“evaluación farmacológica de los mecanismos involucrados
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología
Proyecto de Investigación Titulado:
“Evaluación farmacológica de los mecanismos involucrados en el efecto vasoconstrictor inducido por el
2-(5-metoxi-3-indolil)-3-aminopropanol [TR-3661] en la vena safena aislada del conejo”
Que para obtener el Título de
INGENIERO FARMACÉUTICO
Presenta
ALVAREZ REYES SILVIA EDITH
Asesor Interno: Dr. Gustavo Valencia del Toro Subdirector académico de UPIBI-IPN Vo Bo __________________________
Asesor Externo: Dr. José Antonio Terrón Sierra
Sección Externa de Farmacología CINVESTAV-IPN Vo Bo
__________________________
MARZO, 2007.
ÌNDICE
AGRADECIMIENTOS
LOGROS
1. RESUMEN................................................................................................................................................ 1 2. ANTECEDENTES ................................................................................................................................... 2
2.1. Migraña ........................................................................................................................................... 2 2.1.1. Historia....................................................................................................................................... 2 2.1.2. Definición y prevalencia............................................................................................................. 2 2.1.3. Fisiopatología............................................................................................................................. 4
2.2. Serotonina y su papel en la migraña............................................................................................... 6 2.2.1. Historia de la serotonina ............................................................................................................ 6 2.2.2. Distribución y vías metabólicas.................................................................................................. 7 2.2.3. Papel fisiológico de la serotonina .............................................................................................. 9 2.2.4. Clasificación de receptores a la serotonina ............................................................................... 9 2.2.5. Evidencias del papel de la serotonina en la migraña.............................................................. 12
2.3. Tratamientos antimigrañosos......................................................................................................... 12 2.4. Desarrollo de nuevos fármacos con utilidad en el tratamiento agudo de la migraña..................... 15
2.4.1. Farmacología de los triptanes.................................................................................................. 17 2.4.2. 5-metoxitriptamina-β-metil-carboxilito (Indorrenato)............................................................. 19 2.4.3. 2-(5-metoxi-3-indolil)-3-aminopropanol (TR-3661)................................................................. 20
2.5. La vena safena de conejo como modelo experimental válido en la predicción de la actividad de fármacos agonistas a la Serotonina sobre vasos craneales humanos ............................................................ 22
3. JUSTIFICACIÓN................................................................................................................................... 23 4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ............................................................................................. 24 5. HIPÓTESIS ............................................................................................................................................ 24 6. OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 25
6.1. Objetivo General ........................................................................................................................... 25 6.2. Objetivos Particulares.................................................................................................................... 25
7. MATERIALES Y MÉTODOS.............................................................................................................. 26 7.1. Protocolos experimentales............................................................................................................. 27
8. RECOPILACIÓN DE DATOS Y ANÁLISIS ESTADÍSTICO.......................................................... 28 9. RESULTADOS Y DISCUSIÓN............................................................................................................ 29
9.1. Comparación de los efectos contráctiles de TR-3661, 5-HT y sumatriptán. ................................. 29 9.2. Efecto de antagonistas serotonérgicos sobre la respuesta contráctil inducida por el TR-3661...... 30 9.3. Efecto de antagonistas no serotonérgicos sobre la respuesta contráctil inducida por el TR-3661.33
10. CONCLUSIONES .................................................................................................................................. 36 11. ANEXOS ................................................................................................................................................. 37
ANEXO 1..................................................................................................................................................... 38 ASPECTOS FARMACODINÁMICOS BÁSICOS ..................................................................................... 38 ANEXO 2..................................................................................................................................................... 42 TRATAMIENTO PROFILÁCTICO DE LA MIGRAÑA ........................................................................... 42
Fármacos antimigrañosos preventivos..................................................................................................... 42 ANEXO 3.................................................................................................................................................... 46 MODELOS EXPERIMENTALES FARMACOLÓGICOS......................................................................... 46
Modelos basados en la estimulación del Sistema Trigémino. .................................................................. 46 Modelos basados en el papel de la vasodilatación craneal en la migraña. ............................................. 47
12. REFERENCIAS ..................................................................................................................................... 49
2
A mis padres Gracias por estar siempre a mi lado apoyándome e impulsándome para seguir adelante. Mamá gracias por luchar día a día por proporcionarnos lo mejor; Papá gracias porque aún en la distancia me sigues enseñando que hay que ser fuerte para conseguir lo que uno quiere. Al Dr. José Antonio Terrón Gracias Doc por apoyarme en todo momento y porque además de ser mi guía en la elaboración de éste trabajo me brindó su amistad. A mis hermanos Gracias Andrés por tu paciencia para explicarme todas las cosas que no entendía cuantas veces lo necesité, gracias Beto por enseñarme a tomar la vida más ligera y gracias Chinese por comprender todas aquellas veces que no tuve tiempo para jugar contigo. A mis amigos A todos mis compañeros del laboratorio 19: Karo, Esther, Leo, Brenda, Lalo por sus valiosos consejos y apoyo desde el primer momento en que llegué ahí, así como a todos los que se fueron uniendo al equipo de trabajo, que termino por formar, más que compañeros, amigos. A Yidan, Ab, Chio, por compartir conmigo los momentos de angustia y de felicidad durante toda la carrera. A todos los futuros Ingenieros y amigos que he recolectado a lo largo de éste tiempo que con su amistad ayudaron a que mi estancia en Upibi fuese placentera. A Paty y Lore porque desde que nos conocimos hemos compartido mil sueños. A Antonio, gracias Jengibre por estar conmigo en ésta última fase de mi sueño y por entregarte a él como si fuera el tuyo propio.
3
Este trabajo fue presentado en modalidad cartel durante:
2° Jornada Nacional de Ciencias Farmacéuticas del Valle de México. Febrero 2006. Obteniendo el 3° Lugar.
Congreso Nacional de Ciencias Fisiológicas. Querétaro, Qro.
Septiembre 2006. Además, utilizando ésta misma técnica:
Se escribió el artículo titulado;
“Characterization of the contractile response induced by 2-(2-aminoethyl)-quinoline (D-1997) in the rabbit isolated saphenous vein: are 5-HT5A/5B receptor involved?“. Actualmente se encuentra bajo revisión para su publicación en el British Journal of Pharmacology
Y durante el próximo XXX Congreso Nacional de Farmacología, a celebrarse en Culiacán, Sinaloa; se presentará el cartel titulado:
• “Posible participación de los receptores 5-ht5A/5B en el efecto contráctil inducido por los derivados del ergot en la vena safena de conejo”
RESUMEN
1
1. RESUMEN
La migraña es una patología caracterizada por intensos dolores de cabeza que afecta a
más del 10% de la población mundial, su tratamiento agudo comprende el uso de
fármacos agonistas de los receptores serotonérgicos 5-HT1B/1D como el sumatriptán y los
triptanes de segunda generación. En 1992, durante el cernimiento farmacológico de una
serie de compuestos análogos del indorrenato, se encontró que el 2-(5-metoxi-3-indolil)-3-
aminopropanol [TR-3661] se comportó como un nuevo agonista serotonérgico con
actividad sobre los receptores 5-HT1 que median la respuesta contráctil en la arteria
basilar y vena safena aisladas de perro.
El propósito del presente trabajo fue analizar los efectos vasomotores inducidos por el
TR-3661 en la vena safena aislada de conejo, la cual constituye un modelo válido para
predecir la actividad de compuestos agonistas a la serotonina (5-Hidroxitriptamina; 5-HT)
sobre vasos craneales humanos. Para tal efecto, se obtuvieron segmentos de dicho tejido,
los cuales fueron montados en cámaras de órgano aislado para el registro de la tensión
isométrica. Los resultados mostraron que el TR-3661 es más eficaz y más potente que el
sumatriptán para constreñir la vena safena de conejo, de manera que el orden de
potencia fue 5-HT>TR-3661>sumatriptán. Así mismo se encontró que el efecto contráctil
del TR-3661 tiene un comportamiento bifásico similar al de la serotonina.
Posteriormente se caracterizó el efecto de fármacos antagonistas de los receptores
serotonérgicos 5-HT1B/1D (GR-127935, ketanserina), 5-HT2A (ketanserina) y 5-HT1/2/7,
(metiotepina) sobre el efecto vasomotor inducido por el TR-3661. Los antagonistas
produjeron una inhibición significativa del efecto contráctil inducido por el TR-3661 de
manera dependiente de la concentración sugiriendo que la primera fase de la respuesta
es mediada por los receptores 5-HT1B/1D. Por otro lado, los datos sugirieron, que la
segunda fase de la contracción es mediada por receptores α1-adrenérgicos.
El TR-3661 puede ser útil como modelos para el diseño y la síntesis de nuevos
compuestos antimigrañosos más potentes.
INTRODUCCIÒN
2
2. ANTECEDENTES
2.1. Migraña
2.1.1. Historia
Durante el siglo XVII se establecieron las bases de la neurología moderna y los avances
en el conocimiento de la migraña fueron decisivos (Zavala y Saravia, 2004). Se le atribuye
a Arateus de Capadocia el reconocimiento del síndrome de cefalea unilateral asociada
con alteraciones visuales y malestar gastrointestinal. Thomas Willis [1621-1675] fue quien
escribió la primera monografía moderna sobre la migraña, llamando la atención sobre los
factores vasculares en la génesis de este trastorno. Pasarían dos siglos más para que en
1873, Liveing publicara por primera vez un recuento sistemático sobre la migraña y se
reconocieran muchas de sus variantes (Sanin y Takeuchi, 2000). Posteriormente en 1937,
se produjo un interesante progreso al demostrar John Graham y H.G. Wolff el efecto
vasoconstrictor de la Ergotamina sobre los vasos dilatados en la crisis migrañosa,
sirviendo como base para iniciar una serie de investigaciones que orientaron hacia un
esbozo más racional sobre la etiopatogenia y el tratamiento de las migrañas, lo cual fue
publicado en 1948 (Zavala y Saravia, 2004).
2.1.2. Definición y prevalencia
La migraña es un síndrome que se caracteriza por ataques de intensos dolores de cabeza
punzante, pulsátil y unilateral. Aproximadamente una tercera parte de los pacientes,
presentan aura con ciertos síntomas como de dolor intenso, taladrante, de carácter
uniforme, localizado en la región (peri)orbital o temporal, que va acompañado por
fenómenos ipsilaterales de disfunción autonómica, como un ojo enrojecido, lagrimeo,
ptosis, miosis, edema del párpado, rinorrea u obstrucción nasal, o hiperhidrosis en un solo
lado del rostro (IHS, 1988). Los síntomas de la migraña comúnmente duran entre 4 y 72
horas (Blau, 1993) por lo que la actividad diaria normal se ve seriamente afectada. El
diagnóstico de migraña se basa en el informe retrospectivo de las características de la
cefalea y los síntomas asociados.
INTRODUCCIÒN
3
Entre 60% y 80% de los migrañosos informa sobre la aparición de un conjunto de
síntomas premonitorios (pródromo) que son los eventos iniciales del ataque, estos
incluyen: cambios en las emociones o la conducta (irritabilidad, depresión, ansiedad,
apatía, letargia, euforia, excitación, estallido de energía), síntomas neurológicos (bostezo
excesivo, fonofobia, fotofobia, visión borrosa, mareo), síntomas constitucionales (fatiga
excesiva, palidez, dolores musculares, retención de líquidos) y síntomas alimenticios
(hambre, antojo por algún tipo especial de comida, bulimia, náusea, anorexia) (Blau,
1993).
Fig. 1. Gráfica comparativa de prevalencia de
ataques de migraña en hombres y mujeres, con
respecto a la edad (Tomado de Edmeads y col.,
1993)
La migraña es un síndrome que
afecta a gran parte de la
población mundial, tan sólo en el
mundo occidental se sabe que el
11% de la población la padece y
que tiene mayor prevalencia en
mujeres (15-17%) que en
hombres (6%) (Fig. 1) (Edmeads
y col., 1993; Tomkins y col.,
2000).
Este hecho repercute en pérdidas millonarias como consecuencia del ausentismo laboral
relacionado con el padecimiento de migraña. Sin embargo, no existen diferencias
significativas de la prevalencia de ataques de migraña con relación a la raza, nivel cultural
o económico, o el hábitat. En 1988, la Sociedad Internacional del Dolor de Cabeza (IHS,
del silogismo en inglés, International Headache Society), elaboró ciertos criterios que
ayudan en el diagnóstico de este síndrome, a saber (IHS, 1988):
A. Haber tenido por lo menos cinco ataques con una duración de 4-72 horas y
con al menos dos de las siguientes características:
1. Localización unilateral
2. Naturaleza Pulsátil
3. Intensidad moderada a severa (que afecte las actividades diarias normales)
4. Agravado por la actividad física rutinaria (por ejemplo subir escaleras o barrer)
INTRODUCCIÒN
4
B. Durante el dolor de cabeza ocurre por lo menos uno de los siguientes
síntomas:
1. Hipersensibilidad a la luz, el ruido y/o los olores
2. Náusea y/o vómito.
C. Que no haya evidencia de otro padecimiento que pudiera estar
produciendo el dolor de cabeza.
