caracterización y selección de bacterias-doris zuñiga

8/3/2019 Caracterizacin y seleccin de bacterias-Doris Zuiga

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Caracterizacin y seleccin de bacterias promotoras de crecimiento enel cultivo orgnico de maca(Lepidium meyenii Walpers) como herramienta

Biotecnolgica para mejorar su calidad productivaProyecto Per Biodiverso GTZ - CONCYTEC

Dra. Doris Ziga Dvila

Universidad Nacional Agraria La Molina

Mayo 2010

Email: [email protected]: www.lamolina.edu.pe/lmt

Red biofag: www.biofag.org
mailto:[email protected]://www.lamolina.edu.pe/lmthttp://www.lamolina.edu.pe/lmtmailto:[email protected]


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LUGAR DE EJECUCIN:Campesina San Pedro de CajasProvincia de Tarma Departamento de JunnEnsayos de laboratorio: Laboratorio de Ecologa Microbiana y

Biotecnologa Marino Tabusso, Dpto. Biologa UNALM


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EQUIPO DE INVESTIGACIN

Biol. Katty Ogata

Bach. Minoru MatsubaraBach. Mitsuyo GarcaBach. Jessica TolentinoWendy PrezBach. Luder Ramos

Colaboradores

Dr. Carlos Samaniego, Ecoandino S.A.CDr. David Campos, Instituto de Biotecnologa, UNALM

Institucin Internacional

Dra. Esperanza martnez, CCG Cuernavaca, UNAM-Mexico


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Lugares de muestreo y condicin del campo

Lugar Suelo Condicin de campo muestrasGalpn Condorn(MC1) Rizosfrico 1er ao de siembra

M1M2M3M4Blanco (C1) Sin cultivo M1M2

Agomachay (MC2) Rizosfrico 2do ao de cosechaM1M2M3M4

Blanco (C2) Sin cultivo M1M2Condorn (D3) Sin cultivo 10 aos de descanso M1M2


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METODOLOGA


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Anlisis Microbiolgicos Recuento de bacterias aerobias mesfilas viables (ICMSF,

1998) Recuento de bacterias aerobias psicrfilas (ICMSF, 1998) Recuento de esporognicos mesfilos aerobios (APHA,

1992) Recuento de mohos y levaduras (ICMSF, 1998) Recuento de actinomicetos (APHA AWWA WEF 1998) Enumeracin de Pseudomonas (APHA AWWA WEF 1998)

Enumeracin de bacterias fijadoras de nitrgeno de vidalibre (Burges, 1960)


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Bioqumica: glucosinolatosContenido macronutrientesContenido micronutrientesContenido de metales pesados

Plantas

Parmetros de crecimiento, tamao, PFresco, P Seco, tasa de crecimiento

Suelo

Caracterizacin fisico quimica de suelos:pH, M.O, CE, Textura.Contenido de macronutrientesContenido de micronutrientes

Contenido metales pesados


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Preparacin de muestras y diluciones

10-1

10-2 10-390 mL

AP 0.1%

Muestra

1 mL

9 mL

AP 0.1%

9 mL

AP 0.1%

10 mL/g

1 mL


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Anlisis Diluciones Medio de cultivo Temperatura y tiempo deincubacinAerobiasmesfilas -4, -5, -6 Agar Plate Count

28C por 48 horas

Hongostotales -2, -3, -4OGY* 22C por 3 - 5 das.

Actinomicetos -1, -2, -3, -4 Agar Almidn casena** 28C por 6 - 7 das.Bacillus(80C) -4, -5 y -6

AgarTriptona glucosa 28C por 48 horasDiaztrofos devida libre -2, -3, -4, -5, -6, -7, -8 Caldo mineral sinnitrgeno 28C por 7 - 10 das

Pseudomonas -2, -3, -4, -5, -6, -7 Caldo Asparagina 28C por 7 - 10 das

Medios de cultivo y condiciones de incubacin para la determinacin de lamicroflora analizada

*Suplementado con Oxitetraciclina al 0.1%

**Suplementado con Fluconazol al 0.25%


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Medicin de la actividad microbiana

