PRÁCTICA DE LABORATORIO

DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO Y VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR. TIEMPO COAGULACIÓN

Y TIEMPO DE SANGRÍA

Nombres: Cristhian Jesús

Apellidos: Cervera Varías

Curso: Laboratorio de Fisiología

Año: Tercero

Sección: 06B

Docente: Dra. Carmen Torres Lopez

Chiclayo, 24 de abril de 2016

INTRODUCCIÓN

La sangre está compuesta por plasma (un componente líquido), glóbulos blancos (leucocitos), glóbulos rojos (eritrocitos) y plaquetas. El cuerpo humano contiene unos 5 litros de sangre. Una vez que la sangre es expulsada desde el corazón, tarda de 20 a 30 segundos en recorrer por completo el sistema circulatorio y volver.

Mientras circula por el cuerpo, la sangre realiza varias funciones esenciales. Distribuye oxígeno y nutrientes esenciales (como grasas, azúcares, minerales y vitaminas) a los diferentes tejidos del organismo. Además, transporta el dióxido de carbono a los pulmones y lleva otros productos de desecho hacia los riñones para que sean eliminados del organismo. Asimismo, circulan en la sangre distintas hormonas (mensajeros químicos) que permiten que las diferentes partes del cuerpo se comuniquen entre sí. También transporta ciertos componentes que combaten infecciones y otros que sirven para hacer cesar los sangrados.

El hematocrito mide la porción de la sangre compuesta por glóbulos rojos. En concreto, mide el volumen de glóbulos rojos que transportan oxígeno a través de la corriente sanguínea a todas las células del organismo. Esto es muy importante, ya que se necesita oxígeno para mantener los órganos sanos.

En el presente informe, se trabajarán procedimientos para determinar patrones sanguíneos y de coagulación.

OBJETIVOS

1. Determinar el hematocrito y la velocidad de sedimentación (VSG).

2. Conocer aplicaciones clínicas de las alteraciones del Hematocrito y VSG.

3. Observar el fenómeno de coagulación.

4. Determinar el tiempo de sangría y el tiempo de coagulación.

5. Conocer aplicaciones clínicas de las alteraciones de la coagulación.

MARCO TEÓRICO

La proporción de la sangre que corresponde a glóbulos rojos se conoce como hematocrito, es decir, si una persona tiene un hematocrito de 40 significa que el 40% del volumen sanguíneo está formado por las células y el resto es plasma. El hematocrito de un varón adulto alcanza un promedio de 42 (40–55), mientras que en las mujeres es de 38 (35–50). Estos valores son muy variables, dependiendo de la persona tiene anemia, del grado de actividad corporal y de la altitud en la que reside la persona. Sus variaciones pueden poner en evidencia diferentes patologías. En los varones sanos, el número medio de eritrocitos por milímetro cúbico es de 5.200.000 (±300.000); en las mujeres es de 4.700.000 (±300.000). Las personas que viven en altitudes elevadas tienen más eritrocitos.

Conociendo el hematocrito se puede determinar el nivel de Hemoglobina.

El volumen de sangre circulante suma aproximadamente el 7% del peso corporal. Alrededor del 55% de la sangre es plasma, con un contenido de proteínas de 7g/dl.

La principal proteína de los eritrocitos es la hemoglobina compuesta por el hemo que contiene hierro, unido a la globina. La afinidad de la Hemoglobina por el oxígeno varía en relación al pH, la temperatura, la concentración del 2-3 difosfoglicerato.

Los eritrocitos tienen la capacidad de concentrar la hemoglobina en el líquido celular hasta unos 34g por cada 100 ml de células. La concentración no aumenta por encima de este valor porque este es el límite metabólico del mecanismo formador de la hemoglobina en la célula. Además, en las personas normales el porcentaje de hemoglobina es casi siempre cercano al máximo en cada célula. Pero cuando la formación de hemoglobina es deficiente, el porcentaje de hemoglobina en las células puede reducirse muy por debajo de este valor, y el volumen del eritrocito puede también reducirse por la menor cantidad de hemoglobina que llena la célula. Cuando el

hematocrito (el porcentaje de sangre que son células, normalmente del 40-45%) y la cantidad de hemoglobina en cada célula son normales, la sangre completa de los varones contiene una media de 15 g de hemoglobina por 100 ml de células; en las mujeres contiene una media de 14g por 100 ml.

