daftar isi - sinta.unud.ac.id file3.2.2 bahan kimia ... 3.7 analisis data ..... 25 bab 4 hasil dan...
TRANSCRIPT
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................... ii
TIM PENGUJI SIDANG SKRIPSI ............................................................. iii
ABSTRAK .................................................................................................. iv
ABSTRACT ................................................................................................ v
KATA PENGANTAR ................................................................................. vi
DAFTAR ISI ................................................................................................ viii
DAFTAR TABEL ........................................................................................ xi
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xii
BAB 1 PENDAHULUAN ....................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ...................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................. 4
1.3 Tujuan Penelitian .................................................................. 4
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................. 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 6
2.1 Tinospora sinensis ................................................................. 6
2.2 Inflamasi ................................................................................ 8
2.3 Pengobatan Inflamasi ............................................................. 10
2.3.1 Anti-Inflamasi Non-Steroid (AINS) ............................. 10
2.3.2 Kortikosteroid .............................................................. 10
2.4 Metode Pengujian Aktivitas Antiinflamasi ............................ 11
ii
2.4.1 Model inflamasi akut .................................................... 11
2.5 Hewan Uji ............................................................................ 13
2.6 Karagenan ............................................................................. 13
2.7 Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) ............. 15
BAB 3 METODE PENELITIAN............................................................. 18
3.1 Rancangan Penelitian ............................................................. 18
3.2 Bahan Penelitian .................................................................... 18
3.2.1 Bahan uji ...................................................................... 18
3.2.2 Bahan kimia ................................................................. 19
3.3 Alat Penelitian ...................................................................... 19
3.3 Tempat Penelitian ................................................................. 19
3.5 Prosedur Penelitian ................................................................ 20
3.5.1 Penyiapan bahan ….…………………………………… 20
3.5.2 Ekstraksi batang ............................................................ 20
3.5.3 Uji fitokimia.................................................................. 20
3.5.4 Analisis dengan GC-MS ............................................... 22
3.5.5 Uji aktivitas antiinflamasi.............................................. 22
3.6 Perhitungan Persen Inflamasi ................................................. 24
3.7 Analisis Data ......................................................................... 25
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Penyiapan Sampel .................................................................. 26
4.2 Ekstraksi Batang Antawali (Tinospora sinensis L.) ................ 26
iii
4.3 Persiapan Hewan Uji ............................................................. 26
4.4 Optimasi Lambda Karagenan 1% (b/v) .................................. 27
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antiinflamasi ...........................................
4.6 Hasil Identifikasi Ekstrak Etanol Batang Antawali
(Tinospora sinensis L.) secara Fitokimia ................................ 35
4.7 Hasil Identifikasi Ekstrak Etanol Batang Antawali
(Tinospora sinensis L.) dengan GC-MS.................................. 36
BAB 5 SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan ............................................................................... 41
5.2 Saran ..................................................................................... 41
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 43
LAMPIRAN ................................................................................................ 49
iv
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Volume udema rata-rata telapak kaki tikus (mL) setelah