2.1.3. Fisiopatología
Basándose en las características clínicas de la migraña, se han identificado tres fases
distintas que incluyen un disparo inicial, la aparición de aura y, finalmente, el
desencadenamiento del dolor de cabeza. Hasta ahora se han propuesto dos mecanismos
fundamentales para explicar la fisiopatología de la migraña y estos están descritos por lo
que se ha llamado hipótesis vascular e hipótesis neurogénica de la migraña.
Hipótesis vascular: Postula que el dolor de cabeza se produce como consecuencia de la
vasodilatación profunda de las ramas extracerebrales de la arteria carótida externa y de
otros vasos craneales (Tips, 1991) (Fig. 2). Algunos resultados experimentales indican
que el disparo inicial involucra el tallo cerebral como “generador de la migraña”; una vez
que éste ha sido encendido, el flujo sanguíneo de la región cerebral disminuye; en
aquellos pacientes donde el flujo sanguíneo desciende por debajo de ciertos valores
críticos, pueden aparecer los síntomas de aura.
Diámetrodel vaso
normalizado
Nervio Trigémino
Luzdel
vaso
Músculo lisovascular Endotelio
Impulsosnociceptivos
Arterias extra-e intra-craneales
Vasod
ilatac
ión
Impulsosnociceptivosbloqueados X
Normal Migraña Tratamientoagudo
Receptores5-HT1B
(+)(+)
Inervaci ón
serotonérg
ica
Diámetrodel vaso
normalizado
Nervio Trigémino
Luzdel
vaso
Músculo lisovascular Endotelio
Impulsosnociceptivos
Arterias extra-e intra-craneales
Vasod
ilatac
ión
Impulsosnociceptivosbloqueados X
Normal Migraña Tratamientoagudo
Receptores5-HT1B
(+)(+)
Nervio Trigémino
Luzdel
vaso
Músculo lisovascular Endotelio
Impulsosnociceptivos
Arterias extra-e intra-craneales
Vasod
ilatac
ión
Impulsosnociceptivosbloqueados X
Normal Migraña Tratamientoagudo
Receptores5-HT1B
(+)(+)
Inervaci ón
serotonérg
ica
Fig. 2. Esquema de la teoría vascular de la migraña (Tomado de Saxena y Ferrari, 1989)
INTRODUCCIÒN
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La reducción del flujo sanguíneo cerebral es seguida de una vasodilatación que concurre
con la fase de dolor de cabeza; esto es debido probablemente a los cambios en la
actividad de las grandes arterias craneales extracerebrales que proveen de flujo
sanguíneo a ciertas estructuras de la cabeza y el cuello (i.e. dura madre, base del cráneo
y cuero cabelludo, entre otros)
Hipótesis neurogénica: Postula que el dolor de cabeza se produce por la inducción de un
proceso inflamatorio “estéril” mediado por neuropéptidos vasoactivos liberados de las
fibras trigeminales perivasculares (Fig. 3) La manifestación de la cefalea migrañosa se ha
atribuido a la activación del sistema trigéminovascular y la subsiguiente liberación de
neuropéptidos vasoactivos, tales como el péptido relacionado con el gen de calcitonina
(CGRP), la sustancia P y la neurocinina A (Humphrey y Feniuk, 1991).
Fig. 3. Esquema de la hipótesis neurogénica de la migraña
(Tomado de Humphrey y Feniuk, 1991).
La liberación de sustancias vasoactivas de las terminales nerviosas trigeminales induce
reacciones inflamatorias en los vasos sanguíneos meníngeos, caracterizadas por
vasodilatación, extravasación de proteínas plasmáticas, activación del endotelio vascular
y activación de aferentes trigeminovasculares. Se ha visto mediante estudios con PET
[Tomografía de Emisión de Positrones] que en los ataques se activa el tallo cerebral, así
como el tálamo y la corteza cerebral. Esta activación persiste sobre todo en el rafe dorsal
(sitio de máxima concentración de serotonina en el sistema nervioso central) aún después
de que el dolor haya pasado con ayuda de medicamentos (Fig. 4).
INTRODUCCIÒN
6
Fig. 4. PET que
ilustra la activación
del núcleo del rafe
dorsal en la
migraña, aunque el
dolor haya cedido
al tratamiento
(Tomado de
Weiller y col.;
1995).
Ello sugiere que dicha área puede estar involucrada en la generación y terminación del
ataque migrañoso, lo que podría explicar las recurrencias que presentan los pacientes
(Sanin y Takeuchi, 2000).
2.2. Serotonina y su papel en la migraña
2.2.1. Historia de la serotonina
Las primeras publicaciones que hacen referencia al hecho de que el suero proveniente de
la sangre coagulada no es del todo una sustancia inocua datan del siglo XIX.
Posteriormente, Creite (1869), Rummo y Bordoni (1889) y Weiss (1896), reportaron que la
inyección intravenosa de suero a un animal produce constricción de los vasos
sanguíneos, aumento de las frecuencias cardiaca y respiratoria, disminución en la
cantidad de orina, albuminuria, y un incremento en la peristalsis del intestino delgado. En
1918, Janeway y col. demostraron que la "sustancia vasoconstrictora" derivada de la
sangre coagulada se origina de la desintegración de las plaquetas, y que no es
adrenalina. En los años siguientes no hubo avances significativos con respecto a la
dilucidación de la naturaleza química de la sustancia involucrada.
INTRODUCCIÒN
7
No obstante, a finales de la década de los 40's, Page, quien estaba buscando agentes
presores humorales que pudieran explicar la hipertensión arterial, en colaboración con
Green y Rapport, pudo aislar "la sustancia vasoconstrictora" en forma de un complejo
cristalino al que nombraron serotonina, dado que ciertamente era capaz de incrementar el
tono vascular (Rapport y col., 1948a, b). Poco después, Rapport (1949) dedujo que la
fracción activa de este complejo (para la cual él decidió dejarle el nombre de serotonina)
era la 5-hidroxitriptamina (5-HT). Cuando este compuesto fue preparado sintéticamente
por Hamlin y Fischer (1951), se demostró que la 5-HT tenía todas las propiedades de la
serotonina natural, incluyendo aquellas observadas en el sistema gastrointestinal
(Ersparmer y Asero, 1952). Por lo tanto, no es sorprendente que la introducción de la
5-HT sintética en 1951 (Hamlin y Fischer, 1951) diera un auge "explosivo" a las
investigaciones.
La serotonina, químicamente conocida como 5-HT, es una amina biogénica cuyo peso
molecular es de 176 Daltones. En los mamíferos se encuentra principalmente en las
plaquetas, en las células enterocromafines del tracto gastrointestinal y en el sistema
nervioso central (SNC), donde desempeña un papel importante como neurotransmisor
(Page, 1958). Gracias al descubrimiento fundamental de agonistas y antagonistas
selectivos de los receptores a la 5-HT (Saxena y Villalón, 1990a), muchas funciones
insospechadas de esta monoamina en el SNC y en la periferia han sido dilucidadas.
Como consecuencia, estos hallazgos han originado una nueva era en el desarrollo de
fármacos con utilidad terapéutica potencial en el tratamiento de algunas patologías
incluyendo la ansiedad, la esquizofrenia, la hipertensión arterial, la migraña y la
enfermedad vascular periférica, entre otras.
2.2.2. Distribución y vías metabólicas
Cuando la serotonina fue identificada como 5-Hidroxitriptamina (5-HT), un gran número de
investigaciones demostró que ésta se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza,
dado que había sido localizada no sólo en el reino animal (vertebrados e invertebrados),
sino también en el reino vegetal (plantas, frutas, nueces, etc.; Ersparmer, 1966).
INTRODUCCIÒN
8
En los mamíferos, la 5-HT puede encontrarse en el SNC, donde desempeña un papel
importante como neurotransmisor (Page, 1958) y en varias estructuras periféricas tales
como las células enterocromafínicas de la mucosa gastrointestinal, las plaquetas, ciertos
nervios en los vasos sanguíneos, los pulmones y el corazón, entre otros.
Quizás con excepción de las plaquetas, la 5-HT es sintetizada en la mayor parte de los
tejidos en donde se almacena. Alrededor del 90% del contenido de 5-HT de las
estructuras periféricas del organismo se encuentra en las células enterocromafínicas. A
partir de éstas la 5-HT entra a la circulación. La 5-HT es sintetizada de novo a partir del
aminoácido esencial L-triptofano (Fig. 4) a través de dos reacciones enzimáticas: en la
primera se forma el 5-hidroxitriptofano mediante la actividad catalítica de la enzima
citoplásmica triptofano hidroxilasa; la actividad de esta enzima constituye el paso limitante
en la síntesis de 5-HT (Gershon y col., 1977).
Fig. 4. Ruta de síntesis y degradación
de la serotonina (Tomado de Clark y col.,
1995)
Subsecuentemente, la enzima
descarboxilasa de los aminoácidos
L-aromáticos, que también está
involucrada en la biosíntesis de las
catecolaminas, cataliza la conversión del
5-hidroxitriptofano en 5-hidroxitriptamina
(5-HT; serotonina. Douglas, 1985).
La ruta metabólica predominante de la
5-HT es la desaminación oxidativa por la
MAO-A para generar el intermediario
inestable 5-hidroxiindolacetaldehído, el
cual es oxidado posteriormente a ácido
5-hidroxiindolacético (5-HIAA) por la
enzima aldehído deshidrogenasa. El
5-HIAA es excretado finalmente en la
orina.
5-Hidroxiindolacetaldehído 5-Hidroxitriptamina (Serotonina)
INTRODUCCIÒN
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2.2.3. Papel fisiológico de la serotonina
La 5-HT ejerce una variedad compleja de efectos en el organismo. Sin embargo, su papel
fisiológico preciso, además del de neurotransmisor en el SNC, y quizás en el sistema
nervioso entérico (Gershon y col., 1990), no está claramente dilucidado. Puesto que la 5-
HT es incapaz de cruzar la barrera hematoencefálica (Lexchin y col., 1977), hay una
discriminación aparente entre sus funciones a nivel central y periférico. Por ejemplo, en la
periferia, la 5-HT está involucrada en la contracción de las células musculares lisas, en la
agregación de las plaquetas sanguíneas y en la modulación presináptica (estimulación y/o
inhibición) de la transmisión en las neuronas autonómicas; en el SNC, la 5-HT sirve como
un neurotransmisor y parece desempeñar un papel importante en la regulación de la
memoria, el apetito, el sueño, el estado de ánimo, la temperatura corporal, la conducta
sexual y el sistema cardiovascular, entre otros.
2.2.4. Clasificación de receptores a la serotonina
Desde 1957 Gaddum y Picarelli realizaron intentos por clasificar a los receptores (Anexo1)
a la serotonina, posteriormente Peroutka y Snyder (1979) hicieron lo propio. Sin embargo
ninguna de estas dos clasificaciones eran completas, de modo que en 1986, un grupo de
científicos formularon algunos criterios para la caracterización y clasificación de
receptores a la 5-HT.
De éste modo, decidieron construir una clasificación basada en la combinación de las
dos previamente propuestas, tomando en consideración las afinidades (Anexo 1) de los
sitios de unión de los agonistas y los antagonistas (Anexo 1), así como los sistemas de
segundo mensajeros involucrados. Así los receptores fueron clasificados en tres
categorías principales, receptores parecidos a los 5-HT1 (5-HT1-like), 5-HT2 y 5-HT3.
INTRODUCCIÒN
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Los criterios importantes para la clasificación de los receptores a la serotonina fueron:
a) 5-HT1-like – Si presenta alta afinidad por el antagonista metiotepina, pero no por la
ketanserina o ICS205-930 (tropisetrón). En general un comportamiento similar al de 5-
Carboxamidotriptamina (5-CT).
b) 5-HT2 – Si presenta alta afinidad al agonista 2-metil-5-HT y a los antagonistas
ketanserina y metiotepina, pero no para el tropisetrón. Acoplado al fosfatidilinositol.
c) 5-HT3 – Si presenta alta afinidad por el agonista 2-metil-5-HT y el antagonista
tropisetrón, pero no para la ketanserina ni metiotepina.
Hoy en día estos criterios ya no se consideran como válidos, sin embargo se toman como
referencia y punto de partida para caracterizar respuestas funcionales cuyo mecanismo es
desconocido. Actualmente existen por lo menos siete clases diferentes de receptores a la
serotonina (5HTl a 5HT7) y diversos subtipos o subclases.
