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Informe sobre contaminación cruzada para los filtros bacterianos

y virales de Vitalograph

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Extraído de Vitalograph 2019: P208_0182 Cross-Contamination Report, Bacterial Viral Filters (Informe sobre contaminación cruzada para los filtros bacterianos y virales de Vitalograph 2019: P208_0182)

Informe sobre contaminación cruzada para los filtros bacterianos y virales de Vitalograph

Resumen

El filtro bacteriano y viral (FBV) de Vitalograph se ha diseñado para utilizarse en pruebas del

funcionamiento pulmonar sin tener que preocuparse por la contaminación cruzada y la

infección de pacientes durante dichas pruebas.

A diferencia de los filtros de barrera que atrapan el material expectorado y permiten que

atraviesen los virus y las bacterias, el filtro bacteriano y viral de Vitalograph utiliza material

cargado electrostáticamente para atrapar el material expectorado y, además, las bacterias

y los virus. Esto brinda una protección eficaz contra la contaminación cruzada.

Además de los beneficios para la higiene, los filtros bacterianos y virales favorecen la

productividad en las pruebas del funcionamiento pulmonar ya que, al utilizarse en un solo

paciente, reducen el tiempo de limpieza y descontaminación de los equipos utilizados en las

pruebas.

Los fabricantes del material de barrera del filtro bacteriano y viral (Technostat® 150 de H&V

[Hollingsworth & Vose]) declaran una eficacia de filtrado bacteriano (EFB) del 99.99978 %

y una eficacia de filtrado viral (EFV) del 99.99935 %. Evidentemente, la eficacia en lo que

respecta a la prevención de la contaminación cruzada (es decir, el uso del equipo en dos

pacientes) sería muy superior.

La contaminación cruzada se refiere al proceso de transmisión no intencional de bacterias u

otros microrganismos de un objeto a otro, con efectos perjudiciales. El filtro bacteriano y

viral evita la contaminación cruzada al reducir a un nivel no detectable la cantidad de

biocarga que atraviesa el filtro y, luego, por un segundo filtro, según los métodos y los

materiales aquí utilizados.

En este informe, se resume el trabajo realizado para corroborar que el filtro bacteriano y viral de

Vitalograph es eficaz para evitar la contaminación cruzada. El filtro bacteriano y viral de

Vitalograph es un dispositivo para utilizar en un solo paciente durante las pruebas del

funcionamiento pulmonar. En el informe, se confirma la eficacia a través de cálculos teóricos

fundados en la especificación de los fabricantes del filtro y, además, en las pruebas realizadas.

Luego, se demuestra la verificación correspondiente en un contexto de laboratorio.

La conclusión de este informe es que el filtro bacteriano y viral de Vitalograph es eficaz para

prevenir la contaminación cruzada. Se cumplieron los criterios de aceptación de la

verificación para el informe, dado que todos los resultados teóricos y prácticos generados

para la eficacia en cuanto a la contaminación cruzada (de la biocarga) fueron superiores al

99.99 %.

Criterios de aceptación de la verificación Los criterios de aceptación de la verificación para el informe consisten en que todos los

resultados teóricos y prácticos generados para la eficacia en cuanto a la contaminación

cruzada (respecto de la biocarga) sean iguales o superiores al 99.99 %.

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Unidades de verificación Las unidades de verificación para las 4 pruebas diferentes son las siguientes:

Prevención de la contaminación cruzada teórica: especificaciones de Technostat®

No corresponde: esta prueba se realizó con las especificaciones provistas por el fabricante

del material del filtro de H&V (Apéndice 1).

Prevención de la contaminación cruzada teórica

(FBV nuevo >nivel de la prueba de exposición in vivo [véanse los Apéndices 2 y 3])

Para realizar esta prueba, se utilizó lo siguiente:

o Prueba de eficacia de filtrado bacteriano: 3 FBV, número de pieza 28552, número de LOTE 1829 (Apéndice 2).

o Prueba de eficacia de filtrado viral: 3 FBV, número de pieza 28552, número de LOTE 1829 (Apéndice 3).

Prevención de la contaminación cruzada teórica

(FBV de más de 7 años >nivel de la prueba de exposición in vivo [véanse los Apéndices 4 y 5]).


o Prueba de eficacia de filtrado bacteriano: 3 FBV, número de pieza 28362 (provisto en el kit para la prueba del funcionamiento pulmonar, número de pieza 28372), número de LOTE 1026 (Apéndice 4).

o Prueba de eficacia de filtrado viral: 3 FBV, número de pieza 28362 (provisto en el kit para la prueba del funcionamiento pulmonar, número de pieza 28372), número de LOTE 1026 (Apéndice 5).