diinduksi dengan lambda karagenan 1% (b/v) ......................... 27
Tabel 4.2 Persentase inflamasi rata-rata telapak kaki tikus (%) setelah
diinduksi dengan lambda karagenan 1% (b/v) ......................... 28
Tabel 4.3 Hasil identifikasi ekstrak etanol batang antawali secara
fitokimia ................................................................................ 35
Tabel 4.4 Dugaan senyawa-senyawa penyusun ekstrak etanol batang
antawali berdasarkan pendekatan database ............................. 37
v
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tinospora sinensis .................................................................. 6
Gambar 2.2 Kappa, Iota, dan Lambda Karagenan ...................................... 14
Gambar 2.3 Skema GC-MS ....................................................................... 16
Gambar 3.1 Skema rancangan penelitian ................................................... 18
Gambar 4.1 Persentase inflamasi rata-rata pada optimasi
lambda karagenan .................................................................. 29
Gambar 4.2 Persentase inflamasi rata-rata pada pengujian
aktivitas antiinflamasi ............................................................ 30
Gambar 4.3 Persentase hambatan inflamasi rata-rata pada pengujian
aktivitas antiinflamasi ............................................................ 31
Gambar 4.4 Kromatogram ekstrak etanol batang antawali
(Tinospora sinensis L.) ........................................................... 36
vi
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas antiinfamasi dari ekstrak
etanol batang antawali (Tinospora sinensis) dan mengidentifikasi kandungan
kimianya. Uji aktivitas antiinflamasi dilakukan secara in vivo dengan metode
induksi karagenan, sedangkan identifikasi kandungan kimia dilakukan dengan
GC-MS. Pada penelitian ini menggunakan 25 ekor tikus putih jantan galur Wistar
yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kontrol negatif (P0), kontrol positif (P1)
yang diberi natrium diklorofenak 5 mg/kg BB, kelompok ekstrak uji (P2, P3, dan
P4) dengan dosis 125 mg/kg BB, 250 mg/kg BB, dan 500 mg/kg BB. Hasil uji
aktivitas antiinflamasi menunjukkan bahwa semakin rendah dosis yang diberikan,
maka akan menghasilkan persentase hambatan inflamasi yang semakin besar.
Pemberian dosis 125 mg/kg BB mampu menghasilkan persentase hambatan
tertinggi, diikuti dengan dosis 250 mg/kg BB, serta 500 mg/kg BB yaitu masing-
masing sebesar 64,71%; 52,94%; dan 29,41% pada menit ke-360. Secara statistik
dengan uji One Way ANOVA menunjukkan nilai p<0,05 yang berarti terdapat
perbedaan yang bermakna pada persentase hambatan inflamasi kelompok kontrol
negatif (P0) dengan kelompok perlakuan (P1, P2, P3, dan P4). Pada ekstrak etanol
batang antawali terdapat 8 senyawa yang teridentifikasi dengan GC-MS
berdasarkan database. Senyawa-senyawa tersebut antara lain asam
heksadekanoat, asam oktadekanoat, heksazinon, β-sitosterol, 5,15,24-Trihidroksi
Bistetrahidrofuran Asetogenin, asam 7-ketodeoksiholat, Tetrahidroksagamavunon-5,
dan Bis-(2-ethylhexyl) heksandioat yang berperan dalam penghambatan inflamasi baik
secara bersama-sama maupun individu. Ektrak etanol batang antawali aktif sebagai
antiinflamasi dengan ED50 yaitu sebesar 51,521 mg/kgBB.
Kata Kunci : antawali, karagenan, GC-MS, uji aktivitas antiinflamasi
vii
ABSTRACT
This study aimed to evaluate the antiinflammatory activity of ethanolic
extract of antawali stem (Tinospora sinensis) and to identify its phytochemical
constituents. In vivo antiinflammatory activity test was performed on Wistar rat
oedem induced by carrageenan, while chemical content identification was done
with GC-MS. In this study, 25 male Wistar strains were divided into 5 groups :
negative control (P0), positive control (P1), test extract group (P2, P3, and P4) with
doses of 125 mg/kg BW, 250 mg/kg BW, and 500 mg/kg BW. Antiinflammatory
activity test results showed that the lower the dose given, it will show a greater
percentage of inflammatory inhibition. The dose of 125 mg/kg BW was able to
produce the highest percentage of inhibition, followed by doses of 250 mg/kg
BW, and 500 mg/kg BW at 64.71%; 52.94%; and 29.41% in the 360th minute. The
extract of ethanol stem antawali active as antiinflamasi with ED50 that is equal to
51,521 mg/kg BB. Statistically with One Way ANOVA test showed p value
<0,05. In the extract of ethanol stem antawali there were 8 compounds identified
with GC-MS, such as hexadecanoic acid, octadecanoic acid, hexazinone, β-
sitosterol, 5,15,24-trihydroxy bistetrahidrofuran acetogenin, 7-ketodeoxyholic
acid, tetrahidroksagamavunon-5, and bis- (2-ethylhexyl) hexandioate.