La tabla 1 muestra los diferentes receptores de serotonina y su acción. En general, las
drogas que actúan en el ataque agudo de la migraña son agonistas de los receptores
5HTlB, 5-HT1D y 5-HT1F, mientras que los fármacos serotonérgicos profilácticos son
antagonistas de los receptores 5HT2 y 5-HT7. (Clark y col., 1995)
INTRODUCCIÒN
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TABLA 1. Clasificación, localización, función y características farmacológicas de los
receptores a la serotonina (Hoyer, 2002; Mayer, 2002 y Sanders-Bush, 2000)
Familia Subfamilia Localización Función Agonista Antagonista5-HT1A Núcleo del Rafe,
Hipocampo Hipotensor 8-OH-DPAT
>5-HT > Sumatriptán
WAY 100635
5-HT1B Vasos sanguíneos craneales
Autorreceptor Heteroreceptor Vasoconstrictor
5-CT ≈ 5HT>Sumatriptán
SB236067 GR127935
5-HT1D Sustancia Negra , Neuronas trigeminales
Heteroreceptor Sumatriptán, 5-CT, 5-HT
GR127935
5-HT1E Corteza, Cuerpo estriado
Desconocido
5-HT1
5-HT1F Encéfalo, periferia, NTV
Heteroreceptor Sumatriptán
5-HT2A Vasos Sanguíneos craneales, plaquetas, músculo liso
Agregación plaquetaria, contracción músculo liso
α-Me-5-HT Ketanserina
5-HT2B Corteza cerebral Contracción, excitación neuronal
α-Me-5-HT SB104741 LY53857
5-HT2
5-HT2C Plexo coroídeo Acoplado a Proteína G
Producción de Fosfatos de inositol y diacilglicerol
Mesulergina LY53857
5-HT3
Nervios periféricos
Despolarización de la membrana, Excitación neuronal
2-Me-5-HT Tropisetrón Ondasetrón
5-HT4
Hipocampo, Tubo digestivo
Estimulación de la frecuencia cardiaca y contracción gastrointestinal
Renzaprida Tropisetrón GR113803
5-HT5A Hipocampo Desconocido 5-CT 5-HT5 5-HT5B Desconocido 5-CT 5-HT6 Cuerpo estriado Desconocido 5-CT SB357134 5-HT7
Hipotálamo, intestino
Regulador de ciclos circadianos, Dilatación de músculo liso vascular y no vascular. Excitación neuronal
5-CT LP-44
SB269970
INTRODUCCIÒN
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2.2.5. Evidencias del papel de la serotonina en la migraña
Podemos dividir las evidencias del papel de la serotonina en:
a) Bioquímicas. Desde hace 30 años se observó que el ácido 5-hidroxiindolacético, 5-
HIAA (metabolito de serotonina) esta incrementado en la orina durante los ataques de
migraña y, además, hay un descenso de serotonina en las plaquetas. Por otro lado, se
conocía que la depleción de serotonina podía desencadenar migraña y que su
administración intravenosa la aliviaba. Se pensó, por tanto, que el dolor era debido a una
vasodilatación compensatoria a los efectos vasoconstrictores de la serotonina liberada de
las plaquetas. Sin embargo, posteriormente se comprobó que los cambios en los niveles
séricos de serotonina eran en realidad muy pequeños y la teoría perdió interés (Eguia y
García, 2000).
b) Anatómicas. Se atribuyen a la inervación de vasos sanguíneos craneales por fibras
nerviosas serotonérgicas y fibras nerviosas simpáticas que contienen 5-HT.
c) Farmacológicas. Se encontró que la administración intravenosa de reserpina (agente
antihipertensivo) produce liberación masiva de 5-HT, produciendo cefaleas migrañosas,
así como sus efectos secundarios (náuseas, vómito, etc.) (Lance, 1991).
2.3. Tratamientos antimigrañosos
Las opciones terapéuticas disponibles incluyen tratamientos agudos y profilácticos. Para
el tratamiento profiláctico se emplean antieméticos seguidos de analgésicos tales como
aspirina, paracetamol u otros analgésicos anti-inflamatorios no esferoidales, el anexo 2
describe las recomendaciones más usadas durante el tratamiento profiláctico. En general
el fármaco de elección dependerá de las experiencias del paciente y del médico, así como
de la comorbilidad del paciente (Ezpeleta, 2002). La tabla 2 resume algunos ejemplos de
comorbilidad y los fármacos sugeridos para su tratamiento.
INTRODUCCIÒN
13
TABLA 2. Resumen de diversos tipos de comorbilidad y fármaco sugerido para cada uno
(Tomado de Ezpeleta, 2002).
Comorbilidad Fármaco
epilepsia Ácido Valproico
hipertensión arterial
temblor esencial
hipertiroidismo
Betabloqueantes
depresión
cefalea tensional Amitriptilina M
IGR
AÑ
A
dismenorrea Naproxeno
Por otro lado los antecedentes patológicos del paciente pueden contraindicar de forma
absoluta o relativa el uso de ciertos fármacos, por ejemplo los inhibidores selectivos de la
recaptación de serotonina (ISRS) están contraindicados para los casos de disminución de
la libido (Tabla 3) (Ezpeleta, 2002).
TABLA 3. Fármacos contraindicados para algunas patologías (Tomado de Ezpeleta,
2002).
Patología Contraindicación
Asma bronquial, diabetes, disfunción eréctil, insuficiencia
cardiaca, bloqueo auriculoventricular, vagotonía, depresión Betabloqueantes
Sobrepeso, obesidad, depresión, parkinsonismo Flunarizina
Hepatotoxicidad Valproato
Xerostomía, glaucoma, prostatismo Antidepresivos tricíclicos
Disminución de la libido ISRS
Ulcus gastroduodenal AINE
Para el tratamiento agudo de ataques moderados a severos se emplean fármacos
antieméticos en combinación con ergotamina o dihidroergotamina. Los fármacos que
actúan agudamente como antimigrañosos constriñen vasos sanguíneos craneales
extracerebrales dilatados (Saxena y Ferrari, 1989).
INTRODUCCIÒN
14
Dado que el dolor de migraña parece tener origen vascular, es razonable sugerir que el
sitio primario de acción de los fármacos es a nivel de la pared de los vasos sanguíneos
craneales (Humphrey y Feniuk, 1991). Basados en el concepto vascular de la migraña,
Humphrey y Feniuk (1991) establecieron la hipótesis de que fármacos agonistas de los
receptores a 5-HT1 que median contracción de vasos sanguíneos craneales podrían
constreñir los vasos dilatados durante la migraña y así aliviar el dolor de cabeza.
Este fue el razonamiento fundamental para el desarrollo del sumatriptán (Humphrey y col.,
1991). En aquellos casos en que los ataques no son suprimidos por la ergotamina o se
presentan efectos adversos intolerables, se emplea el sumatriptán, que es un agonista de
los receptores serotonérgicos 5-HT1B, 5-HT1D y 5-HT1F, el cual representó un avance
significativo en la terapia abortiva de la migraña durante el inicio de la década de los 90´s.
Los nuevos fármacos antimigrañosos agudos (también conocidos como triptanes de
segunda generación), zolmitriptán, naratriptán, rizatriptán, eletriptán, almotriptán y
flavotriptán (Fig. 5.), también son agonistas de los receptores 5-HT1B/1D/1F pero difieren un
tanto en su perfil farmacocinético-farmacodinámico en comparación con el sumatriptán; no
obstante, esto sólo se ha traducido en diferencias menores de eficacia (Anexo 1),
recurrencia de ataques y efectos adversos (Diener y col., 1999; Tfelt-Hansen y col., 2000).
Fig. 5. Estructuras químicas de: A) almotriptán; B) eletriptán; C) naratriptán y; D)
rizatriptán.
INTRODUCCIÒN
15
Los mecanismos de acción de estos fármacos se han adscrito a una acción constrictora
de los vasos craneales dilatados (vía la activación de receptores 5-HT1B) y a la inhibición
de la liberación de neuropéptidos de fibras nerviosas trigeminovasculares (vía la
activación de receptores 5-HT1D y/o 5-HT1F) (Tfelt-Hansen y col., 2000).
2.4. Desarrollo de nuevos fármacos con utilidad en el tratamiento agudo de la migraña
Recientemente se han desarrollado nuevos tratamientos para los ataques agudos de
migraña; los triptanes han sido un aporte muy importante en este campo y han contribuido
al manejo y mayor calidad de vida de estos pacientes (Liaño, 2005). Como se ha
mencionando, una teoría para explicar la fisiopatología de la migraña, es que durante los
ataques los vasos craneales se encuentran dilatados, lo que activa las terminaciones
trigeminovasculares y éstas a su vez envían impulsos nociceptivos a través del STV. Los
receptores 5-HT1B median contracción vascular, por lo que su activación devuelve el tono
vascular normal y por ende bloquea los impulsos dolorosos.
Los investigadores que demostraron esta teoría del dolor de la cabeza en la crisis de
migraña pensaron que si se obtenían substancias que simularan la acción de la
serotonina y se administrasen al darse cuenta el enfermo de que le comenzaba una crisis,
ésta cedería. El hallazgo de moléculas que no sean tóxicas, se absorban y lleguen a
simular a la serotonina, fue el descubrimiento de estos agonistas de receptores de
serotonina 1B/1D, llamados triptanos o triptanes (Liaño, 2005). Así pues los triptanes
actúan a nivel de los subtipos de receptores específicos 5-HT1B/1D que a nivel del tallo
cerebral, ya sea en los núcleos del Raphe o a nivel del núcleo caudalis del trigémino
disminuyen el tránsito de impulsos dolorosos y a nivel extraaxial intervienen en la
normalización del tono vascular y en la reducción de la inflamación estéril perivascular
(Parajeles, 1998).
INTRODUCCIÒN
16
El primero que se descubrió fue el sumatriptán (Fig. 6), en 1991, haciéndose su
lanzamiento en Europa como medicación para el tratamiento agudo de la migraña y
estuvo sometido a las pruebas más exhaustivas que hasta entonces se habían hecho en
la historia de la farmacología. Se comparó con los medicamentos que hasta entonces se
usaban, que eran los analgésicos, los antinflamatorios y la ergotamina, y fue mejor que
todos ellos. Para muchos enfermos éste tratamiento mostró enormes ventajas sobre otros
medicamentos tradicionalmente utilizados en ataques agudos de jaqueca. Lo investigó y
comercializó la empresa GlaxoWellcome, hoy en día Glaxo-SK, con el nombre de Imigrán.
Fig. 6. Estructura del sumatriptán.
Las tablas 4 y 5 muestran respectivamente los triptanes que actualmente se encuentran
disponibles, y aquellos que se encuentran en la etapa de estudios clínicos.
TABLA 4. Triptanes disponibles (adaptado de Chinea, 1998)
Farmacéutica Lanzamiento Presentaciones Nombre comercial
Sumatriptán GlaxoWellcome 1991 Iny/ Tab/ NS Imigrán, Novelian, Arcoirán
Zolmitriptán Zeneca 1997 Tab Zomig, Flezol Naratriptán GlaxoWellcome 1997 Tab Naramig Rizatriptán MSD 1998 Tab/ MT Maxalt
TABLA 5. Triptanes en estudios clínicos (adaptado de Chinea, 1998)
Farmacéutica Presentaciones Dosis [mg] Eletriptán Pfizer Tab 40- 80 Frovatriptán Vanguard/ SKB Tab 2.5
INTRODUCCIÒN
17
2.4.1. Farmacología de los triptanes
Los triptanes, incluyendo el sumatriptán [Suma] y los triptanes llamados de segunda
generación, como el zolmitriptán [Zolmi], naratriptán [Nara], rizatriptán [Riza], eletriptán
[Ele], almotriptán y frovatriptán [Frova], son potentes agonistas de los receptores 5HT1B,
5HT1D, 5HT1F y 5HT1A (Tabla 6).
TABLA 6. pKi de los Triptanes (adaptado de Chinea, 1998)
pKi Suma Nara Zolmi Riza Ele Frova
5-HT1A 7.0 6.5 7.5 6.3 7.4 7.3
5-HT1B 7.9 8.3 8.7 7.4 8.0 8.6
5-HT1D 7.9 9.2 8.3 8.0 8.9 8.4
5-HT1E 5.6 <5.0 7.2 6.8 7.3 <6.0
5-HT1F 7.6 7.2 8.3 6.6 8.2 7
Se han descrito tres acciones farmacológicas para explicar su eficacia en el tratamiento
de la migraña.
1. Inhibición de la inflamación neurogénica dural. Se estimulan los receptores
5HT1D en el ámbito de las fibras trigeminales inhibiendo la producción de CGRP y
por lo tanto bloqueando la vasodilatación dural. La estimulación de los receptores
5HT1D y posiblemente los 5HT1F en el ámbito de las fibras trigeminales, inhiben la
liberación de sustancia P y neurocinina A, bloqueando de esta manera la
extravasación plasmática a nivel dural (Newman et al., 2005).
2. Se produce una atenuación en la excitabilidad de las células en el ámbito del
núcleo trigeminal mediante la estimulación de los receptores 5HT1B/1D en el tallo
cerebral. Algo interesante es que la dihidroergotamina [DHE] y triptanes de segunda
generación atraviesan la barrera hematoencefálica y llegan al tallo cerebral, mientras
que el sumatriptán actúa en el ámbito del tallo directamente únicamente cuando hay
disrupción de la barrera. Es decir que mientras el sumatriptán inhibe la excitabilidad
trigeminal en el ámbito periférico, la DHE y los triptanes de segunda generación lo
hacen en el ámbito periférico y central (Newman y col; 2005).
