pertumbuhan dan perkembangbiakan bakteri

8/17/2019 Pertumbuhan Dan Perkembangbiakan Bakteri

1/24

Pertumbuhan dan perkembangbiakan bakteri

Pertumbuhan bakteri

Peningkatan jumlah semua komponen dari suatu organisme secara teratur, penambahan

jumlah sel bakteri yang sedang tumbuh akan meningkat dalam jumlah besar dengan

waktu yang singkat dan akibat pertumbuhan tersebut akan terbentuk koloni, serta

pertumbuhan bakteri dapat diukur atau dihitung.

Pertumbuhan bakteri memerlukan unsur kimiawi serta kondisi fisik tertentu :

1. Kondisi fisik yang diperlukan

Suhu (temperatur

pertumbuhan bakteri perlu suhu tertentu tiap bakteri mempunyai temperature

optimum yaitu di mana bakteri tersebut tumbuh sebaik ! baiknya dan batas

temperatur di mana pertumbuhan dapat terjadi, pembelahan sel dapat rusak dengan

pengaruh temperatur tinggi.

"erdasarkan batas suhu pertumbuhan bakteri dibagi atas golongan :

a. psikhrofilik : # $ sampai % &') dengan optimum 1' ! *')

b. mesofilik : 1' ! +$) dengan optimum *' ! +') , misalnya golongan

bakteri pathogen yang menyebabkan penyakit infeksi pada manusia.

c. termofilik : *$ ! ') dengan optimum $' ! -')

Suhu terendah di mana bakteri dapat tumbuh disebut minimum growh temperature.

Suhu tertinggi di mana bakteri dapat tumbuh dengan baik disebut maximum growh

temperature. Suhu di mana bakteri dapat tumbuh dengan sempurna di antara kedua

suhu tersebut disebut suhu optimum.

p (konsentrasi ion hidrogen

Pertumbuhan bakteri memerlukan p tertentu, pada umumnya bakteri memiliki

dengan p netral -,$ ! /,$. kebanyakan bakteri pathogen mempunyai p optimum

/,* ! /,-. "eberapa bakteri ada yang tumbuh pada p +, tetapi ada juga yang

tumbuh pada p alkalis. Perbenihan pada permulaan baik bagi bakteri tetapi

pertumbuhan selanjutnya akan terbatas karena proses biokimia (proses metabolisme

dll, memerlukan peranan en0im, maka masing ! masing bakteri memiliki p


2/24

optimal untuk pertumbuhan, ada dijumpai pada bakteri yang bersifat fermentatif

menghasilkan sejumlah besar asam organik yang bersifat menghambat.

ekanan osmose dan kekuatan ion

2aktor ! faktor seperti tekanan osmotik, konsentrasi garam dan substansi yang

dipelukan :

a. air : merupakan bahan yang penting bagi pertumbuhan bakteri ('3 # 4'3, air

dalam konsentrasi cukup (tinggi disekitarnya karena diperlukan sebagai

mempertahankan pertumbuhan dan perkembangbiakan, misalnya bakteri berada

dalam larutan yang konsentrasinya lebih tinggi daripada konsentrasi yang ada

dalam sil bakteri, maka akan terjadi keluarnya cairan bakteri melalui membrane

sitoplasma yang disebut plasmolisis.

b. 5aram anorganik : diperlukan untuk mempertahankan keadaan koloidal dan

tekanan osmotik didalam sel, untuk memelihara keseimbangan asam ! basa,

berfungsi sebagai bagian ensim atau akti6ator reaksi ensim.

c. 7ineral : sel ! sel hidup memerlukan sejumlah mineral untuk pertumbuhan

# "elerang (sulfur : merupakan komponen substansi sel, sebagian besar

sulfur sebagai *S, tetapi kebanyakan mengambil dari bentuk S8+

(sulfat.

# 2osfor ! fosfat (P8+ : diperlukan sebagai komponen asam nukleat dan

berupa koensim.

# 9kti6ator ensim : sejumlah mineral diperlukan sebagai akti6ator ensim

seperti 7g, 2e, K dan )a.

