OPTIMASI PEMUCATAN (BLEACHING) MINYAK HASIL SAMPING

PENGALENGAN IKAN LEMURU (Sardinella sp.) MENGGUNAKAN ADSORBEN

BENTONIT, ZEOLIT, DAN KARBON AKTIF

SKRIPSI

Oleh:

PINGKY PUTRI ERNES

135100101111015

JURUSAN TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2017

ii

HALAMAN JUDUL

OPTIMASI PEMUCATAN (BLEACHING) MINYAK HASIL SAMPING

PENGALENGAN IKAN LEMURU (Sardinella sp.) MENGGUNAKAN ADSORBEN

BENTONIT, ZEOLIT, DAN KARBON AKTIF

Oleh:

PINGKY PUTRI ERNES

NIM 135100101111015

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

gelar Sarjana Teknologi Pertanian

JURUSAN TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2017

iii

LEMBAR PESETUJUAN

Judul Skripsi :Optimasi Pemucatan (Bleaching) Minyak Hasil Samping

Pengalengan Ikan Lemuru (Sardinella sp.) Menggunakan

Adsorben Bentonit, Zeolit, dan Karbon Aktif

Nama Mahasiswa : Pingky Putri Ernes

NIM : 135100101111015

Jurusan : Teknologi Hasil Pertania Pertanian

iv

LEMBAR PENGESAHAN

v

RIWAYAT HIDUP

Pingky Putri Ernes dilahirkan di Banyuwangi pada tanggal

23 Januari 1995. Penulis merupakan putri pertama Almarhum

Sunaryo dan Sumini. Memiliki satu saudara perempuan Ajeng

Mimbi Masprilia. Pendidikan TK penulis adalah di TK Dharma

Wanita Banyuwangi, pendidikan SD di SDN 1 Cantuk

Banyuwangi, pendidikan SMP di SMPN 1 Genteng Banyuwangi,

dan pendidikan SMA di SMAN 1 Genteng Banyuwangi. Penulis melanjutkan studi

program S-1 angkatan 2013 di program studi Ilmu dan Teknologi Pangan, jurusan

Teknologi Hasil Pertanian Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya

Malang melalui jalur Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN).

Pada masa perkuliahan penulis aktif di organisasi English for Specific Purposes

(ESP) FTP UB tahun 2014-2016. Pada tahun 2016 penulis diberikan amanah untuk

menjadi Pengurus Harian ESP FTP UB sebagai Sekretaris 2 dan diamanahi kembali

untuk menjadi Pengurus Harian sebagai sekretaris 1 tahun 2017. Kepanitiaan yang

pernah dijalankan antara lain staf divisi sponsorship dalam ESP Great Present (EGP)

2014, staf divisi kestari dalam Olimpiade Brawijaya 2014, koordinator sekretaris

dalam ESP Great Present (EGP) 2015 dan ESP Organization Training 2016. Selain

aktif berorganisasi, penulis juga aktif di kegiatan Asisten Praktikum dalam kampus

diantaranya asisten praktikum kimia dasar, asisten praktikum mikrobiologi umum.

Pada tahun 2017 penulis telah berhasil menyelesaikan pendidikannya dan

mendapatkan gelar Sarjana Teknologi Pertanian di Jurusan Teknologi Hasil

Pertanian Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya Malang.

vi

LEMBAR PERSEMBAHAN

Alhamdulillah dengan terselesaikannya laporan skripsi ini saya resmi

memperoleh gelar S-1. Awali segala sesuatu dengan bismillah dan niatkan

semua yang kita lakukan semata-mata hanya untuk beribadah kepada Allah

SWT. Jangan takut untuk berkata dan berperilaku jujur karena pasti ada

jalan. Permudahlah urusan orang lain, insyaAllah urusanmu dipermudah oleh

Allah SWT.

Semoga semua kegiatan saya selama menempuh kuliah S-1 dapat

bermanfaat, baik bagi diri saya sendiri maupun lingkungan sekitar. Saya juga

mohon maaf atas segala kesalahan yang saya lakukan khususnya selama

masa perkuliahan dan seluruh umur hidup saya.

vii

PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI

Yang bertanda tangan dibawah ini: Nama Mahasiswa : Pingky Putri Ernes

NIM : 135100101111015

Jurusan : Teknologi Hasil Pertanian

Fakultas : Teknologi Pertanian

Judul Skripsi :Optimasi Pemucatan (Bleaching) Minyak Hasil Samping

Pengalengan Ikan Lemuru (Sardinella sp.) Menggunakan

Adsorben Bentonit, Zeolit, dan Karbon Aktif

Menyatakan bahwa,

Skripsi dengan judul di atas merupakan karya asli penulis tersebut di atas. Apabila di

kemudian hari terbukti ini tidak benar, saya bersedia menerima sanksi sesuai hukum

yang berlaku.

Malang, 22 September 2017

Pembuat Pernyataan,

Pingky Putri Ernes

NIM 135100101111015

viii

PINGKY PUTRI ERNES. 135100101111015. Optimasi Pemucatan (Bleaching) Minyak Hasil Samping Pengalengan Ikan Lemuru (Sardinella sp.) menggunakan Adsorben Bentonit, Zeolit, dan Karbon Aktif. SKRIPSI. Pembimbing: Prof. Dr. Teti Estiasih, STP., MP.

RINGKASAN

Minyak ikan berpotensi sebagai sumber omega-3 PUFA (Polyunsaturated Fatty Acids) yang memiliki pengaruh positif untuk kesehatan. Proses pengalengan lemuru yang terdapat di daerah Muncar Banyuwangi mempunyai hasil samping berupa minyak ikan namun belum banyak dimanfaatkan karena kualitasnya masih rendah, sehingga perlu dilakukan pemurnian meliputi degumming, netralisasi, dan pemucatan (bleaching) menggunakan adsorben. Konsumen menyukai minyak yang pucat dan jernih sehingga perlu dikaji lebih mendalam mengenai proses bleaching. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kondisi optimum serta karakteristik fisikokimia dan komposisi asam lemak minyak hasil samping pengalengan lemuru yang diberi perlakuan pemucatan menggunakan adsorben bentonit, zeolit, dan karbon aktif. Metode penelitian dirancang menggunakan RSM (Response Surface Methodology) desain percobaan CCD (central Composite Design). Dalam penelitian ini terdapat tiga faktor yaitu suhu (50, 70 dan 900C), waktu (5, 10, dan 15 menit), dan konsentrasi adsorben (5, 10, dan 15% b/b) dengan respon kecerahan (L) dan kejernihan (Absorbansi). Minyak ikan hasil optimasi dari masing-masing adsorben dikarakterisasi lebih lanjut untuk penentuan perlakuan terbaik menggunakan Metode Multiple Atribute.

Solusi optimasi yang diprediksikan oleh program yaitu suhu, waktu proses, dan konsentrasi adsorben masing-masing sebesar 66,750C; 19,63 menit; dan 5,7% dengan nilai respon kecerahan 26,36 dan kejernihan 0,52 untuk bentonit, 76,070C; 19,26 menit; dan 9,05% dengan nilai respon kecerahan 26,51 dan kejernihan 0,51 untuk zeolit; 69,400C; 22,89 menit; dan 9,48% dengan nilai respon kecerahan 25,63 dan kejernihan 0,83 untuk karbon aktif. Hasil verifikasi data pada ketiga adsorben masuk dalam rentang nilai PI (Prediction Interval) dan CI (Confident Interval) sehingga sesuai untuk diterapkan. Karakteristik minyak ikan setelah pemucatan pada ketiga adsorben memenuhi standar IFOMA dan memiliki hasil lebih baik dibandingkan minyak ikan kasar kecuali bilangan peroksida, namun belum layak konsumsi karena tingginya produk oksidasi sehingga belum memenuhi standar IFOS. Pemucatan menggunakan adsorben zeolit memiliki kualitas yang paling baik dengan karakteristik yang diperoleh meliputi nilai kecerahan (L) 26,55±0,21, kejernihan (Absorbansi) 0,50±0,001, bilangan asam 0,52±0,004, asam lemak bebas 3,65±0,026%, bilangan peroksida 16,83±0,15 mek/kg, bilangan p-anisidin 5,45±0,52, total oksidasi 6,85, kadar air tidak terdeteksi, rendemen 82,45±0,21%, EPA 8,38% area.

Kata Kunci: Adsorben, Bleaching, Minyak Ikan Lemuru, Respon Surface Methodology

ix

PINGKY PUTRI ERNES. 135100101111015. Optimization of Fish Oil Bleaching from Lemuru (Sardinella sp.) Canning By-Product Using Bentonite, Zeolite, and Activated Carbon Adsorbent. Minor Thesis. Advisor: Prof. Dr. Teti Estiasih, STP., MP.

SUMMARY

Fish oil has the potential to become the source of omega-3 PUFA

(Polyunsaturated Fatty Acids) that has a positive effect on health. The lemuru canning process in Muncar Banyuwangi yields fish oil of by-product but has not been widely used because of its low quality, therefore it must go through purifying process which consists of degumming, neutralization, and bleaching using adsorbent. Consumers prefer fish oils with bright and clear visual therefore it is necessary to conduct a further study on fish oil bleaching process. The aim of this research is to know the optimum condition, physicochemical characteristics and fatty acid composition of fish oil by-product that are treated with bleaching using bentonite, zeolite and activated carbon adsorbent. The research method was designed using RSM (Response Surface Methodology) with CCD (Central Composite Design). In this study there were three factors: temperature (50, 70 and 90 0C), time (5, 10, and 15 minutes), and concentration of adsorbent (5, 10, and 15% w/w) with brightness (L) and clarity (Absorbansi) responses. The optimized fish oil from each adsorbent was further characterized to determine the best bleaching treatment using Multiple Atribute Method.

Optimizing solutions predicted by the program were temperature, processing time, and adsorbent concentration with respective value for each adsorbent of 66,750C; 19.63 minutes; And 5.7% with brightness response value 26,36 and clarity 0,52 for bentonite, 76,070C; 19.26 minutes; And 9,05% with brightness response value 26,51 and clarity 0,51 for zeolite; 69,400C; 22.89 minutes; And 9.48% with brightness response value 25.63 and clarity 0.83 for activated carbon. The results of data verification on the three adsorbents were within the range of PI (Prediction Interval) and CI (Confident Interval) values therefore the conditions were applicable. Characteristics of fish oil after bleaching on three adsorbents complied IFOMA standarts and had better results than crude fish oil except peroxide numbers, but not yet feasible for consumption due to high oxidation products that were not within the IFOS standards. The bleaching using zeolite adsorbent had the best quality with characteristics obtained include brightness (L) 26.55 ± 0.21, clarity (Absorbansi) 0,50 ± 0,001, acid number 0,52 ± 0,004, free fatty acid 3,65 ± 0,026%, peroxide number 16,83 ± 0.15 meq/kg, p-anisidine number 5.45 ± 0.52, total oxidation 6.85, moisture content is not detected, yield 82.45 ± 0.21%, EPA 8.38% interval.

Keywords: Adsorbent, Bleaching, Lemuru Fish Oil, Response Surface Methodology

x

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat, hidayah,

dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan skripsi yang berjudul

“Optimasi Pemucatan (Bleaching) Minyak Hasil Samping Pengalengan Ikan

Lemuru (Sardinella sp.) menggunakan Adsorben Bentonit, Zeolit, dan Karbon

Aktif” dengan baik.

Adapun tujuan dari penyusunan laporan ini adalah untuk memperoleh gelar

Sarjana Teknologi Pertanian di Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya.

Pada kesempatan kali ini penulis menyampaikan terima kasih kepada seluruh pihak

yang telah membantu, mendukung, dan membimbing dalam penyelesaian laporan

skripsi ini, terutama kepada:

1. Keluarga besar yang selalu mendoakan saya.

2. Ibu Prof. Dr. Teti Estiasih., STP, MP. selaku dosen pembimbing skripsi dan

ketua jurusan Teknologi Hasil Pertanian Universitas Brawijaya Malang.

3. Fish Oil Squad dan Pengurus Harian ESP 2015/2016 yang membantu dari sisi

teknis maupun nonteknis.

4. Teman-teman THP angkatan 2013.

Penulis menyadari bahwa laporan ini masih memiliki kekurangan sehingga

diharapkan saran dan kritik demi kesempurnaan laporan ini. Penyusun berharap

semoga tulisan ini bermanfaat bagi penulis maupun semua pihak yang

membutuhkan.

