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INDICE
PáginaLISTA DE TABLAS ……………………………………………………………...…. iii
INDICE DE FIGURAS ……………………………………………………………… iv
RESÚMEN………………………………………………………..…………………… v
INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………..... vi
JUSTIFICACIÓN……………………………………………………………………. vii
OBJETIVO GENERAL…………………………………………………………….. viii
HIPÓTESIS……………………………………………………………………………. x
I. REVISION BIBLIOGRÁFICA……………………….…………………………….. 1
1.1 Origen del agua …...………………………………………………..…………. 1
1.2 Ciclo hidrológico …...………………………………………………..……...…. 3
1.3 Agua superficial ……………………………….…………………….………… 4
1.4 Agua subterránea ……………………………………… …………....…………4
1.6 Fuentes para consumo humano …………………..………………………… 5
1.7 Calidad del Agua ……………………………………………………………… 6
1.8 Calidad del Agua subterránea ………………………………………………. 7
1.9 ANALISIS MICROBIOLÓGICOS..………..……………………………...…… 9
1.9.1 Microbiología del agua …….....…………….………….……................ 9 1.9.2 Principales géneros de bacterias que se encuentran en el agua ………………….……..………………………....…………….... 10 1.9.3 Microorganismos patógenos…………….………….………………....10 1.9.4Organismos del grupo coliforme …………………………...…….….. 10
1.9.5 Organismos coliformes fecales…………………….………..…….... 11 1.9.6 Salmonella……………………………………………………..………... 11
1.9.7 Mesófilos aerobios…………………………………………..…..…….. 12 1.9.8 Vibrio Cholerae……………………………………..…………..………. 12 1.9.9 Normas oficiales para el agua destinada a consumo humano……………………….……………………………….…..............…. 12 II. MATERIALES Y MËTODOS…………………………...…….….…………….. 14
2.1 Descripción de la zona de estudio…………………...…………….….. 14 2.2 Sitios de muestro ………………….…………………………………….. 17 2.3 Periodos de muestreo………………………………………………….... 18 2.4 Toma y transporte de la muestra……….………………………….…… 19 2.5 Análisis bacteriológicos…………….……………………………….….. 19 2.5.1. Determinación de la cuenta total viable de mesó- filos aerobios, por la técnica de vaciado en placa………...…….…... 19 2.5.2Determinación del número mas probable (NMP) de coliformes totales y coliformes fecales por la técnica de fermentación de tubos múltiples…………………………………..… 19 2.6 Enriquecimiento y aislamiento de Salmonella……….……………… 21 2.7 Enriquecimiento y asilamiento de Vibrio Cholerae…………….….... 22 III. DISCUSION DE RESULTADOS …………………..……………………….... 23 3.1 Determinación de cuenta total viable de Bacterias mesofílicas aerobias…………………………………...…… 23 3.2 Número más probable (NMP) de coliformes totales y fecales …………………………………………………………….……… 24 3.3 Aislamiento e identificación de Salmonella y Vibrio Cholerae…..…………………….…………………………….................... 24
CONCLUSIONES………………………………………………………………….. 26
BIBLIOGRAFÍA………………………………………………………,…………… 27
ANEXOS ………………………………………………………………..………..… 29
iii
LISTA DE TABLAS
Tabla Descripción Página
1
Distancias mínimas recomendadas desde varios tipos de fuentes de contaminación
8
2 Límites permisibles de características microbiológicas
13
3 Ubicación de los sitios de muestreos
17
4 Periodo de muestreo
18
5 Resultados de análisis microbiológicos del agua pozo
25
6 Resultados registrados de pH.
31
7 Resultados registrados de cloro residual.
31
iv
INDICE DE FIGURAS
Figura Descripción Página
1 Ciclo hidrológico
3
2
Mapa del Ejido Guadalupe Victoria
15
3
Pozo del Ejido Guadalupe Victoria
16
RESUMEN
El Objetivo de presente trabajo fue evaluar la calidad sanitaria del agua de pozo
para consumo humano del Ejido Guadalupe Victoria. Este Estudio se llevo acabo
durante el periodo de febrero de 2004 a enero de 2005.
Los sitios de muestreo fueron 1 pozo y 4 tomas domiciliarias a los cuáles se les
realizaron análisis microbiológicos establecidos por la Secretaria de Salubridad y
Asistencia (SSA); la cuenta total viable de bacterias mesofílicas aerobias,
coliformes fecales, determinación de Salmonella y Vibrio cholerae. Los análisis se
realizaron una vez por mes.
