A base da espectrometria de massas
JJ Thomson's 'Plum Pudding Model' of the atom, a sphereof positive charge containing electrons
The father of MS and the first massspectrometrist to win the Nobel Prize.
Pure species and mixtures
EI : Ionização por elétrons(Dempster e Nier)
• Moléculas neutras, na fase gasosa (dessorçãotérmica), a uma pressão típica de 10-5 torr, são bombardeadas por elétrons, com energia típica de 70 eV. Ocorre principalmente a retirada ou captura de um eléctron formando íons M+. ou M-.. Íons positivos são em geral predominantes (~100 vezes mais). M-. se tornam importantes para moléculas com alta EA.
M + e- (70 eV) → M+. (~ 5 eV) + 2e- (65 eV)
Princípio Geral de EI
M M
e-
+
F2
F4F3
F1
Princípios Gerais
• Processo unimolecular. Os íons formados são rapidamente extraídos da fonte de ionização pelo eletrodo de repulsão("repeller“).
• Íons moleculares são formados com excesso de energia interna e se fragmentam total ou parcialmente.
• EI é bastante popular: produz tanto o íon molecular (massa) como também fragmentos (estrutura); espectros reprodutíveis; bibliotecas de espectros de EI a 70 eV; estável; fácil de operar; alta sensibilidade.
• Aplica-se a moléculas de média e baixa polaridade e baixo peso molecular (~500u), voláteis e termo-estáveis: moléculas orgânicas relativamente pequenas.
Princípios Gerais
• Quando o íon molecular não é observado (devido a dissociação excessiva), é inútil diminuir a energia dos elétrons.
• Uma em cada 103-105 moléculas que entram na fonte de EI éionizada.
• EI ocorre em ~10-16 s. Ocorre sem mudanças nas distâncias internucleares (Frank-Condon).
• Esquema Geral
• A diminuição da energia dos elétrons provoca uma queda brusca nas intensidades absolutas de todos os íons, mas um aumento na intensidade relativa do íon molecular.
Espectros Típicos de EI a 70 eV
2-Hydroxy-1,2-diphenyl-ethanone
(mainlib) 1-Octanol10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140
0
50
100
15 18
27
29
37
39
41
45 50
56
62
70
73 77
84
91 97 101 112
OH
(mainlib) 1-Octene10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
0
50
100
14
27
29
31
39
41
43
45
55
59 62
70
72 77
83
91 97
112
(mainlib) 2-Octene10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
0
50
100
15
2729
32
39
41
51
55
67
70
77
83
97
112
Alguns espectros de EI apresentam dissociação excessiva, outros pouca dissociação.
M+. = massa e isótopos
F+ = estrutura
Espectro de Massas: Ionização por Elétrons (EI)
Isômeros C3H6O
M-1 Perda de hidrogênio radicalar M - .H
M-15 Perda de metil radicalar M - .CH3
M-29 Perda de etil radicalar M - .C2H5
M-31 Perda de metoxi radicalar M - .OCH3
M-43 Perda de propil radicalar M - .C3H7
M-45 Perda de etoxi radicalar M - .OC2H5
M-57 Perda de butil radicalar M - .C4H9
M-2 Perda de hidrogênio M – H2
M-18 Perda de água M – H2O
M-28 Perda de CO ou etileno M-CO ou M-C2H4
M-30 Perda de formaldeido M- CH2O
M-32 Perda de metanol M-CH3OH
M-44 Perda de CO2 M-CO2
M-60 Perda de ácido acético M-CH3CO2H
Conceitos Importantes
Notação dos Espectro de Massas
• Informações Estruturais• Informação da Massa do Compostos
m/z0 50 100 150 200 250
Ion
Abun
danc
e (%
)
0
20
40
60
80
100
Eixo y: Abundância %Eixo x: Relação massa/carga (m/z)
Mass spectra and isotopes
The Nobel Prize in Chemistry 1922"for his discovery, by means of his mass spectrograph, of isotopes, in a largenumber of non-radioactive elements, and for his enunciation of the whole-number rule"
Francis William AstonAt the end of 1909 he accepted the invitation of Sir J.J.Thomson to work as his assistant at the Cavendish Laboratory, Cambridge, onstudies of positive rays. It was during this period that he obtaineddefinite evidence for the existence of two isotopes of the inert gasneon.