*. Kebutuhan unsur kimiawikarbon ()8* : diperlukan dalam proses sintesa dengan timbulnya asimilasi )8*

di dalam sel.

"erdasarkan sumber karbon yang diperlukan untuk pertumbuhan, ada beberapa

yaitu :

# "akteri autotrof (litotrof : bakteri yang memerlukan air, garam

anorganik dan )8* sebagai sumber ) bagi pertumbuhan, mensintesa

sebagia besar metabolik organik dari )8*. nergi yang diperlukan

diperoleh dari cahaya ; oksidasi bahan ! bahan kimia. "akteri autotrof


3/24

fotosintetik (fotolitotrof memperoleh energi dari cahaya. "akteri

autotrof kemosintetik (kemolitotrof memperoleh energi dari oksidasi

substrat anorganik, seperti 2e, S,


4/24

Senyawa logam (trace element

=iperlukan dalam pertumbuhan diperlukan dalam jumlah sedikit, misalnya 2e,

)u, dan @n. =i alam trace element terdapat pada air atau bahan ! bahan lain.

&. 2aktor pertumbuhan

=iperlukan untuk pertumbuhan bakteri tetapi bahan tersebut tidak dapat disintesis

oleh bakteri itu sendiri dan bahan tersebut harus ditambahkan pada media

perbenihan. 2actor pertumbuhan antara lain adalah purin, pirimidin, asam amino dan

6itamin (sebagai koen0im.

+. Pengambilan bahan makanan (nutrient uptake

Sangat tergantung pada kemampuan bakteri dalam memindahkan bahan makanan

yang berada disekitarnya kedalam sitoplasma. Kemampuannya tidak hanya terjadi

secara pasif tetapi juga secara aktif, kecuali untuk air dan ammonia yang masuk

kedalam sitoplasma secara pasif.

Secara aktif : pengambilan bahan makanan menggunakan sistem pembawa (carrier.

Secara pasif : pengambilan bahan makanan menggunakan fasilitas porin dan

maltose channel.

=inding sel dan membran sitoplasma yang bersifat semipermiabel sehingga dapat

memilih bahan yang masuk ke dalam sel. Pengambilan bahan makanan dari luar sel

dilakukan secara pasif (difusi dan secara aktif.

)ara pasif (difusi : hanya terjadi pada bahan makanan dengan ukuran berat molekul

kecil karena adanya perbedaan tekanan osmosis di dalam dengan di luar sel. )ara

aktif : untuk bahan makanan dengan berat molekulnya besar, diperlukan adanya

peranan eksoensim yang dilepaskan kelingkungan sekitarnya untuk memecah bahanmakanan sehingga bahan tersebut dapat masuk ke dalam sel.


5/24

Perkembangbiakan bakteri ; reproduksi

Pada umumnya bakteri berkembangbiak dengan cara membelah diri satu menjadi

dua, dua menjadi empat dan seterusnya yang disebut binary fission, pembelahan

tersebut terjadi secara trans6ersal yang dimulai terjadinya perlekuan membran

sitoplasma bagian tengah, diikuti penebalan dan pertumbuhan kedalam dinding sel

pada daerah tersebut.

?eproduksi bakteri dengan pembelahan biner

=iagram skematis pembelahan biner yang menunjukkan pertumbuhan logaritma

"ila kuman ditanam dalam pembenihan yang sesuai dan pada waktu ! waktu

tertentu ditinjau jumlah kuman yang hidup, maka dapat dilihat suatu grafik yang

dapat dibagi dalam + fase :

1. 2ase penyesuaian (lag phase

Aaktu penyesuaian umumnya berlangsung selama * jam. "akteri belum

berkembangbiak dalam fase ini, tetapi akti6itas metabolisme sangat tinggi, fase

ini merupakan persiapan untuk fase berikutnya.

*. 2ase pembelahan (logarhytmik phase / exponential phase

"erkembangbiak dengan berlipat *, jumlah kuman meningkat secara

eksponensial, untuk kebanyakan bakteri, fase ini berlangsung 1 ! *+ jam. Pada


6/24

pertengahan fase ini pertumbuhan sangat ideal, pembelahan terjadi secara

teratur, semua bahan dalam sel berada seimbang (balanced growth.