Malang, September 2017

Penulis

xi

DAFTAR ISI

xii

xiii

DAFTAR TABEL

xiv

xv

DAFTAR GAMBAR

xvi

xvii

DAFTAR LAMPIRAN

1

I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Indonesia adalah negara kelautan dengan kekayaan laut maritim yang

sangat melimpah dengan luas wilayah territorial berdasarkan konvensi PBB tahun

1982 sebesar 7,1 juta km2 didominasi oleh wilayah laut yaitu kurang lebih 5,4 juta

km2 . Menurut Kementerian Kelautan dan Perikanan Republik Indonesia (2017),

total hasil perikanan tangkap laut pada tahun 2013 di seluruh provinsi di Indonesia

mencapai 13.313.838 ton yang didominasi oleh komoditas ikan pelagis kecil dan

ikan pelagis besar. Hal tersebut berpotensi memberikan kontribusi yang signifikan

bagi pertumbuhan ekonomi Indonesia apabila dimanfaatkan seoptimal mungkin.

Komoditas perikanan banyak dimanfaatkan sebagai bahan baku industri

pengalengan dan penepungan terutama ikan sarden/ lemuru yang hidup dan

berkembang biak di perairan pantai, khususnya di selatan perairan Jawa Timur

dan Bali (Poppo dkk, 2008).

Pada proses pengalengan lemuru di daerah Muncar Banyuwangi Jawa

Timur mempunyai hasil samping berupa minyak ikan namun belum banyak

dimanfaatkan terutama di bidang pangan karena kualitas minyak ikan yang ada

masih terbatas untuk pakan ternak dengan harga jual rendah. Menurut Gamez-

Meza et al (1999), asam lemak yang paling berlimpah dalam minyak ikan sarden

mentah adalah asam lemak esensial EPA 20% dan DHA 13%. Oleh karena itu,

minyak sarden dapat dianggap sebagai sumber penting dari omega-3 PUFA

(polyunsaturated fatty acids) yang baik untuk perkembangan bayi, jantung, dan

dementia (Sahena, 2010), pencegahan penyakit kardiovaskular, rheumatoid

arthritis, fungsi kekebalan tubuh dan kanker (Mantzioris et al., 2000; Li et al., 2003;

Cleland et al., 2006). Berdasarkan data statistika, diketahui nilai impor Indonesia

terhadap minyak ikan sebesar 4.666 ton dengan nilai nominal 17.555 juta dolar

Amerika, sedangkan nilai ekspornya sendiri adalah sebesar 183,407 ton atau

setara dengan 589,132 juta dolar Amerika (KKP, 2012). Tingginya nilai impor

memperlihatkan permintaan pasar dalam negeri terhadap minyak ikan belum

mampu dipenuhi oleh industri di Indonesia sehingga dapat menjadi salah satu

tantangan sekaligus peluang bagi produsen minyak ikan untuk memproduksi

minyak ikan dengan kualitas yang baik. Menurut Copeland and Maurice (2005),

terdapat 4 tahap pemurnian minyak ikan yaitu degumming, netralisasi, pemucatan

(bleaching), dan deodorisi. Minyak hasil samping pengolahan ikan mudah

2

mengalami oksidasi yang dipicu oleh besi dari hemoglobin, suhu pemanasan yang

terlalu tinggi, dan adanya oksigen selama proses produksi sehingga terbentuk

warna gelap (Frankel, 2005). Selain pengotor yang hilang, konsumen menyukai

minyak dengan warna cerah dan jernih sehingga perlu dikaji lebih mendalam

mengenai pemucatan (bleaching).

Sebelum dilakukan pemucatan (bleaching) perlu didahului tahapan

degumming dan netralisasi supaya proses bleaching lebih efektif. Degumming

pada suhu 800C dengan menambahkan 1% asam fosfat 85% (Crexi et al., 2010;

Sathivel et al., 2003), netralisasi dengan konsentrasi 20 oBe, konsentrasi NaOH

sebanyak 12,6 g (Abdillah, 2008; Sathivel et al., 2003), mampu memperbaiki

karakteristik minyak ikan dari limbah pengolahan ikan. Karakteristik minyak hasil

samping proses pengalengan ikan lemuru mengalami peningkatan mutu dan

penurunan jumlah asam lemak jenuh setelah pemurnian dengan menggunakan

variasi bahan pemucat yaitu arang aktif dan zeolit sebanyak 5% (Astutik, 2012),

dan pemakaian bentonit dengan konsentrasi 5% (Crexi et al., 2010). Oleh karena

itu perlu dilakukan uji coba tiga jenis adsorben dengan konsentrasi yang berbeda

pada tahapan bleaching (pemucatan). Selain adsorben, faktor lain perlu

dipertimbangkan karena adsorpsi dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu

konsentrasi adsorben, waktu adsorpsi, dan suhu (Nurnafisah, 2016). Berdasarkan

penelitian pendahuluan Nurnafisah (2016), suhu dan waktu yang tepat untuk

proses pemucatan menggunakan adsorben Miracle Filter Powder (MFP) yaitu

suhu 50, 70, 900C dan waktu 5, 10, 15, 20 menit. Pemurnian minyak ikan

menggunakan adsorben zeolit 15% pada suhu 400C selama 30 menit mampu

meningkatkan kualitas pada minyak ikan hasil samping pengalengan lemuru

(Ahmadi dkk, 2007).

Penentuan titik optimum dari faktor-faktor tersebut diperlukan agar

diperoleh minyak ikan yang berkualitas pangan. Metode permukaan respon dapat

menentukan titik-titik optimal setiap faktor dengan jumlah perlakuan dan waktu

yang lebih singkat (Nurnafisah, 2016). Moreno et al. (2013) menggunakan metode

permukaan respon pada optimasi pemucatan (bleaching) minyak ikan lemuru.

Namal dan Sahidi (2002) menyatakan bahwa metode permukaan respon telah

berhasil diaplikasikan di berbagai industri untuk riset optimasi proses.

3

1.2. Rumusan Masalah

Dari uraian latar belakang maka rumusan masalah yang akan dibahas

antara lain:

1. Bagaimana kondisi optimum pemucatan minyak hasil samping pengalengan

lemuru menggunakan adsorben zeolit, bentonit, dan karbon aktif?

2. Bagaimana pengaruh penambahan variasi jenis dan konsentrasi adsorben

serta suhu dan lama waktu pemucatan terhadap karakteristik fisik, kimia, dan

komposisi asam lemak minyak ikan hasil pemucatan?

3. Apa jenis adsorben yang paling baik dalam pemucatan minyak hasil samping

pengalengan lemuru?

1.3. Tujuan

Adapun tujuan dari penelitian ini adalah:

1. Mengetahui kondisi optimum pemucatan minyak hasil samping pengalengan

lemuru menggunakan adsorben zeolit, bentonit, dan karbon aktif.

2. Mengetahui pengaruh penambahan variasi jenis dan konsentrasi adsorben

serta suhu dan lama waktu pemucatan terhadap karakteristik fisik, kimia, dan

komposisi asam lemak minyak ikan hasil pemucatan.

3. Pemilihan jenis adsorben yang paling baik dalam pemucatan minyak hasil

samping pengalengan lemuru berdasarkan sifat fisik, kimia, dan komposisi

asam lemak.

1.4. Manfaat

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai

kondisi optimum pemucatan minyak hasil samping pengalengan lemuru untuk

menghasilkan minyak ikan murni yang memiliki kualitas lebih baik.

1.5. Hipotesis

1. Diduga ada perbedaan solusi optimasi proses Bleaching menggunakan

adsorben bentonit, zeolit, dan karbon aktif.

2. Terdapat pengaruh nyata faktor suhu, waktu, dan konsentrasi adsorben

terhadap respon kecerahan (L) dan kejernihan (Absorbansi)

3. Minyak hasil samping pengalengan lemuru setelah bleaching telah sesuai

dengan standar pangan yang ditetapkan oleh IFOS.

4

II TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Ikan Lemuru

Lemuru merupakan ikan yang termasuk golongan pelagis kecil dalam famili

clupeidae pemakan fitoplankton dan zooplankton (terutama copopeda). Sebaran

S. Lemuru terdapat di Samudra Hindia timur (Phuket, Thailand, Pantai Selatan

Jawa Timur dan Bali, Australia Barat). Lemuru hidup bergerombol pada perairan

laut dangkal di daerah pesisir. Lemuru dapat ditangkap secara musiman yakni

mulai awal musim penghujan di sekitar Selat Bali (bulan September-Oktober)

dengan puncak migrasi pada bulan Desember sampai dengan Januari (FAO,

2017).

Sebutan Sardinella longiceps oleh Whitehead tahun 1965 yang digunakan

sebagai nama ilmiah ikan lemuru yang tertangkap di perairan Selat Bali diganti

menjadi Sardinella lemuru. Hasil revisi klasifikasi dilakukan oleh Wongratana tahun

1980. Sardinella lemuru dalam bahasa Inggris dinamakan Bali Sardinella,

sedangkan nama ilmiah dalam deskripsi asli adalah Sardinella lemuru (FAO,

2017). Hal yang membedakan Sardinella lemuru dengan S. longicep adalah

bagian kepala yang lebih pendek (26 sampai 29% dari panjang standar; S.

longicep 29-35%) dan memiliki selaput insang yang lebih sedikit (77 sampai 188

pada ikan ukuran 6,5 sampai 22 cm; pada S. longiceps 150-253 pada ukuran 8 –

15.5 cm). Panjang badan S. lemuru 20-23 cm, berwarna keperakan dengan biru

gelap pada bagian belakang (posterior), terdapat sedikit bercak emas di belakang

lubang insang dan di sepanjang garis tengah badan, terdapat bercak hitam di

belakang penutup insang, memiliki 8 sirip pinggul (FAO, 2017).

Menurut Bleeker (1853), ikan lemuru dapat diklasifikasikan sebagai berikut:

Kingdom : Animalia

Phylum : Chordata

Sumbphylum : Vertebrata

Superclass : Gnathostomata

Class : Actinopterygii

Subclass : Neoptrygii

Superorder : Clupemorpha

Order : Clupeiformes

Suborder : Clupeoidei

Family : Clupeidae

5

Gambar 2.1 Ikan Lemuru (Sardinella Lemuru) (Sumber: FAO, 2017)

Subfamily : Clupeinae

Genus : Sardinella

Spesies : Sardinella lemuru (Bali sardinella)

2.1.1. Komposisi Gizi Ikan Lemuru

Ikan lemuru merupakan salah satu jenis ikan tropis yang mengandung

komponen asam lemak omega-3 dalam jumlah yang cukup tinggi. Hal ini

dikarenakan ikan lemuru di alam banyak memakan plankton-plankton maupun

mikro alga yang banyak memproduksi komponen asam lemak omega-3. Ikan

lemuru mengandung 13,7% EPA, 8,9% DHA, dan 26,8 % total omega-3 dari total

minyak (Estiasih, 2009). Ikan sarden mengandung EPA (eicosapentaenoic acid)

1,381 mg/100 gram dan DHA (docohexanoic acid) 1,138 mg/100 gram (Ghufran

2011). Komposisi kimia daging ikan lemuru dapat dilihat pada Tabel 2.1.

