nghiÊn cỨu nhÂn giỐng in vitro mỘt sỐ dÒng lan...
TRANSCRIPT
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
Nguyễn Thị Thu Thủy
NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO MỘT SỐ DÒNG
LAN HUỆ (Hippeastrum equestre)
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Hà Nội – 2014
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
Nguyễn Thị Thu Thủy
NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO MỘT SỐ DÒNG
LAN HUỆ (Hippeastrum equestre)
Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm
Mã số: 60420114
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:
PGS. TS. Nguyễn Trung Thành
Hà Nội – 2014
i
LỜI CẢM ƠN
Lời đầu tiên, em xin bày tỏ sự kính trọng và lòng biết ơn sâu sắc đến
PGS.TS. Nguyễn Trung Thành, thầy đã luôn tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em
trong suốt quá trình thực hiện và hoàn thành luận văn này.
Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới GS.TS. Nguyễn
Quang Thạch, TS. Nguyễn Hạnh Hoa và toàn thể tập thể cán bộ, nhân viên
trong Viện Sinh học Nông nghiệp, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã
nhiệt tình chỉ bảo, giúp đỡ, tạo điều kiện về cơ sở vật chất, chia sẻ kinh
nghiệm quý báu để em hoàn thành tốt đề tài này.
Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất tới gia đình, người
thân và bạn bè, những người luôn chia sẻ, động viên, giúp đỡ và góp ý cho
em trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài.
Em xin chân thành cảm ơn!
Hà Nội, ngày 05 tháng 12 năm 2014
Học viên
Nguyễn Thị Thu Thủy
ii
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
2,4-D 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid
BAP 6-benzylaminopurin
CV% Hệ số biến động (Correlation of Variance)
ĐC Đối chứng
IBA Indol butyric acid
MS Murashige và Skoog
LSD0,05 Leant Significant Difference P - 0,05
ND Nước dừa
α-NAA α-naphthylacetic acid
iii
MỤC LỤC
Trang
LỜI CẢM ƠN .......................................................................................................... i
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT.................................................................... ii
MỤC LỤC .............................................................................................................. iii
DANH MỤC BẢNG ................................................................................................. vi
DANH MỤC HÌNH ................................................................................................. vii
MỞ ĐẦU .................................................................................................................. 8
Chƣơng 1 - TỔNG QUAN ........................................ Error! Bookmark not defined.
1.1. Giới thiệu chung về cây Lan huệ .......................... Error! Bookmark not defined.
1.1.1. Đặc điểm thực vật học và phân bố của cây Lan huệError! Bookmark not defined.
1.1.2. Giá trị kinh tế và sử dụng ................................ Error! Bookmark not defined.
1.2. Một số phương pháp nhân giống vô tính cây Lan huệError! Bookmark not defined.
1.2.1. Phương pháp tách củ con ............................... Error! Bookmark not defined.
1.2.2. Phương pháp cắt lát ........................................ Error! Bookmark not defined.
1.2.3. Phương pháp nhân giống in vitro ................... Error! Bookmark not defined.
1.3. Quy trình sản xuất cây nuôi cấy mô ..................... Error! Bookmark not defined.
1.3.1. Lấy mẫu và xử lý mẫu ..................................... Error! Bookmark not defined.
1.3.2. Tái sinh mẫu nuôi cấy ..................................... Error! Bookmark not defined.
1.3.3. Nhân nhanh chồi ............................................. Error! Bookmark not defined.
1.3.4. Tái sinh rễ ........................................................ Error! Bookmark not defined.
1.3.5. Chuyển cây ra vườn ươm ................................ Error! Bookmark not defined.
1.4. Tình hình nghiên cứu về cây Lan huệ ................. Error! Bookmark not defined.
1.4.1. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ trên thế giớiError! Bookmark not defined.