&. 2ase stasioner ( stationary phase

7eningkatnya jumlah bakteri, meningkatnya jumlah hasil metabolisme yang

toksis. "akteri mulai ada yang mati, pembelahan terhambat, suatu saat terjadi

jumlah bakteri yang hidup tetap sama.

+. 2ase penurunan ( period of decline

Bumlah bakteri yang hidup berkurang dan menurun, keadaan lingkungan

menjadi jelek. Pada beberapa jenis bakteri timbul bentuk ! bentuk abnormal

(bentuk in6olusi.

7utasi : perubahan yang ada hubungannya dengan gen. bersifat tetep dan dapat

diturunkan pada keturunannya.

2luktuasi : perubahan yang bersifat sementara dalam morfologi dan fisiologi yang

biasanya disebabkan karena keadaan sekitarnya ( bakteri yang berpigmen untuk

sementara waktu dapat kehilangan kemampuan untuk membentuk pigmen.

Cn6olusi (degenerasi : perubahan yang disertai dengan kemunduran sifat ! sifat bakteri,

terdapat pada bakteri yang sudah terlalu lama disimpan ; dipelihara pada perbenihan

artificial.

9daptasi : bakteri berbeda dalam penyesuaian terhadap keadaan sekitarnya yang baru.

"akteri pathogen dapat kehilangan patogenitasnya apabila ditanam pada perbenihan,


7/24

akan tetapi dapat memperoleh patogenitasnya kembali apabila dibiakkan melalui

binatang, contoh : perubahan koloni S menjadi ?.

Pengukuran pertumbuhan bakteri

7engukur pertumbuhan bakteri biasanya digunakan dua jenis parameter, yaitu :

1. Peningkatan massa sel dan pengukuran massa sel

pengukuran berat kering sel (protoplasma total per unit 6olume biakan

(culture.


8/24

*. )ara tidak langsung (indirect viable count digunakan untuk menghitung sel

hidup, populasi bakteri yang akan dihitung diencerkan terlebih dahulu

dengan bahan nontoksis. =ilakukan penanaman sample pada media plat,

koloni yang tumbuh dihitung dan dianggap satu koloni berasal dari satu sel

induk bakteri. =ihitung koloni dari media plat yang tidak terlalu rapat dan

tidak terlalu sedikit, biasanya dipilih &' ! &'' koloni.

)ara ini lebih disukai dan lebih tepat digunakan untuk masalah yang

berhubungan dengan pembelahan sel, genetik atau infeksi.


9/24

)ara kerja

emositometer dan sel (contoh khamir dihitung dibawah mikroskop

# "ersihkan permukaan alat dengan kertas lensa yang telah dibasahi

dengan setetes air suling sampai tidak ada sisa ! sisa minyak.

# Detakkan kaca tutup pada permukaan alat hemositometer.

# Kocok suspensi (jaga agar tutup tabung tidak terbasahi, ambil suspensi

dalam tabung dengan menggunakan pipet pasteur sebanyak ',1 # ',$ ml.

# aruhlah suspensi tersebut dalam lekukan E pada tepi kaca tutup

hetesitometer sampai ruangan terpenuhi dengan suspensi secara kapiler

(gambar 9. gunakan telunjuk untuk mengatur aliran suspensi yang

masuk untuk mencegah terbanjirnya bagian bawah kaca tutup oleh aliran

yang berlebihan, usahakan agar tidak ada cairan masuk diantara kaca

tutup dan penyangga (gambar ". Sebenarnya harus berukuran tepat ',1

mmF pada kedalaman cairan dibawah kaca tutup.

# aruh hemasitometer diatas mikroskop, amati dengan obyektif yang

kecil, hitung jumlah sel yang terdapat pada ' buah kotak kecil yang

terletak didalam kotak bagian tengah berukuran 1 mmF (gambar ).