6

Tabel 2.1 Komposisi Kimia dalam 100 gram Daging Ikan Sarden Jumlah/100g Satuan

Energi 185 KKal Total lemak 10,45 g Protein 20,86 g Karbohidrat 0,54 g Air 66,86 g Gula 0,43 g Serat 0,1 g Kalsium 240 mg Fosfor 336 mg Besi 2,3 mg Magnesium 34 mg Natrium 414 mg Kalium 341 mg Zinc 1,4 mg Vit C 1 mg Thiamine 0,04 mg Riboflavin 0,233 mg Niacin 4,2 mg Vit B-6 0,123 Mg Folate 24 µg Vit B-12 9 µg Vit A, RAE 34 µg Vit A IU 151 IU Vit E (alpha-tocopherol) 1,38 µg Vit D (D2+D3) 2,38 µg Vit D 193 IU Vit K 0,4 µg Asam Lemak Jenuh 2,684 g Asam Lemak Tak Jenuh Tunggal 4,818 g Asam Lemak Tak Jenuh Majemuk 2,111 g Kolesterol 61 µg

Sumber: USDA (2017)

2.2. Minyak Ikan

Minyak ikan merupakan komponen lemak dalam jaringan tubuh ikan yang

telah diekstraksi dalam bentuk minyak. Lemak atau minyak didefinisikan sebagai

senyawa yang mengandung asam lemak oleh karena itu sifat-sifat asam lemak

penting untuk dipahami dalam memahami sifat-sifat minyak ikan. Minyak ikan

mempunyai jenis asam lemak yang lebih beragam dibandingkan jenis minyak

nabati dan lemak hewan darat (Estiasih, 2009). 2-5% minyak ikan kasar terdiri dari

sterol (meliputi kolesterol), kolesterol teresterifikasi asam lemak, dan asam lemak

bebas. Komponen lain yang terdapat dalam minyak belum dimurnikan meliputi

vitamin A, D, E dan beberapa asam amino larut air, peptida, dan mineral (Farooqui,

2009). Kandungan minyak dalam ikan berbeda-beda. Hal ini tergantung dari

makanan, jenis spesies, kematangan gonad, jenis kelamin, musim, lokasi, serta

suhu lingkungan (Aidos et al., 2003). Ikan yang ditangkap pada perairan dingin

7

mengandung asam lemak omega-3 yang lebih tinggi daripada ikan yang ditangkap

di perairan tropis (Eskin, 2002).

Minyak ikan yang dimurnikan dapat dikonsumsi dalam bentuk obat

(Omacor™, Lovaza™), kapsul minyak ikan, atau ditambahkan ke dalam berbagai

jenis makanan seperti roti, jus jeruk, dan yogurt untuk meningkatkan kandungan

n-3 PUFA (Breivik, 2007). Menurut Rizliya and Mendis (2014), minyak ikan

digunakan dalam berbagai jenis produk makanan seperti roti, pie, sereal, yogurt,

produk keju, dairy product beku, produk daging, cookies, cracker, snack (makanan

ringan), condiment (rempah-rempah), saus, campuran sup.

2.2.1. Karakteristik Minyak Ikan

Asam lemak yang dominan dalam minyak ikan adalah asam lemak omega-

3 terutama EPA dan DHA yang atom karbonnya berjumlah 20 (C20) dan 22 (C22)

serta bersifat tak jenuh karena memiliki 5 dan 6 ikatan rangkap pada molekulnya.

Asam lemak omega-3 merupakan golongan asam lemak tak jenuh ganda

(Polyunsaturated Fatty Acid/ PUFA) yang memiliki ikatan rangkap pada karbon

nomor 3 dihitung dari ujung gugus metal (CH3) atau karbon omega. Ikan yang

dapat dianggap sebagai sumber penting dari omega-3 PUFA (polyunsaturated

fatty acids) yaitu minyak ikan sarden/ lemuru (Estiasih, 2009). Struktur kimia dari

EPA dan DHA dapat dilihat pada Gambar 2.2. serta kadar EPA dan DHA yang

pernah diamati oleh Standsby (1982) dapat dilihat pada Tabel 2.2

Gambar 2.2 Struktur Kimia EPA dan DHA (Sumber: Ackman, 1982)

8

Tabel 2.2 Kadar asam lemak omega-3 dari beberapa jenis ikan

Jenis Ikan Kadar Lemak (%) Asam Arakhidonat (g) EPA (g) DHA (g)

Tuna 6.8 0.14 0.63 1.70 Hering 6.2 0.03 0.33 0.58 Mackerel 9.8 0.12 0.85 1.10 Salmon 13.2 0.06 1.00 0.72 Cod 0.73 0.02 0.08 0.15 Sardine 10.2 0.22 1.7 0.64

Sumber: Standby (1982)

Tabel 2.3 Komposisi Lemak dalam 100 gram Minyak Ikan Sarden

Jumlah/100g Satuan

Asam Lemak Jenuh 29,892 G Asam Lemak Tak Jenuh Tunggal 33,841 G Asam Lemak Tak Jenuh Majemuk 31,867 G Kolesterol 710 µg

Sumber: USDA (2017)

Minyak ikan juga mengandung antioksidan larut lemak seperti karoten dan

vitamin E yang mampu mengikat radikal bebas, namun minyak ikan laut sangat

tidak jenuh dan sangat rentan terhadap oksidasi bila terkena oksigen, cahaya, dan

panas. Selain itu stabilitas oksidatif dan hidrolisis bisa sangat berbeda antar

spesies ikan (Wu and Bechtel, 2008). Standar mutu minyak ikan dapat dilihat pada

Tabel 2.4.

Tabel 2.4 Standar Minyak Ikan

No Parameter IFOS CAC CRN EP IFOMA

1 Kadar Air (%)

9

2.3. Minyak Hasil Samping Pengalengan Ikan Lemuru

Pengalengan ikan merupakan suatu cara pengawetan bahan pangan yang

dikemas secara hermetis (kedap terhadap udara, air, mikroba dan benda asing

lainnya) dalam suatu wadah yang kemudian disterilkan secara komersial untuk

membunuh semua mikroba patogen (penyebab penyakit pada manusia

khususnya) dan mikroba pembusuk (penyebab kebusukan atau kerusakan bahan

pangan) (Fadli, 2011). Tahapan proses pengalengan ikan berdasarkan Canadian

Food Inspection Agency (1997), dapat dilihat pada Gambar 2.3.

Gambar 2.3 Tahapan Pengalengan Ikan (Sumber: Canadian Food Inspection Agency, 1997)

Pada beberapa proses pengolahan ikan, yaitu pemindangan, penepungan,

dan pengalengan dihasilkan cairan hasil samping pengolahan yang mengandung

Filling

Raw Material

Penyiangan

Pencucian

Pre-cooking (dikukus)

Pemotongan

Kaleng

Pencucian H2O2

Pengeringan

Exhausting

Penambahan medium Brine / Saus

Seaming

Sterilisasi

Pendinginan

Pemeraman

Labelling dan Packing

Ikan Kaleng

Limbah Cair

Evaporasi Air

Minyak Ikan

Air dingin

10

minyak ikan, namun yang telah banyak diteliti minyak hasil samping penepungan

dan pengalengan sedangkan pemindangan belum banyak dieksplorasi. Mutu

minyak ikan hasil samping pengalengan lebih tinggi daripada penepungan karena

bahan baku penepungan tersebut berasal dari ikan yang tidak masuk mutu ikan

untuk pengalengan serta bagian kepala, ekor, dan isi perut (Estiasih, 2009).

Pengawetan ikan dengan cara pengalengan jauh lebih bagus dibandingkan

pengawetan cara lain, namun dibutuhkan penanganan yang lebih intensif serta

ditunjang dengan peralatan yang serba otomatis (Wulandari dkk., 2009).

Pada industri pengalengan ikan, saat pemasakan dengan uap air panas

(precooking) dihasilkan cairan hasil samping cairan dari fraksi minyak, fraksi air,

dan padatan tersuspensi. Sebagian besar penggunaan fraksi minyak tersebut

bukan untuk pangan (petis, pakan ternak, dan industri kulit) dan masih jarang

dimanfaatkan sebagai sumber asam lemak omega 3 (Estiasih, 2009). Pada tahap

pre-cooking proses pengalengan ikan lemuru menghasilkan minyak ikan sebanyak

5% (Yunizal, 2002). Menurut Kompiang et al. (1981) dalam Sari et al. (2015) dari

ikan lemuru sebanyak 100 kg akan diperoleh minyak ikan lemuru sebanyak 20 kg.

Minyak hasil samping pengolahan ikan mudah mengalami oksidasi yang

dipicu oleh besi dari hemoglobin, suhu pemanasan yang terlalu tinggi, dan adanya

oksigen selama proses produksi (Frankel, 2005). Produk oksidasi tidak hanya

memiliki rasa dan warna gelap yang tidak diinginkan tetapi juga memiliki pengaruh

cytotoxic, genotoxic, low density lipoprotein cytotoxicity, atherogenesis dan

atherosclerosis (Oliveira and Miller, 2014). Hal tersebut membuktikan pentingnya

dilakukan proses pemurnian untuk mengontrol kualitas dan stabilitas oksidatif

minyak ikan. Jika ikan yang dikalengkan merupakan sumber asam lemak omega

3 seperti lemuru, maka minyak hasil samping pengalengan juga mengandung

asam lemak omega 3 dalam kadar yang tinggi sehingga perlu diproses lebih lanjut

untuk mendapatkan mutu yang baik (Estiasih, 2009). Karakteristik fisik, kimia, dan

komposisi asam lemak minyak hasil samping pengalengan lemuru sebelum diberi

perlakuan Bleaching dapat dilihat pada Tabel 2.5

11

Tabel 2.5 Karakteristik Fisik, Kimia, dan Komposisi Asam Lemak Sebelum Bleaching

No Parameter Minyak Kasar1

Minyak Hasil Degumming2

Minyak Hasil Netralisasi3

1 Asam Lemak Bebas (%)

5,49 3.93 0,56

2 Bilangan asam 7,78 5,58 0,79 3 Bilangan Peroksida

(mek/kg) 10,48 9,6 7,18

4 Bilangan P-anisidin 64,02 62 12,22 5 Bilangan Total

Oksidasi 76,05 81,9 26,59

6 Kadar air (%) 0,17 0,06 0 7 Komposisi Asam

Lemak (EPA) (%) 4,85 3,08 23,1

8 Rendemen (%) - 95,48 80,57 9 Kecerahan (L) 25,5 25,5 25,55 10 Kejernihan

(Absorbansi) 1,999 1,999 1,999

Sumber: 1: Iqbal (2017) 2: Kurniawan (2017) 3: Ramzy (2017)

2.4. Analisa Sifat Fisik dan Kimia Minyak Ikan

2.4.1 Kejernihan

Tingkat kekeruhan dapat ditentukan dengan spektrofotometer pada

panjang gelombang 380-700 nm, absorbansi pada 460 nm dipakai sebagai indeks

warna minyak (Miyagi dkk, 2001). Spektrofotometri adalah suatu penetapan kadar

atau konsentrasi suatu larutan yang berwarna, berdasarkan pengukuran

penyerapan sinar dengan panjang gelombang terbatas. Jika sinar monokromatik

dilewatkan melalui suatu larutan, perbandingan intensitas sinar keluar (I) terhadap

sinar masuk (I0) disebut transmittance (T). Spektrofotometri menyiratkan

pengukuran jauhnya penyerapan energi cahaya oleh suatu sistem kimia sebagai

fungsi dari panjang gelombang radiasi, demikian pula dengan pengukuran

penyerapan pada suatu panjang gelombang tertentu (Sulistiawati dkk, 2012).

Spektrum Cahaya Tampak dan Warna-warna Komplementer dapat dilihat pada

Tabel 2.6.

12

Tabel 2.6 Spektrum Cahaya Tampak dan Warna-warna Komplementer

Panjang Gelombang (nm) Warna Warna Komplementer

400-435 Violet Kuning-Hijau 435-480 Biru Kuning 480-490 Hijau-Biru Oranye 490-500 Biru – Hijau Merah 500-560 Hijau Ungu 560-580 Kuning – hijau Violet 580-595 Kuning Biru 595-610 Oranye Hijau - biru 610-750 Merah Biru-Hijau

Sumber: Day and Underwood (2002)

2.4.2. Warna

Warna merupakan parameter penting dari produk pangan. Perubahan

warna pada minyak dapat mengindikasi terjadinya perubahan akibat proses

maupun terjadinya oksidasi. Zat warna dalam minyak terdiri dari dua golongan.

Pertama adalah warna alami yang ikut terekstrak saat proses ekstraksi minyak

seperti beta karoten. Kedua adalah warna yang muncul akibat hasil degradasi zat

warna alami akibat proses oksidasi yang menyebabkan warna gelap pada minyak

Warna gelap dapat terjadi selama proses pengolahan dan penyimpanan, yang

disebabkan oleh suhu pemanasan yang terlalu tinggi pada waktu pengepresan

dengan cara hidraulik atau expeller, sehingga sebagian minyak teroksidasi yang

juga dipercepat dengan adanya logam Fe, Cu, dan Mn (Ketaren, 2008).

Warna pada minyak dapat diamati secara kuantitatif menggunakan alat

Color Reader dengan metode Hunter menghasilkan tiga nilai pengukuran yaitu L*,

a* dan b*. Nilai L* menunjukkan tingkat kecerahan minyak, semakin cerah minyak,

maka nilai L* mendekati 100 dan semakin gelap nilai L akan mendekati nilai 0.