Prevención de la contaminación cruzada en el laboratorio


o Prueba FBV-FBV: 40 FBV, número de pieza 28554, número de LOTE 1827 o FBV-cabezal de flujo Alpha: 39 FBV, número de pieza 28554, número de

LOTE 1827

Evaluadores Datos suministrados por agencias externas (Nelson Labs, Hollingsworth & Vose, profesor

Colum Dunne).

Cálculos obtenidos por Vitalograph Ltd.

Equipos utilizados

Prevención de la contaminación cruzada teórica: especificaciones de Technostat®

No corresponde: esta prueba se realizó con las especificaciones provistas por el fabricante

del material del filtro de H&V. No se necesitaron equipos para los cálculos.

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Prevención de la contaminación cruzada teórica: Nelson Labs, 2019 (FBV nuevo)

No corresponde: esta prueba se realizó con los resultados analíticos proporcionados por

Nelson Labs. No se necesitaron equipos para los cálculos.

Prevención de la contaminación cruzada teórica: Nelson Labs, 2019 (FBV de más de 7 años)

No corresponde: esta prueba se realizó con los resultados analíticos proporcionados por

Nelson Labs. No se necesitaron equipos para los cálculos.

Prevención de la contaminación cruzada en el laboratorio: profesor Colum Dunne, Universidad de Limerick, 2019

Los equipos utilizados en las pruebas que se realizaron para determinar la prevención de la

contaminación cruzada en el laboratorio pueden dividirse en las 2 pruebas

correspondientes:

FBV-FBV

• Hisopos para transporte (101 x 16.5 mm, Ref.: 80.625).

• Esparcidores para inoculación (Ref.: 86.1569.005) de Startsted Ltd.

• Placas ya preparadas con medios de cultivo, a saber, recuento en placa de agar (PCA, por sus siglas en inglés) y solución salina amortiguada (PBS, por sus siglas en inglés) de Fannin Ltd.

• Escherichia coli, también conocida como E. coli (K12).

• 40 filtros bacterianos y virales de Vitalograph, número de pieza 28554, número de LOTE 1827.

• 1 jeringa de 3 litros: número de pieza 36113, número de equipo T2678.

FBV-cabezal de flujo Alpha

• Hisopos para transporte (101 x 16.5 mm, Ref.: 80.625).

• Esparcidores para inoculación (Ref.: 86.1569.005) de Startsted Ltd.

• Placas ya preparadas con medios de cultivo, a saber, recuento en placa de agar (PCA) y solución salina amortiguada (PBS) de Fannin Ltd.

• Escherichia coli, también conocida como E. coli (K12).

• 39 filtros bacterianos y virales de Vitalograph, número de pieza 28554, número de LOTE 1827.

• 39 cabezales de flujo Alpha, número de pieza 61029, número de trabajo 14854.

• 1 espirómetro Alpha Touch, número de pieza 65502, número de serie 26819.

• 1 tubo doble de silicona, número de pieza 42172.

• 1 cable de alimentación PowerSAFE para el espirómetro Alpha, número de pieza 41211.

• 1 jeringa calibrada de 3 litros, número de pieza 36113, número de equipo T2678.

• 1 pantalla táctil Stylus, número de pieza 65813.

Procedimiento El procedimiento correspondiente a este informe analítico puede dividirse en

2 subsecciones. Las subsecciones son las siguientes:

• El procedimiento para los cálculos de la prevención de la contaminación cruzada teórica.

• El procedimiento para la prevención de la contaminación cruzada en el laboratorio.

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El procedimiento para los cálculos de la prevención de la contaminación cruzada teórica se llevó

a cabo con 3 grupos de datos exclusivos. Los 3 grupos de datos son las especificaciones para

filtros de Technostat®, los resultados de Nelson Labs correspondientes a las pruebas con filtros

bacterianos y virales nuevos, y los resultados de Nelson Labs correspondientes a las pruebas

con filtros bacterianos y virales de más de 7 años de antigüedad.

Los primeros cálculos se realizaron con los valores para la EFB y la EFV indicados en la

hoja de especificaciones de los filtros de Technostat® (véase el Apéndice 1). Esto permitió

calcular la eficacia de los filtros de Technostat® respecto a la prevención de la

contaminación cruzada bacteriana y viral.

Luego, los filtros bacterianos y virales de Vitalograph se enviaron a Nelson Labs para el

análisis de la EFB (véase el Apéndice 2) y la EFV (véase el Apéndice 3). La prueba se

realizó con 3 filtros bacterianos y virales que se seleccionaron al azar de un lote. Los

resultados más bajos obtenidos para la EFB y la EFV se utilizaron para calcular la

capacidad de los filtros bacterianos y virales en cuanto a la prevención de la contaminación

cruzada bacteriana y viral.