Isóbaros
São moléculas com diferentes elementos e mesma no de massa.
Ex.: [C5H6O4]+; [C6H10O3]+, [C9H22]+ = 130 Da
Isótopos
São núcleos associados ao mesmo elemento da tabela periódica (mesmo númeroatômico) mas com diferentes números de nêutrons.
Ex: Hidrogênio, Deutério e Trítio
Isóbaros
São moléculas com diferentes elementos e mesma no de massa.
Ex.: [C5H6O4]+; [C6H10O3]+, [C9H22]+ = 130 Da
Isótopos
São núcleos associados ao mesmo elemento da tabela periódica (mesmo númeroatômico) mas com diferentes números de nêutrons.
Ex: Hidrogênio, Deutério e Trítio
Algumas definições importantesAlgumas definições importantes
Elemento Isótopo Abund. Relativa Isótopo Abund. Relativa Isótopo Abund. RelativaCarbono 12C 100 13C 1.1Hidrogênio 1H 100 2H 0.016Nitrogêio 14N 100 15N 0.38Oxigênio 16O 100 17O 0.04 18O 0.2Enxoger 32S 100 33S 0.78 34S 4.4Cloro 35Cl 100 Â 37Cl 32.5Bromo 79Br 100 81Br 98
Espectro de Massas: ISÓTOPOS
Espectro de Massas: abundância isotópica
Pico do Carbono 13Pico do Carbono 13
Pico monoisotópicoPico monoisotópico
Espectro de Massas
m/z0 50 100 150 200 250
Ion
Abun
danc
e (%
)
0
20
40
60
80
100PrecursorPrecursor
FragmentosFragmentos
Espectro de dissociação/fragmentaçãoEspectro de dissociação/fragmentação
Íon molecular
(mainlib) Benzoic acid, 2-hydroxy-, methyl ester10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
0
50
100
15
1828
39
4550
53
55
65
76 81
92
104 109
120
137
152
OH
O
O
(mainlib) Benzoic acid, 2-hydroxy-, methyl ester10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
0
50
100
15
1828
39
4550
53
55
65
76 81
92
104 109
120
137
152
OH
O
O
C7H6O3138.12
138.031694C 60.87% H 4.38% O 34.75%
Espectro de Massas: abundância isotópicaPara se estimar o número de carbonos em uma molécula: dividir a intensidade de A+1 por 1.1 (abundância do Carbono 13 na natureza).
Para se estimar o número de carbonos em uma molécula: dividir a intensidade de A+1 por 1.1 (abundância do Carbono 13 na natureza).25%25%
25 / 1.1 = 23,7~ 23 átomos de
carbono na molécula
25 / 1.1 = 23,7~ 23 átomos de
carbono na molécula
Espectro de Massas: abundância isotópica
Br - CH315 uma
79Br-CH3 = 9481Br-CH3 = 96
Informações:• Relação m/z• Presença dos isótopos• Diferença de massa entre os sinais
Espectro de Massas: abundância isotópica
Cloro Peso atômico = 35,453Mistura de Cloro 35 (75,77%) e Cloro 37 (24,23%)
40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61mass0
100
%
7.49e1250.0
52.0
CH3Cl
40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60mass0
100
%
50.0
52.0
Padrão isotópico: Cloro 35 (75,77%) e Cloro 37 (24,23%)
CH3Cl
74 76 78 80 82 84 86 88 90 92 94 96mass0
100
%
84.0
86.0
87.9
CH2Cl2
108 110 112 114 116 118 120 122 124 126 128 130 132mass0
100
%
117.9119.9
121.9
123.9
CHCl3
145 150 155 160 165mass0
100
%
153.9
151.9
155.9
157.9
CCl4
Padrões isotópicos complexos
165 170 175 180 185 190mass0
100
%
3.06e12178.9436
172.9467
165 170 175 180 185 190mass0
100
%
3.06e12178.9436
172.9467
265 270 275 280 285 290mass0
100
%
1.52e12279.8496
265 270 275 280 285 290mass0
100
%
1.52e12279.8496
Composto contendo 1 átomo de RutênioComposto contendo 1 átomo de Rutênio
Composto contendo 2 átomo de RutênioComposto contendo 2 átomo de Rutênio
Evidência do número de elementos presentes na moléculaEvidência do número de elementos presentes na molécula
Medida de Massa Molecular
Ex: M = 249C20H9+ C19H7N+ C13H19N3O2+
Ex: M = 249C20H9+ 249.0700C19H7N+ 249.0580C13H19N3O2+ 249.1479
Sistemas de Baixa resolução
Sistemas de Alta resolução
MassaMassa nominalMassa de um íon de uma determinada fórmula empírica calculada através do isótopomais abundante.