Keywords : Tinospora sinensis, carrageenan, GC-MS, antiinflammatory activity test
BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Inflamasi merupakan respon biologis kompleks dari jaringan pembuluh
darah yang mengaktivasi sel darah putih, pelepasan sistem imun kimia seperti
sitokin, serta pelepasan mediator inflamasi seperti prostaglandin (Cotran et al.,
2001) karena adanya cedera, infeksi, pengaruh lingkungan, perubahan sel, atau
meningkatnya ROS (Reactive Oxygen Species). Inflamasi juga merupakan upaya
protektif tubuh untuk menghilangkan stimulus yang berbahaya dan memulai
proses penyembuhan terhadap jaringan (Denko, 1992).
Lima tanda utama (cardinal signs) yang umumnya muncul sebagai respon
inflamasi, yaitu nyeri (dolor), panas (calor), kemerahan (rubor), bengkak (tumor),
dan hilangnya fungsi (functio laesa). Berbagai respon inflamasi tersebut dapat
disebabkan oleh meningkatnya aliran darah (panas dan kemerahan), akumulasi
cairan (bengkak), pelepasan berbagai senyawa yang merangsang syaraf nyeri
(nyeri), dan kombinasi dari beberapa respon inflamasi lainnya (Mayer et al.,
2006).
Untuk mengurangi dampak inflamasi, salah satunya dapat digunakan obat
modern maupun obat tradisional. Obat modern yang biasa digunakan sebagai
antiinflamasi adalah obat golongan AINS (Antiinflamasi Non Steroid), namun
demikian obat ini memiliki efek samping pada tukak lambung. Untuk mengurangi
efek samping rasa nyeri pada tukak lambung tersebut, obat tradisional yang
berasal dari tumbuhan merupakan alternatif yang dapat dimanfaatkan. Umumnya
secara empiris pemanfaatan obat tradisional oleh masyarakat telah terbukti
2
khasiatnya dan relatif aman terhadap efek samping, namun masih perlu dikaji dan
dikembangkan sehingga dapat bermanfaat secara optimal untuk peningkatan
kesehatan masyarakat (Tjokronegoro dan Baziad, 1992; Handayani, 2006).
Salah satu tumbuhan obat tradisional yang memiliki aktivitas antiinflamasi
adalah brotowali (Tinospora crispa). Secara tradisional, brotowali yang memiliki
rasa pahit sering dimanfaatkan untuk mengobati rematik, asam urat, memar,
demam, serta sebagai penambah nafsu makan (Dalimartha, 2008). Rasa pahit pada
brotowali memungkinkan adanya sifat analgetik dan umumnya obat analgetik
juga memiliki khasiat antipiretik atau antiinflamasi (Goodman dan Gilmand,
1985).
Aktivitas antiinflamasi dari tumbuhan brotowali diduga karena adanya
kandungan kimia golongan alkaloid, saponin, glikosida, tanin, polifenol,
flavonoid, dan senyawa pikroretin, berberin, tinokrisposida, serta kolumbin
(Heyne, 1950; Sudarsono et al., 2006). Ekstrak etanol batang brotowali memiliki
kandungan total flavonoid setara dengan senyawa rutin sebesar 3,71±0,05%
(Harwoko, 2016). Ekstrak metanol batang brotowali memberikan efek antipiretik
terhadap tikus putih jantan pada dosis 5,00 dan 7,50 µg/kg BB, dan dosis
10,00µg/kg BB memberikan efek antipiretik yang setara dengan parasetamol
(asetaminofen) 200 µg/kg BB (Chairul, 1998). Ekstrak air batang brotowali
memberikan efek antiinflamasi terhadap tikus putih pada dosis 50, 100, dan dosis
150 mg/kg BB. Akan tetapi, dosis 150 mg/kg BB dapat memberikan efek
antiinflamasi yang hampir setara dengan ibuprofen 10 mg/kg BB yaitu adanya
hambatan inflamasi sebesar 84% (Hipol, 2012).