1.4.2. Tình hình nghiên cứu cây Lan huệ ở Việt NamError! Bookmark not defined.
Chƣơng 2 – VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUError! Bookmark not defined.
2.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứuError! Bookmark not defined.
2.1.1. Đối tượng ........................................................ Error! Bookmark not defined.
2.1.2 Vật liệu ............................................................. Error! Bookmark not defined.
iv
2.1.3. Điều kiện nuôi cấy .......................................... Error! Bookmark not defined.
2.1.4. Địa điểm và thời gian nghiên cứu ................... Error! Bookmark not defined.
2.2. Phương pháp bố trí thí nghiệm ........................... Error! Bookmark not defined.
2.2.1. Giai đoạn nuôi cấy khởi động ........................ Error! Bookmark not defined.
2.2.2. Giai đoạn nhân nhanh..................................... Error! Bookmark not defined.
2.2.3. Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh .......................... Error! Bookmark not defined.
2.2.4. Giai đoạn vườn ươm ...................................... Error! Bookmark not defined.
2.3. Các chỉ tiêu theo dõi .............................................. Error! Bookmark not defined.
2.4. Phương pháp tiến hành ........................................ Error! Bookmark not defined.
2.5. Phương pháp xử lý số liệu .................................... Error! Bookmark not defined.
Chƣơng 3 - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .............. Error! Bookmark not defined.
3.1. Nghiên cứu phương pháp khử trùng mẫu tạo nguồn vật liệu nuôi cấy cho
nhân giống in vitro các dòng Lan huệ ............... Error! Bookmark not defined.
Xác định thời gian khử trùng thích hợp ........... Error! Bookmark not defined.
3.2. Ảnh hưởng của nhóm chất điều hòa sinh trưởng riêng rẽ và phối hợp đến
sự phát sinh chồi và hệ số nhân từ vảy củ đôi ... Error! Bookmark not defined.
3.2.1. Ảnh hưởng của BA tới sự phát sinh chồi của mẫu nuôi cấyError! Bookmark not defined.
3.2.2. Ảnh hưởng của sự phối hợp BA và Kinetin đến khả năng phát sinh chồi từ
vảy củ đôi ......................................................... Error! Bookmark not defined.
3.2.3. Ảnh hưởng của sự phối hợp hai nhóm chất auxin và cytokinin đến khả năng nhân nhanh chồi in vitro từ vảy củ đôi Error! Bookmark not defined.
3.3. Nghiên cứu khả năng phát sinh hình thái và nhân nhanh từ đế củError! Bookmark not defined.
3.3.1. Ảnh hưởng của 2,4-D tới khả năng phát sinh hình thái từ đế củError! Bookmark not defined.
3.3.2 Ảnh hưởng của α-NAA tới sự phát sinh hình thái từ đế củError! Bookmark not defined.
3.3.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng phat sinh hình thái
từ đế củ ............................................................. Error! Bookmark not defined.
3.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của thành phần môi trường tới chất lượng chồi in
vitro của 5 dòng Lan huệ .................................... Error! Bookmark not defined.
3.4.1. Ảnh hưởng của hàm lượng nước dừa tới chất lượng chồi in vitroError! Bookmark not defined.
3.4.2. Ảnh hưởng của hàm lượng đường tới chất lượng chồi in vitroError! Bookmark not defined.
v
3.5. Nghiên cứu ra rễ tạo cây hoàn chỉnh ................. Error! Bookmark not defined.
3.5.1. Ảnh hưởng của IBA tới khả năng ra rễ và chất lượng rễError! Bookmark not defined.
3.5.2. Ảnh hưởng của than hoạt tính tới khả năng ra rễ và chất lượng rễError! Bookmark not defined.
3.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại giá thể đến tỷ lệ sống và sinh
trưởng và phát triển của cây Lan huệ sau in vitro ngoài vườn ươmError! Bookmark not defined.
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ....................................... Error! Bookmark not defined.