Pesar 25g desuelo tamizado

Adicionar 0.5mLde sol. glucosa

25%Vial con 3.5mL

NaOH 1N

Incubar a 28C por 24 horas

Trasvasar el contenido del

vial a un matraz

Adicionar 3.5mL deBaCl2 + fenoftalena

HCl0.25N

Titular el NaOH no combinado (hasta elviraje de rosa grosella a transparente)

Calcular la tasa de CO2producido: mg CO2/g*h


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Lugar : San Pedro de Cajas (4100 msnm)

Temperatura registrada durante el muestreo : 9 y 10C

RESULTADOS Y DISCUSIONES


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Temperatura y Humedad relativa del ambiente

Campo muestreado Caracterstica LOCALIZACIN T (C) % HGalpn Condorn(C1) Primer ao de siembra 18L0401914 9.42 60.8UTM8755920Agomachay (C2) Segundo ao decosecha 18L0401914 10 53.4UTM8755942

Condorn (D1) 10 aos de descanso 18L0399212 9.04 65.4UTM8754983Pampa Cima (D2) 4 aos de descanso 18L0398260 10.64 50.4

UTM8754213Pampa Cima (D3) 1 ao de descanso 18L0398288 10.88 39.2

UTM8754085


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Caractersticas fisicoqumicas de los suelos y rizsfera

Parmetros MC1 C1 MC2 C2 D3 D2 D1pH 4.25 4.27 5.08 5.08 5.26 4.59 4.48

C.E. 0.57 0.26 0.5 1.44 0.48 0.38 0.6CaCO3 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00M.O. 4.84 4.4 6.4 11.94 8.1 5.5 4.7

P 67.9 60.6 61.6 64.1 61.3 65.2 65.9K 215 176 158 554.4 210 161 231Clase Textural Fr.A. Fr. A. Fr.A. Fr.A. Fr.A. Fr.A. Fr.A.

CIC 14.9 15.04 27.52 23.68 8.43 8.43 8.43

PRIMER MUESTREO


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ParmetrosC1

1 aoSiem.

C22 ao

cosecha

pH 5.2 5.21

C.E. 0.51 0.24

CaCO3 0.00 0.00

M.O. 7.8 8.0

P 36.7 56.1

K 162 196

Clase Textural Fr. A. Fr.A.

CIC 18.72 24.00

Caractersticas fisicoqumicas de los suelos, San Pedro de Cajas

TERCER MUESTREO


15/53

PRIMER MUESTREO Bac te r ias m es f i l as Ps ic r f i l os

Su elo s a er ob io s * B ac il lu s * M oh os * Ac t in omic e to s * D ia z t ro fo s ** P se ud omo na s ** mg CO2/( gs s * h ) aerob iosC 1 6.18 4.74 5.08 5.08 5.30 3.95 0.026 4.903C 2 7.18 4.49 5.46 4.91 6.06 4.93 0.046 7.490

MC1 5.69 4.49 4.11 4.32 4.95 6.04 0.030 6.591MC2 6.99 4.84 4.88 5.04 6.20 6.25 0.055 7.157D 1 6.41 4.52 5.26 5.78 4.95 5.38 0.034 5.903D 2 5.41 4.81 5.28 4.93 5.18 4.38 0.020 6.121D 3 5.90 4.81 5.32 5.30 5.30 3.38 0.032 6.182

Poblaciones microbianas del suelo y de la rizsfera de maca Junn

* Log ufc/g** NMP/g

Mohos y levaduras

Esporuladosmesfilos

aerobios


16/53

Poblaciones microbianas del suelo y rizsfera del cultivo de maca

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

C1 MC1 C2 MC2 D1 D2 D3

Suelos muestreados

log(ufc/g) aerobios

mohos y levaduras

bacillus

psicrfilos

actinomicetos

Poblaciones microbianas de Pseudomonasy diaztrofos en el

suelo y rizfera del cultivo de maca

0

1

2

3

4

5

6

7

8

C1 MC1 C2 MC2 D1 D2 D3

Suelos muestreados

log(NMP/g)

pseudomonas

Azotobacter

Poblacin microbiana de suelos de Junn del primer muestreo


17/53

SEGUNDO MUESTREO

B ac te ri as m es f i la s B a c t er ia s ps ic r f i l asS ue los a erob io s B ac i l lus A ct ino m ic et os M oho s Diaz t ro fo s P seu do m ona ae ro b io s B ac il lu s M ohos mg CO2 re s p /(g sue lo* h )