# )ara menghitung G seluruhnya ada 4 area, masing ! masing berukuran 1

mm. Kotak yang ditengah (kesemua sisinya dibatasi dengan garis ganda

berukuran 1 mmF dan dibagi menjadi *$ kotak besar. Setiap kotak besar

dibagi menjadi 1- kotak kecil, dengan demikian di dalam kotak tengah

seluruhnya terdapat +'' kotak kecil (*$ H 1-.

# )ontoh penghitungan : $'' sel di dalam ' kotak kecil, maka jumlah sel

yang terdapat dalam setiap ml suspensi, dihitung dengan cara :

a. ' kotak kecil mempunyai luas ',* mmF, jadi didalam setiap mmF

terdapat $'' H $ atau *$'' sel.

b. Kedalaman cairan dibawah hemasitometer adalah ',1 mm, maka

6olume cairan yang tercakup oleh kotak berukuran 1 mmF ialah ',1

mmI. terdapat *$'' sel ; ',1 mmI atau *$''' sel ; mmI.

c. 1 ml J 1 cmI atau 1''' mmI. maka julah sel yang terdapat didalam

suspensi ialah *,$ H 1' sel ; ml.


10/24

"

5ambar 9 : tampak atas hemesitometer memperlihatkan tempat meneruh sampel atau suspensi.

5ambar " : tampak samping hemasitometer berjarak sebesar ',1 mm antara permukaan hitung bagian

atas hemasitometer dan permukaan bawah kata tutup

5ambar ) : pembagian


11/24

itungan )awan Petri

Kuantitatif

ujuan : melakukan pengenceran dan menentukan konsetrasi suspensi bakteri dengan

metode hitungan cawan petri.

"erdasarkan anggapan bahwa setiap sel yang dapat hidup akan berkembang menjadi

satu koloni, jadi jumlah koloni pada permukaa cawan Petri merupakan suatu indeks bagi

jumlah bakteri hidup yang terkandung dalam sample. Pengenceran sample dan

penuangan pada cawan petri, setelah diinkubasi, jumlah koloni dicawan petri diamati.

Perhitungan koloni pada permukaan cawan ialah &' ! &'' koloni. iap cawan yang

mengandung jumlah yang memenuhi syarat, kemudian di kalikan dengan factor

pengenceran pada cawan petri tersebut. 9da * metode yaitu penyebaran dan penuangan.

Penyebaran

1. =alam pengenceran siapkan + botol, masing ! masing 44 ml larutan pengencer

garam fisiologis ; buffer phosphate, sedang botol ke & diisi 4' ml larutan pengencer.

ulis pada dinding botol tersebut sesuai dengan urutan 1 : 1'', 1 : 1'.''', 1 :

1''.''', 1 : 1.'''.'''"langko pengenceran :

abung atau botol berisi dengan jumlah tertentu cairan pengencer steril (biasanya

garam fisiologis ; buffer phosphate dengan tutup ulir ; karet, tabung biasanya berisi

4 ml ; 4,4 ml, sedang botol berisi 4' ml ; 4,4 ml.

*. Kocok suspensi sample ( E.coli, pipet 1 ml suspensi sample secara aseptik,

masukkan ke dalam blanko pengencer 1 : 1'' letakkan pipet pada tempat yang

berisi disinfektan. )ampur suspensi tersebut dengan tutup tabung tetap rapat,

sehingga tersebar rata di dalam larutan pengencer, pipet 1 ml suspensi dari 1 : 1''

masukkan kedalam blanko pengencer 1: 1'.''' , Pipet dimasukkan dalam tempat

yang berisi disinfektan. Kocok tabung tersebut.

&. Pipet 1' ml secara aseptic suspensi 1 : 1'.''' masukkan kedalam blanko pengencer

1 : 1''.''' , pipet dimasukkan dalam tempat yang berisi disinfektan. kocok tabung

tersebut. Kocok tabung tersebut.


12/24

+. Pipet 1 ml pengencer 1 : 1'.''' secara aseptic, masukkan ke dalam blanko

pengencer 1 : 1.'''.'''. Pipet dimasukkan dalam tempat yang berisi disinfektan.

Kocok tabung suspensi 1 : 1''.'''.

