml/kg BB.
Pada jam ke-24 setelah diberi karbon tetraklorida semua kelompok diambil
darahnya pada daerah sinus orbitalis pada mata tikus, kemudian ditampung
dalam Effendorf untuk penetapan aktivitas serum ALT dan AST. Darah
disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan 3500 rpm dan bagian
supernatannya diambil.
10. Penetapan aktivitas ALT-AST serum
Alat yang digunakan untuk menganalisis aktivitas ALT dan AST serum
adalah Mikro vitalab 200. Aktivitas enzim diukur pada panjang gelombang
340 nm, suhu 370
C, dengan faktor koreksi, dan dinyatakan dengan satuan
U/L. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST dilakukan di laboratorium
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Biokimia Fisiologi Manusia, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta. Analisis aktivitas serum ALT dilakukan dengan cara mencampur
100 µL serum atau plasma dengan 800 µL reagen I, kemudian dicampurkan
200 µL reagen II dan didiamkan selama operating time selama satu menit
kemudian divortex dan dibaca resapan setelah dua menit. Untuk analisis
fotometri dengan AST serum dilakukan dengan cara mencampur 100 µL
serum atau plasma dengan 800 µL reagen I, kemudian dicampurkan 200 µL
reagen II dan didiamkan selama operating time selama satu menit kemudian
divortex dan dibaca resapan setelah dua menit.
11. Perhitungan Efek Hepatoprotektif
Hasil resapan aktivitas serum ALT dan AST yang dilakukan pengujian
besarnya efek hepatoprotektif yang dinyatakan dalam persen (%).
Perhitungan mengenai besarnya efek hepatoprotektif dapat dihitung
menggunakan rumus:
𝑝𝑢𝑟𝑎𝑡𝑎 𝐴𝐿𝑇/𝐴𝑆𝑇 ℎ𝑒𝑝𝑎𝑡𝑜𝑡𝑜𝑘𝑠𝑖𝑛 −𝑝𝑢𝑟𝑎𝑡𝑎 𝐴𝐿𝑇/𝐴𝑆𝑇 𝑝𝑒𝑟𝑙 𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛
𝑝𝑢𝑟𝑎𝑡𝑎 𝐴𝐿𝑇/𝐴𝑆𝑇 ℎ𝑒𝑝𝑎𝑡𝑜𝑡𝑜𝑘𝑠𝑖𝑛 x 100%
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas ALT-AST diuji dengan Kolmogorov-Smirnov untuk
mengetahui distribusi data dan analisis varian untuk melihat homogenitas varian
antar kelompoknya sabagai syarat analisis parametrik. Jika data terdistribusi
normal maka dilanjutkan dengan analisis variansi pola searah (ANOVA one way)
dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing
kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat perbedaan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak bermakna (tidak
signifikan) (p>0,05). Tetapi bila distribusi tidak normal dilakukan analisis dengan
Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT-AST serum antar
kelompok. Kemudian dilanjutkan uji dengan Mann Whitney untuk melihat
perbedaan tiap kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dan membuktikan khasiat
ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. sebagai hepatoprotektor tikus
yang terinduksi karbon tetraklorida (CCl4) dengan pemberian jangka pendek.
Selain itu penelitian ini sebagai kelanjutan dari penelitian sebelumnya mengenai
efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air daun M.tanarius namun
menggunakan hepatotoksin karbon tetraklorida. Untuk mencapai tujuan penelitian
tersebut maka dilakukan beberapa pengujian. Aktivitas ALT dan AST dari serum
tikus yang diteliti dijadikan sebagai tolak ukur pengujian kuantitatif.
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Penelitian dengan tema penggunaan tanaman sebagai hepatoprotektor ini
menggunakan serbuk dari daun tanaman M. tanarius. Daun tanaman M. tanarius
yang didapat dari kebun obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma ini
dilakukan determinasi. Tujuan determinasi tanaman ini supaya diketahui secara
pasti tanaman yang digunakan dalam penelitian ini benar merupakan tanaman M.
tanarius supaya tidak terjadi kesalahan dalam penyiapan bahan.
Pendeterminasian ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Bagian tanaman yang
dideterminasi adalah daun, batang, bunga dan buah menggunaan buku acuan
untuk mendeterminasi tanaman hingga ke tingkat spesies. Hasil yang diperoleh
adalah daun, batang, buah dan bunga benar merupakan tanaman M. tanarius.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
2. Pembuatan serbuk daun M. tanarius
Pembuatan serbuk daun M. tanarius diawali dengan pengambilan daun M.
tanarius, kemudian dilakuan pencucian dan pensortiran daun sesuai dengan
langkah-langkah pembuatan simplisia. Pencucian bertujuan supaya daun yang
diperoleh bebas dari kotoran dan debu. Penyortiran dilakukan supaya daun yang
digunakan daun yang hijau dan tidak berlubang. Kemudian daun dikeringkan
dibawah sinar matahari yang ditutupi kain hitam. Hal ini dilakukan supaya daun
menjadi layu, namun kandungan klorofilnya tidak rusak akibat sinar matahari.
Setelah daun menjadi rapuh, dipanaskan menggunakan oven sekitar 15 menit,
kemudian dipisahkan daun dari tulang daun, sehingga diperoleh serpihan daun.
Potongan kecil daun-daun ini kemudian diserbukkan penggunakan penyerbuk dan
disaring menggunakan pengayak dengan nomor mess 40. Hal ini sesuai dengan
ketentuan yang ditetapkan oleh BPOM RI.
3. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Penetapan kadar air dari serbuk daun M. tanarius bertujuan untuk menguji
serbuk yang dihasilkan memenuhi persyaratan serbuk yang baik, yakni kadar air
kurang dari 10% (Departemen Kesehatan RI, 1995). Penetapan kadar air serbuk
daun M. tanarius dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat
moisture balance. Serbuk dipanaskan pada suhu 110°C selama 15 menit.
Penetapan suhu sebesar 110°C dimaksudkan agar supaya kandungan air telah
menguap dan waktu 15 menit dianggap bahwa kadar air telah memenuhi
persyaratan parameter standarisasi non spesifik. Dari hasil pengujian penetapan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
kadar air menunjukkan bahwa serbuk daun M. tanarius memiliki rata-rata kadar
air sebesar 7,59%. Hasil pengujian ini, menunjukkan bahwa kadar air sebuk daun
M. tanarius telah memenuhi persyaratan kadar air untuk serbuk yang baik, yaitu
kurang dari 10% (Departemen Kesehatan RI, 1995).
B. Hasil Penimbangan Bobot Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius
Pembuatan ekstrak metanol-air dilakukan dengan metode penyarian yaitu
dengan maserasi. Maserasi merupakan metode penyarian yang dilakukan dengan
cara memasukkan serbuk simplisia ke dalam labu erlenmeyer, yang kemudian di
aduk dengan kecepatan kostan menggunakan shaker, selama kurang lebih 72 jam.
Metode ini dipilih dalam metode penyarian karena peralatan yang digunakan
sederhana dan cara pengerjaan serta pengoperasian alat yang mudah. Metode ini
dilakukan untun menyari simplisia yang dilarutkan menggunakan pelarut tertentu.
Pemilihan pelarut ini didasarkan pada jenis kandungan zat aktif digunakan,
hal ini supaya ada kecocokan antara zat akif dengan larutan penyari, sehingga zat
aktif akan larut dan bercampur dengan cairan penyari. Dalam daun M. tanarius
mengandung senyawa golongan glikosida fenolik yang dapat larut di dalam air,
sehingga dalam larutan penyari juga menggunakan air. Pada penelitian ini
digunakan cairan penyari, yaitu campuran metanol dengan air dengan
perbandingan 1:1 atau 50 ml air dan 50 ml metanol.
Menurut standar, proses ekstraksi metanol-air serbuk daun M. tanarius
menghasilkan ekstrak kental. Ekstrak kental didapatkan dengan mengikuti
parameter yang ada, yaitu ekstrak kental didapatkan bobot pengeringan tetap
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
dengan susut pengeringan sebesar 0%. Tujuan dilakukan pengukuran parameter
non spesifik yaitu parameter susut pengeringan adalah untuk menghitung sisa zat
setelah dilakukan pengeringan pada temperatur ± 50°C. Ekstrak yang berada
dalam cawan ditimbang setiap waktu tertentu selama 24 jam atau hingga berat
menjadi konstan (dinyatakan dalam persen). Tujuannya adalah untuk menentukan
batasan atau rentang mengenai seberapa banyak senyawa yang hilang selama
proses pengeringan, dimana hal ini dapat mempengaruhi bobot ekstrak yang
didapatkan sehingga akan mempengaruhi konsentrasi dan dosis ekstrak. Hasil dari
proses pengeringan didapatkan bahwa tidak ada perubahan bobot ekstrak sehingga
diperoleh bobot pengeringan tetap yaitu pada jam ke-23 dan ke-24.
