dimension vista system

CTNIFlex® reagent cartridge

K6421

Dimension Vista® SystemDimension Vista® 500, Dimension Vista® 1000T, Dimension Vista® 1500, Dimension Vista® 3000T Systems

Issue Date 2020-08

Cardiac Troponin IIntended Use: The CTNI method is an in vitro diagnostic test for the quantitative measurement of cardiac troponin I in human serum and plasma on the Dimension Vista® System. Measurements of cardiac troponin I are used to aid in the diagnosis of acute myocardial infarction (AMI) and in the risk stratification of patients with acute coronary syndromes with respect to their relative risk of mortality.

Summary: Troponin is the contractile regulatory protein complex of striated muscle. It is found periodically along the thin filament of the myofibrils, in conjunction with the protein tropomyosin. The troponin complex consists of three distinct polypeptide components: troponin-C (the calcium binding element), troponin-I (the actinomyosin ATPase inhibitory element), and troponin-T (the tropomyosin binding element). The complex serves to regulate the calcium dependent interaction of myosin and actin and thus plays an integral role in muscle contraction.1 Troponin-I exists in three distinct molecular forms which correspond to specific isotypes found in fast-twitch skeletal muscle, slow-twitch skeletal muscle, and heart, respectively. The skeletal isotypes are similar in molecular size approximately 20000 daltons, but exhibit an amino acid sequence heterogeneity of approximately 40%. The cardiac isotype also exhibits about a 40% sequence heterogeneity with respect to the skeletal isotypes, but also has an additional 31 residues at the amino terminus, resulting in a molecular weight of about 24000 daltons.2,3

Several reports in the literature have indicated that cardiac troponin-I is released into blood within hours of the onset of symptoms of myocardial infarction and that it remains elevated for several days post-infarction. The cumulative data from these reports indicate that troponin-I levels become abnormal 4–8 hours following onset of chest pain, peak at 12–16 hours, and remain elevated for 5–9 days following an infarction.2,3,4 Based upon these studies it appears that troponin-I is elevated over a time period which covers the diagnostic window of both CKMB and LD.5 Clinical studies also suggest an improved cardiac specificity for troponin-I compared to CKMB for detection of myocardial injury in the presence of skeletal muscle injury.6,7

Measurement of cardiac troponin-I levels provide sensitive and specific determination of myocardial injury over a wide diagnostic window. Elevations in cardiac troponin-I levels have been observed across a spectrum of acute coronary syndromes including Q-wave MI, non-Q-wave MI and unstable angina. A significantly higher incidence of mortality has been observed in patients with non-Q-wave MI and unstable angina who have detectable levels of cardiac troponin-I. This suggests that cardiac troponin-I provides a means for risk stratification of these individuals.8

Given troponin’s high myocardial specificity and sensitivity, the Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee recognizes troponin as the preferred biochemical marker for myocardial damage. The committee also recommends an imprecision level (coefficient of variation or CV) for Troponin assays of <10% at the 99th percentile of normal.9 Based on imprecision and other performance characteristics, the Dimension Vista® System CTNI method is a high sensitivity troponin I method.

Principles of Procedure: The CTNI method is a homogeneous, sandwich chemiluminescent immunoassay based on LOCI® technology. The LOCI® reagents include two synthetic bead reagents and a biotinylated anti-cardiac troponin I monoclonal antibody fragment. The first bead reagent (Sensibeads) is coated with streptavidin and contains photosensitizer dye. The second bead reagent (Chemibeads) is coated with a second anti-cardiac troponin I monoclonal antibody and contains chemiluminescent dye. Sample is incubated with Chemibeads and biotinylated antibody to form bead-cardiac troponin I-biotinylated antibody sandwiches. Sensibeads are added and bind to the biotin to form bead-pair immunocomplexes. Illumination of the complex at 680 nm generates singlet oxygen from Sensibeads which diffuses into the Chemibeads, triggering a chemiluminescent reaction. The resulting signal is measured at 612 nm and is a direct function of the cardiac troponin I concentration in the sample.10.11,12

Reagents

Wellsa Form Ingredient Concentrationb Source

1–2 Liquid Biotinylated Antibodyc 8 µg/mL Mouse monoclonal3–4 Liquid Troponin I Chemibeadsc 190 µg/mL Mouse monoclonal7–8 Liquid Streptavidin Sensibeadc 1500 µg/mL Recombinant E. coli9–12 Liquid Assay Buffera. Wells are numbered consecutively from the wide end of the cartridge.b. Nominal value per well in a cartridge.c. Antibody titer and reagent activity may vary lot to lot.

Risk and Safety

H317P280, P272, P302 + P352, P333 + P313, P501Warning!May cause an allergic skin reaction.

Wear protective gloves/protective clothing/eye protection/face protection. Contaminated work clothing should not be allowed out of the workplace. IF ON SKIN: Wash with plenty of soap and water. If skin irritation or rash occurs: Get medical advice/attention. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations.Contains: 5-chloro-2-methyl-3(2h)-isothiazolone mixture with 2-methyl-3(2h)-isothiazolone.

Safety data sheets (MSDS/SDS) available on siemens.com/healthcare

Precautions: Used LOCI® reaction vessels contain human body fluids; handle with appropriate care to avoid skin contact or ingestion.

For in vitro diagnostic use.Reagent Preparation: All reagents are liquid and ready to use.Store at: 2–8 °CExpiration: Refer to carton for expiration date of individual unopened reagent cartridges. Sealed wells on the instrument are stable for 30 days.

Open Well Stability: 7 days for wells 1–12Specimen Collection and Handling: Recommended specimen types: serum or plasma (sodium or lithium heparin).Samples and controls stabilized with azide cannot be used.Serum or plasma samples can be collected using recommended procedures for collection of diagnostic blood specimens by venipuncture.13

Follow the manufacturer’s instructions for their specimen collection device for use and processing.15

Comparative testing of 63 contemporaneous draws of serum and lithium heparinized plasma produced the following regression line: lithium heparin plasma = 1.02 serum + 0.031. The serum CTNI concentration varied from 0.026 – 22.9 ng/mL [µg/L]. A similar study was conducted between lithium and sodium heparin which produced the following regression line: sodium heparin plasma = 0.99 lithium heparin plasma + -0.05. The lithium heparin CTNI concentration varied from 0.09 – 39.85 ng/mL [µg/L] for 50 samples.

Complete clot formation should take place before centrifugation. Serum should be physically separated from cells as soon as possible with a maximum limit of two hours from the time of collection.14, 15 Specimens should be free of particulate matter.

Samples are stable for at least 2 days when stored at 2–8 °C or for at least 8 weeks when frozen at -20 °C or below.16 Repetitive freezing and thawing of specimens should be avoided.

The purpose of specimen storage information is to provide guidance to users; however, users may validate their own procedures for storing patient samples.

Procedure

Materials Provided

CTNI Flex® reagent cartridge, Cat. No. K6421

Materials Required But Not Provided

CTNI CAL, Cat. No. KC678

CTNI SDIL, Cat. No. KD692

Quality Control Materials

Test Steps

Sampling, reagent delivery, mixing, and processing are automatically performed by the Dimension Vista® System. For details of this processing, refer to your Dimension Vista® Operator’s Guide.

Test Conditions

Sample Volume (delivered to the reaction vessel)

20 µL

Chemibead Reagent Volume 20 µLBiotinylated Antibody Reagent Volume 20 µLSensibead Reagent Volume 13 µLAssay Buffer Volume 100 µLTemperature 37.0 °CReaction Time 10 minutesWavelength 680 and 612 nmType of Measurement Chemiluminescence

CalibrationCalibration Material CTNI Calibrator, Cat. No. KC678Calibration Scheme 6 levels, n=3Units ng/mL [µg/L] d

(ng/mL x 1) = [µg/L]Typical Calibration Levels Level 1 (Calibrator A): 0 ng/mL [µg/L]

Level 2 (Calibrator B): 0.5 ng/mL [µg/L] Level 3 (Calibrator C): 4.0 ng/mL [µg/L] Level 4 (Calibrator D): 8.0 ng/mL [µg/L] Level 5 (Calibrator E): 20.0 ng/mL [µg/L] Level 6 (Calibrator F): 41.0 ng/mL [µg/L]

Calibration Frequency Every 30 days for any one lotCalibration interval may be extended based on acceptable verification of calibration.

A new calibration is required: • For each new lot of Flex® reagent cartridges• After major maintenance or service, if indicated by

quality control results• As indicated in laboratory quality control procedures• When required by government regulations

d. Système International d’Unités [SI units] are in brackets.

Quality Control

Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. At least once each day of use, analyze two levels of a Quality Control (QC) material with known cardiac troponin I concentrations. Follow your laboratory internal QC procedures if the results obtained are outside acceptable limits.

Results: The instrument calculates the concentration of cardiac troponin I in ng/mL [µg/L] using the calculation scheme described in your Dimension Vista® Operator’s Guide.

Results of this test should always be interpreted in conjunction with the patient’s medical history, clinical presentation and other findings.

Analytical Measurement Range (AMR): 0.015–40 ng/mL [µg/L]

This is the range of analyte values that can be measured directly from the specimen without any dilution or pretreatment that is not part of the usual analytical process and is equivalent to the assay range.

See shaded sections: Updated information from 2019-06 version.

• Samples with results in excess of 40 ng/mL [µg/L] should be repeated on dilution.

Manual Dilution: Dilute with CTNI Sample Diluent (Cat. No. KD692) to obtain results within reportable range. Enter dilution factor on the instrument, but no greater than 1:5. Reassay. Resulting readout is corrected for dilution.

Autodilution (AD): Autodilution requires onboard CTNI SDIL (Cat. No. KD692). The autodilute sample volume is 20 μL (dilution factor = 5) for serum/plasma to obtain results within the analytical measurement range.

• Samples with results less than 0.015 ng/mL [µg/L] will be reported as “less than 0.015 ng/mL [µg/L]” by the instrument.

Limitations of Procedure

Patient samples may contain heterophilic antibodies that could react in immunoassays to give falsely elevated or depressed results. This assay has been designed to minimize interference from heterophilic antibodies.Nevertheless, complete elimination of this interference from all patient specimens cannot be guaranteed. A test result that is inconsistent with the clinical picture and patient history should be interpreted with caution. 17,28

The instrument reporting system contains flags and comments to provide the user with information regarding instrument processing errors, instrument status information and potential errors in cardiac troponin I results. Refer to your Dimension Vista® Operator’s Guide for the meaning of report flags and comments. Any report containing flags and/or comments should be addressed according to your laboratory’s procedure manual and not reported.

Expected Results: In a study of 199 serum samples from apparently healthy individuals, the reference interval encompassing the 99th percentile for the Dimension Vista® CTNI method was as follows:

N Range encompassing the 99th Percentile199 0.00–0.045 ng/mL [µg/L]

Each laboratory should establish its own expected values for CTNI as performed on the Dimension Vista® System.

Interpretation of ResultsThe temporal evaluation of cardiac troponin-I concentration is a useful tool in the diagnosis of myocardial infarction. Serial samples from a patient with a myocardial infarction will result in the classic rise and fall in cardiac troponin I concentration observed with other markers of myocardial infarction such as CK-MB. Unlike CK-MB, cardiac troponin-I values generally remain elevated above the reference range for several (5–9) days.2,3,4 The National Academy of Clinical Biochemistry (NACB) recommends serial sampling at admission, 2–4 hours, 6–9 hours, and 12–24 hours (optional).19 Clinical studies indicate that elevated levels of cardiac troponin I are a useful indicator of myocardial injury for a range of acute coronary syndromes including unstable angina, non Q-Wave and Q-wave myocardial infarction.4,5,6,7,8 Each institution should establish its own reference interval and cutoffs to ensure proper representation of specific populations, taking into account current practice and criteria for diagnosing AMI at its institution. Other conditions which can lead to myocardial injury, such as cardiac contusion and myocarditis, have the potential to cause elevations in the circulating concentrations of proteins found in the myocardium, including cardiac troponin I. Factors such as these should be considered when interpreting results.20

Risk Stratification: Statistically significant increases in mortality have been observed as a function of increasing levels of cardiac troponin-I. In patients with acute coronary syndromes such as unstable angina or non-Q-wave myocardial infarction, cardiac troponin-I levels provide useful prognostic information and aid in early detection of such patients with an increased risk of death.8 A joint committee from the American College of Cardiology (ACC) and the American Heart Association (AHA) has defined the short-term risk of death or non-fatal MI in association with troponin levels as high risk with elevated (>0.1 ng/mL) levels, intermediate risk with slightly elevated (<0.1 ng/mL) levels, and low risk for normal levels.20

ESC/ACC Recommended Definition of AMI: A joint committee from the European Society of Cardiologists (ESC) and the American College of Cardiology (ACC) has recommended a redefinition of myocardial infarction (MI). The committee defines MI as the typical rise and gradual fall of troponin or more rapid raise and fall of CK-MB in conjunction with ischemic symptoms, pathologic ECG Q waves, ECG ST segment elevation/depression, and/or coronary artery intervention. The committee further recommends that an increased troponin level should be defined as a measurement exceeding the 99th percentile of the reference interval and that an acceptable imprecision (coefficient of variation) for measurements at the 99th percentile is <10%.9 The 99th percentile of the reference interval for the Dimension Vista® CTNI method was determined to be 0.045 ng/mL [µg/L] and the 10% CV limit was estimated to be <0.04 ng/mL [µg/L].W.H.O. Definition of AMI: The definition of AMI as described by the World Health Organization (WHO) requires satisfying two of the following criteria for confirmation of acute myocardial infarction: electrocardiogram changes consistent with infarction, temporal changes in cardiac marker levels, chest discomfort of significant duration (≥ 20 minutes).21 In a study22 performed with the Stratus® II cardiac Troponin-I assay, Troponin-I cutoffs in the range 0.6–1.5 ng/mL were found to be consistent with the WHO criteria for AMI. This was a multi-center study which included 314 patients presenting with chest pain, 128 of whom ruled-in for AMI. Satisfying the biomarker criteria for AMI in this study required a CKMB value which exceeded 5.6 ng/mL along with a temporal change of at least 3 ng/mL. Both clinical sensitivity and clinical specificity were found to be greater than 90% across this range of cutoff values when serial sampling of patients with chest pain was performed (see figure below). This study is provided for reference based on comparability of results between the Stratus® II cardiac Troponin-I method and the Dimension® RxL cardiac Troponin-I assay (Dimension® RxL = 1.10 Stratus® II–0.075; r = 0.992; n = 111; range = 0–47.9 ng/mL) and comparability of results between the Dimension® RxL cardiac Troponin-I assay and the Dimension Vista® cardiac Troponin-I assay (data provided in this product insert under Method Comparison). It is important to note that Troponin-I cutoffs in the range of 0.6–1.5 ng/mL represent a higher level of myocardial damage than the 99th percentile cutoff recommended by the European Society of Cardiology and American College of Cardiology (ESC/ACC). The ranges reported above should be used only as a guide.

90

92

94

96

98

100

0.60 0.75 0.90 1.05 1.20 1.35 1.50 1.65

Sensitivity(%)Specificity(%)

Per

cent

age

Sensitivity and Specificity as a Function of AMI cut-off

Troponin-I Cut-Off (ng/mL)


Troponin I Cutoff (ng/mL)

Perc

enta

ge


Maximum Observed Repeatability

The expected maximum observed standard deviations for repeatability (within-run precision) using n = 5 replicates at the following cardiac troponin I concentrations are:

CTNI concentration Acceptable SD Maximum

0.5 ng/mL [µg/L] 0.063 ng/mL [µg/L]8.0 ng/mL [µg/L] 0.939 ng/mL [µg/L]

A system malfunction may exist if the acceptable SD maximum is exceeded.

Specific Performance Characteristics

The following data represent typical performance for the Dimension Vista® System.

Precision23, e

MaterialMean

ng/mL[µg/L]

Standard Deviation (% CV)

Repeatability Within-Lab

Serum Pool 0.123 0.005 (4.2) 0.007 (5.8)Serum Pool 0.55 0.012 (2.3) 0.016 (2.9)Serum Pool 31.4 0.95 (3.0) 1.18 (3.8)Liquichek™ Cardiac Markers Control LT

Level 2 Level 3

0.28 1.41

0.016 0.021

(5.8) (1.5)

0.019 0.049

(6.6) (3.4)

e. CLSI/NCCLS EP5-A2 was used. During each day of testing, two separate runs with two test samples for each test material were analyzed for 20 days. Liquichek™ Cardiac Markers Control LT is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Irvine, CA 92618.

Method Comparison24

Regression Statisticsf

Comparative Method SlopeIntercept

ng/mL [µg/L] Correlation Coefficient n

Dimension® RxL system 1.0150 -0.003 0.993 197g

f. CLSI/NCCLS EP9-A2 was used. The method used to fit the linear regression line was ordinary least squares.g. The range of 197 values in the correlation study was 0.0–35.72 ng/mL [µg/L].

Specificity

Hemolysis, Icterus, Lipemia (HIL) Interference

The CTNI method was evaluated for interference according to CLSI/NCCLS EP7-A2.25 Bias is the difference in the results between the control sample (without the interferent) and the test sample (contains the interferent) expressed in percent. Bias exceeding 10% is considered interference.

Substance Tested Substance ConcentrationCTNI

ng/mL [µg/L] Bias* %

Hemoglobin (hemolysate) Hemoglobin (monomer) 500 mg/dL [0.31 mmol/L] 0.945 <10

Bilirubin (unconjugated) 40 mg/dL [684 µmol/L] 0.907 <10Bilirubin (conjugated) 40 mg/dL [684 µmol/L] 0.879 <10Lipemia (Intralipid®) Lipemia cholesterol

3000 mg/dL [33.9 mmol/L] 500 mg/dL [5.7 mmol/L]

0.970 0.941

<10 <10

Intralipid® is a registered trademark of Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Germany.* Analyte results should not be corrected based on this bias.

Interfering Substances

The CTNI method was evaluated for interference according to CLSI/NCCLS EP7-A2.29 Bias is the difference in the results between the control sample (without the interferent) and the test sample (contains the interferent) expressed in percent. Bias exceeding 10% is considered interference.

AnalyteConcentration

Biotin Test Level (ng/mL)

50 100 250 500 1200

% Bias

0.046 ng/mL -5 -13 -31 -67 -83

1.5 ng/mL -4 -6.2 -27.8 -90.8 Below AMR

• Specimens that contain biotin at a concentration of 50 ng/mL demonstrate a less than or equal to 10% change in results. Biotin concentrations greater than this may lead to falsely depressed results for patient samples.