INTRODUCCIÒN
18
3. Vasoconstricción de los vasos meníngeos, durales y piales. Mediante la
estimulación de los receptores 5HT1B en el ámbito vascular. Ya que estos
receptores se encuentran en vasos coronarios también puede producirse un grado
de vasoconstricción coronaria. Por tal motivo estos medicamentos están
contraindicados en pacientes con enfermedad coronaria (Newman y col; 2005). Los
triptanes están contraindicados en pacientes que se conoce o se sospecha que
tienen problemas de arterias coronarias [CAD coronary artery disease]. Aunque
algunos estudios han evaluado a pacientes con obstrucción de arterias coronarias
para cuantificar el efecto vasoconstrictor del sumatriptán y eletriptán sobre vasos
coronarios dañados, los resultados indican que los triptanes tienen un afecto
modesto sobre arterias coronarias en un pequeño grupo de pacientes que padecen
angina de pecho; se advierte que los resultados deben ser interpretados
cuidadosamente ya que hay casos en los que solo una pequeña dosis de triptán,
asociada a la constricción epicardial, es suficiente para precipitar una isquemia al
miocardio en pacientes con obstrucción severa de arterias coronarias (Newman y
col; 2005).
Los nuevos triptanes fueron desarrollados con el objetivo de superar los inconvenientes
asociados a la utilización de sumatriptán oral, tal como la recurrencia de la cefalea de
hasta un 40%, baja biodisponibilidad y asociación con síntomas de isquemia cardiaca
(Weitzel y col.; 1999).
Un aspecto de interés radica en conocer si las diferencias en cuanto al perfil
farmacocinético entre estos agentes mejorarían la respuesta al tratamiento, tal y como se
presenta en los mensajes promocionales de la industria (Ferrari, 1998; Weitzel y col.;
1999). El sumatriptán por vía oral presenta una biodisponibilidad del 14%, menor que la
observada con los nuevos agentes.
Por otra parte, tras su administración oral, eletriptán y rizatriptán (y en menor medida,
naratriptán y zolmitriptán) se absorben de forma más rápida que el sumatriptán;
alcanzándose concentraciones terapéuticas, antes que con sumatriptán (Ferrari, 1998;
Weitzel y col.; 1999; Jhee y col.; 2001).
INTRODUCCIÒN
19
Este hecho podría significar que, en pacientes con migrañas de inicio rápido, el
tratamiento con estos agentes sea probablemente más eficaz (Deleu y Hanssens, 2000;
Bartleson, 1999; Dawn, 2001). Por el contrario, naratriptán presenta un inicio de acción
más retardado y presenta la vida media más larga entre todos los triptanes, lo que hace
que, en pacientes que presentan ataques de migraña de larga duración, pueda reducir el
riesgo de recurrencia de la cefalea (Deleu y Hanssens, 2000; Bartleson, 1999; Jhee y col.,
2001; Adelman y Adelman, 2001; Dulli, 1999).
Dado el mayor tiempo que se necesita para alcanzar la respuesta, y su mayor duración de
acción, se ha postulado la utilidad de naratriptán en combinación con otro triptán de
acción corta (Weitzel y col.; 1999); aunque se dispone de algunos datos preliminares a
este respecto, debe destacarse que sus efectos vasoespásticos podrían ser aditivos, por
lo que naratriptán no debe utilizarse en las 24 horas siguientes a la administración de otro
triptán o fármacos conteniendo derivados ergotamínicos (Weitzel y col.; 1999). Hay que
tomar en consideración que cada paciente responde de forma diferente al tratamiento con
triptanes (Bartleson, 1999; Jhee y col., 2001; Adelman y Adelman, 2001); por lo que, en
principio, disponer de una amplia variedad de agentes permitiría seleccionar mejor el
tratamiento para esta población tan heterogénea de pacientes (Jhee y col., 2001).
Sin embargo, a pesar de las mejoras farmacocinéticas ya comentadas, hasta en el 40%
de los ataques y hasta un 25% de los pacientes no responden a ninguno de estos
fármacos. No esta aclarado si este grupo de pacientes que no responden al tratamiento
agudo presentarían alguna forma variante de migraña o un perfil diferente de receptores
de la serotonina (Deleu y Hanssens, 2000; Limmroth y Diener, 1998).
2.4.2. 5-metoxitriptamina-β-metil-carboxilito (Indorrenato)
En 1982, se realizaron estudios del 5-metoxitriptamina-β-metil-carboxilato (al que
posteriormente se le asignó el número de clave TR-3369 y el nombre de indorrenato),
(Fig. 7) reportándose sus propiedades antihipertensivas cuando se administra por vía oral
en la rata (Safdy y col., 1982).
INTRODUCCIÒN
20
Estudios posteriores demostraron que el indorrenato tiene alta afinidad por los sitios de
unión 5-HT1A en el hipocampo del ternero (Dompert y col., 1985) y en la corteza cerebral
del cerdo (Schoeffter y Hoyer, 1988), y que su efecto antihipertensivo podría deberse a la
estimulación de este subtipo de receptor en el SNC (Hong y col., 1987; Schoeffter y
Hoyer, 1988).
Fig. 7. Estructura química del indorrenato
Posteriormente surgió información concerniente a la actividad del indorrenato en sistemas
que involucran la participación de los receptores 5-HT1-like (Bradley y col., 1986; Saxena
y Villalón, 1990) ya que se demostró que el efecto vasoconstrictor de éste agonista en la
arteria basilar canina in Vitro se debe a la estimulación de receptores 5-HT1-like pero no
de receptores 5-HT2 o 5-HT3 (Hong y col., 1989). Asimismo, Villalón y col. (1990)
demostraron que el indorrenato produce constricción de las anastomosis arteriovenosas
del cerdo vía la activación de receptores 5-HT1-like no relacionados con los subtipos
5-HT1A, 5-HT1B, 5-HT1C o 5-HT1D.
2.4.3. 2-(5-metoxi-3-indolil)-3-aminopropanol (TR-3661)
A partir de los hallazgos con indorrenato, una serie de derivados indólicos fueron
sintetizados con el propósito de encontrar fármacos antihipertensivos cuyo mecanismo de
acción fuera la estimulación de los receptores serotonérgicos centrales involucrados en la
modulación de la presión arterial (Safdy y col., 1982).
INTRODUCCIÒN
21
Sin embargo en 1992, al realizar pruebas para el cernimiento farmacológico de dichos
análogos del indorrenato (Terrón, 1992) se encontró que el 2-(5-metoxi-3-indolil)-3-
aminopropanol [TR-3661; Fig. 8] (el cual era una excepción entre los demás compuestos
debido a que en lugar de un metil-éster tiene un hidroximetil en la posición β de la cadena
lateral) era un nuevo agonista serotonérgico con selectividad por los receptores 5-HT1 que
median la respuesta contráctil inducida por la 5-HT en la arteria basilar aislada canina.
Así mismo, se concluyó que el perfil farmacológico de TR-3661 sugería que los receptores
5-HT1 presentes en la arteria basilar y en la vena safena del perro son de naturaleza
distinta (Terrón, 1992).
Los compuestos sintetizados
surgieron a partir del corrimiento
del grupo carboxilo del triptofano
desde el átomo de carbono α al β
de la cadena lateral.
Fig. 8. Estructura de TR-3661.
Los experimentos anteriores demostraron que el TR-3661 produce una contracción
dependiente de la dosis y que ésta se ve bloqueada por la metiotepina (antagonista no
selectivo de los receptores 5-HT1/2/7); mientras que la ketanserina (antagonista selectivo
de los receptores 5-HT2A), prazosina (antagonista selectivo de los receptores α1-
adrenérgicos), y haloperidol (antagonista selectivo de los receptores adrenérgicos) no
produjeron efecto alguno sobre la respuesta contráctil al TR-3661 en dicha preparación.
Ante tal evidencia, los investigadores sugirieron que los receptores involucrados en la
respuesta contráctil inducida por TR-3661 es mediada por el subtipo 5-HT1
INTRODUCCIÒN
22
2.5. La vena safena de conejo como modelo experimental válido en la predicción de la actividad de fármacos agonistas a la serotonina sobre vasos craneales humanos
El presente trabajo se basó en el uso de fármacos agonistas y antagonista. Este tipo de
estudios nos proporciona información fundamentalmente sobre el mecanismo receptor, la
potencia relativa y la eficacia de un determinado fármaco (TR-3661 en este caso). Por
otro lado, es conveniente realizar dichos estudios en modelos experimentales válidos y
útiles en la predicción del comportamiento de fármacos agonistas a la serotonina sobre
vasos craneales humanos (ver Anexo 3).
Para nuestro estudio, la preparación utilizada fue la vena safena aislada de conejo que en
estudios previos ha demostrado ser un modelo válido y útil para predecir la actividad de
agonistas serotonérgicos en vasos craneales humanos.
En éste sentido la figura 9 muestra como las concentraciones efectivas cincuenta (CE50)
de diversos agonistas serotonérgicos para contraer vena safena de conejo se
correlacionan significativamente con los valores CE50 de los mismos agonistas para
contraer vasos craneales humanos (Cohen y col., 1997).
Fig. 9. Correlación de los valores
de –log CE50 de diversos
agonistas serotonérgicos para
contraer vasos craneales
humanos y vena safena de conejo
(Tomado de Cohen y col., 1997)
JUSTIFICACIÓN
23
3. JUSTIFICACIÓN La migraña es una patología caracterizada por intensos dolores de cabeza que afecta a
más del 10% de la población mundial. El tratamiento agudo de este síndrome comprende
el uso de fármacos agonistas de los receptores serotonérgicos 5-HT1B/1D, como el
sumatriptán y los triptanes de segunda generación, los cuales producen contracción de
vasos sanguíneos craneales. No obstante, un efecto colateral importante de estos
fármacos es que producen contracción de las arterias coronarias y una eventual reducción
del flujo sanguíneo que puede tener repercusiones importantes en pacientes con
afecciones cardíacas.
El mecanismo involucrado en este efecto colateral involucra también la activación de
receptores 5-HT1B/1D, pero el grado de eficacia de los fármacos antimigrañosos por este
mecanismo puede variar de un compuesto a otro. De hecho, los resultados con TR-3661
indican que el fármaco es capaz de contraer la arteria basilar canina pero no la vena
safena del perro (Terrón, 1994), siendo que en ambas preparaciones el mecanismo
vasoconstrictor de la 5-HT y del sumatriptán involucra la activación de receptores 5-
HT1B/1D (Cohen y col., 1997).
Es entonces factible considerar las diferencias en el grado de eficacia de fármacos
agonistas 5-HT1B/1D como un factor importante para buscar un efecto vasoconstrictor
selectivo en vasos craneales sin afectar el tono de los vasos coronarios.
HIPÓTESIS
24
4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Durante el cernimiento farmacológico de una serie de análogos estructurales del agonista
serotonérgico indorrenato (indoles), se identificó al 2-(5-metoxi-3-indolil)-3-aminopropanol
[TR-3661] como agonista de los receptores serotonérgicos 5-HT1 que median contracción
de la arteria basilar canina (Terrón, 1992). Sin embargo, el efecto vasomotor de éste
nuevo fármaco no ha sido caracterizado en un modelo validado de vasos craneales
humanos, como lo es la vena safena de conejo. Dicha caracterización es importante para
determinar si dicho fármaco tienen utilidad potencial en el tratamiento agudo de la
migraña.
5. HIPÓTESIS
El TR-3661 se comporta como agonista de los receptores 5-HT1B/1D que median
contracción en la vena safena de conejo y pueden por lo tanto tener utilidad potencial en
el tratamiento agudo de la migraña.
OBJETIVO
25
6. OBJETIVOS
6.1. Objetivo General
Investigar el efecto del TR-3661 en la vena safena de conejo y dilucidar su mecanismo
de acción.
6.2. Objetivos Particulares
1. Analizar el efecto contráctil inducido por el TR-3661 en la vena safena de conejo y
compararlo con el producido por la 5-HT y el agente antimigrañoso agudo,
sumatriptán.
2. Investigar el efecto de antagonistas de los receptores serotonérgicos 5-HT1B/1D
(GR-127935, ketanserina), 5-HT2A (ketanserina), y 5-HT1, 5-HT2 y 5-HT7 (metiotepina)
sobre la respuesta contráctil inducida por el TR-3661.
3. En caso de que la respuesta vasomotora al TR-3661 solo se vea parcialmente inhibida
por los antagonistas serotonérgicos evaluados, excluir la participación de otros
mecanismos mediante el uso de fármacos antagonistas de los receptores
muscarínicos (atropina), α1-adrenérgicos (prazosina) e histaminérgicos
(bromfeniramina).
MATERIALES Y MÈTODOS
26
7. MATERIALES Y MÉTODOS Se utilizaron conejos machos Nueva Zelanda (2.5-3.5 Kg. de peso corporal), los cuales
fueron sacrificados en una cámara de CO2. Inmediatamente después se procedió a
disecar la vena safena de ambas extremidades (Fig. 10.a) para colocarla en solución
bicarbonatada de Krebs con la siguiente composición (concentraciones milimolares):
NaCl, 118; KCl, 4.8; CaCl2•2H2O 2.5; MgSO4, 1.2; NaHCO3, 24; KH2PO4, 1.2;
Dextrosa, 11; y Ca2EDTA, 0.026; a temperatura ambiente. Después de eliminar el tejido
adherente, las preparaciones fueron seccionadas en anillos de 4 mm de longitud; de cada
vena se obtuvieron cuatro anillos adyacentes. No se realizó procedimiento alguno para
remover el endotelio.
