Plaquetas (Trombocitos)

HEMOSTASIA PRIMARIA

Estructuralmente simple y funcionalmente complejo que actan sobre la pared vascular.Es una capa unicelular que cubre la superficie interna de los vasos sanguineos y conforma la pared de los capilaresForma alargada poligonal, con muchas vesiculas de pinocitos y forma complejo de union a celulas vecinas.detecta cambios en las fuerzas hemodinmicasVinculados con procesos fisiolgicos y patolgicosSe originan de la mdula sea, entran en circulacin y colonizan el interior de los vasos.

Endotelio vascular

Mantiene el tono y la estructura vascularRegula el crecimiento vascularRegula la permeabilidad vascular.Interviene en el mecanismo de la inflamacin y de la inmunidad. Regula las propiedades trombociticas y fibrinoliticas de la sangreModula la oxidacin de lpidos (actividad metabolica).

Endotelio vascular - funcin

REGULACIN DEL TONO VASCULAR

Es la primera sustancia que se describi como derivada del endotelio, siendo su descubridor Salvador Moncada en 1976 (30). Esta sustancia deriva del cido araquidnico (a.a.), compuesto que a su vez se forma a partir de los fosfolpidos de membrana por accin de la fosfolipasa . El a.a. puede seguir la va de la lipoxigenasa para formar leucotrienos o la va de la ciclooxigenasa para formar las prostaglandinas. Los pasos para la formacin de estas ltimas son los siguientes: formacin del endoperxido PGG2reduccin a PGH2 con liberacin de una especie de oxgeno reactivo, conversin de PGH2 a las distintas prostaglandinas: prostaciclina (PGI2), tromboxano (TXA2), PGE2, PGD2 y PGF2alfa.La PGI2 es el principal producto de la clula endotelial derivado del cido araquidnico. Posee una accin vasodilatora y antiagregante plaquetaria a travs de la activacin de la adenilciclasa que aumenta el AMP cclico en los vasos sanguneos y en las plaquetas, respectivamente. Comparativamente es mayor su accin antiagregante que vasodilatadora. La PGI2 se sintetiza no solo en el endotelio (principal sitio) sino en las clulas musculares lisas. Los estmulos para su liberacin son numerosos y variados : la presin pulsatil, el shear stress, la bradiquinina, la trombina, la serotonina, el factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF), la acetilcolina y la interleucina1.Los frmacos que se utilizan en teraputica cardiovascular para aumentar su accin o su produccin son: la aspirina, los antagonistas clcicos, los inhibidores de la enzima de conversin de angiotensina (IECA), los nitratos y el magnesio.

ProstaciclinasVasodilatacion

EndoperxidoReduccioprostaglandinasPosee una accin vasodilatora y antiagregante plaquetaria activacin adenilciclasa

AMP cclico en los vasos sanguneos y en las plaquetasComparativamente es mayor su accin antiagregante que vasodilatadora

Prostaciclina PGI2

La enzima oxido ntrico sintetasa (eNO) convierte la L-arginina en NO y citrulina. La fuerza de tensin tangencial (shear stress) activa la eNO , mientras mayor sea la fuerza de tensin tangencial mayor es la activacin de la eNO El oxido ntrico activa a la guanilato ciclasa (GC) en el musculo liso vascular, produciendo un incrementeo de concentraciones de guanosin monofosfato cclico (GMPc) El guanosin monofosfato cclico (GMPc) disminuye las concentraciones de calcio citosolico, causando la ralafacion del musculo liso y la disminucin del tono vascular.

Oxido Ntrico (NO)Vasodilatacion

regula el tono del msculo liso vascular inhibe la adhesin y agregacin plaquetarias inhibe la adhesin e infiltracin de leucocitos inhibe la proliferacin de cl. muscul. lisas vasculares previene la oxidacin de las ldl-colesterol efecto antiproliferativo al oponerse a los efectos del factor de crecimiento derivado de las plaquetasregula el tono de la arteriola aferente y la relajacin del mesangio renal FUNCIONES DEL NO

Es el ms potente vasoconstrictor endgeno conocido hasta el momento, diez veces superior a laAG-II. Es un pptido de 21 aminocidos que tiene tres isoformas: la endotelina 1 (ET-1), la endotelina 2 (ET-2), y la endotelina 3 (ET-3), de las cuales solo la ET-1 se sintetiza en el endotelio, pudiendo tambin hacerlo en las clulas musculares lisas del vaso sanguneo.