• The recommended adult daily dietary intake for biotin is 30 µg/day. Over the counter dietary supplements promoted for use in hair, skin and nail health may contain 5–100 mg of biotin, with recommendations to take multiple pills per day. Pharmacokinetic studies in healthy adults have shown that, in subjects ingesting 5 mg, 10 mg, and 20 mg of biotin, serum concentrations of biotin can reach up to 73 ng/mL, 141 ng/mL, and 355 ng/mL, respectively.26 Subjects who take up to 300 mg of biotin per day may have plasma biotin levels as high as 1160 ng/mL.27

Non Interfering Substances

The following substances have no significant effect (less than 10%) on the CTNI method when added to a 1.5 ng/mL [µg/L] serum pool at the concentrations indicated:

Compound Concentration SI UnitsAcetaminophen 20 mg/dL 1323 µmol/LAllopurinol 2.5 mg/dL 184 µmol/LAmikacin 15 mg/dL 256 µmol/LAmpicillin 5 mg/dL 143 µmol/LAscorbic acid 3 mg/dL 170 µmol/LAtenolol 1.0 mg/dL 37.6 µmol/LCaffeine 10 mg/dL 515 µmol/LCarbamazepine 12 mg/dL 508 µmol/LCaptopril 5.0 mg/dL 230 µmol/LCholesterol 500 mg/dL 12.9 mmol/LChloramphenicol 25 mg/dL 774 µmol/LChlordiazepoxide 2 mg/dL 67 µmol/LChlorpromazine 5 mg/dL 157 µmol/L

Siemens Healthcare Diagnostics Inc.500 GBC DriveNewark, DE 19714 USA

Cimetidine 10 mg/dL 396 µmol/LCinnarizine 3.0 mg/dL 81.4 µmol/LCreatinine 30 mg/dL 2652 µmol/LCyclosporine A 4000 ng/mL 3.3 µmol/LDextran 75 2500 mg/dL 333 µmol/LDiazepam 2 mg/dL 70 µmol/LDigoxin 5 ng/mL 6.4 nmol/LDopamine 45 mg/dL 2.4 mmol/LErythromycin 20 mg/dL 272 µmol/LEthanol 350 mg/dL 76 mmol/LEthosuximide 30 mg/dL 2125 µmol/LFurosemide 2 mg/dL 61 µmol/LGentamicin 12 mg/dL 251 µmol/LSodium heparin 8 U/mL 8000 IU/LIbuprofen 40 mg/dL 1939 µmol/LIsosorbide dinitrate 6.0 mg/dL 254 µmol/LLidocaine 6 mg/dL 256 µmol/LLipemia (triglyceride) 3000 mg/dL 33.9 mmol/LLithium 2.3 mg/dL 3.3 mmol/LL-thyroxine 60 µg/dL 0.77 µmol/LMethyldopa 2.5 mg/dL 118 µmol/LNicotine 2 mg/dL 123 µmol/Nifedipine 6.0 mg/dL 173 µmol/LPenicillin G 25 U/mL 25000 U/LPentobarbital 10 mg/dL 442 µmol/LPhenobarbital 15 mg/dL 646 µmol/LPhenytoin 10 mg/dL 396 µmol/LPrimidone 10 mg/dL 458 µmol/LPropoxyphene 0.4 mg/dL 12 µmol/LPropranolol 0.15 mg/dL 5.8 µmol/LProtein, human albumin 6 g/dL 60 g/LProtein, human IgG 3.5 g/dL 35 g/LSalicylic acid 50 mg/dL 3.6 mmol/LTheophylline 25 mg/dL 1388 µmol/LUrea 500 mg/dL 83.3 mmol/LUric acid 20 mg/dL 1.2 mmol/LValproic acid 50 mg/dL 3467 µmol/LVerapamil 16 mg/dL 351.6 µmol/L

Hook EffectOne step sandwich immunoassays are susceptible to a high-dose “hook effect”, where an excess of antigen prevents simultaneous binding of the capture and detection antibodies to a single analyte molecule.18 The CTNI method shows no hook effect up to 1000 ng/mL [µg/L].

Cross-reactivity

CTNI method is specific for cardiac troponin I. Cardiac troponin I was evaluated for cross-reactivity in the presence of other myofibrillar proteins found in human muscle. The percent cross-reactivity was calculated as follows:

measured analyte – control analyte (ng/mL[µg/L]) % cross reactivity = –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 metabolite added

Crossreactant Concentration SI Units Percent Crossreactivity

Troponin-C (cardiac) 1000 ng/mL 1000 µg/L NoneTroponin-T (cardiac human) 1000 ng/mL 1000 µg/L 0.06Troponin-I (skeletal human) 1000 ng/mL 1000 µg/L 0.12Troponin-I (skeletal human) 280 ng/mL 280 µg/L 0.13

Recovery:

Serum samples containing elevated and low levels of CTNI were tested using different mixing volumes. The observed values were then compared to the expected values for each mixture.

Sample Mixture CTNI Serum CTNI Serum 1:1 Mixture CTNI PercentSample 1 Sample 2 Expected Obtained Recovery

A 16.03 0.001 8.02 7.95 99.2B 11.275 0.845 6.1 6.00 99.1

Analytical Sensitivity: 0.015 ng/mL [µg/L]

This sensitivity is defined as the concentration that corresponds to the mean value (n=20) plus two standard deviations of the Low level A (0 ng/mL [µg/L]) CTNI Calibrator (or sample devoid of CTNI).

Limit of Quantitation (Functional Sensitivity): Evaluation of the 10% CV limit

Functional sensitivity was evaluated by determining total imprecision of natural TnI serum samples. Total imprecision was measured by a two replicate per day, twenty day ANOVA study. The limit of quantitation (functional sensitivity /imprecision profile) for the Dimension Vista® troponin method corresponds to a coefficient of variation (CV) of 10% at a troponin I concentration of <0.04 ng/mL [µg/L]. Imprecision as demonstrated in the Imprecision Study graph is indicative of a high sensitivity method.

Symbols Key: See Adjacent Panel.

Bibliography: See Adjacent Panel.

Dimension Vista®, Dimension®, LOCI®, Flex® and Stratus® are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics.

©2008 Siemens Healthcare Diagnostics All rights reserved.

2020

-08

J P

N 10

8675

92 -

US

CTNI Functional Sensitivity

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

0.000 0.030 0.060 0.090 0.120 0.150CTNI Recovey ng/mL [µg/L]

% Total CV

10% CV

% T

otal

CV

CTNI Recovery ng/mL [µg/L]



K6421

Dimension Vista® System

Ausgabedatum 2020-08

Kardiales Troponin IVerwendungszweck: Die CTNI-Methode ist ein in-vitro-Diagnosticum für die quantitative Bestimmung von kardialem Troponin I in Humanserum und-plasma auf dem System Dimension Vista®. Die Messung von kardialem Troponin I unterstützt die Diagnose eines akuten Myokardinfarkts (AMI) und die Risikoeinschätzung von Patienten mit akuten Koronarsyndromen im Hinblick auf das relative Sterblichkeitsrisiko.

Zusammenfassung: Troponin ist der Proteinkomplex, der in der quergestreiften Muskulatur die kontraktile Funktion reguliert. Es findet sich regelmäßig entlang der dünnen Filamente der Myofibrillen, in Verbindung mit dem Protein Tropomyosin. Der Troponinkomplex besteht aus drei verschiedenen Polypeptid-Komponenten: Troponin C (die Calcium bindende Einheit), Troponin I (die die Aktin-Myosin-Wechselwirkung hemmende Einheit) und Troponin T (die Tropomyosin bindende Einheit). Der Komplex dient der Regulation der Calcium-abhängigen Interaktion von Myosin und Aktin und spielt daher eine entscheidende Rolle bei der Muskelkontraktion.1 Troponin I existiert in drei verschiedenen molekularen Formen, die spezifischen Isotypen in der schnell kontrahierenden Skelettmuskulatur, in der langsam kontrahierenden Skelettmuskulatur und im Herzen entsprechen. Die Skelettmuskel-Isotypen ähneln sich in der Molekülgröße (ca. 20 000 Dalton), weisen jedoch eine Heterogenität in der Aminosäurensequenz von ungefähr 40 % auf. Der Herzmuskel-Isotyp zeigt ebenfalls eine 40 %-ige Sequenz-Heterogenität im Vergleich zu den Skelettmuskel-Isotypen, verfügt aber außerdem über zusätzliche 31 Reste am Aminoende, was zu einem Molekulargewicht von ca. 24000 Dalton führt.2,3

In der Literatur wurde mehrfach berichtet, dass kardiales Troponin I innerhalb weniger Stunden nach Auftreten von Symptomen eines Myokardinfarkts in den Blutkreislauf gelangt und dass es noch einige Tage nach dem Infarkt auf einem erhöhten Spiegel bleibt. Die kumulativen Daten aus diesen Berichten weisen darauf hin, dass es 4–8 Stunden nach dem Auftreten des Brustschmerzes zu abnormalen Troponin I-Spiegeln und nach 12–16 Stunden zu Spitzenwerten kommt und die Werte noch 5–9 Tage nach einem Infarkt erhöht sind.2,3,4 Dadurch scheinen sich erhöhte Werte für Troponin I in einem Zeitraum, der auch das diagnostische Fenster von CKMB und LD abdeckt, zu ergeben.5 Klinische Studien legen zudem nahe, dass die Herzmuskel-Spezifität für Troponin I für die Entdeckung von Schädigungen des Herzens bei gleichzeitig vorliegender Skelettmuskel-Schädigung besser ist als die von CKMB.6,7

Die Messung der Werte von kardialem Troponin I bietet eine empfindliche und spezifische Bestimmung einer Herzmuskelschädigung über ein großes diagnostisches Fenster. Erhöhte Werte an kardialem Troponin I wurden bei einigen akuten Koronarsyndromen, z. B. MI mit Q-Zacke, MI ohne Q-Zacke und instabiler Angina, beobachtet. Eine erheblich höhere Sterblichkeits-Inzidenz wurde beobachtet bei Patienten mit MI ohne Q-Zacke und instabiler Angina, bei denen messbare Spiegel von kardialem Troponin I vorliegen. Dies lässt darauf schließen, dass die Bestimmung von kardialem Troponin I ein Mittel zur Risikoabschätzung bei diesen Personen darstellt.8

Aufgrund der hohen Herzmuskel-Spezifität von Troponin erkennt die Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee Troponin als bevorzugten biochemischen Marker für Schädigungen des Herzmuskels an. Das Komitee empfiehlt außerdem einen Ungenauigkeitsgrad (Variationskoeffizient, VK) für Troponintests von ≤10 % beim 99. Perzentil des Referenzbereichs.9 Aufgrund der Ungenauigkeit und anderer Funktionsmerkmale gilt die CTNI-Methode auf dem Dimension Vista® System als hochempfindliche Troponin-I-Methode.

Grundlagen des Verfahrens: Die CTNI-Methode ist ein homogener, Sandwich-Chemilumineszenz-Immunoassay, der auf der LOCI®-Technologie beruht. Zu den LOCI®-Reagenzien gehören zwei synthetischen-Bead-Reagenzien und ein biotinyliertes monoklonales Anti-kardiales Troponin I-Antikörperfragment. Das erste Bead-Reagenz (Sensibeads) ist mit Streptavidin beschichtet und enthält Photosensitizer-Farbstoff. Das zweite Bead-Reagenz (Chemibeads) ist mit einem zweiten monoklonalen Anti-kardialem Troponin I-Antikörper beschichtet und enthält Chemilumineszenz-Farbstoff. Die Probe wird mit Chemibeads und biotinylierten Antikörpern inkubiert, sodass sich Bead-kardiale biotinylierte Troponin I-Antikörper-Sandwiches bilden. Danach folgt die Zugabe der Sensibeads. Diese binden sich an das Biotin und bilden Immunkomplexe aus Bead-Paaren. Durch die Beleuchtung des Komplexes mit einer Wellenlänge von 680 nm wird Singulett-Sauerstoff in den Sensibeads erzeugt, der in die Chemibeads diffundiert und eine Chemilumineszenzreaktion auslöst. Das daraus resultierende Signal wird bei 612 nm gemessen und stellt eine direkte Funktion der kardialen Troponin I-Konzentration in der Probe dar.10.11,12

Reagenzien

Zellena Form Bestandteil Konzentrationb Quelle

1–2 Flüssig Biotinylierter Antikörperc 8 µg/ml Maus, monoklonal3–4 Flüssig Troponin I-Chemibeadsc 190 µg/ml Maus, monoklonal7–8 Flüssig Streptavidin-Sensibeadc 1500 µg/ml Rekombinante E. coli9–12 Flüssig Testpuffera. Die Zellen sind vom breiten Ende der Kassette aus durchgehend nummeriert.b. Nominalwert pro Zelle in einer Kassette.c. Der Antikörpertiter und die Reagenzaktivität können von Charge zu Charge variieren.

Gefahrenhinweise und Sicherheitssätze

H317P280, P272, P302 + P352, P333 + P313, P501Warnung!Kann allergische Hautreaktionen verursachen.

Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. Kontaminierte Arbeitskleidung nicht außerhalb des Arbeitsplatzes tragen. BEI KONTAKT MIT DER HAUT: Mit viel Wasser und Seife waschen. Bei Hautreizung oder -ausschlag: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen. Inhalt und Behälter sind in Übereinstimmung mit den gesetzlichen Bestimmungen zu entsorgen.Enthält: 5-chloro-2-methyl-3(2h)-isothiazolone mixture with 2-methyl-3(2h)-isothiazolone

Sicherheitsdatenblätter (MSDS/SDS) verfügbar auf siemens.com/healthcare

Vorsichtsmaßnahmen: Gebrauchte LOCI®-Reaktionsgefäße enthalten menschliche Körperflüssigkeiten; behandeln Sie die Gefäße mit der entsprechenden Vorsicht; vermeiden Sie Hautkontakt oder Verschlucken.Nur zur in-vitro-diagnostischen Anwendung.

Reagenzvorbereitung: Alle Reagenzien sind flüssig und gebrauchsfertig.

Lagerung bei: 2–8 °C

Verfallzeit: Verfalldatum einzelner ungeöffneter Reagenzkassetten siehe Umverpackung. Versiegelte Zellen sind im Gerät 30 Tage stabil.

Stabilität geöffneter Zellen: 7 Tage für Zellen 1–12

Probengewinnung und Probenvorbereitung: Empfohlene Probenarten: Serum oder Plasma (Natrium- oder Lithiumheparin).

Mit Azid stabilisierte Proben und Kontrollsubstanzen können nicht verwendet werden.

Serum -oder Plasmaproben kann mit den empfohlenen Verfahren zur Gewinnung von diagnostischen Blutproben durch Venenpunktion gewonnen werden.13

Befolgen Sie zur Verwendung und Verarbeitung von Proben mit dem Probenentnahmegerät die Anweisungen des jeweiligen Herstellers. 15

Vergleichstests mit 63 gleichzeitig entnommenen Serum- und Lithiumheparinplasma-Proben ergaben folgende Regressionsgerade: Lithiumheparinplasma = 1.02 Serum + 0.031. Die CTNI-Serumkonzentration lag in einem Bereich von 0.026–22.9 ng/ml [µg/l]. Eine ähnliche Studie wurde für Lithium- und Natriumheparin durchgeführt, die die folgende Regressionsgerade ergab: Natriumheparinplasma = 0.99 Lithiumheparinplasma + -0.05. Die CTNI-Konzentration in Lithiumheparinplasma lag bei 50 Proben in einem Bereich von 0.09–39.85 ng/ml [µg/l].

Vor dem Zentrifugieren sollte eine vollständige Gerinnung abgewartet werden. Serum sollte so schnell wie möglich, maximal jedoch zwei Stunden nach der Probengewinnung, physikalisch von den Zellen getrennt werden.14,15 Die Proben sollten frei von Partikeln oder Klumpen sei.

Proben sind mindestens 2 Tage haltbar, wenn sie bei 2–8 °C gelagert werden. Bei -20 °C oder darunter können die Proben mindestens 8 Wochen gelagert werden.16 Ein wiederholtes Einfrieren und Auftauen der Proben ist zu vermeiden.

Die Hinweise darüber wie die Proben aufzubewahren sind, dienen als Hilfestellung. Benutzer können Verfahren zur Aufbewahrung von Patientenproben auch selbst validieren.

TestverfahrenInhalt der Handelspackung

CTNI Flex®-Reagenzkassette, Kat.-Nr. K6421Zusätzlich benötigte Materialien

CTNI CAL, Kat.-Nr. KC678CTNI SDIL, Kat.-Nr. KD692Qualitätskontrollmaterialien

Testschritte

Probennahme, Reagenzzugabe, Mischen und Bearbeitung werden vom Dimension Vista® System automatisch durchgeführt. Genaue Informationen zu diesen Vorgängen entnehmen Sie bitte dem Dimension Vista® Bedienungshandbuch.

Testbedingungen

Probenvolumen (pipettiert in Reaktionsgefäß)

20 µl

Reagenzvolumen Chemibead 20 µlReagenzvolumen biotinylierter Antikörper 20 µlReagenzvolumen Sensibead 13 µlTest-Puffervolumen 100 µlTemperatur 37.0 °CReaktionszeit 10 MinutenWellenlänge 680 und 612 nmMessverfahren Chemilumineszenz

KalibrationKalibrationsmaterial CTNI-Kalibrator, Kat.-Nr. KC678Kalibrationsschema 6 Level, n=3Einheiten ng/ml [µg/l]d

(ng/ml x 1) =[µg/l]Typische Kalibrations-Level Level 1 (Kalibrator A): 0 ng/ml [µg/l]

Level 2 (Kalibrator B): 0.5 ng/ml [µg/l] Level 3 (Kalibrator C): 4.0 ng/ml [µg/l] Level 4 (Kalibrator D): 8.0 ng/ml [µg/l] Level 5 (Kalibrator E): 20.0 ng/ml [µg/l] Level 6 (Kalibrator F): 41.0 ng/ml [µg/l]

Kalibrationshäufigkeit Alle 30 Tage für jede ChargeBasierend auf der Überprüfung einer akzeptierten Kalibration kann das Kalibrationsintervall ausgedehnt werden.

Eine neue Kalibration ist erforderlich: • Für jede neue Charge von Flex®-Reagenzkassetten• Nach größeren Wartungs- oder Servicemaßnahmen, nach

Maßgabe der Kontrollergebnisse• Nach Maßgabe der Qualitätskontrollverfahren des Labors• Nach Maßgabe behördlicher Vorschriften

d. SI-Einheiten sind in Klammern angegeben

Siehe schraffierte Abschnitte: Aktualisierte Informationen gegenüber der Version 2019-06.

kardialen Troponin I-Assay vergleichbar sind (entsprechende Daten finden Sie in dieser Produktbeilage unter “Methodenvergleich”) Sie sollten unbedingt beachten, dass die Troponin I-Cutoffs im Bereich 0.6–1.5 ng/ml eine stärkere Schädigung des Herzmuskels bedeuten als die im 99. Perzentils liegenden Cutoff-Werte, die von der European Society of Cardiology (ESC) und dem American College of Cardiology (ACC) empfohlen werden. Die hier genannten Bereiche sollten nur als Anhaltspunkt dienen.

Maximal beobachtete Reproduzierbarkeit

Die erwarteten Werte für die maximal beobachteten Standardabweichungen für die Reproduzierbarkeit (Präzision in der Serie) mit n=5 Replikaten ei den folgenden Konzentrationen von kardialem Troponin I betragen:

CTNI-Konzentration Maximal akzeptable SA

0.5 ng/ml [µg/l] 0.063 ng/ml [µg/l]8.0 ng/ml [µg/l] 0.939 ng/ml [µg/l]

Wenn die maximal akzeptable Standardabweichung überschritten wird, kann eine Systemfehlfunktion vorliegen.

Spezifische Leistungscharakteristika

Die folgenden Daten stellen eine Normalfunktion des Systems Dimension Vista® dar.

Präzision23, e

MaterialMittelwert

ng/ml [µg/l]

Standardabweichung (% VK)

Reproduzierbarkeit Intra-Labor

Serumpool 0.123 0.005 (4.2) 0.007 (5.8)Serumpool 0.55 0.012 (2.3) 0.016 (2.9)Serumpool 31.4 0.95 (3.0) 1.18 (3.8)Liquichek™ Cardiac Markers Control LT

Level 2 Level 3

0.28 1.41

0.016 0.021

(5.8) (1.5)

0.019 0.049

(6.6) (3.4)

e. CLSI/NCCLS EP5-A2 wurde angewandt. Es wurden 20 Tage lang jeden Tag zwei separate Durchläufe mit zwei Proben für jedes Probenmaterial analysiert. Liquichek™ Cardiac Markers Control LT ist eine Marke der Firma Bio-Rad Laboratories, Irvine, CA 92618, USA.