Cada gramo de hemoglobina pura es capaz de combinarse con 1,34 ml de oxígeno. Luego, en un varón normal, puede transportarse un máximo de unos 20 ml de oxígeno combinados con la hemoglobina por cada 100 ml de sangre y, en una mujer normal, 19 ml de oxígeno.

La velocidad de sedimentación globular es la velocidad con que sedimenta la sangre y depende principalmente de la densidad del medio que está relacionada con la concentración del fibrinógeno.

Por otro lado, el término hemostasia significa prevención de la pérdida de sangre. Siempre que se corta o se rompe un vaso, se llega a la hemostasia por varios mecanismos: 1) el espasmo vascular; 2) la formación de un tapón de plaquetas; 3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación sanguínea, y 4) la proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente.

El tiempo de coagulación es el lapso de tiempo necesario para que la sangre forme un coágulo, que se determina mediante la recogida de algunos mililitros de sangre en un tubo de cristal y el examen de la formación del coágulo.

El tiempo de sangría es el tiempo que demora en detenerse la sangría producida por una pequeña incisión cutánea.

DESARROLLO

RESULTADOS

NOMBRE

TIEMPO DE COAGULACIÓN

HTOHb

Calculada VSGTIEMPO DE SANGRÍA

37°C T° Ambiente

Willy Rodas 3 min. - 44% 14,6 15 mm/h 1 min. 20 seg.

Imagen 1. Tabla de comparación de hematocrito

Imagen 4. Tubo capilar para determinar el hematocrito posteriormente

Imagen 2. Medición de hematocrito en tabla de comparación

Imagen 3. Tubos de ensayo para determinar el tiempo de coagulación

DISCUSIÓN

Para la realización de la práctica se necesitó extraer una pequeña cantidad de sangre a uno de los alumnos para realizar los procedimientos de laboratorio, que por voluntad propia aceptó participar de esta.

Lo primero que se determinó fue el tiempo de coagulación sanguínea mediante el llenado de una pequeña cantidad de sangre en 3 tubos de ensayo y luego colocándolos en baño María a 37°C. Con la ayuda de un cronómetro, se tomó el tiempo que demoró cada tubo en coagular y se llegó a la conclusión que este fue de 3 minutos. Con la realización de este procedimiento se trata de estimar un hecho parecido que podría ocurrir al interior de nuestro cuerpo; ya que nuestra temperatura corporal es la misma con la que se trabajó (37°C), ofrecida por el baño María. Entonces, se podría tener un aproximado de 3 minutos (rango 7-15 minutos) en que se podría producir el proceso de coagulación en nuestro organismo, en comparación con el hecho en la práctica. Un punto a tener en cuenta es que no se estimó el tiempo de coagulación a temperatura ambiente en la práctica, pero este podría ser de 11 a 19 minutos, según lo estudiado.

Luego, se estimó el hematocrito mediante el llenado del tubo capilar hasta una marca de calibración y luego se llevó a la microcentrífuga por unos 5 a 10 minutos. Al extraer el tubo, este fue llevado a una hoja de marcaje o tabla de comparación de hematocrito como lo muestra la imagen 1 para estimar su medida. Se obtuvo que el hematocrito fue de 44, que es un valor normal. La centrifugación de la sangre permite separar las distintas células de la sangre de acuerdo a su densidad. Entonces, se tiene que las estarán el a base del tubo, más arriba se encontrarán los leucocitos y trombocitos y; por último, en la superficie quedará el plasma sanguíneo.

Imagen 5. Tubo con sangre para determinar la VSG

El valor de la hemoglobina (Hb), se calculó a partir del resultado del hematocrito. Esto se estima mediante la división del hematocrito entre 3 (HTO/3). Ante esto, se obtuvo un Hb calculada de 14,6; lo cual resulta normal en un varón. Esta relación no es tan aceptable, pues en solo se aplica cuando los glóbulos rojos son normocíticos-normocrómicos. En la práctica se utilizó porque el alumno se encuentra en buen estado de salud.

Para calcular la velocidad de sedimentación globular (VSG), se tenía que llenar un tubo de pequeño calibre con sangre y colocarlo en posición vertical durante la sedimentación de eritrocitos y en el transcurso de una hora se leía la distancia a las cual han caído los glóbulos rojos. Por un tema de tiempo no se pudo realizar esta parte de la práctica pero se estimó un valor normal para su edad que sería de 15 mm/h.