Los anillos fueron suspendidos horizontalmente entre dos ganchos de níquel-cromo en
forma de L (0.5 mm de diámetro) en cámaras de tejido aislado. El gancho inferior fue
fijado al fondo de la cámara mediante un sujetador de vidrio (Fig. 10.b), mientras que el
gancho superior fue atado directamente a un transductor (TCI 100) para registrar los
cambios de tensión isométrica en un sistema de arranque MP100 (Biopac), el cuál estuvo
conectado a una computadora.
Fig. 10. Fotografías tomadas de a) Vena safena de conejo, localizada en las
extremidades inferiores, b) Segmento de vena safena aislada de conejo montada sobre
ganchos de Ni-Cr en cámara de tejido aislado, c) Transductores de Fuerza (TCI 100), d)
Equipo completo de laboratorio. (Fotografía: Alfredo Padilla. CINVESTAV-IPN)
a b
c
d
MATERIALES Y MÈTODOS
27
Los datos fueron colectados y analizados mediante el programa Acknowledge 3.8.0
(Biopac). Los ganchos fueron montados en cámaras de tejido aislado que contenían 10
ml de solución bicarbonatada de Krebs. Esta solución fue mantenida a una temperatura
de 37°C con burbujeo continuo de una mezcla de gas carbógeno (95% de O2 y 5% de
CO2) a un pH de 7.4.
Posteriormente, se aplicó a los tejidos una tensión inicial de 4g permitiendo después un
período de equilibrio de 120 min. durante el cual se generaron respuestas contráctiles
cada 30 min. por exposición a 5-HT 0.1 μM y una contracción final por exposición a
solución de Krebs conteniendo KCl 80mM. Con el objeto de eliminar la influencia de
factores relajantes derivados del endotelio, se trató sistemáticamente a todas las
preparaciones con una concentración elevada (100μM) del inhibidor de la sintasa de óxido
nítrico, L- nitro-arginina-metil éster (L-NAME). Como ya se mencionó, la razón de utilizar
la vena safena de conejo es que esta preparación ha mostrado ser útil para predecir
eficacia antimigrañosa aguda de compuestos serotonérgicos como el sumatriptán (Cohen
y col., 1997).
7.1. Protocolos experimentales
Una vez obtenida la respuesta contráctil máxima a KCl 80mM, se construyó una curva
concentración-respuesta (C-R) (Anexo 1) a 5-HT, sumatriptán y TR-3661. En otros
experimentos, se construyó una curva C-R a TR-3661 en preparaciones preincubadas
durante por lo menos 15 min. con vehículo (controles) o una concentración
predeterminada de los antagonistas, GR127935 (1, 10 y 100 nM), metiotepina (10, 100 y
1000 nM), ketanserina (1μM), prazosina (1μM), atropina (1μM) o bromfeniramina (1μM).
En todos los casos, las respuestas producidas por el TR-3661 bajo las diferentes
condiciones (i.e. en ausencia o presencia de antagonistas) fueron analizadas en
preparaciones independientes y solo se construyó una curva C-R en cada tejido.
MATERIALES Y MÈTODOS
28
8. RECOPILACIÓN DE DATOS Y ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Todos los datos en el texto y en las figuras se presentan como la media ± el error
estándar de la media y se expresan como porcentaje de la respuesta contráctil inducida
por el KCl 80mM. Los valores de tensión en gramos fueron obtenidos directamente del
registro de los experimentos mediante el programa Acknowledge 3.8.0. En todos los
casos se determinaron los valores basales de tensión y aquellos obtenidos a partir de las
curvas C-R acumulativas a los agonistas bajo las diferentes condiciones. Todos los datos
fueron tabulados y graficados utilizando los programas de Excel y Prism GraphPad 2.0,
respectivamente.
Las comparaciones de las curvas C-R a TR-3661 bajo las diferentes condiciones se
realizaron mediante un análisis de varianza de dos vías para medidas repetidas, seguido
de una prueba de Newman-Keuls para determinar diferencias.
Asimismo, los valores de la concentración efectiva 50 (CE50) y del efecto máximo (Emax) de
los agonistas bajo condiciones control y en presencia de los antagonistas fueron
obtenidos mediante un análisis de regresión no lineal empleando el programa Prism
GraphPad 2.0. En todos los casos, las diferencias serán consideradas significativas [*]
cuando el nivel de significancia p sea menor a 0.05 (p<0.05).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
29
9. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
9.1. Comparación de los efectos contráctiles de TR-3661, 5-HT y sumatriptán.
De acuerdo con lo reportado en la literatura (Cohen y col., 1997), la 5-HT produjo un
efecto contráctil dependiente de la concentración en la vena safena de conejo, registrando
la potencia más alta (Fig. 11). La respuesta contráctil inducida por la 5-HT y TR-3661
mostraron un comportamiento bifásico (primera fase para el TR-3661: desde 10-9 hasta
10-5.5 M; segunda fase: desde 10-5 hasta 10-4 M. Para 5-HT primera fase: desde 10-9 hasta
10-6 M; segunda fase: desde 10-5.5 hasta 10-4 M); en el caso de la 5-HT dicho efecto se ha
reportado que es debido a la liberación de noradrenalina de las terminales nerviosas
simpáticas por un efecto tipo tiramina (Escudero, 2000).
Fig. 11. Curvas concentración-respuesta
a serotonina, sumatriptán, y 2-(5-metoxi-
3 indolil)-3- aminopropanol [TR-3661] en
la vena safena aislada de conejo. Los
puntos representan la media y las barras
verticales denotan el error estándar de la
media. *p<0.05 vs. sumatriptán. 456789
0
25
50
75
Serotonina
SumatriptanTR-3661
*
** *
*
***
**
*
-Log [M]
% R
espu
esta
s a
KC
l
El efecto tipo tiramina postula que hay una acumulación de un falso neurotransmisor
(fenetilaminas, Ej.: tiramina) en las neuronas adrenérgicas periféricas. Estas fenetilaminas
son metabolizadas en forma normal por la Mono Amino Oxidasa [MAO] en hígado y tracto
gastrointestinal (principalmente por MAO-B). La inhibición periférica de estas MAOs
llevaría a una absorción sistémica mayor de fenetilaminas desde el tracto gastrointestinal.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
30
A nivel neuronal la tiramina (por beta-oxidación de la cadena lateral carbonada) se
transforma a octopamina, compuesto que se acumula debido a una disminución en su
metabolización por MAO, y es capaz de desplazar a la noradrenalina de sus vesículas. Al
estimularse la liberación de norepinefrina de las terminales nerviosas periféricas, se
libera un poco de norepinefrina y un poco de octopamina (con débil actividad
adrenérgica). No obstante a su comportamiento, el TR-3661 muestra una potencia y
eficacia menor a los presentados por la 5-HT, pero mayores a los presentados por el
sumatriptán (Tabla 7), que como ya ha sido mencionado, es un fármaco de elección y
altamente efectivo en el tratamiento agudo de la migraña por lo cual fue tomado como
compuesto de referencia.
9.2. Efecto de antagonistas serotonérgicos sobre la respuesta contráctil inducida por el TR-3661
Con el objeto de investigar la posible participación de un mecanismo similar al activado
por el TR-3661 en la arteria basilar de perro (Terrón y Hong, 1991), se analizó el efecto
de la metiotepina sobre la respuesta contráctil al TR-3661 en la vena safena aislada de
conejo. Como se muestra en la figura 12, el antagonista produjo una potente inhibición
de la contracción en sus dos fases sugiriendo la participación de receptores 5-HT1.
456789
0
10
20
30
40CONTROL
10 nM100 nM1000 nM
Metiotepina
*
*****
************ * * * * * * * * * *
-Log TR-3661 [M]
% R
espu
esta
a K
Cl
Fig. 12. Efecto de la metiotepina
sobre la respuesta contráctil
producida por TR-3661 en anillos
de vena safena aislada de conejo.
Los puntos representan la media y
las barras verticales denotan el
error estándar de la media.
*p<0.05 vs control.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
31
Estos resultados son consistentes con observaciones previas que demostraron un efecto
bloqueante de la metiotepina sobre la respuesta contráctil al TR-3661 en la arteria basilar
de perro (Terrón y Hong, 1991) y la vena safena de conejo. Sin embargo, debido a que la
metiotepina tiene alta afinidad, además de los 5-HT1, por los receptores serotonérgicos
5-HT2 y 5-HT7, adrenérgicos α1, e histaminérgicos, es probable la participación de estos
mecanismos en el efecto contráctil inducido por el TR-3661. Por tal motivo, se decidió
evaluar el efecto de antagonistas serotonérgicos y no serotonérgicos más selectivos.
Como se muestra en la figura 13, la preincubación con GR-127935, un antagonista de
los receptores 5-HT1B/1D, produjo una disminución de la respuesta contráctil al TR-3661
de manera dependiente de la concentración. El efecto inhibitorio del GR-127935 se
observó fundamentalmente sobre la primera fase de la respuesta vasomotora al TR-3661
lo que sugiere una importante participación de los receptores 5-HT1B/1D.
Fig. 13. Efecto de GR-127935 sobre
la respuesta contráctil producida por
TR-3661 en anillos de vena safena
aislada de conejo. Los puntos
representan la media y las barras
verticales denotan el error estándar
de la media. *p<0.05 vs control. 45678
0
10
20
30
40
50 Control
1nM10 nM100 nM
GR-127935
****
**
*
* **
-Log TR-3661[M]
% R
espu
esta
a K
Cl
La ausencia de un efecto importante del GR-127935 sobre la segunda fase de la
respuesta al TR-3661 sugiere la participación de otro mecanismo en la respuesta
inducida por concentraciones elevadas del agonista (Fig. 13).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
32
Con la finalidad de investigar la posible participación de los receptores 5-HT2A, así como
de comprobar la participación de los receptores 5-HT1B/1D en el efecto contráctil inducido
por TR-3661, se realizó una curva C-R al TR-3661 en presencia de ketanserina. Los
resultados revelaron que el efecto contráctil del TR-3661 se inhibe por la ketanserina de
manera dependiente de la concentración (Fig. 14), corroborando la participación de los
receptores 5-HT1B/1D en la primera fase de la respuesta contráctil.
Dada la falta de un efecto importante de la ketanserina sobre la respuesta inducida por
concentraciones altas de TR-3661 (concentraciones desde 10-5 hasta 10-4 M), se
descarta la participación de receptores 5-HT2A y 5-HT1B/1D en la segunda fase de
contracción al TR-3661.
456789
0
10
20
30
40 CONTROL
10 nM100 nM1000 nM
Ketanserina
**
**** ****
*
* *
-Log TR-3661[M]
% R
espu
esta
s a
KC
l
Fig. 14. Efecto de la ketanserina sobre la respuesta contráctil producida por TR-3661 en
anillos de vena safena aislada de conejo. Los puntos representan la media y las barras
verticales denotan el error estándar de la media. *p<0.05 vs control.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
33
9.3. Efecto de antagonistas no serotonérgicos sobre la respuesta contráctil inducida por el TR-3661.
En la figura 15 se muestra el comportamiento del TR-3661 ante el tratamiento con
antagonistas no serotonérgicos. La gráfica revela que la atropina produjo una atenuación
no significativa de la contracción inducida por el TR-3661 sin modificar el comportamiento
bifásico de la misma.
Por otro lado el pretratamiento con bromfeniramina produjo una inhibición aparentemente
del tipo no competitivo de la respuesta contráctil al TR-3661, lo cual resultó en una
reducción significativa del efecto máximo (Emax) (Tabla 7). La bromfeniramina no
modificó el comportamiento bifásico de la respuesta al TR-3661 (Fig. 15). Sin embargo el
comportamiento más interesante es el que se observa ante la presencia de prazosina, la
cual inhibe clara y significativamente la segunda fase de la respuesta contráctil inducida
por el TR-3661 (concentración desde 10-5 hasta 10-4 M), resultando en una disminución
significativa del efecto máximo (Emax) del TR-3661 (Fig. 15; Tabla 7).
Fig. 15. Efecto de antagonistas no
serotonérgicos sobre la respuesta
contráctil producida el TR-3661 en anillos
de vena safena aislada de conejo. Los
puntos representan la media y las barras
verticales denotan el error estándar de la
media. *p<0.05 vs. Control.
456789
0
30
60
90
120ControlPrazosina 1μMAtropina 1μMBromfen 1μM
****
**
*
******
*
*
-Log TR-3661 [M]
% R
espu
esta
a K
Cl
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
34
Este hecho nos sugiere que la segunda fase de la respuesta al TR-3661 esta media por
receptores α1-adrenérgicos. Así mismo es importante resaltar el hecho de que la primera
fase del efecto contráctil producido por el compuesto bajo estudio (concentración desde
10-9 hasta 10-5.5 M) se encuentra disminuida, lo cual puede sugerir una pequeña
participación de los receptores α1-adrenérgicos en la primera fase de la respuesta.