C 1 6.76 5.04 4.13 5.48 5.64 2.89 4.66 4.75 5.20 0.0302C 2 6.43 4.67 3.52 5.64 6.06 4.38 6.22 4.60 5.93 0.0447

M C 1 6.42 4.86 4.77 5.00 7.12 5.03 6.84 5.01 5.20 0.0354M C 2 6.30 4.69 4.28 5.40 5.94 5.44 6.44 4.97 5.49 0.0446D 3 6.68 4.89 4.29 3.89 6.33 6.03 6.30 5.17 4.88 0.0383

A c t . M i c r o b i an a

Poblaciones microbianas del suelo y de la rizsfera de maca - Junn


18/53

Poblaciones microbianas del suelo y rizsfera del cultivo de "maca"

0

1

2

3

4

5

6

7

8

C1 MC1 C2 MC2 D3

Suelos muestreados

log(

ufc/g)

Bacillus Psf

M y L Psf.

Aerobios Psf

M y L

Bacillus

Aerobios

Actinomicetos

Poblaciones Pseudomonas y diaztrofos del cultivo de "maca"

0

1

2

3

4

5

67

8

9

C1 MC1 C2 MC2 D3

suelos muestreados

log(NMP/g)

Pseudomonas

Diazotrofos

Poblacin microbiana de suelos de Junn del segundo muestreo

Mc1 y Mc2, rizsferasmaca


19/53

Variacin de las Poblaciones microbianas en Galpn Condorn

0

1

2

3

4

5

6

7

8

0 20 40 60 80 100 120 140

log(ufc/g)

tiempo (das)

log (ufc/g) vs tiempo ( das)Galpn Condorn (C1)

aerobios

Bacillus

mohos

actinomicetos

aerobios psf

0

1

2

3

4

5

6

0 20 40 60 80 100 120 140

log(NMP/g)

tiempo (das)

log (NMP/g) vs tiempo (das) Ga lpn Condorn (C1)

diaztrofos

Pseudomonas

DVL Pseudomonas


20/53

0

1

2

3

4

5

6

7

8

0 20 40 60 80 100 120 140

log(ufc/g)

tiempo (das)

log (ufc/g) vs tiempo (das) Agomachay (C2)

aerobios

Bacillus

mohos

actinomicetos

aerobios psf

Variacin de las Poblaciones microbianas en Agomachay

0

1

2

3

4

5

6

0 20 40 60 80 100 120 140

log(poblacNMP/g

)

tiempo (das)

log (NMP/g) vs tiempo (das) Galpn Condorn (C1)

diaztrofos

Pseudomonas


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Reaccin oxidativa con el reactivo de Salkowsky

Produccin de cido Indolacticos

Bacterias diaztrofasmostraron altos niveles de AIA

y de solubilizacin de fosfatosen comparacin a los otrosgrupos bacterianos


22/53

a

b

Solubilizacin de Fosfato biclcico y triclcico


23/53

0 cm 0.05 a 0.45 cm 0.5 a 1.8 cm 0 cm .05 a 0.45 cm 0.5 a 1.8 cm

421 241 (57.24%) 102 (24.23%) 78 (18.53%) 204 (48.46%) 160 (38%) 57 (13.54%)

Solubilizacin de fosfato biclcico Solubilizacin de fosfato triclcicoTotal de Bacterias

< 20 a 70 g/ml 0 g/ml 20 a 70 g/ml

421 246 (58.43%) 43 (10.21%) 132 (31.36%)

Produccin AIATotal de bacterias

Bacteria Cultivos

Pantoea agglomerans trigoRahnella aquatilis trigo, maz

Stenetrophomonas rhizophila papa, colza

Total de bacterias que solubilizaron fosfato bi y triclcico

Total de bacterias que produjeron cido indolactico

Bacterias relacionadas a la rizsfera de diferentes cultivos


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Produccin de AIA Solubilizcin de fosfatos

20 a 70 g/ml

Biclcico

(0.5 a 1.8 cm)

Triclcico

(0.5 a 2 cm)

Cepas

Bacillus 19 (4.51%) 0 (0%) 0 (0%)

Actinomicetos 23 (5.46%) 1 (0.24%) 1 (0.24%)