Las 60 muestras analizadas manifiestan una calidad sanitaria satisfactoria, en
cuanto a Salmonella y Vibrio Cholerae ya que se comprueba la ausencia total de
esto patógenos además se presento muy baja incidencia de carga bacteriana
mesofílica aerobia pues ninguna muestra sobrepaso el límite de 200 UFC/ml. Sin
embargo se logro detectar sólo una muestra que sobrepaso el limite permisible de
0 UFC/ml de coliformes totales que representa el 6.6 % y se obtuvieron resultados
de 0 fecales concluyendo que el agua presenta una calidad microbiológica
aceptable y no representa ningún riesgo para la salud de los consumidores.
v
INTRODUCCION
Formada por dos moléculas de hidrógeno y una de oxígeno, el agua es unos de
los elementos más vitales para todos los seres vivos, de ahí que debe ser pura
para poder consumirla, sus características organolépticas son: inodora, incolora,
insípida y refrescante son las que la hacen más atractiva para su consumo.
En México el 80% de las comunidades rurales, se abastecen principalmente de
pozos subterráneos. Además la principal causa de las enfermedades de tipo
gastrointestinal tiene como vehículo el agua de consumo, por ello la importancia
de su calidad y tratamiento.
Generalmente el agua de pozo es de buena calidad, libre de sólidos suspendidos,
libre de bacterias y otros patógenos, por lo que no se requiere un extensivo
tratamiento antes de consumirla. Sin embargo en lugares donde existe riesgo de
contaminación por actividades agrícolas, ganaderas y domesticas, propias de la
región, la calidad bacteriológica disminuye considerablemente.
vi
El control y la higiene de las fuentes de abastecimiento del agua es de suma
importancia, ya que estas pueden ser contaminadas por diferentes sustancias y
bacterias procedentes del suelo y posiblemente de microorganismos de los
animales y aguas residuales, que pueden causar graves enfermedades hídricas e
intestinales en el hombre.
Por lo antes mencionado es importante tomar medidas higiénicas adecuadas y
determinar la calidad microbiológica del agua que consumen los habitantes del
Ejido Guadalupe Victoria Cajeme Sonora, ya que por inconformidad de los
habitantes no desean consumirla por desconfiar si es inocua o no.
vii
JUSTIFICACION
El uso del agua potable es indispensable para el desarrollo de cualquier
comunidad, por lo cual es importante realizar estudios de la calidad del agua como
los microbiológicos para evitar la transmisión de cualquier enfermedad que se
pueda presentar en el agua.
En el Ejido Guadalupe Victoria los pobladores han manifestado su preocupación
en relación a la calidad del agua que se les esta suministrando; han mencionado
que debido al olor y sabor no agradable, la mayoría de los habitantes la rechazan,
lo que los obliga a adquirir agua purificada comercialmente, repercutiendo esto en
la economía familiar que actualmente esta seriamente afectada.
Al realizar esta investigación se tendrá información completa sobre la calidad
sanitaria del agua de abastecimiento de Ejido Guadalupe Victoria, así como el
manejo de la dosificación de cloro a la misma, lo cual servirá para recomendar que
se lleve a cabo la desinfección del agua de manera controlada y con ello hacer su
uso confiable, además que no se tiene antecedentes estudios anteriores del agua
de pozo del lugar.
viii
Objetivo
General:
Realizar análisis microbiológicos en el agua de pozo del ejido Guadalupe Victoria
por medio de la técnica del número más probable, aislamiento e identificación de
bacterias patógenas (Salmonella y Vibrio) para poder determinar su calidad
sanitaria y conocer si es apta para consumo humano.
ix
HIPÓTESIS
El agua de pozo de la comunidad del Ejido Guadalupe Victoria, Cajeme Sonora no
cumple con las normas oficiales mexicanas establecidas para el consumo
humano.
x
xi
I. REVISION BIBLIOGRAFICA 1.1 Origen del agua
Del océano al cielo, a la tierra y al océano. El ciclo no tiene principio ni fin; pero
comienza con el agua de los océanos, que cubren aproximadamente las tres
cuartas partes de la superficie de la tierra. El agua de las superficies de los
océanos se evapora en la atmósfera y esa humedad sube y se condensa y cae de
nuevo sobre la superficie de la tierra en forma de precipitación. La parte de
precipitación después de mojar el follaje y el suelo, corre sobre la superficie hasta
los arroyos. Esta es el agua que causa la erosión y el es el principal origen de las
inundaciones. De la precipitación que moja la superficie de la tierra, alguna parte
se utiliza para el crecimiento de las plantas y se pierde en la evaporación. Otra
1
parte llega a las zonas mas profundas, se filtra lentamente a través de los
manantiales y escurre para conservar el caudal de los arroyos, a su vez vuelven
eventualmente a los océanos en donde el agua tuvo su origen, debido a esta
incesante circulación se le conoce a este proceso como ciclo hidrológico.
Solo hay dos fuentes de agua, las de las superficies que comprende lagos, ríos
áreas de drenaje que envían el agua hacia los embalses y las subterráneas que
incluyen los pozos, manantiales entre otros. La verdadera fuente de casi todas
nuestras reservas de agua dulce la constituye la precipitación que cae sobre las
áreas terrestres. De ella dependemos para renovar aquellas cantidades que se
utilizan y que se toman de los lagos, corrientes superficiales y de los pozos
destinadas a innumerables usos humanos. El agua es el liquido fundamental.