$. 7asing ! masing cawan di beri tanda pada permukaan luar cawan petri yang berisi

nutrient agar 1 : *''.''', 1 : 1.'''.''', 1 : *.'''.''' dan 1 : 1'.'''.''' pindahkan

suspensi dari botol ; tabung ke dalam cawan petri nutrient agar secara aseptik.

a. pipet ',$ ml sampel masukkan ke dalam cawan petri 1 : *.'''.'''

b. pipet ',1 ml sampel masukkan ke dalam cawan Petri 1 : 1'.'''.'''

-. "atang kaca disteril dengan cara mencelupkan kedalam alcohol 4$3 atau bakar

diatas api (lidah nyala api, kemudian gunakan batang kaca untuk menyebarkan

cairan pada cawan petri di pengenceran tertinggi 1 : 1'.'''.'''

/. ulangi langkah no. - untuk cawan petri 1 : *.'''.''' tanpa mensterilkan kembali

batang kaca, karena suspensi dilakukan pada sampel dari botol ; tabung pengencer

yang sama, tetapi dilakukan pemindahan suspensi jumlah yang kecil.

. pengenceran 1 : 1''.''' kedalam cawan nutrient agar

a. pipet ',$ ml ke dalam cawan petri 1 : *''.'''

b. pipet ',1 ml ke dalam cawan petri 1 : 1.'''.'''

4. Ckuti langkah no. - dan / mula ! mla cawan Petri 1 : 1.'''.''' kemudian 1 :

*''.''' untuk suspensi ',1 ml biasanya segera di serap oleh medium daripada ',$

ml sampel tungguh sampai masing ! masing sampel terserap di media, kemudian

tutup dan balikkan cawan petri tersebut.

1'. "eri tanda : nama, nomer, tanggal pada cawan petri, inkubasikan ke dalam incubator

&/) selama *+ jam cawan petri dalam posisi terbalik.

Pengenceran dan pencawanan kuantitatif


13/24

Pengamatan

# Pilih biakan yang jumlah koloninya &' ! &'' bila biakan koloni yang kurang &' dan

lebih &'' tidak dapat digunakan karena secara statistic hitungan tersebut tidak dapat

dipercaya.

# =engan alat penghitung koloni LMuebecN (counter colony, letakan cawan

Petri dalam keadaan terbalik, sebagai pedoman manfaatkan garis tebal pada dasar

berpola kotak ! kotak.

# itung jumlah koloni pada baris teratas, dari kiri ke kanan pada baris

bawah dan seterusnya. itung koloni yang terletak di kiri dan di atas garis yang

membatasi kotak yang koloninya sedang dihitung.

# Kalkulasikan jumlah organisme per ml biakan dengan cara jumlah koloni

H factor pengenceran, contoh : 1'$ koloni dalam inokulasi ',1 ml (1 : 1''.'''

maka 11' H 1.'''.''' J 11'.'''.''' bakteri per ml bahan.

Penghitung koloni dengan alat penghitung Muebec


14/24

Pengukuran massa sel

(metode urbidimetrik

ujuan : Prinsip kolorimetri untuk digunakan dalam pendugaan pertumbuhan mikroba

secara turbidimetrik serta menentukan korelasi antara kekeruhan biakan dan

hitungan sel.

7etode yang lebih cepat dan praktis : pengukuran kekeruhan biakan dengan

fotokolorimeter, untuk memperoleh data dari pengukuran dapat dinyatakan

sebagai konsentrasi organisme diperlukan standart, korelasi antara kekeruhan

biakan dengan jumlah organisme per ml biakan. Sekali kur6a standart di

peroleh maka sejumlah besar biakan organisme sejenis dapat cepat diukur

kekeruhannya dan konsetrasi segera diketahui dengan cara membaca kur6a

standart.

"ahan:

"iakan ( E.coli dalam kaldu nutrien

- tabung fotokolorimeter 1 pipet $ ml

1 tabung kaldu nutrien

Prosedur :

# Siapkan fotokolorimeter L"ousch and Domb spectronic *'N. 9lat di pasang dengan

cara memutar tombol pengatur nol yang terletak di kiri depan mengikuti arah jarum

jam, *' menit sebelum di gunakan.