Por último, en la tabla 7 se presenta un resumen de la Concentración Efectiva 50 (CE50)
(expresado como el –Log CE50), y Efecto Máximo (Emax) (expresado como el porcentaje
de respuesta a KCl 80Mm) (véase Anexo 1) del TR-3661 bajo las diferentes condiciones
en las que se realizaron los tratamientos de la vena safena aislada de conejo. Así mismo
se muestra el número de experimentos realizados en cada protocolo (n).
Cabe mencionar que para el caso de la 5-HT y el TR-3661, cuyos comportamientos
contráctiles resultaron bifásicos, se analizaron sus CE50 y Emax considerando solo la
primera fase de contracción.
De éste modo los valores de la tabla 7 nos aclaran las diferencias significativas de
contracciones inducidas por el TR-3661 bajo los diferentes tratamientos de la vena safena
aislada de conejo, así como, las diferencias entre los compuestos evaluados. Los valores
mostrados demuestran que 5-HT es el compuesto más eficaz, en concordancia con lo
reportado en literatura (Cohen y col., 1997), y de igual manera se muestra que el TR-3661
resulta ser un compuesto más eficaz y más potente que el sumatriptán, pero a la vez
menos potente y eficaz que la serotonina.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
35
TABLA 7. Valores de potencia (Concentración que produce el 50% del Efecto máximo;
CE50) y Efecto Máximo (Emax) de los agonistas evaluados en presencia y ausencia de los
tratamientos. La n representa el número de experimentos realizados en cada caso.
AGONISTA ANTAGONISTA [Antago] n pCE50 EMAX
Sumatriptán -------------------- --------------- 10 5.34 + 0.20 30.21 + 5.86
5-HT -------------------- --------------- 22 7.48 + 0.45 33.75 + 4.49
TR-3661 -------------------- --------------- 17 6.78 + 0.17 37.11 + 3.50
Control 7 6.35 + 0.21 29.84 + 6.68
1 nM 8 6.65 + 0.29 15.85 + 1.08
10 nM 7 6.40 + 0.58 3.82 + 1.95* GR-127935
100 nM 6 6.82 + 0.31 1.64 + 0.69*
Control 29 7.24 + 0.15 12.63 + 1.21
10 nM 23 7.21 + 0.19 7.17 + 1.62*
100 nM 23 7.29 + 0.4 6.93 + 1.28* Ketanserina
1000 nM 19 6.99 + 0.45 6.74 + 1.62 *
Control 24 7.08 + 0.21 7.89 + 1.22 10 nM 22 7.29 + 0.22 5.71 + 1.16
100 nM 25 7.13 + 0.17 1.89 + 0.64* Metiotepina
1000 nM 23 7.16 + 0.40 1.63 + 0.30*
Vehículo Control 7 6.78 + 0.09 94.38 + 6.23
Atropina 1 μM 8 6.62 + 0.27 75.82 + 8.66
Bromfeniramina 1 μM 8 6.90 + 0.10 57.53 + 8.83*
TR-3
661
Prazosina 1 μM 6 6.52 + 0.16 72.45 + 8.44*Nota: Los valores fueron calculados solo para la primera fase de la respuesta contráctil inducida por TR-3661 a excepción de sumatriptán y TR-3661+ prazosina *p< 0.05 vs control
CONCLUSIONES
36
10. CONCLUSIONES Por los resultados del presente trabajo se puede concluir que:
El TR-3661 tiene actividad vasoconstrictora en un modelo válido de predicción de
vasos craneales humanos.
El TR-3661 es más eficaz y más potente que el sumatriptán para contraer la vena
safena de conejo, lo que lo convierte en un compuesto de interés para su posible
utilización como fármaco antimigrañoso de acción aguda.
La primera fase del efecto contráctil del TR-3661 es mediada por receptores 5-
HT1B/1D mientras que la segunda fase es mediada por receptores α1-adrenérgicos.
Este hecho representa una desventaja en el posible uso clínico del compuesto.
A pesar de las desventajas del TR-3661 éste compuesto seguirá siendo de interés
ya que a partir de su estructura se pueden realizar análisis cuantitativos de la
relación estructura actividad [QSAR1] para dilucidar nuevos compuestos que
mejoren las propiedades de su antecesor.
1 Del silogismo en inglés Quantitative Structure-Activity Relationship
37
11. ANEXOS
ANEXOS
38
ANEXO 1
ASPECTOS FARMACODINÁMICOS BÁSICOS
La mayoría de los fármacos ejercen acciones intensas y específicas en el organismo,
mediante la formación de un enlace, generalmente reversible, con un componente celular
denominado receptor. Los fármacos que interactúan con receptores para provocar una
respuesta se denominan agonistas; los compuestos que lo hacen impidiendo la acción de
los agonistas se denominan antagonistas farmacológicos específicos. Los que pueden
actuar como agonista o antagonista, dependiendo de las circunstancias, se denominan
agonistas o antagonistas parciales (Clark y col., 1995).
La existencia de receptores celulares para un fármaco se puede deducir de: (1) las
relaciones entre estructura y actividad en una serie homóloga de compuestos; (2) los es-
tudios cuantitativos sobre pares de agonistas-antagonistas; y (3) la unión selectiva de
fármacos radiactivos a las células, las membranas o el propio receptor aislado.
Receptor: Los receptores son grupos de macromoléculas protoplásmicas con las que los
fármacos se combinan reversible o irreversiblemente (Clark y col., 1995). La función de un
receptor consiste en reconocer una señal química específica y discriminar entre esta
señal estructural apropiada y otras moléculas. Entonces se acopla la interacción fármaco-
receptor, habitualmente a través de un segundo mensajero.
Interacción Fármaco- Receptor: Las fuerzas de unión en las interacciones fármaco-
receptor consisten en enlaces covalentes, iónicos o de puente de hidrógeno, así como de
fuerzas de Van der Walls. La función básica de un receptor es distinguir una señal real de
la procedente de un ruido. Para recibir la señal, el receptor debe tener afinidad por el
fármaco la cual esta determinada por las fuerzas de unión expuestas anteriormente. Al
mismo tiempo, los receptores deben poseer especificidad; en otras palabras, una afinidad
reducida por fármacos menos activos; esto permite que el receptor distinga entre varias
señales potenciales.
ANEXOS
39
Afinidad: La afinidad representa la tenacidad con que un compuesto se combina con el re-
ceptor. La afinidad se cuantifica mediante el estudio de la relación dosis-respuesta entre
un fármaco y un receptor. Se puede utilizar uno entre los diversos métodos que existen.
En sistemas en que sólo se pueda determinar la dosis y la respuesta, el log de la dosis se
compara con la respuesta. En esos estudios, la dosis de un fármaco, que produce una
respuesta que es el 50% de la respuesta máxima, se denomina DE50 (Dosis efectiva 50 –
in Vivo- , o Concentración Efectiva 50 - in Vitro -) (Clark y col., 1995).
Los métodos más modernos, que suelen precisar un fármaco radiactivo, pueden
cuantificar la relación entre la concentración de fármaco libre y la del unido
específicamente. La unión de un fármaco (D) y un receptor (R) se puede representar de la
siguiente forma (Clark y col.; 1995):
][][][1
DRRDk
→+ La proporción en que se combinan se describe por la constante k1.
Dado que la mayoría de las interacciones fármaco-receptor son reversibles, también es
cierto que:
][][][2
RDDRK
+→ En el equilibrio, los índices de las reacciones directas e inversas son
iguales, y: ][]][[ 21 DRkRDk =
El concepto de Kd surge cuando la ecuación anterior se escribe:
[ ][ ][ ] dk
kk
DRRD
==1
2
Kd es la constante de disociación del equilibrio; su magnitud indica la afinidad del receptor
por el fármaco. En la ecuación anterior, si la mitad de los receptores se unen al fármaco,
las concentraciones de R y DR son iguales, por lo que se pueden eliminar. En esas
condiciones Kd = [D]. Esto significa que la concentración de fármaco necesaria para unirse
al 50% de los receptores es igual a Kd. Si esa concentración es baja, la afinidad es alta.
ANEXOS
40
Agonista: Es un fármaco con afinidad por un receptor y con actividad intrínseca. Un
agonista es un fármaco que posee afinidad y eficacia. Interactúa con los receptores y
provoca una respuesta.
Agonistas Parciales: Los fármacos que se encuentran en una situación intermedia entre
los agonistas puros y los antagonistas puros son los agonistas parciales. Tienen afinidad y
cierta actividad intrínseca (aunque no completa). Administrados solos actúan como
agonistas; en combinación, pueden antagonizar la acción de un agonista total al interferir
con la unión de éste con sus receptores.
Antagonista: Un antagonista tiene afinidad por el receptor, pero carece de actividad
intrínseca, y puede, a su vez, ser competitivo o no competitivo. Fig. A.1.1 Curvas log dosis-respuesta que ilustran la diferencia entre un antagonista competitivo y otro no competitivo. (A) Un antagonista competitivo disminuye la potencia, pero no la eficacia; hay un desplazamiento paralelo de la curva log dosis- respuesta hacia la derecha. (B) Un antagonista no competitivo reduce la eficacia; la curva log dosis-respuesta reduce la altura máxima.
Antagonismo no competitivo: En algunos casos, el antagonista puede combinarse irreversiblemente con el receptor y el aumento de la concentración del agonista nunca podrá superar totalmente la inhibición. El efecto neto será una reducción de la altura máxima de la curva log dosis-respuesta, que se considera un reflejo de la disminución del número de complejos fármaco-receptor (Fig. A.1.1, panel B). No existe ningún cambio en el Ki del fármaco; la afinidad de éste por los receptores disponibles no se altera.
Con antagonista NO competitivo
ANEXOS
41
Curva Dosis- Respuesta: Comparando la dosis de un fármaco, en una escala logarítmica,
con la medida del efecto producido, se obtiene una curva sigmoide, que se suele
denominar curva log dosis-respuesta, o bien Curva Concentración Respuesta (Fig. A.1.2). Potencia: Se dice que un fármaco es potente cuando tiene gran actividad biológica por
unidad de peso. Cualquier punto de una Curva D-R podría indicar la potencia de un
fármaco, pero, con fines comparativos, se suele seleccionar la DE50. En la figura A.1.2,
panel A, los fármacos A y B producían curvas dosis-respuesta paralelas, pero se puede
decir que el fármaco A es diez veces más potente que el B. Es esencial recordar que las
potencias se comparan en base a las dosis que producen el mismo efecto y no
comparando las magnitudes de los efectos provocados por la misma dosis (Clark y col.;
1995). Fig. A.1.2. Curvas log dosis-respuesta que ilustran la diferencia entre potencia y eficacia. A) El fármaco A es mucho más potente que el B, pero ambos causan el mismo efecto máximo. B) El fármaco A no sólo es más potente, sino que también tiene mayor eficacia; produce un mayor efecto máximo que el fármaco B.
Efecto Máximo: En la figura A.1.2 panel B, El fármaco A no sólo es diez veces más
potente que el B, sino que también tiene una mayor actividad máxima o «techo» de
actividad; muestra mayor eficacia, o fuerza, una expresión de su actividad intrínseca.
Potencia y eficacia se suelen confundir en la terminología médica. La potencia sola es una
ventaja sobre estimada en terapéutica. Si el fármaco A es diez veces más potente que el
B, pero no tiene otras virtudes, puede suponer tan sólo que el paciente tomará
comprimidos que contengan menos miligramos del fármaco A. Los laboratorios farma-
céuticos suelen subrayar que un fármaco es más potente que otro, lo que, en sí mismo,
tiene poca importancia para el médico. Por otra parte, si el fármaco tiene mayor eficacia,
puede lograr resultados que no se obtendrían con un compuesto más potente.
ANEXOS
42
ANEXO 2
TRATAMIENTO PROFILÁCTICO DE LA MIGRAÑA
La migraña es una enfermedad crónica cuyo curso suele ser fluctuante. Una persona con
migraña puede tener periodos con muchas crisis y es entonces cuando cobra una mayor
importancia el tratamiento preventivo o profiláctico de la migraña. El principal factor que se
valora para decidir un tratamiento profiláctico es el número de crisis. Por regla general, se
recomienda tratamiento preventivo en caso de tres o más crisis al mes aunque puede
haber excepciones. No conviene asociar antimigrañosos profilácticos de forma precoz y
es preferible ir cambiando de familia farmacológica cuando se decida que cierto fármaco
no es eficaz tras dos o tres meses de terapia. Es imprescindible avisar al paciente que el
fármaco que se ha recetado tiene otras indicaciones distintas a la migraña (hipertensión,
temblor, epilepsia o depresión). Así mismo, si existe comorbilidad (Ej.: migraña y
depresión) se notificará al paciente que con el mismo fármaco antidepresivo -en caso de
estar indicado- le trataremos sus dos enfermedades.