El primer precursor que forma el gen de la ET-1 es la preproendotelina de 303 aminocidos, luego se forma la big-endotelina de 39 aminocidos que por accin de la enzima convertidora de endotelina forma el pptido ET-1. No se almacenan en los grnulos celulares ni los precursores ni la propia endotelina, por lo tanto la misma es formada de novo por estmulos que actan a nivel gnico. Los estmulos que favorecen su liberacin y formacin son : la hipoxia, el shear stress o fuerza tangencial del flujo sanguneo, la trombina, la angiotensina II, las catecolaminas, la insulina, el factor transformante beta y las LDL oxidadas. Por su parte el NO, la PGI2 y los pptidos natriurticos auriculares (ANP) inhiben su sntesis.

EndotelinaVasoconstriccin

Poderoso vasoconstrictor.Induce la proliferacin del musculo liso vascularEstimula la adhesin de los neutrofilos y las plaquetas al endotelio.Es un factor quimiotactico para los monocitos.

Funcin de la endotelina

El endotelio tiene un rol primordial en la regulacin del Sistema Renina Angiotensina Aldosterona (SRA-A) dado que la enzima convertidora de angiotensina (ECA) se expresa en la superficie luminal de las CE. La AG-II produce vasoconstriccin directa e indirecta, esta ltima por estmulo en la produccin de ET1. Debido a que la ECA degrada tambin a la bradicinina, hormona que estimula la liberacin de PGI2 y NO, esta enzima potencia el efecto vasoconstrictor de la AG-II

Angotensina IIVasoconstriccin

E-nzima convertidora de angiotensina (ECA)se expresa en la superficie luminal de las CEVasoconstriccin directaVasoconstriccin inderectaECA degrada la bradicinina: hormona que estimula la liberacin de PGI2 y NOpotencia el efecto vasoconstrictor de la AG-II

ECA potencia la AG-IIdegrada la bradicininaAG II estimula la produccin de ET I

El endotelio produce otros vasoconstrictores que a diferencia de los ya vistos, estn ms relacionados con situaciones patolgicas que llevan a disfuncin endotelial. Son el anin superxido y diversos productos derivados del cido araquidnico como los endoperxidos, el TXA2 y la PGH2

Otros vasoconstricoteresVasoconstriccin

ENDOTELIO Y HEMOSTASIACapa no trombognicamantiene un fino equilibrio de sustancias.regulan la agregacin plaquetariala coagulacinla fibrinolisisinhibe la agregacin plaquetaria:PGI2NOfuncin antitrombtica se debe a la accin:heparansulfato y la trombomodulina que se encuentran en la superficie de las CE.

Fisiologa Plaquetas (Trombocitos)--

La hemostasia es un proceso complejo que permite prevenir la prdida espontnea de sangre y detener la hemorragia causada por daos al sistema vascular:hemostasia primarialahemostasia secundaria (coagulacin)la fibrinolisis.

TROMBOPOYESISLos precursores megacariocticos no pueden ser distinguidos morfolgicamente de otras clulas precursoras de la mdula sea.BFU: MK21 dasCFU-MK11 dasLD-CFU-MKmegacarioblastos con bajacelularidad y alto contenido de DNACD34+

Clulas troncaleshematopoyticasClulastroncalesmieloidesCl. progenitorasmegacariocitoeritroideMegacarioblastoMegacariocitoDesprendimiento

Megacarioblastos 18 mNcleo grande nuclolos y cromatina laxa. Citoplasma es muy basfilosin granulaciones.