Kết luận ......................................................................... Error! Bookmark not defined.
Đề nghị .......................................................................... Error! Bookmark not defined.
TÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................................... 9
PHỤ LỤC ...................................................................................................................
vi
DANH MỤC BẢNG
Trang
Bảng 3.1. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng đến khả năng vào mẫu của các dòng
Lan huệ (sau 4 tuần) ................................ Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.2. Ảnh hưởng của BA đến khả năng phát sinh hình thái của vảy củ đôi (sau
4 tuần) ...................................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.3. Ảnh hưởng của sự phối hợp BA và Kinetin đến khả năng phát sinh hình
thái của vảy củ đôi (Sau 4 tuần) .............. Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.4. Ảnh hưởng của BA, Kinetin v{ α-NAA đến khả năng nh}n nhanh chồi
in vitro từ vảy củ đôi (Sau 4 tuần) ......... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.5. Ảnh hưởng của 2,4-D tới khả năng phát sinh hình thái từ đế củ (sau 4
tuần) ......................................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của α-NAA tới khả năng phát sinh hình thái từ đế củ (sau 4
tuần) ......................................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng phat sinh hình thái in vitro
từ đế củ (Sau 4 tuần) ................................ Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.8. Ảnh hưởng của BA, Kinetin đến khả năng phat sinh ch ồi của mô sẹo từ
đế củ (Sau 4 tuần) .................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.9. Ảnh hưởng của hàm lượng nước dừa tới chất lượng chồi in vitro (sau 4
tuần) ......................................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.10. Ảnh hưởng của hàm lượng đường tới chất lượng chồi in vitro (sau 4
tuần) ......................................................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.11. Ảnh hưởng của IBA tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ của 5 dòng Lan
huệ (sau 4 tuân) ........................................ Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.12. Ảnh hưởng của than hoạt tính tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ của 5
dòng Lan huệ (sau 4 tuần) ....................... Error! Bookmark not defined.
Bảng 3.13. Ảnh hưởng của các loại giá thể đến tỷ lệ sống, sinh trưởng và phát triển
của cây Lan huệ sau in vitro (Sau 4 tuần)Error! Bookmark not defined.
vii
DANH MỤC HÌNH
Trang
Hình 1.1 Hoa Lan huệ (Hippeastrum equestre) ....................................................... 5
Hình 1.2. Phương pháp cắt lát củ của cây Lan huệ . Error! Bookmark not defined.
Hình 3.1. Ảnh hưởng của BA đến khả năng phát sinh hình thái của vảy củ đôi (Sau
4 tuần) ...................................................... Error! Bookmark not defined.
Hình 3.3. Ảnh hưởng của sự phối hợp BA, Kinetin và α-NAA đến khả năng nhân
nhanh chồi in vitro từ vảy củ đôi (sau 4 tuần)Error! Bookmark not defined.
Hình 3.4. Ảnh hưởng của α-NAA đến khả năng tạo mô sẹo từ đế củ (sau 4 tuần)Error! Bookmark not defined.
Hình 3.5. Ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng tạo mô sẹo từ đế củ (sau 4
tuần) ......................................................... Error! Bookmark not defined.
Hình 3.6. So sánh ảnh hưởng của BA và α-NAA đến khả năng tạo mô sẹo từ đế củ
(sau 4 tuần ) ............................................. Error! Bookmark not defined.
Hình 3.7. Ảnh hưởng của BA, Kinetin đến khả năng phat sinh ch ồi từ mô sẹo của
dòng Lan huệ H10 và H18 (sau 4 tuần) ... Error! Bookmark not defined.
Hình 3.8. Ảnh hưởng của nước dừa tới chất lượng chồi in vitro (sau 4 tuần)Error! Bookmark not defined.
Hình 3.9. Ảnh hưởng của IBA tới khả năng ra rễ và chất lượng rễ của 5 dòng Lan
huệ nuôi cấy in vitro (sau 4 tuần) ............ Error! Bookmark not defined.