Nilai a* dan b* secara berturut-turut menunjukkan warna campuran merah-hijau

dan kuning-biru (Hutching, 1999).

2.4.3. Asam Lemak Bebas

Salah satu penyebab kerusakan minyak adalah adanya kandungan asam

lemak bebas yang disebabkan karena adanya proses hidrolisis pada minyak yang

mampu memecah molekul induk seperti trigliserida dan fospolipid. Hidrolisis lemak

terjadi akibat adanya sejumlah air dan peningkatan aktivitas enzim lipase pada

jaringan (Oliveira and Miller, 2014). Keberadaan asam lemak bebas dijadikan

sebagai indikator awal adanya kerusakan pada minyak. Asam lemak bebas lebih

13

mudah teroksidasi jika dibandingkan dalam bentuk esternya (Dewi, 2013). Adapun

reaksi terbentuknya asam lemak babas tertera pada Gambar 2.4.

2.4.4. Bilangan Peroksida

Bilangan peroksida adalah nilai terpenting untuk menentukan derajat

kerusakan pada minyak atau lemak. Asam lemak tidak jenuh dapat mengikat

oksigen pada ikatan rangkapnya sehingga membentuk peroksida. Peroksida yaitu

produk awal dari reaksi oksidasi yang bersifat labil, reaksi ini dapat berlangsung

bila terjadi kontak antara oksigen dengan minyak (Ketaren, 2008). Oksidasi terjadi

pada ikatan tidak jenuh dalam asam lemak. Pada suhu kamar sampai dengan suhu

100°C, setiap satu ikatan tidak jenuh mengikat 2 atom oksigen, sehingga terbentuk

persenyawaan peroksida yang bersifat labil. Proses pembentukan peroksida ini

dipercepat oleh adanya cahaya, suasana asam, kelembapan udara dan katalis.

Bilangan peroksida dinyatakan dengan miliequivalen peroksida dalam 1000 gram

(Sudarmadji, 1976 dalam Fauziah, 2013). Secara umum reaksi pembentukan

peroksida pada minyak seperti pada Gambar 2.5.

Prinsip kerja metode ini adalah kemampuan senyawa peroksida yang

terbentuk dari oksidasi lemak dalam mengoksidasi ion fero (Fe2+) dalam larutan

FeCl2 menjadi ion feri (Fe3+). Ion feri kemudian dapat mengompleks senyawa

Trigliserida Asam Lemak Gliserol

Gambar 2.4 Reaksi Pembentukan Asam Lemak Bebas (Sumber: Fessenden, 1997)

Gambar 2.5 Reaksi pembentukan peroksida (Sumber: Ketaren, 2008).

14

tiosianat dalam larutan ammonium tiosianat (NH4SCN) menjadi kompleks besi (III)

tiosianat (FeSCN) yang berwarna merah. Kepekatan senyawa besi (III) tiosianat

dapat diukur absorbansinya secara optimal dengan spektrofotometer VIS pada

panjang gelombang 500 nm (Dobarganes and Velasco, 2002). Metode penentuan

bilangan peroksida dengan metode spektrofotometri berdasarkan standar IDF

(International Dairy Federation) nomor 74A:1991 merupakan metode yang

mudah, cepat, dan sensitif karena dapat mendeteksi konsentrasi senyawa

peroksida hingga ketelitian 0.1 mgrek/kg (Shanta and Decker, 1994). Reaksi yang

terjadi pada analisis bilangan peroksida dapat diamati pada Gambar 2.6

2.4.5. Analisa Bilangan p-Anisidin

Nilai anisidin merupakan parameter oksidasi lemak yang mengukur

produk oksidasi sekunder lemak yang dikarakterisasi oleh degradasi lemak yang

diinisiasi oleh hidroperoksida, sehingga menghasilkan produk sampingan karbonil

yang yang bersifat non-volatile (Aidos et al., 2003). Prinsip penentuan bilangan

anisidin adalah berdasarkan pada reaksi antara anisidin dengan α- dan β- aldehid

tidak jenuh yang tidak volatil. Aldehid merupakan produk dekomposisi dari oksidasi

asam lemak bebas. Aldehid tersebut dapat digunakan sebagai sebuah tanda untuk

menentukan berapa banyak komponen-komponen peroksida yang telah mulai

terpecah (Stier, 2001). Nilai bilangan anisidin merupakan nilai dari pengukuran

produk oksidasi sekunder yang dihasilkan dari proses dekomposisi hidroperoksida

sehingga menghasilkan aldehida, keton, asam, alkohol, komponen hidroksi,

hidrokarbon dan senyawa polimer lainnya yang merupakan produk oksidasi

sekunder (Panagan et al, 2011). Reaksi yang terjadi pada analisis bilangan p-

anisidin dapat dilihat pada Gambar 2.7

Fe2+ + Peroxide → Fe3+

Fe3+ (yellow) + NH4SCN → FeSCN2+ (red) + NH4+

Gambar 2. 6 Reaksi Pembentukan Ferri-tiosianat Sumber: (Decker, 2005 )

15

2.4.6. Bilangan Total Oksidasi

Nilai totoks adalah jumlah total oksidasi primer dan sekunder yang

didapatkan dengan menjumlahkan dua kali nilai peroksida dengan nilai anisidin

(Perrin, 1996).

2.4.7. Bilangan Asam

Bilangan asam atau Acid value sangat erat sekali hubungannya dengan

nilai asam lemak bebas (FFA). Bilangan asam dapat digunakan juga untuk

mengukur jumlah ALB yang terdapat dalam minyak. Metode yang dilakukan

adalah dengan melarutkan sejumlah minyak ke dalam alkohol eter dan diberikan

indikator phenolphthalein. Campuran tersebut kemudian dititrasi dengan larutan

KOH 0.5 N sampai terjadi perubahan warna merah jambu yang permanen

(Ketaren, 2008).

2.4.8. Komposisi Asam Lemak Minyak Ikan

Komposisi asam lemak minyak ikan dapat dianalisa menggunakan GC-MS.

Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS) merupakan suatu metode

pemisahan komponen dimana cuplikan berkesetimbangan diantara 2 fasa, yaitu

fasa gerak sebagai pembawa cuplikan dan fasa diam sebagai penahan cuplikan

secara selektif. Hasil dari kromatografi gas (KG) dinyatakan dengan parameter

waktu retensi (Rt) yaitu waktu yang digunakan untuk mengelusi komponen

cuplikan sampai menghasilkan kromatogram (Sastrohamidjojo, 1985 dalam Dewi

2013).

Prinsip kerja Kromatografi Gas-Spektroskopi Massa (KG-SM) yaitu,

cuplikan diinjeksikan ke dalam injektor. Aliran gas dari gas pengangkut akan

Gambar 2. 7 Reaksi Pengikatan Aldehid oleh p-Anisidin Sumber: (Hamilton, 1994)

16

membawa cuplikan yang telah teruapkan masuk kedalam kolom. Kolom akan

memisahkan komponen-komponen dari cuplikan. Komponen komponen tersebut

terelusi sesuai dengan urutan semakin membesarnya senilai koefisien partisi (K),

selanjutnya masuk dalam spektrofotometer massa (MS). Pada spektroskopi

massa komponen cuplikan ditembaki dengan berkas elektron dan diubah menjadi

ion-ion muatan positif yang bertenaga tinggi (ion-ion molekuler atau ion-ion induk)

dan dapat pecah menjadi ionion yang lebih kecil (ion-ion anak pecahan atau ion-

ion induk), lepasnya elektron dari molekul/ komponen-komponen menghasilkan

radikal kation. Ion-ion molekul, ion-ion pecahan, dan ion-ion radikal pecahan

dipisahkan oleh ion pembelokan dalam medan magnet yang berubah sesuai

dengan massa dan muatannya. Perubahan tersebut menimbulkan arus (arus ion)

pada kolektor yang sebanding dengan limpahan relatifnya. Kemudian dicatat

sebagai spektra massa yang merupakan gambaran antara limpahan relatif dengan

rasio massa/muatan (m/z) (Sastrohamidjojo, 1985 dalam Fauziah 2013).

2.5. Pemurnian (Refining) Minyak Ikan

Pemurnian adalah proses yang bertujuan menghilangkan rasa dan bau

yang tidak enak, warna tidak menarik dan untuk memperpanjang umur simpan

sebelum dikonsumsi atau digunakan sebagai bahan mentah dalam industri

(Ketaren, 2008). Proses pemurnian minyak terdiri dari 4 tahap, yaitu: a) proses

degumming, b) netralisasi, c) pemucatan (bleaching), dan d) deodorisasi yang

merupakan proses penghilangan asam lemak bebas dan komponen penyebab

bau tidak sedap seperti peroksida, keton dan senyawa hasil oksidasi lemak lainnya

(Copeland and Maurice, 2005).

1.5.1 Degumming

Proses degumming bertujuan untuk menghilangkan pengotor yang larut

dan tidak larut seperti protein, fosfolipid, lilin, logam. Degumming dilakukan dengan

mencuci minyak dengan larutan hidrofilik yang berasal dari asam organik seperti

asam sitrat atau asam fosfat di bawah kondisi sedikit panas (Oliveira and Miller,

2014). Proses degumming dibedakan menjadi water degumming, dry degumming,

enzymatic degumming, membrane degumming, dan acid degumming (H3PO4,

H2SO4 dan HCl) (Dijkstra and Opstal, 1987; Zufarov et al., 2008). Penelitian ini

menggunakan acid degumming minyak ikan dengan asam fosfat 85%. Acid

17

degumming dengan asam fosfat dimaksudkan untuk memisahkan fosfatida yang

merupakan sumber rasa dan warna yang tidak diinginkan (Madya and Azis, 2006).

Prinsip degumming adalah hidrasi fosfatida dan komponen pengotor

berlendir. Degumming dilakukan dengan menambahkan air sebanyak 75% dari

kadar fosfatida dalam minyak yang umumnya berkisar 1-1,5%. Suhu yang

digunakan pada proses degumming tidak terlalu tinggi, sekitar 50-80 0C. Pada

prinsipnya suhu yang digunakan adalah suhu saat viskositas minyak cukup rendah

untuk memudahkan fosfatida terhidrasi. Setelah proses hidrasi selesai, fosfatida

dan gum yang terhidrasi dipisahkan dari minyak dengan cara sentrifugasi

(Estiasih, 2009). Menurut O`Brien (2004), asam yang biasanya digunakan adalah

asam fosfat 85%, didispersikan dalam minyak pada suhu 80-1000C sebanyak

0,05-1,2% berat minyak. Reaksi dari proses pemisahan gum dengan asam dapat

diamati pada Gambar 2.8.

Gambar 2.8 Reaksi yang terjadi pada proses degumming Sumber: (Deffense, 2009)

2.5.2. Netralisasi

Metode netralisasi adalah metode yang bertujuan untuk meningkatkan

kualitas minyak ikan dengan mengurangi asam lemak bebas dan kandungan

bahan pengotor (impurities) yang terkandung dalam minyak dengan

menambahkan suatu basa seperti NaOH (Huang and Sathivel, 2010), KOH (Haas

et al., 2000). Menurut Estiasih (2009), prinsip netralsasi adalah alkali dapat

bereaksi dengan asam lemak bebas membentuk sabun kemudian sabun dan

fraksi tersabunkan dipisahkan. Jumlah, jenis dan konsentrasi alkali yang

digunakan harus tepat untuk mencegah hidrolisis trigliserida dan membentuk

sabun yang berlebihan serta menurunkan rendemen. Penggunaan alkali yang

lemah seperti natrium karbonat sulit menurunkan kadar asam lemak bebas sampai

dibawah 0,1%. Berdasarkan hasil analisis Dewi (2013) dapat diketahui bahwa

limbah minyak ikan dengan pemberian perlakuan NaOH memberi pengaruh cukup

18

baik terhadap nilai dari sifat fisik, kimia dan komposisi asam lemak dibandingkan

dengan KOH.

Pada proses pemurnian minyak dengan menggunakan alkali dapat

berlangsung melalui 3 tahapan proses. Proses pertama adalah pencampuran

minyak dengan larutan alkali dan diaduk dalam waktu yang telah ditentukan.