Pseudomonas 54 (12.83%) 32 (7.6%) 29 (6.89%)

diaztrofos 36 (8.55%) 35 (8.31%) 29 (6.89%)

Total cepas aisladas 421


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5Aa 53Aa 66Aa B29a Ps 31a

Crec Halo Crec Halo Crec Halo Crec Halo Crec Halo

5Ab 0.85 ++ - 0.8 + - 0,75 + - 0.8 + - 0.8 + -

53Ab 0.8 + - 0.8 + - 0,85 + - 0.9 ++ - 0.85 ++ -

66Ab 0.9 ++ - 0.8 + - 0,75 + - 0.95 ++ - 0.85 ++ -

B29b 0.95 ++ - 1.1 +++ 1.1 1 +++ - 0.95 ++ - 0.95 +++ -

Ps 31b 0.8 + - 0.9 ++ 0.9 1 +++ 1 0.85 + 0.85 0.9 ++ 0.9

Ps 42b 1.55 +++ - 1.05 +++ 1.05 1,6 +++ - 1.05 +++ 1.05 1 +++ 1

Ps 88b 0.95 ++ 0.95 1.1 +++ 1.1 0,9 ++ 0.9 0.8 + 0.8 0.95 +++ 0.95

12 Actc 0.9 ++ - 0.9 ++ - 0,85 + - 0.75 + 1.4 0.8 + -

5 Actc 0.9 ++ - 0.95 +++ - 0,85 + - 0.9 ++ 1.5 0.85 ++ -

Interacciones microbianas in vitro de cepas con potencial PGPR


26/53

Ps 42a Ps 88a 12 Acta 5 Acta

Crec. Halo Crec. Halo Crec. Halo Crec. Halo

5Ab 0.75 + - 0.85 ++ - 0.8 + - 1.05 +++ -

53Ab 0.75 + - 0.8 + - 0.8 + - 0.85 + -

66Ab 0.8 + - 0.9 ++ - 0.7 + - 0.8 + -

B29b 0.8 + - 0.9 ++ - 0.75 + - 0.85 + -

Ps 31b 0.85 ++ - 0.8 + - 0.7 + 0.7 0.9 ++ 0.9

Ps 42b 0.8 + 0.8 0.8 + - 0.7 + - 0.9 ++ 0.9

Ps 88b 0.9 ++ 0.9 0.9 ++ 0.9 0.75 + 1.3 0.9 ++ 0.9

12 Actc 0.7 + - 0.8 + - 0.8 + - 0.9 ++ 2

5 Actc 0.65 + - 0.8 + - 0.75 + 0.75 0.9 ++ -

Interacciones microbianas in vitro de cepas con potencial PGPR


27/53

Porcentaje de germinacin in vitro a los 8 das

0

20

40

60

80

100

120

Tratamientos

Porcentajedegerminaci

n

46 56 48 44 66 45 58 87 40

A3M2 pf pp A16M2 B4 B15 st5 P2N3 H2O

B15 Ps42 Control 14A B11 6A B2 P2N3 Ps31 5AAct. M2/-

4

40 72 29 33 22 43 50 62 59 71 70

0

10

20

30

40

50

6070

80

90

100

Porcentajedegermin

acin

Tratamiento

Porcentaje de germinacin in vitro a los 2 das

Pruebas de germinacin en maca

Germinacin usando bacteriasaisladas de otros cultivosaltoandinos (8 a 10C)

Germinacin usandobacterias aisladas delcultivo de maca (15 a 18C)


28/53

ActM2/-4 Control

Pruebas de germinacin con microorganismos


29/53

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Porcentajedegerminacin

Cepas probadas

Porcentaje de germinacin in vitro a los 2 dias

Porcentaje de germinacin interacciones bacterianas


30/53

N+ A3M2 pf pp A16M2 B4 B15 st5 N- P2N3 H2O

25.00 20.00 25.00 16.67 22.50 25.00 23.33 30.00 27.50 67.50 12.50

0

1020

30

40

50

60

7080

90

100

Porc

entajedeemergen

cia

Tratamientos

Porcentaje de emergencia de "maca" a los 15 das

Emergencia de maca usando bacterias aisladas de otroscultivos altoandinos (8 a 10C)