Con el fin de verificar que los filtros bacterianos y virales de Vitalograph siguen funcionando

durante todo su período de validez, se enviaron a analizar a Nelson Labs filtros bacterianos

y virales de Vitalograph que tenían más de 7 años de antigüedad.

Se seleccionaron al azar de un lote y se enviaron 5 filtros bacterianos y virales; luego, se

analizaron 3 filtros bacterianos y virales para determinar la EFB (véase el Apéndice 4) y la

EFV (véase el Apéndice 5).

Los resultados más bajos obtenidos para la EFB y la EFV se utilizaron para calcular la

capacidad de los filtros bacterianos y virales de más de 7 años de antigüedad en cuanto a la

prevención de la contaminación cruzada bacteriana y viral.

El profesor Colum Dunne también analizó los filtros bacterianos y virales en la Universidad

de Limerick. Las pruebas se realizaron con el fin de evaluar la capacidad de los filtros

bacterianos y virales de Vitalograph para evitar la contaminación cruzada de la biocarga en

un contexto de laboratorio. Inicialmente, se analizó la capacidad de las piezas para prevenir

la contaminación de la biocarga desde un filtro bacteriano y viral hacia un cabezal de flujo

Alpha con caudales determinados (ensambles FBV-cabezal de flujo Alpha). Luego, la

prueba se realizó con ensambles FBV-FBV.

Los caudales determinados utilizados se separaron en 3 grupos. Los grupos fueron los

siguientes:

• Bajo: menos de 55 l/min.

• Mediano: entre 55 l/min y 750 l/min.

• Alto: más de 750 l/min.

El caudal más alto que puede evaluar el dispositivo de espirometría Alpha es de 960 l/min. Este

caudal está muy por encima del valor previsto para la exhalación de un paciente en un entorno

clínico. En el artículo de referencia NHANES III, empleado para calcular los valores previstos

para el flujo espiratorio máximo (PEF, por sus siglas en inglés), el caudal más alto utilizado

corresponde a un hombre mexicoamericano de 30 años, de 206 cm, a 13.79 l/s (827.4 l/min).

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Cálculo de la prevención de la contaminación cruzada teórica

x = x equivale a la eficacia del filtro.

1- x = Esta es la cantidad de biocarga que atraviesa cada uno de los filtros,

dado que x (la eficacia) se resta de la cantidad total de biocarga.

(1- x) x (1- x) =

Luego, para calcular la cantidad de biocarga que atraviesa tanto el

primer como el segundo filtro, se multiplica la cantidad de biocarga

que atraviesa el primer filtro por la cantidad de biocarga que

atravesará el segundo filtro.

1-((1- x )2) =

La eficacia de los 2 filtros utilizados para prevenir la contaminación

cruzada puede calcularse al restar la cantidad de biocarga que

atraviesa el primer y el segundo filtro de la cantidad total de

biocarga.

Prevención de la contaminación cruzada en el laboratorio

Se evaluó el filtro bacteriano y viral de Vitalograph en cuanto a la prevención de la

contaminación cruzada por biocarga en un entorno de laboratorio. La eficacia del filtro se

analizó con caudales calibrados. Esta prueba se realizó para determinar si el filtro

bacteriano y viral de Vitalograph protege contra la contaminación cruzada a diversos

caudales. Se utilizaron cabezales de flujo Alpha, un espirómetro Alpha Touch y una jeringa

de 3 l para proporcionar el volumen y el flujo de aire definidos, de forma similar al uso en la

práctica.


La metodología de la prueba FBV-cabezal de flujo Alpha se dividió en 2 subsecciones:

generación del caudal mediante el uso del espirómetro Alpha Touch y la jeringa de 3 l,

y análisis microbiano.

Generación del caudal

1. El espirómetro Alpha Touch se calibró con la jeringa calibrada de 3 l. 2. En el menú principal, se seleccionó Capacidad vital forzada (FVC, por sus siglas en

inglés). 3. La temperatura se introdujo en grados Celsius. 4. Los caudales necesarios se dividieron en 3 bandas: caudal bajo (menos de 30 l/min),

caudal mediano (entre 55 l/min y 750 l/min) y caudal alto (más de 750 l/min). 5. Se utilizó un caudal alto en 5 FBV, un caudal mediano en 29 FBV y un caudal bajo

en 5 FBV. 6. Se aplicó una embolada de la jeringa con la velocidad y la presión necesarias para

generar el caudal deseado. 7. El caudal se visualizó en el PEF, a la derecha de la pantalla. Se registró este valor.