Tahap kedua hidrasi yang bertujuan untuk memudahkan pemisahan fraksi

tersabunkan dan fraksi tidak tersabunkan. Pada proses hidrasi, air yang

ditambahkan tidak boleh berlebihan karena dapat membentuk emulsi, akan tetapi

jika terlalu sedikit maka proses hidrasi tidak berjalan sempurna sehingga masih

banyak pengotor tertinggal. Setelah proses hidrasi selesai, maka dilakukan

pemisahan antara fraksi tersabunkan dan fraksi tidak tersabunkan atau minyak.

Teknik pemisahan yang dapat dilakukan adalah dekantasi, sentrifugasi namun

pemisahan yang terbaik menggunakan sentrifugasi karena waktu pemisahan lebih

cepat (Estiasih, 2009). Faktor–faktor yang mempengaruhi proses netralisasi

adalah konsentrasi alkali, suhu, pengadukan. dan pencucian (Sari dkk, 2015).

Reaksi yang terjadi selama proses netralisasi dapat diamati pada Gambar 2.9.

Gambar 2.9 Reaksi Penyabunan Asam Lemak oleh NaOH Sumber: (Mardiyah, 2011)

2.5.3. Pemucatan (Bleaching)

Pemucatan adalah suatu proses pemurnian minyak yang bertujuan untuk

menghilangkan atau memucatkan warna yang tidak disukai, menghilangkan getah

(gum) atau residu sabun hasil proses netralisasi, dan diserap pula fosfolipid,

logam, suspensi koloid serta hasil degradasi minyak seperti peroksida yang ada

dalam minyak (May, 2007). Faktor yang mempengaruhi pemucatan adalah suhu,

waktu, dan tekanan (Sari dkk, 2015). Banyak konsumen menginginkan warna

minyak yang jernih sehingga perlu dilakukan pemucatan.

Ada dua metode umum pemucatan yaitu metode fisika adsorpsi dan

metode pemucatan kimiawi. Metode kimiawi jarang digunakan dan merupakan

metode penghilangan warna dengan cara mengoksidasi pigmen menjadi senyawa

Asam lemak Basa Sabun (garam) Air

19

tidak berwarna. Metode ini tidak digunakan untuk minyak makan dan memiliki efek

merugikan minyak juga dapat teroksidasi (Estiasih, 2009).

Metode fisika adsorpsi dilakukan dengan menggunakan adsorben.

Adsorpsi adalah suatu pengikatan molekul dari suatu fluida ke permukaan benda

padat. Zat yang diserap disebut adsorbat. Proses adsorpsi biasanya dilakukan

dengan cara mengontakkan larutan/ gas dengan padatan, sehingga komponen

larutan/ gas diserap pada permukaan padatan (Kahar, 2007). Berdasarkan

sifatnya adsorpsi ada dua yaitu adsorpsi secara fisik (physiosorption) dan adsorpsi

secara kimia (chemisorption). Adsorpsi fisik adalah adsorpsi yang melibatkan gaya

intermolekul (gaya Van der Walls dan ikatan hidrogen) antar adsorbat dan substrat

(adsorben) (Atkins, 1999). Pada adsorpsi ini adsorbat tidak terikat kuat pada

permukaan adsorben sehingga dapat bergerak dari satu bagian ke bagian lain

dalam adsorben. Sifat adsorpsinya adalah reversible yaitu dapat dilepaskan

kembali dengan adanya penurunan konsentrasi larutan dan membentuk lapisan

multilayer (Lilik, 2008). Adsorpsi kimia adalah adsorpsi yang melibatkan ikatan

kovalen sehingga partikel dapat melekat pada permukaan. Ikatan tersebut terjadi

sebagai hasil dari pemakaian bersama elektron oleh adsorben dan adsorbat. Sifat

adsorpsinya adalah irreversible dan membentuk lapisan monolayer (Atkins, 1999).

Daya adsorbsi disebabkan karena adsorben memiliki pori dalam jumlah besar dan

adsorbsi akan terjadi karena adanya perbedaan energi potensial antara adsorben

dengan zat yang akan diserap. Penyerapan terhadap warna akan lebih efektif jika

adsorben tersebut memiliki bobot jenis yang rendah, ukuran partikel halus, dan pH

adsorben mendekati netral (Ketaren, 2008). Menurut Berbesi (2011), selama

proses pemucatan adsorpsi terjadi beragam mekanisme yang melibatkan berbagai

interaksi fisik (melalui daya tarik permukaan yang melibatkan kekuatan van der

Waalls) dan kimia ("chemisorption" oleh ikatan elektrokimia ke permukaan

adsorben), mekanisme ini meliputi:

1. Penyerapan

Mekanisme dimana pori-pori intra-granular diisi dengan beberapa

cairan terutama minyak dan pada gilirannya kontaminan apa pun ikut

dengannya. Retensi minyak terjadi melalui dua cara: Penurunan berat

dengan ekstraksi Soxhlet (heksana digunakan sebagai pelarut), dan

penentuan bahan organik total dengan ashing. Total retensi minyak

bergantung pada sejumlah variabel yaitu jumlah adsorben, karakteristik

20

adsorben (distribusi, ukuran partikel dan jenis mineral), permeabilitas

saringan, kualitas bahan baku, kebersihan filter.

2. Penyaringan

Dengan saringan molekuler yang menjebak kontaminan di bawah

tekanan di dalam pori-pori adsorben selama penyaringan. Tindakan fisik

untuk menyaring adsorben yang ditangguhkan yang secara bersamaan

menghilangkan kontaminan minor yang teradsorbsi ke partikel adsorben.

3. Katalisis

Mekanisme dimana kontaminan terdegradasi oleh interaksi dengan

adsorben. Sebagai contoh, peroksida secara efektif dikurangi

(dipolimerisasi dan / atau didekomposisi menjadi produk samping oksidasi

yang mudah menguap) melalui interaksi adsorben dengan minyak. Panas

dan oksidasi yang berlebihan menyebabkan pigmen membentuk senyawa

warna yang sulit dikeluarkan atau dikatakan "tetap." Jika terjadi fiksasi

warna, warna merah lebih sulit dikeluarkan oleh adsorben dan tahan

terhadap degradasi termal.

Pemurnian minyak ikan secara fisika yang telah dilakukan antara lain

dengan adsorben zeolit (Ahmadi dkk., 2007), arang aktif (García-Moreno et al.,

2013), bagasse (Wannahari et al., 2012), dan sentrifugasi (Tambunan et al., 2014).

Berdasarkan penelitian pendahuluan Nurnafisah (2016), suhu dan waktu yang

tepat untuk proses pemucatan menggunakan adsorben Miracle Filter Powder

(MFP) yaitu suhu 50, 70, 900C dan waktu 5, 10, 15, 20 menit.

2.6. Adsorben

Adsorben adalah bahan yang memiliki banyak pori-pori yang umumnya

berdiameter sangat kecil sehingga permukaan dalamnya menjadi beberapa kali

lebih besar dari permukaan luarnya (Jauhar, 2007). Secara spesifik, jika ukuran

pori adsorben semakin kecil maka kemampuan adsorpsinya semakin besar

dengan anggapan komponen yang teradsorpsi dapat memasuki rongga porinya.

Selain itu makin banyak jumlah adsorben akan memberi kesempatan kontak yang

makin besar dengan molekul-molekul adsorbat (Sembodo, 2006).

Jenis-jenis adsorben yang termasuk kedalam kelompok tanah pemucat

antara lain atapulgit, montmorilonit, bentonit, dan zeolit. Selain tanah pemucat,

adsorben lain yang digunakan adalah karbon atau silika yang sudah diaktivasi

(Estiasih, 2009). Adsorben bentonit, zeolit, dan karbon aktif telah digunakan untuk

21

pemurnian minyak goreng bekas oleh Wardani (2014), pemurnian minyak kayu

putih oleh Hesty (2013), serta digunakan untuk pemucatan minyak hasil

pengalengan dan penepungan tuna oleh Budiadnyani (2015) dengan ukuran

partikel 60-100 mesh konsentrasi 5, 10, 15%.

2.6.1. Adsorben Zeolit

Zeolit adalah mineral kristal alumina silikat berpori terhidrat yang

mempunyai struktur kerangka tiga dimensi terbentuk dari tetrahedral [SiO4]4- dan

[AlO4]5-. Kedua tetrahedral tersebut dihubungkan oleh atom-atom oksigen,

menghasilkan struktur tiga dimensi terbuka dan berongga yang didalamnya diisi

oleh atom-atom logam biasanya logam-logam alkali atau alkali tanah dan molekul

air yang dapat bergerak bebas (Breck, 1974; Chetam, 1992; Scot et al., 2003

dalam Laila, 2016). Secara sistematik struktur kerangka zeolit tertera pada

Gambar 2.10.

Gambar 2. 10 Struktur Kerangka Zeolit

(Sumber: Astutik, 2012)

Zeolit merupakan adsorben yang unik, karena memiliki ukuran pori yang

sangat kecil dan seragam jika dibandingkan dengan adsorben yang lain seperti

karbon aktif dan silika gel, sehingga zeolit hanya mampu menyerap molekul-

molekul yang berdiameter sama atau lebih kecil dari diameter celah rongga,

sedangkan molekul yang diameternya lebih besar dari pori zeolit akan tertahan

dan hanya melintasi antar partikel. Dalam keadaan normal ruang hampa dalam

kristal zeolit terisi oleh molekul air yang berada disekitar kation. Bila zeolit

dipanaskan maka air tersebut akan keluar. Zeolit yang telah dipanaskan dapat

berfungsi sebagai penyerap gas atau cairan (Khairinal, 2000). Zeolit memiliki sifat

fisik dan kimia yaitu derajat hidrasi tinggi, ringan, penukar ion yang tinggi, ukuran

saluran yang uniform, menghantar listrik, mengadsorbsi uap dan gas, mempunyai

sifat katalitik (Sutarti, 1994).

22

Zeolit dengan kemampuan yang tinggi diperoleh melalui aktivasi. Aktivasi

zeolit alam dapat dilakukan baik secara fisika maupun secara kimia. Aktivasi

secara fisika dilakukan melalui pengecilan ukuran butir, pengayakan, dan

pemanasan pada suhu tinggi, tujuannya untuk menghilangkan pengotor-pengotor

organik, memperbesar pori, dan memperluas permukaan. Sedangkan aktivasi

secara kimia dilakukan melalui pengasaman. Tujuannya untuk menghilangkan

pengotor anorganik. Pengasaman ini akan menyebabkan terjadinya pertukaran

kation dengan H+ (Ertan, 2005).

2.6.2. Adsorben Bentonit

Bentonit merupakan istilah dalam dunia perdagangan untuk clay yang

mengandung monmorilonit. Kandungan utama bentonit adalah mineral

monmorilonit (80%). Bentonit berasal dari perubahan hidrotermal dari abu vulkanik

yang disimpan dalam berbagai air tawar (misalnya, danau alkali) dan cekungan

laut (fosil laut yang melimpah dan batu kapur), ditandai dengan energi

pengendapan yang rendah oleh lingkungan dan kondisi iklim sedang (Utracki,

2004). Mineral-mineral montmorillonit umumnya berupa butiran halus/ sedang,

lapisan-lapisan penyusunnya tidak terikat dengan kuat. Dalam kontaknya dengan

air, mineral-mineral tersebut menunjukkan pengembangan antar lapis yang

menyebabkan volumenya meningkat menjadi dua kali lipat atau lebih. Potensi

mengembang dan mengerut, dan adanya muatan negatif yang tinggi merupakan

penyebab mineral ini dapat menerima dan menyerap ion-ion logam serta kation-

kation organik (Arifin dan Sudrajat, 1997).

Bentonit merupakan mineral alumina silikat hidrat yang termasuk dalam

pilosilikat, atau silikat berlapis yang terdiri dari jaringan tetrahedral (SiO4)2- yang

terjalin dalam bidang tak hingga membentuk jaringan anion (SiO3)2- dengan

perbandingan Si/O sebesar 2/5 (Megawati, 2008). Adanya atom-atom yang terikat

pada masing-masing lapisan struktur montmorillonit memungkinkan air atau

molekul lain masuk di antara unit lapisan. Akibatnya kisi akan membesar pada

arah vertikal. Selain itu karena adanya pergantian atom Si oleh Al menyebabkan

terjadinya penyebaran muatan negatif pada permukaan bentonit. Bagian inilah

yang disebut sisi aktif (active site) dari bentonit dimana bagian ini dapat menyerap

kation dari senyawa-senyawa organik atau dari ion-ion senyawa logam (Zamroni

dan Las, 2003). Struktur bentonit dapat dilihat pada Gambar 2.11.