Methodenvergleich24

Regressionsstatistikf

Vergleichsmethode SteigungAchsenabschnitt

ng/ml [µg/l] Korrelationskoeffizient n

Dimension® RxL system 1.0150 -0.003 0.993 197g

f. CLSI/NCCLS EP9-A2 wurde angewandt. Die lineare Regressionsgerade wurde mit einer einfachen Kleinste-Quadrate-Methode angepasst.

g. Die zur Korrelationsstudie verwendeten 197 Werte lagen zwischen 0.0 und 35.72 ng/ml [µg/l].

Spezifität

HIL-Interferenz (Hämolyse, Ikterus, Lipämie)

Die CTNI-Methode wurde nach CLSI/NCCLS EP7-A2 auf mögliche Interferenz evaluiert.25 Der systematische Fehler ist die Abweichung zwischen den Ergebnissen der Kontrollprobe (ohne Störsubstanz) und der Testprobe (mit Störsubstanz), ausgedrückt in Prozent. Eine Abweichung von über 10 % wird als Interferenz bewertet.

Getestete Substanz Substanz konzentrationcTnI-Konzentration

ng/ml [µg/l] Abweichung* %

Hämoglobin (Hämolysat) Hämoglobin (Monomer) 500 mg/dl [0.31 mmol/l] 0.945 <10

Bilirubin (unkonjugiert) 40 mg/dl [684 µmol/l] 0.907 <10Bilirubin (konjugiert) 40 mg/dl [684 µmol/l] 0.879 <10Lipämie (Intralipid®) Lipämie Cholesterin

3000 mg/dl [33.9 mmol/l] 500 mg/dl [5.7 mmol/l]

0.970 0.941

<10 <10

Intralipid® ist eine eingetragene Marke der Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Deutschland.* Ermittelte Analytkonzentrationen sollten nicht anhand dieser Abweichung korrigiert werden.

Qualitätskontrolle

Richten Sie sich bei der Häufigkeit der Qualitätskontrollen nach behördlichen Vorschriften oder den Zulassungsbestimmungen. Analysieren Sie mindestens einmal im täglichen Gebrauch zwei Level eines Qualitätskontrollmaterials (QC-Materials) mit bekannten Konzentrationen von kardialem Troponin I. Wenn die ermittelten Ergebnisse außerhalb des akzeptablen Bereichs liegen, befolgen Sie die laborinternen QC-Bestimmungen.

Ergebnisse: Das Gerät berechnet die Konzentration von kardialem Troponin I in ng/ml [µg/l] nach dem Berechnungsschema, das im Dimension Vista® Bedienungshandbuch dargestellt ist.

Resultate dieses Tests sollten stets in Verbindung mit der Vorgeschichte des Patienten, dem klinischen Bild und anderen Untersuchungsergebnissen interpretiert werden.

Analytischer Messbereich (AMR): 0.015–40 ng/ml [µg/l]

Dies ist der Bereich von Analytwerten, die in der Probe direkt ermittelt werden können, ohne dass eine Verdünnung oder eine Vorbehandlung erfolgen muss, die nicht Teil des gewöhnlichen Analysevorgangs ist. Dieser Bereich entspricht dem Nachweisbereich.

• Proben mit Ergebnissen von über 40 ng/ml [µg/l] sollten verdünnt und erneut analysiert werden.

Manuelle Verdünnung: Verdünnen Sie die Probe mit CTNI-Probenverdünnungslösung (Kat.-Nr. KD692), um Ergebnisse innerhalb des Nachweisbereichs zu erhalten. Geben Sie am Gerät den Verdünnungsfaktor (maximal 1:5) ein und wiederholen Sie den Test. In der Ergebnisausgabe wird die Verdünnung berücksichtigt.

Automatische Verdünnung (AD): Für die automatische Verdünnung ist CTNI SDIL (Art.-Nr. KD692) im System erforderlich. Das automatische Probenverdünnungsvolumen beträgt 20 µl (Verdünnungsfaktor = 5) für Serum/Plasma, um Ergebnisse innerhalb des Messbereichs zu erhalten.

• Ergebnisse kleiner 0.015 ng/ml [µg/l] werden vom Gerät als „kleiner 0.015 ng/ml [µg/l]“ ausgegeben.

Grenzen des Verfahrens

Patientenproben können heterophile Antikörper enthalten, die in Immunoassays zu falsch erhöhten oder falsch erniedrigten Ergebnissen führen können. Dieser Test wurde so entwickelt, dass die Einflüsse durch heterophile Antikörper auf ein Minimum reduziert werden. Jedoch kann eine vollständige Vermeidung dieser Interfernzen nicht ausgeschlossen werden. Ein Testergebnis, das nicht zum klinischen Bild und Anmnese des Patienten paßt, sollte mit Vorsicht interpretiert werden.17,28

Das integrierte Meldesystem des Geräts verfügt über Markierungen und Kommentare, die Informationen zu Verarbeitungsfehlern des Geräts, Gerätestatusinformationen und Informationen zu möglichen Fehlern bei kardialen Troponin I-Ergebnissen enthalten. Näheres zur Bedeutung der Markierungen und Kommentare entnehmen Sie bitte dem Dimension Vista® Bedienungshandbuch. Berichte, die Markierungen und/oder Kommentare enthalten, sollten gemäß den Verfahrensanweisungen Ihres Labors behandelt und nicht weitergegeben werden.

Erwartete Ergebnisse: In einer Studie wurden 199 Serumproben von anscheinend gesunden Personen untersucht, dabei lag der Referenzbereich unter Einschluss des 99. Perzentils für die Dimension Vista® CTNI-Methode bei folgenden Werten:

N Bereich unter Einschluss des 99. Perzentils199 0.00–0.045 ng/ml [µg/l]

Jedes Labor sollte seine eigenen Erwartungswerte für CTNI auf dem Dimension Vista® System ermitteln.

Ergebnisinterpretation

Die zeitliche Beobachtung des Spiegels des kardialen Troponins I ist ein nützliches Hilfsmittel bei der Diagnose des Myokardinfarkts. Werden bei einem Patienten mit Myokardinfarkt Proben entnommen, wird sich dasselbe klassische Bild des Anstiegs und Abfalls der gemessenen kardialen Troponin I-Konzentration ergeben wie bei anderen Myokardinfarkt-Markern, z. B. CK-MB. Im Gegensatz zu CK-MB bleiben die Werte des kardialen Troponin I im Allgemeinen mehrere (5–9) Tage lang über den Referenzbereich hinaus erhöht.2,3,4 Die National Academy of Clinical Biochemistry (NACB) empfiehlt eine Serie von Proben bei Einlieferung, nach 2–4 Stunden, nach 6–9 Stunden und nach 12–24 Stunden (optional).19 Klinische Studien weisen darauf hin, dass erhöhte kardiale Troponin I-Werte ein wichtiger Indikator für Herzmuskelschäden sein können, wie sie bei einer Vielzahl an akuten Koronarsyndromen auftreten, z. B. instabiler Angina, Myokardinfarkt ohne und mit Q-Zack.4,5,6,7,8 Jede Einrichtung sollte ihren eigenen Referenzbereich und ihre eigenen Cutoffs festlegen, um eine korrekte Repräsentation bestimmter Populationen zu gewährleisten, unter Berücksichtigung der in der Einrichtung praktizierten aktuellen AMI-Diagnosemethoden und -kriterien. Auch andere Faktoren, die zu Schädigungen des Herzmuskels führen können, wie Herzkontusion und Myokarditis, können die Konzentrationen von im Myokard auftretenden Proteinen im Blutkreislauf erhöhen, auch von kardialem Troponin-I. Solche Faktoren sollten bei der Interpretation der Ergebnisse berücksichtigt werden.20

Risikostratifikation: In Abhängigkeit von der Konzentration des kardialen Troponin I sind statistisch signifikante Anstiege in der Sterblichkeit beobachtet worden. Bei Patienten mit akuten koronaren Syndromen wie instabile Angina oder Myokardinfarkt ohne Q-Zacke, bieten die Werte des kardialen Troponins I nützliche prognostische Daten und Hilfe bei der frühzeitigen Erkennung derjenigen Patienten mit erhöhtem Sterberisiko.8 Ein gemeinsames Komitee des American College of Cardiology (ACC) und der American Heart Association (AHA) hat das kurzfristige Risiko eines tödlichen oder nicht tödlichen MI bei hohen Troponinwerten (>0.1 ng/ml) als hoch, bei leicht erhöhten Werten (<0.1 ng/ml) als mittel und bei normalen Werten als gering eingestuft.20

Von ESC/ACC empfohlene Definition von AMI: Ein gemeinsames Komitee der European Society of Cardiology (ESC) und des American College of Cardiology (ACC) empfiehlt eine Neudefinition des Myokardinfarkts (MI). Danach ist MI definiert als typischer Anstieg und allmählicher Abfall des Troponinwerts und ein schnellerer Anstieg und Abfall des CK-MB-Werts zusammen mit ischämischen Symptomen, pathologischen Q-Zacken im EKG, Hebung/Senkung der ST-Strecke im EKG und/oder koronararterieller Intervention. Das Komitee empfiehlt außerdem, dass eine erhöhte Troponinkonzentration definiert werden sollte als eine Messung, die über dem 99. Perzentil des Referenzintervalls liegt, und dass eine akzeptable Ungenauigkeit (Variationskoeffizient) für Messungen beim 99. Perzentil bei <10 % liegt.9 Das 99. Perzentil des Referenzintervalls für die Dimension Vista® CTNI-Methode wurde auf 0.045 ng/ml [µg/l] festgelegt und die 10 %-Grenze für VK wurde auf <0.04 ng/ml [µg/l] geschätzt.

WHO Definition von AMI: Laut Definition durch die Weltgesundheitsorganisation (WHO) kann ein akuter Myokardinfarkt (AMI) bestätigt werden, wenn zwei der folgenden Kriterien vorliegen: infarkttypische EKG-Veränderungen, zeitliche Änderungen in den Herzenzymkonzentrationen, Brustbeschwerden von erheblicher Dauer (≥ 20 Minuten)21. In einer Studie,22 die mit dem Stratus® II kardialen Troponin I-Assay durchgeführt wurde, stimmten die Troponin I-Cutoffs im Bereich 0.6–1.5 ng/ml mit WHO-Kriterien für AMI überein. Diese Studie wurde an mehreren Standorten durchgeführt und umfasste 314 Patienten, die mit Brustbeschwerden eingeliefert wurden; 128 von diesen Patienten wurden mit einem AMI diagnostiziert. Um die Biomarker-Kriterien eines AMIs für diese Studie zu erfüllen, musste der CKMB-Wert 5.6 ng/ml überschreiten und eine zeitliche Änderung von mindestens 3 ng/ml vorliegen. Sowohl die klinische Sensitivität als auch die klinische Spezifität waren größer als 90 % über den gesamten Bereich von Cutoff-Werten bei Entnahme mehrerer aufeinander folgender Proben pro Patient mit Brustbeschwerden (siehe nachfolgende Abbildung). Diese Studíe wird zu Referenzzwecken angeführt. Als Voraussetzung gilt, dass die Ergebnisse der Stratus® II kardialen Troponin I-Methode mit dem Dimension® RxL kardialen Troponin I-Assay (Dimension® RxL = 1.10 Stratus® II–0.075; r = 0.992 ; n = 111; Bereich = 0–47.9 ng/ml) bzw. des Dimension® RxL kardialen Troponin I-Assays mit dem Dimension Vista®

90

92

94

96

98

100

0.60 0.75 0.90 1.05 1.20 1.35 1.50 1.65


Per

cent

age



Sensitivität und Spezifität Funktion des AMI-Cutoffs

Proz

ent

Sensitiviät(%)Spezifität(%)

Troponin I Cutoff (ng/ml)


Hook-Effekt

Ein-Schritt-Sandwich-Immunoassays sind gegenüber einem „Hook-Effekt“ bei hohen Antigen-Konzentrationen anfällig, wobei ein Antigen-Überschuss die simultane Bindung der Bindungs- und Markierungsantikörper an ein einziges Analytmolekül verhindert.18 Die CTNI-Methode zeigt bei Werten bis zu 1000 ng/ml [µg/l] keinen „Hook-Effekt“.

Kreuzreaktionen

Die CTNI-Methode ist spezifisch für kardiales Troponin I. Kardiales Troponin I wurde auf Kreuzreaktivität bei Vorhandensein anderer myofibrillärer Proteine im menschlichen Muskelgewebe getestet. Die prozentuale Kreuzreaktivität wurde wie folgt berechnet:

Gemessener Analyt – Kontroll-Analyt (ng/ml[µg/l]) % Kreuz-reaktivität = ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 hinzugefügter Metabolit

Kreuzreagenz Konzentration SI-Einheiten Prozent KreuzreaktivitätTroponin C (kardial) 1000 ng/ml 1000 µg/l KeineTroponin T (kardial human) 1000 ng/ml 1000 µg/l 0.06Troponin I (Human-Skelett) 1000 ng/ml 1000 µg/l 0.12Troponin I (Human-Skelett) 280 ng/ml 280 µg/l 0.13

Wiederfindung:

Serumproben mit erhöhten und niedrigen CTNI-Konzentrationen wurden in unterschiedlichen Volumenmischungen getestet. Die gemessenen Werte wurden für jede Mischung mit den Erwartungswerten verglichen.

Probenmischung CTNI-Serum CTNI-Serum 1:1 Mixture CTNI-Probe 1 Probe 2 erwartet: erhalten Wiederfindung in %

A 16.03 0.001 8.02 7.95 99.2B 11.275 0.845 6.1 6.00 99.1

Analytische Sensitivität: 0.015 ng/ml [µg/l]

Diese Sensitivität wird als die Konzentration definiert, die dem Mittelwert (n = 20) plus zwei Standardabweichungen über dem Level A (0 ng/ml [µg/l]) des CTNI-Kalibrators (oder einer Probe ohne CTNI) entspricht.

Quantifizierungsgrenze (funktionale Sensitivität): Evaluierung der 10 %-VK-Grenze

Die funktionale Sensitivität wurde durch die Ermittlung der Gesamtungenauigkeit der natürlichen TnI-Serumproben ausgewertet. Die Gesamtungenauigkeit wurde mittels einer ANOVA-Studie mit zwei Replikaten pro Tag an 20 Tagen gemessen. Die Quantifizierungsgrenze (funktionale Sensitivität/Ungenauigkeitsprofil) bei der Dimension Vista®-Troponin-Methode entspricht einem Variationskoeffizienten (VK) von 10 % bei einer Troponin I-Konzentration von <0.04 ng/ml [µg/l]. Die in der Grafik der Ungenauigkeitsstudie wiedergegebenen Werte stehen für eine Hochsensitivitäts-Methode.

Symbolschlüssel: Siehe Verzeichnis im Anhang.

Literatur: Siehe Verzeichnis im Anhang.

Dimension Vista®, Dimension®, LOCI®, Flex® und Stratus® sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics.

©2008 Siemens Healthcare Diagnostics Alle Rechte vorbehalten.

Störsubstanzen

Der CTNI-Test wurde nach CLSI/NCCLS EP7-A2 auf mögliche Interferenz evaluiert.29 Die Abweichung berechnet sich aus dem Werteunterschied in Prozent zwischen der Kontrollprobe (ohne Störsubstanz) und der Testprobe (mit Störsubstanz). Eine Abweichung von mehr als 10 % wird als Interferenz bezeichnet.

Analyt-Konzentration

Biotin-Teststufe (ng/ml)

50 100 250 500 1200

% Abweichung

0.046 ng/ml -5 -13 -31 -67 -83

1.5 ng/ml -4 -6.2 -27.8 -90.8 Unter AMR

• Proben, die Biotin in einer Konzentration von 250 ng/ml enthalten, zeigen eine Veränderung der Ergebnisse von kleiner oder gleich 10 %. Höhere Biotinkonzentrationen können zu falsch niedrigen Ergebnissen für Patientenproben führen.

• Der empfohlene Referenzwert für die Aufnahme von Biotin für Erwachsene beträgt 30 µg/Tag. Rezeptfreie Nahrungsergänzungsmittel, die für gesunde Haare, Haut und Nägel vermarktet werden, können 5–100 mg Biotin enthalten, wobei eine Einnahmeempfehlung von mehreren Tabletten pro Tag besteht. Pharmakokinetische Studien mit gesunden Erwachsenen haben gezeigt, dass die Einnahme von 5 mg, 10 mg und 20 mg zu Biotin-Serumkonzentrationen von bis zu 73 ng/ml, 141 ng/ml und 355 ng/ml führen kann.26 Studienteilnehmer, die bis zu 300 mg Biotin pro Tag einnehmen, können einen Biotin-Plasmaspiegel von 1160 ng/ml erreichen.27

Nicht störende Substanzen

Die folgenden Substanzen haben keine signifikante Auswirkung (weniger als 10 %), wenn sie in den genannten Konzentrationen zu Proben mit ungefähr 1.5 ng/ml [µg/l] CTNI hinzugefügt werden.

Verbindung Testkonzentration SI-EinheitenAcetaminophen 20 mg/dl 1323 µmol/lAllopurinol 2.5 mg/dl 184 µmol/lAmikacin 15 mg/dl 256 µmol/lAmpicillin 5 mg/dl 143 µmol/lAscorbinsäure 3 mg/dl 170 µmol/lAtenolol 1.0 mg/dl 37.6 µmol/lKoffein 10 mg/dl 515 µmol/lCarbamazepin 12 mg/dl 508 µmol/lCaptopril 5.0 mg/dl 230 µmol/lCholesterin 500 mg/dl 12.9 mmol/lChloramphenicol 25 mg/dl 774 µmol/lChlordiazepoxid 2 mg/dl 67 µmol/lChlorpromazin 5 mg/dl 157 µmol/lCimetidin 10 mg/dl 396 µmol/lCinnarizin 3.0 mg/dl 81.4 µmol/lKreatinin 30 mg/dl 2652 µmol/lCyclosporin A 4000 ng/ml 3.3 µmol/lDextran 75 2500 mg/dl 333 µmol/lDiazepam 2 mg/dl 70 µmol/lDigoxin 5 ng/ml 6.4 nmol/lDopamin 45 mg/dl 2.4 mmol/lErythromycin 20 mg/dl 272 µmol/lEthanol 350 mg/dl 76 mmol/lEthosuximid 30 mg/dl 2125 µmol/lFurosemid 2 mg/dl 61 µmol/lGentamicin 12 mg/dl 251 µmol/lNatriumheparin 8 U/ml 8000 IU/lIbuprofen 40 mg/dl 1939 µmol/lIsosorbid-Dinitrat 6.0 mg/dl 254 µmol/lLidocain 6 mg/dl 256 µmol/lLipämie (Triglyceride) 3000 mg/dl 33.9 mmol/lLithium 2.3 mg/dl 3.3 mmol/lL-Thyroxin 60 µg/ml 0.77 µmol/lMethyldopa 2.5 mg/dl 118 µmol/lNikotin 2 mg/dl 123 µmol/lNifedipin 6.0 mg/dl 173 µmol/lPenicillin G 25 U/ml 25000 U/lPentobarbital 10 mg/dl 442 µmol/lPhenobarbital 15 mg/dl 646 µmol/lPhenytoin 10 mg/dl 396 µmol/lPrimidon 10 mg/dl 458 µmol/lPropoxyphen 0.4 mg/dl 12 µmol/lPropranolol 0.15 mg/dl 5.8 µmol/lProtein, humanes Albumin 6 g/dl 60 g/lProtein, humanes IgG 3.5 g/dl 35 g/lSalicylsäure 50 mg/dl 3.6 mmol/lTheophyllin 25 mg/dl 1388 µmol/lHarnstoff 500 mg/dl 83.3 mmol/lHarnsäure 20 mg/dl 1.2 mmol/lValproinsäure 50 mg/dl 3467 µmol/lVerapamil 16 mg/dl 351.6 µmol/l

2020

-08

J

PN 1

0867

592

- DE

% V

K ge

sam

t

CTNI Wiederfindung ng/ml [µg/l]

CTNI funktionelle SensitivitätCTNI Functional Sensitivity

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00


% Total CV

10% CV


K6421


Date d’édition 2020-08

Troponine I cardiaqueUtilisation : La méthode CTNI est un test diagnostique in vitro utilisé pour la mesure quantitative de troponine I cardiaque dans le sérum humain et la plasma sur le Système Dimension Vista®. Les mesures de la troponine I cardiaque facilitent le diagnostic d’un infarctus aigu du myocarde et la stratification des risques des patients atteints de syndromes coronariens aigus par rapport à leur risque relatif de mortalité.