Selain brotowali, terdapat tumbuhan obat tradisional yang masih satu
3
genus dengan brotowali yaitu guduchi (Tinospora cardifolia), yang memiliki
aktivitas antiinflamasi. Secara tradisional, guduchi mampu mengobati penyakit
asma, diabetes, sakit kuning, demam, asam urat dan infeksi kulit (Saha et al.,
2012; Kavya et al., 2015; Kaur et al., 2012). Ekstrak air batang guduchi dengan
dosis 50 mg/kg BB mampu menghambat inflamasi sebesar 33,06% (Patgiri et al.,
2014). Selain ekstrak airnya, ekstrak etanol batang guduchi dengan dosis 250 dan
500 mg/kg BB mampu mengurangi efek inflamasi pada tikus wistar jantan yang
diinduksi indometasin 10 mg/kg BB (Bhagyasree et al., 2016).
Tumbuhan obat tradisional lainnya yang memiliki kekerabatan yang dekat
dengan brotowali (Tinospora crispa) dan guduchi (Tinospora cardifolia) adalah
Tinospora sinensis karena berada dalam genus yang sama yaitu Tinospora. Secara
tradisional, Tinospora sinensis dimanfaatkan untuk mengobati luka, demam,
sifilis, bronkitis, penyakit kulit maupun penyakit hati (Rakesh, 2008). Ekstrak air
dan ekstrak etanol Tinospora sinensis diketahui memiliki aktivitas farmakologis
sebagai antidiabetes, pengatur imun, serta pengatur aktivitas adaptogenik
(Manjrekar et al., 2000), sedangkan aktivitas antiinflamasinya masih belum
diketahui secara pasti sehingga perlu diteliti.
Berdasarkan pendekatan kemotaksonomi bahwa dalam genus yang sama
akan ditemukan senyawa dan keaktifan farmakologi yang hampir sama (Saifudin,
2014), maka dalam penelitian ini akan dikaji aktivitas batang tumbuhan Tinospora
sinensis sebagai antiinflamasi dengan nilai dosis efektif (ED50) sebagai
parameternya terhadap tikus wistar yang diinduksi karagenan.
4
1.2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dirumuskan permasalahan
penelitian sebagai berikut :
1. Apakah Tinospora sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi pada tikus
wistar terinduksi karagenan (persentase hambatan inflamasi) ?
2. Berapakah ED50 ekstrak etanol batang Tinospora sinensis sebagai
antiinflamasi ?
3. Senyawa apakah yang terkandung dalam ekstrak etanol batang Tinospora
sinensis yang aktif sebagai antiinflamasi ?
1.3. Tujuan Penelitian
Berdasarkan rumusan masalah di atas, maka tujuan yang hendak dicapai
dalam penelitian ini adalah :
1. Mengetahui Tinospora sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi pada tikus
wistar terinduksi karagenan.
2. Menentukan ED50 ekstrak etanol batang Tinospora sinensis sebagai
antiinflamasi.
3. Mengetahui senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol batang
Tinospora sinensis yang aktif sebagai antiinflamasi.
1.4. Manfaat Penelitian
Manfaat yang diperoleh dari penelitian ini antara lain :
1. Data ilmiah mengenai efek antiinflamasi ekstrak etanol batang Tinospora
sinensis dengan menggunakan metode induksi karagenan pada kaki tikus.
5
2. Hasil penelitian yang diperoleh merupakan data awal bahwa Tinospora
sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi terujicoba pada tikus putih jantan
galur wistar, sehingga kedepannya dapat dilakukan penelitian lebih lanjut
seperti isolasi terhadap senyawa aktif inflamasinya maupun pengujian
secara in vitro untuk menunjang penggunaan ekstrak etanol batang
Tinospora sinensis sebagai alternatif pengobatan inflamasi.