Además que existen evidencias de que la vida empezó en un medio acuoso y las
células de los seres vivos consisten principalmente de agua.
Debido a su inocuidad el agua se considera con frecuencia un líquido inerte. Sin
embargo el agua es una sustancia de gran reaccionabilidad, con propiedades
poco frecuentes que la diferencian mucho, tanto física como químicamente, de la
mayoría de los líquidos corrientes.
Los organismos vivos se han adaptado a su medio acuoso y han desarrollado
métodos para aprovechar las propiedades del agua. Debido a que el agua no tiene
valor energético no sufre cambio químicos durante su utilización biológica, en
muchas ocasiones el agua no se considera como nutrimento. Sin embargo sin
este líquido no podrían llevarse a cabo diferentes reacciones bioquímicas que se
presentan en la vida (Jonson EE. 1975).
2
1.2 Ciclo hidrológico
Aunque el agua participa químicamente en la fotosíntesis, la mayor parte del
movimiento del agua a través del ecosistema ocurre por procesos físicos de
evaporación, transpiración y precipitación (Figura 1). La energía luminosa y
calorífica absorbida por el agua realiza el trabajo de evaporación. La condensación
del vapor del agua atmosférico para formar nubes libera la energía potencial en el
vapor de agua como calor. Sobre La tierra la precipitación excede a la evaporación
y a la transpiración. Sobre los océanos la evaporación excede a la precipitación en
una cantidad similar. Gran parte del agua que se evapora de las superficies de los
océanos es llevada por los vientos a los continentes, donde es capturada como
precipitación por el suelo (Ricklefs, 1998).
La evaporación y la precipitación se encuentran estrechamente relacionadas por
que la atmósfera tiene una capacidad limitada para mantener vapor de agua;
cualquier aumento de la evaporación del agua en la atmósfera crea un exceso de
vapor y produce un incremento igual en la precipitación (Ricklefs, 1998).
Figura 1. Ciclo hidrológico
Fuente: www.erres.org.uy/agua.htm
3
1.3 Agua superficial
Son aquellas corrientes naturales como ríos y arroyos, incluyéndose lagos,
embalses, mares y en estado sólido el hielo y la nieve donde se acumulan en
grandes cantidades.
Esta agua proviene de las lluvias que cae en la cuenca receptora correspondiente.
La cantidad de lluvia que cae tiene un efecto importante sobre la cantidad de agua
que se puede obtener. El agua superficial puede estar turbia en época de flujos
altos y esta sujeta a contaminarse, ya sea directa o indirectamente, por lo tanto,
necesitara tratamiento para resguardar su calidad sanitaria (Jonson 1975).
1.4 Agua subterránea
El agua subterránea es la porción del agua bajo la superficie de la tierra la cual
puede ser colectada por pozos, túneles o galerías de drenaje; o que puede fluir
libremente hacia la superficie de la tierra es considerada como agua subterránea.
Si se perfora un orificio en la tierra, se puede encontrar un suelo húmedo o
igualmente saturado. Aquella agua que empieza a fluir libremente hacia el interior
del orificio, es conocida como “agua subterránea”, cuya característica distintiva
del resto de agua bajo el suelo, es que se encuentra a una presión mayor que la
atmosférica (Todd, 1980).
El agua subterránea no es pura debido a que contiene iones minerales disueltos.
La mayoría de las aguas subterráneas no contienen partículas suspendidas y
prácticamente ninguna bacteria o materia orgánica y es usualmente clara e
inodora. Por ello el agua subterránea, en contraste con las aguas superficiales es
normalmente más higiénica.
4
Algo de un menos del 3% de la disponibilidad de agua dulce fluida de nuestro
planeta, corresponde a ríos y lagos. El 97% restante se encuentra en el subsuelo.
El agua subterránea es una importante fuente de suministro de agua en todo el
mundo. Se ha pensado que el agua subterránea es la fuente primaria de agua en
zonas áridas y las aguas superficiales en zonas húmedas, sin embargo estudios
realizado s en USA, revela que el agua subterránea es importante recurso en
todas las zonas climáticas. Las razones para ello incluyen: su disponibilidad
conveniente en las zonas de uso, su excelente calidad y su relativamente bajo
costo de desarrollo (Gray 1996).
1.5 Fuentes para el ser humano
El agua utilizada para las necesidades humanas tiene como primer origen el agua
de lluvia. Pero la lluvia que cae sobre el terreno se divide en diversas fracciones
según proporciones variables:
1.-Parte regresa a la atmósfera, bajo la forma de vapor.
2.-Otra parte corre por la superficie del suelo y contribuye a alimentar arroyos y
ríos.
3.-El resto (que es la fracción menos importante, de un 20-40%) penetra en el
terreno por infiltración y contribuye a la alimentación de los manantiales y de las
capas profundas.
Precisamente en función de esa clasificación se recurre unas veces a las aguas
superficiales y otras a las aguas subterráneas habiéndose precisado que, según
las instrucciones generales del consejo superior de higiene pública no debe
recurrirse a las aguas superficiales más que cuando cualquier otra solución resulte
irrealizable.