Hình 3.10. Ảnh hưởng của một số loại giá thể đến tỷ lệ sống và sinh trưởng và phát
triển của cây Lan huệ sau in vitro ngoài vườn ươmError! Bookmark not defined.
Hình 3.11. Ảnh hưởng của một số loại giá thể tới số lượng rễ mới và chiều dài rễ
cây in vitro của 5 dòng Lan huệ (sau 2
tuần)…………………………………64
8
MỞ ĐẦU
Lan huệ (Hippeastrum equestre) l{ một trong những lo{i hoa được yêu thích
v{ rất có tiềm năng ph|t triển trong những năm gần đ}y. Lan huệ được trồng kh|
phổ biến để l{m cảnh do m{u sắc đa dạng, khả năng thương mại cao khi l{ hoa cắt
c{nh hoặc được trồng trong chậu cảnh hay v{o c|c dịp lễ, tết. Bên cạnh đó, đ}y còn l{
c}y thuốc chữa bệnh vì theo đông y trong củ của nó có chứa c|c th{nh phần biệt
dược có gi| trị như c|c ankaloids [21], c|c lectins có khả năng chống ung thư, cầm
m|u, chữa l{nh vết thương…
Lan huệ ở Việt Nam hiện nay còn nghèo n{n về m{u sắc (chủ yếu là màu đỏ),
thời gian ra hoa của chúng lại kh| muộn (khoảng từ giữa tháng 3 đến cuối tháng 5)
nên khả năng ph|t triển lo{i hoa n{y còn rất nhiều hạn chế. Bằng con đường thu
thập nguồn gen, lai hữu tính v{ chọn lọc có thể l{m phong phú bộ giống hoa Lan huệ
ở nước ta. Năm 2009 – 2010, Nguyễn Hạnh Hoa v{ cộng sự đ~ chọn tạo ra h{ng loạt
con lai có m{u sắc lạ, đẹp, đa dạng, hoa có độ bền l}u v{ có thời gian ra hoa đ|p ứng
đúng thị trường, điển hình l{ c|c dòng H2, H4, H9, H10, H18. Tuy nhiên, c|c dòng
Lan huệ n{y lại có nhược điểm l{ sinh sản vô tính kém (trong điều kiện tự nhiên),
đặc biệt l{ c|c dòng Lan huệ H2, H4 v{ H18. Do vậy, những c| thể lai có đặc điểm ưu
tú được chọn lọc cần phải nh}n giống vô tính nhằm duy trì được tính trạng ban đầu.
Từ nhiều năm nay, để nh}n giống vô tính c}y Lan huệ có thể sử dụng c|c phương
ph|p: T|ch chồi hoặc củ nhỏ từ cụm c}y mẹ; kỹ thuật cắt l|t (Chipping); nh}n giống
bằng hạt; sử dụng phương ph|p nh}n giống in vitro. Mặc dù đơn giản nhưng hiệu
quả khi nh}n giống bằng phương ph|p truyền thống không cao do thời gian nh}n
giống d{i, hệ số nh}n thấp, c}y không đồng nhất cũng như không tạo được c}y sạch
bệnh. Phương ph|p nh}n giống in vitro đ~ khắc phục được những nhược điểm đó
tạo được c}y con sạch bệnh, thời gian nh}n giống ngắn, hệ số nh}n giống cao, c}y
đồng nhất, do vậy đ|p ứng được nhu cầu về số lượng giống có chất lượng cao v{ tính
di truyền ổn định. Để đ|nh gi| v{ duy trì nguồn vật liệu thì việc nghiên cứu nh}n
9
giống vô tính c|c dòng Lan huệ trên l{ rất cần thiết. Năm 2009 – 2010, một số t|c giả
trong nước đ~ bước đầu x|c định kết quả để x}y dựng quy trình nh}n nhanh in vitro
hoa Loa kèn đỏ nhung (H. equestre Herb.) v{ c}y Lan huệ mạng (H. reticulatum var.
striatifolium) [10,11]. Bên cạnh việc kế thừa một số kết quả trên cần phải có những
nghiên cứu tiếp theo nhằm bổ sung v{ ho{n thiện quy trình nh}n giống in vitro c}y
hoa Lan huệ để nh}n nhanh nguồn gen ưu tú phục vụ cho công t|c chọn tạo giống.