La migraña es una enfermedad de curso fluctuante y muchos pacientes sólo necesitarán
profilaxis durante determinados periodos. El tratamiento profiláctico no se debe mantener
de forma crónica sin hacer descansos o cambios de fármacos para evitar la taquifilaxia y
reducir la probabilidad de efectos secundarios. No se aconsejan periodos mayores a los 6
meses para los betabloqueantes y de 3 meses para flunarizina. En caso de tratamiento de
dos enfermedades con un solo fármaco en los pacientes comórbidos el factor que decidirá
el mantenimiento crónico o la retirada, suspensión temporal o cambio de tratamiento será
la enfermedad principal (Ej. epilepsia o hipertensión arterial) (Ezpeleta, 2002).
Fármacos antimigrañosos preventivos
Existen varias familias de fármacos con potencial profiláctico antimigrañoso (Tabla A.1)
Llama la atención la disparidad farmacológica de estos tratamientos, reflejo indudable de
las complejidades fisiopatológicas de la migraña como síndrome. Se distinguen los
siguientes grupos principales de fármacos: betabloqueantes, calcioantagonistas,
antidepresivos, antiepilépticos, AINE y otros.
ANEXOS
43
Betabloqueantes. Están indicados en pacientes jóvenes con hipertensión arterial, temblor
esencial, ansiedad e hipertiroidismo. Están contraindicados en caso de asma bronquial,
síndrome de Raynaud, insuficiencia cardiaca y bloqueo auriculoventricular. Conviene
evitarlos en pacientes diabéticos y en caso de depresión. Si es preciso se pueden usar en
niños y en embarazadas (no durante el primer trimestre). Pueden provocar disfunción
eréctil en el varón, hecho que se debe valorar con especial cautela. Alguno de ellos, como
Metoprolol, puede provocar insomnio y pesadillas (Ezpeleta, 2002).
Calcioantagonistas. Aunque estos fármacos se engloban dentro de la misma categoría,
estructuralmente son distintos y su mecanismo de acción también. El más usado es
flunarizina, que ejerce su acción por un mecanismo de antagonismo serotonérgico como
dotarizina, otro derivado piperazínico. La dosis diaria eficaz de flunarizina es de 2,5-5 mg
(una toma por la noche) y no está indicada en caso de depresión u obesidad. Dosis
mayores pueden producir aumento de peso y excesiva somnolencia diurna (Ezpeleta,
2002).
El consumo crónico de flunarizina se relaciona con parkinsonismo. Las dihidropiridinas,
nicardipina y nimodipina así como verapamilo, más usado en Estados Unidos, son
calcioantagonistas antimigrañosos de segunda línea (Ezpeleta, 2002).
Verapamilo está contraindicado en caso de insuficiencia cardiaca, hipotensión arterial y
bloqueo auriculoventricular de segundo o tercer grado. Otro fármaco de este grupo en
estudio es ciclandelato, que no parece ser más eficaz que propranolol.
Antidepresivos. Amitriptilina es un antidepresivo tricíclico clásico que puede presumir de
ser uno de los fármacos más usados en neurología, y no sólo en cefalea. Además de su
típica indicación en cefalea tensional y en los diferentes tipos de cefalea crónica diaria, su
utilidad está fuera de toda duda, incluso en migraña aislada. La indicación más típica de
amitriptilina sería aquel paciente que sufre migraña y cefalea tensional, cefalea mixta o
migraña y depresión. A su efecto antimigrañoso y antidepresivo se une su acción
inductora del sueño. Amitriptilina está contraindicada en caso de glaucoma o prostatismo
debido a su efecto anticolinérgico.
ANEXOS
44
TABLA A.1. Fármacos con potencial profiláctico antimigrañoso (Tomado de Ezpeleta,
2002).
Los principales efectos adversos de los antidepresivos (somnolencia, aumento de peso,
xerostomía, estreñimiento) pueden ser muy leves o inexistentes si se hace una progresiva
escalada de dosis hasta la dosis mínima eficaz y si se administra sólo al acostarse.
Imipramina tiene un perfil terapéutico parecido a amitriptilina. Un nuevo antidepresivo que
puede ser útil en migraña y con pocos efectos secundarios es mirtazapina, que también
ayuda a conciliar el sueño.
FAMILIA FÁRMACOS DOSIS
Nadolol 40-120 mg/día en dosis única matutina Atenolol 50-100 mg/día en dosis única matutina Betabloqueadores
Propranolol 40-160 mg/día en 3 dosis Flunarizina 2.5-5 mg/día en única dosis nocturna Nicardipina 40-60 mg/día en 2-3 dosis Verapamilo 80-360 mg/día en 2-3 dosis
Calcioantagonistas
Nimodipina 90 mg/día en 3 dosis Amitriptilina 10-75 mg/día en dosis única nocturna Imipramina 25-75 mg/día en dosis única nocturna Fluoxentina 20 mg/día por la mañana Paraxentina 20 mg/día por la mañana Sertralina 50-100 mg/día por la mañana
Antidepresivos
Mirtazapina 15-30 mg/día en dosis única nocturna Ácido valproico 400-1000 mg/día en 1-2 dosis
Gabapertina 600-1800 mg/día en tres dosis Antiepilépticos Topiramato 50-100 mg/día en única dosis nocturna Naproxeno 500-1100 mg/día en 2 dosis
AINE AAS 500-1000 mg/día en 2 dosis Pizotifeno 0.5-1.5 mg/día en única dosis nocturna
Metilsergida 2-6 mg/día (máximo 4 meses en forma continua)
Riboflavina ____ (en estudio) Otros
Toxina botulínica
____ (en estudio)
ANEXOS
45
Los inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina (fluvoxamina, fluoxetina,
paroxetina, sertralina, citalopram) no parecen comportarse como antimigrañosos
primarios. Su efecto, de haberlo, estaría más en relación con su acción coadyuvante
como antidepresivos que con un efecto antimigrañoso real (Ezpeleta, 2002).
Antiepilépticos. El ácido valproico a dosis de 400 mg a 1000 mg diarios reduce
eficazmente la frecuencia de ataques de migraña (Ezpeleta, 2002). Se le considera un
fármaco de primera elección en la migraña con aura -sobre todo si el aura es prolongada-
y de segunda línea en la migraña sin aura que no responde a betabloqueantes o
flunarizina. También es útil en los pacientes que combinan ataques de migraña y de
cefalea tensional. Cuando se usa ácido valproico hay que vigilar especialmente la función
hepática y la ganancia de peso. Los buenos resultados del ácido valproico despertaron la
investigación de otros antiepilépticos en migraña. Ya se dispone de varios estudios con
carbamacepina, lamotrigina, gabapentina, vigabatrina y topiramato. De todos estos, el
más eficaz es topiramato, un fármaco que está llamado a ser un preventivo de la migraña
de primera línea.
AINE. Además de su utilidad como tratamiento sintomático no específico de los ataques
de migraña y como tratamiento de soporte en las primeras semanas de retirada de los
analgésicos o ergóticos en caso de cefalea crónica diaria con abuso de estos fármacos,
los AINE -principalmente naproxeno y aspirina- están indicados en la profilaxis
premenstrual de los ataques de migraña.
Otros. Riboflavina (vitamina B2) es un cofactor de los complejos I y II del ciclo de Krebs.
Se supuso que riboflavina podría ser útil en la profilaxis migrañosa según una teoría que
postula que la migraña puede tratarse de un trastorno mitocondrial. Los pocos estudios
que hasta la fecha se han realizado indican que esta vitamina puede convertirse en un
eficaz antimigrañoso (Ezpeleta, 2002).
La toxina botulínica inyectada en la zona glabelar, frontal y temporal es el último fármaco
que se ha añadido a la lista de antimigrañosos y está por demostrar un beneficio
específico independiente del simple alivio sintomático producido al relajar la musculatura
pericraneal -con frecuencia contraída- de los pacientes migrañosos.
ANEXOS
46
ANEXO 3
MODELOS EXPERIMENTALES FARMACOLÓGICOS
El uso de modelos experimentales es tan frecuente en la mayoría de las enfermedades,
que no parece necesario justificar su utilización para el estudio de las cefaleas. Sin
embargo, en el campo del estudio de las cefaleas, el uso de modelos animales y humanos
es relativamente reciente (10-15 años). Dentro de las razones que han contribuido al inicio
y desarrollo dentro de esta fase cabe destacar dos hechos: un mayor conocimiento en los
últimos años de las bases fisiológicas de la migraña, que son cruciales para la validación
y desarrollo de los métodos experimentales; y por otro lado, un mayor conocimiento
clínico, que ha sido posible gracias a la publicación de la clasificación de las cefaleas por
la IHS en 1988 (Lizasoain y Leira, 2003).
Aunque no hay un modelo ideal que se correlacione con los cuadros de la migraña en el
paciente, cada uno de ellos tiene una serie de ventajas y desventajas y en general sirven
para el estudio de parcelas determinadas. En el estudio de mecanismos directamente
aplicables a la migraña y otras cefaleas vasculares, y asumiendo las dos hipótesis que
explican la fisiopatología de la migraña, hipótesis vascular e inflamación neurogénica,
podemos diferenciar los siguientes modelos:
Modelos basados en la estimulación del Sistema Trigémino.
Moskowitz y col. (1995) fueron los primeros en describir la inflamación neurogénica que
se produce en las meninges de rata después de la estimulación eléctrica o química del
ganglio trigeminal y además de producir extravasación de proteínas plasmáticas en la
dura madre que a su vez están involucrados en el dolor.
Para el estudio de la activación del sistema trigémino vascular, se han desarrollado varias
técnicas, basadas en la estimulación eléctrica, química o inmunológica del ganglio
trigémino, del seno sagital superior o de la dura madre.
ANEXOS
47
Tras la estimulación del ganglio trigeminal, se estudian los cambios que se desencadenan
(Lizasoain y Leira, 2003).
• Extravasación de proteínas plasmáticas.
• Modificación del flujo cerebral.
• Liberación de péptidos neuroinflamatorios.
• Expresión de c-fos (activación neuronal)
Modelos basados en el papel de la vasodilatación craneal en la migraña.
Estos modelos están basados en la vasodilatación extracerebral como parte importante
en la fisiopatología de la migraña, apoyada por el hecho de que los derivados ergóticos y
el sumatriptán, que son útiles en el tratamiento agudo de la migraña, no cruzan la barrera
hematoencefálica y por lo tanto su efecto es por vasoconstricción periférica de los vasos
dilatados (Lizasoain y Leira, 2003). Para el estudio de esta teoría existen dos modelos
fundamentales:
• Contracción de las anastomosis arteriovenosa carotideas.
• Contracción de vasos sanguíneos aislados.
Este último cumple con una serie de características que le confieren una gran fiabilidad;
entre las que podemos destacar que el método es relativamente sencillo, que los datos
obtenidos son reproducibles y que permiten el estudio de muchos compuestos en un corto
periodo de tiempo utilizando la misma preparación.
ANEXOS
48
Sin embargo, hay que tener en cuenta algunos aspectos cuando se utiliza éste modelo en
el estudio de fármacos antimigrañosos con el fin de unificar al máximo todos los
parámetros:
• Los vasos cerebrales poseen más receptores 5-HT1B que 5-HT2 que
predominan en los vasos periféricos
• Con respecto a la composición de la solución salina que baña los vasos, es
importante controlar la concentración de calcio (las arterias cerebrales
dependen en mayor grado que las arterias periféricas del calcio
extracelular), el pH y la temperatura, ya que pueden variar la reactividad de
los vasos.
• La presencia del endotelio y la liberación de óxido nítrico (NO), un potente
vasodilatador natural presente en la pared de los vasos craneales, atenúan
el efecto del fármaco.
• La elección de la especie (animal o humana).
• La elección del lecho vascular.
REFERENCIAS
49
12. REFERENCIAS
Adelman, J.U; Adelman, R.D. (2001).”Current options for the prevention and treatment of
migraine” en Clin Ther; 23 (6): 772 - 788.
Bartleson, J.D.(1999). “Treatment of migraine headaches” en Clin Proc . 74 (7): 702-708.
Blau, J.N. (1993).” Behavior during a cluster headache” en Lancet; 342(8873):723-725.
Bradley, P; Engel, G; Feniuk, W; Fozard, J; Humphrey, P; Middlemiss, D; Mylecharane, E;
Richardson, B;. Saxena, P. (1986). “Proposals for the classification and nomenclature of
functional receptors for 5-hydroxytryptamine” en Neuropharmacol., 25, 563-576.
Cohen, M; Johnson, K; Schenck K; Phebus, L. (1997) “Migraine therapy: relatioinship
between serotonergic contractile receptors in canine and rabbit saphenous vein to human
cerebral and coronary arteries” en Cephalgia., 17: 631-638.
Chinea, A. (1998) “Agonistas de serotonina (5-HT1): Triptanes” en Primer Congreso Virtual
Iberoamericano de Neurología. [En Línea].Conferencia 16 del área de Cefaleas. España,
disponible en: http://neurologia.rediris.es/congreso-1/conferencias/cefaleas-16.html
[Accesado el día 13 de octubre de 2005]
Clark, W; Brater, D; Johnson, A. (1995). “Goth Farmacología Médica”. 13a. ed. Ed. Mosby/
Doyma. España. 6 -12, 204 pp.