Promegacariocitos 20 umabundante ribosomancleo comienza a lobularse (herradura)Citoplasma BasofloGranulogenesis

megacariocitos granularestamao 35 mncleo multilobuladoCitoplasma acidfilo

megacariocitos maduros _0.02-0.05% MO50-80 mncleo multilobuladocitoplasma acidfilopocas mitocondriasSDM desarrolladogrnulos citoplasmticos.El proceso de maduracin demora 10 das

Plaquetas: 1-3 um de dimetroAnucleados150-300 mil/mmVM.: 8-12 das

3

Un megacariocito es capaz de producir entre 1000 y 5000 plaquetas

Regulacintrombopoyetina (TPO): hormona que induce la proliferacin de megacariocitos Citocinas involucradas con este proceso: IL-3, IL-6 e IL-11.

ESTRUCTURA DE LAS PLAQUETAS

Membrana plaquetariaformada por una doble capa fosfolipdicaTiene receptores para: ADP, TxA2, trombina Protenas adhesivas: fibringeno, fibronectina, laminina, vitronectina, factor de von Willebrand (FvW) y para ligandos fibrosos como el colgeno, adems, posee enzimas importantes para el funcionamiento celular y fosfolpidos

Lpidos: tienen un papel estructural como metablico, participando como mediadores lipdicos de la activacin plaquetaria y en procesos de transmisin de seales.

Glicoprotenasparticipan activamente en los procesos adhesivos y agregatorios en las plaquetas.

GPIIb-IIIa. La GPIIb-IIIA (CD41-CD61) - receptor plaquetario para el fibringeno, protenas adhesivas como el factor von Willebrand, fibronectina y vitronectina.

GPIb-IX-V

Grnulos plaquetarios: alfa, los densos y los lisosomas.

Grnulos alfa (200-400 nm): ms abundantes, contienen protenas regulacin del balance entre la formacin del cogulo y su disolucin.

Grnulos densos: elevado contenido de calcio y fsforo inorgnico contiene ademas serotonina

Lisosomas: exposicin de protenas lisosmicas en la membrana de las plaquetas activadas como la CD63, que se utiliza como un marcador de fuerte activacin plaquetaria.

CD63

Citoesqueleto plaquetariocompuesto de polmeros de tubulina y actina, y otras protenas

Sistema canicular abierto

Sistema tubular denso

Anticuerpo monoclonalEstructura antignicaFuncinCD62P P selectinaActivacin plaquetariaCD41GPIIbAgregacinCD61GPIIIaPAC-1GPIIb/IIIa de alta afinidad Ambas estructuras conforman el receptor para el fibringenoCD42aGPIXAdhesinCD42bGPIbaCD42cGPIbbTodas estas subunidades conforman el receptor del factor von WillebrandCD42d GPVCD36GPIVReceptor para la trombospondina y el colgenoCD63GP53 Protena lisosomalCD51 RVNa Cadena a del receptor de vitronectina

Marcadores Plaquetarios

FuncinLas plaquetas intervienen en el proceso de hemostasia. A nivel de la hemostasia primaria, trombo plaquetario

Tambin en la hemostasia secundaria, a travs de la liberacin de factores.

La principal funcin de las plaquetas es evitar la prdida de sangre por adhesin a la pared del vaso daado e interaccin con otras plaquetas, formando la base del tapn hemosttico.

Este proceso involucra fenmenos de AdhesinSecrecin Agregacin plaquetaria

FORMACIN DEL TROMBO PLAQUETARIO

ENVEJECIMIENTO Y REMOCIN PLAQUETARIAlas plaquetas circulan 8 a 10 das

secuestradas por el sistema fagoctico mononuclear (SFM)_bazo- inmune: PA Ig G- no inmune: dao mitocondrial (apoptosis)

PRUEBAS

PUNTOS

Pruebas que estudian la fragilidad capilar.

Pruebas que estudian la funcionalidad plaquetaria.

Recuento Plaquetario.

Tiempo de Hemorragia(Duke).

Pruebas de Fragilidad Capilar Rumpel- Leede

Esta prueba consiste en evaluar la resistencia que ofrecen las paredes capilares al AUMENTO DE LA PRESIN INTRACAPILAR Y LA ANOXIA

POSITIVO : Mas de 10 petequiasUn ascenso de la fragilidad capilar en : Trombocitopenias-Enfermedad Von Willebrand-Escobuto- Prpuras vasculares.