# Pada permukaan datar sebelah kanan terdapat tombol pengatur panjang gelombang

(pasang pada -*' nm. Sementara pelajari prosedur pengenceran (gambar

# 9mbil ke - tabung yang telah disediakan untuk pembacaan dan dibersihkan, gunakan

dengan hati ! hati karena tabung ! tabung ini mahal. Pada dinding atas tabung tulis

masing ! masing 1:1, 1:*, 1:+, 1:, 1:1-, dan " (banko. Pindahkan & ml kaldu

nutrient steril (menggunakan pipet $ ml ke dalam masing ! masing tabung 1:*, 1:+,

1: dan 1:1- (karena sampel akan segera dibaca.


15/24

# Pipet diletakkan ditempatnya, kocok tabung berisi biakan E.coli hingga suspensi

tersebut rata. =engan pipet yang sama pindahkan & ml biakan E.coli kedalam tabung

1:1 dan & ml kedalam tabung 1:*. Dangkah ini tidak perlu aseptik tetapi setelah

digunakan, dibuang ditempat yang berisi disinfektan.

# )ampurkan isi tabung 1:* dengan cara memipet cairan tersebut dan dikeluarkan

kembali kedalam tabung sebanyak &H, pindahkan & ml ke tabung 1:+ campurkan

sampai &H, lakukan sampai ke tabung 1:1- dan tabung 1:1- mempunyai 6olume - ml.

# Dakukan kalibrasi fotokolorimeter :

a. atur jarum meter menunjukkan pada LtransmittanceN '3 ('3 dengan cara

menggerakkan tombol pengatur nol ke kiri atau ke kanan.

b. 9mbil blanko, bersihkan bagian luar tabung sampai kering (setelah itu jangan

sampai tersentuh jari atau benda lain letakkan tabung tersebut pada ruang sampel

( terletak pada permukaan dasar alat ini di sebelah kiri.

c. 9tur agar garis pada tabung terletak segaris dengan garis pada ruang sampel, tutup

ruang sampel. =engan menggerak ! gerakan tombol pengatur cahaya yang terletak

di bagian kanan depan, atur agar jarum meter menunjukan pada 1''3. keluarkan

tabung blanko dan tutup ruang sampel, maka jarum meter harus kembali pada '3,

bila tidak maka ulangi ke + langkah lagi seperti diatas.

d. "ila sudah terkalibrasi dengan baik maka alat siap untuk dipakai membaca

kekeruhan sampel tersebut diatas.

Pengamatan

1. )atatlah hasil pengukuran kekeruhan sampel dalam 3 pada table berikut ini :

Pengenceran 3 8.=.O Bumlah organisme;mlOO

1:1

1:*

1:+

1:

1:1-

O8.=. (Optical Dencity atau rapat optis,


16/24

)tt : meskipun nilai 8.=. dapat dibaca secara langsung pada gal6anometer ,namun

akan lebih akurat bila menghitung dari nilai 3.

*. 5ambarlah grafik yang menyatakan hubungan antara nilai 8.=. dan jumlah

organisme;ml pada kertas grafik yang disediakan


17/24

5enetika bakteri

9danya dua fenomena biologi pada konsep hereditas, yaitu :

1. ereditas : bersifat stabil di mana generasi berikut yang terbentuk dari

pembelahan satu sel mempunyai sifat identik dengan induknya

*. 6ariasi genetik yang mengakibatkan adanya perbedaan sifat generasi

berikut dari sel induknya akibat peristiwa genetik tertentu, misalnya :

mutasi

>nit herediter disebut genom bakteri. 5enom bakteri disebut sebagai gen. 5en bakteri

biasanya terdapat dalam molekul =


18/24

Kesimpulannya sekuens nukleotida pada gen =


19/24

&. Konjugasi

ransfer unilateral dari meteri genetic antara bakteri sejenis maupun dengan

jenis lain dapat terjadi melalui proses konjugasi (J mating J kawin. Karena

adanya factor 2 yang menentukan adanya sex pili. "akteri yang mempunyai sex

pili disebut bakteri 2% dan melalui pili tersebut materi genetic dari sel donor

(2% termasuk plasmid =


20/24


21/24

Csolasi bakteri dari suspensi

ujuan : cara mengisolasi bakteri dari suatu campuran dengan teknik cawan gores ;

streak dan cawan tuang.