Xuất ph|t từ những yêu cầu đó, chúng tôi tiến h{nh đề t{i: “Nghiên cứu nhân giống
in vitro một số dòng Lan huệ (Hippeastrum equestre)”.
Mục tiêu nghiên cứu
- X|c định được c|c giai đoạn cơ bản trong quy trình kỹ thuật nh}n giống in
vitro của một số dòng Lan huệ từ c|c nguồn vật liệu nuôi cấy kh|c nhau.
- Góp phần bổ sung v{ ho{n thiện quy trình nh}n giống in vitro nhằm nh}n
nhanh một số dòng Lan huệ.
Ý nghĩa khoa học và thực tiễn
- Cung cấp những dữ liệu khoa học mới về nh}n giống vô tính c}y Lan huệ bằng
phương ph|p nuôi cấy mô tế b{o, góp phần l{m phong phú cơ sở dữ liệu về kỹ thuật
nuôi cấy mô c}y hoa.
- Cung cấp thông tin cần thiết l{m cơ sở cho việc x}y dựng ho{n thiện quy trình
nh}n giống Lan huệ thương mại có thương hiệu riêng v{ hiệu quả kinh tế cao.
- Đ|p ứng sản xuất c}y giống Lan huệ có hiệu quả, chất lượng tốt, khắc phục
được những hạn chế của nh}n giống truyền thống, duy trì v{ nh}n nhanh kiểu gen
được chọn lọc.
-
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tài liệu Tiếng Việt
1. Nguyễn Thị Lý Anh, Đinh Thị Phòng (2007), Công nghệ nuôi cấy mô, NXB Nông
nghiệp, H{ Nội.
10
2. Nguyễn Tiến B}n (1997), Cẩm nang tra cứu và nhận biết các họ thực vật hạt kín ở
Việt Nam, NXB Nông nghiệp, H{ Nội.
3. Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, NXB Khoa học v{ Kĩ thuật, H{
Nội.
4. Nguyễn Thị Đỏ (2007), Bộ Hoa Loa Kèn – Liliales Perleb, Thực vật chí Việt Nam
(Flora of Viet Nam), NXB Khoa học v{ Kĩ thuật, H{ Nội.
5. Nguyễn Hạnh Hoa v{ cộng sự (2009), Thu thập, phân loại, đánh giá nguồn gen
hoa cây cảnh họ Hành (Liliaceae). Bước đầu tạo vật liệu khởi đầu cho chọn và
nhân giống một số loài bằng kĩ thuật nuôi cấy mô và gây đột biến, B|o c|o tổng
kết đề t{i cấp Bộ m~ số B2008 - 11- 80.
6. Nguyễn Như Khanh (2002), Sinh học phát triển thực vật, NXB Gi|o Dục H{ Nội.
7. Nguyễn Đức Lượng, Lê Thị Thủy Tiên (2002), Công nghệ tế bào, NXB Đại học
Quốc Gia Th{nh phố Hồ Chí Minh.
8. Nguyễn Quang Thạch (chủ biên), Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Phương Thảo
(2004), Giáo trình công nghệ sinh học Nông nghiệp, NXB Nông nghiệp, H{ Nội.
9. Nguyễn Thị Phương Thảo (1998), Nghiên cứu nhân giống in vitro cây hoa Loa
Kèn, Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp H{ Nội.