Untuk susut pengeringan ekstrak metanol air daun M. tanarius pada jam
ke-23 dan ke-24 sebesar 0% sehingga dapat diketahui pelarut penyari ekstrak
sudah tidak ada atau tidak ada sisa. Dengan demikian, pada penelitian ini, waktu
pengeringan 24 jam yang digunakan untuk memperoleh bobot pengeringan tetap
ekstrak metanol air daun M. tanarius. Dari hasil penimbangan bobot ekstrak
didapat rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius sebesar 3,77% yang
dihasilkan dari 63 cawan ekstrak kental. Untuk pembuatan ekstrak kental,
digunakan 1 kg serbuk kering daun M. tanarius, sehingga dapat dihasilkan ekstrak
kental sebanyak 63 cawan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
C. Uji Pendahuluan
1. Penentuan dosis hepatotoksin
Pada penelitian ini jenis hepatotoksin karbon tetraklorida. Karbon
tetraklorida ini diberikan dengan dosis tertentu yang dapat memberikan efek
terhadap hepar tikus. Adanya respon dari pemberian hepatotoksin ini ditandai
dengan kenaikan tinggi serum ALT dan AST yang menandakan adanya kerusakan
pada hepar tikus. Karbon tetraklorida merupakan hepatotoksin yang dapat
menyebabkan terjadinya perlemakan hati atau degradasi melemak. Kenaikan
serum ALT dan AST dari pemberian karbon tetraklorida dibandingkan dengan
kondisi normal adalah sekitar 3-4 kali (Zimmerman, 1999). Hal ini berbeda
dengan hepatotoksin yang digunakan, misalnya seperti paracetamol yang
kenaikan serum ALT dan AST mencapai 10-20 kali lipat. Hal ini disebabkan
karena, kemampuan parasetamol dapat menyebabkan kerusakan hati sampai pada
tahap nekrosis akut.
Dosis yang digunakan pada penelitian ini, yaitu 2 ml/kg BB, dengan
pelarut yang digunakan adalah olive oil. Adapun perbandingan yang digunakan
adalah 1:1. Penetapan dosis ini berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan
oleh Janakat, Al-Merie (2003). Pada penelitian ini, pemberian CCl4 dengan dosis
2 ml/kg BB diberikan secara intraperitonial.
2. Penentuan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Pada penelitian ini digunakan ekstrak metanol-air daun M. tanarius.
Penetapan dosis yang digunakan, didapatkan dari penelitian yang dilakukan oleh
Windrawati (2013) dimana dosis ini memiliki efek hepatoprotektif yang paling
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
baik. Selain itu, penetapan dosis juga berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh
Adrianto (2010). Dosis yang digunakan sebesar 3840 mg/kgBB yang diberikan
secara peroral dengan pelarut yang digunakan adalah CMC Na. Pelarut CMC Na
yang digunakan 1 gram dalam 1 ml aquadest yang kemudian dicampurkan dengan
ekstrak metanol-air daun M. tanarius.
3. Penentuan waktu pencuplikan darah
Pada penelitian dengan waktu jangka pendek dilakukan penentuan waktu
pencuplikan darah pada rentang waktu tertentu, yaitu 24 jam dan 48 jam. Hal ini
bertujuan untuk melihat keefektifan hepatotoksin dalam bekerja dan memberikan
respon maksimal pada dosis 2 ml/kg BB. Dari pengujian ini akan didapatkan
waktu optimal terjadinya peningkatan serum ALT dan AST. Karbon tetraklorida
diujikan pada tikus dengan dosis 2 ml/kg BB dengan waktu pencuplikan darah
pada jam ke-24 dan 48. Namun sebelum hepatotoksin diujikan, serum darah tikus
diambil dahulu dan sebagai jam ke-0. Hal ini bertujuan supaya dapat
dibandingkan sebelum diberikan senyawa uji dan setelah diberi perlakuan. Hasil
yang didapatkan dari pengujian ini adanya aktivitas serum ALT yang dapat dilihat
pada tabel I serta gambar VI.
Tabel I. Aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis
2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
Selang Waktu (jam) Purata Aktivitas serum ALT ± SE (U/L)
0 73,2 ± 12,9
24 246,4 ± 17,0
48 102,0 ± 14,6
Keterangan: SE = Standard Error
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT-serum sel hati tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
Dari data tabel I dan gambar VI diagram batang tersebut, diketahui bahwa
aktivitas serum ALT pada jam ke 0 sebelum perlakuan, jam ke-24 dan jam ke-48
secara berturut-turut adalah 73,2 ± 12,9; 246,4 ± 17,0 dan 102,0 ± 14,6 U/L.
Dapat diketahui bahwa aktivitas serum ALT pada pencuplikan darah jam ke-24
dengan pemberian perlakuan karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB lebih tinggi
dibandingkan dengan pencuplikan darah pada jam ke 0 dan jam ke-48.
Pada pencuplikan darah 24 jam didapatkan peningkatan serum ALT 3-4
kali dari nilai normal yang dibandingkan terhadap jam ke-0 (73,2 ± 12,9U/L).
Pada pencuplikan darah 48 jam mengalami kenaikkan serum ALT hampir 2 kali
dari nilai normal, karena peningkatan aktivitas serum ALT tertinggi sudah
memenuhi kriteria terjadinya hepatotoksisitas, dan pada jam ke-48 sudah terjadi
penurunan aktivitas ALT dan maka tidak dilakukan lagi pengukuran pencuplikan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
darah pada jam ke-72. Selain itu dari uji statistik, dapat diketahui bahwa kenaikan
serum AST pada jam ke-24, menunjukkan perbedaan yang bermakna
dibandingkan dengan data pada jam ke-0 dan ke-48 yang dapat dilihat pada tabel
III.
Tabel II. Aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis
2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
Selang Waktu (jam) Purata Aktivitas serum AST ± SE (U/L)
0 151,2 ± 14,2
24 596,2 ± 25,3
48 188,6 ± 3,2
Keterangan: SE = Standard Error
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas AST-serum sel hati tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Untuk data tabel II dan gambar VII dari aktivitas serum AST juga
menunjukkan adanya peningkatan pada pencuplikan darah 24 jam dibandingkan
dengan pencuplikan darah pada jam ke-0 dan jam ke-48. Dapat diketahui bahwa
aktivitas serum AST pada jam ke 0 sebelum perlakuan, jam ke-24 dan jam ke-48
secara berturut-turut adalah 151,2 ± 14,2 U/L; 596,2 ± 25,3 U/L dan 188,6 ± 3,2
U/L. Nilai AST menggambarkan adanya kenaikan aktivitas serum AST pada jam
ke-24 sebesar 3-4 kali dari nilai normal AST-serum yang dibandingkan terhadap
jam ke-0 (151,2 ± 14,2 U/L), sedangkan pada jam ke-48, kenaikan aktivitas
serum sebesar 1-2 kali dari jam ke-0. Pada jam ke-48 sudah terjadi penurunan
aktivitas serum. Maka, dari data tersebut, kenaikan serum yang paling tinggi
adalah pada jam ke-24. Kenaikan 3-4 kali sudah dapat dikategorikan terjadinya
hepatotoksisitas. Berikut ini, hasil statistik perbedaan kenaikan akivitas serum
ALT pada waktu pencuplikan darah jam ke-0, 24 dan 48.
Tabel III. Perbedaan kenaikan aktivitas serum ALT setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada waktu pencuplikan
darah jam ke-0, 24 dan 48
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Dari tabel tersebut, terdapat kenaikan aktivitas serum ALT yang
menunjukkan perbedaan yang bermakna pada waktu pencuplikan darah jam ke-24
bila dibandingkan dengan jam ke-0 dan 48.
ALT Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48
Jam ke-0 BB TB
Jam ke-24 BB BB
Jam ke-48 TB BB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
Tabel IV. Perbedaan kenaikan aktivitas serum AST setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada waktu pencuplikan
darah jam ke-0, 24 dan 48
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Dari data tersebut serum ALT dan AST secara statistik menunjukkan
perbedaan yang bermakna pada pencuplikan darah jam ke-24 (p<0,05)
dibandingkan dengan pencuplikan darah jam ke-0 dan jam ke-48. Oleh sebab itu,
pada penelitian jangka pendek dipilih waktu pencuplikan darah hewan uji pada
jam ke-24 setelah induksi CCl4 dengan dosis 2 ml/kgBB.
D. Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun M.
tanarius Terhadap Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida
Penelitian ini dilakukan untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif
dari ekstrak metanol-air daun M.tanarius dengan perlakuan jangka pendek. Dalam
hal ini, jangka pendek diartikan bahwa pemberian antihepatotoksin dilakukan
dalam rentang waktu tertentu, yaitu pemberian ekstrak metanol-air pada jam ke-½,
1, 2, 4 dan 6, setelah penginduksian CCl4.