31/53

Peso seco areo de plantas de maca de 3 mesesCondiciones de laboratorio (15 a 18C)

00.0050.01

0.0150.02

0.0250.030.035

0.040.0450.05

Peso seco areo


32/53

a b

c

Sistemas a. Jarras leonard modificadas b. bandejas c. tapers

Plntulas de maca al mes de sembradas 19C

arena Tierra de Junn


33/53

Perfiles BOX - PCR de las cepas probadas como PGPRs

M. Marcador de ADN 1 Kb (Axygen),B. Blanco, 1. B2, 2. B11, 3. B15,4. Ps31, 5. Ps42, 6. Ps 46, 7. 5A,8: 6A, 9. 14A

M. Marcador de ADN 1 Kb (Axygen),B. Blanco, 1. Ps31, 2. Ps61, 3 Ps80,4. Ps87, 5. Ps88, 6. 13Bac, 7. 4Bac,8. 29Bac, 9. 25Bac, 10. 50A, 11. 53A,

12. 66A, 13. 64A


34/53


35/53

rbol filogentico de secuencias del gen 16S rDNA. El mtodo de reconstruccin filogentica fueNeighbour-joining (NJ) y las distancias fueron calculadas de acuerdo al mtodo de Kimura-2parmetros. Los valores en los puntos de ramificacin indican un soporte de bootstrapmayor al 60%(1000 pseudo-replicas). Los aislados de rizsfera de maca se muestran en negrita.


36/53

Ps88

Ps61

Ps87

Pseudomonas costantiniiCFBP 5705T

P. azotoformans IAM1603T

P. poae LMG 21465T

P. extremorientalis KMM 3447T

P. salomoniiCFBP 2022T

P. proteolytica CMS 64T

P. fluorescens IAM 12022T

P. Antarctica CMS 35T

P. putida IAM 1236TP. rhizosphaerae IH5T

P. reinekeiMT1T

P. vancouverensis DhA-51T

Ps42

Ps46

P. aeruginosa DSM 50071T.

Stenotrophomonas maltophilia LMG 981T

S. acidaminiphila AMX 19T

S. maltophilia IAM 12423T

Ps31S. rhizophila e-p10T

Rhizobium tropici CIAT 899T

97

88

67

62

98

100

100

88

100

0.01

Ps0

rbol filogentico de secuencias del gen 16S rDNA. El mtodo de reconstruccin filogentica fueNeighbour-joining (NJ) y las distancias fueron calculadas de acuerdo al mtodo de Kimura-2parmetros. Los valores en los puntos de ramificacin indican un soporte de bootstrapmayor al 60%

(1000 pseudo-replicas). Los aislados de pseudomonaceae de rizsfera de maca se muestran en negrita.


37/53

Bacillus drentensis (T) type strain: ...

Bacillus b ataviensis (T) type strain:...

Bacillus soli (T) type strain: LMG 21...

Bacillus vireti (T) LMG 21834.

Bacillus novalis (T) type strain: LMG...

Bacillus niacini (T) IFO15566.

Bacillus pocheonensis (T) Gsoil 420.

Bacillus foraminis (T) type strain: C...

Bacillus siralis (T) 171544.

Bacillus circulans (T).

Bacillus asahii (T) MA001.

Bacillus psychrosaccharolyticus (T) A...

Bacillus sp. LMG 20238 (T).

Brevibacterium frigoritolerans (T) ty...

Bacillus simplex (T) DSM 1321T.

Bacillus butanolivorans (T) K9.

Bac29

Bac25

B.megaterium IAM1341I8 D16273

Bacillus litoralis (T) SW-211.

Bacillus halmapa lus (T) DSM 8723.

Bacillus horikoshii (T) DSM8719.

Bacillus luciferensis (T) LMG 18422.Bacillus cereus ATCC 14579 (T).

Bacillus subtilis sub sp. subtilis (T)...

Bacillus marisflavi (T) TF-11.

Bacillus aquimaris (T) TF-12.

Bacillus vietnamensis (T) 15-1.