10. Nguyễn Thị Phương Thảo, Nguyễn Hạnh Hoa v{ Ninh Thị Thảo (2010), “Nghiên
cứu quy trình nh}n nhanh in vitro c}y Lan huệ mạng”, Tạp chí Khoa học và Phát
triển, Tập 8, số 3: 426 – 432, Trường Đại học Nông nghiệp H{ Nội.
11. Ninh Thị Thảo, Nguyễn Thị Cúc, Nguyễn Hạnh Hoa v{ Nguyễn Thị Phương Thảo
(2009), “Bước đầu nghiên cứu quy trình nh}n nhanh in vitro c}y hoa loa kèn đỏ
nhung (Hippeastrum equestre Herb.)”, Tạp chí Khoa học và Phát triển, Tập 7, số 4,
tr.453- 459, Trường Đại học Nông nghiệp H{ Nội.
12. Nguyễn Thị Quỳnh (2005), Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố môi trường lên
sự tăng trưởng của một số cây thân gỗ nhiệt đới và cận nhiệt đới trong điều kiện
nuôi cấy in vitro, Hội nghị tổng kết NCCB trong KHTN, tr. 42-44.
11
13. Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh T}m, Ho{ng Minh Tấn (2007), Sinh lý học thực vật, NXB
Gi|o dục H{ Nội.
Tài liệu Tiếng Anh
14. Bapat V.A., Narayanaswamy S. (1976), “Growth and Organogenesis in Explanted
Tissues of Amaryllis in Culture”, Bulletin of the Torrey Botany Club, 103 (2), pp.
53-56.
15. Behzad Kaviani, Sara Zakizadeh (2012), “Efect of photoperiod, auxin and
cytokinin on the multiplication rate and growth of Amaryllis (Hippeastrum
johnsonii) bulbs in vitro”, Propagation of Ornamental Plants, 13(2), pp. 78-85.
16. Bhojwani S.S., Razdan M.K. (1996), Plant tissue culture: Theory and practice, a
revised edition. Elsevier Science B.V. The Netherlands, p.113.
17. Chieh Li Huang, Kuo Cheng Chang, Hiroshi Okubo (2005), “In vitro
morphogenesis from ovaries of Hippeastrum x Hybridum”, J. Fac. Agr. Kyushu
Univ., 50 (1), pp. 19 – 25.
18. De Bruyn M.M, Ferreira D.I., Slabbert M.M., Pretorius J. (1992), “In vitro
propagation of Amaryllis belladonna”, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 31,
pp.179-184.
19. Debergh P.C. and Zimmerman R.H. (1991), “Micropropagation technology and
application”, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, the Netherlnds, pp.1-13.
20. Epharath J.E., Ben-Asher., Baruchin F., Alekperov C., Dayan E., Silerbush M.
(2001), “Various cutting methods for the propagation of Hippeastrum bulbs”,
Biotronics, 30, pp. 75-83.
21. Funganti C. (1975), The Amaryllidaceae alkaloids, Academic Press, New York,
Vol. XV: The Alkaloids, pp. 83- 164.
22. George E.F. (1993), Plan propagation by Tissue Culture: Part 1, The Technology,
2nd Edn. Exegetics, Edington, UK., pp. 337 – 356.
12
23. Hussey G. (1975), “Totipotency in tissue explants and callus of some members of
the Liliaceae, Iridaceae and Amaryllidaceae”, J. Exp. Rot, 26, pp. 253-262.
24. Hussey G. (1976), In-vitro Release of Axillary Shoots from Apical Dominance in
Monocotyledonous Plants. Annals of Botany, 40, pp. 1323-1325.
25. Mii M., Mori T., Iwase N. (1974), “Organ formation from the excised bulb scales
of Hippeastrum hybridum in-vitro”. J. Hortic. Sci, 49, pp. 241-244.
26. Miller C.O. (1961), “Kinetin and related compounds in plant growth”, Ann. Rev.
Plant Physiol, 12, p.395.