Dosis untuk hepatotoksin dan dosis M. tanarius yang digunakan pada
penelitian ini menggunakan dosis tertinggi yang didapatkan berdasarkan
penelitian yang dilakukan sebelumnya dengan pengujian ekstrak metanol-air
AST Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48
Jam ke-0 BB TB
Jam ke-24 BB BB
Jam ke-48 TB BB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
daun M. tanarius jangka panjang yang dilakukan oleh Windrawati (2013)
menghasilkan nilai aktivitas serum ALT dan AST yang paling baik pada dosis
tertinggi. Dosis yang digunakan yaitu 3840 mg/kgBB, dengan pencuplikan darah
yang dilakukan pada jam ke-24 setelah penginduksian CCl4. Berikut ini hasil
penelitian dalam bentuk tabel dan diagram batang:
Tabel V. Pengaruh perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air daun M.
tanarius 3840 mg/kgBB berdasarkan aktivitas serum ALT dan
AST pada beberapa variasi waktu terhadap hepatotoksisitas
karbon tetraklorida
Kel. Purata ± SE (U/L)
Aktivitas serum ALT
Purata ± SE (U/L)
Aktivitas serum AST
Efek Hepatoprotektif
(%)
I. 82,2 ± 2,7 118,6 ± 5,1 -
II. 246,4 ± 17,0 596,2 ± 25,3 -
III. 65,6 ± 5,1 108,6 ± 3,1 -
IV. 95,8 ± 4,2 271,0 ± 35,9 61,12
V. 140,6 ± 6,3 431,0 ± 24,5 42,93
VI. 147,4 ± 11,3 429,6 ± 17,8 40,17
VII. 113,4 ± 7,5 408,6 ± 7,3 53,97
VIII. 74,2 ± 5,9 177,8 ± 19,8 69,88
I : Kelompok kontrol negatif (olive oil dosis 3840 mg/kgBB)
II : Kelompok kontrol hepatotoksin CCl4 dosis 3840 mg/kg BB
III : Kelompok kontrol perlakuan (Ekstrak metanol air daun M. tanarius
dosis 3840 mg/kgBB)
IV : Kelompok perlakuan EMAMT 3840 mg/kgBB ½ jam + CCl4 840mg/kgBB
V : Kelompok perlakuan EMAMT 3840 mg/kgBB 1 jam + CCl4 3840mg/kgBB
VI : Kelompok perlakuan EMAMT 3840 mg/kgBB 2 jam + CCl4 3840mg/kgBB
VII : Kelompok perlakuan EMAMT 3840 mg/kgBB 4 jam + CCl4 3840mg/kgBB
VIII : Kelompok perlakuan EMAMT 3840 mg/kgBB 6 jam + CCl4 3840mg/kgBB
EMAMT = Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius; SE = Standard Error;
1. Kontrol negatif
Kontrol negatif ini bertujuan untuk mengetahui kenaikan aktivitas serum
ALT dan AST pada tikus tidak disebabkan karena pelarut dari senyawa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
hepatotoksin melainkan berasal dari senyawa yang diinduksikan yaitu CCl4. Pada
penelitian ini, digunakan kontrol negatif yaitu olive oil, sebagai pelarut dari CCl4.
Pada penelitian ini, digunakan olive oil dengan dosis 2 ml/kg BB (Janakat,
Al-Merie, 2003). Dosis yang digunakan sama dengan dosis hepatotoksin yang
digunakan, dengan perbandingan 1:1. Dari hasil pengukuran aktivitas serum ALT
yang diperoleh dari kelompok kontrol negatif dapat dilihat pada tabel V diatas
menunjukkan bahwa aktivitas serum ALT kontrol negatif adalah sebesar 82,2 ±
2,7 U/L dan dari tabel VI dapat dilihat bahwa aktivitas AST sebesar 118,6 ± 5,1
U/L. Hasil pengujian terhadap aktivitas serum ALT dan AST menunjukkan bahwa
pemberian olive oil dengan dosis 3840 mg/kgBB pada tikus tidak mempengaruhi
kenaikan aktivitas serum AST dan ALT. Dari hasil statistik, apabila dibandingkan
dengan perlakuan pada jam ke-0 menunjukkan perbedan yang tidak bermakna.
Hal ini mengindikasikan bahwa bila terjadi kenaikan aktivitas ALT dan AST ada
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan bukan berasal dari pelarut (olive oil).
Data hasil perbandingan aktivitas serum ALT dan AST pada jam ke-0 apabila
dibandingkan dengan perlakuan kontrol negatif dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel VI. Perbandingan aktivitas serum ALT jam ke-0 dengan perlakuan
kontrol negatif olive oil
ALT Jam ke-24 Kontrol negatif
Jam ke-24 TB
Kontrol negatif TB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Tabel VII. Perbandingan aktivitas serum AST jam ke-0 dengan perlakuan
kontrol negatif olive oil
AST Jam ke-24 Kontrol negatif
Jam ke-24 TB
Kontrol negatif TB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Pada penelitian ini, dilakukan pengukuran terhadap enzim alanin
transferase dan aspartat transferase pada serum darah tikus karena kedua enzim
tersebut dapat mengalami peningkatan jika terjadi kerusakan pada hati. Sebagai
faktor penentu utama adalah aktivitas serum ALT karena enzim tersebut spesifik
terdapat di hati, sedangkan untuk AST tidak spesifik berada di hati tetapi dapat
ditemukan pada organ lainnya, misalnya otot. Oleh karena itu, adanya perubahan
akivitas serum AST dapat disebabkan tegangnya tikus saat pengambilan darah,
sehingga mempengaruhi kinerja otot dan menaikkan serum AST. Aktivitas serum
AST dapat digunakan sebagai faktor yang mendukung adanya kerusakan hati.
Namun dengan gabungan pengujian kerusakan hati menggunakan pengujian ALT
dan AST lebih baik dan lebih sensitif bila dibandingkan dengan pengujian
menggunakan enzim hidrogenase dalam menunjukkan adanya kerusakan pada hati
akibat induksi hepatotoksin, karena keberadaan enzim tersebut tidak spesifik
bekerja di hati.
2. Kontrol hepatotoksin (karbon tetraklorida 3840 mg/kgBB)
Pengujian kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 3840 mg/kgBB
(kelompok II) dibuat untuk mengetahui pengaruh dari penginduksian karbon
tetraklorida 3840 mg/kgBB terhadap sel hati tikus melalui pengujian aktivitas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
serum ALT dan AST sekaligus digunakan untuk menganalisis efek
hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius.
Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST pada kontrol hepatotoksin CCl4
bertujuan untuk menunjukkan efek dari pemberian CCl4 dosis 3840 mg/kgBB
terhadap aktivitas serum ALT dan AST. Hasilnya, pada tabel V menunjukkan
aktivitas serum ALT meningkat hingga 246,4 ± 17,0 U/L atau sekitar 3-4 kali lipat
dari nilai kontrol negatif dan dari perlakuan jam ke-0 (73,2 ± 12,9 U/L). Pada
perubahan aktivitas serum AST pada tabel VI, yaitu 596,2 ± 25,3 U/L dengan
peningkatan hingga 5 kali lipat.
Data yang diperoleh dilakukan uji statistik menggunakan analisis statistik
variasi satu arah dan uji lanjutan Scheffe terdapat perbedaan yang bermakna antara
kelompok kontrol hepatotoksin CCl4 dengan kelompok kontrol negatif. Hasil
pengukuran aktivitas serum ALT dan AST menunjukkan telah terjadi kerusakan
sel hati tikus. Nilai kenaikan serum ALT dan AST pada kelompok kontrol
hepatotoksin CCl4 dosis 3840 mg/kgBB pada penelitian ini akan digunakan
sebagai dasar dalam melihat besarnya efek hepatoprotektif yang dimiliki oleh
ekstrak metanol air daun M. tanarius pada kelompok perlakuan jangka pendek
pada jam ke-½, 1, 2, 4 dan jam ke 6.
3. Kontrol perlakuan (ekstrak metanol-air daun M. tanarius 3840
mg/kgBB)
Kontrol perlakuan dengan pemberian perlakuan ekstrak metanol air daun
M. tanarius 3840 mg/kg. Kontrol perlakuan ini bertujuan untuk melihat
pemberian ekstrak metanol air daun M. tanarius mengakibatkan adanya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
perubahan aktivitas serum ALT dan AST atau tidak. Aktivitas serum ALT dan
AST secara berturut-turut yang dihasilkan dapat dilihat pada tabel V adalah 65,6 ±
5,1 U/L dan 180,6 ± 3,1 U/L. Bila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin
(karbon tetraklorida) menunjukkan perbedaan yang bermakna. Bila dibandingkan
dengan kontrol negatif (olive oil) maka menunjukkan perbedaan yang tidak
bermakna. Hal ini menunjukan bahwa ekstrak metanol air daun M. tanarius tidak
menimbulkan kenaikan serum ALT dan AST. Kenaikan aktivitas serum ALT dan
AST berasal dari penginduksian CCl4. Berikut ini merupakan data hasil statistik
perbandingan aktivitas serum ALT dan AST kontrol perlakuan (ekstrak metanol
air) dengan kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif.
Tabel VIII. Perbandingan aktivitas serum ALT kontrol perlakuan dengan
kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif
ALT Kontrol CCl4 Kontrol Olive Oil Kontrol Metanol
Kontrol CCl4 BB BB
Kontrol Olive Oil BB TB
Kontrol Metanol BB TB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Tabel IX. Perbandingan aktivitas serum AST kontrol perlakuan dengan
kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif
AST Kontrol CCl4 Kontrol Olive Oil Kontrol Metanol
Kontrol CCl4 BB BB
Kontrol Olive Oil BB TB
Kontrol Metanol BB TB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
4. Perlakuan Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius
Terhadap Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida
Pada penelitian ini, dilakukan pengujian jangka pendek. Oleh karena itu
penulis membatasi waktu perlakuan jangka pendek ekstrak metanol air daun M.
tanarius sebelum pemejanan CCl4 adalah rentang waktu antara ½ jam sampai 6
jam. Dari rentang waktu tersebut, ditentukan waktu sebagai perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius yaitu ½, 1,2, 4, dan 6 jam.
Berikut merupakan hasil data secara statistik yang menunjukkan perbedaan
yang bermakna dan perbedaan yang tidak bermakna dari masing-masing
kelompok, dapat dilihat pada tabel VII, gambar 8 untuk data ALT dan tabel VIII
dan gambar 9 untuk data AST.
