Il punto di vista dell'anatomo patologoAnna Sapino

1. La determinazione dello stato di HER2 deve essere effettuata sempre al momento della diagnosi sul tumore primario.

2. In presenza di progressione di malattia la determinazione va effettuata sulla lesione metastatica, se disponibile, o sul tumore primario (se non precedentemente effettuata secondo gli attuali standard).

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APQuando farlo? Quando farlo?

1. La determinazione dello stato di HER2 deve essere effettuata sempre al momento della diagnosi sul tumore primario.

2. In presenza di progressione di malattia la determinazione va effettuata sulla lesione metastatica, se disponibile, o sul tumore primario (se non precedentemente effettuata secondo gli attuali standard).

Lesione secondaria non sempre = alla lesioneprimaria (eterogeneità tumorale)

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APQuando farlo? Quando farlo?

Annals of Oncology 21 (Supplement 7): vii112–vii119, 2010

2 CLONI DISTINTI

1 CLONE 100% score 3+1 CLONE 100% SCORE 0/1+

1 CLONE 2% SCORE 3+30% SCORE 2+68% SCORE 0

=

SELEZIONE DI CLONI RESISTENTI??

1. La determinazione dello stato di HER2 deve essere effettuata sempre al momento della diagnosi sul tumore primario.

2. In presenza di progressione di malattia la determinazione va effettuata sulla lesione metastatica, se disponibile, o sul tumore primario (se non precedentemente effettuata secondo gli attuali standard).

3. Occorre rivalutare lo stato di HER2 su malattia residua post-chemioterapia neoadiuvante e trastuzumab?

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APQuando farlo? Quando farlo?

Loss of HER2 Amplification Following TrastuzumabBased Neoadjuvant Systemic Therapy and SurvivalOutcomes

Clin Cancer Res 2009;15(23)

32.0% posttreatment tumors were found to be HER2negative by fluorescence in situ hybridization

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APQuando farlo? Quando farlo?

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APQuando farlo? Quando farlo?

Clin Cancer Res 2009;15(23)

1. If conversion of HER2 status reflects response to therapy, such that only HER2 negative clones remain, the need to complete 1 year of trastuzumab in the adjuvant setting comes into question.2. Furthermore, all patients with early-stage HER2-positive disease who relapseafter adjuvant or neoadjuvant trastuzumab therapy should have biopsies of their recurrent disease and reassessment of their marker status, as we have shown that a change in marker status correlates with outcome in patients who develop metastatic disease

L’immunoistochimica è la metodica più comunemente utilizzata come valutazione di primo livello. Le metodiche ISH vengono prevalentemente utilizzate per l’accertamento dell’eleggibilità alla terapia con trastuzumab nei casi con immunoreattività 2+, e/o quando richiesto dal curante nell’appropriato contesto clinico.

•Necessità di controllo nelle fasi pre-analitiche (fissazione etc).•L’immunoistochimica è AUTOMATIZZATA, è controllabile, è ripetibile.•Le metodiche ISH alcune automatizzate (SISH).

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APCome farlo? Come farlo?

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APCome interpretarlo? Come interpretarlo?

Effects of the change in cutoff values for human epidermal growth factor receptor 2 status by immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization: a study comparing

conventional brightfield microscopy, image analysis-assisted microscopy, and interobserver variation.Arch Pathol Lab Med. 2011 Aug;135(8):1010-6.

• 150 patients with breast cancer scored by 7 pathologists using conventional microscopy, with a cutoff of both 10% and 30% IHC-stained cells, and using automated microscopy with image analysis.

• The IHC results were compared individually and to HER2 status as determined by FISH, using both the approved cutoff of 2.0 and the recently introduced cutoff of 2.2.

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APCome interpretarlo? Come interpretarlo?

Effects of the change in cutoff values for human epidermal growth factor receptor 2 status by immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization: a study comparing

conventional brightfield microscopy, image analysis-assisted microscopy, and interobserver variation.Arch Pathol Lab Med. 2011 Aug;135(8):1010-6.

High concordance was found in IHC scoring among the 7 pathologists. The 30% cutoff led to slightly fewer positive IHC observations. Introduction of a FISH equivocal zone affected 4% of the FISH scores. If cutoff for FISH is kept at 2.0, no difference in patient selection is found between the 10% and the 30% IHC cutoff. Among the 150 breast cancer samples, the new 30% IHC and 2.2 FISH cutoff levels resulted in one case without a firm diagnosis because both IHC and FISH were equivocal.

Automated microscopy and image analysis-assisted IHC led to significantly better interobserver agreement among the 7 pathologists, with an increase in mean scoring time of only about 30 seconds per slide.

IHCL’uso sporadico delle procedure e/o la valutazione di un limitato numero di casi/ anno deve indurre a considerare la centralizzazione dei test presso un laboratorio di riferimento.E’ opportuna l’adesione a programmi di VEQ per IIC su base regionale, nazionale o sovra-nazionale.

ISHLa limitata esperienza nelle procedure e/o la valutazione di un esiguo numero di casi/anno deve indurre a considerare la centralizzazione dei test presso un laboratorio di riferimento.

Controllo dei controllori

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APCome interpretarlo? Come interpretarlo?

CQ FISH NAZIONALECQ FISH NAZIONALEConcordanzaConcordanza

• 2009-201038%

38%25%

• 2010-201175%

25%

63%

38%

A B

Validazione di sistemiPre-analisi:• sistema sottovuoto• formalina a 4°C

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APProspettive future? Prospettive future?

Plos one 2011

Sistemi automatizzati di analisi di immagine• per immunoistochimica• per ISH

2011 HER2 Diagnostica AP2011 HER2 Diagnostica APProspettive future? Prospettive future?