Résumé : La troponine est le complexe protéique qui régule la contraction des muscles striés. On le trouve périodiquement le long du filament fin des myofibrilles, en conjonction avec la tropomyosine. Le complexe troponine comprend trois polypeptides distincts : troponine C (élément de liaison du calcium), troponine I (élément inhibiteur de l’actinomyosine ATPase) et troponine T (élément de liaison de la tropomyosine). Ce complexe assure la régulation de l’interaction dépendant du calcium entre la myosine et l’actine et, par conséquent, joue un rôle à part entière dans la contraction musculaire.1 La troponine I existe sous trois formes moléculaires distinctes correspondant à des isotypes spécifiques qui se trouvent respectivement dans les muscles squelettiques à fibrillation rapide, les muscles squelettiques à fibrillation lente et le cœur. Les isotypes squelettiques sont d’un poids moléculaire similaire (20000 daltons environ), mais présentent une hétérogénéité de 40 % environ dans leur séquence d’acides aminés. L’isotype cardiaque présente par ailleurs une hétérogénéité de 40 % environ par rapport aux isotypes squelettiques, mais a également 31 résidus supplémentaires au N terminal, pour donner un poids moléculaire avoisinant 24000 daltons.2,3

Plusieurs rapports publiés indiquent que la troponine I cardiaque est libérée dans le sang dans les heures qui suivent l’apparition des symptômes d’un infarctus du myocarde et qu’elle demeure présente à un niveau élevé pendant plusieurs jours après l’infarctus. Les données cumulées de ces rapports indiquent que les niveaux de troponine I deviennent anormaux dans les 4 à 8 heures qui suivent l’apparition de la douleur thoracique, avec un niveau maximal sous 12 à 16 heures, et restent élevés pendant 5 à 9 jours après un infarctus.2,3,4 D’après ces études, le niveau de troponine I est élevé sur une période qui couvre l’intervalle de diagnostic à la fois pour CK-MB et LD.5 Des études cliniques suggèrent également une spécificité cardiaque améliorée pour la troponine I, comparativement à la CK-MB en ce qui concerne la détection de lésions du myocarde en présence de lésions musculaires squelettiques.6,7

La mesure des niveaux de troponine I cardiaque permet une détermination sensible et spécifique des lésions myocardiques sur un long intervalle diagnostique. L’élévation des niveaux de troponine I cardiaque a été observée à travers un spectre de syndromes coronariens aigus, y compris IM à onde Q, IM incomplet et angor instable. Une incidence sensiblement supérieure de mortalité a été observée chez des patients victimes d’un IM incomplet et d’un angor instable qui présentent des niveaux détectables de troponine I cardiaque. Cela suggère que la troponine I cardiaque constitue un moyen de stratification des risques de ces personnes.8

Étant donné les hautes spécificité et sensibilité myocardiques de la troponine, le Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee désigne la troponine comme marqueur biochimique préféré des lésions myocardiques. Le comité recommande également un niveau d’imprécision (coefficient de variation ou CV) de <10 % pour les dosages de la troponine au 99ème centile de la normal.9 Au vu de l’imprécision et d’autres caractéristiques de performance, la méthode CTNI du Système Dimension Vista® est une méthode ultra-sensible de dosage de la troponine I.

Principes de la méthode : La méthode CTNI est un immunodosage en chimiluminescence homogène en sandwich basé sur la technologie LOCI®. Les réactifs LOCI® incluent deux réactifs de billes en synthetique et un fragment d’anticorps anti-troponine I cardiaque monoclonal biotinylé. Le premier réactif de billes (Sensibeads) est revêtu de streptavidine et contient un colorant photosensibilisateur. Le second réactif de billes (Chemibeads) est revêtu d’un second anticorps anti-troponine I cardiaque monoclonal et contient un colorant chimiluminescent. L’échantillon est incubé avec les Chemibeads et l’anticorps biotinylé pour former des sandwiches bille-anticorps troponine I cardiaque biotinylé. Les Sensibeads sont ajoutées et se lient à la biotine pour former des immunocomplexes de billes. L’illumination du complexe à 680 nm génère de l’oxygène singlet provenant des Sensibeads qui se diffuse en Chemibeads, déclenchant ainsi une réaction chimiluminescente. Le signal résultant est mesuré à 612 nm et représente une fonction directe de la concentration en troponine I cardiaque dans l’échantillon.10.11,12

Réactifs

Puitsa Forme Composant Concentrationb Origine

1–2 Liquid Anticorps biotinyléc 8 µg/ml Monoclonal de souris3–4 Liquid Chemibeads Troponine Ic 190 µg/ml Monoclonal de souris7–8 Liquid Sensibead Streptavidinec 1500 µg/ml E. coli recombinant9–12 Liquid Tampon

a. Les puits sont numérotés dans l’ordre croissant à partir de l’extrémité large de la cartouche. b. Valeur nominale par puits dans une cartouche.c. Le titre de l’anticorps et l’activité du réactif peuvent varier d’un lot à l’autre.

Risque et sécurité

H317P280, P272, P302 + P352, P333 + P313, P501AvertissementPeut provoquer une allergie cutanée.

Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des yeux/du visage. Les vêtements de travail contaminés ne devraient pas sortir du lieu de travail. EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU: laver abondamment à l’eau et au savon. En cas d’irritation ou d’éruption cutanée: consulter un médecin. Éliminer les contenus et les contenants conformément à toutes les réglementations locales, régionales et nationales.Contient : 5-chloro-2-methyl-3(2h)-isothiazolone mixture with 2-methyl-3(2h)-isothiazolone

Les fiches de sécurité sont disponibles sur siemens.com/healthcare

Précautions : Les tubes de réaction LOCI® utilisés contiennent des fluides corporels humains ; manipuler avec soin pour éviter un contact avec la peau ou une ingestion.

Pour usage diagnostique in vitro.

Préparation des réactifs : Tous les réactifs sont liquides et prêts à l’emploi.

Conserver à : 2 à 8 °C

Péremption : Se reporter à la date d’expiration de chaque cartouche de réactifs non ouverte. Les puits scellés sur l’instrument restent stables pendant 30 jours.

Stabilité des puits ouverts : 7 jours pour les puits 1 à 12

Prélèvement et manipulation des échantillons : Types d’échantillons recommandés : Sérum ou plasma (héparine-lithium ou héparine-sodium).

Les échantillons et les contrôles stabilisés à l’azide sont inutilisables.

Les échantillons de sérum ou de plasma peuvent être prélevés selon les procédures recommandées pour les prélèvements d’échantillons sanguins pour diagnostic par ponction veineuse.13

Suivez les instructions d’utilisation et de traitement du fabricant de l’appareil de prélèvement d’échantillons. 15

Les tests comparatifs de 63 prélèvements contemporains de sérum et de plasma hépariné (lithium) ont produit la droite de régression suivante : plasma hépariné (lithium) = 1.02 sérum + 0.031. La concentration CTNI sérique varie de 0.026 – 22.9 ng/ml [µg/l]. Une étude similaire a été menée entre l’héparine de lithium et de sodium qui produit la droite de régression suivante : plasma hépariné (sodium) = 0.99 plasma hépaniné (lithium) + -0.05. La concentration CTNI héparine de lithium varie de 0.09 – 39.85 ng/ml [µg/l] pour 50 échantillons. »

La formation de caillot complète doit avoir lieu avant la centrifugation. Le sérum doit être physiquement séparé des cellules dès que possible, dans les deux heures qui suivent le prélèvement.14,15 Les échantillons doivent être dépourvus de particules.

Les échantillons sont stables pendant au moins 2 jours lorsqu’ils sont conservés entre 2 et 8 °C ou pendant au moins 8 semaines lorsqu’ils sont congelés à -20 °C.16 Éviter les congélations-décongélations répétées.

Les informations de stockage des échantillons sont destinées à servir de référence aux utilisateurs ; ceux-ci peuvent toutefois valider leurs propres procédures de conservation des échantillons de patients.

ProcédureMatériels fournis

Cartouche de réactifs Flex® CTNI, n° de réf. K6421Matériels requis mais non fournis

Calibrateur CTNI, n° de réf. KC678CTNI SDIL, n° de réf. KD692Matériels de contrôle de qualité

Étapes du dosage

L’échantillonnage, la distribution des réactifs, le mélange et le traitement sont automatiquement réalisés par le système Dimension Vista®. Pour les détails du traitement, voir le guide de l’utilisateur du système Dimension Vista®.

Conditions du dosage

Volume d’échantillon (distribué dans le tube de réaction)

20 µl

Volume de réactif Chemibead 20 µlVolume de réactif d’anticorps biotinylé 20 µlVolume de réactif Sensibead 13 µlVolume de tampon 100 µlTempérature 37.0 ºCTemps de réaction 10 minutesLongueur d’onde 680 et 612 nmType de mesure Chimiluminescence

ÉtalonnageMatériel d’étalonnage Calibrateur CTNI n° de réf. KC678Schéma d’étalonnage 6 nive, n=3Unités ng/ml [µg/l]d

(ng/ml x 1) = [µg/l]Niveaux d’étalonnage type Niveau 1 (Calibrateur A) : 0 ng/ml [µg/l]

Niveau 2 (Calibrateur B) : 0.5 ng/ml [µg/l] Niveau 3 (Calibrateur C) : 4.0 ng/ml [µg/l] Niveau 4 (Calibrateur D) : 8.0 ng/ml [µg/l] Niveau 5 (Calibrateur E) : 20.0 ng/ml [µg/l] Niveau 6 (Calibrateur F) : 41.0 ng/ml [µg/l]

Fréquence de Calibration Tous les 30 jours pour chacun des lotsL’intervalle de Calibration peut-être allongé si la vérification de la calibration est acceptable.

Un nouvel étalonnage est obligatoire : • Pour chaque nouveau lot de cartouches de réactifs Flex®

• Après une maintenance ou une réparation majeure, selon les résultats du contrôle de qualité

• Comme indiqué dans les procédures de contrôle de qualité du laboratoire

• Selon les exigences des réglementations nationales en vigueur

d. Les unités du Système international sont indiquées entre crochets.

Voir les sections ombrées : Informations mises à jour à partir de la version 2019-06.

Contrôle de qualité

Se conformer aux réglementations ou aux exigences d’accréditation gouvernementales concernant la fréquence du contrôle de qualité. Analyser au moins une fois par jour d’utilisation, deux niveaux de matériel de contrôle de qualité, avec des concentrations de troponine I cardiaque connues. Suivre les procédures de contrôle de qualité internes du laboratoire si les résultats obtenus se situent en dehors des limites de contrôle.

Résultats : L’instrument calcule la concentration de troponine I cardiaque en ng/ml [µg/l] selon les formules de calcul décrites dans le guide de l’utilisateur du système Dimension Vista®.

Les résultats de ce test doivent toujours être interprétés en tenant compte des antécédents médicaux du patient, de son motif de consultation et d’autres constatations.

Intervalle de mesure analytique (IMA) : 0.015–40 ng/ml [µg/l]

Il s’agit de l’intervalle des valeurs d’analyte pouvant être mesurées directement dans l’échantillon sans dilution, ou avec traitement préalable qui ne fait pas partie de la méthode d’analyse usuelle et est équivalent au domaine de mesure.

• Les échantillons présentant des résultats supérieurs à 40 ng/ml [µg/l] doivent être redosés après dilution.

Dilution manuelle : Diluer dans du CTNI (n° de réf. KD692) pour obtenir des résultats dans l’intervalle communicable. Entrer le facteur de dilution sur l’instrument, sans dépasser 1:5. Redoser. Le résultat lu tient compte de la dilution.

Dilution automatique (DA) : La dilution automatique requiert CTNI SDIL (n° de réf. KD692) à bord. Le volume d’échantillon pour une autodilution est de 20 µl (facteur de dilution = 5) pour le sérum et le plasma afin d’obtenir des résultats compris dans le domaine de mesure analytique.

• Les échantillons dont les résultats sont inférieurs à 0.015 ng/ml [µg/l] seront signalés par l’instrument comme ayant « moins de 0.015 ng/ml [µg/l] ».

Limites de la procédure

Les échantillons patients pourront contenir des anticorps hétérophiles susceptibles de réagir dans des immunodosages et de fausser les résultats vers le haut ou vers le bas. Ce dosage a été conçu pour minimiser l’interférence des anticorps hétérophiles. Cependant, une élimination complète de cette interférence ne peut être garantie pour tous leséchantillons de patients. Un résultat de dosage discordant avec la clinique et les antécédents du patient doit être interprété avec précaution. 17,28

Le système de communication des résultats de l’instrument utilise des indicateurs et des commentaires pour informer l’utilisateur sur les erreurs de traitement de l’instrument, l’état de l’instrument et les erreurs potentielles dans les résultats de troponine I cardiaque. Pour la signification des indicateurs et des commentaires, se reporter au guide de l’utilisateur du Dimension Vista®. Tout rapport contenant des indicateurs et/ou commentaires doit être traité conformément au mode opératoire du laboratoire et ne doit pas être communiqué.

Résultats attendus : Lors d’une étude portant sur 199 échantillons de sérum de sujets apparemment en bonne santé, l’intervalle de référence du 99ème centile pour la méthode CTNI Dimension Vista® était le suivant :

N Intervalle de référence du 99ème centile199 0.00–0.045 ng/ml [µg/l]

Chaque laboratoire doit établir ses propres valeurs attendues pour la CTNI mesurées sur le système Dimension Vista®.

Interprétation des résultats :

L’évaluation temporelle de la concentration de troponine I cardiaque est un outil utile au diagnostic de l’infarctus du myocarde. Les échantillons en série d’un patient victime d’un infarctus du myocarde produiront l’augmentation et la diminution classiques de la concentration de troponine I cardiaque observée avec d’autres marqueurs de l’infarctus du myocarde comme la CK-MB. Contrairement à la CK-MB, les valeurs de la troponine I cardiaque restent généralement au-dessus de la plage de référence pendant 5 à 9 jours.2,3,4 La National Academy of Clinical Biochemistry (NACB) recommande un prélèvement en série à l’admission, au bout de 2 à 4 heures, de 6 à 9 heures et de 12 à 24 heures (facultatif).19 Des études cliniques indiquent que des niveaux élevés de troponine I cardiaque constituent un indicateur utile de lésions du myocarde pour un ensemble de syndromes coronariens aigus, notamment un infarctus du myocarde à onde Q, un infarctus du myocarde incomplet ou un angor instable.4,5,6,7,8 Chaque établissement doit définir ses propres intervalle de référence et seuils pour garantir la représentation correcte de populations spécifiques, en tenant compte de la pratique et des critères actuels internes de diagnostic de l’infarctus du myocarde aigu. D’autres états pouvant donner lieu à des lésions myocardiques, comme une contusion cardiaque et une myocardite, peuvent provoquer une augmentation des concentrations de protéines en circulation dans le myocarde, notamment la troponine I cardiaque. Il faut tenir compte de ces facteurs lors de l’interprétation des résultats.20

Stratification du risque : Des augmentations statistiquement significatives de la mortalité ont été observées comme fonction de l’augmentation des niveaux de troponine I cardiaque. Chez les patients souffrant de syndromes coronariens aigus comme un angor instable ou un infarctus du myocarde incomplet, les niveaux de troponine I cardiaque sont une information utile au pronostic et facilitent la détection précoce de ces patients présentant un risque de décès accru.8 Un comité mixte de l’American College of Cardiology (ACC) et l’American Heart Association (AHA) a défini comme suit le risque à court terme de mort ou d’IM non mortel en association avec un niveau de troponine : haut risque avec des niveaux élevés (>0.1 ng/ml), risque intermédiaire avec des niveaux légèrement élevés (<0.1 ng/ml) et faible risque pour des niveaux normaux.20

Définition recommandée d’un IMA par l’ESC/ACC : Un comité mixte de la European Society of Cardiology (ESC) et de l’American College of Cardiology (ACC) a recommandé une nouvelle définition de l’infarctus du myocarde (IM). Le comité définit l’IM comme l’augmentation typique et la diminution progressive de troponine ou l’augmentation ou la diminution plus rapide de CK-MB en conjonction avec des symptômes ischémiques, des ondes Q pathologiques sur l’ECG, l’élévation/la baisse du segment ST sur l’ECG et/ou une intervention sur l’artère coronaire. Le comité recommande par ailleurs que l’augmentation du niveau de troponine soit définie comme une mesure dépassant le 99ème centile de l’intervalle de référence et qu’une imprécision acceptable (coefficient de variation) pour des mesures au 99ème centile soit <10 %. 9 Le 99ème centile de l’intervalle de référence pour la méthode CTNI Dimension Vista® a été déterminé à 0.045 ng/ml [µg/l] et la limite de 10 % de CV estimée à <0.04 ng/ml [µg/l].

OMS - Définition de l’IMA : La définition de l’IMA par l’Organisation mondiale de la santé (OMS) exige deux des critères suivants pour confirmation d’un infarctus du myocarde aigu : changements d’électrocardiogramme correspondant à un infarctus, changements temporels des niveaux de marqueur cardiaque, gêne au niveau de la poitrine d’une durée significative (≥ 20 minutes).21 Dans une étude22 effectuée à l’aide du dosage Stratus® II de la troponine I cardiaque, des seuils de troponine I situés dans l’intervalle 0.6–1.5 ng/ml étaient cohérents avec les critères de l’OMS concernant l’IMA. Il s’agissait d’une étude multicentrique portant sur 314 patients souffrant de douleurs thoraciques, dont 128 présentaient un IMA. Pour satisfaire aux critères des marqueurs biologiques de l’IMA dans le cadre de cette étude, il fallait une valeur de CK-MB supérieure à 5.6 ng/ml et un changement temporel d’au moins 3 ng/ml. On a constaté une sensibilité et une spécificité cliniques supérieures à 90 % à travers l’intervalle de valeurs limites lors de l’échantillonnage en série de patients souffrant de douleurs thoraciques (voir figure ci-dessous). Cette étude est fournie pour servir de référence. Elle est basée sur la comparaison des résultats de la méthode de dosage de la troponine I cardiaque Stratus® II avec ceux de la méthode Dimension® RxL (Dimension® RxL = 1.10 Stratus® II–0.075; r = 0.992 ; n = 111; intervalle = 0–47.9 ng/ ml) et sur la comparaison des résultats de la méthode de dosage de la troponine I cardiaque Dimension® RxL avec ceux de la méthode Dimension Vista® (données indiquées dans la notice de ce produit à la section Comparaison de la méthode). Il est important de noter que les seuils de troponine I situés dans l’intervalle 0.6–1.5 ng/ml reflètent un niveau de lésions myocardiques supérieur au seuil du 99ème centile recommandé dans les directives de la European Society of Cardiology/American College of Cardiology Guidelines (ESC/ACC). Les intervalles signalés ci-dessus doivent uniquement être utilisés à titre de référence.