Tabel VII. Perbandingan data berbeda bermakna dan berbeda tidak
bermakna pada perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air
daun M. tanarius 3840 mg/kgBB berdasarkan aktivitas serum
ALT pada beberapa variasi waktu
ALT
Kontrol
CCl4
Kontrol
Olive oil
Kontrol
Metanol Jam ½ Jam 1 Jam 2 Jam 4 Jam 6
Kontrol CCl4 BB BB BB BB BB BB BB
Kontrol Olive oil BB TB TB BB BB TB TB
Kontrol Metanol BB TB TB BB BB TB TB
Jam ½ BB TB TB TB TB TB TB
Jam 1 BB BB BB TB TB TB BB
Jam 2 BB BB BB TB TB TB BB
Jam 4 BB TB TB TB TB TB TB
Jam 6 BB TB TB TB BB BB TB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Gambar 8. Diagram batang rata-rata pengaruh perlakuan jangka pendek pemberian ekstrak metanol-air terhadap hepatotoksisitas karbon tetraklorida dilihat dari aktivitas
serum ALT
Tabel VIII. Perbandingan data berbeda bermakna dan berbeda tidak
bermakna pada perlakuan jangka pendek ekstrak metanol-air
daun M. tanarius 3840 mg/kgBB berdasarkan aktivitas serum
AST pada beberapa variasi waktu
AST Kontrol
Metanol
Jam
½ Jam 1 Jam 2 Jam 4 Jam 6
Kontrol
CCl4 BB BB BB BB BB BB
Kontrol
Olive oil TB BB BB BB BB TB
Kontrol Metanol
BB BB BB BB TB
Jam ½ BB BB BB BB TB
Jam 1 BB BB TB TB BB
Jam 2 BB BB TB TB BB
Jam 4 BB BB TB TB BB
Jam 6 TB TB BB BB BB
BB= berbeda bermakna (p<0,05); TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Gambar 9. Diagram batang rata-rata pengaruh perlakuan jangka pendek pemberian ekstrak metanol-air terhadap hepatotoksisitas karbon tetraklorida dilihat dari aktivitas
serum AST Pada pemberian perlakuan pada waktu jam ke-½ jam ekstrak metanol air
daun M. tanarius 3840 mg/kg BB (kelompok IV) menunjukkan aktivitas serum
ALT adalah 95,8 ± 4,2 U/L. Pada pengukuran data aktivitas serum ALT tersebut
didukung dengan pengukuran aktivitas serum AST yang secara statistik dihasilkan
271,0 ± 35,9 U/L. Hasil analisis menunjukkan efek hepatoprotektif yang
dihasilkan sebesar 61,12%. Apabila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin
CCl4 menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna, yang menyatakan bahwa
pemberian ekstrak M. tanarius pada jam ke-½ dapat menurunkan aktivitas serum
ALT dan AST sedangkan dibandingkan dengan kontrol negatif memiliki
perbedaan yang tidak bermakna. Pada perlakuan jam ke-½ ekstrak metanol-air
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
daun M. tanarius mempunyai efek hepatoprotektif karena dapat melindungi hati
sebesar lebih dari 50% dari hepatotoksin CCl4.
Kelompok perlakuan jam ke-1 ekstrak metanol air daun M. tanarius 3840
mg/kg BB (dapat dilihat pada kelompok V) dari tabel V menunjukkan hasil
aktivitas serum ALT 140,6 ± 6,3 U/L dan aktivitas serum AST sebesar 431,0 ±
24,5 U/L. Pada perlakuan ini, diketahui bahwa memiliki efek hepatoprotektif
sebesar 42,93 %. Apabila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin CCl4
menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<0,05), hal ini membuktikan bahwa
ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotekif. Apabila nilai
ALT dan AST pada kelompok perlakuan jam ke-1 dibandingkan dengan kontrol
negatif olive oil, menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna (tabel VIII).
Dari data tersebut berarti, ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek
hepatoprotektif tetapi akibat kerusakan di hepar yang ditimbulkan oleh CCl4,
belum bisa kembali seperti normal.
Pada perlakuan efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dengan perlakuan jam ke-2 (dapat dilihat pada kelompok VI)
dari tabel V menunjukkan hasil aktivitas serum ALT 147,4 ± 11,3 U/L dan
aktivitas serum AST sebesar 429,6 ± 17,8 U/L dengan efek hepatoprotektif
sebesar 40,17%. Hasil ini menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<0,05)
dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin CCl4. Dengan adanya perbedaan
aktivitas serum yang bermakna antara kelompok perlakuan jam ke-2 dengan
kelompok kontrol hepatotoksin berarti ekstrak metanol-air daun M. tanarius
memiliki efek hepatoprotektif. Pada perlakuan jangka pendek jam ke-2 terjadi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
penurunan efek hepatoprotektif bila dibandingkan dengan jam ke-½ dan pada jam
ke-1. Apabila dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil, menunjukkan adanya
perbedaan yang bermakna yang berarti bahwa ekstrak metanol-air daun M.
tanarius memiliki efek hepatoprotektif tetapi akibat kerusakan pada hepar yang
ditimbulkan oleh CCl4 belum bisa kembali seperti normal.
Pada perlakuan jam ke-4 (dapat dilihat pada kelompok VII) dari tabel V
menunjukkan hasil aktivitas serum ALT 113,4 ± 7,5 U/L dan aktivitas serum AST
sebesar 408,6 ± 7,3 U/L dengan efek hepatoprotektif sebesar 53,97%. Dari data
tersebut apabila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin CCl4 menunjukkan
perbedaan yang bermakna (p<0,05) yang berarti ekstrak metanol-air daun M.
tanarius memiliki efek hepatoprotektif. Pada perlakuan jangka pendek jam ke-4
bila dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil, menunjukkan adanya
perbedaan yang tidak bermakna (tabel VII) yang berarti bahwa, ekstrak metanol-
air daun M. tanarius yang diberikan memiliki efek hepatoprotektif sehingga dapat
memperbaiki kerusakan yang terjadi di hepar yang disebabkan oleh CCl4, dan
fungsi hati sudah kembali seperti normal.
Pada perlakuan jam ke-6 pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius
didapatkan hasil pengukuran aktivitas serum ALT sebesar 74,2 ± 5,9 U/L dan
aktivitas AST sebesar 177,8 ± 19,8 U/L dengan daya hepatoprotektif sebesar
69,88%. Dari hasil tersebut apabila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin
menghasilkan perbedaan yang bermakna yang berarti ekstrak metanol-air daun M.
tanarius memiliki efek hepatoprotektif. Bila dibandingkan dengan kontrol negatif
olive oil terdapat perbedaan yang tidak bermakna, yang menandakan bahwa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotektif sehingga
dapat memperbaiki kerusakan hepar yang diakibatkan oleh induksi CCl4 sehingga
fungsi hati dapat kembali normal.
Data penelitian ini, secara keseluruhan diketahui bahwa, ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dapat digunakan sebagai hepatoprotektor, dengan senyawa
penginduksi karbon tetraklorida yang menyebabkan steatosis. Kerusakan hati
lainnya yang disebabkan oleh senyawa kimia seperti galaktosamin. Penginduksian
galaktosamin menyebabkan terjadinya kerusakan hati disebabkan oleh virus yang
menyerupai virus hepatitis (Yamamoto, Mori, Murakami, Yoshino, 1995). Oleh
karena itu, diperlukan pengujian lebih lanjut, daun M. tanarius dapat digunakan
untuk hepatoprotektor dengan menggunakan senyawa penginduksi galaktosamin.
Pada perlakuan jangka pendek yang dilakukan pada jam ke-½, 1, 2, 4 dan 6
didapatkan hasil aktivitas serum ALT secara berurutan yaitu 95,8 ± 4,2; 140,6 ±
6,3; 147,4 ± 11,3; 113,4 ± 7,5; 74,2 ± 5,9 U/L. Untuk aktivitas ALT secara
berurutan yaitu 271,0 ± 35,9; 431,0 ± 24,5; 429,6 ± 17,8; 408,6 ± 7,3 dan 177,8 ±
19,8 U/L. Dari data tersebut, diketahui bahwa efek hepatoprotektif tertinggi yang
mencapai 60%, pada perlakuan jam ke-6, kemudian perlakuan jam ke-½ (dapat
dilihat pada tabel V).
Perlakuan jangka pendek, dapat diketahui waktu perlakuan yang paling
efektif yang memiliki efek hepatoprotektif. Hasil data statistik yang diperoleh,
terdapat perbedaan yang tidak bermakna pada perlakuan jangka pendek jam ke-½,
4 dan 6 bila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin CCl4 dan kontrol negatiif
olive oil. Dari data tersebut menandakan bahwa, ekstrak metanol-air daun M.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
tanarius memiliki efek sebagai hepatoprotektif dan dapat memperbaiki kerusakan
yang terjadi akibat induksi CCl4, sehingga hepar dapat kembali ke kondisi
normal.
Pada perbandingan data statistik antara jam ke-½ dan jam ke-4
menunjukkan aktivitas serum ALT yang berbeda tidak bermakna, sedangkan
dari aktivitas serum AST didapatkan perbedaan yang bermakna. Maka, dapat
dikatakan bahwa perlakuan pada jam ke-½ memiliki efek hepatoprotektif yang
sama. Apabila perlakuan jam ke-½ dibandingkan dengan jam ke-6 terdapat
perbedaan yang tidak bermakna pada aktivitas serum ALT dan AST. Hal ini
menunjukkan bahwa, pada jam ke-½ dan ke-6 memiliki efek hepatoprotektif yang
sama. Maka, dari perbandingan antar jam, dapat disimpulkan bahwa pemberian
ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada jam ke-½, 4 dan 6, memiliki efek
hepatoprotektif yang sama. Oleh karena itu, waktu efektif pemberian ekstrak
metanol-air daun M. tanarius yang dapat diberikan untuk melindungi hepar
adalah pada jam ke-½. Hal ini disebabkan karena waktunya yang cukup singkat,
sehingga dapat dengan cepat melindungi hepar tikus dari toksin CCl4. Dalam
pengembangan penelitian, ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang memiliki
efek hepatoprotektif dapat diformulasikan menjadi bentuk sediaan lain, sehingga
dapat diaplikasikan pada manusia.