5
1.6 Calidad del agua
La calidad del agua queda definida por su composición y el conocimiento de los
efectos que puedan causar cada uno de los elementos que contiene o el conjunto
de todos ellos. Permitiéndose establecer las posibilidades de su utilización,
clasificando de acuerdo con los límites estudiados su destino para bebida, usos
agrícolas, industriales entre otros.
El agua, para que sea útil, debe reunir una serie de características que depende
del uso que queramos darle, el agua puede llevar disueltas mayor o menos
cantidad de sustancias o arrastrar o no algunos organismos mas o menos nocivos
para la salud, se dice que debe tener mayor o menor calidad, teniendo siempre en
cuenta lo que se quiera hacer con ella. Se entiende por calidad natural” del agua
al conjunto de características fisicoquímicas y bacteriológicas que presenta en
estado natural en los ríos lagos manantiales, en el subsuelo o en el mar.
El agua en la naturaleza va cargándose con un sin fin de sustancias a su paso por
el aire, por la superficie de la tierra, por el interior del suelo y cambia sus
características. Es muy difícil que el agua procedente de distintos sitios, tenga una
calidad idéntica. Existen tantas calidades naturales como masas de agua
diferentes y, en condiciones naturales, algunas de ellas son directamente
aprovechables por las personas para beber o regar, mientras que otras a pesas de
ser tan naturales nunca se utilizan para esto, como ocurre con el caso del agua del
mar.
Un agua esta contaminada y no será útil, por lo tanto para determinados usos,
cuando las medidas de aquellas características físicas, químicas y bacteriológicas,
6
arrojen valores a los aconsejable en cada uno de los casos (Custodio E. y Llamas,
1983).
1.7 Calidad del agua subterránea
En casi todos los lugares, el agua subterránea en su estado natural, es de calidad
sanitaria satisfactoria y segura para su consumo. Generalmente la apertura a
través de las cuales fluye el agua en el suelo son muy pequeñas, esto proporciona
una acción filtrante de las partículas que se encuentran originalmente en
suspensión en el agua, afectando sus cualidades físicas, químicas y
microbiológicas (Uric, 1984).
La calidad del agua subterránea depende de una serie de factores: (1) la
naturaleza del agua de lluvia, la cual puede variar considerablemente,
especialmente en términos de acidez debido a la contaminación y a los efectos del
aerosol marino que afecta especialmente a las zonas costeras; (2) la naturaleza
de las aguas subterráneas existentes las cuales pueden tener una edad de
decenas de miles de años; (3) la naturaleza del suelo a través del cual el agua
puede infiltrar; y (4) la naturaleza de la roca que forma el acuífero (Gray 1996).
La distancia mínima de un pozo a una posible fuente de contaminación deberá ser
suficientemente grande, como para asegurarse de que cualquier escurrimiento
superficial no alcance a llegar al pozo (Ver Tabla 1).
7
Tabla 1. Distancias mínimas recomendadas desde varios tipos
de fuentes de contaminación.
Fuentes de contaminación Distancia mínima recomendada
Alcantarilla de hierro fundido con juntas mecánicas o
emplomadas
3 metros
Fosa séptica o alcantarilla de losa fuertemente unida 15 metros
Retrete de foso de tierra, fosa de filtración o campo de
drenaje
23 metros
Resumidero que recibe aguas negras sin tratar 30 metros
Fuente: (Uric, 1984)
8
1.9 ASPECTOS MICROBIOLÓGICOS
1.9.1 Microbiología del agua
Las aguas no sólo contienen su propia flora microbiana, sino que también
contienen microorganismos procedentes del suelo y posiblemente
microorganismos de los animales y de las aguas residuales. En las aguas
superficiales de los ríos embalses, aguas estancadas de los lagos y las grandes
lagunas, el contenido de microorganismos es muy variable, pudiendo encontrarse
desde varios millones de mililitros después de una tormenta de lluvia, hasta un
número relativamente bajo, como consecuencia de auto depuración que tiene
lugar en lagos y lagunas de aguas tranquilas. Las aguas subterráneas de
manantiales y pozos, que han sido atravesado estratos rocosos y capas del suelo
hasta un determinado nivel, han sido eliminadas de las mismas, la mayoría de las
bacterias también la mayor parte de las otras partículas es suspensión (Pelczar,
1993).
9
1.9.2 Principales géneros de bacterias que se encuentran en el agua
Las más comunes son del género pseudomonas (flourecens y aeruginosa o
pyocyanea), que producen un pigmento soluble en el agua, a la que dan
fluorescencia verde y varias especies de los géneros Serratia, Flavobacterium,
chromobacterium, que producen pigmentos insolubles en el agua. Estas bacterias
naturales del agua se consideran generalmente como no patógenas para el
hombre. Cabe mencionar que algunas de ellas, en especial las formas
fluorescentes que sobreviven frecuentemente al proceso de purificación causan
sabores extraños en productos alimenticios y tiene importancia desde el punto de
vista industrial. Además, es posible que Pseudomona aeruginosa tenga alguna
participación de disturbios entéricos de origen hídrico.