90

92

94

96

98

100

0.60 0.75 0.90 1.05 1.20 1.35 1.50 1.65

Pou

rcen

tage

Sensibilité et spécificité - Fonction du seuil IMA

Seuil Troponine I (ng/ml)

Sensitivity (%)Specificity (%)

Sensibilié et spécificité - Fonction du seuil IMA

Seuil Troponine I (ng/ml)

Pour

cent

age

Sensibilité(%)Spécificité(%)

Reproductibilité maximale observée

Les écarts-types observés maximums attendus pour la reproductibilité (précision intra-série) sur la base de n = 5 répétitions aux concentrations de troponine I cardiaque suivantes sont :

Concentration CTNI E-T maximum acceptable


Si l’écart-type maximum acceptable est dépassé, le système connaît peut-être un dysfonctionnement.

Caractéristiques spécifiques de performance

Les données suivantes représentent une performance type pour le système Dimension Vista®.

Précision23, e

MatérielMoyenne

ng/ml [µg/l]

Écart-type (CV en %)

Reproductibilité Intra-laboratoire

Pool de sérum 0.123 0.005 (4.2) 0.007 (5.8)Pool de sérum 0.55 0.012 (2.3) 0.016 (2.9)Pool de sérum 31.4 0.95 (3.0) 1.18 (3.8)Contrôle Liquichek™ Cardiac Markers LT

Niveau 2 Niveau 3

0.28 1.41

0.016 0.021

(5.8) (1.5)

0.019 0.049

(6.6) (3.4)

e. La directive CLSI/NCCLS EP5-A2 a été utilisée. Durant chaque jour de test, deux dosages séparés, avec deux échantillons de test pour chaque matériel de test, ont été effectués sur 20 jours. Liquichek™ Cardiac Markers Control LT est une marque de Bio-Rad Laboratories, Irvine, CA 92618, USA.

Comparaison de la méthode24

Statistiques de régressionf

Méthode comparative PenteOrdonnée à l’origine

ng/ml [µg/l]Coefficient de

corrélation n

Système Dimension® RxL 1.0150 -0.003 0.993 197g

f. La directive CLSI/NCCLS EP9-A2 a été utilisée. La méthode utilisée pour ajuster la droite de régression linéaire était la méthode des moindres carrés ordinaires.

g. L’intervalle de 197 valeurs dans l’étude de corrélation était de 0.0–35.72 ng/ml [µg/l].

Spécificité

Interférence HIL (hémolyse, ictère, lipémie)

L’interférence de la méthode CTNI a été évaluée conformément à CLSI/NCCLS EP7-A2.25 Un biais représente la différence dans les résultats entre l’échantillon de contrôle (sans la substance interférente) et l’échantillon de test (avec la substance interférente) exprimée en pourcentage. Un biais supérieur à 10 % est considéré comme une « interférence ».

Substance testée Concentration de substance Concentration cTnI

ng/ml [µg/l] Biais %

Hémoglobine (hémolysat) Hémoglobine (monomère) 500 mg/dl [0.31 mmol/l] 0.945 <10

Bilirubine (indirecte) 40 mg/dl [684 µmol/] 0.907 <10Bilirubine (directe) 40 mg/dl [684 µmol/l] 0.879 <10Lipémie (Intralipid®) Cholestérol-lipémie

3000 mg/dl [33.9 mmol/l] 500 mg/dl [5.7 mmol/l]

0.970 0.941

<10 <10

Intralipid® est une marque déposée de Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Allemagne.* Les résultats d’analyte ne doivent pas être corrigés en fonction de ce biais


Substances interférentes

La méthode CTNI a été évaluée pour définir les interférences conformément au document EP7-A2 du CLSI/NCCLS.29 Le biais représente la différence dans les résultats entre l’échantillon de contrôle (sans la substance interférente) et l’échantillon de test (contenant la substance interférente) exprimée en pourcentage. Un biais supérieur à 10 % est considéré comme une interférence.

Concentration d’analyte

Niveau de test de biotine (ng/ml)

50 100 250 500 1200

% Biais

0.046 ng/ml -5 -13 -31 -67 -83

1.5 ng/ml -4 -6.2 -27.8 -90.8 Inférieur à l’AMR

• Les échantillons qui contiennent de la biotine à une concentration de 250 ng/ml démontrent une variation des résultats inférieure ou égale à 10 %. Les concentrations de biotine supérieures peuvent provoquer des résultats faussement faibles sur les échantillons de patients.

• La consommation de biotine alimentaire quotidienne recommandée chez l’adulte est de 30 µg/jour. Les suppléments alimentaires en vente libre conseillés pour améliorer la santé des cheveux, de la peau et des ongles peuvent contenir 5 à 100 mg de biotine, et il est recommandé de prendre plusieurs comprimés par jour. Des études pharmacocinétiques réalisées sur des adultes en bonne santé ont démontré que, chez les sujets qui ingèrent des doses de 5 mg, 10 mg et 20 mg de biotine, les concentrations de biotine sérique peuvent atteindre 73 ng/ml, 141 ng/ml et 355 ng/ml, respectivement.26 Chez les sujets qui prennent jusqu’à 300 mg de biotine par jour, les niveaux de biotine plasmatique peuvent atteindre 1160 ng/ml.27

Substances non interférentes

Les substances suivantes sont dépourvues d’effet significatif (moins de 10 %) lorsqu’elles sont ajoutées à environ 1.5 ng/ml [µg/l] de CTNI aux concentrations indiquées :

ComposéConcentration de

l’échantillon Unités SIParacétamol (acétaminophène) 20 mg/dl 1323 µmol/lAllopurinol 2.5 mg/dl 184 µmol/lAmikacine 15 mg/dl 256 µmol/lAmpicilline 5 mg/dl 143 µmol/lAcide ascorbique 3 mg/dl 170 µmol/lAténolol 1.0 mg/dl 37.6 µmol/lCaféine 10 mg/dl 515 µmol/lCarbamazépine 12 mg/dl 508 µmol/lCaptopril 5.0 mg/dl 230 µmol/lCholestérol 500 mg/dl 12.9 mmol/lChloramphénicol 25 mg/dl 774 µmol/lChlordiazépoxide 2 mg/dl 67 µmol/lChlorpromazine 5 mg/dl 157 µmol/lCimétidine 10 mg/dl 396 µmol/lCinnarizine 3.0 mg/dl 81.4 µmol/lCréatinine 30 mg/dl 2652 µmol/lCyclosporine A 4000 ng/ml 3.3 µmol/lDextran 75 2500 mg/dl 333 µmol/lDiazépam 2 mg/dl 70 µmol/lDigoxine 5 ng/ml 6.4 nmol/lDopamine 45 mg/dl 2.4 mmol/lÉrythromycine 20 mg/dl 272 µmol/lÉthanol 350 mg/dl 76 mmol/lÉthosuximide 30 mg/dl 2125 µmol/lFurosémide 2 mg/dl 61 µmol/lGentamicine 12 mg/dl 251 µmol/lHéparine sodique 8 U/ml 8000 IU/lIbuprofène 40 mg/dl 1939 µmol/lDinitrate d’isosorbide 6.0 mg/dl 254 µmol/lLidocaïne 6 mg/dl 256 µmol/lLipémie (triglycérides) 3000 mg/dl 33.9 mmol/lLithium 2.3 mg/dl 3.3 mmol/lL-thyroxine 60 µg/dl 0.77 µmol/lMéthyldopa 2.5 mg/dl 118 µmol/lNicotine 2 mg/dl 123 µmol/lNifédipine 6.0 mg/dl 173 µmol/lPénicilline G 25 U/ml 25000 U/lPentobarbital 10 mg/dl 442 µmol/lPhénobarbital 15 mg/dl 646 µmol/lPhénytoïne 10 mg/dl 396 µmol/lPrimidone 10 mg/dl 458 µmol/lPropoxyphène 0.4 mg/dl 12 µmol/lPropranolol 0.15 mg/dl 5.8 µmol/lProtéine, albumine humaine 6 g/dl 60 g/lProtéine, IgG humaine 3.5 g/dl 35 g/lAcide salicylique 50 mg/dl 3.6 mmol/lThéophylline 25 mg/dl 1388 µmol/lUrée 500 mg/dl 83.3 mmol/lAcide urique 20 mg/dl 1.2 mmol/lAcide valproïque 50 mg/dl 3467 µmol/lVérapamil 16 mg/dl 351.6 µmol/l

Effet crochet

Les immunodosages en sandwich à une étape sont susceptibles d’effet crochet à forte dose à savoir, un excès d’antigènes qui empêche la liaison simultanée des anticorps de capture et de détection en une molécule d’analyte unique.18 La méthode CTNI ne présente aucun effet crochet jusqu’à 1000 ng/ml [µg/l].

Réaction Croisée

La méthode CTNI est spécifique de la troponine I cardiaque. Cette dernière a été évaluée pour une réactivité croisée avec d’autres protéines myofibrillaires situées dans les tissus musculaires humains. Le pourcentage de réaction croisée a été calculé comme suit :

analyte mesuré - analyte de contrôle (ng/ml[µg/l]) % réaction croisée = –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 métabolite ajouté

Réactif croisé Concentration Unités-SI Réaction croisée en pourcentageTroponine C (cardiaque) 1000 ng/ml 1000 µg/l AucunTroponine T (cardiaque humaine) 1000 ng/ml 1000 µg/l 0.06Troponine I (squelettique humaine) 1000 ng/ml 1000 µg/l 0.12Troponine I (squelettique humaine) 280 ng/ml 280 µg/l 0.13

Recouvrement :

Les échantillons de sérum qui contiennent des niveaux bas et élevés de CTNI ont été testés sur la base de divers mélanges de volumes. Les valeurs observées ont alors été comparées aux valeurs attendues pour chaque mélange.

Mélange 1:1Mélange d’échantillons

Sérum CTNI Échantillon 1

Sérum CTNI Échantillon 2

attendu :

obtenu :

Pourcentage de récupération CTNI

A 16.03 0.001 8.02 7.95 99.2B 11.275 0.845 6.1 6.00 99.1

Sensibilité analytique : 0.015 ng/ml [µg/l]

Cette sensibilité est définie comme la concentration correspondant à la valeur moyenne (n=20) plus deux écarts-types du calibrateur CTNI de niveau A bas (0 ng/ml [µg/l]) (ou échantillon dépourvu de CTNI).

Limite de l’analyse quantitative (sensibilité fonctionnelle) : Évaluation de la limite de 10% de CV

La sensibilité fonctionnelle a été évaluée en déterminant l’imprécision totale d’échantillons de sérum TnI naturel. L’imprécision totale a été mesurée par une étude ANOVA menée sur 20 jours, avec deux dosages par jour. La limite de l’analyse quantitative (sensibilité fonctionnelle/profil d’imprécision) de la méthode de dosage de la troponine Dimension Vista® correspond à un coefficient de variation (CV) de 10% pour une concentration de troponine I <0.04 ng/ml [µg/l]. L’imprécision démontrée par le graphe de l’étude d’imprécision indique la haute sensibilité de la méthode

Explication des Symboles : Voir page annexe.

Bibliographie : Voir page annexe.

Dimension Vista®, Dimension®, LOCI®, Flex® et Stratus® sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.

©2008 Siemens Healthcare DiagnosticsTous droits réservés.

2020

-08

J

PN 1

0867

592

- FR


0.00

5.00

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15.00

20.00


% Total CV

10% CV

% C

V to

tale

Récupération CTNI ng/ml [µg/l]

Sensibilité fonctionelle CTNI


K6421


Data di edizione 2020-08

Troponina cardiaca IUso previsto: il metodo CTNI è un test diagnostico in vitro per la determinazione quantitativa della troponina cardiaca I nel siero e nel plasma umano sul Sistema Dimension Vista®. La determinazione della troponina cardiaca I è di ausilio nella diagnosi dell’infarto miocardico acuto (IMA) e nella stratificazione del rischio in pazienti affetti da sindrome coronarica acuta, in riferimento al loro rischio relativo di mortalità.

Riassunto: la troponina è il complesso di proteine del muscolo striato che regola l’attività contrattile. Si trova periodicamente lungo il filamento sottile delle miofibrille, in associazione con la proteina tropomiosina. Il complesso troponinico consiste in tre componenti polipeptidiche distinte: troponina C (l’elemento legante il calcio), troponina I (l’elemento che inibisce l’ATPasi dell’actina-miosina) e troponina T (l’elemento legante la tropomiosina). Il complesso serve a regolare l’interazione calcio-dipendente tra miosina e actina, pertanto riveste un ruolo fondamentale nella contrazione muscolare.1 La troponina I esiste in tre forme molecolari distinte che corrispondono a isotipi specifici presenti rispettivamente nei muscoli scheletrici a rapida contrazione, nei muscoli scheletrici a lenta contrazione e nel cuore. Gli isotipi presenti nel muscolo scheletrico sono simili quanto a dimensione molecolare, approssimativamente 20000 dalton, ma mostrano un’eterogeneità nella sequenza amminoacidica di circa il 40%. Anche l’isotipo cardiaco mostra un’eterogeneità della sequenza di circa il 40% rispetto agli isotipi presenti nel muscolo scheletrico, ma presenta anche altri 31 residui nell’estremità ammino-terminale, originando un peso molecolare di circa 24000 dalton.2,3

I dati riportati in letteratura hanno indicato che la troponina cardiaca I viene rilasciata nel sangue entro alcune ore dalla comparsa dei sintomi di infarto miocardico e rimane elevata per alcuni giorni dopo l’infarto. I dati cumulativi della letteratura indicano che i livelli di troponina I divengono anomali a 4–8 ore dalla comparsa del dolore toracico, con valori di picco a 12–16 ore, e rimangono elevati nei 5–9 giorni successivi.2,3,4 Sulla base di tali studi, i livelli di troponina I sono elevati nell’arco di un periodo che comprende la finestra diagnostica sia del CKMB che dell’LD.5 Studi clinici recenti postulano una miglior cardiospecificità a carico della troponina I, rispetto al CKMB, ai fini della rilevazione del danno miocardico in presenza di danno al muscolo scheletrico.6,7

La misurazione dei livelli di troponina cardiaca I consente la determinazione sensibile e specifica del danno miocardico nell’arco di un’ampia finestra diagnostica. Un incremento dei livelli di troponina cardiaca I è stato osservato in un’ampia gamma di sindromi coronariche acute, tra cui l’infarto miocardico transmurale, l’infarto miocardico non-Q e l’angina instabile. Un’incidenza significativamente più elevata di mortalità è stata osservata in pazienti con infarto miocardico non-Q e con angina instabile, che presentano livelli rilevabili di troponina cardiaca I. Ciò lascia supporre che la troponina cardiaca I fornisca i mezzi di stratificazione del rischio di tali individui.8

Il comitato congiunto European Society of Cardiology/American College of Cardiology individua nella troponina il marcatore biochimico preferito di danno miocardico considerando la sua elevata specificità e sensibilità miocardica. Il comitato raccomanda inoltre un livello di imprecisione (coefficiente di variazione o CV) per i test di troponina pari a <10% al 99° percentile dei valori normali.9 Sulla base dell’imprecisione e di altre caratteristiche di prestazione, il metodo CTNI per il Sistema Dimension Vista® è un metodo per la troponina I a elevata sensibilità.

Principi del metodo: Il metodo CTNI è un immunodosaggio sandwich chemiluminescente in fase omogenea, basato sulla tecnologia LOCI®. I reagenti LOCI® comprendono due reagenti con microsfere in sintetica e un frammento di anticorpo monoclonale biotinilato anti-troponina cardiaca I. Il primo reagente con microsfere (microsfere sensibili) è rivestito di streptavidina e contiene un colorante fotosensibilizzatore. Il secondo reagente con microsfere (microsfere chimiche) è rivestito di un secondo anticorpo monoclonale anti-troponina cardiaca e contiene un colorante chemiluminescente. Il campione viene incubato con le microsfere chimiche e l’anticorpo biotinilato per formare sandwich di microsfere, troponina cardiaca I e anticorpo biotinilato. Vengono aggiunte le microsfere sensibili che si legano alla biotina per formare immunocomplessi di coppie di microsfere. L’illuminazione del complesso a 680 nm genera ossigeno singoletto dalle microsfere sensibili che si diffonde nelle microsfere chimiche, scatenando una reazione chemiluminescente. Il segnale che ne deriva viene misurato a 612 nm ed è una funzione diretta della concentrazione di troponina cardiaca I nel campione.10.11,12

Reagenti

Pozzettia Forma Componente Concentrazioneb Tipo di campione

1–2 Liquido Anticorpo biotinilatoc 8 µg/ml Monoclonale di topo3–4 Liquido Microsfere chimiche di troponina Ic 190 µg/ml Monoclonale di topo7–8 Liquido Microsfere sensibili di streptavidinac 1500 µg/ml E. coli, ricombinante9–12 Liquido Tampone per il test

a. I pozzetti sono numerati in sequenza a partire dall’estremità larga della cartuccia.b. Valore nominale per pozzetto in una cartuccia.c. Il titolo anticorpale e l’attività del reagente variano a seconda del lotto.

Condizioni di rischio e sicurezza

H317P280, P272, P302 + P352, P333 + P313, P501Avvertenza!Può provocare una reazione allergica cutanea.

Indossare guanti/indumenti protettivi/Proteggere gli occhi/il viso. Gli indumenti da lavoro contaminati non devono essere portati fuori dal luogo di lavoro. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: lavare abbondantemente con acqua e sapone. In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. Smaltire il prodotto e il contenitore in conformità con tutte le disposizioni locali, regionali e nazionali.Contiene: 5-chloro-2-methyl-3(2h)-isothiazolone mixture with 2-methyl-3(2h)-isothiazolone

Le schede di sicurezza sono disponibili sul sito siemens.com/healthcare

Precauzioni: Le provette di reazione LOCI® usate contengono fluidi di origine umana; maneggiare con cura per evitare il contatto con la pelle o l’ingestione.Per uso diagnostico in vitro.

Preparazione del reagente: Tutti i reagenti sono liquidi e pronti per l’uso.

Conservare a: 2–8 °C

Scadenza: per la data di scadenza delle singole cartucce reagenti ancora chiuse fare riferimento alla confezione. I pozzetti sigillati sullo strumento sono stabili per 30 giorni.

Stabilità pozzetto aperto: 7 giorni per i pozzetti 1–12

Raccolta e manipolazione del campione: Tipi di campioni consigliati: siero o plasma (eparina di litio e/o di sodio).

Non è consentito l’uso di campioni e controlli stabilizzati con azide.