Pruebas de Agregacin plaquetariaLa prueba consiste en la evaluacin de la capacidad que tiene las plaquetas al unirse a si mismas.Plasma

sustanciaADPColgenocido AraquidnicoFormolTrombinaFactor activador plaquetarioRistocetina.

PlasmaDisminuida:Trombastenia de GlanzmannAumentado:Macroglobulinemia de Waldentrom y en estrs

Pruebas de evaluacin de la funcin secretoria de las plaquetas.Durante la agregacin de las plaquetas estas liberan sustancias en sus grnulos (serotonina, Tromboxano A2, Factor plaquetario4, etc.)Pruebas de retraccin del coguloLa prueba consiste en evaluar la capacidad de retraccin del cogulo, formado previamente, y teniendo en cuenta que depende de la aptitud de las plaquetas para liberar TROMBOSTENINA.

sangre2mlNo anti coaguladasangre

37C-1hora3horas a T ambientesangre

Tiempo de HemorragiaTiempo que transcurre desde que la lesin hasta la formacin de un trombo plaquetario .

MATERIALAlgodn-Portaobjetos-Lanceta-Papel de Filtro- Cronmetro

Alcohol BenzalconioO50% de alcohol etlico de 96% mas Povidona Yodada

Procedimiento

DESINFECTANTE

Tiempo de Hemorragia es de:

1 a 3 minutos.

TECNICA1.-Limpiar el lbulo de la oreja, con algodon embebido en desinfectante, pero sin frotar en exceso.2.-Dejar que seque3.-Colocar el portaobjeto detrs del lobulo de la oreja.4.-Pinchar el lbulo de la oreja cerca del borde inferior y simultneamente, poner en marcha el cronmetro.5.-Retirar el portaobjeto.

6.-Dejar que salga la sangre del lbulo, sin hacer presin sobre l.7.-Recoger con un papel de filtro, cada 30 segundos, la gota de sangre que ste presente en el lbulo.(ojo no se debe tocar la herida , para evitar que se rompa el trombo plaquetario que se esta formando).8.-Despazar un poco de papel de filtro entre cada recogida de sangre, para que las gotas de sta no coincidan sobre la misma zona de aqul.9.-Para el Cronmetro en el momento en eel cual el papel de filtro no se tie con sangre,tras ponerlo en contacto con la superficie del lobulo.

ImportanciaEl Tiempo de Hemorragia est alargado en las Prpuras Vasculares, en las Trombocitopenias, en las Trombopatas congnicas, En la enfermedad de Von Willebrand en los sujetos que han tomado cido acetilsaliclico

Factores que Intervienen1.- Profundidad del pinchazo2.- Mal recogida con el Papel de filtro3.- Mala limpieza4.- Edemas

Recuento de Plaquetas

110,51Sangre: EDTADilucin: 21

Valores normales:

150 000 a 300 000 mm3Se llena de sangre la pipeta de dilucin hasta la seal 0'5 y el lquido de dilucin hasta la marca de 11 se agita suavemente y se deja reposar durante unos segundos tapando los extremos.Formula: #Gr x 10000

Para cargar la cmara se adhiere a las bandas longitudinales, se agita la pipeta se desecha las primera gotas y las siguientes se colocan en el borde del cubreobjetos reposar de 2 a 4 minutosObjetivo: se lee a40x

http://books.google.com.pe/books?id=apSP3g_oXNoC&pg=PA47&dq=megacariocito+granular&hl=es&ei=HVXmTu3sIIbi0QH9yMjgBQ&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=5&ved=0CEQQ6AEwBA#v=onepage&q=megacariocito%20granular&f=falsehttp://www.incan.org.mx/revistaincan/elementos/documentosPortada/1193426538.pdfhttp://bvs.sld.cu/revistas/ang/vol1_2_00/ang08200.pdfhttp://www.wfh.org/3/docs/Publications/Monographs/TOH-19_platelet-function-Rev2008_SP.pdfhttp://bvs.sld.cu/revistas/ang/vol1_2_00/ang08200.htm