D. Rangkuman Pembahasan
Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini adalah perlakuan jangka pendek
ekstrak metanol air daun M. tanarius 3840 mg/kg BB mampu menghasilkan efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
hepatoprotektif pada waktu ½, 1, 2, 4, dan 6 jam secara berturut-turut persen efek
hepatoprotektif untuk serum ALT adalah 61,12; 42,93; 40,17; 53,97; 69,88%.
Sedangkan pada aktivitas serum AST memiliki efek hepatoprotektif pada ½, 1, 2,
4, dan 6 jam secara berturut-turut sebesar 54,54; 27,70; 27,94; 31,46; 70,17%.
Hasil ini sesuai dengan hipotesis bahwa ektrak metanol air daun M. tanarius
memiliki efek hepatoprotektif jangka pendek pada tikus jantan terinduksi karbon
tetraklorida.
Pada kelompok kontrol perlakuan M. tanarius menunjukkan hasil yang
berbeda tidak bermakna dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil. Hal ini
menujukkan bahwa ekstrak metanol air daun M. tanarius tidak memiliki pengaruh
terhadap kenaikan aktivitas serum ALT dan AST yang menandakan bahwa tidak
berpengaruh terhadap sel-sel hati tikus jantan, sehingga kenaikkan serum ALT
dan AST pada penilitian ini diakibatkan oleh induksi hepatoksin karbon
tetraklorida pada tikus jantan. Jangka waktu pemberian ekstrak metanol air daun
M. tanarius yang paling baik sebagai hepatoprotektor adalah pada perlakuan jam
ke-½ dan jam ke-6. Setelah diuji statistik, kedua data dari rentang waktu tersebut
tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna dalam menurunkan aktivitas serum
ALT dan AST.
Oleh karena itu pada penelitian ini dipilih pada waktu perlakuan ekstrak
metanol air daun M. tanarius jam ke-½ sebagai waktu paling efektif. Hal ini
menandakan waktu yang dibutuhkan lebih singkat, yaitu hanya ½ jam dalam
memberikan efek hepatoprotektif pada tikus.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang diperoleh dari hasil penelitian berdasarkan dan
analisis statistik yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan:
1. Pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada dosis 3840 mg/kgBB
terbukti mampu menghasilkan efek hepatoprotektif jangka pendek pada
tikus yang terinduksi karbon tetraklorida dengan dosis 2 ml/kgBB dengan
waktu jam ke-½, 1, 2, 4, dan 6 jam secara berturut-turut untuk ALT serum
adalah 61,12; 42,93; 40,17; 53,97; 69,88% dan AST serum pada jam ke-½,
1, 2, 4 dan 6 jam secara berturut-turut sebesar 54,54; 27,70; 27,94; 31,46;
70,17%.
2. Perlakuan jam ke-½ ekstrak metanol-air daun M. tanarius 3840 mg/kg BB
merupakan waktu pemberian perlakuan yang paling efektif untuk
menghasilkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan teriduksi karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang:
1. Uji hepatoprotektif dengan ekstrak metanol-air daun M. tanarius untuk
induksi hepatotoksin lain seperti galaktosamin.
2. Perlu dilakukan formulasi menjadi bentuk sediaan obat dengan bahan baku
ekstrak metanol-air daun M. tanarius.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Daftar Pustaka
Adrianto, 2010, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol:Air Daun Macaranga
tanarius L. Pada Tikus Jantan Terinduksi Parasetamol, Skripsi,
Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Al-Ash’ary, M.N., Supriyanti, T.F.M., Zackiyah., 2010, Penentuan Pelarut terbaik
dalam mengekstraksi senyawa bioaktif dari kulit batang Artocarpus
heterophyllus, Universitas Pendidikan Indonesia.
Andini, A.P., 2010, Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga
tanarius L. Pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta.
Asian Plant, 2012, Macaranga tanarius, http://www.asianplant.net/
Euphorbiaceae/Macaranga_tanarius .htm, diakses tanggal 25 April 2012.
Baradero M., Dayrit W.M., Siswadi Y., 2005, Klien Gangguan Hati, Penerbit
Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 1, 3.
Bruckner, J.V., dan Warren, O.A., 2001, Toxic Effect of Solvent and Vapors, Mc
Graw Hill, New York, pp. 887.
Bulan, M.S.H., Pramono, A., Kadar SGOT dan SGPT Setelah Mengkonsumsi
Rebusan Daun Putri Malu (Mimosa pudica, Linn) pada Tikus (Rattus
norvegicus) Terinduksi Karbon Tetraklorida (CCl4), Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Yogyakarta
Byers, J.A., 2003, Solvent Polarity and Miscibility, http://www.chemical-
ecology.net/java/solvents.htm, diakses tanggal 15 September 2012.
Cadman B. E., 2000, Adverse Effects of Drugs on The Liver, in Halber, R., and
Edwards, C., (Eds), Clinical Pharmacy and Therapeutics, 2 ed.,
Churchill Livingstone, Edinburgh, pp. 183.
Chandrasoma, P., dan Taylor, C.R., 1995, Concise Pathology, Edisi 2, FRC Path
Prentice-Hall International Inc.,USA, pp. 620-633.
Departemen Kesehatan RI, 1995, Farmakope Indonesia, jilid IV, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 7, 410.
Departement of Health and Human Services, 2005, Public Health Statement:
Carbon Tetracloride, http://www.atsdr.cdc.gov/phs/phs.
asp?id=194&tid=35, diakses tanggal 15 September 2012.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Departement of Health and Human Services, 2011, National Toxicology
Program, Public Health Statement: Carbon Tetracloride, Edisi 12,
http://ntp.niehs.nih.gov/go/roc12, diakses tanggal 15 September 2012.
DiPiro, J. T., Robert L. T., Gary C. Y., Gary R. M., Barbara G. W., dan, L. th
Michael P., 2008, Pharmacotherapy : Apathiphysiologic Approach, Edisi
7, Mc Graw Hill, New York, pp. 651-656.
Donatus, I.A., 1992, Fitofarmaka Penyakit Hati, Kumpulan Naskah Lengkap
Simposium National Hepatitis, Jakarta, pp. 23.
Edem, D.O., dan Akpanabiatu, M.I., 2006, Effects of palm oil-containing diets on
enzymeactivities ofrats, Pakistan Jnutr, pp. 301-305.
Environmental Protection Agency, 1994, Methanol Basic, www.epa.gov/oms/
consumer/07-meoh.pdf, 15 September 2012.
Forrest, E., 2006, Hepatic Disorders, Edisi 2, Pharmaceutical Press, London, pp.
193, 201 – 202.
Frezza, E.E., Gerunda, G.E., Farinati, F., DeMaria, N., Galligioni, A., Plebani, F.,
Giacomin, A & Van Thiel, D.H., 1994, CCl4-induced liver cirrhosis and
hepatocellular carcinoma in rats: relation to plasma zinc, copper and
estradiol levels, Hepato-Gastroenterology, pp. 41.
Ganong, W. F., 2001, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 14, Penerbit EGC,
Jakarta, pp. 472-477.
Greguz, E., dan Klaaseen, C.D., 2001, Mechanism of Toxicity, in Klaaseen, C.D.,
Cassarett dan Doull’s Toxicology: The Basic Science Poisons, Edisi 6,
Mc Graw Hill, New York, pp.57-64.
Guyton, A.C., dan Hall, J.E., 1997, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 9,
Penerbit EGC, Jakarta, pp. 1103-1104.
Guyton, A.C., dan Hall, J.E., 2007, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 11,
Penerbit EGC, Jakarta, pp. 902-904.
Heinrich, M., Barnes, J., 2009, Farmakognosi dan Fitoterapi, Penerbit EGC,
Jakarta, pp. 118.
Hippeli, S., Elstner, E.F., 1999, Mechanism of Carbon Tetrachloride-Induced
Hepatotoxicity, hepatocellular Damage by Reactive Carbon
Tetrachloride Metabolites, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles
/PMC2933147/, diakses tanggal 15 September 2012
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
Janakat, S., Al-Merie, H., 2003, Optimization of the dose and route of injection,
and characterisation of the time course of carbon tetrachloride-induced
hepatotoxicity in the rat, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
pubmed/12750040, diakses tanggal 15 September 2012.
Kazantzis G., Bomford R.R., Oxon D.M., 1960, Dyspepsia due to Inhalation of
Carbon Tetrachloride Vapour, Lancet, pp. 360-362.
Keenan, Kleinfelter, Wood, 1992, Kimia Untuk Universitas, Jilid 2, Penerbit
Erlangga, Jakarta, pp. 382.
Kumar, V., Abbas, A.K., Fausto, N., Mitchell, R.N., 2007, Robbins&Cortan Basic
Pathology, Edisi 7, Philadelphia, USA, pp. 649.
Kurniawati, A.Y., 2010, Efek Antiinflamasi Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. Pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi,
Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Laurence, D.R., Bennett, P.N., Brown, M.J., 1997, Clinical Pharmacology, Edisi
8, Churchill Livingstone, New York, America, pp. 589.
Lin, J.H., Nonaka, G., Nishioka, I., 1990, Tannins and Related Compounds.