I campioni del siero o plasma può essere raccolto applicando le procedure consigliate per la raccolta di campioni di sangue per uso diagnostico mediante venopuntura.13

Per l’uso del dispositivo di raccolta dei campioni e l’analisi, seguire le istruzioni del produttore. 15

Il test comparativo di 63 prelievi contemporanei di siero e di plasma con litio eparina ha prodotto la seguente linea di regressione: plasma con litio eparina = 1.02 siero + 0.031. La concentrazione di siero CTNI varia tra 0.026 e 22.9 ng/ml [µg/l]. “Uno studio analogo è stato condotto tra litio e sodio eparina che ha prodotto la seguente linea di regressione: plasma con sodio eparina = 0.99 plasma con litio eparina + -0.05. La concentrazione di litio eparina CTNI varia tra 0.09 e 39.85 ng/ml [µg/l] per 50 campioni.

La formazione completa del coagulo deve avvenire prima della centrifugazione. Separare fisicamente il siero dalle cellule appena possibile con un limite massimo di due ore dal momento della raccolta.14,15 I campioni devono essere privi di materiale corpuscolato.

I campioni rimangono stabili per almeno 2 giorni se conservati a 2–8 °C o per almeno 8 settimane se conservati a -20 °C o temperature inferiori.16 Evitare di congelare e scongelare ripetutamente i campioni.

Lo scopo delle informazioni sulla conservazione dei campioni è di fornire una guida agli utenti. Tuttavia gli utenti possono convalidare le proprie procedure personali per la conservazione dei campioni dei pazienti.

Procedura

Materiale fornito

Cartuccia reagente CTNI Flex®, codice K6421

Materiale necessario ma non fornito

CTNI CAL, codice KC678CTNI SDIL, codice KD692Materiali di controllo qualità

Fasi del test

Il sistema Dimension Vista® effettua automaticamente il campionamento, l’erogazione del reagente, la miscelazione e il processo di analisi. Per informazioni dettagliate su questo processo di analisi, fare riferimento al Manuale Operatore del Dimension Vista®.

Condizioni del test

Volume del campione (erogato alla provetta di reazione)

20 µl

Volume del reagente delle microsfere chimiche 20 µlVolume del reagente anticorpale biotinilato 20 µlVolume del reagente delle microsfere sensibili 13 µlVolume del tampone per il test 100 µlTemperatura 37.0 °CTempo di reazione 10 minutiLunghezza d’onda 680 e 612 nmTipo di misura Chemiluminescenza

CalibrazioneMateriale di calibrazione Calibratore CTNI, codice KC678Schema di calibrazione 6 livelli, n=3Unità ng/ml [µg/l]d

(ng/ml x 1) =[µg/l]Livelli di calibrazione tipici Livello 1 (Calibratore A): 0 ng/ml [µg/l]

Livello 2 (Calibratore B): 0.5 ng/ml [µg/l] Livello 3 (Calibratore C): 4.0 ng/ml [µg/l] Livello 4 (Calibratore D): 8.0 ng/ml [µg/l] Livello 5 (Calibratore E): 20.0 ng/ml [µg/l] Livello 6 (Calibratore F): 41.0 ng/ml [µg/l]

Frequenza di calibrazione Ogni 30 giorni per ciascun lottoSe i risultati della verifica di calibrazione sono accettabili, è possibile ampliare l’intervallo di calibrazione.

Occorre effettuare una nuova calibrazione • Quando si usa un nuovo lotto di cartucce reagenti Flex®• In seguito a manutenzione o riparazione importante, se

indicato dai risultati del controllo qualità • Se indicato nelle procedure del controllo qualità del

laboratorio• Quando richiesto in base alle normative in vigore

d. Le unità SI (Système International d’Unités) sono tra parentesi.

Vedere le sezioni ombreggiate: informazioni aggiornate dalla versione 2019-06.

Controllo qualità

Per la frequenza dei controlli di qualità seguire le normative in vigore o i requisiti di accreditamento. Almeno una volta in ogni giornata di utilizzo, analizzare due livelli di un materiale per il controllo qualità (CQ) a di concentrazione nota di troponina cardiaca I. Seguire le procedure di controllo qualità interne del laboratorio se i risultati ottenuti non rientrano nei limiti accettabili.

Risultati: lo strumento calcola la concentrazione di troponina cardiaca I in ng/ml [µg/l] utilizzando lo schema di calcolo descritto nel Manuale Operatore del Dimension Vista®.

I risultati del test devono essere sempre interpretati insieme all’anamnesi, al quadro clinico e ad altri dati relativi al paziente.

Intervallo di misura analitica (AMR): 0.015-40 ng/ml [µg/l]

È l’intervallo dei valori di analita che è possibile misurare direttamente sul campione senza alcuna diluizione o pretrattamento che non siano parte integrante del processo di analisi abitualeabituale ed equivale all’intervallo di misura.

• I campioni che mostrano risultati superiori a 40 ng/ml [µg/l] devono essere rianalizzati dopo essere stati diluiti.

Diluizione manuale: diluire con Diluente campione CTNI (codice KD692) per ottenere risultati compresi nell’intervallo accettabile. Inserire il valore di diluizione nello strumento, non superiore a 1:5. Ripetere l’analisi. La lettura che ne risulta è quella corretta per la diluizione.

Autodiluizione (AD): L’autodiluizione richiede la presenza sullo strumento di CTNI SDIL (Num. cat. KD692). Il volume del campione per l’autodiluizione è di 20 µl (fattore di diluizione = 5) per siero/plasma per ottenere risultati compresi nell’intervallo di misura analitica.

• I campioni che mostrano risultati inferiori a 0.015 ng/ml [µg/l] saranno refertati dallo strumento come “inferiori a 0.015 ng/ml [µg/l]”.

Limiti della procedura

È possibile che i campioni prelevati dai pazienti contengano anticorpi eterofili che potrebbero reagire negli immunodosaggi producendo risultati errati per eccesso o per difetto. Questo test è stato configurato per ridurre al minimo l’interferenza da anticorpi eterofili. Tuttavia non può essere garantita l’eliminazione completa dell’interferenza da tutti I campioni di paziente. Un risultato analitico che non sia coerente con il quadro clinico e l’anamnesi del paziente deve essere interpretato con cautela. 17,28

Il sistema di refertazione dello strumento contiene flag e commenti che forniscono all’utente le informazioni relative agli errori di elaborazione dello strumento, allo stato dello strumento e agli errori potenziali nei risultati della troponina cardiaca I. Per i flag e i commenti dei referti, consultare il Manuale Operatore del Dimension Vista®. Eventuali referti contenenti flag e/o commenti devono essere trattati in base al manuale di procedura del laboratorio e non devono essere refertati

Risultati previsti: in uno studio condotto su 199 campioni di siero provenienti da soggetti apparentemente sani, l’intervallo di riferimento che comprende il 99° percentile per il metodo CTNI per Dimension Vista® era:

N Intervallo che comprende il 99° percentile199 0.00–0.045 ng/ml [µg/l]

Ogni laboratorio deve stabilire un proprio intervallo di riferimento per CTNI da utilizzare con il sistema Dimension Vista®.

Interpretazione dei risultati

La valutazione nel tempo della concentrazione di troponina cardiaca I è uno strumento utile per la diagnosi di infarto miocardico. Campioni seriali prelevati da un paziente con infarto miocardico mostreranno l’innalzamento e l’abbassamento tipici della concentrazione di troponina cardiaca I osservati con altri marcatori di infarto miocardico quale CK-MB. A differenza di CK-MB, i valori di troponina cardiaca I rimangono in genere elevati e al di sopra dell’intervallo di riferimento per alcuni giorni (5–9).2,3,4 La National Academy of Clinical Biochemistry (NACB) raccomanda il campionamento seriale al momento del ricovero, ogni 2–4 ore, 6–9 ore e 12–24 ore (facoltativo).19 Studi clinici mostrano che i livelli elevati di troponina cardiaca I rappresentano un indicatore utile di danno miocardico in un’ampia gamma di sindromi coronariche acute, tra cui l’angina instabile, l’infarto miocardico non-Q e l’infarto miocardico transmurale.4,5,6,7,8 Ogni laboratorio deve definire il proprio intervallo di riferimento e le proprie soglie per garantire un’adeguata rappresentazione della popolazione specifica, tenendo conto della pratica corrente e dei criteri per la diagnosi dell’IMA. Altre cause di danno miocardico, quali la contusione cardiaca e la miocardite, sono potenziali cause di aumento delle concentrazioni circolanti delle proteine miocardiche, inclusa la troponina cardiaca I. Tali fattori dovrebbero essere tenuti in considerazione nell’interpretazione dei risultati.20

Stratificazione del rischio: sono stati osservati incrementi statisticamente significativi della mortalità in funzione di livelli crescenti di troponina cardiaca I. Nei pazienti con sindromi coronariche acute, come l’angina instabile o l’infarto miocardico non-Q, i livelli di troponina cardiaca I forniscono informazioni prognostiche utili e contribuiscono a diagnosticare precocemente i pazienti che presentano un rischio maggiorato di morte.8 Un comitato congiunto di American College of Cardiology (ACC) e American Heart Association (AHA) ha definito il rischio a breve termine di morte o di infarto miocardico non fatale in associazione al livello di troponina, considerando un alto rischio con livelli alti (>0.1 ng/ml), un rischio moderato con livelli moderatamente elevati (<0.1 ng/ml) e un basso rischio per livelli normali.20

Definizione di infarto miocardico acuto consigliata da ESC/ACC: un comitato congiunto di European Society of Cardiology (ESC) e American College of Cardiology (ACC) ha consigliato una ridefinizione dell’infarto miocardico (IM). Il comitato definisce l’IM come l’innalzamento e il graduale abbassamento tipici dei livelli di troponina o come l’innalzamento e l’abbassamento più rapidi di CK-MB in associazione a sintomi ischemici, onde Q patologiche in ECG, sopralivellamento/sottolivellamento del tratto ST dell’ECG e/o intervento coronarico. Il comitato raccomanda inoltre di definire come aumento di livello della troponina il dosaggio superiore al 99° percentile dell’intervallo di riferimento e che un’imprecisione accettabile (coefficiente di variazione) per i dosaggi al 99° percentile è <10%.9 Il 99° percentile dell’intervallo di riferimento per il metodo CTNI per Dimension Vista® era 0.045 ng/ml [µg/l] e il limite CV di 10% era stimato a <0.04 ng/ml [µg/l].

Definizione di infarto miocardico acuto dell’OMS: la definizione di IMA descritta dall’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) richiede la soddisfazione di due dei seguenti criteri per confermare la diagnosi di infarto miocardico acuto: variazioni ECG coerenti con l’infarto miocardico, variazioni nel tempo dei livelli dei marcatori cardiaci, dolore toracico di durata significativa (≥ 20 minuti).21 In uno studio22 condotto con il test Stratus® II per troponina cardiaca I, le soglie comprese nell’intervallo 0.6–1.5 ng/ml erano coerenti con i criteri dell’OMS per l’IMA. Si trattava di uno studio multicentrico che comprendeva 314 pazienti che presentavano dolore toracico, a 128 dei quali è stato diagnosticato IMA. La soddisfazione dei criteri dei biomarcatori per l’IMA in questo studio richiedeva un valore di CKMB superiore a 5,6 ng/ml insieme a una variazione nel tempo di almeno 3 ng/ml. Quando è stato effettuato un prelievo di campioni seriali sui pazienti affetti da dolore toracico, la sensibilità e la specificità cliniche sono entrambe risultate superiori al 90% in questo intervallo di valori di soglia (vedere la figura di seguito). Questo studio è fornito per riferimento in base alla comparabilità dei risultati tra il metodo Stratus® II per troponina cardiaca I e il test per troponina cardiaca I di Dimension® RxL (Dimension® RxL = 1.10 Stratus® II–0.075; r = 0.992; n = 111; intervallo = 0–47.9 ng/ml) e alla comparabilità dei risultati tra il test per troponina cardiaca I di Dimension® RxL e il test per troponina cardiaca I di Dimension Vista® (dati forniti in questo foglio illustrativo, nella sezione Comparazione dei metodi). È importante notare che le soglie per la troponina I nell’intervallo 0.6–1.5 ng/ml rappresentano un livello superiore di danno miocardico rispetto alla soglia del 99° percentile raccomandata dalla European Society of Cardiology e American College of Cardiology (ESC/ACC). Gli intervalli sopra riportati devono essere utilizzati solo come riferimento.

Ripetibilità massima osservataLe deviazioni standard massime osservate (precisione intra serie) con n= 5 ripetizioni per le seguenti concentrazioni di troponina cardiaca I sono:

Concentrazione CTNI DS massima accettabile


Se la DS massima accettabile viene superata è possibile che sia presente un malfunzionamento del sistema.

Caratteristiche specifiche di prestazione

I seguenti dati rappresentano le prestazioni tipiche del sistema Dimension Vista®.

Precisione23, e

MaterialeMedia

ng/ml [µg/l]

Deviazione standard (% CV)

Ripetibilità In laboratorio

Pool di siero 0.123 0.005 (4.2) 0.007 (5.8)Pool di siero 0.55 0.012 (2.3) 0.016 (2.9)Pool di siero 31.4 0.95 (3.0) 1.18 (3.8)Liquichek™ Cardiac Markers Control LT

Livello 2 Livello 3

0.28 1.41

0.016 0.021

(5.8) (1.5)

0.019 0.049

(6.6) (3.4)

e. È stato usato CLSI/NCCLS EP5-A2. Durante ciascuno dei 20 giorni di test sono state analizzate due serie separate con due campioni di test per ogni materiale del test. Liquichek™ Cardiac Markers Control LT è un marchio della ditta Bio-Rad Laboratories, Irvine, CA 92618, USA.

Comparazione dei metodi24

Statistiche di regressionef

Metodo di confronto PendenzaIntercetta

ng/ml [µg/l]Coefficiente di correlazione n

Sistema Dimension® RxL 1.0150 -0.003 0.993 197g

f. È stato usato CLSI/NCCLS EP9-A2. Per l’adattamento con la linea di regressione lineare è stato usato il metodo dei minimi quadrati.

g. L’intervallo dei 197 valori nello studio di correlazione era 0.0–35.72 ng/ml [µg/l].

Specificità

Interferenza emolisi, ittero, lipemia (HIL)

L’interferenza del metodo CTNI è stata valutata in base al documento CLSI/NCCLS EP7-A2.25 La differenza è la deviazione espressa in percentuale tra i risultati ottenuti con il campione di controllo (senza sostanza interferente) e quelli ottenuti con il campione sottoposto a test (con sostanza interferente). Una differenza superiore al 10% è considerata interferenza.

Sostanza analizzata Concentrazione della sostanzaConcentrazione cTnI

ng/ml [µg/l] Differenza* %

Emoglobina (emolisi) Emoglobina (monomero) 500 mg/dl [0.31 mmol/l] 0.945 <10

Bilirubina (nonconiugata) 40 mg/dl [684 µmol/l] 0.907 <10Bilirubina (coniugata) 40 mg/dl [684 µmol/l] 0.879 <10Lipemia (Intralipid®) 3000 mg/dl [33.9 mmol/l] 0.970 <10Lipemia (colesterolo) 500 mg/dl [5.7 mmol/l] 0.941 <10

Intralipid® è un marchio registrato di Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Germania.*I risultati dell’analita non devono essere corretti in base a questa differenza.

90

92

94

96

98

100

0.60 0.75 0.90 1.05 1.20 1.35 1.50 1.65

Sensibilità e specificità in funzione della soglia IMA

Per

cent

uale

Soglia troponina I (ng/ml)

Sensibilità (%)Specificità (%)

Sensibilità e specificità in funzione della soglia IMA

Soglia troponina I (ng/ml)

Perc

entu

ale

Sensibilità(%)Specificità(%)


Sostanze interferenti

Le interferenze sul metodo CTNI sono state valutate in base al CLSI/NCCLS EP7-A2.29 Il bias o inaccuratezza sistematica è la differenza tra il campione di controllo (senza sostanza interferente) e il campione di test (con sostanza interferente), espressa in percentuale. Un errore sistematico superiore al 10% viene considerato “interferenza”.

Concentrazione di analita

Livello di test biotina (ng/ml)

50 100 250 500 1200

Bias %

0.046 ng/ml -5 -13 -31 -67 -83

1.5 ng/ml -4 -6.2 -27.8 -90.8 Inferiore all’AMR

• I campioni che contengono biotina a una concentrazione di 250 ng/ml dimostrano una variazione nei risultati inferiore o pari al 10%. Concentrazioni di biotina superiori a questa potrebbero portare a risultati falsamente sottostimati nei campioni dei pazienti.

•L’assunzione giornaliera raccomandata di un adulto di biotina è 30 µg/die. Gli integratori alimentari da banco promossi per la salute dei capelli, della pelle e delle unghie possono contenere 5–100 mg di biotina, con raccomandazioni relative all’assunzione di più compresse al giorno. Studi di farmacocinetica su adulti sani hanno dimostrato che, nei soggetti che assumono 5 mg, 10 mg e 20 mg di biotina, le concentrazioni sieriche di biotina possono raggiungere rispettivamente fino a 73 ng/ml, 141 ng/ml e 355 ng/ml.26 I soggetti che assumono fino a 300 mg di biotina al giorno possono presentare livelli plasmatici di biotina fino a 1160 ng/ml.27

Sostanze non interferenti

Le seguenti sostanze non hanno un effetto significativo (meno del 10% se aggiunte a circa 1.5 ng/ml [µg/l] di CTNI nella concentrazione indicata:

Composto Concentrazione del test Unitá SIAcetaminofene 20 mg/dl 1323 µmol/lAllopurinolo 2.5 mg/dl 184 µmol/lAmikacina 15 mg/dl 256 µmol/lAmpicillina 5 mg/dl 143 µmol/lAcido ascorbico 3 mg/dl 170 µmol/lAtenololo 1.0 mg/dl 37.6 µmol/lCaffeina 10 mg/dl 515 µmol/lCarbamazepina 12 mg/dl 508 µmol/lCaptopril 5.0 mg/dl 230 µmol/lColesterolo 500 mg/dl 12.9 mmol/lCloramfenicolo 25 mg/dl 774 µmol/lClordiazepossido 2 mg/dl 67 µmol/lClorpromazina 5 mg/dl 157 µmol/lCimetidina 10 mg/dl 396 µmol/lCinnarizina 3.0 mg/dl 81.4 µmol/lCreatinina 30 mg/dl 2652 µmol/lCiclosporina A 4000 ng/ml 3.3 µmol/lDestrano 75 2500 mg/dl 333 µmol/lDiazepam 2 mg/dl 70 µmol/lDigossina 5 ng/ml 6.4 nmol/lDopamina 45 mg/dl 2.4 mmol/lEritromicina 20 mg/dl 272 µmol/lEtanolo 350 mg/dl 76 mmol/lEtosuccimide 30 mg/dl 2125 µmol/lFurosemide 2 mg/dl 61 µmol/lGentamicina 12 mg/dl 251 µmol/lEparina di sodio 8 U/ml 8000 IU/lIbuprofene 40 mg/dl 1939 µmol/lIsosorbide dinitrato 6.0 mg/dl 254 µmol/lLidocaina 6 mg/dl 256 µmol/lLipemia (trigliceridi) 3000 mg/dl 33.9 mmol/lLitio 2.3 mg/dl 3.3 mmol/lL-tiroxina 60 µg/dl 0.77 µmol/lMetildopa 2.5 mg/dl 118 µmol/lNicotina 2 mg/dl 123 µmol/lNifedipina 6.0 mg/dl 173 µmol/lPenicillina G 25 U/ml 25000 U/lPentobarbital 10 mg/dl 442 µmol/lFenobarbital 15 mg/dl 646 µmol/lFenitoina 10 mg/dl 396 µmol/lPrimidone 10 mg/dl 458 µmol/lPropossifene 0.4 mg/dl 12 µmol/lPropranololo 0.15 mg/dl 5.8 µmol/lProteina, albumina umana 6 g/dl 60 g/lProteina, IgG umana 3.5 g/dl 35 g/lAcido salicilico 50 mg/dl 3.6 mmol/lTeofillina 25 mg/dl 1388 µmol/lUrea 500 mg/dl 83.3 mmol/lAcido urico 20 mg/dl 1.2 mmol/lAcido valproico 50 mg/dl 3467 µmol/lVerapamil 16 mg/dl 351.6 µmol/l

Effetto gancio

Gli immunodosaggi sandwich a una fase sono sensibili a un effetto “gancio” ad alte dosi, dove un eccesso di antigene ostacola il simultaneo legame della cattura e del rilascio degli anticorpi a una singola molecola dell’analita.18 Il metodo CTNI non presenta effetto gancio fino a 1000 ng/ml [µg/l].