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Análisis de microbiología

1. Para cada prueba, se colocó un FBV alineado con un cabezal de flujo Alpha. 2. En una cabina de contención microbiológica, se introdujo 1.0 ml de 1 x 106 UFC de

E. coli mediante un atomizador en la entrada del FBV. 3. Con la jeringa calibrada de 3 l, se envió aire a través del ensamble inoculado

FBV-cabezal de flujo Alpha. 4. El ensamble FBV-cabezal de flujo Alpha se desarmó y se separó. 5. Se pasó un hisopo por las entradas y las salidas del cabezal de flujo Alpha, y por el

“filtro interpuesto” (filtro de malla plástica) con el diluyente de PBS (solución salina amortiguada).

6. Cada hisopo se introdujo en la agitadora vorticial para liberar las células microbianas y las suspensiones se diluyeron de forma serial antes de la distribución en la placa de PCA.

7. La incubación se realizó a 37 °C, de forma aerobia. 8. Los recuentos se efectuaron a las 24 horas. 9. Este análisis se realizó como se estipuló anteriormente.

FBV-FBV

1. En cada prueba, se unieron de forma alineada dos FBV mediante papel film (Parafilm) para formar un sello hermético que no permitiera que el aire que fluía por el primer FBV se fugara antes de entrar en el segundo FBV.

2. En una cabina de contención microbiológica, se introdujo 1.0 ml de 1 x 106 UFC de E. coli mediante un atomizador en la primera entrada del FBV.

3. Con la jeringa de 3 l, se envió aire a través del ensamble inoculado de los FBV. 4. Los FBV unidos se desarmaron y se separó cada entrada, filtro y salida de los FBV

con tijeras estériles. 5. Se pasó un hisopo con el diluyente de PBS (solución salina amortiguada) por las

entradas y las salidas plásticas. 6. Cada hisopo se introdujo en la agitadora vorticial para liberar las células microbianas

y las suspensiones se diluyeron de forma serial antes de la distribución en la placa de PCA.

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Resultados

Prevención de la contaminación cruzada teórica: especificaciones de Technostat® Las especificaciones de Technostat® indican que el filtro Technostat® del FBV debe tener

una eficacia de filtrado bacteriano del 99.99978 % y una eficacia de filtrado viral del

99.99935 %. Estos datos permiten calcular la eficacia del filtro en cuanto a la contaminación

cruzada de la siguiente manera:

Prevención de la contaminación cruzada bacteriana

99.99978 % = el % de eficacia bacteriana del filtro

0.9999978 = la eficacia bacteriana del filtro con decimales

1-0.9999978 = la cantidad de bacterias que atraviesan el primer filtro

2.2 x 10-6 =

(2.2 x 10-6) x (2.2 x 10-6) = la cantidad de bacterias que luego atraviesan el segundo filtro

1-(4.84 x 10-12) = la eficacia bacteriana de ambos filtros

0.99999999999 =

99.999999999 % = el % de eficacia bacteriana de los filtros para prevenir la

contaminación cruzada

Prevención de la contaminación cruzada viral

99.99935 % = el % de eficacia viral del filtro

0.9999935 = la eficacia viral del filtro con decimales

1-0.9999935 = la cantidad de virus que atraviesan el primer filtro

6.5 x 10-6 =

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(6.5 x 10-6) x (6.5 x 10-6) = la cantidad de virus que luego atraviesan el segundo filtro

1-(4.225 x 10-11) = la eficacia viral de ambos filtros

0.99999999995 =

99.999999995 % = el % de eficacia viral de los filtros para prevenir la contaminación

cruzada

Prevención de la contaminación cruzada teórica: resultados analíticos de Nelson Labs (FBV nuevo) Nelson Labs evaluó el filtro con respecto a la eficacia de filtrado bacteriano y la eficacia de

filtrado viral (véanse los detalles en el Apéndice 2 y 3). La eficacia de filtrado bacteriano más

baja para los filtros analizados fue del 99.962 %. La eficacia de filtrado viral más baja para

los filtros analizados fue del 99.925 %.