XCIV.1)
Isolation and Characterization of Seven New Hydrolyzable
Tannins from the Leaves of Macaranga tanarius (L.) MUEL(L.), et
ARG., Chem.Pharm.Bul(L.) 38 (5) 1218-1223
Lu, F.C., 1995, Toksikologi dasar, Asas, Organ Sasaran dan Penilaian Resiko,
Edisi kedua, UI press, Jakarta, Indonesia, 209-215.
Mahendra, A. A., 2010, Efek Hepatoprotektif Infusa Daun Macaranga tanarius L.
pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Parasetamol, Skripsi,
Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Matsunami, K., Ichiko T., Takakazu S., Mitsunori A., Kazunari K., Hideaki O,
dkk., 2006, Radical-Scavenging Activities of New Megastigmane
Glucosides from Macaranga tanarius (L.) MÜLL.-ARG., Chem. Pharm.
Bull., 54 (10), 1403-1407.
Matsunami, K., Otsuka, H., Kondo, K., Shinzato, T., Kawahata, M., Yamaguchi,
K., dkk., 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[600-O-
galloyl]-b-D-glucopyranoside, macarangiosides E, and F isolated from
the leaves of Macaranga tanarius, Phytochemistry, 70 (2009), 1277–
1285.
McPhee, S.J., Ganong, W., 2010, Patofisiologi Penyakit, Edisi 5., Penerbit EGC,
Jakarta, pp. 431.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Nugraha, A.W., 2010, Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Infusa Daun M.
tanarius (L.) pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Parasetamol,
Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Oehha, 2000, Chronic Toxicity Summary Carbon Tetrachloride,
http://www.oehha.ca.gov/air/chronic_rels/pdf/56235.pdf, diakses tanggan
12 September 2012.
Oktavia, T., 2012, Efek Hipoglikemik Kombinasi Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga Tanarius L. Dengan Metformin Pada Tikus Putih Jantan
Galur Wistar Terbebani Glukosa, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma, Yogyakarta.
Plantamor, 2008, Informasi Spesies-Mara Macaranga tanarius L., http://
www.plantamor.com/index.php?plant=804, diakses tanggal 25 April
2012.
Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chimnoi, N., Ruchirawat, R., Sutthivaiyakit, S.,
2005, Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod,
68, 927-930.
Pustakalaya, 2005, Carbon Tetrachloride, http://www.pustakalaya.org/
wiki/images/194/19438.png.htm, diakses tanggal 15 September 2012.
Poppy, K., Komala, S., Santoso, A. H., Sulaiman, J. R., Rienita, Y., Nuswantari,
D., 1998, Kamus Saku Kedokteran Dorland, Edisi 25, EGC, Jakarta,
pp.503
Price, S.A., dan Wilson, L.M., 2005, PATOFISIOLOGI : Konsep Klinis Proses-
Proses Penyakit, Edisi 6, Vol 1, Penerbit EGC, Jakarta, pp.473-476.
Puteri, M.G., dan Kawabata, J. 2010, Novel a-glucosidase inhibitors from
Macaranga tanarius leaves, food chemistry, 123 (2010), 384-389.
Robbins dan Cortan, 2010, Dasar-Dasar Patologis Penyakit, Edisi 7, Penerbit
Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 903.
Rosnalini, 1995, Optimasi Dosis Hepatoprotektif Kurkuminoid Pada Tikus,
Laporan Penelitian, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada,
Yogyakarta.
Sudjadi, 2007, Kimia Farmasi Analisis, UGM Press, Yogjakarta, pp. 46.
Sudjadi, 1986, Metode Pemisahan, UGM Press, Yogyakarta, pp. 53.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Timbrell, A.J., 2008, Principles of Biochemical Toxicology, Edisi 4, Informa
Healthcare, USA, Inc, USA, pp.195, 308, 309.
Windrawati, T.G., 2013, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol:Air (50:50) Daun
Macaranga tanarius L. Terhadap Kadar ALT-AST Serum Pada Tikus
Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta
World Health Organisation (WHO), 2004, Carbon Tetrachloride in Drinking-
water, http:// www.who.int/water.../carbontetrachloride.pdf, diakses
tanggal 23 Maret 2012
World Health Organisation (WHO), 2008a, Hepatitis B, http://www.who.int/
mediacentre/fact-sheets/fs204/en/, diakses tanggal 12 September 2012.
World Health Organisation (WHO), 2008b, Hepatitis A, http://www.who.int/
mediacentre/fact-sheets/fs328/en/, diakses tanggal 12 September 2012.
World Health Organisation (WHO), 2009, Cancer, http://www.who.int/
mediacentre /fact-sheets/fs297/en/, diakses tanggal 15 September 2012.
World Health Organisation (WHO), 2012, Cancer, http://www.who.int
/cancer/events/world_cancer_day2012/en/, diakses tanggal 15 September
2012.
Yamamoto, C., Mori, S., Murakami, K., Yoshino M., 1995, Effect of
galactosamine-induced hepatitis on the aerobic and anaerobic
metabolism of the rat exposed to high-altitude hypoxia,
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/074284139400068L,
diakses tanggal 24 September 2012.
Zimmerman, H. J., 1978, Hepatotoxicity, Appleton Century Crofts, NewYork, pp.
179.
Zimmerman, H. J., 1999, Hepatotoxicity, Appleton Century Crofts, New York,
pp. 210
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
LAMPIRAN
Lampiran 1. Daun M. tanarius
Lampiran 2. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi tanaman M. Tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 4. Surat Etikal Clearance
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 5. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova
One-Way data ALT pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darah
setelah pemberian Karbon tetraklorida dengan dosis 3840 mg/kg BB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 45 1.1769E2 55.78279 57.00 311.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ALT
N 45
Normal Parametersa Mean 1.1769E2
Std. Deviation 5.57828E
1
Most Extreme
Differences
Absolute .182
Positive .182
Negative -.138
Kolmogorov-Smirnov Z 1.218
Asymp. Sig. (2-tailed) .103
a. Test distribution is normal
Oneway
Descriptives
ALT
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol CCl4 5 2.4640E2 38.02368 17.00471 199.1874 293.6126 219.00 311.00
Kontrol Olive oil 5 82.2000 6.09918 2.72764 74.6269 89.7731 77.00 92.00
Kontrol Metanol 5 65.6000 11.41490 5.10490 51.4265 79.7735 57.00 85.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Dosis 3840 mg/kg 5 93.6000 8.44393 3.77624 83.1155 104.0845 82.00 103.00
Jam ½ 5 95.8000 9.41807 4.21189 84.1059 107.4941 85.00 108.00
Jam 1 5 1.4060E2 14.22322 6.36082 122.9395 158.2605 124.00 161.00
Jam 2 5 1.4740E2 25.36336 11.34284 115.9072 178.8928 115.00 180.00
Jam 4 5 1.1340E2 16.89083 7.55381 92.4273 134.3727 93.00 135.00
Jam 6 5 74.2000 13.40522 5.99500 57.5552 90.8448 62.00 95.00
Total 45 1.1769E2 55.78279 8.31561 100.9299 134.4479 57.00 311.00
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.350 8 36 .038
ANOVA
ALT
Sum of
Squares Df Mean Square F Sig.