Reattività crociata

Il metodo CTNI è specifico per la troponina cardiaca I. La reattività crociata della troponina cardiaca I è stata valutata in presenza di altre proteine miofibrillari presenti nei muscoli umani. La reattività crociata percentuale è stata calcolata come segue:

analita misurato - analita di controllo (ng/ml [µg/l]) reattività crociata % = –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 metabolita aggiunto

Crossreagente Concentrazione Unità SI Reattività crociata percentualeTroponina C (cardiaca) 1 000 ng/ml 1000 µg/l AucunTroponina T (cardiaca umana) 1 000 ng/ml 1000 µg/l 0.06Troponina I (scheletrica umana) 1 000 ng/ml 1000 µg/l 0.12Troponina I (scheletrica umana) 280 ng/ml 280 µg/l 0.13

Recupero:

I campioni di siero contenenti livelli elevati e bassi di CTNI sono stati analizzati con miscele di volume diverse. I valori osservati sono poi stati messi a confronto con quelli attesi per ciascuna miscela.

Miscela 1:1Miscela di campione

Siero CTNI Campione 1

Siero CTNI Campione 2

atteso :

ottenuto :

Recupero in percentuale CTNI

A 16.03 0.001 8.02 7.95 99.2B 11.275 0.845 6.1 6.00 99.1

Sensibilità analitica: 0.015 ng/ml [µg/l]

Questa sensibilità viene definita come la concentrazione che corrisponde al valore medio (n=20) più due deviazioni standard del livello più diluito della curva A (0 ng/ml [µg/l]) del calibratore CTNI (o campione privo di CTNI).

Limite di quantificazione (sensibilità funzionale): valutazione del limite CV di 10%

La sensibilità funzionale è stata valutata determinando l’imprecisione totale dei campioni di siero naturale con TnI. L’imprecisione totale è stata misurata in uno studio ANOVA di venti giorni, con due ripetizioni al giorno. Il limite di quantificazione (profilo sensibilità funzionale/imprecisione) per il metodo troponina per Dimension Vista® corrisponde a un coefficiente di variazione (CV) del 10% a una concentrazione di troponina I pari a <0.04 ng/ml [µg/l]. L’imprecisione, come riportato nel relativo grafico di studio, è indicativa di un metodo ad elevata sensibilità.

Interpretazione simboli: Vedere la sezione aggiunta.

Bibliografia: Vedere la sezione aggiunta.

Dimension Vista®, Dimension®, LOCI®, Flex® e Stratus® sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics.

©2008 Siemens Healthcare DiagnosticsTutti i diritti riservati.

2020

-08

J

PN 1

0867

592

- IT


0.00

5.00

10.00

15.00

20.00


% Total CV

10% CV

% C

V To

tale

Recupero di CTNI ng/ml [µg/l]

Sensibilità funzionale di CTNI


K6421


Fecha de la edición 2020-08

Troponina cardiaca IUso previsto: El método CTNI es una prueba de diagnóstico in vitro para la medición cuantitativa de la troponina I cardíaca en suero y plasma humano en el Sistema Dimension Vista®. Las determinaciones de troponina I cardíaca se utilizan como ayuda en el diagnóstico de un infarto agudo de miocardio (IAM) así como en la estratificación del riesgo de pacientes con algún síndrome coronario agudo con respecto al riesgo relativo de mortalidad.

Resumen: La troponina es el complejo proteínico regulador de la función contráctil del músculo estriado. Se dispone a intervalos regulares a lo largo del filamento delgado de las miofibrillas, acompañada de la proteína tropomiosina. El complejo de troponina está compuesto por tres polipéptidos diferenciados: la troponina C (el elemento fijador del calcio), la troponina I (el elemento inhibidor de la actinomiosina ATPasa) y la troponina T (el elemento fijador de la tropomiosina). La función de este complejo es regular la interacción dependiente del calcio de la miosina y la actina y, por este motivo, desempeña una papel fundamental en la contracción muscular.1 La troponina I existe en tres formas moleculares distintas, que corresponden a los isotipos específicos presentes en el músculo esquelético de rápida contracción, el músculo esquelético de contracción lenta y el corazón, respectivamente. Los isotipos esqueléticos tienen un tamaño molecular similar, aproximadamente 20000 daltons, pero presentan una heterogeneidad de la secuencia de aminoácidos del 40 % aproximadamente. Aunque el isotipo cardíaco también presenta una heterogeneidad de la secuencia de aminoácidos aproximada del 40 % con respecto a los isotipos esqueléticos, también tiene 31 residuos adicionales en la región amino-terminal, por lo que su peso molecular aproximado es de 24000 daltons.2,3

Algunos informes indican que la troponina I cardíaca se libera en el torrente sanguíneo a las horas del inicio de los síntomas del infarto cardíaco y que los niveles continúan siendo elevados durante varios días tras el infarto. Los datos recopilados de estos informes indican que los niveles de troponina I comienzan a ser anormales transcurridas 4–8 horas desde el inicio del dolor torácico, alcanzan el valor pico a las 12–16 horas y se mantienen elevados durante los 5–9 días posteriores al infarto.2,3,4 Según estos estudios, parece que los niveles de troponina I son elevados durante un periodo de tiempo que cubre la ventana diagnóstica tanto de CKMB como de LD.5 Asimismo, los estudios clínicos sugieren que la especificidad cardíaca de la troponina I es superior a la de CKMB en cuanto a la detección de lesiones miocárdicas en presencia de lesiones del músculo esquelético.6,7

La medición de los niveles de troponina I cardíaca proporciona una determinación sensible y específica de los daños miocárdicos en una ventana diagnóstica amplia. Se ha observado un aumento de los niveles de troponina I cardíaca en un amplio espectro de síndromes coronarios agudos, por ejemplo, IM con y sin onda Q y angina inestable. Se ha observado que el índice de mortalidad es considerablemente mayor en pacientes con IM sin onda Q y angina inestable con niveles detectables de troponina I cardíaca. Esto sugiere que la troponina I cardíaca puede utilizarse en la estratificación del riesgo de estos pacientes.8

Dada la alta especificidad y sensibilidad miocárdica de la troponina, el comité formado por la European Society of Cardiology (Sociedad Europea de Cardiología) y el American College of Cardiology (Colegio Americano de Cardiología) reconoce a la troponina como el marcador bioquímico idóneo de daños en el miocardio. El comité también recomienda un nivel de imprecisión (coeficiente de variación o CV) para los análisis de troponina <10 % en el percentil 99.9 Basado en la imprecisión y en otras características de rendimiento, el método CTNI del Sistema Dimension Vista® es un método de alta sensibilidad.

Principios del procedimiento: El método CTNI es un inmunoensayo quimioluminiscente “sándwich” homogéneo basado en la tecnología LOCI®. Los reactivos LOCI® incluyen dos reactivos de sintética en forma de bolas y un fragmento de anticuerpo monoclonal antitroponina I cardíaca biotinilado. El primer reactivo en forma de bolas (Sensibeads) está recubierto de estreptavidina y contiene un tinte fotosensibilizador. El segundo reactivo en forma de bolas (Chemibeads) está recubierto de un segundo anticuerpo monoclonal antitroponina I cardíaca y contiene un tinte quimioluminiscente. La muestra se incuba con el reactivo Chemibeads y el anticuerpo biotinilado para formar un complejo “sándwich” compuesto por bola, troponina I cardíaca y anticuerpo biotinilado. A continuación, se añade el reactivo Sensibeads, que se liga a la biotina para formar inmunocomplejos compuestos por un par de bolas. La iluminación del complejo a 680 nm genera oxígeno singlete a partir del reactivo Sensibeads que se difunde al reactivo Chemibeads, provocando una reacción quimioluminiscente. La señal resultante se mide a 612 nm y es una función directa de la concentración de troponina I cardíaca en la muestra.10.11,12

Reactivos

Pocillosa Forma Ingrediente Concentraciónb Origen

1–2 Líquido Anticuerpo biotiniladoc 8 µg/mL Monoclonal de ratón3–4 Líquido Chemibeads de troponina Ic 190 µg/mL Monoclonal de ratón7–8 Líquido Sensibeads de estreptavidinac 1500 µg/mL E. coli recombinante9–12 Líquido Tampón de análisis

a. Los pocillos están numerados consecutivamente desde el extremo ancho del cartucho.b. Valor nominal por pocillo en un cartucho.c. El título de anticuerpos y la actividad del reactivo pueden variar de un lote a otro.

Riesgos y seguridad

H317P280, P272, P302 + P352, P333 + P313, P501¡Advertencia!Puede provocar una reacción alérgica en la piel.

Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. Las prendas de trabajo contaminadas no podrán sacarse del lugar de trabajo. EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. En caso de irritación o erupción cutánea: Consultar a un médico. Eliminar el contenido y el recipiente de acuerdo con las normativas locales, regionales y nacionales. Contiene: 5-chloro-2-methyl-3(2h)-isothiazolone mixture with 2-methyl-3(2h)-isothiazolone

Las fichas de datos de seguridad (MSDS/SDS) están disponibles en siemens.com/healthcare

Precauciones: Las cubetas de reacción LOCI® usadas contienen fluidos corporales humanos por lo que deben manipularse con cuidado para evitar la ingestión y el contacto con la piel.Para uso diagnóstico in vitro

Preparación del reactivo: Todos los reactivos son líquidos y están listos para su uso.

Conservar a: 2–8 °C

Fecha de caducidad: Consulte en la caja la fecha de caducidad de los cartuchos de reactivos individuales cerrados. Los pocillos del cartucho sellados en el instrumento son estables durante 30 días.

Estabilidad de los pocillos abiertos: 7 días para los pocillos 1–12

Recogida y preparación de las muestras: Tipos de muestras recomendadas: suero o plasma (heparína de litio o de sodio).

Las muestras y controles estabilizados que contienen azida como conservante no se pueden utilizar.

Las muestras del suero o del plasma se puede recoger utilizando los procedimientos recomendados para la obtención de muestras de sangre mediante venopunción.13

Siga las instrucciones del fabricante del dispositivo de recogida de muestras para uso y procesamiento. 15

El análisis comparativo de 63 muestras recientes de suero o plasma heparinizado con litio genera la siguiente recta de regresión: plasma heparinizado con litio = 1.02 suero + 0.03 1. La concentración de CTNI del suero oscila entre 0.026 y 22.9 ng/mL [µg/L]. Se realizó un estudio similar entre la heparina de sodio y litio lo que dio lugar a la siguiente recta de regresión: plasma con heparina sódica = 0.99 plasma con heparina de litio + -0.05. La concentración de CTNI de la heparina de litio oscila entre 0.09 y 39.85 ng/mL [µg/L] para 50 muestras.

Antes de la centrifugación se debe producir una coagulación completa. El suero debe separarse físicamente de las células lo antes posible en el plazo límite de las dos horas posteriores a la recogida de la muestra.14,15 Las muestras deben estar libres de partículas.

Las muestras son estables como mínimo durante 2 días si se conservan a 2–8 °C u 8 semanas si se congelan a -20 °C o menos.16 Debe evitarse congelar y descongelar repetidamente las muestras.

El objetivo de la información del almacenamiento de muestras es orientar a los usuarios; sin embargo, los usuarios pueden validar sus propios procedimientos para almacenar muestras de pacientes.

ProcedimientoMateriales suministrados

Cartucho de reactivos CTNI Flex®, Referencia K6421

Materiales necesarios que no se suministran

CTNI CAL, Referencia KC678

CTNI SDIL, Referencia KD692

Materiales de control de calidadProceso de análisis

El Sistema Dimension Vista® realiza automáticamente el muestreo, la dispensación de reactivos, la mezcla y el procesamiento. Para obtener más detalles sobre este proceso, consulte el Manual del usuario de Dimension Vista®.

Condiciones del análisis

Volumen de muestra (dispensado en el cubilete de reacción)

20 µL

Volumen de reactivo Chemibeads 20 µLVolumen de reactivo de anticuerpo biotinilado 20 µLVolumen de reactivo Sensibeads 13 µLVolumen de tampón de análisis 100 µLTemperatura 37.0 °CTiempo de reacción 10 minutosLongitud de onda 680 y 612 nmTipo de medición Quimioluminiscencia

CalibraciónMaterial de calibración Calibrador CTNI, Referencia KC678Esquema de calibración Seis niveles, n=3Unidades ng/mL [µg/L]d

(ng/mL x 1) =[µg/L]Niveles de calibración típicos Nivel 1 (calibrador A): 0 ng/mL [µg/L]

Nivel 2 (calibrador B): 0.5 ng/mL [µg/L] Nivel 3 (calibrador C): 4.0 ng/mL [µg/L] Nivel 4 (calibrador D): 8.0 ng/mL [µg/L] Nivel 5 (calibrador E): 20.0 ng/mL [µg/L] Nivel 6 (calibrador F): 41.0 ng/mL [µg/L]

Frecuencia de calibración Cada 30 dias para cualquier loteEl intervalo de la calibración se puede ampliar basándose en una verificación aceptable de la calibración.

Se requiere una nueva calibración: • Para cada nuevo lote de cartuchos de reactivos Flex®• Después de la realización de importantes tareas

de mantenimiento o servicio, si así lo indican los resultados del control de calidad

• Tal como se indica en los procedimientos de control de calidad del laboratorio

• Cuando sea necesario por normativa gubernamentald. Las unidades del Sistema internacional de medidas [unidades SI] se indican entre corchetes.

Consulte las secciones sombreadas: Información actualizada desde la versión de 2019-06.

Control de calidad

Siga las reglamentaciones gubernamentales o los requisitos de acreditación para conocer la frecuencia de control de calidad. Al menos una vez cada día que se utilice, analice dos niveles de un producto de control de calidad (CC) con concentraciones de troponina I cardíaca conocidas. Siga los procedimientos internos de CC de su laboratorio si los resultados obtenidos están fuera de los límites aceptables.

Resultados: El instrumento calcula la concentración de troponina I cardíaca en ng/mL [µg/L] utilizando el patrón de cálculo descrito en el Manual del usuario de Dimension Vista®.

Los resultados de este análisis deben interpretarse siempre conjuntamente con la historia clínica del paciente, la presentación clínica y otros hallazgos.

Intervalo de medición analítica AMR: 0.015–40 ng/mL [µg/L]

Es el intervalo de los valores del analito que se pueden medir directamente en la muestra sin dilución alguna ni pretratamiento que no forme parte del proceso analítico habitual, y equivale al intervalo del ensayo.

• En las muestras con resultados superiores a 40 ng/mL [µg/L] debe repetirse la dilución.

Dilución manual: diluya con Diluyente de muestras CTNI, referencia KD692, para obtener resultados dentro del intervalo informable. Introduzca en el instrumento un factor de dilución que no sea superior a 1:5. Repita el ensayo. La lectura resultante se corrige para la dilución.

Autodilución (AD): La autodilución requiere CTNI SDIL (ref. KD692). El volumen de muestra para autodilución es de 20 µL (factor de dilución = 5) para suero/plasma para obtener resultados dentro del rango de medición analítico.

• El instrumento considerará las muestras con resultados inferiores a 0.015 ng/mL [µg/L] “inferiores a 0.015 ng/mL [µg/L]”.

Limitaciones del procedimiento

Las muestras de pacientes pueden contener anticuerpos heterófilos que pueden reaccionar en los inmunoensayos y dar lugar a resultados falsamente elevados o reducidos. Este ensayo está diseñado para minimizar la interferencia de los anticuerpos heterófilos. Sin embargo, no se puede garantizar la eliminación completa de esta interferencia en las muestras de los pacientes. Un resultado que es inconsistente con el cuadro clínico debería ser interpretado con precaución.17,28

El sistema del instrumento para presentar informes incluye indicadores y comentarios que proporcionan al usuario información relativa a los errores de procesamiento del instrumento, información del estado de éste y posibles errores en los resultados de troponina I cardíaca. Consulte el Manual del usuario de Dimension Vista® para conocer el significado de los indicadores y comentarios de los informes. Cualquier informe que contenga indicadores y/o comentarios se debe tratar siguiendo el manual de procedimiento de su laboratorio y no se debe informar sobre él.

Resultados esperados: En un estudio de 199 muestras de suero de individuos aparentemente sanos, el intervalo de referencia que abarca el percentil 99 del método CTNI del sistema Dimension Vista® fue el siguiente:

N Intervalo que abarca el percentil 99199 0.00–0.045 ng/mL [µg/L]

Cada laboratorio debe establecer sus propios valores esperados para CTNI procesados en el Sistema Dimension Vista®.

Interpretación de los resultados

La evaluación temporal de la concentración de troponina I cardíaca constituye una herramienta de gran utilidad en el diagnóstico del infarto de miocardio. Las muestras tomadas consecutivamente a un paciente con infarto de miocardio reflejan un aumento y posterior disminución de la concentración de troponina I cardíaca, observados también con otros marcadores del infarto de miocardio como CK-MB. Sin embargo, al contrario de lo que ocurre con CK-MB, los valores de troponina I cardíaca generalmente se mantienen por encima del intervalo de referencia durante varios días (5–9).2,3,4 La National Academy of Clinical Biochemistry (NACB) recomienda que el muestreo en serie se distribuya del modo siguiente: en el momento de la admisión, a las 2–4 horas, a las 6–9 horas y a las 12–24 horas (opcional).19 Los ensayos clínicos revelan que un nivel elevado de troponina I cardíaca es de gran ayuda como indicador de lesión miocárdica para una amplia variedad de síndromes coronarios agudos, como la angina inestable y el infarto de miocardio con y sin onda Q.4,5,6,7,8 Cada institución debe establecer sus propios intervalos de referencia y valores límite para garantizar la representación adecuada de poblaciones específicas, teniendo en cuenta las prácticas actuales y los criterios para el diagnóstico del IAM de cada institución. Otras enfermedades que pueden conducir a lesiones miocárdicas, como la contusión cardíaca y la miocarditis, tiene la capacidad de provocar un aumento de las concentraciones de circulación de proteínas encontradas en el miocardio, incluida la troponina I cardíaca. A la hora de interpretar los resultados, es preciso tener en cuenta este tipo de factores.20

Estratificación del riesgo: Se ha observado un aumento estadístico significativo de la mortalidad como una función de niveles en aumento de la troponina I cardíaca. En el caso de los pacientes con síndromes coronarios agudos, como una angina inestable o infarto de miocardio sin onda Q, los niveles de troponina I cardíaca proporcionan información de pronóstico útil y ayuda para la detección temprana de aquellos pacientes con un mayor riesgo de muerte.8 Un comité conjunto formado por miembros del American College of Cardiology y la American Heart Association (AHA) ha definido el riesgo de muerte a corto plazo y el IM no mortal en relación con el nivel de troponina del modo siguiente: riesgo alto con niveles elevados (>0.1 ng/mL), riesgo intermedio con niveles ligeramente elevados (<0.1 ng/mL) y riesgo bajo con niveles normales.20

Definición de IAM recomendada por ESC/ACC: Un comité formado por la Sociedad Europea de Cardiología (ESC) y el American College of Cardiology (ACC) ha recomendado que se vuelva a definir el infarto de miocardio (IM). El comité define el IM como el típico aumento y gradual caída de la troponina o el aumento y caída más rápidos de CK-MB en conjunción con síntomas isquémicos, ondas Q patológicas en el electrocardiograma, depresión o elevación del segmento ST en el electrocardiograma y/o intervención de la arteria coronaria. Además, el comité recomienda que un nivel aumentado de troponina debe definirse como aquella medición que supera el percentil 99 del intervalo de referencia y que una imprecisión (coeficiente de variación) <10 % para las medidas en el percentil 99 es aceptable.9 El percentil 99 del intervalo de referencia del método CTNI del sistema Dimension Vista® se determinó en 0.045 ng/mL [µg/L] y se calculó que el límite CV del 10 % era <0.04 ng/mL [µg/L].