Por último, se determinó el tiempo de sangría mediante un pequeño pinchazo en el lóbulo de la oreja del compañero e iniciar el cronometraje hasta que se detenga el flujo sanguíneo. El tiempo que duró este proceso fue de 1 minuto con 20 segundos (rango 1-5 minutos). Esto representa la mínima expresión de la hemostasia, la cual ya está comenzado a ejercer su acción sobre el endotelio para reparar el tejido dañado. Si la sangre hubiera seguido saliendo por el lugar de la incisión cutánea por más de 3 a 5 minutos, se deberían tomar precauciones pues puede ser un indicativo de algún trastorno o falla de los factores de coagulación.

CONCLUSIONES

1. El hematocrito representa la relación porcentual entre la cantidad de glóbulos rojos y el plasma, que oscila entre 40 a 45%. Su valor se puede determinar de muchas formas, pero la más convencional y la utilizada es la práctica es mediante el uso de una tabla de comparación de hematocrito, en donde se estima su resultado. Mientras que, la velocidad de sedimentación globular (VSG) es la velocidad con que se sedimenta la sangre y depende de la concentración del fibrinógeno. La VSG se determina a través de la medición de la distancia recorrida por los glóbulos rojos en su caída durante una hora.

2. Los valores de hematocrito son importantes más que todo para diagnosticar una posible anemia y, en el peor de los casos, una hemorragia interna que puede ser producida por una úlcera u otro factor clínico. Los valores de VSG tienden a aumentar o disminuir de acuerdo a distintas entidades clínicas como por ejemplo en procesos inflamatorios o de anemia esta tiende a subir y, baja en algunos procesos de policitemia o microcitosis.

3. El proceso de coagulación que lleva a la hemostasia consiste en un conjunto complejo de reacciones en el que participan aproximadamente 30 proteínas diferentes. Estas reacciones convierten fibrinógeno, una proteína soluble, en filamentos insolubles de fibrina, que, con las plaquetas, forman un trombo estable. Se han propuesto varios modelos de cascada de coagulación, incluyendo el modelo de la vía intrínseca y extrínseca.

4. El tiempo de coagulación se determina a través del tiempo que demora la sangre en coagular a una determinada de temperatura y de la cual depende el tiempo. El tiempo de sangría es el tiempo que demora en detenerse la sangría producida por una pequeña incisión cutánea.

5. Si se tiene un trastorno de coagulación, significa que no se tienen suficientes plaquetas o factores de coagulación o éstos no funcionan normalmente. Los problemas de coagulación pueden ser a consecuencia de otras enfermedades, tales como enfermedades hepáticas severas. También pueden ser hereditarios. La hemofilia es un trastorno de coagulación. Los trastornos de la coagulación también pueden ser causados por un efecto secundario de ciertas medicinas.

CUESTIONARIO

1. Indique cinco causas de hematocrito elevado.

El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño, casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma).

Los resultados normales varían, pero en general son los siguientes:

Hombres: de 40.7 a 50.3% Mujeres: de 36.1 a 44.3%

Causas de un hematocrito aumentado (disminución de la porción líquida): - Desnutrición, deshidratación o diarreas- Quemaduras - Muestras de O2 bajo en sangre - Policitemia vera: condición que se caracteriza por mieloproliferación

de etiología desconocida.- Síndrome de Mosse: Una condición que involucra la asociación de

cirrosis hepática con policitemia, que es un trastorno mieloproliferativo crónico caracterizado por la producción excesiva de principalmente eritrocitos por la médula ósea.

2. Describa el mecanismo de la Velocidad de Sedimentación Globular y cuál es su importancia.

Cuando se coloca sangre venosa bien mezclada en un tubo vertical, los eritrocitos tenderán a caer hacia el fondo. La longitud de recorrido descendente de la parte superior de la columna de eritrocitos en un intervalo de tiempo determinado se llama velocidad de sedimentación ocular (VSG).

Hay varios factores implicados en este proceso.- Factores plasmáticos: Una VSG acelerada es favorecida por

niveles elevados de fibrinógeno y en menor medida de globulinas (alfa2, beta, gamma).

- Factores eritrocitarios: La anemia aumenta la VSG debido a que la variación de la relación eritrocitoplasma favorece la formación de apilamientos, independientes de las variaciones de la concentración de proteínas plasmáticas.

- Fases de la VSG: a) En los 10 minutos iniciales, hay poca sedimentación en

forma de apilamientos.b) Durante 40 minutos aproximadamente, la sedimentación

se da a una velocidad constante.c) La sedimentación se retrasa en los 10 minutos finales a

medida que las células se apilan en el fondo del tubo.