23

Menurut (Megawati ,2008), bentonit dibagi dua yaitu:

a. Natrium Bentonit

Bentonit jenis ini disebut juga bentonit type Wyoming atau drilling bentonit

mengandung ion Na+ relative lebih banyak jika dibandingkan dengan ion Ca2+

dan

ion Mg2+

. Natrium bentonit mempunyai sifat mengembang apabila dicelupkan ke

dalam air hingga delapan kali lipat dari volume semula, sehingga keadaan

suspensi akan lebih kental. pH suspensi bernilai 8,5-9,8 (bersifat basa). Mineral ini

sering dipergunakan untuk lumpur pemboran, penyumbat kebocoran bendungan,

bahan pencampur pembuatan cat, bahan baku farmasi, dan perekat pasir cetak

pada industri pengecoran logam.

b. Kalsium bentonit

Bentonit jenis ini disebut Mg, Ca-bentonit. Jenis ini mengandung kalsium (CaO)

dan magnesium (MgO) lebih banyak dibandingkan natriumnya dan mempunyai

sifat sedikit menyerap air sehingga apabila didipersikan dalam air akan cepat

mengendap (tidak membentuk suspensi). pH kalsium bentonit 4,0-7,0 (bersifat

asam). Mineral ini dipergunakan untuk bahan pemucat warna untuk minyak.

Kemampuan adsorpsi bentonit terbatas namun dapat diatasi melalui

proses aktivasi menggunakan asam (HCl, H2SO4 dan HNO3) sehingga dihasilkan

lempung dengan kemampuan adsorpsi yang lebih tinggi (Bath et al., 2012).

Gambar 2. 11 Bentonit (a) Diagram skematik struktur montmorrilonite (Lambe, 1953).

(b) Struktur atom montmorrilonite (Grim, 1959 dalam Chittoori, 2008).

24

2.6.3. Adsorben Karbon Aktif

Karbon aktif merupakan karbon amorf dari pelat-pelat datar disusun oleh

atom-atom C yang terikat secara kovalen dalam suatu kisi heksagonal datar

dengan satu atom C pada setiap sudutnya. Berasal dari bahan-bahan yang

mengandung karbon yang diperlakukan dengan proses aktivasi. Luas permukaan

arang aktif berkisar antara 300-3500 m2/gram. Arang aktif dapat mengadsorpsi gas

dan senyawa-senyawa kimia tertentu, tergantung pada besar atau volume dan

luas permukaan pori-pori. Daya serap arang aktif sangat besar, yaitu 25-100%

terhadap berat arang aktif (Sembiring dan Sinaga, 2003). Volume pori-pori karbon

aktif biasanya lebih besar dari 0,2 cm3/gram dan bahkan terkadang melebihi 1

cm3/gram (Pujiyanto, 2010). Menurut Lempang (2014), Sifat dari karbon aktif

antara lain:

A. Sifat Kimia

Arang aktif tidak hanya mengandung atom karbon saja, tetapi juga

mengandung sejumlah kecil oksigen dan hidrogen yang terikat secara kimia dalam

bentuk gugus-gugus fungsi yang bervariasi, misalnya gugus karbonil (CO),

karboksil (COO), fenol, lakton, dan beberapa gugus eter. Oksigen pada

permukaan arang aktif, kadang-kadang berasal dari bahan baku atau dapat juga

terjadi pada proses aktivasi dengan uap (H2O) atau udara. Keadaan ini biasanya

dapat menyebabkan arang bersifat asam atau basa (Brennan et al., 2001). Pada

umumnya bahan baku arang aktif mengandung komponen mineral. Komponen ini

menjadi lebih pekat selama proses aktivasi arang.

B. Sifat Fisika

Arang aktif berupa padatan yang berwarna hitam, tidak berasa, tidak

berbau, bersifat higroskopis, tidak larut dalam air, asam, basa ataupun pelarut-

pelarut organik (Hassler, 1974). Di samping itu, arang aktif juga tidak rusak akibat

pengaruh suhu maupun penambahan pH selama proses aktivasi.

Struktur karbon aktif digambarkan sebagai jaringan yang tumpang tindih,

karbon dapat menyerap substansi terlarut ke dalam porinya. Ada banyak dari

dataran lapisan karbon dengan ikatan silang oleh gugus jembatan alifatik. Hal ini

memeberikan suatu sifat yang unik, disebut struktur pori internal yang mudah

dipenetrasi (Agustina, 2006). Struktur karbon aktif dapat dilihat pada Gambar 2.12.

25

Gambar 2.12 Ilustrasi Struktur Kimia Karbon Aktif (Sudibandriyo, 2003)

Keistimewaan lain dari karbon aktif adalah gugus fungsional pada

permukaannya. Gugus kompleks oksigen di permukaan karbon aktif akan

membuat permukaan karbon aktif menjadi reaktif secara kimiawi dan menentukan

sifat adsorpsinya seperti sifat hidrofobik, keasaman dan potensial negatif. Adsorpsi

oleh karbon aktif bersifat fisik, artinya adsorpsi terjadi jika gaya tarik Van der Waals

oleh molekul-molekul di permukaan lebih kuat daripada gaya tarik yang menjaga

adsorbat tetap berada dalam fluida. Sifat ini menguntungkan karena karbon aktif

dapat dipakai ulang melalui proses regenerasi (Roop et al., 2005). Jenis-jenis

arang aktif berdasarkan perbedaan yang dipertimbangkan dalam pembuatan dan

penggunaan karbon aktif menurut Kirk-othmer (1992) adalah sebagai berikut:

1. Fase liquid

Karbon-karbon aktif umumnya ringan dan halus berbentuk seperti serbuk.

2. Fase atau Penyerap uap

Karbon-karbon aktifnya keras, berbentuk butiran atau pil.

2.7. RSM (Response Surface Methodology)

RSM merupakan teknik statistik dan matematik yang digunakan untuk

pengembangan, perbaikan dan optimasi proses dalam respon utama yang

diakibatkan oleh beberapa variabel dan tujuannya adalah optimasi respon (Bas

and Boyaci, 2007). RSM dapat digunakan pada beberapa desain dasar

diantaranya Central Composite Design (CCD). CCD dipilih karena memiliki

rotatability atau pada semua titik x yang berada pada jarak yang sama dari titik

tengah desain akan memiliki nilai (y(x)) yang sama. Hal ini penting karena tujuan

dari RSM adalah untuk optimasi dan lokasi yang optimal tidak diketahui sehingga

dibutuhkan suatu desain yang menyediakan presisi perkiraan yang tinggi di semua

arah. CCD rotatable dengan adanya α. Nilai α tergantung dari jumlah titik pada

bagian factorial desainnya. Pada umumnya, α= (nf)1/4 dimana nf adalah jumlah

titik uji yang digunakan pada bagian faktorial desain (Subangkit, 2012).

26

Model yang baik sebaiknya memenuhi beberapa kriteria yaitu signifikansi

model, signifikansi lack of fit, adjusted R-square, dan predicted R-square. Kriteria-

kriteria tersebut dapat dilihat pada analisis ragam atau ANOVA. Signifikansi model

dilihat dari nilai probabilitas atau Prob>F. Probabilitas merupakan peluang atau

probability nilai F. Nilai probabilitas tersebut didapatkan dari tabel probabilitas pada

derajat bebas error dan derajat model tertentu yang menunjukkan letak nilai F.

Nilai F merupakan hasil perhitungan dari mean square atau rataan kuadrat dibagi

dengan rataan error kuadrat atau residual mean square. Jika nilai probabilitas

kurang dari nilai α (5%) maka dapat dikatakan faktor berpengaruh nyata atau

signifikan terhadap respon pada taraf signifikansi 5%. Lack of fit menunjukkan

ketidaksesuaian model dengan data. Jika nilai lack of fit kurang dari nilai α (5%)

atau signifikan maka model dikatakan tidak sesuai dengan data yang ada. Model

yang baik memiliki nilai lack of fit yang tidak signifikan atau lebih dari nilai α (5%).

Hal tersebut menunjukkan bahwa model yang didapatkan sesuai dengan data

yang ada atau dapat memodelkan data secara tepat (Montgomery, 2001).

Adjusted R-square dan predicted R-square merupakan R-square atau R2.

R-square atau R2 menunjukkan variasi data disekitar rataan data yang dijelaskan

oleh model dalam hal ini model atau persamaan masing-masing respon sensori.

Jika nilai R-square atau R2 tinggi (mendekati 1) maka data tidak terlalu bervariasi

atau sedikit pencilan (outlier). Adjusted R-square adalah R-square hitung

berdasarkan data yang diperoleh sedangkan predicted R-square adalah R-square

prediksi. Jika selisih nilai kedua R2 kurang atau sama dengan 2 maka dikatakan

data in reasonable agreement yang berarti tidak banyak data pencilan atau nilai

respon prediksi sesuai dengan nilai respon aktual sehingga model yang diperoleh

dapat memodelkan data dengan baik (Montgomery, 2001).

PRESS atau Predicted Residual Sum of Squares merupakan jumlah

kuadrat residu prediksi yang digunakan untuk memperkirakan jumlah kuadrat

residu setiap titik uji. Total SS atau sum of square merupakan total jumlah kuadrat

deviasi yang diperoleh pada analisis ragam. Jika nilai PRESS lebih besar dari nilai

total SS maka nilai predicted R-square menjadi bernilai negatif (-). Hal tersebut

secara tidak langsung menunjukkan data yang diperoleh lebih tidak bervariasi dari

prediksi. SS error adalah jumlah kuadrat deviasi residu. SS model adalah jumlah

kuadrat deviasi model. Df merupakan derajat bebas. Selain keempat kriteria

tersebut, ada kriteria tambahan yaitu Adeq Precision. Adeq Precision atau

adequate precision merupakan ukuran rentang nilai respon prediksi yang

27

dihubungkan dengan error. Nilai Adequate Precision menunjukkan presisi data.

Nilai adeq Precision yang baik adalah lebih dari 4 yang berarti presisinya baik

(Montgomery, 2001).

28

III METODE PENELITIAN

3.1. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan pada bulan Agustus 2016-Maret 2017. Tempat yang

digunakan untuk penelitian antara lain:

1. Laboratorium Rekayasa dan Pengolahan Pangan Hasil Pertanian, Jurusan

Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas

Brawijaya.

2. Laboratorium Kimia dan Biokimia Pangan Hasil Pertanian Jurusan Teknologi

Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya.

3. Laboratorium Instrumen Analitik, Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas

Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya.

4. Laboratorium Kimia Organik, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam, Universitas Gajah Mada.

3.1.1. Alat dan Bahan

3.1.2. Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain corong pemisah, bulb,

tube centrifuge, spatula, pengaduk kaca, botol kaca gelap, color reader (merk

Minolta CR-100), sentrifuse, thermometer, hot plate stirrer, baskom, plastik,

desikator (merk Simax), oven listrik (merk Memmert tipe U,30 kapasitas 2200C),

perangkat titrasi (merk Metrohm Herisau Multi Burrete E 485), kurs porselin, cawan

petri, kompor listrik (merk Maspion), corong, vortex, timbangan analitik (merk

Denver Instrument M 310 dan Mettler Toledo), refrigerator (merk Electrolux),

thermometer, shaker water bath (merk Memmert), gelas ukur 100 ml (merk Pyrex),

labu ukur 500 ml, pipet tetes, pipet ukur 1 ml, 5 ml, 10 ml (merk Pyrex), gelas

beaker 50 ml, 250 ml, 500 ml (merk Pyrex), Erlenmeyer 250 ml (merk Pyrex),

tabung reaksi (merk Pyrex), aluminium foil, tisu, kertas label, kertas saring,

spektrofotometer visible (merk oLabomed), spektrofotometer UV-Vis (merk

Shimadzu).

3.1.3. Bahan

Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah minyak ikan hasil

samping pengalengan lemuru yang diambil tanggal 25 Juli 2016 dari industri

29

pengolahan ikan lemuru PT Visindo di Kabupaten Banyuwangi. Minyak ikan

dimasukan dalam botol cokelat yang tidak tembus cahaya dan tertutup rapat.

