A. Instrumentasi Untuk SpektrometriInstrumen yang digunakan untuk mempelajari penyerapan atau emisi radiasi elektromagnetik sebagai fungsi dari panjang gelombang disebut "spektrometer" atau "spetrofotometer". Prinsip-prinsip optik dan elektronik yang digunakan dalam instrumen ini pada dasarnya sama untuk semua daerah spektrum dari ultraviolet vakum dengan infra merah jauh. ada, namun, terdapat beberapa perbedaan penting dalam komponen tertentu yang digunakan di berbagai daerah. komponen penting dari spektrofotometer meliputi: 1) sumber yang stabil dari energi radiasi, 2) sistem lensa, cermin, dan celah yang menentukan, sejajar (membuat paralel), dan fokus balok, 3) monokromator untuk mengatasi radiasi Info panjang gelombang komponen atau "ikatan" dari panjang gelombang, 4) wadah transparan untuk memegang sampel, dan 5) detektor radiasi dengan sistem pembacaan terkait (meter atau perekam). instrumen komersial mungkin sangat kompleks, tapi semua spektrofotometer merupakan variasi dari diagram sederhana. 1. MonokromatorBerfungsi untuk mendapatkan radiasi monokromatis dari sumber radiasi yang memancarkan radiasi polikromatis. Monokromatis pada spektrofotometer UV-Vis biassanya terdiri dari susunan : celah (slit) masuk filter plasma kisi (grating) celah luarPRISMA dan KISI (GRATING) merupakan bagian monokromator yang terpenting. Prisma dan kisi pada prinsipnya menispersi radiasi elektromagnetik sebatas mungkin supaya didiapatkan resolusi yang baik dari radiasi polikromtis. Prisma dibuat dari leburan silika dan pada sisi siku-siku dari plasma Littrow dilapisi dengan kaca aluminium. Sedangakn prisma Cornu tidak ada pelapisan dengan kaca aluminium. Prisma Littow lebih banyak dipakai pada spektrofotometer karena bentuknya yang kompak, daya resolusi yang lebih baik serta refleksi radiasi elektromagnetik yang datang memberikan keuntungan menghilangkan pengaruh optis aktif.

B. Spektroskopy IR Infra merah = 650 4000 cm-1 Infra merah: Dekat, jika bilangan gelombang > 4000 cm-1 Jauh, jika bilangan gelombang < 650 cm-1 Transisi karena serapan infra merah berkaitan dengan perubahan-perubahan vibrasi dalam molekul.

Contoh: Senyawa organik yang mengandung ikatan C-H Ada 2 vibrasi: Vibrasi ulur: 3000 cm-1 Vibrasi tekuk: 1400 cm-1

A. Cahaya Vis dan UV Transisi dari Eo dan EES Spektrumnya disebut spektrum elektronik berupa pita yang lebar, sebab disertai juga oleh transisi vibrasional (panj gel visibel dan ultraviolet). Infra merah: IM dekat: menimbulkan transisi vibrasional (650-4000nm): V0V1 Selalu disertai transisi rotasional sehingga diperoleh spektrum dengan puncak-puncak yang lebar karena ada saling pengaruh antara transisi vibrasional dan rotasional. IM jauh (1000). Semua gugus dan gugusan atom yang mengabsorbsi radiasi UV-Vis disebut sebagai kromofor. Pada senyawa organik dikenal pula gugus Ausokrom, yaitu gugus gugus fungsional yang mempunyai elektron bebas seperti OH, O-NH2 dan O-CH3 yang memberikan transisi (n *). Panjang gelombang () :Jarak dari puncak ke puncak antara gelombang. Frekuensi ( ) : Jumlah osilasi lengkap (jumlah unit panjang gelombang lengkap) yang dibuat gelombang per detik. Satu osilasi per detik = satu hertz (Hz). Bilangan gelombang () = 1/ = cm-1

Hukum Beer intensitas cahaya yang diabsorpsi oleh medium berbanding eksponensial dengan konsentrasi larutan Keterangan

Io = Intensitas cahaya yang masuk I = intensitas cahaya yang keluar l = panjang lintasan a = konstanta absorpsi T = transmittante A = Absorbansi 100 T = percentase transmitan c = konsentrasi larutanHukum Lambert Beer digunakan untuk radiasi monokromatik, dimana absorbansi sebanding dengan tebal medium (b) dan konsentrasi (c) senyawa yang mengabsorbsi. A = a.b.c