1.9.3 Microorganismos patógenos del agua.
Los microorganismos patógenos del agua mas frecuentes transmitidos por el agua
producen infecciones del aparato digestivo, fiebre tifoidea, paratifoidea, disentería
(bacilar y amibiana) y cólera. Los agentes etimológicos de estas se encuentran en
las materias fecales y orina de ríos infectados cuando son eliminados pueden
llegar a un deposito qué desemboque en una fuente de agua para beber.
1.9.4 Organismos del grupo coliforme
Desde hace tiempo se reconoce que los organismos del grupo coliforme son un
buen indicador microbiano de la calidad del agua potable, debido principalmente a
que son fáciles de detectar y enumerar en el agua. En general, se caracterizan por
su capacidad de fermentar la lactosa en cultivos a 35 o 37 °C con producción de
ácido, gas y aldehído en un lapso de 24 a 48 horas, son bacilos gram negativos y
también oxidasa-negativas y no forman esporas y entre ellos se encuentran las
especies E. Coli, Citrobacter, Enterobacter y Klebsiella. Las bacterias coliformes
no deberían ser detectadas en sistemas de tratamiento de abastecimiento de agua
10
y, si así ocurriese, ello es indicio de que el tratamiento fue inadecuado o de que se
produjo contaminación posteriormente (Organización Panamericana de la Salud,
1997).
1.9.5 Organismos coliformes fecales
Estos son organismos coliformes que son capaces de fermentar la lactosa a
temperaturas de 44.0 a 45.5 °C con producción de gas y ácido y que también
forman indol a partir de tritófano; entre ellos se encuentran los del género
Escherichia y, en menor grado, algunas cepas de Enterobacter, Citrobacter y
Klebsiella. DE todos estos microorganismos, solo los E. Coli tienen un origen
específicamente fecal, pues están siempre presentes en grandes cantidades en
las heces humanas, de los animales y de los pájaros y rara vez se encuentran el
suelo y en el agua que no haya sufrido un tipo de contaminación fecal
(Organización Panamericana de la Salud 1997).
1.9.6 Salmonella
La Salmonella se presenta comúnmente en el agua impura pero solo
ocasionalmente se le ha aislado de las aguas tratadas, ya que la cloración es
altamente efectiva para controlar la bacteria. Los síntomas típicos de la
Salmonelosis son gastroenteritis aguda con diarrea, frecuentemente asociada con
dolores abdominales, fiebre, nauseas, vomito dolor de cabeza y en casos graves
incluso colapso y posiblemente muerte (Gray 1996).
11
1.9.7 Mesófilos aerobios
Al grupo de organismos mesofìlicos aerobios pertenece una gran variedad de
microorganismos, de hecho, están incluidos todos aquellos microorganismos
capaces de desarrollar ente 20 a 37 °C, en condiciones de aerobiosis.
Dentro de la flora aerobia mesofilica tenemos bacilos, cocos, Gram. Positivos y
Gram. Negativos, aislados o agrupados en todas la variedades que nos son
familiares (Instituto Politécnico Nacional 1993).
1.9.8 Vibrio Cholerae
El género Vibrio pertenece a la familia Vibrionaceae, se caracteriza por ser bacilos
curvos Gram. negativos, forma de cadenas de “s” o en espiral. Son móviles con
uno o tras flagelos, aerobios o anaerobios facultativos. La especie patógeno Vibrio
Cholerae produce cólera, la cual es endémico y con los síntomas de vómitos,
diarreas blancuzcas, que acarrear deshidratación intensa, perdida de minerales y
aumento de acidez sanguínea de los tejidos que conducen a la muerte (Gray
1996).
1.9.9 Normas oficiales para el agua destinada a consumo humano
La secretaria de salud establece por medio de la Norma Oficial Mexicana NOM-
127-SSA1-1994, salud ambiental, agua para uso, limites permisibles de calidad y
tratamientos a que deben someterse el agua para su potabilizacion (ver tabla 2).
Estas especificaciones son con la modalidad de reducir al máximo los riesgos de
adquirir enfermedades.
12
Tabla 2 Límites permisibles de características microbiológicas
Características Límite permisible Organismos coliformes totales 0NMP/100 ml
0 UFC/100 ml
Organismos coliformes fecales No detectable NMP/100 ml
Ó UFC/100 ml
Salmonella No detectado
Vibrio Cholerae No detectado
UFC: unidades formadoras de colonias NMP: numero mas probable
Fuente: Diario Oficial de la Federación, 1996
13
II. MATERIALES Y METODOS
2.1 Descripción de la zona de estudio La presente investigación se realizó en la comunidad del Ejido Guadalupe
Victoria, campo 6, del Valle del Yaqui ubicado en el Block 604, municipio de
Cajeme , cuenta actualmente con 273 habitantes. Es un lugar que principalmente
la gente se dedica a la agricultura. Su superficie aproximada es de 16 hectáreas y
sus coordenadas son las siguientes: Longitud 109º 58’ 24’’ Oeste, Latitud 27º 25’
16’’ Norte, Altitud 30 m sobre el nivel del mar (figura 2),
14
Figura 2 Mapa del Ejido Guadalupe Victoria
El ejido cuanta con 65 casa-habitación y 273 habitantes según el último censo
poblacional del INEGI.