Definición de IAM de la OMS: La definición de IAM tal como la formula la Organización Mundial de la Salud (OMS) requiere el cumplimiento de dos de los siguientes criterios para la confirmación del infarto agudo de miocardio: cambios en el electrocardiograma compatibles con un infarto, alteraciones temporales en los niveles de marcadores cardíacos y dolor precordial de duración significativa (≥ 20 minutos).21 En un estudio22 realizado con el ensayo de troponina I cardíaca Stratus® II, los valores límite de troponina I en el intervalo 0.6–1.5 ng/mL eran coherentes con los criterios de la OMS para IAM. En este estudio participaron varias instituciones e incluyó a 314 pacientes que presentaban dolor torácico, a 128 de los cuales se les diagnosticó IAM. A fin de cumplir los criterios de biomarcador para IAM de este estudio, era preciso tener un valor de CKMB superior a 5.6 ng/mL acompañado de un cambio temporal de al menos 3 ng/mL. Se observó que tanto la sensibilidad clínica como la especificidad clínica eran superiores al 90 % en este intervalo de valores límite si se tomaban muestras en serie a los pacientes con dolor torácico (consulte la figura a continuación). Este estudio se proporciona como referencia basada en la comparabilidad de los resultados del método de troponina I cardíaca Stratus® II y el ensayo de troponina I cardíaca Dimension® RxL (Dimension® RxL = 1.10 Stratus® II – 0.075; r = 0.992; n= 111; intervalo= 0–47.9 ng/mL) y la comparabilidad de los resultados de los ensayos de troponina I cardíaca Dimension® RxL y Dimension Vista® (los datos incluidos en el apartado Comparación de métodos de este prospecto del producto). Es importante señalar que los valores límite de la troponina I en el intervalo 0.6–1.5 ng/mL representan un nivel superior de lesiones miocárdicas que el valor límite del percentil 99 recomendado por la Sociedad Europea de Cardiología y el American College of Cardiology (ESC /ACC). Los intervalos indicados anteriormente deben utilizarse únicamente como referencia.

90

92

94

96

98

100

0.60 0.75 0.90 1.05 1.20 1.35 1.50 1.65


Per

cent

age



Sensibilidad y especificidad como una función del valor limite de IAM

Valor límite de troponina I (ng/mL)

Porc

enta

je

Sensibilidad(%)Especificidad(%)

Repetibilidad máxima observada

Las desviaciones estándar máximas que se esperan en función de los datos recogidos para la repetibilidad (precisión intraserie) utilizando 5 duplicados con las siguientes concentraciones de troponina I cardíaca son:

Concentración de CTNI DE máxima aceptable

0.5 ng/mL [µg/L] 0.063 ng/mL [µg/L]8.0 ng/mL [µg/L] 0.939 ng/mL [µg/L]

Es posible que el sistema no funcione correctamente si se excede la DE máxima aceptable.

Características específicas de funcionamiento

Los siguientes datos representan el rendimiento típico para el sistema Dimension Vista®.

Precisión23, e

MaterialMedia

ng/mL [µg/L]

Desviación estándar (% CV)

Repetibilidad Intralab.

Pool de suero 0.123 0.005 (4.2) 0.007 (5.8)Pool de suero 0.55 0.012 (2.3) 0.016 (2.9)Pool de suero 31.4 0.95 (3.0) 1.18 (3.8)Liquichek™ Cardiac Markers Control LT

Nivel 2 Nivel 3

0.28 1.41

0.016 0.021

(5.8) (1.5)

0.019 0.049

(6.6) (3.4)

e. Se utilizó CLSI/NCCLS EP5-A2. Durante 20 días, se analizaron cada día dos ensayos independientes, con dos muestras de prueba para cada material de prueba. Liquichek™ Cardiac Markers Control LT es una marca comercial de Bio-Rad Laboratories, Irvine, CA. 92618, USA.

Comparación de métodos24

Estadísticas de regresiónf

Método comparativo PendienteIntersección ng/mL [µg/L]

Coeficiente de correlación n

Sistema Dimension®RxL 1.0150 -0.003 0.993 197g

f. Se utilizó CSLI/NCCLS EP9-A2. El método utilizado para ajustar la línea de regresión lineal fue el de los mínimos cuadrados.

g. El intervalo de 197 valores del estudio de correlación fue 0.0–35.72 ng/mL [µg/L].

Especificidad

Interferencia de hemólisis, ictericia, lipemia (HIL)

Se evaluó la presencia de sustancias de interferencia con el método CTNI de acuerdo con CLSI/NCCLS EP7-A2.25 Las inexactitudes sistemáticas (deriva) son la diferencia en los resultados entre la muestra de control (sin sustancia de interferencia) y la muestra de prueba (con sustancia de interferencia) expresada en porcentaje. Un valor de deriva superior al 10 % se considera interferencia.

Sustancia analizada Concentración de sustanciaConcentración de cTnI

ng/mL [µg/L] % Deriva

Hemoglobina (hemolizado) Hemoglobina (monómero) 500 mg/dL [0.31 mmol/L] 0.945 <10

Bilirrubina (no conjugada) 40 mg/dL [684 µmol/L] 0.907 <10Bilirrubina (conjugada) 40 mg/dL [684 µmol/L] 0.879 <10Lipemia (Intralipid®) Colesterol (lipemia)

3000 mg/dL [33.9 mmol/L] 500 mg/dL [5.7 mmol/L]

0.970 0.941

<10 <10

Intralipid®es una marca comercial registrada de Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Alemania.* Los resultados del analito no deben corregirse basándose en esta deriva.


Sustancias que causan interferencia

Se valoró el método CTNI en términos de interferencia según la directriz EP7-A2 del CLSI/NCCLS.29 La deriva es la diferencia en los resultados entre la muestra de control (sin el interferente) y la muestra analizada (que contiene el interferente) expresada en porcentaje. Se considera interferencia una deriva superior al 10%.

Concentración de analitos

Nivel de análisis de biotina (ng/mL)

50 100 250 500 1200

% Deriva

0.046 ng/mL -5 -13 -31 -67 -83

1.5 ng/mL -4 -6.2 -27.8 -90.8 Por debajo de AMR

• Las muestras que contienen biotina en una concentración de 250 ng/mL han demostrado un cambio igual o inferior al 10% en los resultados. Las concentraciones de biotina superiores a esta pueden producir resultados falsamente disminuidos en las muestras de los pacientes.

• La ingesta alimenticia de biotina recomendada en adultos es de 30 µg/día. Los suplementos alimentarios sin receta que se anuncian para mejorar el estado del cabello, la piel y las uñas pueden contener 5–100 mg de biotina, y lo que se recomienda es tomar varias píldoras al día. En estudios farmacocinéticos en adultos sanos se ha observado que, en individuos que toman 5 mg, 10 mg y 20 mg de biotina, las concentraciones en suero de biotina pueden alcanzar hasta 73 ng/mL, 141 ng/mL y 355 ng/mL, respectivamente.26 Los individuos que toman hasta 300 mg de biotina al día pueden presentar unos niveles de biotina en plasma de hasta 1160 ng/mL.27

Sustancias sin interferencia

Las siguientes sustancias no tienen un efecto significativo (inferior al 10%) al añadirse a muestras con aproximadamente 1.5 ng/mL [µg/L] de CTNI en las concentraciones indicadas:

Compuesto Concentración de prueba Unidades SIAcetaminofeno 20 mg/dL 1323 µmol/LAlopurinol 2.5 mg/dL 184 µmol/LAmikacina 15 mg/dL 256 µmol/LAmpicilina 5 mg/dL 143 µmol/LÁcido ascórbico 3 mg/dL 170 µmol/LAtenolol 1.0 mg/dL 37.6 µmol/LCafeína 10 mg/dL 515 µmol/LCarbamacepina 12 mg/dL 508 µmol/LCaptopril 5.0 mg/dL 230 µmol/LColesterol 500 mg/dL 12.9 mmol/LCloranfenicol 25 mg/dL 774 µmol/LClordiacepóxido 2 mg/dL 67 µmol/LClorpromacina 5 mg/dL 157 µmol/LCimetidina 10 mg/dL 396 µmol/LCinnarizina 3.0 mg/dL 81.4 µmol/LCreatinina 30 mg/dL 2652 µmol/LCiclosporina A 4000 ng/mL 3.3 µmol/LDextrano 75 2500 mg/dL 333 µmol/LDiazepam 2 mg/dL 70 µmol/LDigoxina 5 ng/mL 6.4 nmol/LDopamina 45 mg/dL 2.4 mmol/LEritromicina 20 mg/dL 272 µmol/LEtanol 350 mg/dL 76 mmol/LEtosuximida 30 mg/dL 2125 µmol/LFurosemida 2 mg/dL 61 µmol/LGentamicina 12 mg/dL 251 µmol/LHeparina de sodio 8 U/mL 8000 IU/LIbuprofeno 40 mg/dL 1939 µmol/LDinitrato de isosorbida 6.0 mg/dL 254 µmol/LLidocaína 6 mg/dL 256 µmol/LLipemia (triglicéridos) 3000 mg/dL 33.9 mmol/LLitio 2.3 mg/dL 3.3 mmol/LL-tiroxina 60 µg/dL 0.77 µmol/LMetildopa 2.5 mg/dL 118 µmol/LNicotina 2 mg/dL 123 µmol/LNifedipino 6.0 mg/dL 173 µmol/LPenicilina G 25 U/mL 25000 U/LPentobarbital 10 mg/dL 442 µmol/LFenobarbital 15 mg/dL 646 µmol/LFenitoína 10 mg/dL 396 µmol/LPrimidona 10 mg/dL 458 µmol/LPropoxifeno 0.4 mg/dL 12 µmol/LPropranolol 0.15 mg/dL 5.8 µmol/LProteína (albúmina humana) 6 g/dL 60 g/LProteína (IgG humana) 3.5 g/dL 5 g/LÁcido salicílico 50 mg/dL 3.6 mmol/LTeofilina 25 mg/dL 1388 µmol/LUrea 500 mg/dL 83.3 mmol/LÁcido úrico 20 mg/dL 1.2 mmol/LÁcido valproico 50 mg/dL 3467 µmol/LVerapamilo 16 mg/dL 351.6 µmol/L

Efecto prozona

Los inmunoensayos “sándwich” de una sola fase son susceptibles a una dosis alta de “efecto prozona”, en el que un exceso de antígeno impide la unión simultánea de los anticuerpos de captura y de detección en una única molécula de analito.18 El método CTNI no presenta efecto prozona alguno hasta 1000 ng/mL [µg/L].

Reactividad cruzada

El método CTNI es específico para la troponina I cardíaca. Se evaluó la reactividad cruzada de la troponina I cardíaca en presencia de otras proteínas miofibrilares del músculo humano. El porcentaje de reactividad cruzada se calculó de la siguiente forma:

analito medido – analito de control (ng/mL[µg/L]) % reactividad cruzada = –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 metabolito añadido

Reactante Concentración Unidades SI Porcentaje de reactividad cruzadaTroponina C cardíaca 1000 ng/mL 1000 µg/L AucunTroponina T (cardíaca humana) 1000 ng/mL 1000 µg/L 0.06Troponina I (esquelética humana) 1000 ng/mL 1000 µg/L 0.12Troponina I (esquelética humana) 280 ng/mL 280 µg/L 0.13

Recuperación:

Se analizaron muestras de suero que contenían niveles elevados y bajos de CTNI, utilizando diferentes volúmenes de mezcla. Los valores observados se compararon posteriormente con los valores esperados para cada mezcla.

Mezcla 1:1Mezcla de muestra

Suero CTNI Muestra 1

Suero CTNI Muestra 2

Esperado:

Obtenido:

Recuperación porcentualde CTNI

A 16.03 0.001 8.02 7.95 99.2B 11.275 0.845 6.1 6.00 99.1

Sensibilidad analítica: 0.015 ng/mL [µg/L]

Esta sensibilidad se define como la concentración correspondiente al valor medio (n=20) más dos desviaciones estándar del calibrador CTNI de nivel bajo A (0 ng/mL [µg/L]) o una muestra que no contenga CTNI.

Límite de cuantificación (Sensibilidad funcional): Evaluación del límite CV del 10 %

Se evaluó la sensibilidad funcional mediante la determinación de la imprecisión total de las muestras de suero con TnI natural. Esta imprecisión total se midió realizando un ensayo ANOVA diario por duplicado durante 20 días. El límite de cuantificación (sensibilidad funcional /perfil de imprecisión) del método de troponina de Dimension Vista® corresponde a un coeficiente de variación (CV) del 10 % con una concentración de troponina I <0.04 ng/mL [µg/L]. La imprecisión, tal como refleja el gráfico del estudio de imprecisión, es indicativa de una alta sensibilidad del método.

Clave de los Símbolos: Ver hoja adjunta.

Bibliografía: Ver hoja adjunta.

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% Total CV

10% CV

% T

otal

CV

Recuperación de CTNI ng/mL [µg/L]

Sensibilidad funcional de CTNI

Bibliography / Literatur / Bibliographie / Bibliografia / Bibliografía:

1. Zot AS, Potter JD, Structural aspects of troponin-tropomyosin regulation of skeletal muscle contraction. Ann Rev Biophys 1987; Chem. 16: 535-559.

2. Cummins B, Auckland MS, Cummins P, Cardiac-specific troponin-I radioimmunoassay in the diagnosis of acute myocardial infarction. American Heart Journal 1987; 113 (6): 1333-1344.

3. Bodor GS, Porter S, Landt Y, Ladenson JH. Development of monoclonal antibodies for an assay of cardiac troponin-I and preliminary results in suspected cases of myocardial infarction. Clinical Chemistry 1992; 38(11):2203-2214.

4. Larue C, et al., Cardiac-specific immunoenzymometric assay of troponin-I in the early phase of acute myocardial infarction. Clinical Chemistry 1993; 39(6): 972-979.

5. Bodor GS, Cardiac troponin-I: A highly specific marker for myocardial infarction. Journal of Clinical Immunoassay 1994; 17(1): 40-44.

6. Adams JE, et al., Cardiac troponin-I: A marker with high specificity for cardiac injury. 1993; Circulation 88(1): 101-106.

7. Adams JE, et al., Diagnosis of perioperative myocardial infarction with measurement of cardiac troponin-I. New England Journal of Medicine 1994; 330 (10): 67-674.

8. Antman EM, et al., Cardiac specific troponin-I levels to predict the risk of mortality in patients with acute coronary syndromes. New England Journal of Medicine 1996; 335(18): 1342-1349.

9. Myocardial Infarction redefined—A consensus Document of the Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology committee for the Redefinition of Myocardial Infarction. J Am Coll Cardiol 2000, 36 (3): 959 – 69.

10. Ullman EF, Kirakossian H, Switchenko AC, Ishkanian J, et. al., Luminescent oxygen channeling assay (LOCI®): sensitive, broadly applicable homogenous immunoassay method. Clin Chem 42:9 1996, 1518-1526.

11. Ullman EF, Kirakossian H, Sharat S, Ping Wu Z, Irvin BR, et. al Luminescent oxygen channeling immunoassay: Measurement of particle binding kinetics by chemiluminescence. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol 91, pp.5426-5430, June 1994 Biochemistry.

12. Ullman, EF Homogenous Immunoassays The immunoassay Handbook, 2nd ed., David Wild editor, 2001 192-194.

13. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard-Fifth Edition. CLSI/NCCLS document H3-A5 (ISBN 1-56238-515-1). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898, 2003.

14. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline-Third Edition. CLSI/NCCLS document H18-A3 (ISBN 1- 56238-555-0). CLSI, 940 West Valley Road, Suite1400, Wayne, PA 19087-1898, 2004.

15. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Tubes and Additives for Venous Blood Specimen Collection; Approved Standard - Fifth Edition. CLSI/NCCLS document H1-A5 (ISBN 1-56238-519-4). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2003.

16. Dade Behring Stratus® CS Cardiac Troponin I product instructions for use, rev 2004-07-02.17. Kricka LJ, Human anti-animal antibody interference in immunological assays. Clin Chem 1999; 45 (7):

942-956.18. Ryall RG, Story CJ, Turner DR. Reappraisal of the causes of the “hook effect” in two-site immunoradiometric

assays. Anal Biochem 1982:127:308.19. Wu A, et al. National Academy of Clinical Biochemistry Standards of Laboratory Practice: Recommendations

for the Use of Cardiac Markers in Coronary Artery Diseases. Clin Chem 1999;45(7):104-1121.20. Braunwald, E. et al. ACC/AHA Practice Guidelines: ACC/AHA Guideline Update for the Management of Patients

With Unstable Angina and Non-ST Segment Elevation Myocardial Infarction. American College of Cardiology and American Heart Association 2002.

21. World Health Organization. Report on the Joint International Society and Federation of Cardiology -World Health Organization Task Force on Standardization of Clinical Nomenclature. Nomenclature and criteria for diagnosis of ischemic heart disease. Circulation 1979; 59:607-609.

22. Stratus® Cardiac Troponin-I Fluorometric Enzyme Immunoassay product insert, rev E. 5/9 23. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Evaluation of Precision Performance of Quantitative

Measurement Methods; Approved Guideline- Second Edition. CLSI/NCCLS Document EP5-A2 (ISBN 1-56238-542-9) CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA, 19087-1898 USA, 2004.

24. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline- Second Edition. CLSI/NCCLS document EP9-A2 (ISBN 1-56238-472-4). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2002.

25. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline-Second Edition. CLSI/NCCLS document EP7-A2 (ISBN 1-56238-584-4). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2005.

26. Grimsey P, Frey N, Bendig G, et al. Population pharmacokinetics of exogenous biotin and the relationship between biotin serum levels and in vitro immunoassay interference. Int. J. Pharmacokinet. 2017;2(4): 247–256.

27. Piketty ML, Prie D, Sedel F, et al. High-dose biotin therapy leading to false biochemical endocrine profiles: validation of a simple method to overcome biotin interference. Clin Chem Lab Med. 2017;55(6):817-825

28. Vaidya HC, Beatty BG. Eliminating interference from heterophilic antibodies in a two-site immunoassay for creative Kinane MB by using F(ab´)

2 conjugate and polymouse IgG. Clin Chem 1992; 38:1737-1742.

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