1 - 0.99962 = la cantidad de bacterias que atraviesan el primer filtro

3.8 x 10-4 =

(3.8 x 10-4) x (3.8 x 10-4) = la cantidad de bacterias que atraviesan el segundo filtro

1 - (1.444 x 10-7) = la eficacia bacteriana de ambos filtros

0.9999998556 =



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1 - 0.99925 = la cantidad de virus que atraviesan el primer filtro

7.5 x 10-4 =

(7.5 x 10-4) x (7.5 x 10-4) = la cantidad de virus que luego atraviesan el segundo filtro

1 - (5.625 x 10-7) = la eficacia viral de ambos filtros

0.9999994375 =


cruzada

Prevención de la contaminación cruzada teórica: resultados analíticos de Nelson Labs (FBV de más de 7 años) Nelson Labs evaluó la eficacia de filtrado bacteriano y la eficacia de filtrado viral en un filtro

cuya fecha de caducidad ya había pasado (véanse los detalles en el Apéndice 4 y 5). La

eficacia de filtrado bacteriano más baja para los filtros analizados fue del 99.9948 %. La

eficacia de filtrado viral más baja para los filtros analizados fue del 99.90 %.




1 - 0.999948 = la cantidad de bacterias que atraviesan el primer filtro

5.2 x 10-5 =

(5.2 x 10-5) x (5.2 x 10-5) = la cantidad de bacterias que atraviesan el segundo filtro

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1 - (2.704 x 10-9) = la eficacia bacteriana de ambos filtros

0.9999999973 =






1 - 0.9990 = la cantidad de virus que atraviesan el primer filtro

1 x 10-3 =

(1 x 10-3) x (1 x 10-3) = la cantidad de virus que luego atraviesan el segundo filtro

1 - (1 x 10-6) = la eficacia viral de ambos filtros

0.999999 =


cruzada

Prevención de la contaminación cruzada en el laboratorio Las pruebas de prevención de la contaminación cruzada que se efectuaron en los filtros

bacterianos y virales de Vitalograph confirmaron que no se detectó biocarga cuando se

utilizó un caudal inferior a 960 l/min.


No se observó proliferación de la biocarga en los cabezales de flujo Alpha cuando las

pruebas se realizaron con caudales bajos o medianos. De las pruebas realizadas, solo dos

tuvieron resultados positivos. Con caudales equivalentes o superiores a 960 l/min, dos de

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las pruebas mostraron niveles de biocarga en la entrada del cabezal de flujo Alpha. Este

caudal está muy por encima del valor previsto para la exhalación de un paciente en un

entorno clínico. En el artículo de referencia NHANES III, empleado para calcular los valores

previstos para el flujo espiratorio máximo (PEF, por sus siglas en inglés), el caudal más alto

corresponde a un hombre mexicoamericano de 30 años, de 206 cm, a 13.79 l/s

(827.4 l/min).

Estos resultados indican que, cuando se utilizaron caudales bajos, medianos o altos que no

superaran los 960 l/min, cualquier transferencia de biocarga desde el FBV hacia el cabezal

de flujo Alpha fue inferior al nivel de detección correspondiente a los métodos y materiales

utilizados. A partir de estos datos, se deduce que el FBV fue eficaz para prevenir la

transferencia de biocarga.

FBV-FBV

El ensamble FBV-FBV fue un modelo de reemplazo del ensamble FBV-cabezal de flujo

Alpha.

No se observó ninguna proliferación en ninguno de los segundos FBV de los ensambles.

Esto indica que cualquier transferencia de biocarga desde el primer FBV de los ensambles

hacia el segundo FBV fue inferior al nivel de detección correspondiente a los métodos y

materiales utilizados.

Conclusión La conclusión de este informe es que el filtro bacteriano y viral de Vitalograph es eficaz para

prevenir la contaminación cruzada. Se cumplieron los criterios de aceptación de la

verificación para el informe, dado que todos los resultados teóricos y prácticos generados

para la eficacia en cuanto a la contaminación cruzada (de la biocarga) son iguales o

superiores al 99.99 %.

Como se puede comprobar, los resultados obtenidos en las pruebas de laboratorio

corroboran los resultados calculados de forma teórica acerca de la eficacia relacionada con

la contaminación cruzada.

Referencias NHANES III: Hankinson JL, Odencrantz JR, Fedan KB. Spirometric reference values from a sample of the general US population. Am J Respir Crit Care Med 1999; 159: 179-187.

Study CDe 19/039 Calibrated Flow Bioburden testing of Vitalograph Alpha Flow Heads and

Bacterial Viral Filters (BVF): Colum Dunne. 2019; 1-7

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Apéndice 1: datos técnicos de Technostat®

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Apéndice 2: eficacia de filtrado bacteriano de Nelson Labs

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Apéndice 3: eficacia de filtrado viral de Nelson Labs

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Apéndice 4: eficacia de filtrado bacteriano en filtros de más de 7 años, de Nelson Labs

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Apéndice 5: eficacia de filtrado viral en filtros de más de 7 años, de Nelson Labs

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