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  • Objetivos

    Diferencias las caracterisitcas bioqumicas de cada cepa conservada

    Diferenciar las especies mas importantes de Stafilococcus en humanos asi como sus

    caractristicas bioqumicas,

    Reconocer las especies de estreptococos y las enfermedades que generan

    Estafilococo

    Procedimiento:

    Sobre una placa Con Agar ADN se hizo siembra dibujando una estra simple

    Luego de incubar por 24 horas cobre las colonias de estafilococo se aadi solucin de 1 N de HCl.

    Y se observ lo siguiente, opacidad y halo circundante a la colonia del estafilococo debido a la

    precipitacin del ADN polimerizado despus de agrega el HCl.

    Estafilococo Agar ADN

  • Estreptococo beta-hemoltico

    MATERIALES

    Cepa conservada de Streptococcus B hemoltico

    Mechero

    Lmina porta

    Batera de coloracin Gram

    Microscopio ptico

    Isopos estriles

    Medios de cultivo: Agar sangre y Agar azida

    PROCEDIMIENTO

    1. Con el isopo estril, tomar muestras de secrecin farngea y sembrarlo en

    la placa de agar azida y agar sangre.

    2. Efectuar extendidos en lminas porta objetos

    3. Colocar la lmina con la materia de coloracin Gram, siguiendo la tcnica.

    4. Secar y observar al microscopio ptico.

    RESULTADOS

    Se observa el halo transparente en las muestras de agar azida y agar

    sangre.

    Se trata de un estreptococo beta hemoltico y por lo tanto tiene la propiedad

    de causar lisis total de los eritrocitos.

    El agar azida es un medio de cultivo que favorece el crecimiento de las

    bacterias gram positivas, por eso fomenta esta reaccin.

  • AGAR azida estreptococo

  • LECTURA A LAS 24 HORAS

    Objetivos

    Difereniar las caractersticas microscpicas del streptococus penumonia y del

    Streptococus sp.

    S. Pneumoniae Streptococus sp.

  • MBRA DE MUESTRAS BIOLGICAS PARA EL AISLAMIENTO DE NEISSERIA

    1. PROCEDIMIENTO:

    Se sembr la cepa conseguida sobre el agar Thayer Martin

    2. RESULTADOS

    AGAR THAYER MARTINA)

    No se observ crecimiento de Neisseria gonorrhoeae.

    TINCION GRAM

    Uno de los mejores mtodos para identificar infecciones de areas

    genitales de gonococo.

    Hombres (secrecin uretral), evidencia diplococos gran negativos

    intracelulares en los PMNs , es diagnostico (97-98%).

    Mujeres (muestras cervicales), puede mostrar falsos positivos, porque flora

    normal tan bien esta presentes diplococos negativos.

    Se us una lmina preparada anteriormente en el laboratorio de

    Microbiologa de la UNFV, y se observ.

  • Se observan bacterias en forma de diplococos, gram negativos (Neisseria

    Gonorrhoeae) en la todo el campo de observacin de la lmina brindada.

    PRUEBA BIOQUMICA (DEGRADACION DE CARBOHIDRATOS) PARA

    IDENTIFICAR LAS ESPECIES DE NEISSERIA

    - Manera de diferenciar Neisseria Gonorrhoeae (fermenta solo glucosa) y

    Neisseria Meningitidis (fermenta glucosa y maltosa)

    Caractersticas Crecimiento a 22 C

    Fermentacin de azcares

    Especies Glucosa Maltosa Sacarosa Lactosa

    N. Meningitidis - + + - -

    N. Gonorrhoeae - + - - -

    N. Lactmica - + / - + - +

    Moraxella catarrhalis + - - - -

    N. Sicca + + + + -

    N. Flavescens + - - - -

  • ESTUDIO DEL GENERO BRUCELLAE

    Objetivos

    Reconocer las caractersticas microscpicas de este genero

    Reconocer las caractersticas bioqumicas de este genero

    PROCEDIMIENTO

    El rpocedimiento fue segn la gua de practica de microbiologa medica

    Resultados

  • ESTUDIO DE LOS GENEROS HAEMOPHILUS Y BORDETELLA

    GNERO HAEMOPHILUS

    1. Procedimiento:

    En agar sangre:

    - Sembrar por agotamiento y por puntura la muestra de Haemophilus y de

    Staphilococcus aureus, para lo cual se necesit la secrecin farngea de dos

    alumnos y se dividi la placa en dos.

    2. Resultados

    Agar chocolate

    Agar sangre: Fenmeno de satelitismo

    Tincin Gram:

    Se obtuvo la siguiente imagen al microscopio con aumento de 100X

  • 3. Interpretacin:

    En agar sangre:

    La cepa de Haemophilus influenzae creci en la zona hemoltica creada por Staphylococcus

    aureus en la placa. La hemlisis de los eritrocitos por S. aureus libera nutrientes para el

    crecimiento de H. influenzae (NAD o factor V). El NAD se difunde por el medio y estimula el

    crecimiento de Haemophilus en la periferia de Staphylococcus.

    H. influenzae no crecer fuera de la zona hemoltica de Staphylococcus aureus. Esto es

    conocido como SATELITISMO.