EL pozo donde ese abastecen los pobladores del lugar (Figura 3) se encuentra en
la parte este y el agua corre por las tuberías a cada una de las casa del lugar
teniendo una distancia a la primer casa de 40 m y la ultima como 600 m
aproximadamente quedando el resto de las casas en el centro del ejido.
15
Figura 3 Pozo del Ejido Guadalupe Victoria
Existen dos drenes de aguas negras que rodean prácticamente a la comunidad, el
dren de la calle 600 en la parte sur y el de la calle 500 al norte, que están
aproximadamente a 1500 m y 500m del pozo respectivamente.
16
2.2 Sitios de muestreo Para la realización de esta investigación, se seleccionaron 5 puntos de
muestreo elegidos al azar y de forma representativa cubriendo todo el Ejido.. Para
ello se seleccionaron el pozo, y 4 llaves (la escuela, la primera casa frente el pozo,
una casa bajo el tinaco, y una casa de la orilla del ejido) del agua consumida en el
Ejido Guadalupe Victoria (tabla 3).
Tabla 3. Ubicación de los sitios de muestreos
Sitio
Ubicación
Punto 1 Escuela Primaria Gpe. Victoria
Punto 2 Pozo sin clorar
Punto 3 Casa frente del pozo
Punto 4 Casa junto al tinaco
Punto 5 Casa frente del kinder
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2.3 Periodos de muestreo Para llevar a cabo este estudio, se realizaron muestreos mensuales desde el 24
de febrero de 2004 al 18 de Enero de 2005 (tabla 4).
Muestreo Fecha de muestreo
I 24 de febrero de 2004
II 23 de marzo de 2004
III 20 de abril de 2004
IV 18 de mayo de 2004
V 15 de junio de 2004
VI 13 de julio de 2004
VII 24 de agosto de 2004
VIII 21 de septiembre de 2004
IX 19 de octubre de 2004
X 23 de noviembre 2004
XI 14 de diciembre 2004
XII 18 de enero de 2005
Tabla 4. Periodo de muestreo
18
2.4 Toma y transporte de la muestra Para la recolección de las muestras se utilizaron frasco estériles de 500 ml. En la
toma de la muestra, se dejó correr el agua por 5 minutos y se abrió el frasco
cuidando de no tocar la boca con la mano ni con la llave. Se recogieron
aproximadamente 2/3 del volumen del frasco.
Las muestras se transportaron en hielo a unos 4° C aproximadamente, cuidando
que el hielo cubra hasta la altura del agua. El análisis bacteriológico se realizo en
un tiempo no mayo de 6 horas, después de que la muestra se recolecto.
2.5Análisis bacteriológicos 2.5.1 Determinación de la cuenta total viable de mesófilos aerobios, por la técnica de vaciado en placa. Para llevar acabo este análisis se utilizó la técnica de diluciones por vaciado en
placa. Primero la muestra se homogeniza agitándola 25 veces, se toma una
alícuota de 10 ml y se agregan 90 mil de agua estéril para obtener la dilución 10 -1
, posteriormente de toma 1 ml de la dilución homogenizada y se añade en un tubo
con 9 ml de agua estéril obteniendo la dilución 10 - 2 , luego se toma un mililitro de
la muestra directa, de la dilución 10 -1 y de la dilución 10 -2 , y se depositan en
cajas petri respectivamente. Después se le añaden de 15-20 mililitro de Agar
Cuenta Estándar Métodos previamente esterilizado, se dejan solidificar y se
incuban de 35-37 °C durante 24-48 horas. Para determinar las unidades
formadoras de colonias (UFC/ml). Se multiplica el numero de colonias por la
inversa de la dilución correspondiente (Fernández, 1981).
19
2.5.2 Determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales y coliformes fecales por la técnica de fermentación de tubos múltiples. Prueba presuntiva Se agita la muestra a fin de homogenizarla y con una pipeta estéril, se inoculan 5
tubos de 10 mil con caldo lactosado doble concentración y campana, con 10 ml de
muestra cada uno. Respectivamente inoculan con 1 ml y 0.1 ml de muestra en
tubos con 10 ml de caldo lactosado simple concentración y campana. Después se
incuban a 37° C durante 24-48 horas, se consideran tubos positivos los que
presenten gas en la campana y turbidez.
Prueba confirmativa Coliformes totales. A partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva, se
inoculan mediante dos asadas, con tubos de 10 ml de caldo bilis verde brillante
2% con campana. Se incuban a 35-37° C por 24-48 horas. Los tubos positivos
presentan gas y turbidez. El numero mas probable/100ml de coliformes totales en
la muestra, se determina basándose en la tabla del NMP.