La VSG es una de las pruebas de laboratorio más antiguas que todavía se emplean. Aunque algunos de sus usos han disminuido cuando se desarrollaron métodos más específicos de evaluación de enfermedades, se han declarado nuevas aplicaciones:

1) En las enfermedades de células falciformes; osteomielitis; ictus; cáncer prostático y enfermedad de la arteria coronaria.2) Tiende a ser notablemente elevada en los trastornos de las proteínas sanguíneas monoclonales tales como mieloma múltiple o macroglobulinemia.3) Es útil y está indicada para establecer el diagnóstico y el seguimiento de polimialgia reumática y artritis temporal.

3. Explicar qué evalúa el tiempo de sangría

Es un examen de sangre que analiza qué tan rápido se cierran los vasos sanguíneos pequeños en la piel para detener el sangrado. Este examen ayuda a diagnosticar problemas de sangrado. El sangrado normalmente se detiene entre 1 y 9 minutos, sin embargo, los valores pueden variar de un laboratorio a otro.

El tiempo de sangría más prolongado de lo normal puede deberse a:

Anomalías vasculares

Defecto de agregación plaquetaria

Trombocitopenia (bajo conteo de plaquetas)

Trastornos adicionales bajo los cuales puede realizarse el examen:

Defectos adquiridos de la función plaquetaria

Defectos congénitos de la función plaquetaria

Trombocitemia primaria

Enfermedad de Von Willebrand

Existe un riesgo muy bajo de infección donde ha habido perforación de la piel y es poco común que se presente un sangrado excesivo.

4. Haga un esquema especificando como y donde se forma un trombo blanco.

Trombo blanco, de conglutinación o cabeza de trombo

Causa: por lesión del endotelio.

Composición: plaquetas y fibrina. Morfología: masa grisácea, quebradiza y seca, que al corte transversal

presenta una alternancia de líneas grises oscuras, de plaquetas, y líneas pálidas de fibrina; a esta disposición en láminas se llama “líneas de Zahn”. La cabeza del trombo está fuertemente adherida a la pared arterial.

Tipos: Cuando los trombos arteriales aparecen en corazón, aorta o arterias de gran calibre y están unidos a su pared sin ocluir la luz, se habla de trombos murales. También son trombos murales los que se presentan en aneurismas. Cuando los trombos aparecen en arterias de menor calibre y ocluyen la luz, se llaman trombos oclusivos.

5. Haga un esquema especificando como y donde se forma un trombo rojo.

Trombo rojo, de coagulación o cola de trombo

Causa: por enlentecimiento del flujo sanguíneo. Composición: hematíes, que le dan su color rojo, leucocitos y fibrina. Morfología: es largo, se forma a continuación de la cabeza, rojizo,

húmedo y débilmente adherido al endotelio, por lo que se puede desprender con facilidad, convirtiéndose en un émbolo. El trombo rojo puede confundirse con un coágulo postmorten, pero el coágulo postmorten es gelatinoso y no está unido a la pared. En cambio, el trombo de coagulación es más consistente y está unido a la pared.

6. ¿En qué consiste el sistema fribrinolítico?

La fibrinólisis es el proceso de degradación del coágulo de fibrina una vez que éste ya no es necesario. La fibrinólisis también ayuda a prevenir la formación del coágulo fuera de la zona del vaso lesionado. Este proceso se inicia por el activador del plasminógeno tisular o por el activador del plasminógeno de tipo urocinasa: ambos convierten el plasminógeno en plasmina. La plasmina entonces degrada el coágulo de fibrina y el fibrinógeno nativo, formando fragmentos llamados productos de degradación del fibrinógeno/ fibrina (PDF). Los mecanismos de fibrinólisis parecen estar conectados con los

factores de contacto del mecanismo intrínseco de la coagulación en que la activación in vivo del factor XII puede tener como resultado la generación de plasmina, y la plasmina puede activar el factor XII. Varios sistemas de regulación previenen un exceso de fibrinólisis; si no, podría tener como resultado una hemorragia.

7. ¿Cómo se evalúa la vía extrínseca de la Coagulación?

Tiempo de protrombina (T.P.)