Paenibacillu s polymyxa IAM13419(t)

97

99

93

90

87

76

89

73

95

61

68

77

98

79

78

98

0.01

rbol filogentico de

secuencias del gen 16SrDNA. El mtodo dereconstruccin filogenticafue Neighbour-joining (NJ)y las distancias fueroncalculadas de acuerdo almtodo de Kimura-2parmetros. Los valores en

los puntos de ramificacinindican un soporte debootstrap mayor al 60%(1000 pseudo-replicas).Los aislados de Bacillusderizsfera de maca semuestran en negrita.


38/53

Muestra N P K Ca Mg S Na Zn Cu Mn Fe B Mo Pb Cd CrC1 P9 3.7 0.2 1.5 1.79 0.165 0.33 0.2 77 6.5 102 582 239 3.05 17 0.5 0

C1 P12 4.5 0.2 1.8 1.85 0.17 0.39 0.1 97 10.5 119 861 149 4.88 42 0 0

C2 P2-P14 4.3 0.3 1.8 2.35 0.245 0.46 0.2 92 13 130 1133 177 2.35 21 0.8 0

C2 P15-P16 4.4 0.3 2 2.39 0.25 0.45 0.2 63 10 129 797 197 1.9 20 0 0

Contenido de nutrientes y metales pesados (parte area de la maca)


39/53

Muestra N P K Ca Mg S Na Zn Cu Mn Fe B Mo Pb Cd Cr

C1 P9 2.44 0.21 1.23 0.64 0.08 0.33 0.17 45 7 62 2338 126 1.90 5.25 0.50 0.50

C1 P12 2.17 0.24 1.29 0.59 0.08 0.40 0.16 53 7 35 1395 137 2.28 2.00 0.00 0.00

C2 P2-P14 2.52 0.28 1.28 0.65 0.10 0.42 0.16 48 10 52 1470 165 2.10 6.25 0.00 0.25

C2 P15-P16 2.50 0.30 1.49 0.51 0.09 0.35 0.18 29 6 27 708 146 1.05 2.00 0.00 0.00

Contenido de nutrientes y metales pesados (sistema radicular maca)


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Cuantificacin glucosinolatos siete meses despus de la siembra

Muestra Ecotipo Concentracin de glucosinolatosmol equi. de sinigrin/g ms

RC1P3 amarilla 9.89 0.43RC1P13 amarilla 16.99 0.51RC1P10 blanca 35.17 3.39RC2P1 morada 43.07 0.51RC2P9 morada 39.49 3.81

RC2P13

RC2P10

Morada

blanca

25.49 4.1038.69 5.49


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Cuantificacin de Glucosinolatos


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Morfotipos de plantas de maca muestreados

Galpn Condorn Agomachay


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Determinacin taxonmica de la planta: Lepidium meyeniiWalpers

Flores de maca semillas de maca

Planta de maca


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CAPACITACIN Y DIFUSIN

1.- Taller biofertilizantes para la agricultura de Iberoamrica en el siglo XXI

Ziga, D. 2009. Presente y futuro de los biofertilizantes en Iberoamrica:Per. Taller de Biofertilizantes para la Agricultura de Iberoamrica en el sigo XXI.Red Biofag-CYTED. 4 mayo. La Habana, Cuba.


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2.- Presentacin de resmenes y psters

Katty Ogata*, Carlos Garca, Wendy Prez, Mitsuyo Garca, Jessica Tolentino, Carlos Soto & Doris

Ziga. 2009. MICROFLORA Y ACTIVIDAD MICROBIANA DE LA RIZSFERA DEL CULTIVO DEMACA(Lepidium meyenii Walpers)EN LA MESETA DEL BOMBN JUNN. XXIV RELAR IIBEMPA. LaHabana, Cuba. 4-8 Mayo.

Katty Ogata, Csar La Torre, Wendy Prez & Doris Ziga. 2009. EFECTODE DIFERENTES BACTERIAS PROMOTORAS DE CRECIMIENTO (PGPR) EN

LA GERMINACIN Y EMERGENCIA DE PLANTULAS DE MACA (Lepidiummeyenii Walpers). XXIV RELAR IIBEMPA. La Habana, Cuba. 4-8 Mayo.


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Capacitacin de asistentes de investigacin de LEMYB en la XXIVRELAR y I IBEMPA, La Habana Cuba.

Grupo peruano con investigadores de otros pases


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Taller: Importancia de las PGPR en los cultivos orgnicos nativos

Katty Ogata y Carlos Garca con losagricultores

Junn, 2009


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CONCLUSIONES

Los contenidos de Cd, Cr estn por debajo de los valores permitidosmientras que si presenta problemas de contaminacin por Pb.

