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PRÁCTICA 5Sesión 1
Observación de cromosomas humanos
Curso 2007 - 2008
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GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos
Observar cromosomas metafásicos con tinción diferencial (Cromosomas arlequines).
Observar preparaciones de linfocitos de sangre periférica humana - Cariotipo humano.
Observar cambios estructurales de los cromosomas.
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GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos
Observar cromosomas metafásicos con tinción diferencial (Cromosomas arlequines).
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GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCE – Sister Chromatid Exchange testSCE – Sister Chromatid Exchange test
Ensayo para detectar lesiones en el DNA.
Detecta intercambio de material entre las 2 cromátidas de un cromosoma que se puede visualizar mediante tinción diferencial.
Producirse rotura en la doble cadena del DNA y el posterior intercambio y unión del DNA.
En la fase SInducción por mutágenos y carcinógenos (aductos, interferencia con la replicación DNA...)
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GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCESCE
Base molecular ¿?
SCE no son letales para la célula.
SCE biomarcador de exposición.
Ensayo sensible a la acción de agentes genotóxicos.Evaluación de riesgo
Nivel basal SCE: 6-10 SCE / célula.
Factor confusión: edad, sexo, estilo de vida
Fuerte relación entre fumar y SCE.Frecuencia
Significado
biológico
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GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCE SCE
24 h0 h 48 h 72 h
Fitohemaglutinina 5-Bromo-2-deoxiuridina Colcemid
-KCl
-Carnoy
HoestchIrradiación con UV (350 nm)
Tinción Giemsa
Linfocitos (G0)M1 M2
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SCESCE - Incorporación de la BrdU - Incorporación de la BrdU
1 cs
Fase S
BromodeoxiUridina (análogo Timidina)
METAFASE- M1
División
M2
Fase S División
Fase S M3
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GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCESCE
SCE
+BrdUrd
G1 S
Metafase 1
G2
1r ciclo 2n ciclo
G1
S
G2
M 2
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GENÈTICA MENDELIANASíndrome de BloomSíndrome de Bloom
SCE SCE
SCE en un individuo normal SCE individuo con Síndrome de Bloom.
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Observación de cromosomas humanos
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