Creite, A. (1869) “Versuche über die Wirkung des Serumeiweisses nach Injection in das
Blut” en Zeitschrift für rationelle Medicin, B. 36, 90.
Dawn, M. (2001) “Establishing a standard of speed for assessing the efficacy of the
serotonin 1B/1D Agonists (Triptans)” en Arch Neurol., 58 (7): 1056-1058.
REFERENCIAS
50
Deleu, D; Hanssens, Y. (2000). “Current and emerging second-generation triptans in acute
migraine therapy: a comparative review” en J Clin Pharmacol. 40 (7): 687-700.
Diener, H; Kaube, H; Limmroth, V. (1999). “Antimigraine drugs” en J. Neurol., 246(7), 515-
519.
Dompert, W; Glaser, T; Traber, J. (1985). “3H-TVX Q 7821: Identification of 5-HT1 binding
sites as target for a novel putative anxiolytic” en Naunyn-Schmiedeberg's Arch.
Pharmacol., (328), 467-470.
Douglas, W.(1985). “5-Hydroxytryptamine (serotonin)” dentro de Goodman and Gilman's.
The Pharmacological Basis of Therapeutics, 7° Edición. Goodman Gilman, A; Goodman,
L.S; Rall, T.W; Murad F. (eds). McMillan Publishing Company, New York,. 628-638 pp.
Dulli, D.(1999). “Naratriptan: an alternative for migraine” en Ann Pharmacother.; 33(6):
704-711.
Edmeads, J; Findlay, H; Tugwell, P. (1993). “Impact of migraine and tension type
headache on life style, consulting behavior, and medication use a Canadian population
survey” en Can J Neurol Sci., (20) 131-37.
Eguia, P; García, J. (2000) “Fisiopatología de las Cefaleas” Plan de Formación en
Neurología. Capitulo 1. España
Ersparmer, V; Asero, D.(1952). “Identification of enteramine, the specific hormona of the
enterchromaffin cell system, as 5- hidroxytripyamine” en Nature. (169):800-801
Ersparmer, V. (1966). “Peripherial, physiological and pharmacological actions of indole
alkylamines” en Handbook of experimental Farmacology. (14)V. Erspamer (editor).
Springer-Verlag, Berlin, 245-359 p
REFERENCIAS
51
Escudero, M.C. (2000). “Evaluación farmacológica de compuestos quinolínicos 2-
sustituidos en la vena safena aislada de conejo. Caracterización farmacológica de
compuestos con posibilidad de acción antimigrañosa” en Tesis de Licenciatura. México,
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas– Instituto Politécnico Nacional
Ezpeleta, D. (2002). “Tratamiento preventivo de la migraña” en Apuntes de Neurología,
Capítulo 2: Cefaleas, disponible en línea http://www.infodoctor.org/neuro/Art27.htm
Noviembre de 2002 Hospital Reina Sofía de Tudela, Navarra. España [Accesado el 13 de
octubre de 2005]
Ferrari, M. (1998). “Migraine” en Lancet; 351 (9108): 1043 - 1051.
Fozard, J.R. (1987). “Trends“ en Pharmacol. Sci; 100:501
Gaddum, J.H; Picarelli, Z.P. (1957). “Two kinds of tryptamine receptors” en Br. J.
Pharmac. 12:323-328
Gershon, M.; Dreyfus, C.; Pickel, V.; Joh, T.; Reis, D.J. (1977). “Serotonergic neurons
in the peripheral nervous system. Identification in gut by immunohistochemical localization
of tryptophan hydroxylase” en Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (74): 3086-3089.
Gershon, M; Mawe, G; Branchek, T.(1990). “5-Hydroxytryptamine neurotransmission in
the gut” en Cardiovascular Pharmacology of 5-Hydroxytryptamine: Prospective
Therapeutic Applications. Saxena, P.R., Wallis, D.I., Wouters, W. and Bevan, P., (eds).
Dordrecht: Kluwer Academic Publishers,191-210 pp.
Hamlin, K; Fischer, F. (1951). “The synthesis of 5-hydroxytryptamine” en J. Am. Chem.
Soc.(73): 5007-5008.
Humphrey, P; Feniuk, W; Perren, M.; Connor, H.; Oxford, A.; Coates, L.; Butina, D. (1988).
“GR43175, a selective agonist for the 5-HT1-like receptor in dog isolated saphenous vein”
en Br. J. Pharmacol. 94(4), 1123-1132.
REFERENCIAS
52
Humphrey, P; Feniux, W. (1991). “Mode of action of the ant-migraine drug sumatriptan”
en Eur. J. Pharmacol. 12: 444-446
Hong, E; Rion, R; Aceves, J.; Benitez-King, G; Anton-Tay, F. (1987). “Further evidence for
a central antihypertensive effect of indorenate.” en Proc. West. Pharmacol. Soc. (30) 1-3.
Hong, E; Villalón, C; De León, H. (1989). “Pharmacological evidences that Indorenate is a
5-HT agonist” en Pharmacologist; 31, 33 pp.
Hoyer D, Hannon J.P, Martin GR. (2002) “Molecular, pharmacological and functional
diversity of 5-HT receptors” en Pharmacol. Biochem. Behav.; 71(4):533-54.
IHS (1988). Headache Classification Committee of the International Headache Society.
Classification and diagnostic criteria for headache disorders, cranial neuralgias and facial
pain” en Cephalalgia; 8 (Suppl 7): 1-96
Janeway, T; Richardson, H; Park, E. (1918). “Experiments on the vasoconstrictor action of
blood serum” en Arch. Int. Med. (21):565-603
Jhee, S.S; Shiovitz, T; Crawford, A.W; Cutler, N.R. (2001). “Pharmacokinehcs and
pharmacodynamics of the triptan antimigraine agents: a comparative review” en Clin
Pharmacokinet. 40(3): 189-205.
Lance, J. (1991) “5-Hidroxytriptamine and its role in migraine”. Institute of Neurological
Sciences, Prince Henry Hospital, Sydney, N.S.W., Australia
Lexchin, J; Cude-Simpson, K; Stancer, H. (1977). “Brain and blood indole metabolites
after peripheral administration of 14C-5-HT in rat” en Neurochem. Res. (2) 39-50.
Liaño, H. (2005). “¿Qué son los triptanos y para qué sirven?”. En grupo de Estudio de
Cefaleas [En Línea], Ficha 3 .España, disponible en:
http://www.gecsen.org/pacientes/3ficha.htm [Accesado el día 13 de octubre de 2005]
REFERENCIAS
53
Limmroth, V; Diener, H.C (1998). “New anti-migraine drugs: present and beyond the
millennium” en Int J Clin Pract. 52 (8): 566-570.
Lizasoain, I; Leira, R. (2003). “Modelos experimentales de las cefaleas” en Neurología.
Compostela de Madrid
Mayer, E.A; Berman, S; Derbyshire, SW, Suyenobu, B; Chang, L; Fitzgerald, L;
Mandelkern, M; Hamm, L; Vogt, B; Naliboff, B.D. (2002). “The effect of the 5-HT3 receptor
antagonist, alosetron, on brain responses to visceral stimulation in irritable bowel
syndrome patient” en Aliment Pharmacol Ther.;16(7):1357-66.
Moskowitz, M.A; Cutrer, F.M; Lee, W.S; Waeber, C; Limmroth, V; Yu, X. (1995). “Drug
discovery in migraine circa” en Experimental headache models. Olesen J, Moskowitz,
(eds). Lippincott-Raven Publisher.
Newman, C.M; Starkey, I; Buller, N; Seabra-Gomes, R; Kirby, S; Hettiarachchi, J;
Cumberland, D; Hillis, W.S (2005). “Effects of sumatriptan and eletriptan on diseased
epicardial coronary arteries” en Eur J Clin Pharmacol. 61(10): 733-742
Page, I.H. (1958) “Serotonin (5-hydroxytryptamine); the last four. Years” en Physiol. Rev.,
(38). 227-335.
Parajeles, A. (1998).”Mecanismo de acción de los Triptanes. Una mirada a la serotonina”
en Primer Congreso Virtual Iberoamerican de Neurología. [En Línea].Conferencia 15 del
área de Cefaleas. España, disponible en: http://neurologia.rediris.es/congreso-
1/conferencias/cefaleas-15.html [Accesado el día 13 de octubre de 2005]
Peroutka, S.J; Snyder, S.H.(1979) “Multiple serotonin receptors: diferential binding of [3H]-
5-hidroxytryptamine, [3H]-lysergic acid diethylamide and [3H]-spiroperidol” en Molec.
Pharmac. 16:687-699.
REFERENCIAS
54
Rapport, M.M. (1949). “Serum vasoconstrictor (serotonin). V. The presence of creatinine
in the complex: a proposed study of the vasoconstrictor principIe.” en J. Biol. Chem. (180):
961-969.
Rapport, M.M; Green, A.A; Page, I.H. (1948a) “Partial purification of the vasoconstrictor in
beef serum” en J. Biol. Chem. (174) 735-741.
Rapport, M; Green, A.A; Page, I.H. (1948b). ”Vasoconstrictor (serotonin). IV. Isolation
characterization.” en J. Biol. Chem. (176): 1243-1251.
Rummo, G; Bordoni, L. (1889) “Toxicité du sérum du sang de l'home et des animaux a
l'état normal et dans les maladies par infection” en Archiv de Biologie Italiene, Bd. XII,
XLVI-XLVII
Safdy, M; Kurchacova, E; Schut, R; Vidrio, H; Hong, E. (1982). “Tryptophan analogues. 1.
Synthesis and antihypertensive activity of positional isomers” en J. Med. Chem. (25): 723-
730.
Sanders-Bush, E; Chang, M; Zhang, L; and Tam J. P. (2000). “Dissecting G Protein-
coupled Receptor Signaling Pathways with Membrane-permeable Blocking Peptides.
Endogenous 5-HT2C receptors in choroid plexus epithelial cells” en J Biol Chem, Vol. 275,
Issue 10, 7021-7029, March 10, 2000
Sanin, L; Takeuchi, Y. (2000). “Cefálea y dolor crenoeofacial”. Ed. McGraw-Hill. Colombia.
Cap. 5.
Saxena, P; Ferrari, M. (1989). “5-HT1-like receptor agonists and the pathophysiology of
migraine” en Eur. J. Pharmacol. 10: 200-204
Saxena, P; Villalón, C.M. (1990) “Cardiovascular effects of serotonin agonists and
antagonists” en J. Cardiovasc. Pharmacol.,15 (Suppl. 7), S17-S34.
REFERENCIAS
55
Schoeffter, P; Hoyer, D. (1988). “Centrally actino hypotensive agents with affinity for 5-
HT1A binding sites inhibit forskolin-simulated adenylate cyclase activity in calf ippocampus”
en Br. J. Pharmacol. (95): 975-985
Terrón, J.A. (1992). “Cernimiento farmacológico de algunos análogos de la Quipazina y
del Indorrenato. Caracterización farmacológica de compuestos con posibilidad de acción
antimigrañosa”. Tesis de Maestría en Ciencias en la Especialidad de Farmacología.
México, Departamento de Farmacología y Toxicología. Centro de Investigación y de
Estudios Avanzados – Instituto Politécnico Nacional
Terrón, J.A; Hong, E. (1991). “Effects of 2-(5-methoxy-3-indolyl)-3-aminopropanol (TR-
3661) on the canine basilar artery” en Proc. West. Pharmacol. Soc. 34,153-155.
Tfelt-Hansen, P; De Vries, P; Saxena, P. (2000). “Triptans in migraine: a comparative
review of pharmacology, pharmacokinetics and efficacy” en Drugs; 60(6), 1259-1287.
Tomkins, GE; Jackson, J.L; O’Malley, P.G. (2000). ”Treatment of chronic headache with
antidepressants: a meta-analysis” en Am J Med. 111(1): 53-63.
Villalón, C; Bom, A; Heiligers, J; Den Boer, M;. and Saxena, P;. (1990). “Constriction of
porcine arteriovenous anastomoses by indorenate is unrelated to 5-HTlA , 5-HT1B, 5-HT1C,
or 5-HT1D receptor subtype.” en Eur. J. Pharmacol., 190, 167-176. .
Weiller, C; May, A; Limmroth, V. (1995). “Brain steam activation in spontaneous human
migraine attacks” en Nature Medicine; 1:658-660.
Weiss, O. (1896) “Ueber die Wirkungen von Blutserum-Injectionen ins Blut” en Archiv für
die Gesamte Physiologie des Menschen und der Thiere, LXV, 215-230.
REFERENCIAS
56
Weitzel, K. (1999). “Migraine: a comprehensive review of new treatment options” en
Pharmacotherapy; 19 (81): 957-73.
Zavala, H; Saravia, B. (2004). “Migraña”. [En línea] Revista del Hospital General de
Agudos. Volumen IX. Nº 1. Edición electrónica. Buenos Aires-Argentina, disponible en
www.ramosmejia.org.ar/r/200401/migrana.pdf [Accesado el día 12 de octubre de 2005]