Conforme la temperatura del ambiente baja, las poblaciones depseudomonas, actinomicetos y psicrfilos se incrementaron.

Los suelos de Junn son franco arenosos, con alto contenido de materia

orgnica, pH cidos, con disponibilidad de P y K, sin problemas decarbonatos y CIC variable.

Las poblaciones de bacterias psicrfilas fueron mayores en la rizsfera de

maca que en los suelos sin cultivo.Los valores mnimos de las poblaciones aerobias estuvieron en elorden 106, diaztrofos 106, hongos 104, Bacillus 104, actinomicetos103 y los psicrfilos aerobio104.

De 120 de cepas bacterianas (diaztrofos, pseudomonas,actinomicetos y bacillus), todas produjeron AIA en diferentes niveles. Sinembargo, 6 cepas de diaztrofos destacaron por sus niveles de mayorproduccin.


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Cinco cepas aisladas de rizsfera de maca (bacillus, pseudomona,

actinomicetos y diaztrofos) (de 11 seleccionadas) incrementaronsignificativamente el % G semillas de maca.

Dos cepas de rizobios y un Bacillus (aisladas de tara, haba y papa)incrementaron significativamente los porcentajes de germinacin desemillas de maca. Cuando se prob la emergencia slo la cepa de rizobio

P2N3 increment significativamente la emergencia de este cultivo.

De un total de 421 cepas aisladas se encontr que 132 (31%) produjeron de20 a 70 g/ml de AIA.

En la prueba de solubilizacin de fosfatos 68 cepas de las 421 cepasaisladas presentaron halos de 0.5 a 1.8 cm cuando se utiliz el medio NBRIP biclcico y 59 cepas presentaron halos de solubilizacin entre 0.5 y 2 cm elNBRIP triclcico

Las cepas de pseudomona Ps42, actinomiceto 5Act y las interaccionesactino-diaztrofo: 5Act+5A, diaztrofo-pseudomona 5A+Ps42 presentarondiferencias significativas respecto al control.


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El contenido de nitrgeno, potasio, calcio y magnesio en la parte area fuemayor que en la parte radicular. En cuanto al contenido de metales

pesados, la parte area tiene casi cinco veces ms de contenido de plomoque la parte radicular; mientras que el contenido de cromo fue mayor en laparte radicular.

No se observ ninguna influencia del tipo de suelo en la concentracin deglucosinolatos obtenidos. Por otro lado, se encontr que las macas

moradas presentaron una mayor cantidad de este principio activo encomparacin con las macas amarillas.

Se encontr que una de las cepas (Ps31) corresponde a unaStenotrophomonas rhizophila. Las dems pseudomonas caracterizadaspertenecen al grupo de P. fluorescensy P. putida

Se encontraron tambin bacterias relacionadas con Rahnella aquatilis yPantoea agglomerans; y dos cepas de Bacillus emparentadas con B.butanolivorans

De los glucosinolatos analizados se encontr un mayor contenido deGlucotropaeolin (benzylglucosinolato) lo que corresponde a lo encontradoen la bibliografa tanto en hipocotilo como en hojas.


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Se presentaron 3 resmenes y 2 psters a la XXIV RELAR - I IBEMPA. La

Habana Cuba. 2009.Una ponencia en Conference 16 of the FAO Biotechnoloogy Forum,Entitled Learning from the past: Successes and failures with agriculturalbiotechnologies in developing countries over the last 20 years. 8 junio-8Julio 2009.

Existe un gran inters por parte de los agricultores y de la empresa deadquirir los conocimientos en lo que es agricultura orgnica, Utilizar lasbacterias promotoras de Crecimiento vegetal y poner en prctica lainoculacin con estos microorganismos en los cultivos nativosAltoandinos.

De todos los sistemas probados, substratos y temperaturas ambientales,las jarras leonard, el suelo de Junn y condiciones de temperaturas frasresultaron mejor en la emergencia, crecimiento y desarrollo de plntulas

de maca.

Respecto a la difusin y capacitacin


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MUCHAS GRACIAS !!

caracterización y selección de bacterias-doris zuñiga

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