Ex : M=249 C20H9+ or C19H7N+ or C13H19N3O2
+
Massa exataMassa de um íon da uma determinada fórmula empírica calculada através da massa exatado isótopo mais abaundante da cada elemento.
Ex : M=249 C20H9+ 249.070
C19H7N+ 249.0580C13H19N3O2
+ 249.1479
Faixa de massas- Limite superior e inferior de m/z observáveis por um dado analisador de massas.
Resolução
Medida da habilidade de um analisador de massas de separar íons adjacentes.
249 249.0700 249.0580 249.1479
3 compostos diferentesMesma massa nominal
Baixa Resolução
3 compostos diferentes3 massas exatas diferentes
alta resolução
C20H9+C19H7N+
C13H19N3O2+ C20H9+ C19H7N+ C13H19N3O2+
Massa Exata [C18H15P]+ m/z 262.0911
Massa exata (ppm)=106 (Mcal. – Mobs)/Mobs
“Chemical Ionization”CI
Munson and Field - 1966
Princípios Gerais
• Ionização por reação química (ex: protonação : MH+). A exotermicidade da reação controla a extensão dos processos dissociativos.
• Gases ionizantes típicos: metano, isobutano, amônia.
• Como em EI, aplica-se a moléculas de média e baixa polaridade e baixo peso molecular (~500u), voláteis e termo-estáveis: "moléculas orgânicas". Uma aplicação típica de CI ocorre para substâncias que não apresentam o íon molecular por EI.
• Adutos formados entre M e o íon reagente podem ser observados (Ex. M-NH4
+). Estes adutos podem diferenciar isômeros.
• CI é uma técnica branda de ionização, por provocar pouca ou nenhuma fragmentação da molécula ionizada.
CI – IONIZAÇÃO QUÍMICA
Ionização Química (CI).
ReaçãoÍon/molécula
50 eV+ e- e-+
térmicaCH4 + e-
70 eV+CH4 + H+CH4
CH3+
H2++CH4 CH4+ CH5
+ + CH3
CH3+ + CH4
CH4++ CH4
C2H5+
C2H3+
C3H5+
+
+
+
H2
H2
H2
H+
+CH4
CH2+
CH2+
C2H3+
Controle da Exotermicidade da Reação: Extensão de Fragmentação
Ionização Química (CI).
• Ionização Química Positiva:Metano:
CH4 + e -----> CH4+. + 2e ------> CH3
+ + H.
CH4+. + CH4 -----> CH5
+ + CH3.
CH4+. + CH4 -----> C2H5
+ + H2 + H.
Isobutano:
i-C4H10 + e -----> i-C4H10+. + 2e
i-C4H10+. + i-C4H10 ------> i-C4H9
+ + C4H9 +H2
Amônia:
NH3 + e -----> NH3+. + 2e
NH3+. + NH3 ------> NH4
+ + NH2.
NH4+ + NH3 --------->N2H7
+
• Ionização Química Positiva:Metano:
CH4 + e -----> CH4+. + 2e ------> CH3
+ + H.
CH4+. + CH4 -----> CH5
+ + CH3.
CH4+. + CH4 -----> C2H5
+ + H2 + H.
Isobutano:
i-C4H10 + e -----> i-C4H10+. + 2e
i-C4H10+. + i-C4H10 ------> i-C4H9
+ + C4H9 +H2
Amônia:
NH3 + e -----> NH3+. + 2e
NH3+. + NH3 ------> NH4
+ + NH2.
NH4+ + NH3 --------->N2H7
+
Reserpina CH4 CI
Reserpina EI 70 eV