Coliformes fecales. A partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva, se
inoculan tubos con 10 mil de caldo EC con campana, mediante dos asadas. Se
incuban a 44.5 por 24 horas. Los tubos positivos presentan gas y turbidez.
20
Determinación del numero mas probable (NMP) Los resultados de las pruebas para organismos coliformes totales y fecales se
expresan por la técnica del número más probable (NMP). A cada una de las series
se le determina el número de tubos que fueron positivos en su producción de gas
y turbidez (prueba confirmativa).
Estas cifras significativas se llevan a la tabla del numero mas probable (NMP) y se
determinas el índice de coliformes por 100 ml de muestra.
2.6 Enriquecimiento y aislamiento de Salmonella
Enriquecimiento A partir de la muestra problema homogenizada, se toman 25 ml y se inocula en
225 ml de caldo tetrationato base o caldo Selenito Cistina, posteriormente se
incuban a 37°C * por 24 horas.
Aislamiento A partir del medio anterior, se siembra por estrías por agotamiento en agar
McConkey y se incuban a 35-37°C por 24 horas. Se seleccionan las colonias
típicas para su identificación mediante pruebas bioquímicas, además de realizar la
tinción Gram.
21
2.7 Enriquecimiento y asilamiento de Vibrio Cholerae. Enriquecimiento Se toman directamente 25 ml de la muestra problema, totalmente homogenizada y
se inoculan en 225 ml de Caldo Peptona-Alcalino a un pH de 8-9 se incuban de
35-37°C durante 24 horas (Fernández, 1981).
Aislamiento
Posteriormente se siembra por estrías por agotamiento en agar TCBS y se incuba
de 35-37° C por 24 horas. Se seleccionan colonias típicas para su identificado
mediante pruebas bioquímicas, además de realizar la tinción Gram.
22
III RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En el presente estudio se analizaron 60 muestras de agua procedente de
diferentes sitios de muestreo del Ejido Guadalupe Victoria, Cajeme, Sonora,
comprendidas durante el periodo de febrero de 2004 a enero de 2005.
Se les realizaron análisis microbiológicos, los cuales fueron comparados con las
normas oficiales mexicanas establecidas por la Secretaria de Salud y Asistencia,
NOM-127-SSA1-1994. Los resultados fueron los siguientes:
3.1 Determinación de cuenta total viable de bacterias mesofílicas aerobias. Los resultados muestra que en los análisis realizados en el periodo de febrero a
enero presentaron resultados negativos en todas las muestras excepto en el
muestro 1, 11 y 12 en la toma 2 (pozo) como se observa la tabla 5, donde se
presentaron conteos altos respecto a los demás muestreos aunque no sobrepaso
el limite de 200 UFC/ml, además durante estos muestreo el nivel de cloro
residual fue de cero ppm (anexo 3). lo cual asevera la presencia de
23
microorganismos, además que dos días antes de la toma se presentaron lluvias
fuertes.
El agua de la llave no mostró incidencia significativa en la cantidad de mesófilos
aerobios debido a que no se detecto presencia elevada de estos en los doce
muestreos realizados. En general se presentó una carga bacteriana relativamente
nula, lo cual demuestra la buena eficiencia del proceso de desinfección, así como
la inocuidad del pozo.
3.2 Número más probable (NMP) de coliformes totales y fecales
La estimación de NMP de organismos coliformes permite evaluar los riesgos de
contaminación revientes en el agua. La SSA establece como límite un máximo de
0 NMP/mil de coliformes totales.
Como se muestra en la tabla 5 solo en 3 muestreos del agua de pozo se reporto la
presencia de NMP/ml, esto corresponde al 25% de coniforme totales y el 16.6% de
coliformes fecales, las demás muestras mostraron un resultado negativo para
esta prueba.
En general se considera que el agua es de buena calidad sanitaria y que el agua
de pozo no es consumida por los habitantes del ejido si no después de ser
clorada.
3.3 Aislamiento e identificación de Salmonella y Vibrio Cholerae.
En las 60 muestras analizadas en el presente estudio no se detectaron la
presencia de Salmonella y Vibrio Cholerae, por lo que el 100% de las muestras
cumplen con la norma.
24
parámetro muestreos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Mesófilos aerobios UFC/ml 47 23 10 4 7 11 10 5 12 20 49 49 Coliformes totales NMP/100 ml 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 9 Coliformes fecales NMP/100 ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 9
Tabla 5. Resultados de análisis microbiológicos del agua pozo (toma 2)
25
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos en la presente investigación, se concluye lo
siguiente:
• El agua consumida en el Ejido Guadalupe Victoria Cajeme Sonora,
presenta una muy baja incidencia de bacterias mesofílicas aerobias,
descostrando el bueno proceso de cloración.
• En cuanto a coliformes totales y fecales, se presento solo fuera de limite la
muestra del pozo pero esta incidencia solo se presento en el muestreo 1,
11 y 12 por lo que se concluye que por haber estado lloviendo días antes
pudo haber habido infiltraciones a través de tuberías en mal estado.
