![Page 1: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/1.jpg)
Kelompok 1:Muchson, Herllya, Monica, Hazibi, Dian, Fuad, Luthfia, Fajar, Siwi, Rini
PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA.
![Page 2: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/2.jpg)
PENDAHULUAN
Kaya Flavonoid
Memiliki OH bebas Tanpa OH bebas
Mengubah aktivitas sitokrom P450
Efek inhibisi Efek Stimulasi
Pengaruh Flavonoid pada oksidasi Acetaminophen…???
![Page 3: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/3.jpg)
TUJUAN
Tujuan dari penelitian ini adalah menyelidiki lebih lanjut efek dari flavonoid pada P450-dependen aktivitas dan oksidasi Acetaminophen (APAP) pada tikus dan mikrosom hati manusia.
![Page 4: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/4.jpg)
ALAT dan BAHAN
9 Flavonoid (Myrecetin, Flavon,Fisetin, Narigenin, Quercetin, Hesperidin, Tangeretin, Nobiletin, Naringin)
GSH, NDMA, Ethoxyresorufin, virus vaccinia
tissue regaen kultur, sel G2 Hep, reagen.
![Page 5: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/5.jpg)
ALAT dan BAHAN Myrecetin, flavon, fisetin, GSH, dan NDMA dibeli dari Aldrich kimia Co (Milwaukee,WI).
Narigenin, quercetin, hesperidin, tangeretin, nobiletin, dan naringin adalah pemberian dari florida fruitcitric departmen (Lake Alfred, FL). Ethoxyresorufin diperoleh dari Sigma Chemical Co (St Louis MO).
Tissue reagen kultur dibeli dari Gibco BRL (Gaithersburg, MD). Wild type virus vaccinia dan
vektor ekspresi diperoleh dari Dr B Moss (National Institute of Health, Bethesda, MD).
Sel Hep G2diperoleh dari ATCC (Rockville, MD). Semua reagen lainnya adalah dari grade sesuai yang
tersedia secara komersial.
![Page 6: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/6.jpg)
ALAT dan BAHAN
![Page 7: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/7.jpg)
PROSEDUR PERCOBAAN
Persiapan Mikrosom
Hati
Sistem ekspresi
P450 Manusia
Metabolisme APAPUji Enzim
![Page 8: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/8.jpg)
HASIL PENELITIAN
1. Mikrosom liver tikus jantan (control)
2. Human liver microsomes
3. P450 yang diekspresikan pada sel Hep G2
4. Penambahan substrat pada mikrosome yang berbeda
5. Pengaruh flavonoid pada aktivitas EROD
6. Pengaruh flavonoid pada NDMA demetilasi
7. Pengaruh flavonoid pada Erythromycin demethylase
![Page 9: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/9.jpg)
Pengaruh flavonoid terhadap oksidasi APAP pada Mikrosom liver tikus jantan (control) Inhibisi laju pembentukan NAPQI-GSH
utamanya diakibatkan oleh inhibisi pada P450 2E1
Flavone meningkatkan laju oksidasi APAP 2 - 5x
Tangeretin (12.5 µM) meningkatkan oksidasi APAP, namun peningkatan konsentasi berikutnya tidak meningkatkan aktivitas.
Quercetin, Myricetin, Naringenin menurunkan oksidasi APAP.