Pencegahan terhadap oksidasi dilakukan dengan cara menyimpan sampel di

freezer (atau suhu minus 3-40C) (Boran et al., 2006). Bahan kimia yang digunakan

untuk proses degumming yaitu asam fosfat 85% (teknis). Bahan kimia yang

digunakan untuk proses netralisasi yaitu NaOH 14,36% (teknis), akuades. Bahan

yang digunakan untuk proses bleaching yaitu adsorben zeolit yang berbentuk

granul, bentonit jenis kalsium bentonit yang berbentuk serbuk, dan arang aktif yang

berbentuk serbuk. Adsorben zeolit dan bentonit yang dibeli di toko Panadia dalam

keadaan belum aktif sehingga harus diaktivasi terlebih dahulu, sedangkan karbon

aktif sudah siap pakai.

Bahan kimia yang digunakan untuk analisa kadar ALB dan bilangan asam

yaitu bahan analisa dengan kemurnian p.a (pro analysis) antara lain: NaOH 0,1 N

dan etanol 95% (Merck), kecuali bahan kimia indikator phenolphthalein.

Bahan kimia yang digunakan untuk analisa kadar air yaitu toluena teknis.

Bahan kimia yang digunakan untuk analisa bilangan peroksida dengan

kemurnian p.a yaitu benzene, metanol, H2O2, amonium tiosianat, ferro sulfat, HCl

37%, FeCl3.6H2O dan HCl 10 N (Merck) sedangkan bahan analisa dengan

kemurnian teknis adalah akuades.

Bahan kimia yang digunakan untuk analisa bilangan anisidin dengan

kemurnian p.a adalah reagen p-anisidin, kecuali bahan dengan kemurnian teknis

yaitu akuades.

Bahan kimia yang digunakan untuk analisa senyawa bioaktif dengan GC-

MS EPA dan DHA dengan kemurnian p.a adalah metil klorida, NaOH 0,5 N, BF3

14%, metanol, dan akuades.

3.2. Rancangan Percobaan

Metode yang digunakan untuk optimasi bleacing menggunakan adsorben

pada penelitian ini adalah metode RSM (Response Surface Metodology) dalam

program Design Expert DX 7.1.5 dengan rancangan CCD (Central Composite

Design) karena metode ini dianggap sebagai metode paling efektif digunakan

dalam optimasi dan monitoring proses pengolahan makanan (Granato et al, 2014).

Optimasi dilakukan pada pemucatan MHS (Minyak Hasil Samping) pengalengan

lemuru dengan menggunakan 3 jenis adsorben yang sudah diaktivasi yaitu

bentonit, zeolit, dan arang aktif. Dalam penelitian ini terdapat tiga faktor yaitu suhu

30

(50, 70 dan 900C) yang dinyatakan sebagai variabel X1, lama pemucatan (5, 10,

dan 15 menit) sebagai variabel X2, dan konsentrasi adsorben (5, 10, dan 15% b/b)

sebagai variable X3. Melalui tiga peubah tersebut, maka ditentukan nilai-nilai tiap

level dan dibuat desain matriks untuk penentuan kondisi terbaik yang menjadi titik

optimal pada setiap faktor. Tiga faktor tersebut telah diketahui nilainya dari

penelitian terdahulu/ studi literatur. Respon yang diharapkan dari penelitian ini

yaitu kecerahan (L) dengan nilai maksimum dan kejernihan (Absorbansi) yang

memiliki nilai minimum. Kejernihan diukur menggunakan spektrofotometer

sehingga didapatkan nilai absorbansi, yang mana nilai absorbansi yang rendah

menandakan bahwa sedikit pengotor yang terdapat di dalam minyak sehingga

semakin jernih. Besarnya kemampuan pemucatan berbanding terbalik dengan

nilai absorbansi yang diberikan, minyak dengan absorbansi yang rendah setelah

pemucatan berarti bahwa daya pemucatan adsorbennya tinggi. Kombinasi dari

perlakuan (X1, X2, X3) dapat dilihat pada Tabel 3.2 sesuai dengan Rancangan

Komposit Pusat (Montgomery, 2001) ordo kedua untuk tiga faktor.

Tabel 3. 1 Variabel Rancangan Percobaan untuk Masing-Masing Adsorben

Variabel -1,682 -1 0 +1 +1,682

Suhu (0C) X1 36,36 50 70 90 103,64 Waktu (menit) X2 3,18 10 20 30 36,82 Konsentrasi (%) X3 1,59 5 10 15 18,41

Tabel 3. 2 Rancangan Percobaan Metode Permukaan Respon

Std

Variabel Sebenarnya Variabel Terkode Respon

Suhu

(0C) Waktu (Menit)

Konsentrasi (% B/B)

X1 X2 X3 Kecerahan

(L)

Kejernihan (Absorbansi λ 660 nm)

1 50 10 5 -1 0 -1 2 90 10 5 +1 0 -1 3 50 30 5 -1 +1 -1 4 90 30 5 +1 +1 -1 5 50 10 15 -1 0 +1 6 90 10 15 +1 0 +1 7 50 30 15 -1 +1 +1 8 90 30 15 +1 +1 +1 9 36,36 20 10 -1,68 0 0

10 103,64 20 10 1,68 0 0 11 70 3,18 10 0 -1,68 0 12 70 36,82 10 0 1,68 0 13 70 20 1,59 0 0 -1,68 14 70 20 18,41 0 0 1,68 15 70 20 10 0 0 0 16 70 20 10 0 0 0 17 70 20 10 0 0 0 18 70 20 10 0 0 0 19 70 20 10 0 0 0 20 70 20 10 0 0 0

31

Dipanaskan sampai suhu 700C dalam shaker

Waterbath

3.3. Pelaksanaan Penelitian

3.3.1. Aktivasi Asorben Bentonit dan Zeolit

Aktivasi bentonit dilakukan dengan cara 320 g bentonit direndam dalam 1L

larutan H2SO4 34% selama 7 jam kemudian dicuci akuades hingga netral, setelah

netral dipanaskan suhu suhu 900C hingga kering (Makhoukhi et al., 2009). Aktivasi

zeolit dilakukan dengan cara 500 g zeolit direndam dalam 300 ml larutan HCl 25%

selama 2 jam kemudian dicuci akuades hingga netral, setelah netral dipanaskan

suhu 3000C selama 3 jam (Ahmadi, 2007).

3.3.2. Degumming

Proses penghilangan gum dilakukan dengan cara minyak hasil samping

diaduk terlebih dahulu, ditimbang sebanyak 250 gram dalam gelas kimia (beaker

glass) 250 ml kemudian dipanaskan sampai suhu 700C. Setelah itu ditambahkan

asam fosfat dengan konsentrasi 85% (v/v) sejumlah 1% dari berat minyak dan

dilakukan pengadukan selama 30 menit pada suhu 800C, minyak kemudian

didinginkan pada suhu kamar selama ± 15 menit. Setelah itu akan terbentuk tiga

lapisan yaitu minyak kotor, gum, dan air yang selanjutnya dipisahkan dengan cara

disentrifugasi dengan kecepatan 5.000 rpm. Proses degumming minyak kasar

secara ringkas dapat dilihat pada Gambar 3.1 berikut ini.

250 gram MHS pengalengan lemuru

Asam fosfat 85% v/v (1% jumlah MHS)

Diaduk selama 30 menit pada suhu 800C

Didinginkan selama 15 menit

Minyak Hasil Degumming

Dipisahkan Minyak, air dan gum dengan cara

disentrifugasi (5000 rpm) selama 10 menit

Gambar 3.1 Diagram alir degumming (Estiasih, 2009)

32

3.3.3. Netralisasi

Minyak yang dihasilkan dari proses degumming ditimbang sebanyak 250

gram dalam gelas kimia (beaker glass) 250 ml kemudian dipanaskan hingga suhu

minyak mencapai 600C sambil diaduk perlahan-lahan. Setelah suhu tercapai,

dimasukkan larutan NaOH yang telah ditentukan jumlahnya sesuai perhitungan

berbasis kadar asam lemak bebas, kemudian dipanaskan sampai suhu 700C

sambil diaduk dengan cepat selama 10 menit. Setelah pencampuran selesai,

minyak dipisahkan dari sabun dengan corong pemisah dan didinginkan hingga

suhu minyak ± 400C. Jika minyak sulit untuk dipisahkan, dilakukan sentrifugasi

selama 15 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Setelah pemisahan sabun

dilakukan pencucian minyak dengan cara disemprot air panas sampai minyak

bebas dari sabun. Pencucian dilakukan dengan menambahkan air hangat bersuhu

70-80ºC sebanyak 5% dari bobot minyak, dikocok kuat-kuat dan didiamkan sampai

air cucian terpisah dari minyak (± 24 jam). Pencucian dilakukan berulang hingga

diperoleh air cucian yang netral. Setelah pencucian selesai, minyak didiamkan

selama 24 jam di dalam corong pemisah, kemudian dipisahkan antara air, sabun

dan minyak yang diperoleh.

Penentuan jumlah NaOH dilakukan dengan melakukan analisis kandungan

asam lemak bebas dari sampel MHS yang telah dihilangkan kandungan gumnya.

Analisis asam lemak bebas (ALB) dapat dilihat di lampiran 1. Jumlah NaOH yang

ditambahkan pada minyak pada proses netralisasi dinyatakan sebagai treat dan

perhitungannya dapat dilihat pada lampiran 2. Proses netralisasi minyak hasil

degumming secara ringkas dapat dilihat pada Gambar 3.2.

33

250 gram Minyak Hasil Degumming

Diaduk selama 10 menit,

suhu dinaikan sampai

700C

Dipanaskan sampai suhu

600C

Didinginkan selama 15

menit

Dipisahkan air dengan

minyak

Didiamkan selama 24 jam

Dimasukkan ke dalam

corong pemisah

Dicuci dengan air hangat

(t 700C, 5% bobot

minyak)

Air cucian dicek dengan

kertas lakmus

Ya

Minyak hasil Netralisasi

Air cucian

netral Tidak

Larutan NaOH 14,36% (sesuai perhitungan)

Gambar 3.2 Diagram alir proses Netralisasi (Estiasih, 2009)

34

3.3.4. Pemucatan (Bleaching)

Proses bleaching dilakukan dengan cara menimbang minyak ikan setelah

dinetralisasi sebanyak 25 gram dalam erlenmeyer 25 ml kemudian dipanaskan

hingga mencapai suhu yang diinginkan dan ditambahkan adsorben dengan jenis

yang telah ditentukan. Adsorben bentonit, zeolit, dan arang aktif yang telah

diaktivasi dan diayak menggunakan ayakan 60 mesh dioven terlebih dahulu satu

jam kemudian didinginkan dalam desikator selama 15 menit sebelum digunakan,

setelah itu masing-masing adsorben ditimbang dan dimasukkan kedalam 25 gram

minyak dengan konsentrasi tertentu. Setelah minyak dan adsorben tercampur

dilakukan pengadukan campuran minyak dan adsorben pada suhu dan waktu

tertentu dalam shaker waterbath. Minyak ikan dengan adsorben bentonit, zeolit,

dan arang aktif diberi kondisi panas, waktu pengadukan, dan konsentrasi adsorben

sesuai perlakukan optimasi dalam RSM (Response Surface Methodology) Tabel

3.2. Selanjutnya campuran minyak dan adsorben tersebut dipisahkan melalui

sentrifugasi pada kecepatan 5.000 rpm selama 10 menit pada suhu ruang (±

290C).

Minyak ikan yang telah dipisahkan dari adsorben dianalisis respon berupa

kecerahan (L) yang diukur menggunakan color reader dan kejernihan (Absorbansi)

yang diukur menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 500-700

nm yang didasarkan pada warna minyak awal yang hitam kemerahan hingga

didapatkan hasil dengan nilai absorbansi yang paling besar dan panjang

gelombangnya dicatat sebagai panjang gelombang optimum. Spektrofotometer

non Uv-Vis memiliki nilai absorbansi tertinggi 1,999 sehingga penentuan λ

dilakukan dengan cara memilih panjang gelombang saat menunjukkan nilai

absorbansi 1,999 kemudian jika menggunakan di bawah panjang gelombang

tersebut nilai absorbansi

35

3.3.5. Verifikasi Data Kondisi Optimum

Verifikasi merupakan tindakan pengecekan apakah hasil dari perhitungan

suhu, waktu, dan konsentrasi yang optimum dalam RSM pada proses pemucatan

25 gram minyak hasil

Netralisasi

Dipanaskan pada suhu dan waktu

sesuai rancangan RSM

menggunakan shaker waterbath

Disentrifuge 5.000 rpm 10

menit

Minyak Hasil Bleaching

Didinginkan selama 15

menit

Adsorben sesuai

rancangan RSM (b/b)

Analisis:

-kecerahan (L)

-kejernihan (Absorbansi)

Analisis:

-kecerahan (L)

-kejernihan (Absorbansi)

-kadar asam lemak bebas

-bilangan peroksida

-bilangan p-anisidin

-bilangan total oksidasi

-bilangan asam

-kadar air

-uji komposisi asam lemak

dengan gc-ms

-rendemen

Verifikasi sesuai prediksi

RSM

Minyak Hasil Bleaching

Kondisi Optimum

Gambar 3.3 Diagram alir proses Bleaching (Estiasih, 2009).