• No se detecto la presencia de Salmonella y Vibrio Cholerae en ninguno de
los sitios de muestreo. Lo que demuestra la buena calidad sanitaria
respecto a estos patógenos.
• Todas las muestras cumplieron con los parámetros establecidos por la
norma.
26
BIBILOGRAFIA
Custodio E. y Llamas M.R. 1983. Hidrológica Subterránea. Tomo 1y 2. Ed.
OMEGA, Barcelona, España. P. 1037-1063.
Diario Oficial de la Federación (1996). Norma Mexicana para agua de consumo
humano. Gobierno Constitucional de los Estado Unidos Mexicanos.
Fernández, Eduardo. (1981) Microbiología Sanitaria: agua y alimentos, Volumen I,
Universidad de Guadalajara, México DF.
Giono C. Silvia Gutiérrez (1991) Manual de procedimientos para el aislamiento y
caracterización de Vibrio Cholerae. Publicación Técnica INDRE No. 10 México,
DF.
Gray, N.F. (1996) Calidad del agua potable: problemas y soluciones, Editorial
Acribia, S. A. Zaragoza España.
Jonson EE. 1975. El agua subterránea y los pozos. Jonson Division, UOP Inc.
Saint Paul, Minnesota EUA. P. 1-90
López A. Pedro 1985. Abastecimiento de agua potable disposición y eliminación
de excretas, Instituto Politécnico Nacional (IPN) México.
Maskew Fair Gordon. 1996. Ingenierita sanitaria y agua residual. Volumen I. y II,
Grupo Noriega editores, editorial Limusa S.A. de C.V. México DF.
Merck E. (1994) Manual de Medios de Cultivo, Darmstadt, Alemania.
27
Organización Panamericana de la Salud. (1997) Guías para la Calidad del Agua
Potable, Volumen 2, Washington. DC. EE.UU.
Pelczar y Reíd y Chan 1988. Microbiología. Editorial Mc Graw Hill, 4ta. Edición
Mexico D.F.
Ricklefs, R. E. Invitación a la ecología. La economía de la naturaleza. Editorial
Panamericana 4ta. Edición. Madrid, España, 1998.
Rodie E. y W. A. Hardenberg 1975. Ingeniería Sanitaria. Editorial Continental,
México DF.
Todd D. K. 1980. Groundwater. Ed. John Wiley & Sons, Inc. New York, N.Y.
p 1-101
Ulric P. Gibson y Redford D. Singuer (1984). Manual de los pozo pequeños,
Editorial Limusa. México DF.
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ANEXOS
29
ANEXOS Anexo 1. Hoja de control para el muestreo.
Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4 Muestra 5
Lugar de
Muestreo
Hora de
Muestreo
Clave
identificación
Muestra
Clave uso de
Laboratorio
Tipo de
Muestra
T° Muestra
T° Ambiente
pH
Cloro residual
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Anexo 2. Tabla de resultados registrados de pH.
Punto 1 Punto 2
Punto 3 Punto 4
Punto 5
NOM 6,5 NOM 8,5
24-Feb 7.5 7.3 7.6 7.5 7.3 6.5 8.5 23-Mar 7.6 7.6 7.5 7.4 7.5 6.5 8.5 20-Abr 8.4 7.4 7.9 8.3 8.2 6.5 8.5 18-May 7.4 7.6 7.4 7.3 7.5 6.5 8.5 15-Jun 7.2 7.2 7.4 7.2 7.2 6.5 8.5 13-Jul 7.5 7.9 8 7.9 8.1 6.5 8.5 24-ago 7.5 7.3 7.6 7.5 7.3 6.5 8.5 21-sep 7.6 7.6 7.5 7.4 7.5 6.5 8.5
19-oct 8.4 7.4 7.9 8.3 8.2 6.5 8.5
23-nov 7.4 7.6 7.4 7.3 7.4 6.5 8.5
14-dic 7.2 7.2 7.4 7.2 7.2 6.5 8.5
18-ene 7.6 7.6 7.5 7.4 7.5 6.5 8.5
Anexo 3. Tabla de resultados registrados de cloro residual.
Punto 1 Punto 2 Punto 3 Punto 4 Punto 5 NOM 1 NOM 1,524-Feb 1.5 0 1 1.5 1 1 1.5 23-Mar 1 0 1.5 1 1.5 1 1.5 20-Abr 1 0 1 1.5 1 1 1.5 18-May 3 0 3 3 3 1 1.5 15-Jun 3 0 3 3 3 1 1.5 13-Jul 1 0 1.5 1 1.5 1 1.5 24-ago 1.5 0 1 1.5 1 1 1.5 21-sep 1.5 0 1 1.5 1 1 1.5 19-oct 1 0 1.5 1 1.5 1 1.5 23-nov 1 0 1 1.5 1 1 1.5 14-dic 3 0 3 3 3 1 1.5 18-ene 3 0 3 3 3 1 1.5
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