Es un ensayo de diseñado para detectar defectos en el fibrinógeno, la protrombina, y los factores II, V, VII, y X, y por lo tanto las medidas de las actividades de la vía extrínseca de la coagulación. Cuándo cualquiera de estos factores es deficiente entonces el TP se prolonga. Un TP es normal 11.0–12.5 segundos. Un TP más de 20 segundos es indicativo de la coagulación de déficit. El TP se mide utilizando el plasma después de las células de sangre se eliminan. Una muestra de sangre se recoge en un tubo que contiene citrato o EDTA a cualquier quelato de calcio y por lo tanto inhiben la coagulación y las células son eliminadas por centrifugación. Después de las células se eliminan el exceso de calcio se añade a la de plasma para iniciar la coagulación. La medida más común de TP es dividir el tiempo de coagulación de la sangre de los pacientes por la de un estándar conocido y este el valor se conoce como el cociente internacional normalizado (INR). Normal INR valores de rango 0,8–1,2. TP se utiliza para determinar la dosis correcta de la warfarina clase de medicamentos contra la coagulación (por ejemplo, Coumadin), por la presencia de enfermedad del hígado o daños, y para evaluar el estado de la vitamina K.

8. ¿Cómo se evalúa la vía intrínseca de la Coagulación?

Tiempo de tromboplastina parcial activada (T.T.P.a)

También conocido como TPT, es un examen que mide la capacidad de la sangre para coagular, específicamente la vía intrínseca (que implica al factor IX y cofactores) y la vía común (factores X y II, y cofactores) de la coagulación. Está enfocado en un paso específico del proceso de coagulación. Además de detectar anormalidades de la coagulación, el aPPT se usa también para controlar el efecto del tratamiento con heparina, uno de los anticoagulantes más utilizados.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Guyton y Hall. Tratado de Fisiología médica. 12° edición. Editorial: Elsevier Saunders. España. 2011.

Costanzo, Linda. Fisiología. 5° edición. Editorial: Elsevier Saunders. Barcelona. 2014.

Problemas de coagulación. MedlinPlus. Dirección electrónica: https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/bleedingdisorders.html

Hematocrito. University of Maryland Medical Center. Dirección electrónica: http://umm.edu/health/medical/spanishency/articles/hematocrito

Hematocrito. Lab Test Online. Dirección electrónica: http://www.labtestsonline.es/tests/hematocrit.html?tab=3

Hematocrito – Síntomas. CCM Salud. Dirección electrónica: http://salud.ccm.net/faq/8184-hematocrito-sntomas

La cascada de coagulación. Thrombosis Adviser. Dirección electrónica: https://www.thrombosisadviser.com/es/trombosis/cascada-de-coagulacion/

COMENTARIO DEL ARTÍCULO

Este artículo, desde mi punto de vista, resulta interesante pues durante la práctica se utilizó una proporción para determinar la hemoglobina a partir de la obtención del hematocrito. Este estudio revela que la utilización de esta relación es limitada a cierto contexto y no ofrece un valor tan real. En cambio, existe otro parámetro que se acerca más a lo que en realidad sería el valor real comparándola con métodos electrónicos más sofisticados.

La hemoglobina (Hb), componente principal de los eritrocitos, representa el 32% de la masa total del glóbulo rojo. El hematocrito (Hto) es la porción de volumen total de la sangre ocupada por la masa de eritrocitos.

Se considera que estas variables se correlacionan bien y que ambas se encuentran disminuidas en la anemia. La relación Hb-Hto consiste en calcular el valor de la Hb al dividir el Hto entre un factor - usualmente entre 3,0 y 3,3 - y la relación inversa de obtener el Hto a partir de multiplicar la concentración de Hb por este factor.

La creencia de que el valor del hematócrito es equivalente a 3 veces la concentración de hemoglobina es una proporción matemática que solo se cumple en los individuos "normales", con valores "normales" de Hb y Hto, y eritrocitos "normocíticos normocrómicos". De manera que en pacientes con anemia esta relación puede dejar de cumplirse. Por lo tanto, su uso como rutina en el laboratorio clínico no es aconsejable

Existe otra relación entre la Hb y el Hto que sí tiene validez clínica y se cumple en todos los pacientes, que no es otra que la concentración de Hb corpuscular media (CHCM) que se obtiene de multiplicar por 100 el resultado de la división de la Hb en g/L por el Hto expresado %.

La CHCM da una medida global de la cantidad de Hb contenida en los glóbulos rojos y resulta extremadamente útil para conocer si estos son normocrómicos o hipocrómicos. Este índice es la clave para la clasificación morfológica de las anemias.