36

dapat memberikan respon (kecerahan (L) dan kejernihan (Absorbansi)) yang

optimum juga. Verifikasi dilakukan dengan bleaching minyak hasil samping

pengalengan lemuru menggunakan tiga jenis adsorben dengan suhu, waktu, dan

konsentrasi sesuai hasil prediksi model sebanyak dua kali ulangan kemudian

dilakukan analisa kecerahan (L) dan kejernihan (Absorbansi). Perbandingan

ketetapan antara prediksi dan hasil penelitian didasarkan pada nilai PI (Prediction

Interval) dan CI (Confident Interval) pada taraf signifikasi 5%, jika hasilnya tidak

berbeda nyata (tingkat kesalahan

37

3.4.3. Analisa Data

Data hasil pengamatan dianalisis menggunakan metode permukaan

respon diolah dengan program software Design Expert 7.1.5. trial version. Tahap

pertama dalam menentukan kondisi optimum yaitu pemilihan model statistika

untuk menentukan model yang sesuai dalam menggambarkan fenomena

signifikasi dari hasil penelitian. Pemilihan model dilakukan berdasarkan uraian

jumlah kuadrat (Sequential Model Sum of Squares) dan ringkasan model statistik

(Summary of Statistic). ‘Sequential Model Sum of Squares’ didasarkan pada nilai

tertinggi derajat polinomial dengan syarat model diterima apabila nilai p

38

IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Optimasi Bleaching Menggunakan Adsorben Bentonit

Data hasil pengamatan respon kecerahan (L) dan Kejernihan (Absorbansi)

dari minyak hasil samping pengalengan lemuru yang telah diberi perlakuan

pemucatan (bleaching) menggunakan adsorben bentonit disajikan lengkap pada

Tabel 4.1.

Tabel 4. 1 Data Hasil Pemucatan dengan Bentonit

Std

Variabel Sebenarnya Variabel Terkode Respon

Suhu

(0C) Waktu (Menit)

Konsentrasi (% B/B)

X1 X2 X3 Kecerahan

(L)

Kejernihan (Absorbansi λ 660 nm)

1 50 10 5 -1 0 -1 24,90 0,76 2 90 10 5 +1 0 -1 25,30 0,60 3 50 30 5 -1 +1 -1 25,83 0,96 4 90 30 5 +1 +1 -1 25,56 1,76 5 50 10 15 -1 0 +1 25,16 1,90 6 90 10 15 +1 0 +1 24,60 0,68 7 50 30 15 -1 +1 +1 25,36 0,97 8 90 30 15 +1 +1 +1 25,03 0,59 9 36,36 20 10 -1,68 0 0 24,70 0,43

10 103,64 20 10 1,68 0 0 25,70 0,56 11 70 3,18 10 0 -1,68 0 23,93 1,38 12 70 36,82 10 0 1,68 0 23,80 0,63 13 70 20 1,59 0 0 -1,68 26,33 0,53 14 70 20 18,41 0 0 1,68 26,06 0,51 15 70 20 10 0 0 0 26,46 0,49 16 70 20 10 0 0 0 26,30 0,55 17 70 20 10 0 0 0 26,56 0,52 18 70 20 10 0 0 0 25,96 0,51 19 70 20 10 0 0 0 26,13 0,52 20 70 20 10 0 0 0 26,30 0,50

4.1.1. Optimasi Bleaching Menggunakan Adsorben Bentonit Respon

Kecerahan (L)

Data hasil pengamatan (Tabel 4.1) menunjukkan bahwa perlakuan titik

pusat yaitu suhu proses 700C selama 20 menit dengan konsentrasi adsorben 10%

menghasilkan respon kecerahan (L) tertinggi jika dibandingkan dengan respon

pada perlakuan lainnya. Selanjutnya dilakukan analisis pemilihan model yang

dapat dilihat pada Tabel 4.2.

39

Tabel 4.2 Sequential Model Sum of Squares Bleaching dengan Bentonit Respon Kecerahan (L)

Sum of Squares Df

Mean Square F Value

p-value Prob > F

Mean 0,02 1,00 0,02 Linear 0,51 3,00 0,17 0,22 0.8786 2FI 0,20 3,00 0,07 0,07 0.9743 Quadratic 10,72 3,00 3,57 28,43 < 0.0001 Suggested Cubic 0,89 4,00 0,22 3,58 0.0801 Aliased

Residual 0,37 6,00 0,06 Total 12,70 20,00 0,64

Berdasarkan analisis Sequential Model Sum of Squares, didapatkan hasil

bahwa model yang dapat dipilih untuk menggambarkan fenomena pengaruh suhu,

waktu, dan konsentrasi adsorben bentonit terhadap respon Kecerahan (L) adalah

desain model kuadratik. Model kuadratik pada optimasi adsorben bentonit memiliki

nilai p sebesar

40

berarti menunjukkan adanya korelasi positif atau keeratan hubungan antara faktor

suhu, waktu, konsentrasi adsorben terhadap respon kecerahan (L) sebesar 81%.

Setelah selesai pemilihan model, dilakukan analisis ragam (ANOVA) respon

kecerahan (L) yang dapat dilihat pada Tabel 4.4.

Tabel 4. 4 ANOVA Bleaching dengan Bentonit Respon Kecerahan (L)

Source Sum of Squares Df

Mean Square F Value

p-value Prob > F

Model 11,43 9 1,27 10,10 0.0006 Significant A-SUHU 0,06 1 0,06 0,49 0.5008 not significant B-WAKTU 0,19 1 0,19 1,51 0.2475 not significant C-KONSENTRASI 0,26 1 0,26 2,06 0.1814 not significant AB 0,02 1 0,02 0,19 0.6748 not significant AC 0,13 1 0,13 1,06 0.3270 not significant BC 0,04 1 0,04 0,32 0.5844 not significant A2 1,68 1 1,68 13,39 0.0044 Significant B2 9,53 1 9,53 75,82 < 0.0001 Significant C2 0,00 1 0,00 0,02 0.9021 not significant

Residual 1,26 10 0,13 Lack of Fit 1,02 5 0,20 4,30 0.0676 not significant

Pure Error 0,24 5 0,05

Cor Total 12,68 19 Keterangan: A: Variabel X1= suhu (50, 70 dan 900C)

B: Variabel X2= waktu pemucatan (5, 10, dan 15 menit) C: Variabel X3= konsentrasi adsorben (5, 10, dan 15% (b/b)). AB, AC, BC, A2, B2, C2: interaksi antar perlakuan

Model dengan nilai p sebesar 0,0006; nilai p suhu (kuadratik) sebesar

0,0044; waktu (kuadratik) sebesar

41

Berdasarkan hasil analisis ragam diperoleh persamaan L= 17,13 + 0,14X1 + 0,37X2

+ 0,08X3 -0,000271X1X2 – 0,001292X1X3 – 0,001417X2X3 – 0,000854X12 –

0,008132X22 + 0,000471X32.

Hubungan antara suhu, waktu, dan konsentrasi adsorben proses bleaching

terhadap respon kecerahan (L) dapat dilihat pada Gambar 4.1; 4.2; 4.3. Pada

gambar (a) kontur plot terlihat garis-garis kontur melengkung dengan titik merah di

daerah berwarna oranye menunjukkan nilai respon kecerahan (L) yang dihasilkan

semakin besar. Kombinasi faktor dengan nilai yang berbeda akan menghasilkan

respon yang sama sepanjang garis kontur yang sama pula. Gambar (b) kurva tiga

dimensi berbentuk parabola terbuka ke bawah menunjukkan model kuadratik yang

mana semakin tinggi nilai kecerahan (L) akan naik namun di saat tertentu akan

turun.

(a) (b) Gambar 4.1 (a) Kontur Plot dan (b) Kurva 3D Pengaruh Suhu dan Waktu Bleaching

dengan Bentonit terhadap Respon Kecerahan (L)

(a) (b)

Gambar 4.2 (a)Kontur Plot dan (b)Kurva 3D Pengaruh Konsentrasi Adsorben Bentonit dan Suhu Bleaching dengan Bentonit terhadap Respon Kecerahan (L)

42

(a) (b) Gambar 4.3 (a) Kontur Plot dan (b) Kurva 3D Pengaruh Konsentrasi Adsorben Bentonit

dan Waktu Bleaching dengan Bentonit terhadap Respon Kecerahan (L)

Suhu dan waktu memberi pengaruh signifikan (Tabel 4.4) terhadap respon

kecerahan (L) yang juga ditunjukkan pada Gambar 4.1 kontur plot kurva terdapat

gradasi warna dari hijau ke oranye lalu ke hijau kembali pada faktor waktu dan

gradasi warna dari kuning ke oranye lalu ke kuning kembali pada faktor suhu.

Gambar 4.1 3D menunjukkan semakin tinggi suhu dan waktu akan meningkatkan

respon kecerahan (L) karena semakin tinggi suhu dan waktu mengakibatkan

destruksi karotenoid sehingga minyak menjadi pucat (Kaynak et al., 2004). Tidak

hanya warna yang terserap namun juga logam. Pada minyak ikan yang digunakan

mengandung pigmen heme yang terkompleks pada hemoglobin dan myoglobin

dan didalam pigmen tersebut terdapat mineral logam Fe yang dapat memacu

terjadinya oksidasi (Winarno, 2004).Selanjutnya pada saat yang hampir sama

respon menurun dikarenakan pigmen dalam minyak mudah teroksidasi yang

menyebabkan warna gelap pada suhu terlalu tinggi dan waktu pemanasan lama.

Minyak ikan lemuru mengandung senyawa karotenoid yang tinggi yaitu lunaxantin,

lutein dan zeaxantin (Sulistiawati dkk, 2000).

Konsentrsi adsorben tidak berpengaruh signifikan sedangkan suhu

memberi pengaruh signifikan (Tabel 4.4) terhadap respon kecerahan (L) yang juga

ditunjukkan pada Gambar 4.2 kontur plot kurva terdapat gradasi signifikan dari

warna kuning ke oranye lalu ke kuning kembali pada faktor suhu dan tidak terdapat

gradasi warna yang signifikan (dominan warna oranye) pada faktor konsentrasi.

Gambar 4.2 3D menunjukkan semakin tinggi suhu akan meningkatkan respon

karena pada suhu rendah hanya terjadi proses penyerapan fisik yang membentuk

lapisan ganda sedangkan saat suhu tinggi terjadi penyerapan fisik dan kimia yang

membentuk lapisan tunggal namun reaksinya bersifat irrevesible. Meskipun

43

penyerapan fisik dan kimia mungkin terjadi secara simultan pada suhu sedang,

namun lebih memberi pengaruh nyata saat suhu tinggi (Achife and Ibernesi, 1989).

Pada suhu yang terlalu tinggi kecerahan (L) menurun karena pigmen teroksidasi

yang menyebabkan warna gelap, sedangkan semakin tinggi konsentrasi akan

menurunkan nilai kecerahan karena kondisi jenuh saat pemberian adsorben yang

berlebihan sehingga tidak meningkatkan nilai respon. Menurut Dimic et al., (1994),

jumlah adsorben yang terlalu besar akan memicu kehilangan banyak tokoferol

yang mempengaruhi stabilitas minyak. Tokoferol merupakan sumber vitamin E

yang merupakan antioksidan alama sehingga efektif dalam melindungi minyak dari

oksidasi. Tokoferol yang teroksidasi akan menimbulkan warna coklat pada minyak

(Winarno, 2004).

Waktu memberi pengaruh signifikan sedangkan konsentrsi adsorben tidak

berpengaruh signifikan (Tabel 4.4) terhadap respon kecerahan (L) yang juga

ditunjukkan pada Gambar 4.3 kontur plot terdapat gradasi signifikan dari warna