Populasi dilingkungan pada umumnya campuran jarang dijumpai spesies tunggal

dialam, untuk mengidentifikasikan spesies bakteri tertentu pertama dipisahkan dari

organisme lain dengan ditumbuhkan menjadi biakan murni (biakan yang sel ! selnya

berasal dari pembelahan satu sel tunggal. Cdentifikasi memerlukan populasi dengan

satu macam mikroorganisme saja untuk deketahui ciri kultural, morfologis, fisilogis,

maupun serologis.

=alam beberapa metode untuk dapat memperoleh biakan murni dari suatu biakan

campuran, diantaranya teknik cawan gores ; streak dan cawan tuang. Pada prinsip yang

sama yaitu mengencerkan organisme, sehingga spesies dapat dipisahkan satu dengan

yang lainnya, setiap koloni terpisah tampak pada cawan Petri setelah inkubasi selama *+

jam berasal dari satu sel tunggal.

7etode cawan gores ; streak

7etode ini mempunyai keuntungan : menghemat media dan waktu, namun memperoleh

hasil yang baik perlu ketrampilan atau pengalaman, karena untuk mendapatkan isolasi

yang diinginkan (koloni ! koloni terpisah dengan baik. 7emang sukar untuk

dibayangkan betapa kecil ukuran sel bakteri, satu sel bakteri berukuran 1;1'.''' cm jadi

dipermukaan agar nutrient ada puluhan ribu sel. "ila dengan menggunakan teknik gores

pada permukaan medium sel ! sel bakteri akan terpisah satu dengan yang lainnya, sel

tunggal yang terpisah seperti sel induk. Pada waktu inkubasi setiap sel induk akan

membelah secara biner dalam waktu *' ! &' menit menjadi * sel, dalam *' ! &' menit

berikutnya membelah lagi menjadi + sel dan seterusnya.

9lat dan suspensi ; sampel

&. suspensi

+. cawan nutrient agar (


22/24

Prosedur

/. tulis nama, nomer, tanggal pada dasar cawan petri (bawah cawan yang ada

mediumnya bukan pada tutup cawan menggunakan pensil lilin atau spidol.

. 9da beberapa cara metode gores ; streak, antara lain :

)tt : memijarkan kembali lup setiap kali memindahkan sektor kuman.

4. Cnkubasikan cawan petri yang sudah distreak dengan posisi terbalik pada suhu

&') selama *+ jam.


23/24

Pengamatan

1'. Dingkari koloni ! koloni yang terpisah dan berlainan warna, bentuk pada

permukaan medium, gambarkan dan amati penyebaran koloni sesuai dengan warna

koloni yang nampak.

11. 9mati diameter (gunakan penggaris dalam millimeter, warna, ele6asi, tepian,

bentuk, konsistensi. Secara aseptik koloni ! koloni ke dalam agar miring yang

tersedia, inkubasikan dan disimpan.

)irri koloni

7ikroorganisme

E.coli "almonella "taphylococcus

=iameter

Aarna

le6asi

epian

"entuk

Konsistensi

"au

7etode tuang

7emperoleh koloni murni dari populasi campuran mikroorganisme ialah dengan

mengencerkan specimen dalam medium agar yang telah dicairkan dan didinginkan

($'), kemudian dituang kecawan Petri, konsentrasi sel bakteri didalam specimen

belum diketahui, maka pengenceran perlu dilakukan beberapa tahap sehingga salah


24/24

diantara cawan Petri tersebut mengandung koloni terpisah diatas permukaan ; didalam

agar.

)tt : metode ini memboroskan medium dan waktu, namun tidak memerlukan

ketrampilan yang terlampau tinggi.

9lat dan medium

1*. suspensi

1&. cawan Petri steril

1+. tabung nutrient agar (

pertumbuhan dan perkembangbiakan bakteri

Documents