    En agar Chocolate:

    Crecimiento macroscpico de Haemophilus influenzae se observan colonias, pequeas, blancas

    y brillantes sobre agar chocolate, en ambas muestras esto se debe a que este microorganismo

    requiere para su crecimiento los factores V (NAD) y X (hemina) de los glbulos rojos, componentes

    del medio de cultivo agar chocolate que contiene sangre hemolizada.

    Al microscopio:

    Las especies de Haemophilus se tien de color rosado.

    Aparece como bacilos o cocobacilos pequeos gram (-).

  • GNERO BORDETELLA

    Bordetella pertussis es el agente etiolgico e la tos ferina, enfermedad prevenible con la

    vacunacin, que afecta exclusivamente al humano y se localiza en las vas areas superiores.

    Pertenece al gnero Bordetella y fue aislada por primera vez en un cultivo puro en 1906 por

    Bordet y Bengou

    AGAR DE BORDET BENGOU:

    La base de agar BordetGengou es una modificacin del medio originalmente descrito por Bordet y

    Gengou para el cultivo de Bordetellapertussis

    Caractersticas del medio de cultivo:

    Las colonias de BORDETELLA PERTUSSIS son prcticamente transparentes, poco definidas,

    brillantes y de dimetro inferior a 1 mm con un estrecho halo de hemlisis tipo: beta.

    BORDETELLA PARAPERTUSSIS tiene un crecimiento ms rpido. Las colonias son similares y

    dan una coloracin verde oscura al medio.

    El medio se debe incubar en aire a 35C y en una cmara humidificada durante 7-12 das

    LMINA OBSERVADA EN PRACTICA

  • AISLAMIENTO DE ENTEROPATOGENO COPROCULTIVO

    Objetivos Identificar los entero-patgenos ms frecuentes en los coprocultivos

    Identificar mediante la diferenciacin bioqumica los diferentes entero.patogenos

    Identificacin presuntiva y rpida de bacterias entricas gram negativas por los medios TSI

    y LIA

    Procedimiento Se us una muestra, proporcionada por el laboratorio de microbiologa, en medio de transporte

    CARY Y BLAIR (CB) y se procedi a la siembra.

    1ero. se realiza un aislamiento primario a partir de la muestra problema en los siguientes medios

    Medio Mac Conkey (MC)

    Medio Salmonella Shiguella (SS)

    Caldo selenito

    2do en base a los resultados obtenidos en el aislamiento primario se siembra en los medios:

    Tubos de TSI (3)

    Tubos de LIA (3)

    Resultados:

    1. Procedimiento bsico primario

    1 se realiza un aislamiento primario a partir de la muestra problema

    Estra por agotamiento

    Puntura

    Puntura Para mantener un cultivo extra de las

    cepas (Enterobacterias)

  • Medio Mac Conkey colonias Medio Salmonella Shiguella colonias negras y blancas

    2do. Siembra en tubos TSI y LIA

    Se har la siembra de la siguiente manera

    MEDIO / COLONIAS TSI LIA

    Agar Salmonella Shiguella colonias negras Tubo A Tubo A Agar Mac conkey Tubo B Tubo B Agar Salmonela Shiguella colonias blancas Tubo C Tubo C

  • 2. identificacin bacteriana .

    TUBO A

    MEDIO TSI Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): Las colonias fermenta glucosa (+),

    lactosa (+) y sacarosa (+)

    Ausencia de ennegrecimiento del medio indica que las colonias no producen cido

    sulfhdrico: cido sulfrico (-)

    No hay presencia de gas. Gas (-)

    MEDIO LIA Pico violeta / fondo violeta (superficie alcalina / profundidad alcalina): Descarboxilacin

    de la lisina (+)

    Ausencia de color rojo vino en el pico: Desanimacin negativa (-)

  • TUBO B

    MEDIO TSI Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): Las colonias fermenta glucosa (+),

    lactosa (+) y sacarosa (+)

    Presencia de ennegrecimiento del medio indica que las colonias producen cido

    sulfhdrico: cido sulfrico (+)

    No hay presencia de gas. Gas (-)

    MEDIO LIA Pico violeta / fondo violeta (superficie alcalina / profundidad alcalina): Descarboxilacin

    de la lisina (+)

    Pico violeta

    (medio

    alcalino):

    desanimacin

    (-)

    Pico amarillo

    (medio cido):

    sacarosa (+)

    y lactosa (+)

    Fondo

    amarillo

    (medio cido):

    Glucosa (+)

  • Ausencia de color rojo vino en el pico: Desanimacin negativa (-)

    TUBO C

    MEDIO TSI Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): Las colonias fermenta glucosa (+),

    lactosa (+) y sacarosa (+)

    Ausencia de ennegrecimiento del medio indica que las colonias no producen cido

    sulfhdrico: cido sulfrico (-)

    presencia de gas. Gas (+)

    MEDIO LIA Pico violeta / fondo violeta (superficie alcalina / profundidad alcalina): Descarboxilacin

    de la lisina (+)

    Pico violeta

    (medio

    alcalino):

    desanimacin

    (-)

    Cuerpo violeta

    (medio alcalino):

    Descarboxilacin

    (+)

    Pico amarillo

    (medio cido):

    sacarosa (+)

    y lactosa (+)

    Fondo

    amari