27. Murashige T. (1974), “Plant propagation through tissue cultures”, Annu. Rev.
Plant Physiol., Volume 25, pp. 135-166.
28. Murashige T., Skoog F. (1962), “A revised medium for rapid growth and
bioassays with tobacco tissue cultures”, Plant Physiol., 15, pp. 473-497.
29. Narayanaswamy S. (1994), Plant Cell and Tissue Culture, TATA McGraw-Hill Pub.,
New dehli, India, pp.22-49.
30. Nhut D. T., Le B. V., Fukai S., Tanaka M., Van T. T. (2001), “Effects of activated
charcoal, explant size, explant position and sucrose concentration on plant and
shoot regeneration of Lilium longiflorum via young stem culture”, Plant Growth
Reg, 33, pp. 59-65.
31. Nissen, S.J., Sutter, E. G. (1990), “Stability of IAA and IBA in nutrient medium to
several tissue culture procedures”, Horticultural Science, 25, pp. 800-802.
32. O'Rourke E.N., Fountain W.M., Sharghi S. (1991), “Rapid propagation of
Hippeastrum bulblets by in vitro culture”, Herbertia, 47(1), pp. 54-55.
33. Pan M. J., Van Staden J. (1999), “Effect of activated charcoal, autoclaving and
culture media on sucrose hydrolysis”, Plant Growth Regulation, 29, pp. 135-141.
34. Sara Zakizadeh, Behzad Kaviani, Rasoul Onsinejad (2013), “In vitro rooting of
Amaryllis (Hippeastrum johnsonii), a bulbous plant, via NAA and 2-iP”, Annals of
Biological Research, 4 (2), pp. 69-71.
13
35. Seabrook J.E.A., Cumming B.G. (1977), “The in-vitro propagation of Amaryllis
(Hippeastrum spp. hybrids)”, In vitro, Volume 13, No.12.
36. Seabrook J.E.A., Cumming B.G., Dionne L.A. (1976), “The in-vitro induction of
adventitious shoot and root apices on Narcissus (daffodil and narcissus) cultivar
tissue”, Can. J. Bot, 54, pp. 814 - 819.
37. Siddique M.N.A, Sultana J., Sultana N., Hossain M.M. (2007), “Ex vitro
Establishment of in vitro Produced Plantlets and Bulblets of Hippeastrum
(Hippeastrum hybridum)”, Int. J. Sustain. Crop Prod, 2(3): 22-24.
38. Slabbert M.M., De Bruyn M.M., Ferreira D.I., Pretoricus J. (1993), “Regeneration
of bulblets from twin scales of Crinum macowanii in vitro”. Plant cell, Tissue and
organ culture, 33 (2), pp. 133-141.
39. Sultana J., Sultana N., Siddique M. N. A, Islam A. K. M. A., Hossain M. M., T. Hossain
(2010), “In vitro Bulb production in Hippeastrum (Hipp. hybridum)”, Journal of
Central European Agriculture, Volume 11, No.4, pp. 469-474.
40. Tadashi Yanagawa, Takeshi Osaki (1995), “In vitro propagation of bulblets and
elimination of Viruses by Bulb-scale Cultures of Hippeastrum hybridum Bulbs”,
Plant Tissue Culture Letters, 13(2), pp. 147-152.
41. Trigiano G.N., Gray D.J. (2000), Plant tissue culture concepst and laboatry
exercise, CRC Press. Florida, America.
42. Van Winkle S.C., Pullman G. S. (2001), “The combined impact of pH and
Activated Carbon on the elemental composition of plant tissue culture media”,
IPST Technical Paper, Series Number 992.
Tài liệu từ internet
43. http://www.caythuocquy.info.vn/old/modules.php?name=News&opcase=detail
snews&mid=792&mcid=256&pid=&menuid
44. http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Hippeastrum%20piniceum
&list=species
14