Between
Groups 124580.044 8 15572.506 45.447 .000
Within Groups 12335.600 36 342.656
Total 136915.644 44
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I)
Kelompok_
perlakuan
(J)
Kelompok_perla
kuan
Mean
Difference (I-
J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol Kontrol Olive oil 164.20000* 11.70736 .000 114.9899 213.4101
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
CCl4 Kontrol Metanol 180.80000* 11.70736 .000 131.5899 230.0101
Dosis 3840
mg/kg 152.80000* 11.70736 .000 103.5899 202.0101
Jam 1/2 150.60000* 11.70736 .000 101.3899 199.8101
Jam 1 105.80000* 11.70736 .000 56.5899 155.0101
Jam 2 99.00000* 11.70736 .000 49.7899 148.2101
Jam 4 133.00000* 11.70736 .000 83.7899 182.2101
Jam 6 172.20000* 11.70736 .000 122.9899 221.4101
Kontrol
Olive oil
Kontrol CCl4 -164.20000* 11.70736 .000 -213.4101 -114.9899
Kontrol Metanol 16.60000 11.70736 .977 -32.6101 65.8101
Dosis 3840
mg/kg -11.40000 11.70736 .998 -60.6101 37.8101
Jam 1/2 -13.60000 11.70736 .994 -62.8101 35.6101
Jam 1 -58.40000* 11.70736 .009 -107.6101 -9.1899
Jam 2 -65.20000* 11.70736 .002 -114.4101 -15.9899
Jam 4 -31.20000 11.70736 .536 -80.4101 18.0101
Jam 6 8.00000 11.70736 1.000 -41.2101 57.2101
Kontrol
Metanol
Kontrol CCl4 -180.80000* 11.70736 .000 -230.0101 -131.5899
Kontrol Olive oil -16.60000 11.70736 .977 -65.8101 32.6101
Dosis 3840
mg/kg -28.00000 11.70736 .677 -77.2101 21.2101
Jam 1/2 -30.20000 11.70736 .581 -79.4101 19.0101
Jam 1 -75.00000* 11.70736 .000 -124.2101 -25.7899
Jam 2 -81.80000* 11.70736 .000 -131.0101 -32.5899
Jam 4 -47.80000 11.70736 .064 -97.0101 1.4101
Jam 6 -8.60000 11.70736 1.000 -57.8101 40.6101
Dosis 3840
mg/kg
Kontrol CCl4 -152.80000* 11.70736 .000 -202.0101 -103.5899
Kontrol Olive oil 11.40000 11.70736 .998 -37.8101 60.6101
Kontrol Metanol 28.00000 11.70736 .677 -21.2101 77.2101
Jam 1/2 -2.20000 11.70736 1.000 -51.4101 47.0101
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Jam 1 -47.00000 11.70736 .073 -96.2101 2.2101
Jam 2 -53.80000* 11.70736 .022 -103.0101 -4.5899
Jam 4 -19.80000 11.70736 .936 -69.0101 29.4101
Jam 6 19.40000 11.70736 .943 -29.8101 68.6101
Jam 1/2 Kontrol CCl4 -150.60000* 11.70736 .000 -199.8101 -101.3899
Kontrol Olive oil 13.60000 11.70736 .994 -35.6101 62.8101
Kontrol Metanol 30.20000 11.70736 .581 -19.0101 79.4101
Dosis 3840
mg/kg 2.20000 11.70736 1.000 -47.0101 51.4101
Jam 1 -44.80000 11.70736 .103 -94.0101 4.4101
Jam 2 -51.60000* 11.70736 .033 -100.8101 -2.3899
Jam 4 -17.60000 11.70736 .968 -66.8101 31.6101
Jam 6 21.60000 11.70736 .898 -27.6101 70.8101
Jam 1 Kontrol CCl4 -105.80000* 11.70736 .000 -155.0101 -56.5899
Kontrol Olive oil 58.40000* 11.70736 .009 9.1899 107.6101
Kontrol Metanol 75.00000* 11.70736 .000 25.7899 124.2101
Dosis 3840
mg/kg 47.00000 11.70736 .073 -2.2101 96.2101
Jam 1/2 44.80000 11.70736 .103 -4.4101 94.0101
Jam 2 -6.80000 11.70736 1.000 -56.0101 42.4101
Jam 4 27.20000 11.70736 .710 -22.0101 76.4101
Jam 6 66.40000* 11.70736 .002 17.1899 115.6101
Jam 2 Kontrol CCl4 -99.00000* 11.70736 .000 -148.2101 -49.7899
Kontrol Olive oil 65.20000* 11.70736 .002 15.9899 114.4101
Kontrol Metanol 81.80000* 11.70736 .000 32.5899 131.0101
Dosis 3840
mg/kg 53.80000* 11.70736 .022 4.5899 103.0101
Jam 1/2 51.60000* 11.70736 .033 2.3899 100.8101
Jam 1 6.80000 11.70736 1.000 -42.4101 56.0101
Jam 4 34.00000 11.70736 .416 -15.2101 83.2101
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Jam 6 73.20000* 11.70736 .000 23.9899 122.4101
Jam 4 Kontrol CCl4 -133.00000* 11.70736 .000 -182.2101 -83.7899
Kontrol Olive oil 31.20000 11.70736 .536 -18.0101 80.4101
Kontrol Metanol 47.80000 11.70736 .064 -1.4101 97.0101
Dosis 3840
mg/kg 19.80000 11.70736 .936 -29.4101 69.0101
Jam 1/2 17.60000 11.70736 .968 -31.6101 66.8101
Jam 1 -27.20000 11.70736 .710 -76.4101 22.0101
Jam 2 -34.00000 11.70736 .416 -83.2101 15.2101
Jam 6 39.20000 11.70736 .229 -10.0101 88.4101
Jam 6 Kontrol CCl4 -172.20000* 11.70736 .000 -221.4101 -122.9899
Kontrol Olive oil -8.00000 11.70736 1.000 -57.2101 41.2101
Kontrol Metanol 8.60000 11.70736 1.000 -40.6101 57.8101
Dosis 3840
mg/kg -19.40000 11.70736 .943 -68.6101 29.8101
Jam 1/2 -21.60000 11.70736 .898 -70.8101 27.6101
Jam 1 -66.40000* 11.70736 .002 -115.6101 -17.1899
Jam 2 -73.20000* 11.70736 .000 -122.4101 -23.9899
Jam 4 -39.20000 11.70736 .229 -88.4101 10.0101
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
ALT
Scheffe
Kelompok_perla
kuan N
Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4
Kontrol Metanol 5 65.6000
Jam 6 5 74.2000
Kontrol Olive oil 5 82.2000
Dosis 3840
mg/kg 5 93.6000 93.6000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Means for groups in homogeneous subsets are displayed
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
ALT *
Kelompok_perlakuan 45 100.0% 0 .0% 45 100.0%
Resport
ALT
Kelompok_perlakuan Mean Std. Deviation Std. Error of Mean
Kontrol CCl4 2.4640E2 38.02368 17.00471
Kontrol Olive oil 82.2000 6.09918 2.72764
Kontrol Metanol 65.6000 11.41490 5.10490
Dosis 3840 mg/kg 93.6000 8.44393 3.77624
Jam 1/2 95.8000 9.41807 4.21189
Jam 1 1.4060E2 14.22322 6.36082
Jam 2 1.4740E2 25.36336 11.34284
Jam 4 1.1340E2 16.89083 7.55381
Jam ½ 5 95.8000 95.8000
Jam 4 5
1.1340E
2
1.1340E
2
1.1340E
2
Jam 1 5
1.4060E
2
1.4060E
2
Jam 2 5
1.4740E
2
Kontrol CCl4 5
2.4640E
2
Sig. .064 .073 .416 1.000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
Jam 6 74.2000 13.40522 5.99500
Total 1.1769E2 55.78279 8.31561
ANOVA Table
Measures of Association
Eta Eta Squared
ALT *
Kelompok_perlakuan .954 .910
Sum of
Squares df
Mean
Square F Sig.
ALT *
Kelompok_perlakuan
Between
Groups
(Combined) 124580.044 8 15572.506 45.447 .000
Within Groups 12335.600 36 342.656
Total 136915.644 44
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
Lampiran 6. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova
One-Way data AST pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darah
setelah pemberian karbon tetraklorida dengan dosis 3840 mg/kg BB
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean
Std.
Deviation Minimum Maximum
AST 45 3.0144E2 168.32943 101.00 669.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
AST
N 45
Normal Parametersa Mean 3.0144E2
Std. Deviation 1.68329E2
Most Extreme
Differences
Absolute .161
Positive .161
Negative -.122
Kolmogorov-Smirnov Z 1.081
Asymp. Sig. (2-tailed) .193
a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives
AST
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence Interval
for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
Test of Homogenity of Variances
AST
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
4.321 8 36 .001
ANOVA
AST
Sum of
Squares df
Mean
Square F Sig.
Between Groups 1176335.511 8 147041.939 75.197 .000
Within Groups 70395.600 36 1955.433
Total 1246731.111 44
Kontrol CCl4 5 5.9620E2 56.67186
25.3444
3 525.8326 666.5674 522.00 669.00
Kontrol olive oil 5 1.1860E2 11.50217 5.14393 104.3182 132.8818 106.00 133.00
kontrol metanol 5 1.0860E2 7.12741 3.18748 99.7501 117.4499 101.00 119.00
Dosis 3840
mg/kg 5 1.7160E2 30.42696
13.6073
5 133.8199 209.3801 123.00 205.00
Jam 1/2 5 2.7100E2 80.29633
35.9096
1 171.2989 370.7011 188.00 379.00
Jam 1 5 4.3100E2 54.79507
24.5051
0 362.9629 499.0371 347.00 493.00
Jam 2 5 4.2960E2 39.83466
17.8146
0 380.1387 479.0613 385.00 482.00
Jam 4 5 4.0860E2 16.37987 7.32530 388.2617 428.9383 381.00 422.00
Jam 6 5 1.7780E2 44.42072
19.8655
5 122.6444 232.9556 121.00 241.00
Total 45 3.0144E2
168.3294
3
25.0930
7 250.8727 352.0162 101.00 669.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
POST HOC Test
AST
Scheffe
(I)
Kelompok_perla
kuan
(J)
Kelompok_perla
kuan
Mean
Difference (I-
J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol CCl4 Kontrol olive oil 477.60000* 27.96736 .000 360.0434 595.1566
kontrol metanol 487.60000* 27.96736 .000 370.0434 605.1566