![Page 10: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/10.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada Oksidasi APAP pada mikrosom liver tikus jantan
0
1
2
3
4
Flavone Tangeretin Myricetin Quercetin Naringenin
Control+MeOH12.5mcM25mcM50mcM100mcM
![Page 11: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/11.jpg)
Pengaruh flavonoid terhadap oksidasi APAP pada Human Liver Microsomes Flavone, Tangeretin, Nobiletin meningkatkan
NAPQI-GSH pada HL-110 Quercetin, Myricetin menghambat
pembentukan NAPQI-GSH pada HL-110 HL-110 = P450 3A4
![Page 12: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/12.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada Oksidasi APAP pada mikrosom liver manusia compounds HL-1
pmol/mg/min (% activity)
HL-110pmol/mg/min (%
activity)
VehicleFlavoneNobiletinTangeretinNaringinHesperidinNaringeninFisetinMyricetinQuercetin
448 ± 18 (100)650 ± 113 (150)523 ± 70 (120)509 ± 48 (110)415 ± 41 (93)452 ± 13 (101)356 ± 5 (79)361 ± 29 (81)358 ± 38 (80)399 ± 7 (89)
697 ± 66 (100)2298 ± 20 (330)1545 ± 12 (220)1130 ± 82 (160)587 ± 53 (84)572 ± 7 (82)540 ± 46 (77)468 ± 52 (67)390 ± 7 (56)279 ± 10 (40)
Konsentrasi APAP, Flavonoid, dan Metanol = 500 µM, 50 µM, dan 0,03%
![Page 13: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/13.jpg)
Pengaruh Flavone dan Quercetin pada Oksidasi APAP oleh Sitokrom P450 pada Sel Hep G2 Senyawa P450 2E1 P450 1A2 P450 3A4
Pembawa 40 ± 2.1 44 ± 1.4 20 ± 0
Flavone 43 ± 0.7 0 83 ± 4.2
Quercetin 32 ± 2.1 0 8 ± 1.4
Konsentrasi APAP, flavonoid, dan methanol yang digunakan : 500 µM, 50 µM, dan 0,03%
![Page 14: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/14.jpg)
Pengaruh flavonoid terhadap Substrat yang berpengaruh pada oksidasi APAP pada mikrosom yang berbeda Male Rat liver microsome
Flavone ↑ Vmax 3,2 x ↓ Km
Quercetin ↑ Km 3 x ↓ Vm DEX-female rat
Flavone ↑ Vmax 2,4 x ↑ Km 1,6x
Quercetin ↑ Km 5,2 x ↓ Vmax (93%) Hep G2 – 3A4
Flavone ↑ Vmax 1,8 x
Quercetin ↑ Km ↓ Vmax (48%)
![Page 15: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/15.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada Substrate Dependence dari Oksidasi APAP pada Mikrosom yang berbeda-beda
Flavone
Tanpa Flavonoid
Quercetin
Control Rat Liver Microsome
![Page 16: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/16.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada Substrate Dependence dari Oksidasi APAP pada Mikrosom yang berbeda-beda
Flavone
Tanpa Flavonoid
Quercetin
DEX-induced female rat liver microsomes
![Page 17: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/17.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada Substrate Dependence dari Oksidasi APAP pada Mikrosom yang berbeda-beda
Flavone
Tanpa Flavonoid
Quercetin
Sel Hep G2-h3A4
![Page 18: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/18.jpg)
Parameter Kinetik Flavone dan Quercetin pada Oksidasi APAP pada P450 3A4 – Sel Hep G2
![Page 19: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/19.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada aktivitas EROD
Kontrol
Hep G2-h1A2
Flavone, Tangeretin, Quercetin, Myricetin ↓ P450 1A2
Flavone, Tangeretin, ↓ P450 3A4
![Page 20: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/20.jpg)
Pengaruh Flavonoid pada aktivitas NDMA dan Aktivitas Erithromisin demetilasi pada tikus control dan mikrosom liver manusiaKontrol
Mikorosom Liver Manusia
Myricetin = inhibisi lemah
Myricetin = inhibisiFlavone, Tangerenin, Quercetin= sedikit pengaruh
![Page 21: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/21.jpg)
KESIMPULAN
Flavone > Nobiletin > Tangeretin menstimulasi oksidasi APAP
Quercetin > Myricetin > Naringetin >
Fisetin > Hisperidin > Naringinin
menginhibisi oksidasi APAP.
![Page 22: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/22.jpg)
KESIMPULAN Flavone
↑ P450 3A4
↓ P450 1A2 dan EROD
tidak berpengaruh signifikan 2E1, NDMA,
erythromycin demethylase Quercetin
↓ P450 3A4, 1A2, 2E1, dan EROD
↑ kM dan ↓ VMAX
![Page 23: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/24.jpg)
Lanjutan..
Acetaminophen (APAP) adalah analgesik -antipiretik yang sangat umum digunakan. Meskipun APAP adalah obat yang aman dan efektif bila digunakan pada dosis yang dianjurkan, tetapi dapat menyebabkan hepatotoksik/kerusakan hati dan ginjal atau bahkan kematian pada kasus overdosis , terutama pada kecanduan alkohol atau bila digunakan bersama dengan beberapa obat lain
![Page 25: PENGARUH FLAVONOID PADA METABOLISME ASETAMINOFEN SITOKROM P450 DEPENDEN PADA TIKUS DAN MIKROSOM HATI MANUSIA .pptx](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022061511/55cf9884550346d033981882/html5/thumbnails/25.jpg)
Hepatotoksik Asetaminofen