Dosis 3840
mg/kg 424.60000* 27.96736 .000 307.0434 542.1566
Jam 1/2 325.20000* 27.96736 .000 207.6434 442.7566
Jam 1 165.20000* 27.96736 .001 47.6434 282.7566
Jam 2 166.60000* 27.96736 .001 49.0434 284.1566
Jam 4 187.60000* 27.96736 .000 70.0434 305.1566
Jam 6 418.40000* 27.96736 .000 300.8434 535.9566
Kontrol olive oil Kontrol CCl4 -477.60000* 27.96736 .000 -595.1566 -360.0434
kontrol metanol 10.00000 27.96736 1.000 -107.5566 127.5566
Dosis 3840
mg/kg -53.00000 27.96736 .883 -170.5566 64.5566
Jam 1/2 -152.40000* 27.96736 .003 -269.9566 -34.8434
Jam 1 -312.40000* 27.96736 .000 -429.9566 -194.8434
Jam 2 -311.00000* 27.96736 .000 -428.5566 -193.4434
Jam 4 -290.00000* 27.96736 .000 -407.5566 -172.4434
Jam 6 -59.20000 27.96736 .803 -176.7566 58.3566
kontrol metanol Kontrol CCl4 -487.60000* 27.96736 .000 -605.1566 -370.0434
Kontrol olive oil -10.00000 27.96736 1.000 -127.5566 107.5566
Dosis 3840
mg/kg -63.00000 27.96736 .744 -180.5566 54.5566
Jam 1/2 -162.40000* 27.96736 .001 -279.9566 -44.8434
Jam 1 -322.40000* 27.96736 .000 -439.9566 -204.8434
Jam 2 -321.00000* 27.96736 .000 -438.5566 -203.4434
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
Jam 4 -300.00000* 27.96736 .000 -417.5566 -182.4434
Jam 6 -69.20000 27.96736 .635 -186.7566 48.3566
Dosis 3840
mg/kg
Kontrol CCl4 -424.60000* 27.96736 .000 -542.1566 -307.0434
Kontrol olive oil 53.00000 27.96736 .883 -64.5566 170.5566
kontrol metanol 63.00000 27.96736 .744 -54.5566 180.5566
Jam 1/2 -99.40000 27.96736 .166 -216.9566 18.1566
Jam 1 -259.40000* 27.96736 .000 -376.9566 -141.8434
Jam 2 -258.00000* 27.96736 .000 -375.5566 -140.4434
Jam 4 -237.00000* 27.96736 .000 -354.5566 -119.4434
Jam 6 -6.20000 27.96736 1.000 -123.7566 111.3566
Jam 1/2 Kontrol CCl4 -325.20000* 27.96736 .000 -442.7566 -207.6434
Kontrol olive oil 152.40000* 27.96736 .003 34.8434 269.9566
kontrol metanol 162.40000* 27.96736 .001 44.8434 279.9566
Dosis 3840
mg/kg 99.40000 27.96736 .166 -18.1566 216.9566
Jam 1 -160.00000* 27.96736 .002 -277.5566 -42.4434
Jam 2 -158.60000* 27.96736 .002 -276.1566 -41.0434
Jam 4 -137.60000* 27.96736 .010 -255.1566 -20.0434
Jam 6 93.20000 27.96736 .235 -24.3566 210.7566
Jam 1 Kontrol CCl4 -165.20000* 27.96736 .001 -282.7566 -47.6434
Kontrol olive oil 312.40000* 27.96736 .000 194.8434 429.9566
kontrol metanol 322.40000* 27.96736 .000 204.8434 439.9566
Dosis 3840
mg/kg 259.40000* 27.96736 .000 141.8434 376.9566
Jam 1/2 160.00000* 27.96736 .002 42.4434 277.5566
Jam 2 1.40000 27.96736 1.000 -116.1566 118.9566
Jam 4 22.40000 27.96736 1.000 -95.1566 139.9566
Jam 6 253.20000* 27.96736 .000 135.6434 370.7566
Jam 2 Kontrol CCl4 -166.60000* 27.96736 .001 -284.1566 -49.0434
Kontrol olive oil 311.00000* 27.96736 .000 193.4434 428.5566
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
kontrol metanol 321.00000* 27.96736 .000 203.4434 438.5566
Dosis 3840
mg/kg 258.00000* 27.96736 .000 140.4434 375.5566
Jam 1/2 158.60000* 27.96736 .002 41.0434 276.1566
Jam 1 -1.40000 27.96736 1.000 -118.9566 116.1566
Jam 4 21.00000 27.96736 1.000 -96.5566 138.5566
Jam 6 251.80000* 27.96736 .000 134.2434 369.3566
Jam 4 Kontrol CCl4 -187.60000* 27.96736 .000 -305.1566 -70.0434
Kontrol olive oil 290.00000* 27.96736 .000 172.4434 407.5566
kontrol metanol 300.00000* 27.96736 .000 182.4434 417.5566
Dosis 3840
mg/kg 237.00000* 27.96736 .000 119.4434 354.5566
Jam 1/2 137.60000* 27.96736 .010 20.0434 255.1566
Jam 1 -22.40000 27.96736 1.000 -139.9566 95.1566
Jam 2 -21.00000 27.96736 1.000 -138.5566 96.5566
Jam 6 230.80000* 27.96736 .000 113.2434 348.3566
Jam 6 Kontrol CCl4 -418.40000* 27.96736 .000 -535.9566 -300.8434
Kontrol olive oil 59.20000 27.96736 .803 -58.3566 176.7566
kontrol metanol 69.20000 27.96736 .635 -48.3566 186.7566
Dosis 3840
mg/kg 6.20000 27.96736 1.000 -111.3566 123.7566
Jam 1/2 -93.20000 27.96736 .235 -210.7566 24.3566
Jam 1 -253.20000* 27.96736 .000 -370.7566 -135.6434
Jam 2 -251.80000* 27.96736 .000 -369.3566 -134.2434
Jam 4 -230.80000* 27.96736 .000 -348.3566 -113.2434
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
AST
Scheffe
Kelompok_perlakuan N Subset for alpha = 0.05
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
1 2 3 4
kontrol metanol 5 1.0860E2
Kontrol olive oil 5 1.1860E2
Dosis 3840 mg/kg 5 1.7160E2 1.7160E2
Jam 6 5 1.7780E2 1.7780E2
Jam 1/2 5 2.7100E2
Jam 4 5 4.0860E2
Jam 2 5 4.2960E2
Jam 1 5 4.3100E2
Kontrol CCl4 5 5.9620E2
Sig. .635 .166 1.000 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Means
Case Processing Summary
Cases
Included Excluded Total
N Percent N Percent N Percent
AST *
Kelompok_perlakuan 45 100.0% 0 .0% 45 100.0%
ANOVA Table
Sum of
Squares df
Mean
Square F Sig.
AST *
Kelompok_perlakua
n
Between
Groups
(Combined) 1176335.511 8 147041.939 75.197 .000
Within Groups 70395.600 36 1955.433
Total 1246731.111 44
Measures of Association
Eta Eta Squared
AST * Kelompok_perlakuan .971 .944
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
Lampiran 7. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Keterangan
(gram)
Cawan
1
Cawan
2
Cawan
3
Cawan
4
Cawan
5
Cawan
6
Cawan
kosong 60,42 58,85 59,10 53,08 58,86 59,11
Cawan +
ekstrak 64,16 62,69 62,90 56,84 62,56 62,90
Rendemen 3,74 3,84 3,80 3,76 3,70 3,79
𝑅𝑎𝑡𝑎 − 𝑟𝑎𝑡𝑎 𝑟𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 =𝑟𝑒𝑝. 1 + 𝑟𝑒𝑝. 2 + 𝑟𝑒𝑝. 3 + 𝑟𝑒𝑝. 4 + 𝑟𝑒𝑝. 5 + 𝑟𝑒𝑝. 6
6
=3,74 + 3,84 + 3,80 + 3,76 + 3,70 + 3,79
6
= 3,77 g
Sebanyak 1 kg serbuk kering daun M. tanarius menghasilkan 63 cawan ekstrak
kental dengan rata-rata rendemen 3,77 gram ekstrak kental.
Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Cawan
Berat
cawan
kosong
(gram)
Jam ke 0
10.00
5
15.00
10
20.00
21
07.00
22
08.00
23
09.00
24
10.00
1 60,42 Berat
ekstrak
(gram)
129,17 110,30 99,57 64,54 64,26 64,16 64,16
2 53,08 129,04 111,06 99,88 57,34 56,96 56,84 56,84
3 59,11 136,38 118,87 101,31 63,50 63,12 62,90 62,90
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
Lampiran 8. Perhitungan kadar air – gravimetri
Bobot Sebelum Sesudah Kadar air
Replikasi 1 5,008 4,628 7,59 %
Replikasi 2 5,002 4,615 7,74 %
Replikasi 3 5,001 4,629 7,44 %
Rata-rata 7,59 %
Perhitungan Kadar Air
Replikasi 1
Kadar air = 𝐴−𝐵
𝐴 x 100%
= 5,008−4,628
5,008 x 100%
= 7,59%
Replikasi 2
Kadar air = 𝐴−𝐵
𝐴 x 100%
= 5,002−4,615
5,002 x 100%
= 7,74%
Replikasi 3
Kadar air = 𝐴−𝐵
𝐴 x 100%
= 5,001−4,629
5,001 x 100%
= 7,44%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
BIOGRAFI
Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif
Jangka Pendek Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. Terhadap Tikus Terinduksi
Karbon Tetraklorida” memiliki nama lengkap Maria
Rosalia Biri Koni Tiala, merupakan anak ketiga
pasangan Damianus Tiala dan Ritta Magrita Deske
Oleng. Penulis dilahirkan di Yogyakarta pada
tanggal 20 Maret 1990. Pendidikan formal yang telah
ditempuh, yaitu TK Negeri 1 Sleman, Yogyakarta
(1995-1996), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD
Negeri Percobaan 2 Depok, Sleman, Yogyakarta (1996-2002). Pendidikan
Sekolah Menengah Pertama ditempuh oleh penulis di SLTP Pangudi Luhur 1,
Timoho Yogyakarta (2002-2005), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat
menengah atas di SMA Negeri 9 Yogyakarta (2005-2008). Penulis kemudian
melanjutkan belajar bahasa Inggris di Universitas Gadjah Mada (2008), setelah itu
melanjutkan pendidikan sarjana di Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada
tahun 2009. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan
baik dalam fakultas maupun di luar fakultas. Penulis menjadi anggota Badan
Eksekutif Mahasiswa pada tahun 2011-2012. Penulis juga pernah menjadi Asisten
Praktikum Farmakognosi Fitokimia I (2010), Asisten Praktikum Farmakologi
(2011), Asisten Praktikum farmakognosi Fitokimia I (2012) dan Asisten
Praktikum Farmakologi- Toksikologi (2012).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI