brozura hx 3 - ousa.eu · a kvalitu poskytovaných služieb klientom za svoju prioritu. ... 6....

September 2013Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o.Oddelenie manažérstva kvality a marketingu

Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o., Heydukova 10, 812 50 Bratislava

Laboratórne službyOnkologického ústavu sv. Alžbety

Oddelenie manažérstva kvality a marketingu

Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o.

je moderným neštátnym zdravotníckym zariadením, ktoré slúži potrebám nie len

onkologických pacientov z celého územia Slovenska. Ústav je začlenený do siete zdravotníckych

zariadení a má zmluvný vzťah so všetkými zdravotnými poisťovňami pôsobiacimi v SR.

V Onkologickom ústave sv. Alžbety (OUSA) je 7 lôžkových oddelení s kapacitou

203 postelí (chirurgické, onkogynekologické, maxilo-faciálnej chirurgie, intenzívnej medicíny,

interné, rádioterapeutické a nukleárnej medicíny). Ďalej sa v ňom nachádza 25 bezlôžkových

oddelení, 74 odborných ambulancií a Lekáreň sv. Alžbety, slúžiaca potrebám ústavu aj verejnosti.

Po odbornej stránke je Onkologický ústav sv. Alžbety jediným centrom v SR, kde sa vykonáva

liečba malígnych ochorení otvorenými rádionuklidmi, stereorádiochirurgiou, intenzitu modulovanou

rádioterapiou, liečba laserom a fotodynamickými postupmi. Je tiež jediným pracoviskom, kde sa

realizuje diagnostika nádorov pomocou pozitrónového emisného tomografu, ako aj pomocou

viacerých špeciálnych laboratórnych vyšetrení. V rámci 15 kliník sa v OUSA v širokom merítku

vykonáva pregraduálna a postgraduálna výchova študentov pre potreby LFUK, SZU, TU a VŠZaSP

sv. Alžbety.

V Ústave sa kladie veľký dôraz aj na psychologické aspekty, na pozitívny a citlivý prístup

personálu k neraz ťažko chorým pacientom vychádzajúci z kresťanských princípov, pre ktoré bola

pred vyše 200 rokmi nemocnica sv. Alžbety zriadená. Cieľom poskytovania duševného zdravia

slúži pacientom aj ústavná kaplnka, kde sú každodenne vykonávané bohoslužby.

Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o. v Bratislave poskytuje špičkovú zdravotnú starostlivosť

podporovanú moderným a unikátnym diagnostickým a terapeutickým vybavením, vysoko odborným

a vľúdnym ľudským prístupom.

V našich odborných ambulanciách a preventívnych centrách poskytujeme tiež neonkologickú

odbornú a preventívnu starostlivosť a tiež preventívnu zdravotnú starostlivosť (pzs) pre klientov,

ktorí si uvedomujú hodnotu svojho zdravia. Diagnostika je zabezpečovaná širokým spektrom

špecializovaných diagnostických a terapeutických pracovísk (Rtg, ultrazvuk, digitálna mamografia,

3T NMR, SPECT-CT, PET kamera a komplexné laboratóriá).


3

OBSAH Kvalita a certifikáty ............................................................................................... 4

Laboratórne služby ................................................................................................ 6

Oddelenie klinickej biochémie – OKB ................................................................. 8

Oddelenie imunodiagnostiky – OID ................................................................... 30

Oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO ............................................... 44

Oddelenie klinickej imunológie a alergológie – OKIA ...................................... 56

Ústav patológie SZU a OUSA – ÚP ................................................................... 78

Oddelenie klinickej farmakológie – OKF ........................................................... 86

Oddelenie lekárskej genetiky – OLG .................................................................. 90

Legislatívne usmernenie k preventívnym zdravotným prehliadkam ................ 110

PRÍLOHY číslo:

1. Žiadanka na laboratórne biochemické a hematologické vyšetrenie 2. Sprievodný list na skríning Trisomie 3. Žiadanka na prietokovú cytometriu pre HTO 4. Žiadanka na prietokovú cytomeriu pre OKIA 5. Žiadanka na genetické vyšetrenie

Ostatné žiadanky a tlačivá nájdete na našej web stránke:

http://www.ousa.sk/sk/elektronicke-sluzby/ziadanky-na-vysetrenia

4

Kvalita a certifikáty

Vedenie OUSA považuje kvalitu poskytovanej zdravotníckej starostlivosti pacientom a kvalitu poskytovaných služieb klientom za svoju prioritu.

OUSA je nositeľom certifikátu ISO 9001:2008 a 6 laboratórnych pracovísk je akreditovaných podľa ISO 17025:2005. Akreditácia podľa ISO 17025

Počiatky akreditácie laboratórií v OUSA siahajú do roku 2003 keď boli akreditované 3 laboratórne oddelenia – Oddelenie klinickej biochémie, Oddelenie imunodiagnostiky a Oddelenie lekárskej genetiky, ako jedny s prvých akreditovaných laboratórií v SR. Postupne sa akreditovali ďalšie laboratória – Oddelenie hematológie a transfuziológie, Oddelenie klinickej patológie a cytológie (dnes Ústav patológie) a Oddelenie klinickej imunológie a alergológie. Oddelenie lekárskej genetiky má priznaný štatút flexibilného rozsahu akreditácie (http://www.ousa.sk/_img/Documents/Noivnky/flexibilny_zoznam.pdf). Náročné posudzovanie a udelenie osvedčenia o akreditácii vykonal medzinárodne uznávaný akreditačný orgán SNAS – Slovenská národná akreditačná služba (http://www.snas.sk/). Prínos akreditácie pre medicínske laboratóriá

Dôležitou súčasťou systému zdravotnej starostlivosti o pacientov sú aj služby, ktoré poskytujú medicínske laboratóriá. Výsledky ich činnosti sú často základom pre rozhodovanie sa lekára o postupe liečby pacienta, môžu rozhodnúť o diagnóze, na ich základe je možné vyvodzovať prognózu ochorenia. V mnohých prípadoch sú laboratórne vyšetrenia drahé a ten, kto ich platí, právom očakáva, že dostane valídnu informáciu. Preto je veľmi dôležité, aby laboratóriá pracovali na vysokej profesionálnej úrovni, boli vhodne vybavené potrebnými zariadeniami, mali kvalifikovaný personál a najmä, aby poskytovali spoľahlivé a správne výsledky. Certifikácia podľa ISO 9001:2008

V roku 2007 OUSA obdržal Certifikát podľa ISO 9001:2008, na: „Poskytovanie služieb v oblasti prevencie, diagnostiky a liečby nádorových a nenádorových ochorení vo všetkých orgánových lokalizáciách, liečba nádorových ochorení pomocou postupov chirurgických, interných, metabolických, rádioterapeutických, ako aj všetkými druhmi žiaričov. Sledovanie onkologickej epidemiológie v SR. Klinický výskum v onkologickej problematike. Pregraduálna a postgraduálna výchova v zdravotníctve.“

Výsledkom viacročnej prípravy je zdokumentovaný, udržiavaný a cieľavedome

zlepšovaný manažérsky systém. Cieľom systému je zvyšovanie kvality a efektívnosti poskytovaných služieb a zvyšovanie spokojnosti pacientov a ostatných klientov.

5

Certifikát pre systém manažérstva kvality vydaný BUREAU VERITAS Certification

(http://www.bureauveritas.sk/wps/wcm/connect/bv_sk/Local/Footer/Home/) pod akreditáciou UKAS QUALITY MANAGEMENT, potvrdzuje, OUSA splnil prísne požiadavky na zabezpečenie kvality poskytovaných služieb podľa požiadaviek medzinárodnej normy ISO 9001:2008.

Certifikát ISO 9001:2008

6

Laboratórne služby Ústavu laboratórnej medicíny (ÚLM)

Onkologického ústavu sv. Alžbety, s.r.o. v Bratislave Široké spektrum laboratórnych vyšetrení v laboratóriách s certifikátom kvality podľa

ISO 9001 a s akreditáciou podľa medzinárodnej normy pre laboratória ISO 17025 Špičková kvalita modernej laboratórnej diagnostiky s garanciou kvalifikovaného

personálu a špičkovej diagnostickej techniky Vlastný spoľahlivý zvoz biologického materiálu a distribúcia odberového

materiálu Elektronický prístup k výsledkom prostredníctvom internetu alebo iného

elektronického programu Odberový materiál zadarmo Zmluvné partnerstvo so všetkými zdravotnými poisťovňami Komplexnosť služieb a poskytovanie interpretácie výsledkov

Spoluprácou s laboratóriami ÚLM OUSA zabezpečíte maximálny prospech

pre Vašich pacientov.

Laboratória ÚLM poskytujú laboratórne služby v nasledujúcich odboroch:

1. klinická biochémia – oddelenie klinickej biochémie – OKB 2. hormóny a onkomarkery – oddelenie imunodiagnostiky – OID 3. hematológia a transfuziológia – oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO 4. klinická imunológia a alergológia – odd. klinickej imunológie a alergológie – OKIA 5. klinická patológia a cytológia – ústav patológie – ÚP 6. lekárska genetika – oddelenie lekárskej genetiky – OLG 7. klinická farmakológia – oddelenie klinickej farmakológie – OKF

UPOZORNENIE:

Pre efektívne využívanie laboratórnych vyšetrení je potrebné sa riadiť pokynmi

uvedenými pri jednotlivých vyšetreniach:

1. Vypĺňanie žiadaniek: pečiatka lekára s kódmi musí byť čitateľná – žiadanka musí byť opečiatkovaná lekárom, ktorý má oprávnenie (odbornosť) – indikovať požadované vyšetrenia – musí byť zadaná aktuálna poisťovňa pacienta – meno pacienta a rodné číslo musia byť v súlade s údajmi uvedenými na preukaze

poistenca – štvormiestny kód diagnóz, nestačí slovné vypísanie – čitateľnosť ostatných údajov na žiadanke – používať žiadanky laboratórií OUSA – na žiadanke musia byť jednoznačne vyznačené požadované vyšetrenia

7

Žiadame všetkých žiadateľov o laboratórne vyšetrenia, aby na žiadanky zadávali platný kód podľa MKCH 10.

Kód musí byť štvormiestny! V prípade, že vami uvedený kód má podobu napríklad

/N60/, poisťovňa laboratórne vyšetrenie s takýmto MKCH 10 neprepláca. Nakoľko pri príjme takejto žiadanky v laboratóriu nie je možné vami zadaný kód MKCH opraviť, budeme nútení sprievodný list i s materiálom Vám vrátiť k zjednaniu nápravy, alebo Vás žiadať o doplnenie tohto údaju. Príklad: C 53. – nesprávne! C 53.1 – správne 2. Vzorka biologického materiálu:

- rešpektovať požiadavku na množstvo odobratého biologického materiálu podľa požadovaného vyšetrenia a druhu odberovej skúmavky

- rešpektovať obmedzenia stability odobratého biologického materiálu podľa požadovaného vyšetrenia pri plánovaní odberu vzhľadom na termíny transportu

- rešpektovať špecifické požiadavky niektorých vyšetrení na prípravu pacienta a odber vzorky

Kontakt:

V prípade záujmu o niektorú z ponúkaných služieb alebo prípadných nejasností ako

i Vašich ďalších otázok kontaktujte pracovníkov Oddelenia manažérstva kvality a marketingu na telefónnych číslach: +421 917 200 225, +421 918 389 018 alebo +421 2 322 48 413, alebo e-mail: [email protected] a www.ousa.sk.

Pre konkrétnejšie, špecializované otázky konktaktujte zodpovedných pracovníkov na kontaktoch uvedených na jednotlivých oddeleniach. RNDr. Ľubomír Špaček vedúci Oddelenia manažérstva kvality a marketingu +421 2 322 48 413 [email protected] RNDr. Regína Lohajová Behulová, PhD. Manažér pre marketing +421 918 389 018 +421 917 148 766 [email protected]

RNDr. Jozef Tóth, CSc. Manažér pre marketing +421 2 3224 8414 +421 918 477 108 [email protected]

Zdena Hrubá samostatný odborný referent +421 917 200 225 [email protected]

8

Oddelenie klinickej biochémie – OKB

Zabezpečuje kompletnú klinicko-biochemickú základnú a špeciálnu diagnostiku zo séra, moču, likvoru, stolice, ako aj iných biologických materiálov. Okrem základných biochemických vyšetrení vykonáva tiež vyšetrenia špecifických proteínov a zápalových markerov, markerov kostného metabolizmu, kardiálnych markerov, komplexnú diagnostiku metabolizmu železa a hemopoézy, ďalej vyšetrenia rôznych hormónov, vitamínov, ako aj diabetologickú diagnostiku.

Laboratórna diagnostika sa realizuje na najmodernejšom prístrojovom vybavení s využitím spektrofotometrických a nefelometrických metód, metód enzýmovej imuno-analýzy, elektroforetických a separačných HPLC metód. Vysoká kvalita poskytovaných laboratórnych vyšetrovacích metód je zabezpečená zapojením sa OKB do uznávaných medzinárodných systémov externého hodnotenia kvality. OKB, ako súčasť ÚLM, má od r. 2002 zavedený systém manažérstva kvality pre medicínske laboratóriá podľa ISO 17025 a súčasne je toto laboratórium akreditované a tiež certifikované v rámci OUSA podľa ISO 9001.

Pracovníci OKB

Pracovník Funkcia Tel. č. e-mail Darina Veličová, Ing. vedúci odd. (primár) 322 49 519 [email protected]

Katarína Rácová, RNDr. sam. odb. pracovník,zástupca primára 322 49 600

[email protected]ília Belovičová, RNDr. sam. odb. pracovník 322 49 531 [email protected]

Jana Kružlíková vedúca laborantka 322 49 555

Sortiment vyšetrení na OKB – radené abecedne

P.č. Skratka Názov vyšetrenia Systém

(biologický materiál) 1. ABR Acidobázická rovnováha KK, AK,VK 2. ADDIS Addisov sediment 12h M 3. ALB* Albumín S 4. ALP* Alkalická fosfatáza S 5. ALT* Alanin-aminotransferáza S 6. AMG 2-makroglobulín S 7. AMS Amyláza S, M, Pt 8. ASLO Anti-streptolyzín S 9. AST* Aspartát-aminotransferáza S 10. A1AT 1-antitrypsín S 11. A1GP 1- kyslý glykoproteín (orosomukoid) S 12. BILD Bilirubín priamy S 13. BILT* Bilirubín celkový S 14. BJ Imunofixácia BJK a BJL v moči M 15. CA* Vápnik S, 24h M 16. CB* Celková bielkovina S, 24h M, L, Pt 17. CHOL* Cholesterol S, Pt 18. CIK Cirkulujúce imunokomplexy S 19. CK Kreatinkináza celková S 20. CK-MB Kreatinkináza MB-izoenzým (mass) S 21. CL* Chloridy S, 24h M, L, Pt 22. CORT Kortizol S, 24h M 23. CPEPT C-peptid S

OKB

9

P.č. Skratka Názov vyšetrenia Systém

(biologický materiál) 24. CPL Ceruloplazmín S 25. CRP C-reaktívny proteín S 26. CTX Cross-Laps (C-terminál kost. telopeptidu) S 27. CVK Celková väzbová kapacita železa S 28. C3 C3-komplement S 29. C4 C4-komplement S 30. DIGO Digoxín S 31. DVIT 25-hydroxy-vitamín D (D3) S 32. ELFO Elektroforéza bielkovín S 33. EPO Erytropoetin S 34. FE* Železo S 35. FERR Ferritín S 36. FOL Folát S 37. GLU* Glukóza S, 24h M, L, Pt 38. GMT* Gama-glutamyltransferáza S 39. HBA1C Glykovaný hemoglobín (HPLC) KK 40. HCYST Homocysteín S 41. HDL HDL cholesterol S 42. 5-HIAA Kyselina hydroxyindoloctová v moči 24h M 43. HPT Haptoglobín S 44. ICA Ionizovaný vápnik S, KK 45. IELFO ELFO s imunofixáciou S 46. IGA Imunoglobulín A S 47. IGE Imunoglobulín E S 48. IGG Imunoglobulín G S 49. IGM Imunoglobulín M S 50. INZUL Inzulín S 51. JOD Jodidy v moči 24h M 52. K* Draslík S, 24h M 53. KM* Kyselina močová S, 24h M 54. KREA* Kreatinín S, 24h (12h) M 55. LAKTAT Laktát v plazme P 56. LDH* Laktátdehydrogenáza S, L, Pt 57. LDL LDL cholesterol S 58. LIPAZA Lipáza S 59. MG* Horčík S, 24h M 60. MOC CH Moč chemický M 61. NA* Sodík S, 24h M 62. OK-FOB Okultné krvácanie v stolici (FOB-test) F 63. OSMO Osmolalita v sére (výpočtom) S 64. OSTA Kostný izoenzým ALP (Ostáza) S 65. P* Fosfor S, 24h M 66. PREA Prealbumín S 67. RF Reumatoidný faktor S 68. STFR Solubilné transferínové receptory S 69. S100 Proteín S-100 S 70. TAG* Triacylglyceroly S 71. TNI Troponín I S 72. TRF Transferín S 73. UMALB Mikroalbumín v moči M, 24h M 74. UREA* Močovina S, 24h M 75. VITB12 Vitamín B12 S Vysvetlivky: *- akreditovaná metóda, AK - arteriálna krv, KK - kapilárna krv, VK - venózna krv, S - sérum, P - plazma, Pt - punktát, L - likvor, M - ranný moč, 12h M - 12 hod. moč, 24h M - 24 hod. moč

OKB

10

Referenčné hodnoty – aktualizované k 06.03.2012

Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka

KRV, SÉRUM, PLAZMA

Základné vyšetrenia

Glukóza (sérum) GLU

1 deň 2,2 3,3 mmol/l porušená glykémia nalačno 6,1 – 6,9 kritická hodnota pre DM >6,9 (2x v rôz. dňoch)

2 – 5 dní 0,7 4,2 mmol/l 6 dní – 2 roky 1,8 6,2 mmol/l 2 – 4 roky 2,9 5,4 mmol/l 4 – 6 rokov 3,8 5,5 mmol/l 6 – 15 rokov 3,3 6,1 mmol/l

15 – 100 rokov 3,9 5,9 mmol/l

Urea (Močovina) UREA

0 – 6 mesiacov 0,7 7,0 mmol/l

6 mesiacov – 13 rokov 0,7 8,0 mmol/l 13 – 18 rokov 1,8 6,4 mmol/l ženy 18 – 50 rokov 2,6 6,4 mmol/l ženy > 50 rokov 3,1 7,9 mmol/l muži 18 – 50 rokov 3,2 8,1 mmol/l muži > 50 rokov 3,5 8,1 mmol/l

Kreatinín KREA

0 – 1 týždeň 20 115 μmol/l

1 – 2 týždne 17 80 μmol/l 2 – 4 týždne 15 50 μmol/l 4 týždne – 1 rok 20 80 μmol/l 1 –15 rokov 40 90 μmol/l ženy 15 – 50 rokov 50 81 μmol/l ženy > 50 rokov 51 87 μmol/l muži 15 – 50 rokov 63 96 μmol/l muži > 50 rokov 62 106 μmol/l

Kyselina močová KM

0 – 1 mesiac 100 310 μmol/l

1 – 12 mesiacov 140 370 μmol/l 1 – 15 rokov 120 360 μmol/l ženy 15 – 50 rokov 140 350 μmol/l ženy > 50 rokov 140 390 μmol/l muži > 15 rokov 200 420 μmol/l

Celkové bielkoviny CB

0 – 1 mesiac 46 68 g/l

1 mesiac – 1 rok 48 76 g/l 1 –15 rokov 60 80 g/l > 15 rokov 64 83 g/l

Albumín ALB

0 – 2 týždne 24 39 g/l

2 týždne – 1 rok 29 45 g/l 1 – 15 rokov 22 50 g/l > 15 rokov 35 50 g/l

Bilirubín celkový BILT

1 deň 34 103 μmol/l

2 – 3 dni 68 171 μmol/l 4 – 5 dní 68 205 μmol/l 2 týždne – 1 rok <29 μmol/l ženy 1 – 50 rokov 4 22 μmol/l ženy > 50 rokov 5 21 μmol/l muži 1 – 50 rokov 5 28 μmol/l muži > 50 rokov 6 25 μmol/l

Bilirubín priamy (konj.) BILD

1 – 5 dní <40 μmol/l 1 – 15 rokov <7 μmol/l

> 15 rokov <5 μmol/l

OKB

11


Lipidový metabolizmus

Cholesterol celkový CHOL

0 – 1 mesiac 1,3 4,4 mmol/l

1 – 12 mesiacov 1,3 4,0 mmol/l 1 – 3 roky 2,5 4,5 mmol/l 3 – 15 rokov 3,2 4,8 mmol/l

> 15 rokov 3,6 5,2 mmol/l mierne riziko 5,21- 6,2 vysoké riziko >6,2

HDL-cholesterol HDL

0 – 8 rokov 1 3 mmol/l

8 – 15 rokov 1,4 3 mmol/l

ženy > 15 rokov >1,65 mmol/l mierne riziko 1,15 – 1,65 vysoké riziko <1,15

muži > 15 rokov >1,45 mmol/l mierne riziko 0,9 – 1,45 vysoké riziko <0,9

LDL-cholesterol LDL

optimálny

<3,4 mmol/l hraničný 3,4 – 4 vysoký 4 - 5 veľmi vysoký > 5

Triacylglyceroly TAG

0 – 1 rok 0,3 1,2 mmol/l mierne riziko 1,95–2,59 vysoké riziko 2,60–6,49 veľmi vys. riziko >6,50

1 – 15 rokov 0,3 1,4 mmol/l

> 15 rokov <1,95 mmol/l

Rizikový index (aterogénny) RI (CHOL/HDL)

2,3 4,8

ženy mierne riziko 4,8-6,24 vysoké riziko >6,24

muži mierne riziko 4,8 – 7,0 vysoké riziko >7,0

Enzýmy

Aspartát-aminotransferáza AST

1 deň <2,05 μkat/l

2 – 5 dní <1,85 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <1,40 μkat/l 6 – 12 mesiacov <1,00 μkat/l 1 – 15 rokov <0,85 μkat/l ženy > 15 rokov <0,60 μkat/l muži > 15 rokov <0,80 μkat/l

Alanín- aminotransferáza ALT


2 – 5 dní <0,85 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <1,00 μkat/l 6 – 12 mesiacov <0,95 μkat/l 1 – 15 rokov <0,78 μkat/l ženy > 15 rokov <0,60 μkat/l muži > 15 rokov <0,80 μkat/l

Gama-glutamyl-transamináza GMT

1 deň 0,10 2,50 μkat/l

2 – 5 dní 0,10 3,10 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov 0,10 3,40 μkat/l 6 – 12 mesiacov 0,10 0,55 μkat/l 1 – 12 rokov 0,10 0,40 μkat/l ženy 12 – 18 rokov 0,10 0,55 μkat/l

muži 12 – 18 rokov 0,10 0,75 μkat/l

ženy 18 – 40 rokov 0,17 0,70 μkat/l

OKB

12


ženy > 40 rokov 0,18 1,28 μkat/l muži 18 – 40 rokov 0,20 1,30 μkat/l muži > 40 rokov 0,25 1,90 μkat/l

Alkalická fosfatáza ALP

0 – 1 mesiac 1,20 7,00 μkat/l

1 – 12 mesiacov 1,40 6,40 μkat/l 1 – 10 rokov 1,10 5,80 μkat/l ženy 10 – 15 rokov 0,80 4,70 μkat/l ženy 15 – 19 rokov 0,80 2,50 μkat/l muži 10 – 15 rokov 0,70 8,30 μkat/l muži 15 – 19 rokov 0,90 4,60 μkat/l ženy 19 – 50 rokov 0,70 1,63 μkat/l ženy > 50 rokov 0,88 2,35 μkat/l muži 19 – 50 rokov 0,70 2,13 μkat/l muži > 50 rokov 0,95 2,60 μkat/l

Laktátdehydrogenáza LDH


2 – 5 dní <29,0 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <16,3 μkat/l 6 – 12 mesiacov <18,3 μkat/l 1 – 6 rokov <14,2 μkat/l ženy 6 – 12 rokov <9,65 μkat/l ženy 12 –18 rokov <7,25 μkat/l muži 6 – 12 rokov <12,7 μkat/l muži 12 – 18 rokov <11,4 μkat/l 18 – 65 rokov <8,0 μkat/l > 65 rokov <8,85 μkat/l

Alfa-amyláza AMS <1,70 μkat/l Lipáza LIP 0,36 0,85 μkat/l

Ióny

Sodík NA

0 – 1 mesiac 132 147 mmol/l

1 – 12 mesiacov 129 143 mmol/l 1 – 18 rokov 132 145 mmol/l 18 – 65 rokov 136 145 mmol/l > 65 rokov 132 146 mmol/l

Draslík K

0 – 1 mesiac 3,6 6,1 mmol/l

1 – 12 mesiacov 3,6 5,8 mmol/l 1 – 15 rokov 3,2 5,4 mmol/l 15 – 60 rokov 3,3 5,2 mmol/l > 60 rokov 3,5 5,5 mmol/l

Chloridy CL

0 – 1 mesiac 95 116 mmol/l

1 – 12 mesiacov 93 112 mmol/l 1 – 18 rokov 96 111 mmol/l 18 – 65 rokov 98 107 mmol/l > 65 rokov 94 110 mmol/l

Vápnik celkový CA

0 – 1 týždeň 1,9 2,6 mmol/l

1 týždeň – 2 roky 2,24 2,74 mmol/l 2 – 12 rokov 2,20 2,70 mmol/l 12 – 19 rokov 2,30 2,75 mmol/l 19 – 50 rokov 2,20 2,75 mmol/l > 50 rokov 2,15 2,55 mmol/l

Vápnik ionizovaný ICA

0 – 1 mesiac 1,10 1,45 mmol/l

1 – 12 mesiacov 1,15 1,40 mmol/l 1 – 15 rokov 1,20 1,35 mmol/l > 15 rokov 1,13 1,32 mmol/l

OKB

13


Horčík MG

0 – 4 mesiace 0,60 0,90 mmol/l 4 mesiace – 6 rokov 0,70 0,95 mmol/l 6 – 18 rokov 0,65 0,90 mmol/l > 18 rokov 0,70 1,10 mmol/l

Fosfor P

0 – 1 mesiac 0,90 2,60 mmol/l

1 – 12 mesiacov 0,80 2,40 mmol/l 1 – 3 rokov 1,00 2,10 mmol/l 3 – 15 rokov 1,00 1,90 mmol/l 15 – 18 rokov 1,00 1,75 mmol/l ženy > 18 rokov 0,85 1,50 mmol/l muži 18 – 50 rokov 0,75 1,65 mmol/l muži > 50rokov 0,75 1,35 mmol/l

Osmolalita séra OSMO 280 300 mOs/kg výpočet podľa KazduVyšetrenia DM

Glukóza v kap. krvi KKGLU

3,3 5,6 mmol/l porušená glykémia nalačno 5,6 – 6,1

Orálny glukózo-tolerančný test Glykémia nalačno OGTT 0 3,3 5,6 mmol/l

Glykémia po 1 hod. OGTT 60 <11,0 mmol/l Glykémia po 2 hod. OGTT 120 <7,8 mmol/l

Glykovaný hemoglobín (NGSP) HBA1C

výborná kompenzácia 4 6 %

uspokojivá kompenzácia

6 8 %

zlá kompenzácia >8 %

Glykovaný hemoglobín (IFCC) HBA1C V

výborná kompenzácia 2,9 4,2 %

výpočet z HBA1C uspokojivá kompenzácia

4,2 6,0 %

zlá kompenzácia >6 % C-peptid CPEPT 0,80 5,20 ng/ml Inzulín INZUL 1,9 23,0 μIU/ml

Metabolizmus železa a hemopoéza

Železo FE

0 – 1 mesiac 9,0 36,0 μmol/l

1 – 12 mesiacov 5,0 28,0 μmol/l 1 – 12 rokov 4,0 24,0 μmol/l ženy 12 – 25 rokov 6,6 29,5 μmol/l ženy 25 – 40 rokov 4,1 24,0 μmol/l ženy > 40 rokov 7,0 26,7 μmol/l muži 12 – 25 rokov 7,2 27,7 μmol/l muži 25 – 40 rokov 6,3 30,1 μmol/l muži > 40 rokov 7,2 21,5 μmol/l

Väzb. kap.železa voľná VVK 19,7 66,2 μmol/l

Väzb. kap. železa – celková CVK

0 – 1 týždeň 10,6 31,3 μmol/l

2 týždne – 1 rok 20,8 68,7 μmol/l 1 – 15 rokov 29,9 69,8 μmol/l > 15 rokov 44,8 80,6 μmol/l

Saturácia železom SAT 30 50 %

Transferín TRF 0 – 15 rokov 1,3 3,6 g/l

ženy > 15 rokov 2,5 3,8 g/l muži > 15 rokov 2,2 3,7 g/l

Haptoglobín HPT

0 – 6 mesiacov <0,70 g/l 6 mesiacov – 18 rokov 0,22 1,69 g/l > 18 rokov 0,36 1,95 g/l

Ferritín FERR

0 – 3 mesiace 52,0 421,0 ng/ml 3 – 12 mesiacov 114,0 440,0 ng/ml

1 – 10 rokov 9,3 65,0 ng/ml

OKB

14


10 – 15 rokov 12,0 150,0 ng/ml ženy > 15 rokov 11,0 306,8 ng/ml muži > 15 rokov 23,9 336,2 ng/ml

Solubilné transferínové receptory sTfR

12,16 27,25 nmol/l cutoff =21 anémia z nedostatku Fe

sTfR index = (sTfR) / log (FERR)

6,42 22,47 cutoff=14 anémia z nedostatku Fe

Vitamín B12 VITB12

180 914 pg/ml hraničné hodn. 145-

180, deficit <145 Folát (kys.listová) FOL

>4,0 ng/ml hraničné hodn. 3 - 4

deficit <3 Erytropoetín EPO > 15 rokov 2,59 18,5 mIU/ml

Špecifické proteíny

Imunoglobulín G IGG

0 – 1 mesiac 7,0 16,0 g/l

1 – 3 mesiace 2,5 7,5 g/l 3 – 6 mesiacov 1,8 8,0 g/l 1 – 12 mesiacov 3,0 10,0 g/l 1 – 13 rokov 4,5 15,5 g/l > 13 rokov 7,0 16,0 g/l

Imunoglobulín A IGA

0 – 1 mesiac 0,07 0,94 g/l

1 – 12 mesiacov 0,10 1,31 g/l 1 – 13 rokov 0,20 3,58 g/l > 13 rokov 0,82 4,53 g/l

Imunoglobulín M IGM

0 – 1 mesiac 0,10 0,30 g/l

1 – 3 mesiace 0,10 0,70 g/l 3 – 12 mesiacov 0,10 1,45 g/l 1 – 13 rokov 0,20 2,39 g/l > 13 rokov 0,46 3,04 g/l

Imunoglobulín E IGE

0 – 1 mesiac < 2 IU/ml

1 mesiac – 1 rok < 15 IU/ml 1 – 6 rokov < 60 IU/ml 6 – 10 rokov < 90 IU/ml 10 – 15 rokov <200 IU/ml > 15 rokov < 165 IU/ml

Prealbumín PREA

0 – 1 mesiac 0,07 0,39 g/l

1 – 6 mesiacov 0,08 0,34 g/l 6 mesiacov – 6 rokov 0,12 0,36 g/l > 6 rokov 0,20 0,40 g/l

Alfa1-kyslý glykoproteín A1GP

ženy 0,40 1,20 g/l muži 0,50 1,30 g/l

Alfa1antitrypsín A1AT

0 – 1 mesiac 1,24 3,48 g/l

1 – 6 mesiacov 1,11 2,97 g/l 6 mesiacov – 3 roky 0,95 2,51 g/l 3 – 18 rokov 1,10 2,80 g/l > 18 rokov 0,90 2,00 g/l

Ceruloplazmín CPL

ženy 0,20 0,70 g/l muži 0,20 0,60 g/l

Alfa2makroglobulínAMG 1,02 2,59 g/l Elektroforéza bielkovín ELFO Albumín ELFO-ALB 55,0 69,0 % Alfa1-globulín ELFO-A1G 1,6 5,8 % Alfa2-globulín ELFO-A2G 5,9 11,0 % Beta-globulín ELFO-BGL 7,9 14,0 % Gama-globulín ELFO-GGL 11,0 18,0 %

OKB

15


Homocysteín HCYST

15 – 60 rokov 5 15 μmol/l > 60 rokov 5 20 μmol/l

Cystatin-C CYS

0 – 1 rok 1,0 2,0 mg/l 1 – 15 rokov 0,5 1,0 mg/l

> 15 rokov 0,62 1,15 mg/l

Zápalové markery

Komplement C3 C3

0 – 1 mesiac 0,58 1,08 g/l

1 – 3 mesiace 0,67 1,24 g/l 3 – 6 mesiacov 0,74 1,38 g/l 6 – 12 mesiacov 0,78 1,44 g/l 1 – 12 rokov 0,80 1,50 g/l 12 – 20 rokov 0,82 1,60 g/l 20 – 40 rokov 0,84 1,60 g/l > 40 rokov 0,90 1,70 g/l

Komplement C4 C4

0 – 1 mesiac 0,07 0,24 g/l

1 – 3 mesiace 0,09 0,31 g/l 3 – 6 mesiacov 0,10 0,35 g/l 6 – 12 mesiacov 0,12 0,40 g/l 1 – 12 rokov 0,13 0,43 g/l 12 – 20 rokov 0,14 0,43 g/l 20 – 40 rokov 0,16 0,46 g/l > 40 rokov 0,18 0,49 g/l

Cir. imunokomplexy CIK <60 arb.j.

C-reaktívny proteín CRP 0 – 1 mesiac <4 mg/l

1 mesiac – 15 rokov <3 mg/l > 15 rokov <8 mg/l

Antistreptolyzín ASLO

0 – 6 rokov <100 IU/ml 6 – 18 rokov <166 IU/ml

> 18 rokov <116 IU/ml Reumatoidný faktor RF

<20 IU/ml hraničný 20 - 30 pozitívny >30

Kardiomarkery

Kreatínkináza CK

0 – 1 týždeň <10,50 μkat/l

1 týždeň – 6 mesiacov <5,50 μkat/l 6 – 12 mesiacov <4,90 μkat/l 1 – 4 roky <3,80 μkat/l ženy 4 – 12 rokov <2,55 μkat/l ženy 12 – 18 rokov <2,05 μkat/l

muži 4 – 12 rokov <4,10 μkat/l

muži 12 – 18 rokov <4,50 μkat/l ženy > 18 rokov <2,83 μkat/l muži > 18 rokov <3,25 μkat/l

CK-MB (mass) muži > 18 rokov <5,0 ng/ml ženy > 18 rokov <3,0 ng/ml

Troponín I TNI <0,5 ng/ml Osteomarkery

C-terminálne telopeptidy kolagénu typu I CTX

ženy >18 rokov - premenopauza

0,13 0,44 ng/ml

- postmenopauza

0,23 0,78 ng/ml

muži 18 – 50 rokov 0,16 0,44 ng/ml muži 50 – 70 rokov 0,10 0,50 ng/ml muži > 70 rokov 0,16 0,62 ng/ml

Ostáza –. kostný izoenzým ALP

ženy >18 rokov - premenopauza

<14,3 μg/l

OKB

16


OSTA - postmenopauza

<22,4 μg/l

muži > 18 rokov <20,1 μg/l

Vitamín D3 DVIT 25-hydroxy-vitamín D3

47,7 144,0 nmol/l insuficiencia 27,7-–47,7, ťažká insuf. <27,7

Hormóny, liečivá a iné

Kortizol CORT

> 6 rokov ráno 7 – 10 hod.

240 620 nmol/l

poobede 16 – 20 hod. <280 nmol/l Digoxín DIGO terapeutický interval 0,8 2,0 μg/l >2,5 toxickáhladina

Laktát LAKTAT

venózna 0,50 2,22 mmol/l !!! plazma !!!

arteriálna 0,50 1,60 mmol/lProteín S-100 S100 <90 ng/l

Vyšetrenie acidobázickej rovnováhy pH krvi 7,35 7,45

parc. tlak CO2 pCO2 ženy 4,3 6,0 kPa

muži 4,7 6,4 kPa

parc. tlak O2 pO2 11,1 14,4 kPa aktuál. bikarbon. HCO3 22,0 26,0 mmol/l štand. bikarbon. SBC 22,0 26,0 mmol/l celkový CO2 TCO2 22,0 26,0 mmol/l base exces BE -2,5 +2,5 mmol/l saturácia krvi O2 O2s >94 % obsah O2 v arteriálnej krvi O2ct

ženy 15,9 22,4 % muži 17,9 24,7 %

MOČ

Chemické vyšetrenie moču - močovým prúžkom pH moču 4,8 7,4 Hustota moču SG 1,005 1,035 kg/l

Bielkoviny

norma <0,1 g/l negat

hodnotenie patologického nálezu

0,1 0,3 g/l stopy 0,3 1,0 g/l 1+ 1,0 3,0 g/l 2+ >3,0 g/l 3+

Glukóza

norma <0,84 mmol/l negat


0,84 1,7 mmol/l stopy 1,7 2,8 mmol/l 1+ 2,8 5,5 mmol/l 2+ 5,5 17 mmol/l 3+

Ketolátky

norma <0,5 mmol/l negat


0,5 1,5 mmol/l stopy 1,5 3,9 mmol/l 1+ 3,9 7,8 mmol/l 2+ >7,8 mmol/l 3+

Bilirubín

norma <3,4 μmol/l negat


3,5 5 μmol/l stopy 5 10 μmol/l 1+ 10 20 μmol/l 2+ 20 40 μmol/l 3+

Urobilinogén norma 3,2 16 μmol/l negat hodnotenie patologického nálezu

16 33 μmol/l stopy 33 66 μmol/l 1+

OKB

17


66 131 μmol/l 2+ >131 μmol/l 3+

Krv (Erytrocyty)

norma <5 Éry/μl negat


6 10 Ery/μl 1+ 10 50 Ery/μl 2+ 50 250 Ery/μl 3+

Nitráty (Hnis) žiadne negat

Mikroskopické vyšetrenie močového sedimentu Erytrocyty <2 j/zor.pole negat

Leukocyty <5 j/zor.pole negat

Epitélie <16 j/zor.pole negat Valce žiadne negat Baktérie žiadne negat Kvasinky žiadne negat Amorfné soli žiadne negat

Addisov sediment (ADDIS) – zbieraný 12h moč

Erytrocyty <1 mil. negat Leukocyty <2 mil. negat Valce <50 tis. negat

Iné vyšetrenia – jednorazový moč Amyláza UAMS <8,35 μkat/l

Albumín UMALB „mikroalbumín“

<25 mg/l zber moču od 22 :00 do 6:00 hod.

Index UMALB/MKREA IMA

<2,8 mg/mmol v norme 2,8 22,8 mg/mmol mikroalbuminúria >22,8 mg/mmol albuminúria

Klírens kreatinínu (24h resp. 12h moč)

Glomerulárna filtrácia GFR

0 – 2 dni 0,08 0,12 ml/s

2 – 7 dní 0,28 0,33 ml/s 1 – 2 týždne 0,58 0,75 ml/s 2 týždne – ½ roka 0,58 1,52 ml/s ½ - 1 rok 1,05 1,52 ml/s

1 – 10 rokov 1,0 2,0 ml/s

10 – 20 rokov 1,5 2,3 ml/s 20 – 40 rokov 1,3 2,5 ml/s 40 – 50 rokov 1,25 2,2 ml/s 50 – 60 rokov 1,15 2,0 ml/s > 60 rokov 1,1 1,9 ml/s

Tubulárna resorbcia vody RESO 98,3 99,5 % Frakčná exkrécia vody FREX 0,5 1,7 %

Hodnotenie glomerulárnej filtrácie na základe sérovej hodnoty Cystatinu C

Glomerulárna filtrácia GF-CYS

v norme 1,33 2,50 ml/s zber moču nie je potrebný nie je závislá na veku, pohlaví a teles. hmot.

mierne znížená 0,92 1,33 ml/s stredne znížená 0,48 0,92 ml/s silne znížená 0,25 0,48 ml/s

obličkové zlyhanie <0,25 ml/s

Vyšetrenie zbieraného moču za 24 hodín - odpady Glukóza M24 GLU <1,7 mmol/l Bielkoviny M24 CB <0,15 g/l Albumín MALB „mikroalbumín“

<30 mg/24h v norme 30 300 mg/24h mikroalbuminúria

OKB

18


>300 mg/24h albuminúria

Urea M24 UREA

0 – 1 týždeň 2 4 mmol/24h 2 – 4 týždne 10 17 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 33 67 mmol/24h 1 – 15 rokov 67 333 mmol/24h > 15 rokov 330 580 mmol/24h

Kreatinín M24 KREA

0 – 1 mesiac 0,4 0,6 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 0,5 1,2 mmol/24h 1 – 4 roky 1,0 3,8 mmol/24h 4 – 15 rokov 3,3 9,2 mmol/24h ženy > 15 rokov 5,0 16,0 mmol/24h muži > 15 rokov 7,0 18,0 mmol/24h

Kys. močová M24 KM <52 μmol/24h/kg prepočet na telesnú hmotnosť

Sodík M24 NA

0 – 6 mesiacov 1 10 mmol/24h 6 – 12 mesiacov 10 30 mmol/24h 1 – 7 rokov 20 60 mmol/24h 7 – 15 rokov 20 120 mmol/24h > 15 rokov 30 300 mmol/24h

Draslík M24 K

0 – 1 mesiac 5 25 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 15 40 mmol/24h 1 – 15 rokov 20 60 mmol/24h > 15 rokov 25 125 mmol/24h

Chloridy M24 CL

0 – 1 mesiac 0,3 1,4 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 2 15 mmol/24h 1 – 7 rokov 15 70 mmol/24h 7 – 15 rokov 50 130 mmol/24h > 15 rokov 110 250 mmol/24h

Vápnik M24 CA

0 – 1 mesiac <1,5 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 0,1 2,5 mmol/24h 1 – 15 rokov 2,0 4,0 mmol/24h 15 – 18 rokov 2,0 5,0 mmol/24h > 18 rokov 2,5 7,5 mmol/24h

Fosfor M24 P 0 – 1 rok <1,3 mmol/24h

1 – 15 rokov 2,0 10,0 mmol/24h 15 – 18 rokov 19,0 23,0 mmol/24h > 18 rokov 13,0 42,0 mmol/24h

Horčík M24 MG

0 – 1 rok 0,1 1,2 mmol/24h 1 – 15 rokov 1,2 8,2 mmol/24h > 15 rokov 2,5 8,5 mmol/24h

Jodidy JOD

100 400 μg/24h v norme 75 100 μg/24h ľahká jodopénia

30 75 μg/24h stredne ťažká

jodopénia <30 μg/24h ťažká jodopénia

5-hydroxy-indol octová kyselina 5HIAA

<30 μmol/24h

Kortizol UCORT > 6 rokov 160 1112 nmol/24h

LIKVOR Glukóza LGLU 2,5 3,9 mmol/l Celkové bielkoviny LCB 150 450 mg/l Chloridy LCL 118 132 mmol/l

OKB

19

Kritické hodnoty Kritické hodnoty laboratórny personál po overení a potvrdení opakovaným

vyšetrením tej istej vzorky telefonicky hlási žiadajúcemu oddeleniu (resp. lekárovi).

Analyt Materiál Kritické hodnoty Jednotky Poznámka

Železo S <3,1 μmol/l Ťažká anémia

CK S >16,7 μkat/l Digoxín S >2,5 μg/l Toxicita

CRP S >100 mg/l Nešpecifický indikátor zápalových procesov

Osmolalita S >330 mOsm/kg

Laktát S, KK >3,4 mmol/l

pH KK <7,1 >7,7 Acidémia

Alkalémia

pCO2 KK <2,7 >8,6 kPa Respiračná alkalóza

Respiračná acidóza pO2 KK <5,7 kPa Sat.O2 KK <80 %

HCO3 KK <17,1 >33,8 mmol/l Metabolická acidóza

Metabolická alkalóza

BE KK < -8 >+10 mmol/l Metabolická acidóza

Metabolická alkalóza *Vysvetlivky: S – sérum, KK – kapilárna krv

Pokyny pre správny odber a transport vzoriek

Oddelenie klinickej biochémie dodáva svojim klientom pre odber biologického materiálu bezplatne nasledovný odberový systém:

na odber zrážavej krvi - SARSTEDT - S-Monovette skúmavky 7,5 ml - BD VACUTAINER - skúmavky so sep. gélom 7,5 ml na odber kapilárnej krvi - SARSTEDT -Microvette CB 300 (pre HbA1c) - EPPENDORF - mikroskúmavka 1,5 ml (obsahuje 1 ml hemolyzačného roztoku)+ heparinizovaná kapilára 20 l (pre GLU z kap. krvi) na odber moču - plastové nesterilné skúmavky so zátkou 10 ml a 15 ml na odber stolice na OK - Test 3.generácie

Ku každej vzorke biologického materiálu musí byť priložená dôkladne vypísaná

žiadanka (sprievodný lístok). Na žiadanke musia byť uvedené základné údaje: meno, priezvisko, titul, rodné číslo a diagnóza pacienta, kód zdravotnej poisťovne, kód ambulancie (oddelenia), kód ošetrujúceho alebo ordinujúceho lekára, jeho pečiatka a podpis, druh materiálu, žiadané vyšetrenia, dátum a čas odberu, príp. doplňujúce údaje: doterajšia liečba, súčasný stav choroby.

Oddelenia a ambulancie v rámci OUSA vygenerujú a vytlačia žiadanku v nemocničnom informačnom systéme (NIS), pre externých klientov OKB dodáva formulár spoločnej žiadanky pre vyšetrenia vo všetkých typoch biologického materiálu na OKB, OID a HTO.

OKB

20

Odber krvi - Odber krvi na biochemické vyšetrenia sa vykonáva po telesnom odpočinku ráno medzi 7:00 –9:00 hod. Pred odberom je vhodný dostatočný príjem tekutín (voda, resp. nesladený čaj). Ak je to možné, 24 – 72 hodín pred odberom sa vynechá farmakoterapia. Odberu nesmie predchádzať fyzická námaha, záťažové diagnostické alebo terapeutické zákroky. Pred odberom materiálu sestra označí odberovú nádobu štítkom, kde značí základné údaje: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum a čas odberu. Údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku.

Po odbere vložte skúmavku do stojana v kolmej polohe (nikdy neukladajte skúmavky ležmo na stôl) a nechajte krv voľne koagulovať pri izbovej teplote 30 minút. Materiál sa do laboratória odosiela čo najskôr, približne do 60 minút po odbere, na súrne vyšetrenia okamžite z oddelení a ambulancií OUSA sa odobratý materiál sústreďuje v určenej miestnosti vo vestibule hlavnej budovy „A“. Vzorky pre OKB, OID a HTO doručí sanitárka v pravidelných časových intervaloch na Centrálny príjem vzoriek ÚLVM v budove „K“. Zvoz biologického materiálu z externých pracovísk zabezpečuje po dohode Dopravná služba OUSA. Pracovník Dopravnej služby je zodpovedný po prevzatí vzoriek za ich správny transport počas dopravy do laboratória. Vzorky sú transportované v prenosných chladničkách vo fixovanej zvislej polohe. Vzorky z nemocníc môžu byť do laboratória transportované aj dopravnou službou iných zdravotníckych zariadení.

Pre vzdialenejšie externé pracoviská, kde nie je možné zabezpečiť doručenie krvných

vzoriek do 2 hodín od odberu, je odporúčané používať ako odberový systém skúmavky so separačným gélom BD VACUTAINER a vzorky po 30 minútach scentrifugovať (pri 2500 – 3000 otáčkach/min po dobu 10 minút) a takto pripravené vzorky transportovať do laboratória. Separačný gél po centrifugácii inertne oddelí sérum od krvných elementov a zabráni tak ich vzájomnému nežiaducemu ovplyvňovaniu.

Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál

DVIT 1,25 dihydroxyvitamín D

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené séra ( do 3 hodín ) možno uchovávať 24 hodín pri 2-8°C, alebo dlhšie zmrazené na -20°C a dopravia sa do laboratória v ľade v chladenom boxe

VitB12 vitamín B12

Materiál: sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Oddelené séra a plazmy možno uchovávať po dobu 24 hodín pri 2-8 °C. Pri dlhšom skladovaní musia byť zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch

FER Feritín Materiál : sérumOdber a transort: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra možno 7 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie v zmrazenom stave pri -20°C

FOLÁT Kyselina folová

Materiál: sérum, plazma erytrocytyOdber a transport vzoriek: 1. Stanovenie v sére alebo v plazme: odoberá sa krv bez aditív alebo s K2EDTA nalačno. Oddelené séra a plazmy možno uchovávať v uzavretých skúmavkách chránené pred svetlom po dobu 8 hodín pri 2 - 8°C, transport do laboratória v chladenom boxe v deň odberu 2. Folát v eytrocytoch - návod na prípravu lyzátu (vykonáva sa priamo v hematologickej ambulancii): a) vo vzorke nezrazenej krvi stanovte a zaznamenajte hematokrit b) lyzačné činidlo rekonštituujte pridaním 25 ml destilovanej vody, nechajte voľne rozpúšťať 40 min, pred použitím premiešajte točivým pohybom. Skladujte pri 2-8°C maximálne 2 týždne, pred každým použitím vytemperujte na laboratórnu teplotu c) z premiešanej vzorky plnej krvi odoberte 50μl a pridajte 1 ml lyzačného činidla d) opakovaným prevracaním skúmavky premiešajte a nechajte stáť 90

OKB

21


minút pri laboratórnej teplote e) hemolyzát do 3 hodín transportujte do laboratória alebo skladujte do analýzy zmrazené pri -20°C po dobu 30 dní

EPO Erytropoetín

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod, oddelené séra a plazmy po dobu 7 dní pri 2-8 ° C . Transport do laboratória v chladiacom boxe

Príjem materiálu je na OKB zabezpečený v pracovných dňoch cez Centrálny príjem

vzoriek v čase od 7:00 do 17:00 hod. Po tomto čase od 17:00 do 19:00 hod a v dňoch pracovného pokoja od 8:00 do 12:00 hod je zabezpečený službukonajúcou laborantkou. Po ukončení analýzy sa krvné vzorky skladujú v primárnych skúmavkách v chladničke pri teplote +4°C až +8°C po dobu 48 hodín. Do tejto doby je možné telefonicky požiadať o doplnenie biochemických vyšetrení (pre analyty K, GLU, LDH len ak bol odber urobený do skúmavky so separačným gélom BD VACUTAINER, pre analyty AST, ALT, CK, CK-MB a TNI je nutné urobiť nový odber). Odber moču - Na odber moču sa používajú sklenené alebo plastové skúmavky, močové poháre alebo zberné nádoby. Vyšetruje sa čerstvý ranný stredný prúd moču alebo zbieraný moč za určené a presne udané časové obdobie. Prvý ranný moč (stredný prúd) sa používa na kvalitatívne (chemické) vyšetrenie. Pokyny pre zachytenie stredného prúdu prvého ranného moču: a) pacient vykoná intímnu hygienu b) prvú porciu ranného moču vymočí do WC c) strednú porciu ranného moču zachytí do močového pohára d) zbytok vymočí do WC

Pre odoslanie do laboratória odleje cca 5 – 7ml zo stredného prúdu moču do skúmavky, ktorú dôkladne zazátkuje. Skúmavka musí byť označená štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, označenie materiálu – ranný moč, (pri opakovanom odbere moču, napr. pri glykemickom profile alebo OGTT musí byť vyznačený aj čas odberu moču).

Zbieraný moč za určitý časový úsek sa používa na kvantitatívnu analýzu. Odberová

skúmavka alebo zberná nádoba s močom sa opatrí štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum odberu, pri zbieranom moči doba zberu a objem zbieraného moču. Údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku. V prípade zbieraného moču je potrebné na žiadanku zaznamenať aj výšku a hmotnosť pacienta, dobu zberu a diurézu (objem zbieraného moču/ za časové obdobie). Diuréza u zdravého dospelého človeka je 1200 – 1500 ml/24 hod. (hranične 500 – 2000 ml), u detí je 300 – 1500 ml/24 hod.

Poruchy vo vylučovaní moču:

a) polyúria vylúčenie moču nad 2500 ml/24 hod. b) oligoúria vylúčenie moču pod 300 ml/24 hod c) anúria vylúčenie moču pod 100 ml/24 hod.

OKB

22

Tabuľka uvádza pred analytické podmienky pre vyšetrenie odpadových látok v zbieranom moči:.

Analyt Inštrukcie pre zber moču

Spôsob skladovaniaa transportu *

Poznámka

Amyláza ranný moč ak 24h žiadne aditívum

v chladničke skúmavka zber. nádoba

Glukóza žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Urea žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Kreatinín žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Okyslený moč nevhodný na analýzu.

Kys. močová 10ml 5%NaOH pri izb. teplote !!! zber. nádoba

Total protein žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba


Mikroalbumín ranný moč ak 24h žiadne aditívum

v chladničke skúmavka zber. nádoba

Zmrazený aj okyslený moč je nevhodný na analýzu.

Na žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba


K žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba


Ca žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

P žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Mg žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Cl žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Jodidy žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba

Kortizol 100 mg kys. boritá v chladničke zber. nádoba

5-HIAA 20ml kys. octová v chladničke zber. nádoba

Katecholamíny 20ml 6N HCl v chladničke zber. nádoba - tmavá

Odosielame na analýzu do Medirexu.

Kys. vanilmandlová 10ml 6N HCl v chladničke zber. nádoba

Odosielame na analýzu do Medirexu.

* Ak má pacient alebo ambulancia možnosť zmerať objem moču v odmernom valci, stačí odoslať z dobre premiešaného a zhomogenizovaného zbieraného moču do laboratória na analýzu 10 – 15 ml v zazátkovanej skúmavke a napísať presnú diurézu.

Odber stolice - Stolicu vyšetrujeme na stanovenie skrytého krvácania imunologickým testom SureScreen FOB a novou metódou skríningu OC – Sensor – test 3. generácie, kvantitatívna metóda detekcie okultného krvácania. Diagnostická súprava obsahuje fľaštičku s tekutinou, ktorú poskytujeme ambulanciám a oddeleniam zdravotníckeho zariadenia a slúži na odber stolice. Fľaštičku skladujte dobre uzavretú pri teplote +2 až +30°C.

Fľaštičku po odbere doručte do laboratória najneskôr do 3 dní. Fľaštička musí byť označená štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum odberu a tieto údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku. Nie je potrebný viacnásobný odber, nakoľko tento imunologický test je vysoko citlivý na ľudský hemoglobín a zachytí aj mikroskopické krvácanie v stolici.

OKB

23

Požiadavky na vyšetrenie vzoriek na zistenie paraproteinémie (monoklónovej gamapatie) metódou imunofixácie

Spolu so vzorkou je potrebné zaslať výsledky:

z elektroforézy bielkovín + fóliu s elektroforetogramom (alebo fotokópiu uvedeného záznamu)

z kvantitatívneho stanovenia imunoglobulínov z prípadných iných vyšetrení, na základe ktorých vzniklo podozrenie na

paraproteinémiu. V prípade, že na vašom pracovisku nie je možné tieto analýzy vykonať, môžu byť urobené

v našom laboratóriu, ale treba to uviesť na žiadanke.

Konfirmačné vyšetrenia reaktívnych serologických výsledkov

V prípade reaktívneho serologického výsledku na anti-HCV, HIV a SYPH, ak si žiadate zabezpečiť konfirmačné vyšetrenie v Národných referenčných centrách prostredníctvom nášho pracoviska - Ústavu laboratórnych vyšetrovacích metód, postupujte nasledovne: Pre konfirmáciu na anti-HCV stačí zaslať vyplnenú žiadanku o serologické vyšetrenie

(žiadanka so žltým pruhom); odoslanie materiálu na vyšetrenie zabezpečí následne naše pracovisko.

Pre konfirmáciu HIV a SYPH si vyžiadajte z nášho pracoviska špeciálne žiadanky, ktoré nám vyplnené pošlete späť; odoslanie materiálu na vyšetrenie zabezpečí následne naše pracovisko.

Kontakty na Národné referenčné centrá:

Slovenská zdravotnícka univerzita NRC pre vírusové hepatitídy, Limbová 14, Bratislava Tel.: 02/ 59 370 883, 885 (RNDr. Čipková, Mgr. Burcáková, Mgr. Gašparovič), 02/ 59 370 250, 880 (MUDr. Kazár, DrSc. – ved. NRC) Slovenská zdravotnícka univerzita NRC pre HIV/AIDS, Limbová 14, Bratislava Tel.: 02/ 59 370 133, 144 (RNDr. Hábeková), 02/ 59 370 382, 869 (RNDr. Staneková – ved. NRC) Regionálny úrad verejného zdravotníctva NRC pre syfilis, Senný trh 4, 040 01 Košice Tel.: 055/ 625 61 93 (MUDr. Vargová – ved. NRC)

OKB

24

Nová metóda skríningu kolorektálneho karcinómu (KRCA) na OKB OUSA

OC-Senzor-μ – automatický analyzátor pre kvantitatívnu analýzu hemoglobínu v stolici –

qi-FOBT (Fecal Occult Blood Test) – 3. generácia testov pre zabezpečenie skríningu kolorektálneho karcinómu (KRCA)

Vzhľadom k tomu, že riziko karcinómu hrubého čreva celosvetovo, a teda aj v populácii SR, trvalo narastá, je nanajvýš žiaduci jeho včasný záchyt (skríning).

Skríningové programy kombinujú zobrazovacie metódy ako sigmoidoskopia,

kolonoskopia, irigografia, tomografia, magnetická rezonancia s laboratórnymi metódami, t.j. predovšetkým s detekciou okultného krvácania (FOBT – Fecal Occult Blood Test), ako aj prípadne s inými genetickými metódami. Dôvodom pre vykonanie FOB testov je fakt, že kolorektálny karcinóm už v asymptomatickej fáze ochorenia, či už ako karcinóm alebo adenómový polyp, intermitentne krváca. Aby detekcia okultného krvácania mala čo najvačšiu výpovednú hodnotu a prínos pre klinickú prax je nutné nie len maximálne eliminovať možnosť získania falošne pozitívnych výsledkov, ale tiež kvantifikovať straty krvi pomocou koncentrácie hemoglobínu v stolici. Práve táto hodnota umožňuje pri pozitívnych testoch veľmi presne odhadnúť štádium KRCA.

Citlivosť – senzitivita FOBT testov a súčasne aj ich špecificita je daná predovšetkým

nastavením hranice detekcie (cut-off hodnoty) vychádzajúcej z fyziologických strát krvi stolicou a súčasne koncentráciou hemoglobínu vo vzorkách stolice pri KRCA. Fyziologické rozmedzie pre denné straty krvi stolicou sú v objeme 0.5 - 2.5 ml, čo po prepočte pomocou koncentrácie hemoglobínu v krvi (120 -150 mg/ml) a množstve stolice za 24 hodín (300 – 450g) odpovedá hodnotám 0.3 - 1.3 mg hemoglobínu na 1g stolice. Z toho vyplýva, že túto koncentráciu by skríningové testy FOBT nemali detegovať ako pozitívny nález.

Pre laboratórny skríning kolorektálneho karcinómu sa v klinickej praxi použivajú dve metódy detekcie okultného krvácania, t. j. stanovenia prítomnosti hemoglobínu vo vzorke stolice. Hemoglobín môže byť detegovaný chemicky (hem), alebo imunochemicky (protein – globin). Tieto dva prístupy sa zásadne líšia citlivosťou, teda pozitivitou výsledkov a sú výrazne ovplyvnené aj rozdielnou rýchlosťou degradácie oboch zložiek hemoglobínu s ohľadom na proximodistálny gradient v tráviacom trakte. Globín je degradovaný omnoho rýchlejšie a pozitivita imunochemických testov takmer eliminuje detekciu krvácania v hornej časti tráviaceho traktu. Degradácia hemu je výrazne pomalšia a preto chemicky orientované testy FOBT, napr. Haemocult, môžu reagovať aj na krvácanie z vyšších oblastí GIT.

OKB

25

Spôsoby detekcie FOB

Guajakove testy (g-FOBT) sú založené na chemickom princípe oxidačnej reakcie – pseudoperoxidázovej reaktivite hemu. Výsledok môže byť ovplyvnený prítomnosťou iných oxidačnych látok, ako aj hemoglobínu z potravy. Pri týchto testoch sa obyčajne vyžaduje viacnásobný odber stolice a dodržiavanie určitej diéty pred samotným odberom vzorky. Hodnotenie je kvalitatívne vizuálnym vyhodnotením modrého sfarbenia testovacieho okienka. Guajakove testy majú vysokú špecificitu, nemajú takmer žiadnu falošnú pozitivitu, vykazujú však nízku senzitivitu, len 30%.

Imunochemické testy (i-FOBT) sú založené na detekcii ľudského hemoglobínu (Hb)

monoklónovou protilátkou, čo vylučuje možnosť ovplyvnenia iným zdrojom hemoglobínu (z potravy), nie je nutná žiadna špecialna diéta a odpadá tiež interferencia chemických látok.

Sú to kvalitatívne testy na báze hemaglutinačnej, latexovej imunoprecipitácie, radiálnej imunodifúzie alebo imunoafinitnej chromatografie. Tieto testy majú takmer 2-násobnu citlivosť – 60%, oproti guajakovým testom, avšak vykazujú veľmi vysokú falošnú pozitivitu dosahujúcu až 25%, to znamená, že ich špecificita je nízka.

Kvantitatívne stanovenie ľudského hemoglobínu (qi-FOBT) je najnovšou metódou

detekcie okultného krvácania. Tato 3. generácia FOB testov predstavuje kvantitatívnu analýzu Hb vo vzorke stolice pomocou automatických analyzátorov. Analyticky sa jedná o latexovú, imunochemickú, aglutinačnú reakciu s polyklonálnym antigénom k proteínu ľudského hemoglobínu typu A0. Automatická analýza sa uskutočňuje turbidimetrickým meraním pri 600 nm v rozsahu 20 – 2000 ng Hb/ml. Kvantitatívna analýza umožňuje oproti kvalitatívnym testom definovať optimálnu cut-off hodnotu a touto optimalizáciou je možné zabezpečiť až 83% senzitivitu pri súčasnej špecificite 97%. Takto dosahované hodnoty senzitivity a špecificity 3. generácie FOB testov ich robia najvhodnejšími laboratórnymi metódami pre skríning KRCA. Optimálnymi FOB testami sú podľa súčasných odporúčaní len kvantitatívne imunochemické testy s automatickou analýzou koncentrácie hemoglobínu, kde možno optimalizovať spoľahlivosť vhodným nastavením cut-off detekcie hemoglobínu. Preto skríningové programy v mnohých európskych krajinách (Francúzsko, Írsko, Taliansko, Holandsko, Veľká Británia) sú na základe odporučenia národných skríningových komisií realizované od r. 2008/2009 práve imunochemickými kvantitatívnymi testami 3. generácie spracovanými automatickými analyzátormi.

V súčasnej dobe existuje na svete 6 výrobcov týchto analyzátorov, väčšina z nich je

z Japonska. Najpoužívanejšími analyzátormi v európskych krajinách i celosvetovo sú prístroje OC-Senzor-μ a OC-Senzor-Diana od japonskej firmy Eiken Chemical, ktoré dodáva v ČR a SR distribučná firma Dialab, spol. s r.o., Praha. Najnovšia európska štúdia porovnávajúca kvalitu imunochemických, kvantitatívnych testov pre skríning kolorektálneho karcinómu, ktorá bola publikovaná v júli 2011, preukázala, že práve pri týchto analyzátoroch je dosiahnutá výrazne vyššia reprodukovateľnosť výsledkov a teplotná stabilita vzoriek daná unikátnou odberovou kazetou (Analytical Comparison of Three Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Tests for Colorectal Cancer Screening. Guittet L, Guillaume E, Levillain R, Beley P, Tichet J, Lantieri O, Launoy G. (INSERM, IRSA, France) Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2011; 20(7); 1492-1501).

OKB

26

V auguste 2011 bol v Onkologickom ústave sv. Alžbety v Bratislave na oddelení klinickej biochémie inštalovaný OC-Senzor-μ ako prvý analyzátor tohto druhu na Slovensku. Analyzátor OC-Senzor-μ technický popis:

automatizovaný analyzátor FOBT latex aglutinačná imunoturbidimetria polyklonové protilátky proti ľudskému HbA0 rozsah merania: 20 – 2000ng Hb/ml zdroj svetla: LED 660 nm detektor: kremíkova fotodióda kyvety: 5mm akrylové termostat inkubačný: 37°C termostat reagencií: 25°C kapacita zásobnikov: 10 kyviet rýchlosť analýzy: 80 testov/1 hod kapacita pamäte: 999 testov bar code reader termotlačiareň

Systém je kalibrovaný 6-bodovou kalibráciou a interná kontrola kvality je zabezpečená meraním kontrolných vzoriek s definovaným koncentračným rozmedzím. Analyzátor OC-Senzor-μ kombinuje kvantitatívnu analýzu Hb s kvantitatívnym odberom vzorky stolice. Zahrňuje teda optimalizovaný proces odberu vzorky s plastovou kazetou, ktorá sa priamo vkladá do automatického analyzátora. Odberová kazeta pre vzorku stolice je unikátnym systémom, ktorý zaisťuje tiež kvantitatívnu extrakciu odobratej vzorky stolice.

Spôsob kvantitatívneho odberu qi-FOBT

Odobratá stolica na odberovej tyčinke so zárezmi (v množstve 20 – 200 mg) je po zasunutí do kazety pretlačená presne definovaným septom, ktoré zaisťuje extrakciu 10 mg stolice do 2 ml stabilizujúceho tlmivého roztoku. Po odbere vzorky a pevnom uzavretí nádobky horným viečkom nedochádza k žiadnemu úniku akýchkoľvek látok, ktoré by hygienicky znepríjemňovali prácu s týmto systémom.

Odobratá vzorka môže byť pred doručením do laboratória skladovaná v chladničke po dobu 7dní. V analyzátore je kazeta mechanickým tlakom stlačená, čím dochadza k pretlačeniu extraktu stolice filtrom do nástrekovej jamky pod alumíniovou fóliou. Táto fólia je následne perforovaná a nástrek 25 μl extraktu je ihlou aplikovaný do meracej kyvety.

OKB

27

Odberový systém qi-FOBT Odberové kazety qi_FOBT sú riešené pre:

identifikáciu vzorky čiarovým kódom optimálny odber stolice plastovým kartáčikom elimináciu stolice plastovým septom filtráciu extraktu nylónovým filtrom ochranu odberovej jamky hliníkovou fóliouVLOŽENISTOLICE

Hodnotenie testov

Spoločným problémom ako guajakových, tak aj imunochemických testov je ich kvalitatívne hodnotenie (pozitívny – negatívny). Významný efekt na stanovenie má aj spôsob odberu stolice pacientom, ktorý nie je presne kvantifikovaný a tiež vizuálne, subjektívne hodnotenie výsledku testu laboratórnym pracovníkom. Tieto problémy odstraňuje použitie automatických analyzátorov stanovujúcich kvantitatívne množstvo ľudskeho Hb v stolici, ktoré ponúkajú zásadnú zmenu v detekcii FOB pre laboratórny skríning KRCA.

Štúdia z pracoviska prof. Rozena z Tel Avivu demonštruje takmer neuveriteľnú

špecificitu kvantitatívneho stanovenia Hb v súbore 1000 kolonoskopovaných pacientov. Hodnoty Hb (95%-tný rozsah priemerných hodnôt) pri normálnom kolonoskopickom náleze sú 25–45ng/ml, pri nepokročilých adenómoch 44–115ng/ml, pri pokročilých adenómoch 315–654ng/ml a pri karcinómoch 697–1477ng/ml. (Rozen P, Levi Z, Hazazi R, et al. Quantitative colonoscopic evaluation of relative efficiencies of an immunochemical fecal occult blood test and a sensitive guaiac test for detecting significant colorectal neoplasms. Aliment Pharmacol Ther 2009; 29: 450–7, Rozen P, Levi Z, Hazazi R, et al. Identification of colorectal adenomas by a quantitative immunochemical faecal occult blood screening test depends on adenoma characteristics, development threshold used and number of tests performed, Alimentary Pharmacology & Therapeutics Volume 29, Issue 8, pages 906–917, April 2009.)

Štúdie urobené v Českej republike – Všeobecná fakultná nemocnica 1. lekárskej

fakulty UK a Fakultná Thomayerova nemocnica v Prahe odporučili pre skríning KRCA v Českej republike kvantitatívnu imunochemickú metódu OC-Senzor pri cut-off hodnote 75ng/ml s preukázanou spoľahlivosťou detekcie karcinómu, alebo pokročilého adenómu 86.7% (Kocna P. a spol. – Clin Chem Lab Med 2009; 47, Suppl.1, June 2009, Kohout P. a spol. – GUT, 2009; 58, Nov. Suppl.2 – p.950.p.A295, Kovařova J.T. a spol. – Vnitřni lekařstvi, 2009; 55(9):878). Kvantitatívne imunochemické FOB testy sú odporúčaným testom pre skríning kolorektálnych nádorov vo väčšine európskych krajín, vrátane ČR. Rada skríningu KRCA Českej gastroenterologickej spoločnosti odporučila používanie kvantitatívnych FOB testov na svojom zasadaní 16. dec. 2010.

OC-Senzor test je 3-krát citlivejší ako guajakove testy so špecificitou, senzitivitou

a spoľahlivosťou 90–95%, pričom tieto analytické parametre je možné optimalizovať nastavením cut-off hodnoty.

Odporúčanou cut-off hodnotou pre skríning a indikáciu ku kolonoskopii

je 75 ng/ml. Výsledky testov korelujú s morfologickým nálezom. Hodnoty vyššie ako 1000 ng/ml preukazujú so spoľahlivosťou 95% prítomnosť kolorektálneho karcinómu.

OKB

28

Oddelenie klinickej biochémie OUSA zabezpečuje vyšetrenie qi-FOBT – test 3. generácie pre skríning KRCA od augusta 2011. Vyšetrenie vykonávame denne. Na požiadanie pošleme odberové kazety. Prínos pre lekára Test so signifikantne lepšou špecificitou, senzitivitou a spoľahlivosťou a celkovo

výrazne vyššou výpovednou hodnotou Najpresnejšia metóda stanovenia okultného krvácania Výsledky nie sú ovplyvnené diétou ani krvácaním vo vyšších oblastiach GIT Kvantitatívne výsledky korelujúce s mierou krvácania prekanceróz (adenómy)

a nádorov hrubého čreva Výrazne vyšší záchyt pozitívných pacientov Eliminácia väčšiny falošne pozitívných výsledkov Vyšší počet cielených endoskopických vyšetrení

Prínos pre pacienta Neinvazívne, nezaťažujúce bezbolestné vyšetrenie bez akejkoľvek predchádzajúcej

prípravy Ľahký a pritom štandardizovaný odber vždy rovnakého množstva vzorky Nevyžaduje špeciálnu diétu pred odberom Kompaktná, dokonale uzavretá odberová kazeta zabraňujúca úniku látok Teplotná stabilita vzorky v kazete s možnosťou dlhodobého uchovávania – až 7 dní

v chladničke Odpadá zbytočný stres pri falošne pozitívnych výsledkoch získavaných doteraz

z vyšetrení robených inými postupmi Minimalizácia počtu nepríjemných endoskopických vyšetrení s negatívnymi nálezmi Vyššia pravdepodobnosť odhalenia nádorov hrubého čreva a adenómových polypov,

z ktorých sa karcinóm môže vyvinúť

OKB

29

Prínos pre laboratórium Kvantitatívny test Analýza standardného množstva vzorky Automatické spracovanie v analyzátore Rýchlosť vyšetrenia – až 80 vzoriek za hodinu Možnosť nastavení optimálnej hodnoty hranice detekcie (cut-off hodnoty) Minimalizácia výskytu falošne pozitívnych výsledkov Tepelná stabilita vzorky Reprodukovateľnosť vyšetrenia Nemožnosť ovplyvnenia výsledkov subjektívnym vizuálnym vyhodnotením

používaným pri predchádzajúcich testoch

Dokonale uzavretá kazeta eliminujúca nepríjemnú manipuláciu so vzorkou Zabezpečenie kontroly kvality - kontrolné materiály pre internú a externú kontrolu

kvality Text: Ing. Darina Veličová, primár OKB OUSA, RNDr. Karel Stajner, Dialab spol. s r.o., Praha Foto: Dialab spol. s r.o., Praha

OKB

30

Oddelenie imunodiagnostiky – OID

OID sa špecializuje na vyšetrenie nádorových markerov, hormóny, kostné a zápalové

markery. V rámci hormonálnej diagnostiky sú vyšetrované tyroidálne parametre, fertilitná diagnostika, nadobličková diagnostika, diagnostika porúch rastu, skríning v gravidite, diabetologická diagnostika. Sú vyšetrované i vitamíny a ďalšie látky. Vo vyšetrovaní nádorových markerov je toto pracovisko tradičným lídrom na slovensku s najdlhšou tradíciou, najširším spektrom a s najvyššou odbornou erudíciou. Oddelenie imunodiagnostiky je centrom pre určovanie nádorových markerov (onkomarkerov) v SR, z ktorých viaceré sa vyšetrujú len na tomto pracovisku. Oddelenie imunodiagnostiky zabezpečuje skríning trisomie 21, 18 a NTD. Najnovšie bolo zavedené vyšetrenie nádorového markera HE4 pre ovariálny karcinom a solubilný receptor HER2 na karcinóm prsníkov.

Oddelenie imunodiagnostiky zabezpečuje vyšetrenie intaktného PARATHORMÓNU v statimovom režime ( intaktná molekula = celistvá, neporušená, nerozpadnutá molekula, biologicky účinná forma). Pracovníci OID

Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: Juraj Kaušitz,

Doc. MUDr., CSc. vedúci odd. (primár) 3224 9 602 [email protected]

Mišianik Ján, RNDr.

zástupca primára 3224 9 602 [email protected]

Sortiment vyšetrení na OID

Skratka Názov vyšetrenia Systém (biolog.

materiál)

Frekvencia vyšetrenia

1. TYREOIDÁLNA DIAGNOSTIKA 76. TSH * Tyreotropný hormón S,P d 77. T4 Celkový tyroxín S,P d 78. T3 Celkový trijódtyronín S,P d 79. FT4* Voľný tyroxín S,P d 80. FT3* Voľný trijódtyronín S,P d 81. TG Tyreoglobulín S d 82. Anti-TG Autoprotilátky proti tyreoglobulínu S d 83. Anti-TPO* Autoprotilátky proti tyreoperoxidáze S d 84. TRAK Autoprotilátky proti TSH receptorom S d

2. NÁDOROVÉ MARKERY85. AFP* Alfafetoproteín S d 86. ß2-MIKRO (B2M) Beta-2-mikroglobulín S,U 2xt 87. HCG+ * Ľudský choriový gonadotropín - celkový S d 88. CEA* Karcinoembryonálny antigén S,P d 89. CA 125* Karcinoantigén 125 S,P d 90. CA 15-3* Karcinoantigén 15-3 S,P d 91. CA 19-9* Karcinoantigén 19-9 S,P d 92. CA 72-4 Karcinoantigén 72-4 S,P 2xt 93. CYFRA 21-1* Cytokeratínový fragment 21-1 S,P,PV d94. NSE* Neurón špecifická enoláza S d 95. SCC* Karcinómový antigén skvamóznych b. S,P d

OID

31

Skratka Názov vyšetrenia Systém (biolog.

materiál)


96. TK Tymidínkináza S 2xt 97. TPS* Tkanivový polypeptidický špecifický antigén S d 98. NEO Neopterín S,P,L,V 2xt 99. PSA* Prostatický špecifický antigén S d 100. FPSA* Voľná frakcia prostatic. špecifického antigénu S d 101. CG-A Chromogranín A S 1xt

3. FERTILITNÁ DIAGNOSTIKA102. LH Luteinizačný hormón S,P d 103. FSH Folikuly stimulujúci hormón S,P d 104. ESTRA 17β- Estradiol S,P d 105. PROG Progesterón S,P d 106. PRL Prolaktín S,P d 107. TEST Testosterón ZS d 108. freeTEST Voľný testosterón S 1xt 109. DHEA-S Dehydroepiandrosterón-sulfát S,P dD

4. NADOBLIČKOVÁ DIAGNOSTIKA110. ACTH Adrenokortikotropný hormón P 1x m 111. CORT Kortizol S,P,U d

5. SKRÍNING V GRAVIDITE112. AFP* Alfa1 fetoproteín S, AF d 113. HCG* Ľudský choriogonadotropín S,P d 114. PAPP-A Pregnancy Associated Plazma Protein-A S,P d

6. DIAGNOSTIKA DIABETU115. C-PEP C - peptid S,P d 116. anti-GAD Protilátky proti dekarboxyláze kys.glutamovej S 1x t

7. MARKERY KOSTNÉHO METABOLIZMU 117. iPTH Intaktný parathormón S,P d 118. OSTEO Osteokalcín S 1x t 119. CT Kalcitonín S,P 2-3x m Vysvetlivky: S - sérum, V - výpotok, ZS – zmesové sérum, AF – plodová voda, Ery – erytrocyty, P – plazma, L – likvor, U - moč, P- pleurálny výpotok, * - Akreditovaná skúška

Požiadavky na odber biologického materiálu


TSH Tyreotropný hormón

Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.

T4 Celkový tyroxín

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 7 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.

T3 Celkový trijódtyronín

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 7 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť zmrazené na - 20°C.

OID

32

Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál FT4

Voľný tyroxín

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri - 20°C.

FT3 Voľný trijódtyronín

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri - 20°C.

TG Tyreoglobulín

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri -20°C.

Anti-TG Autoprotilátky proti tyreoglobulínu

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín, oddelené sérum 72 hodín pri 2-8°C. Transport do laboratória v chladiacom boxe

Anti-TPO Autoprotilátky proti tyreoperoxidáze

Materiál : sérumOdber a transport : venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C.

TRAK Autoprotilátky proti TSH receptorom

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 3 dni pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na - 20°C.

AFP Alfafetoproteín

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené séra možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -18°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe.

ß2-MIKRO (B2M)

Beta-2-mikroglobulín

Materiál : sérum , močOdber a transport:: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je možné uchovávať po dobu 72 hod pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -18°C. Druhý ranný moč sa odoberá do sklených alebo plastových nádob s prídavkom 1 ml 0,1mol/l NaOH na 10 ml moču . Na vyšetrenie sa odošle 1 skúmavka moču. Upozornenie! Pri pH moču nižšom ako 5 sa mikroglobulín denaturuje a jeho koncentrácia sa nedá stanoviť

HCG+ Ľudský choriový gonadotropín -celkový

Materiál : sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať pri 2-8 ° C, ak majú byť analyzované do 5 hodín od odberu. Inak je potrebné oddelenie séra centrifugáciou. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.

CEA Karcinoembryonálny antigén

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky sú stabilné pri 2-8°C 24 hodín, oddelené séra a plazmy 7 dní .

CA 125 Sacharidový antigén

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 5 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.

CA 15-3 KARCINOantigén 15-3


OID

33


CA 19-9 Karcinoantigén 19-9


CA 72-4 Karcinoantigén 72-4

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2 EDTA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.

CYFRA 21-1 Cytokeratínový fragment 21-1

Materiál: sérum, plazma, pleurálny výpotok Odber a transport : venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, pleurálny výpotok bez aditív. Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C . Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratóriav chladiacich boxoch.

NSE Neurón špecifická enoláza

Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Pri stanovení v plazme inteferuje NSE z trombocytov. Oddelenie séra má byť čo najrýchlejšie, skladovanie celej krvi vedie k uvoľňovaniu NSE z erytrocytov. Oddelené séra možno uchovávať po dobu 72 hodín pri 2-8°C, transport do laboratória v chladenom boxe.

SCC Karcinómový antigén skvamóznych buniek

Materiál: sérum, plazma Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív , prípadne s K2EDTA Vzorky ( oddelené séra a plazmy ) sa uchovávajú po dobu 24 hod pri 2-8°C, dlhšie pri -18°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch!

TK Tymidínkináza

Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Vzorky ( oddelené séra ) sa uchovávajú po dobu 24 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch

TPS Tkanivový polypeptidický špecifický antigén

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín , oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch.

NEO Neopterín

Materiál: sérum, plazma, mozgomiechový mok, výpotky Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, iné telesné tekutiny bez aditív. Keďže NEO je veľmi citlivý na priame svetlo, musia byť vzorky chránené pred priamym slnečným svetlom a skladované v chladničke. Ak vzorky nemožno dopraviť do laboratória v deň odberu, možno ich skladovať 24 hodín chránené pred svetlom pri 2-8°C, oddelené sérum/plazma je stabilná za tých istých podmienok 5 dní.

PSA Prostatický špecifický antigén

Materiál: sérumOdber: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod., oddelené séra po dobu 5 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch.

FPSA Voľná frakcia prostatického špecifického antigénu

Materiál : len sérumOdber a transport : venózna krv bez aditív Oddelenie séra sa má vykonať do 3 hodín od odberu , séra je možné uchovávať 24 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C a dopravené do laboratória v ľade.

CG-A Chromogranín A

Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe.

OID

34

Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál LH

Luteinizačný hormón

Materiál : sérum , plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA.Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C.

FSH Folikuly stimulujúci hormón

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA. Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C.

ESTRA 17β- Estradiol

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív , prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C.

PROG Progesterón

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA. Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 72 hodín pri 2-8°C.

PRL Prolaktín

Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno sa uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C.

TEST Testosterón

Materiál : zmesové sérumPoznámka. Hladiny testosterónu v priebehu dňa kolíšu, preto je vhodné použiť pri vyšetrení 3 vzorky odobraté v priebehu jednej hodiny v čase medzi 8. - 10. hodinou a stanovenie uskutočniť zo zmiešaného séra. Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra a plazmy 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.

freeTEST Voľný testosterón

Materiál: sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C, do laboratória sa transportujú v chladenom boxe.

DHEA-S Dehydroepiandrosterón-sulfát

Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: Venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra a plazmy 8 hodín pri 2-8°C možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C .

ACTH Adrenokortikotropný hormón

Materiál : plazmaOdber a transport: Odoberie sa 3,0-4,0 ml krvi do vychladených plastových skúmaviek s K2EDTA, premieša sa, scentrifuguje a oddelená plazma sa okamžite zmrazí na –20°C ! Transport do laboratória v ľade.

CORT Kortizol

Materiál: sérum, plazma, m o čOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, čo najrýchlejšie oddelenie séra alebo plazmy, oddelené séra/plazmy možno skladovať 5 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Na vyšetrenie diurnálneho rytmu: odbery o 7:00-9:00, 16:00-18:00 a 24:00 hodine Pri funkčných testoch (ACTH, CRH, dexametazónovom teste) je potrebné označiť dobu odberu na skúmavkách. Moč sa zbiera 24-hodín s presne odmeraným objemom. Na vyšetrenie odoslať 10 ml moču s vyznačeným objemom (24-hodinová diuréza).

AFP Alfa1 fetoproteín

Materiál : sérum , plodová vodaOdber a transport: venózna krv alebo plodová voda bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe.

OID

35


HCG Ľudský choriogonadotropín

Materiál : sérum, plazma , amniotická tekutina Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív prípadne s K2EDTA , plodová voda bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe

PAPP-A Pregnancy Associated Plazma Protein-A

Materiál: sérum, plazma Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo heparinizovaná plazma. K2ETDA plazma nie je vhodná na vyšetrenie, poskytuje nízke vysledky. Vzorky (oddelené séra a plazmy) sa uchovávajú pri 2-8°C, ak sa vyšetrenie realizuje do 24 hodín od odberu. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené a do laboratória transportované v ľade.

C-PEP C - peptid

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Oddelené séra/ plazmy možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C , dlhšie skladovanie pri -20°C. Transportovať do laboratória v chladenom boxe.

anti-GAD Protilátky proti dekarboxyláze kys.glutamovej

Materiál : sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív odobratá nalačno. Oddelené séra možno uchovávať po dobu 48 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.

iPTH Intaktný parathormón

Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Vzhľadom na nočný nárast PTH sa odporúča odber nalačno ráno po 7,00 hod. Pri odbere natívnej krvi nechať krv zrážať v chladničke pri 2-8°C, oddelenie krvného koagula vykonať čo najskôr podľa možnosti v chladenej centrifúge. Oddelené sérum je stabilné 24 hodín , plazma 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní zmraziť pri -20°C. Transport zmrazených vzoriek do laboratória v nádobe s ľadom a v chladiacom boxe.

OSTEO Osteokalcín

Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Osteokalcin je veľmi nestabilný protein s biologickým polčasom len niekoľko hodín. Správna predanalytická prípava vzorky je podstatná pre kvalitu vyšetrenia. Odobraté vzorky umiestniť do nádoby s ľadovou drťou a okamžite transportovať do laboratória. Oddelenie séra sa musí vykonať do 6 hodín od odberu. 1 ml séra sa naleje do odberových skúmaviek OSCAstabil tubes, ktoré obsahujú inhibítory proteáz umožňujúce uchovávať intaktnú molekulu osteokalcínu pri 2-8°C 24 hodín. Pri dlhšom skladovaní je nutné vzorky zmraziť na 20°C. Vzorky neošetrené stabilizačným činidlom je nutné zmraziť okamžite. Do laboratória dopraviť v ľade a v chladiacom boxe.

CT Kalcitonín

Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v ľade a v chladiacom boxe.

OID

36

Nádorové markery v klinickej praxi

Nádorová lokalizácia MKCh

Diferenciálna diagnostika

Histologický typ malignity

Sledovanie účinnosti liečby

Sledovanie v remisii

Poznámky

Nádory hlavy, krku a pažeráka

C00-C15

SCCA, CY 21-1, CEA

Epidermoidný ca

SCCA, CY 21-1, TPS

SCCA, CY 21-1

Adeno ca CEA, TPS CEA Nádory žalúdka

C16 CEA, CA 19-9, CA 72-4

Adeno ca CA 72-4, CEA, TPS

CA 72-4, CEA

Nádory čreva C17-20 CEA, CA 19-9, CgA

Adeno ca CEA, CA 19-9, TPS

CEA, CA 19-9

Karcinoid CgA CgA

Nádory pečene a žlčových ciest

C22-24 AFP, CEA, CA 19-9, FER

Hepatocelulárny ca

AFP, FER AFP

Adeno ca, Cholangio ca

CA 19-9, CEA CA 19-9, CEA

Nádory pankreasu

C25 CA 19-9, CEA, CgA, NSE

Adeno ca CA 19-9, TPS CA 19-9 Pri gastrinómoch – GAST a pri inzulinómoch – INS

Neuroendokrinné nádory

CgA, NSE CgA

Nádory pľúc a pleury

C24, C45

CEA, CY 21-1, NSE, CgA, CA 125, SMRP

Adeno ca CEA, TPS CEA SMRP – solubilný mesotelový peptid (=MESOMARK)

Epidermoidný ca

CY 21-1, TPS CY 21-1

Malobunkový ca

NSE, CgA NSE, CgA

Mesotelióm SMRP, Ca 125 SMRP, CA 125

Nádory hrtana C32 SCCA, CY 21-1, CEA

Epidermoidný ca

SCCA, CY 21-1, TPS

SCCA / CY 21-1

Adenoskvamózny ca

SCCA, CEA SCCA, CEA

Nádory prsníka

C50 CA 15-3, CEA Adeno ca CA 15-3, CEA, TPS

CA 15-3 / CEA, TPS

Nádory krčka maternice a vonkajšieho genitálu

C51-53 SCCA, CEA, CY 21-1

Epidermoidný ca

SCCA / CY 21-1, TPS

SCCA

Adeno ca CEA CEA

Nádory tela maternice

C54-55 HE-4, CA 125 Endometrioidný ca

HE-4, CA 125 HE-4, CA 125

Nádory placenty

HCG Trofoblastické nádory

HCG HCG

Nádory ovárií C56

CA 125, HE-4, CA 72-4, CA 19-9, AFP, HCG, LDH

Adeno ca nemucinózny

CA 125, TPS, CA 72-4

CA 125 Pri disgerminómoch – LDH

Adeno ca mucinózny

CA 125, CA 19-9

CA 19-9

Germinatívne nádory

AFP, HCG AFP, HCG, LDH

OID

37

Nádorová lokalizácia MKCh

Diferenciálna diagnostika

Histologický typ malignity

Sledovanie účinnosti liečby

Sledovanie v remisii

Poznámky

Nádory testes C62 AFP, HCG, Free-HCG, LDH

Seminómy LDH, HCG, Free-HCG

HCG, Free-HCG, LDH

Neseminomatózne nádory

AFP, HCG, Free-HCG, LDH

AFP, HCG, Free-HCG, LDH

Nádory prostaty

C61 PSA, f-PSA, CEA, CgA

Adeno ca PSA, TPS, CEA PSA

Pomer f-PSA/PSA vyšetrovať len pri hodnotách PSA v intervale 4 – 10 ng/ml

Nádory obličiek a močových ciest

C64-66 CEA, CgA, CY 21-1, B2M

Svetlobunkový ca, ca z prechodných buniek

TPS, CEA CEA, TPS

Nádory nadobličiek

C74 CgA, NSE Feochromocytóm

CgA, NSE CgA, NSE

Nádory kože C43-44 S-100, SCCA, Melanóm S-100, TK S-100, TK

Epidermoidný ca

SCCA, TK SCCA

Nádory spojiva C40-41, C49

Sarkómy TK TK

Nádory nervového tkaniva

C70-72 NSE, Neuroblastómy

NSE, TK NSE

Hematologické nádory

C81-96 B2M, TK, FER

Lymfómy B2M, TK B2M, TK

Leukémie TK, FER TK, FER Nádory hypofýzy

C75 PRL, CgA Prolaktinómy PRL PRL

Nádory prištítnych teliesok

C73 PTH, CgA Adenómy, karcinómy

PTH PTH

Nádory štítnej žľazy

C73 TG, CT, CEA, CgA

Diferencované karcinómy

TG TG

Medulárne karcinómy

CT, CEA CT, CEA

©Doc. MUDr. Juraj Kaušitz, CSc. 2011

OID

38

Ponuka nových laboratórnych vyšetrení

Onkomarkery

1. Chromogranín A CG-A 2. Mesomark – SMRP (Soluble Mesothelin Related Peptide) 3. IgM-CEA – cirkulujúci imunokomplex 4. HE4 – Nadsemeníkový sekrečný proteín 4 5. HER-2 – HER-2 receptor (HER-2 ECD)

1. CG-A - chromogranín A Hlavné indikácie vyšetrenia CG-A: Diagnostika, monitorovanie liečby a ďalšieho

priebehu ochorenia u neuroendokrínnych tumorov. Zvýšená produkcia CG-A sa vyskytuje najmä pri:

feochromocytóme karcinoidnom tumore neuroblastóme malobunkovom karcinóme pľúc hyperparatyroidnom adenóme tumore hypofýzy endokrinnom tumore pankreasu MEN1 a MEN2 syndróm (MEN = Multiple Endocrine Neoplasia) iných neuroendokrinných nádoroch (gastrinóm, inzulinóm, glukagonóm,

somatostatinóm) neuroendokrinnom nádore prostaty

Poznámka: Zvýšené hodnoty CG-A pri ca prostaty sú spojené s neuroendokrinnou aktivitou nádoru. Poukazujú na nežiaduci rozvoj ochorenia a nižšiu mieru prežívania nezávislú od klinického štádia choroby. Pri ca prostaty je zvýšená hladina CG-A negatívnym prognostickým faktorom. Interferencie a obmedzenia metódy: Zvýšená produkcia z nemalígnych príčin sa môže vyskytnúť pri:

- chronickom zlyhávaní obličiek - hypergastrinémii - atrofickej gastritíde - liečbe inhibítormi protónovej pumpy - liečbe steroidmi

Materiál: Sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe. Vzorky silne hemolyzované alebo lipemické interferujú pri stanovení a sú príčinou chybných výsledkov! Ref. hodnoty: 10 – 100 ng/ml / (medián 32 ng/ml) Detekčný limit: 1,5 ng/ml

OID

39

2. MESOMARK - Soluble Mesothelin Related Peptide (SMRP) Hlavné indikácie vyšetrenia: Diagnostika, monitorovanie liečby a ďalšieho priebehu

ochorenia u mesoteliómu. Zvýšená produkcia SMRP sa vyskytuje najmä pri Malignom mesotelióme. Poznámka: - SMRP uvoľňovaný do telesných tekutín z mesoteliomových buniek je možné stanoviť

aj niekoľko rokov pred vypuknutím samotného ochorenia - Stanovenie SMRP umožňuje lekárom rutinné monitorovanie jedincov s vysokým rizikom

výskytu malígneho mesoteliómu z dôvodu ich profesionálnej expozície azbestom v súčasnosti, či v minulosti.

- Materiál: Sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe.Vzorky silne hemolyzované alebo lipemické interferujú pri stanovení a sú príčinou chybných výsledkov! Ref. hodnoty: 0 – 1,5 nM (nmol/L) Detekčný limit: 0,3 nM (nmol/L)

OID

40

3. Vyšetrenie sérových hladín IgM-CEA

Karcinoembryonální antigén (CEA) je proteín, ktorý sa nachádza v mnohých typoch buniek, ale hlavne je spojený s nádorovými a fetálnymi bunkami. CEA sa štandardne stanovuje v sére. Normálneho rozmedzia je <5 ng/ml u dospelých nefajčiarov a <10,0 ng/ml u fajčiarov. Zvýšené hladiny CEA sa nachádzajú pri rôznych onkologických diagnózach a boli popísané pri rakovine hrubého čreva, pankreasu, žalúdka, pľúc, prsníka a pod. Zvýšené hladiny boli zistené aj pri benígnych ochoreniach, vrátane cirhózy, zápalových črevných ochoreniach, chronickom ochorení pľúc a pankreatitíde. Hladiny CEA boli zvýšené až u 19 percent fajčiarov a 3 percentách zdravej populácie. Okrem vyššie opísaných benígnych ochorení je hladina CEA výrazne ovplyvnená aj cirkulujúcimi autoprotilátkami. Zvýšená hladina cirkulujúcich autoprotilátok je spojená s rôznymi autoimunitnými a imunodeficientnými ochoreniami, ktoré sa môžu klinicky manifestovať, alebo sú latentné. Najdôležitejší cirkulujúci imunokomplex v triede CEA je IgM-CEA. Klinické štúdie ukázali, že súčasné stanovenie CEA a IgM-CEA zvyšuje senzitivitu CEA pri I. klinickom štádiu kolorektálneho karcinómu o 50%. Vyšetrenie sérových hladín IgM-CEA je veľmi presný a citlivý ELISA test určený na meranie CEA imunitných komplexov v sérach pacientov. Odber: odoberá sa periférna krv u pacienta nalačno do biochemických odberoviek Vacutainer na sérum (červený vrchnák). Referenčné hodnoty: IgM-CEA: do 200 UI/ml

Vyšetrenie sa realizuje pri hladinách CEA <10,0 ng/ml!

4. HE4 – Nadsemenníkový sekrečný proteín 4 (Human epididymis secretory protein 4)

Hlavné indikácie vyšetrenia:

1. pomoc pri monitorovaní odpovede na terapiu pacientov s invazívnym epiteliálnym karcinómom ovária

2. na monitorovanie stavu ovariálneho karcinómu – stanovenie hladín HE4 v sére sa musí použiť v spojení s ostatnými klinickými metódami

3. hlavné použitie výsledkov HE4, spolu s výsledkami CA125, je pri výpočte rizika epiteliálneho karcinómu ovária u žien so zistenou pelvickou masou v premeno- a postmeno-pauze. Výsledky musia byť interpretované v spojitosti s ostatnými metódami v súlade so štandardnými klinickými postupmi.

Vysvetlenie podstaty testu:

Ľudský nadsemenníkový proteín 4 (HE4) patrí do skupiny WDFC (Whey Acidic Four Disulphide Core) proteínov. HE4 bol prvýkrát identifikovaný v epiteli distálneho nadsemenníka a pôvodne bol pokladaný za inhibítor proteázy pri dozrievaní spermií. Doterajšie publikácie uvádzali, že HE4 sa tvorí aj v iných zdravých tkanivách, napr., respiračnom epiteli, tkanivách pohlavných orgánov a taktiež v tkanivách ovariálneho karcinómu.

OID

41

V porovnávacej štúdii zdravých jedincov a pacientov s ovariálnym karcinómom (Hellström et al.) sa zistilo, že HE4 detekoval ovariálny karcinóm so 67% senzitivitou a 96% špecificitou. V následnej štúdii porovnávajúcej mnoho známych biomarkerov pre ovariálny karcinóm HE4 vykazoval najvyššiu senzitivitu pri detekcii ovariálneho karcinómu, zvlášť pri skorom štádiu ochorenia. V tejto štúdii sa ukázala kombinácia HE4 a CA125 so senzitivitou 76% a špecificitou 95% pre stanovenie malignity oveľa presnejšia, ako ktorýkoľvek iný samostatný marker.

Rakovina ovárií je celosvetovo štvrtá najčastejšia príčina úmrtnosti na rakovinu u žien.

Príznaky ovariálneho karcinómu sú spojené s prítomnosťou adnexových más, ktoré sú často nejasné a nešpecifické. Primárnym cieľom diagnostického hodnotenia adnexových más je zistenie, či ide o benígny proces, alebo o malignitu.

Odhaduje sa, že počas života až 5-10% žien v USA podstúpi chirurgický zákrok pre

podozrenie na ovariálnu neoplazmu a 13-21% z nich bude mať ovariálnu malignitu. Pretože väčšina adnexových más je benígnych je dôležité už predoperačne zistiť – pre zaistenie ďalšieho manažmentu liečby - aké vysoké riziko ovariálnej malignity má pacientka.

Od prvých správ v roku 1988 boli štandardmi pri zisťovaní, či je adnexová masa

podozrivá z malignity alebo nie, nasledovné faktory: klinický dojem, CA125 + USG + CT , MRI + CT/PET.

V literatúre je mnoho prác porovnávajúcich, ktorá kombinácia je najvhodnejšia.

Kombinácia zobrazovacích metód a tandemového vyšetrenia HE4+CA125 s výpočtom ROMA dosahuje dosiaľ najvyššiu pozitívnu prediktívnu hodnotu.

Práve HE4 v spojení s CA125 je pomocou na zlepšenie hodnotenia (triage) pacientok

so zistenou pelvickou masou pri zisťovaní rizika, či má alebo nemá pacientka epiteliálny ovariálny karcinóm.

Výsledky musia byť interpretované v spojení s ostatnými metódami v súlade

so štandardnými klinickými odporúčaniami (management guide-lines). Ďalšie dôležité využitie stanovenia HE4 je monitoring odozvy na liečbu pacienta s invazívnym epiteliálnym ovariálnym karcinómom. Výsledok má byť interpretovaný v spojení s ostatnými klinickými metódami používanými pri monitoringu pacientok s ovariálnym karcinómom.

Odber: odoberá sa periferná krv u pacientky nalačno do biochemických odberoviek Vacutainer na sérum (červený vrchnák).

OID

42

5. HER-2- solobilný EGF receptor 2 extracelulárna doména (HER-2 ECD) Zvýšené sérové hladiny HER2 ECD sa vyskytujú približne v 0%–38% u pacientok

s primárnym karcinómom prsníka a 23%–80% pacientok s metastatickým karcinómom prsníka (HER2 pozitivita nádorového tkaniva IHC/FISH je približne 25-30% z celkového počtu nádorov prsníka). Stanovovaním sérovej hladiny HER2 ECD môžeme získať potencionálny nezávislý prognostický a prediktívny marker u primárneho a metastatického nádoru prsníka. Rovnako ako pri amplifikácii a overexpresii HER2 sa pozitivita HER2 ECD spája s horšou prognózou ochorenia. Kombinácia vyšetrovania HER2 ECD a konvenčne využívaných markerov CEA a CA 15-3 prináša celkové zvýšenie senzitivity hlavne na skorú detekciu relapsu ochorenia až 76%. Zvýšená sérová hladina CA 15-3 v kombinácii so zvýšenou sérovou hladinou HER2 ECD je spojená s horšou prognózou, ako samostatne zvýšená sérová hladina CA 15-3. Klinické štúdie ukázali, že približne 25% pacientok s prvolíniovou hormonálnou terapiou môžu zmeniť svoj status z HER2/neu negativity na HER2/neu pozitivitu. Stanovenie sérovej hladiny HER2 ECD u tejto skupiny je nezávislým rizikovým faktorom.

Pri relapsoch nádoru prsníka sú pozorované zmeny HER2 statusu medzi primárnym nádorom a tkanivom metastáz, pravdepodobne selekciou a zmenami klonov nádorových buniek. Stanovovanie sérovej hladiny HER2 ECD vykazuje vysokú konkordanciu s referenčným štandardom IHC a FISH, so senzitivitou a špecificitou do 90% . Rozdiel vo výsledkoch vyšetrení môže naznačovať práve selekciu klonu. Každý relaps nádoru prsníka nie je niekedy možné bioptizovať a histologizovať, preto môže detekcia HER2 ECD napomáhať stanoveniu prognózy a predikcie, čím prináša pridanú hodnotu oproti konvenčným markerom. Napomáha tiež klinickým rozhodnutiam v prípade diskordaných tkanivových vzoriek. Vysoká sérová hladina HER2 ECD pri negatívnej tkanivovej expresii HER2 je spojená s vysokou pravdepodobnosťou recidívy základného ochorenia. Pri metastatickom HER2 pozitívnom karcinóme prsníka liečenom kombináciou chemoterapie a Trastuzumabom bol v prípade účinnosti liečby zistený signifikantný pokles hladín HER2 ECD oproti vstupným hodnotám. Pacientky, u ktorých došlo k progresii ochorenia počas liečby mali nesignifikantné zmeny sérovej hladiny ECD. Ukazuje sa, že opakované stanovenie HER2 ECD je výborným ukazovateľom účinnosti terapie Trastuzumabom. Elevované hladiny HER2 ECD sú prediktorom relatívnej rezistencie na hormonálnu liečbu a niektoré režimy chemoterapie. Vyšetrovanie HER2 ECD u zdravej kontrolnej populácie počas viacerých mesiacov vykazovalo konzistentné hladiny sérového HER2 ECD v medziach referenčnej normy s minimálnymi odchýlkami. Stanovovanie HER2 ECD predstavuje pravú kvantitatívnu metodiku, ktorá prináša doplňujúcu informáciu k IHC a FISH stanovovaniu HER2 v nádorovom tkanive, ktoré sú semikvantitatívnymi. Perspektívne je vhodné zvážiť súčasné vyšetrovanie sérovej hladiny TIMP-1 a ECD, nakoľko TIMP-1 ovplyvňuje produkciu solubilného HER2 ECD.

OID

43

Využitie monitorovania sérového HER2 ECD a indikácie vyšetrenia 1. Primárny nádor prsníka - predoperačne a pooperačne

– Prognostický indikátor v oboch skupinách: uzlina pozitívneho aj negatívneho karcinómu prsnika

– Elevované hodnoty spojené s horšou prognózou, skrátením času do progresie ochorenia a skrátením DFS (disease free survival)

– Vysoké hodnoty spojené s častejším relapsom vo forme vzdialených mts (45.4%), lokoregionálna recidíva (9.2%)

– Elevované hodnoty spojené s častejšiou rezistenciou na adjuvantnú chemoterapiu CMF

2. Nádor prsníka - obdobie observácie

– Marker rekurencie ochorenia, s vysokou senzitivitou pri viscerálnom postihnutí

3. Metastatický nádor prsníka – Hodnota pred terapiou - čiastočne predikuje odpoveď na 1. a 2. líniu hormonálnej

terapie. Elevované hodnoty spojené s kratším trvaním odpovede na liečbu, skrátenie času do progresie a zlyhania terapie, znížením počtu objektívnych odpovedí a znížením počtu klinických odpovedí vrátane stabilizácie ochorenia

– HER2 ECD predikuje horšiu odpoveď na chemoterapeutické režimy CMF, Taxány – Hodnota po chemoterapii je prognostickým indikátorom DFS – Sledovanie dynamiky hladín HER2 ECD počas chemoterapie koreluje s klinickým

priebehom ochorenia

4. HER2 pozitívny nádor prsníka – Liečba monoklónovou protilátkou (Trastuzumabom) neinterferuje so stanovovaním

sérových hladín HER2 ECD – Sledovanie dynamiky hladín HER2 ECD počas terapie Trastuzumabom koreluje

s odpoveďou na liečbu a klinickým priebehom ochorenia – najvýhodnejšie vyznačené u skupiny pacientok s viscerálnymi metastázami.

Referenčné hodnoty: do 9 ng/ml Materiál: sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv Kontakt: Doc. MUDr. Juraj Kaušitz, CSc. primár OID, email: [email protected], tel. + 421 2 3224 9602 RNDr. Ján Mišianik, zástupca primára OID, email: [email protected], tel. + 421 2 3224 9602

OID

44

Oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO

HTO zabezpečuje komplexnú hematologickú diagnostiku. Okrem vyšetrení

základných parametrov krvného obrazu, diferenciálu leukocytov, počtu retikulocytov a morfologického vyšetrenia periférnej krvi a kostnej drene vykonávame základné a špeciálne hemostazeologické analýzy a imunohematologické vyšetrenia (stanovenie krvných skupín, skríning protilátok, skúška kompatibility) v 24 hodinovej nepretržitej prevádzke. V rámci kompletného hemokoagulačného vyšetrenia okrem výsledku poskytujeme na požiadanie aj interpretáciu a vyhodnotenie laboratórnych parametrov s odporúčaním ďalšieho postupu, prípadne liečby. Konziliárne služby poskytujeme telefonicky, osobne pri lôžku, alebo vo vlastnej ambulancii po objednaní pacienta.

Oddelenie hematológie a transfuziológie ponúka pre klinické oddelenia, ako aj pre ambulancie odborných lekárov špecialistov hematológov, onkológov a kardiológov široké spektrum najmodernejších vyšetrení multiparametrovou prietokovou cytometriou. Pre hematológov a onkológov:

imunofenotypizácia lymfoproliferatívnych a myeloproliferatívnych malignít, detekcia PNH klonov

vyšetrenie včasných markerov zápalu a sepsy (CD64, CR1, CR3) stanovenie subpopulácií lymfocytov stanovenie antitrombocytových protilátok stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom angiogénne cytokíny, chemokíny a inflamatórne cytokíny

Pre kardiológov:

– stanovenie fosforylácie VASP (vazodilatačne stimulovaný fosfoproteín) pri monitorovaní antitrombotickej liečby derivátmi tienopyridínov.

Vysoká kvalita poskytovaných laboratórnych vyšetrovacích metód je zabezpečená

zapojením sa HTO do uznávaných medzinárodných systémov externého hodnotenia kvality. HTO má zavedený systém manažérstva kvality pre medicínske laboratóriá podľa ISO 17025 a laboratórium je akreditované a v rámci OUSA je tiež certifikované podľa ISO 9001. Organizačná štruktúra – personál – kontakt - Hematologické a transfuziologické oddelenie sa nachádza v Bloku D na III. poschodí OUSA, Tel. +421 2 322 49 + klapka

Funkcia Pracovník Úsek klapka

Primár Doc. MUDr. Tomáš Lipšic, CSc.

HTO kl.526

Sekundárny lekár MUDr. Zuzana Šimoníková HTO kl.525 Zdravotná sestra Eva Rákoczová Hematologická ambulancia kl.525 Vrchná laborantka Alena Mrázová HTO/Úsek hemokoagulácie kl.523 Laborantka špecialistka Yveta Kováčiková Úsek hematológie kl.522 Laborantka špecialistka Katarína Orgoňová Úsek hematológie kl.522 Laborantka špecialistka Libuše Baumanová Úsek prietokovej cytometrie kl.537 Laborantka špecialistka Mgr. Jana Letenayová Úsek imunohematológie kl.500 Laborantka Jana Rubintová Úsek imunohematológie kl.500

HTO

45

Funkcia Pracovník Úsek klapka

Laborantka špecialistka Eva Lacková HTO/Úsek imunohematológie

kl.500

Iný VŠ pracovník RNDr. Tatiana Železníková, PhD.

Úsek prietokovej cytometrie kl.534

Iný VŠ pracovník Mgr. Peter Bartek, PhD. HTO/Úsek prietokovej cytometrie

kl.537

Pohotovostná služba kl.500, 522, 523, 524 +421 905 623 895

Laboratórno – diagnostické pracovisko spracováva a testuje vzorku biologického materiálu, nie pacienta samotného. Za kvalitu vzorky a jej vhodnosť na vyšetrenie, jej reprezentatívnosť v zmysle korelácie so skutočným stavom pacienta, zodpovedá pracovisko zabezpečujúce prípravu pacienta, odber vzorky, jej skladovanie a transport. Konzekventne klinické pracovisko je zodpovedné za indikáciu vyšetrenia.

Požadované vyšetrenia: – použitie štandardnej žiadanky a uvedenie všetkých požadovaných údajov o pacientovi,

oddelení/pracovisku – čas odberu – uvedenie potrebných klinických údajov – uvedenie potrebných údajov o aktuálnej liečbe

Kvalita vzorky

– použitie štandardnej odberovej skúmavky – adekvátne označenie odberovej skúmavky (pri ručnom označovaní používať paličkové

čitateľné písmo!) – vykonávať atraumatický štandardný odber z nepoškodenej vény a v nepoškodenom

tkanive – pri odbere z kanyly nepoužiť na odber prvých 5 ml krvi – na hemokoagulačné vyšetrenie nepoužiť prvých 3-5 ml krvi (možno ich použiť na iné

vyšetrenie) – štandardné naplnenie odberovej skúmavky (po rysku) – dodržať štandardné postupy po odbere – premiešanie vzorky 3–5 krát ihneď

po odbere, skladovanie pri laboratórnej teplote, resp. pri 2 - 8ºC (podľa typu vzorky a vyšetrenia)

Iné požadované informácie

– uvedenie relevantnej terapie na žiadanke – antikoagulačná terapia (pre hemostazeologické vyšetrenia – druh, dávka, trvanie), hemoterapia pre imunohematologické vyšetrenia, iná terapia, ktorá môže ovplyvňovať vyšetrované parametre (kortikoidy, rastové faktory)

– uvedenie iných údajov, ak sú relevantné (iné diagnózy, klinický stav pacienta – infekt, sepsa, zápal, krvácanie, operácia)

Iné základné informácie

– za kvalitu a identitu vzorky zodpovedá žiadateľ – oddelenie, lekár – pri dostatočnom objeme a kvalite vzorky je možné vyšetrenia rozšíriť o ďalšie testy,

ak je to indikované (úspora času a materiálu) – nie všetky vykonávané vyšetrenia môžu byť statimové – nie všetky vyšetrenia sa vykonávajú v ústavnej pohotovostnej službe

HTO

46

Poznámky k uvádzaným údajom Časy príjmu a spracovania vzoriek

– časy príjmu vzoriek pre rutinné a statimové vyšetrenia boli stanovené na základe organizačných, technologických, biologických, ako aj ekonomických dôvodov a je potrebné ich rámcovo dodržiavať

– časy potrebné na vyšetrenie vzorky (zahrňajú čas od príjmu vzorky, cez spracovanie vzorky a žiadanky, vykonanie testu, hodnotenie technologické a medicínske, po schválenie výsledku) sú definované na základe analýzy pracovnej nálože v danom časovom priestore, personálnych a materiálno-technických možností.

Referenčné hodnoty a limity – pre väčšinu parametrov sú definované dlhodobé referenčné hodnoty určené

na podklade odbornej literatúry s prihliadnutím na štatistické vyhodnotenie vyšetrovanej populácie v rámci ústavu

Alarmové a vitálne hodnoty Alarmové hodnoty sú tie, ktoré významne prekračujú referenčné hodnoty – výsledky

sú následne overené, môžu byť doplnené o iné relevantné testy a konečný výsledok je komentovaný. Pri parametri INR výsledok nemusí byť komentovaný u pacientov, u ktorých je monitorovaná účinnosť antikoagulačnej liečby (pacienti s diagnózou I25 a pridruženými diagnózami).

Vitálne hodnoty sú také, kedy hodnota parametra/parametrov predstavuje závažné ohrozenie stavu, vitálnych funkcií alebo života pacienta - výsledky sú následne overené, môžu byť doplnené o iné relevantné testy, výsledok je okamžité hlásený telefonicky (ak je to možné) na žiadajúce pracovisko a konečný výsledok je komentovaný.

Alarmové a vitálne hodnoty sú stanovené podľa kritérií uvádzaných v literatúre a môžu

byť dohodou upravené.

Parameter Jednotka Alarmové hodnoty Vitálne hodnoty Poznámka

HGB g/L Muži 80 alebo 190 Muži 55 alebo 200 Ženy 70 alebo 170 Ženy 50 alebo 180

RBC 1012/L Muži 3,0 alebo 7,0 Muži 2,5 alebo 8,0 Ženy 2,5 alebo 6,0 Ženy 2,2 alebo 7,0

HCT - Muži 0,30 alebo 0,60 Muži0,25 alebo 0,65

Ženy 0,25 alebo 0,50 Ženy 0,20 alebo 0,55

MCV fl 70 alebo 110 60 alebo 120 MCH Pg 24 24 MCHC g/dL 28 28 WBC 109/L 2,0 alebo >15,0 1,0 alebo 20,0 LYMPH % 15 alebo 60 10 alebo 70 NEUT % 20 alebo 85 10 alebo 90 EO % 8 15 MONO % 15 20 PLT 109/L 50 alebo 600 20 alebo 1000 RT % 0,2 alebo 3,5 0,1 alebo 10,0

Morfológia Er

-

Mikrocytóza, makrocytóza, hypochrómia, polychromázia, sférocytóza, poikilocytóza, inklúzie, fragmenty, erytroblast

Prítomnosť morfologických zmien je vždy komentovaná vo výsledku Morfológia

Le -

Posun doľava, posun doprava,atypické Le, nezrelé elementy,vakuolizácia, toxická granulácia

HTO

47

Parameter Jednotka Alarmové hodnoty Vitálne hodnoty PoznámkaMorfológia Tr

- Mikrocytóza, makrocytóza, obrovské trombocyty

PT INR 0,6 alebo 2,0 0,4 alebo 4,0 APTT R 0,6 alebo 2,0 0,4 alebo 3,0 TT R 0,5 alebo 2,0 0,4 alebo 4,0 FBG g/L 1,0 alebo 6,5 0,6 alebo 8,0 HTI sek 0,6 alebo 2,0 0,5 alebo 2,5 RČP sek 40 alebo 150 30 alebo 180 D-Dimér mg/L 1 20 ATIII % 50 30 PCG 0,5 alebo 1,6 0,3 alebo 3,0 FXII % 40 alebo 200 30 alebo 250

V prípade vyšetrení KS, skríningu protilátok a skúšky kompatibility je potrebné

okamžité oznámenie výsledku skúšky v prípade, keď je tento výsledok v nesúlade s predchádzajúcimi výsledkami. Diagnostická časť HTO poskytuje na požiadanie konzultácie týkajúce sa:

1. interpretácie výsledkov vykonaného vyšetrenia 2. možnosti realizácie vyšetrenia v danom čase u daného pacienta 3. možnosti rozšírenia o ďalšie diagnostické postupy resp. postupnosti diagnostických

algoritmov 4. interferencií ovplyvňujúcich stanovené hodnoty (stav pacienta, terapia)

ZOZNAM HEMATOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ

Názov vyšetrenia Materiál/

Objem Typ

skúmavky Čas vyšetrenia Príjem vzoriek

Rutina Statim Rutina Statim

Krvný obraz bez diferenciálu leukocytov PK /

2,7 ml

BD fialový Sarstedt červený

180 min

20 min 7 - 15 0 - 24

Krvný obraz s 5 populačným diferenciálom leukocytov

PK / 2,7 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 - 24

Počet retikulocytov a ich parametre PK /

2,7 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 - 24

Reakcia POX v leukocytoch (cytochemicky)

PK, KD / 2,7 ml


48 hod - 7 - 15 0 - 24

Reakcia PAS v leukocytoch (cytochemicky)

PK, KD / 2,7 ml


48 hod - 7 - 15 0 - 24

Reakcia AF v leukocytoch (cytochemicky) PK, KD /

2,7 ml


48 hod - 7 - 15 0 - 24

Sedimentácia erytrocytov (FW) PK /

1,8 ml

BD Seditainer čierny

360 min

120 min

7 - 15 0 - 24

Morfológia periférnej krvi PK /

2,7 ml


48 hod 120 min

7 - 15 0 – 24

Morfológia/myelogram kostnej drene KD /

2,7 ml


48 hod - 7 - 15 0 – 24

Morfológia likvoru likvor / 2,7

ml


48 hod 120 min

7 - 15 0 – 24

HTO

48

ZOZNAM HEMOSTAZEOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ


Objem Typ



Protrombínový čas QUICK + index INR PK / 5 ml

BD modrý Sarstedt zelený

180 min

20 min 7 - 15 0 – 24

Aktivovaný parciálny tromboplastínový čas APTT + index APTTRatio

PK / 5 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 – 24

Fibrinogén – koncentrácia v plazme PK / 5 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 – 24

Heparín tolerančný index PK / 5 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 – 24

Rekalcifikačný čas plazmy PK / 5 ml


180 min

20 min 7 - 15 0 – 24

D-dimér – stanovenie koncentrácie v plazme

PK / 5 ml


24 hod 120 min

7 - 15 0 – 24

Antitrombín III – stanovenie aktivity PK / 5 ml


24 hod 120 min

7 - 15 0 – 24

ProCGlobal - stanovenie aktivity PK / 5 ml


1týždeň - 7 - 15 0 – 24

Faktor XII – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor II – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor V – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor VII – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor VIII – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor IX – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor X – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor XI – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Faktor XIII – kvalitatívne stanovenie PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Proteín C – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Proteín S – stanovenie aktivity PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Lupus antikoagulans – koagulačné stanovenie prítomnosti

PK / 5 ml


1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Plazminogén – stanovenie aktivity PK / 5 ml


2 týždne až

1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

DTI – priame inhibítory trombínu PK / 5 ml


2 týždne až

1mesiac

- 7 - 15 0 – 24

Poznámky:

1. odber vzoriek vykonávať atraumaticky s použitím vákuového systému (v kolónke Typ skúmavky sú uvedené také odberové skúmavky, ktoré uprednostňujeme ako najvhodnejšie a preto ich poskytujeme zdarma)

2. vzorky doručiť do 4 hodín od odberu (pri morfologickom vyšetrení do 2 hodín) 3. hodnoty indexov (APTT R, INR, TT R, HTI) udávajú pomer nameranej hodnoty pacientskej vzorky

voči kontrolnej vzorke

HTO

49

ZOZNAM IMUNOHEMATOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ


Objem Typ



Orientačné vyšetrenie krvnej skupiny ABO PK / 5 ml

BD červený Sarstedt biely

24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

Vyšetrenie krvnej skupiny ABO+Rh(D) PK / 5 ml


24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

Skríning tepelných protilátok NAT PK / 5 ml


24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

Skríning tepelných protilátok enzýmovým testom

PK / 5 ml


1 týždeň

45 min 7 - 15 0 – 24

Skríning chladových protilátok PK / 5 ml


24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

Priamy antiglobulínový test PK / 5 ml


24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

Skúška kompatibility (krížny pokus) PK / 5 ml


24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24

ZOZNAM VYŠETRENÍ PRIETOKOVEJ CYTOMETRIE


Objem Typ



Imunofenotypizácia PK,KD / 2,7 ml Likvor Uzlina

BD fialový Sarstedt červený (uzlina vo fyziol. roztoku)

72 hod 180 min

7 - 15 7 - 15

VASP (stanovenie účinnosti liečby clopidogrelom)

PK / 5 ml


24 hod 120 min

7 - 15 7 - 15

CD64 – včasný marker infekcie/sepsy PK / 2,7 ml


24 hod 180 min

7 - 15 7 - 15

Subpopulácie lymfocytov PK / 2,7 ml


24 hod 120 min

7 - 15 7 - 15

Antitrombocytové protilátky PK / 5,4 ml


48 hod 240 min

7 - 15 7 - 15

Cytokínový panel Angio (VEGF, bFGF, IL-6, IL-8, IL-1, MCP-1, TNF)

PK / 2,7 ml


1mesiac - 7 - 15 7 - 15

Poznámky:

1. odber vzoriek vykonávať atraumaticky s použitím vákuového systému (v kolónke Typ skúmavky sú uvedené také odberové skúmavky, ktoré uprednostňujeme ako najvhodnejšie a preto ich poskytujeme zdarma)

2. vzorky doručiť do 4 hodín od odberu (pre vyšetrenie antitrombocytových protilátok a panelu cytokínov Angio je dodržanie tejto podmienky zásadné)

3. pre imunofenotypizáciu je potrebné doplnenie relevantných klinických informácií žiadateľom

Naše oddelenie hematológie a transfuziológie ponúka široké spektrum vyšetrení multiparametrovou prietokovou cytometriou, ktoré sú potrebné pre klinické oddelenia nemocnice, ako aj pre ambulancie odborných lekárov špecialistov hematológov, onkológov, kardiológov.

HTO

50

Pre hematológov a onkológov: 1. imunofenotypizácia lymfoproliferatívnych a myeloproliferatívnych malignít pri:

– stanovení diagnózy (z periférnej krvi, kostnej drene, likvoru, lymfatickej uzliny) – monitorovaní úspešnosti liečby (minimálna zvyšková choroba – MRD) – stanovenie deficientného klonu erytrocytov, granulocytov, alebo monocytov

pri diagnostike PNH

2. vyšetrenie zápalových markerov (CD64, CR1, CR3): – včasný zápalový marker s vyššou špecifitou u onkologických pacientov, na rozdiel

od bežných zápalových markerov (napr. CRP, PCT) – pri diferenciálnej diagnostike a monitoringu febrilného stavu a/alebo sepsy – pre zlepšenie diagnostiky pri určovaní závažnosti sepsy/infekcie

3. stanovenie subpopulácií lymfocytov 4. stanovenie antitrombocytových protilátok

– stanovenie prítomnosti imunoglobulínov triedy IgG, A, M viazaných na trombocytoch

– pri diagnóze trombocytopénie neznámej etiológie

5. stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom – stanovenie prítomnosti imunoglobulínov triedy IgG, A, M viazaných

na granulocytoch pri dg. neutropénií

Komplexný imunofenotyp stanovujeme použitím širokého spektra monoklónových/ polyklónových protilátok a ich kombinácií v 4 až 6-farebnom značení na prietokovom cytometri FACSCanto II od firmy Becton-Dickinson. Pre lekárov kardiolólogov:

– stanovenie fosforylácie VASP (vazodilatačne stimulovaný fosfoproteín): prediktívny test (PLT VASP/P2Y12) pre monitorovanie efektu účinnosti liečiv na báze thienopyridínov (clopidogrel, ticlopidine, prasugrel) u pacientov po perakútnej koronárnej intervencii (PCI) a pacientov s koronárnym syndrómom (CAD).

Naše oddelenie poskytuje tiež odborné konzultácie, ktoré sa týkajú indikácie vyšetrení,

odberu biologického materiálu a interpretácie výsledkov. V prípade záujmu sme pripravení reagovať na požiadavky lekárov špecialistov a podľa potreby rozšíriť sortiment vyšetrení. Výsledky rutinných vyšetrení sú k dispozícii v deň prijatia vzorky, resp. nasledujúci pracovný deň, súrne vyšetrenia spravidla do 2-3 hodín. Laboratórium má uzavreté zmluvy so všetkými zdravotnými poisťovňami pôsobiacimi v SR. Zabezpečujeme zvoz biologického materiálu z dohodnutých zberných miest a zmluvným ambulanciám poskytujeme odberový materiál. Vyšetrovaný materiál pre: Imunofenotypizáciu hemato-onkologických ochorení:

periférna krv (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA) kostná dreň (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA) lymfatická uzlina (odber do fyziologického roztoku - sodium chloride 0,9%) likvor (natívny odber – potreba vyšetrenia v najkratšom možnom čase), iné

HTO

51

Zápalové markery: periférna krv (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA)

Pre funkčné testy trombocytov (VASP): periférna krv (odber do skúmaviek s antikoagulantom citrát Na)

Pre stanovenie antitrombocytových protilátok: periférna krv (odber do skúmaviek s K3 EDTA) – objem v závislosti na počte

trombocytov: 4 - 6 ml (pri počtom PLT nad 50.109/L) 6 - 9 ml (pri počtom PLT pod 50.109/L) 9 - 12 ml (pri počtom PLT pod 10.109/L)

Pre stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom:

periférna krv (odber do skúmaviek s K3 EDTA) - minimálne 5ml PK!

Informácie k vyšetreniam prietokovou cytometriou: Doc. MUDr. Tomáš Lipšic, CSc., primár HTO, [email protected], tel. +421 2 322 49 526 Mgr. Peter Bartek, PhD., email: [email protected] tel. +421 2 32249 534 RNDr. Tatiana Železníková, PhD., email: [email protected] tel.+421 2 322 49 534

ODBER VZORKY KRVI NA LABORATÓRNE VYŠETRENIE SCHÉMA A INŠTRUKCIE

Fáza predanalytického

procesu Činnosť Požiadavka, poznámka

PRÍPRAVA MATERIÁLU

Výber odberovho materiálu

Druh a objemy materiálu určuje (aj poskytuje) diagnostické pracovisko

Kontrola a príprava Kontrola nezávadosti a dátumu expirácie, príprava všetkých častí materiálu: odberový systém, dezinfekčný prostriedok, tampón, škrtidlo, náplasť

Vyplnenie a kontrola žiadanky

Identifikácia pacienta, diagnóza, identifikácia vzorky, kód ZP, požadované vyšetrenia, čitateľná pečiatka pracoviska a lekára, dátum a čas odberu

Označenie odberovej skúmavky

Priezvisko a meno pacienta, rok narodenia (rodné číslo), dátum a čas odberu

Všetky údaje na žiadanke a vzorke musia byť čitateľné!

PRÍPRAVA PACIENTA

Časovanie pacienta Na lačno (ak je potrebné), bez vplyvu liekov s interferenciou

Identifikácia pacienta Pozitívna (kontrola mena) s pacientom

Informovanie pacienta O druhu, spôsobe a účele odberu

Umiestnenie pacienta - polohovanie

Pohodlné uloženie pacienta, polohovanie podľa miesta odberu (sediaca alebo ležiaca poloha)

PRÍPRAVA MIESTA ODBERU

Výber miesta odberu Vhodná véna, bez zápalu, edému, hematómu, iného poškodenia

Dezinfekcia miesta odberu Určeným dezinfekčným prostiedkom

Naloženie škrtidla Primerane pevne, 3-5 cm nad miestom vpichu, maximálne na dobu 2 minút !

Cvičenie ruky Pacient sťahuje a uvoľňuje svaly pod naloženým škrtidlom, max. 2 minúty

Iný druh odberu Z vény bez škrtidla – hrubou ihlou, kapilárna krv, arteriálna krv

HTO

52

Fáza predanalytického procesu

Činnosť Požiadavka, poznámka

ODBER VZORKY

Odber venóznej krvi

Uzavretým systémom – priloženie ihly v ose žily, pod uhlom 20-40 stupňov (podľa anatomických pomerov)

postupným nasávaním vzorky (Sarstedt) alebo podtlakom v skúmavke (BD)

Pozor: Nevhodné pre malé a slabé vény, pacientov s poškodenými krvinkami (hemolytické anémie, trombocytopénie a pod.)

- iný druh odberu – otvorený systém (použitie štandardnej techniky)

Odber kapilárnej krvi Špeciálne odberové skúmavky – nestláčať prst !!

Odber vzorky s následnou aplikáciou lieku

BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom

Odber vzorky po aplikácii lieku

BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom

Odber vzorky pri zavedenej infúzii

BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom: odsať 10 ml krvi sterilne do injekčnej striekačky sterilný odber vzorky sterilným sytémom s adaptérom reaplikácia 10 ml sterilnej krvi do vény napojenie infúzie

UKONČENIE ODBERU

Ošetrenie miesta odberu Suchým, sterilným tampónom, primeraný tlak na tampón 2-5 minút, ev. fixácia náplasťou

Odstránenie ihly Do určeného odpadového kontajneru - Infekčný odpad

Uloženie ostatného materiálu

Piest/adaptéry, iný použitý materiál – do určeného odpadového kontajneru – Infekčný odpad

Manuálne premiešanie vzorky

Inverziou (vertikálnym prevrátením) vzorky 3-5 krát – nie trepanie!

PRED-LABORATÓRNE SPRACOVANIE VZORKY

Kontrola odobratej vzorky Neporušenosť, adekvátny objem vzorky, tesnosť, označenie

Prístrojové miešanie Na miešačke minimálne 5 minút (nie je nevyhnutné) Nemiešajú sa vzorky natívnej krvi!

ULOŽENIE A SKLADOVANIE

Celá krv Kontrolovaná chladnička (2-8C) Vzorky pre imunofenotypizáciu, VASP – pri laboratórnej teplote (22 – 28C)

Vzorky ktoré treba urýchlene dopraviť do

laboratória

Hemokoagulačné vyšetrenia Morfologické vyšetrenia Antitrombocytové protilátky Cytokíny panelu Angio Vzorky likvoru a kostnej drene

Vždy je potrebné sa snažiť o čo najkratšie skladovanie a čo najrýchlejšie dopravenie vzorky do laboratória!

TRANSPORT

Vzorky sú umiestnené vertikálne v stojane a v termoboxe (výnimočne sú dopravované v ruke vo vertikálnej polohe) Vzorky nie sú zabalené do žiadaniek (žiadanky sú voľnou prílohou vzoriek) Vždy je potrebné sa snažiť o čo najkratšie skladovanie a čo najrýchlejšie dopravenie vzorky do laboratória!

HTO

53

PONUKA KOAGULAČNÝCH VYŠETRENÍ

1. Faktor II - aktivita (protrombín) – vitamín K závislá serínová proteáza tvorená v pečeni. Jeho aktívna forma trombín má kľúčovú úlohu v hemostáze. Pôsobí prokoagulačne aj antikoagulačne

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovanie funkcie pečene pri ochoreniach pečene

Zvýšené hodnoty: mutácia protrombín. Znížené hodnoty: liečba kumarínmi, DIC, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans, vrodený nedostatok.

2. Faktor V - aktivita (proakcelerín) – plazmatický kofaktor, ktorý v komplexe protrombinázy významne urýchľuje štiepenie trombínu faktorom Xa

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu – pečeňových dysfunciách, konzumpčnej koagulopatii, hyperfibrinolýze, ako aj v súvislosti s prítomnosťou tumoru

Znížené hodnoty: DIC, hepatopatia, amyloidóza, protilátky typu lupus antikoagulans (pooperačne, po pôrode, pri autoimúnnych a onkologických ochoreniach), vrodený nedostatok.

3. Faktor VII - aktivita (prokonvertín) – vitamín K závislá serínová proteáza. V komplexe s tkanivovým faktorom tvorí tzv. vonkajšiu tenázu, ktorá aktivuje faktory IX a X

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovaní funkcie pečene pri ochoreniach pečene

Zvýšené hodnoty: vek, tehotenstvo, zvýšená hladina triglyceridov. Znížené hodnoty: liečba kumarínmi, DIC, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, zriedkavo protilátky typu lupus antikoagulans, vrodený nedostatok.

4. Faktor VIII - aktivita (antihemofilický faktor A) – plazmatický kofaktor, ktorý spolu s faktorom IXa tvorí tzv. vnútornú tenázu. Hladina FVIII súvisí s hladinou vWF a krvnou skupinou v systéme ABO.

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu (hemofília A), rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, monitoringu liečby koncentrátom faktora VIII

Zvýšené hodnoty: vek, tehotenstvo, zápaly, chronické infekcie, fyzická záťaž, stres. Znížené hodnoty: vrodený nedostatok – hemofília A, DIC, hepatopatia, protilátky typu lupus antikoagulans. Faktor IX - aktivita (Christmas faktor) – vitamín K závislá serínová proteáza, ktorá

v komplexe s faktorom VIIIa tvorí tzv. vnútornú tenázu.

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu (hemofília B – Christmasova choroba), rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, monitoringu liečby koncentrátom faktora IX, pri konzumpčnej koagulopatii, cirhóze pečene

Znížené hodnoty: vrodený nedostatok – hemofília B, DIC, hepatopatia, liečba kumarínmi, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans.

HTO

54

5. Faktor X - aktivita (Stuarta - Prowerovej faktor) – vitamín K závislá serínová proteáza. Je súčasťou komplexu protrombinázy, ktorá premieňa protrombín na trombín.

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovanie funkcie pečene pri ochoreniach pečene atď..

Znížené hodnoty: DIC, hepatopatia, liečba kumarínmi, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans, amyloidóza, vrodený nedostatok.

6. Faktor XI - aktivita (Rosenthalov faktor) – serínová proteáza, ktorá patrí ku tzv. faktorom kontaktnej fáze. Aktivuje faktor IX.

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, detekcii aktivácie kontaktnej fázy koagulácie

Znížené hodnoty: vrodený nedostatok (hemofília C), zriedka protilátky typu lupus antikoagulans, hepatopatia.

7. Faktor XII - aktivita (Hagemanov faktor) – serínová proteáza, ktorá patrí ku tzv.faktorom kontaktnej fáze. Aktivuje faktor XI, prekalikreín a vysokomolekulový kininogén.

indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, pri detekcii aktivácie kontaktnej fázy koagulácie, diagnostike vrodeného angioedému

Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, zriedka protilátky typu lupus antikoagulans, hepatopatia. Zvýšené hodnoty: vrodený angioedém.

8. Faktor XIII - aktivita (faktor stabilizujúci fibrín) – transglutamináza, ktorá stabilizuje fibrínové vlákna tvorbou ireverzibilných kovalentých väzieb. Je dôležitý pri hojení rán a udržaní tehotenstva.

indikácia pri diagnostike vrodenej alebo získanej deficiencie Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, Henoch-Schönleinova purpura, DIC, hepatopatia, väčšie operácie, malígne ochorenia, protilátky typu lupus antikoagulans.

9. Proteín C - aktivita - vitamín K dependentná serínová proteáza. Systém proteínu C je prirodzená antikoagulačná cesta, ktorej cieľom je štiepenie aktivovaných faktorov V a VIII. – indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu proteínu C, chorobách pečene, monitoringu liečby koncentrátom proteínu C

Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, liečba kumarínmi, liečba L-asparaginázou, DIC, väčšie operácie, sepsa, protilátky typu lupus antikoagulans.

10. Proteín S (voľný) - aktivita - vitamín K závislá serínová proteáza, je kofaktorom aktivovaného proteínu C. Má aj vlastnú antikoagulačnú aktivitu, viazaný na C4bBP (C4b Binding Protein) je inaktívny.

pri diagnostike vrodenej deficiencie proteínu S, chorobách pečene Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, liečba kumarínmi, DIC, liečba estrogénmi, L-asparaginázou, väčšie operácie, tehotenstvo, užívanie antikoncepcie, zvýšená hladina C4b-viažúceho proteínu, protilátky typu lupus antikoagulans.

HTO

55

11. LA – Lupus antikoagulans – skríningová detekcia autoprotilátok proti negatívne nabitým fosfolipidom alebo komplexom fosfolipidov s proteínmi (β-2-glykoproteín I, protrombín, proteín C, proteín S, faktory kontaktnej fáze, atď. ) ako významného rizikového faktora u pacientov s trombózou na základe určenia aktivity koagulačného systému. Podľa medzinárodných kritérií je súčasťou vyšetrenia antifosfolipidových protilátok okrem koagulačnej metódy (LA) aj vyšetrenie protilátok ELISA metódou, ktorú vykonáva Oddelenie klinickej imunológie a alergológie Ústavu laboratórnej medicíny OUSA pod panelovým označením APLAG .

12. Plazminogén – stanovenie aktivity (kód vyšetrenia PLG, číslo 625)

- plazminogén ako prekurzor plazmínu, hlavného fibrinolytického enzýmu, podlieha konverzii na plazmín vplyvom aktivátorov (uPA, tPA, streptokináza), resp. je regulovaný prostredníctvom inhibítorov (α-2-antiplazmín, PAI-1) - indikácia vyšetrenia pri diagnostike vrodeného alebo získaného nedostatku plazminogénu Klinická interpretácia:

Znížené hodnoty: ochorenia pečene, DIC, sepsa, trombolytická terapia aktivátormi plazminogénu, vrodený nedostatok.

13. DTI – priame inhibítory trombínu - (kód vyšetrenia DTI, číslo 651)

- kvantitatívne stanovenie priamych inhibítorov trombínu (dabigatran, Argatroban®) pri liečbe pacientov prípravkami s DTI napr. Pradaxa®, ktoré je odporúčané vykonávať počas liečby: - v prípade objavenia sa krvácania nejasného pôvodu - u rizikových skupín pacientov (vek nad 75 rokov, nízka alebo vysoká hmotnosť, pacienti s poruchou funkcie pečene alebo obličiek) - v prípade liečby antikoagulantmi (heparín) - vždy pri objavení sa neočakávanej odpovede na liečbu.

Oddelenie HTO poskytuje tiež odborné konzultácie, ktoré sa týkajú indikácie vyšetrení, odberu biologického materiálu a interpretácie výsledkov. V prípade záujmu sme pripravení reagovať na požiadavky lekárov špecialistov a podľa potreby ešte rozšíriť (v rámci našich možností) sortiment vyšetrení. Výsledky špeciálnych vyšetrení sú k dispozícii v priebehu 2 týždňov až 1 mesiaca (podľa typu vyšetrenia).

Kontakt: Hematologická ambulancia: Doc. MUDr. Lipšic Tomáš, CSc., MUDr. Šimoníková Zuzana Ordinačné hodiny: Pondelok - piatok 7:00 - 10:00 odbery Pondelok, streda, piatok 8:00 - 12:00 MUDr. Šimoníková Zuzana 14:00 - 15:00 tel. konzultácie + administratíva Utorok, štvrtok 8:00 - 12:00 Doc. MUDr. Lipšic Tomáš 14:00 - 15:00 konzíliá + administratíva Kontaktné údaje: [email protected], [email protected] Tel: 02/ 3224 9525, 9526 Informácie: Sestra: Rákoczová Eva

HTO

56

Oddelenie klinickej imunológie a alergológie – OKIA

OKIA vzniklo v Onkologickom ústave sv. Alžbety v roku 2006. Nadviazalo na dlhoročnú prácu OKIA v Národnom ústave tuberkulózy a respiračných chorôb v Podunajských Biskupiciach. Z predošlého pracoviska prešli do OKIA OUSA pracovať obaja lekári a jedna laboratórna VŠ pracovníčka, ako aj zdravotné sestry a niektoré laborantky. V súčasnosti na OKIA OUSA pracuje dvanásť pracovníkov, 4 vysokoškoláci (2 lekári, 2 nelekári) a 6 laborantiek. Charakter práce OKIA OUSA vychádza zo základnej koncepcie klinickej imunológie a alergológie ako klinicko - laboratórneho odboru. Znamená to, že spája klinickú prácu s pacientmi na ambulancii, indikáciu, realizáciu, aj interpretáciu špecifických laboratórnych vyšetrení. Na OKIA OUSA pracujú denne 2 ambulancie - jedna špecializovaná na detskú klientelu, jedna na dospelých pacientov. V ambulanciách pracujú vysoko špecializovaní odborníci - internista alergológ imunológ, resp. pediater alergológ imunológ.

V oboch ambulanciách sa vykonáva klasická diagnostika od anamnézy, cez fyzické vyšetrenie pacienta a indikáciu jednotlivých vyšetrení až po ich interpretáciu a samozrejme liečba. Diagnostikujeme, liečime a dispenzarizujeme pacientov s rôznymi prejavmi respiračnej alergie (rôzne formy alergickej nádchy a astmy), kožnej alergie (atopický ekzém, urtikária), pacientov s rôznymi poruchami imunity (primárne a najmä sekundárne poruchy imunity, vrátane porúch imunity pri onkologických diagnózach) a pacientov so systémovými spojivovými ochoreniami (rôzne prejavy autoimunitných a autozápalových ochorení). Venujeme sa aj in vivo (kožné testy) a in vitro (laboratórne testy) diagnostike liekovej a potravinovej alergie. Naše pracovisko patrí medzi priekopníkov diagnostiky a liečby hereditárneho angioedému a histamínovej intolerancie.

OKIA OUSA je od roku 2010 akreditovaným školiacim pracoviskom Slovenskej zdravotníckej univerzity (pozri sekciu → pedagogická činnosť). Spádovú oblasť našej liečebno - preventívnej starostlivosti tvoria okresy Pezinok a Senec, ale konziliárnu a vysoko špecializovanú činnosť poskytujeme pacientom z celej Bratislavy a okolia, resp. po dohovore z celého Slovenska.

Laboratórium OKIA OUSA poskytuje špecializované imunologické vyšetrenia pre obe ambulancie, celú nemocnicu, ako aj klientov z imunologických - alergologických, pneumologických, otorinolaryngologických, dermatologických, gastroenterologických, neurologických a ďalších špecializovaných ambulancií z veľkej spádovej oblasti (bývalý Západoslovenský kraj), avšak konziliárne služby poskytujeme v celoslovenskej pôsobnosti.

Analýzy sa uskutočňujú na moderných prístrojoch - 6 farebné 2 laserové prietokové cytometre s IVD certifikátom, Phadia CAP250 IVD, CAP100, ELISA automat DSX, HYTEC 288, Dynablot a iné zariadenia využívané k diagnostike a prenosu dát do informačného systému.

Akreditácia. Laboratórium v roku 2011 získalo Osvedčenie o akreditácii podľa ISO 17025:2005.

Pracovníci OKIA

Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: Doc. MUDr. Martin Hrubiško, PhD. Vedúci odd. (primár) 02/322 49 610 [email protected]

MUDr. Júlia Michaličková lekár 02/322 49 611 [email protected] Ing. Mária Zuzulová Vedúca laboratória 02/322 49 595 [email protected]

OKIA

57

Aktuálna ponuka laboratórnych vyšetrení OKIA OUSA (je potrebné konzultovať aktuálnosť (veľká frekvencia zmeny) v laboratóriu : 02/32249595)

Skratka Názov vyšetrenia Jednotky Vzorka Metóda / prístroj


CELULÁRNA IMUNITA - SUBPOPULÁCIE LYMFOCYTOV PRIETOKOVÁ CYTOMETRIAZákladný panel bunkovej imunity

CD3 CD3 T Lymfocyty % EDTA, Heparín

Prietoková cytometria

6 color CANTO II

denne

CD3A CD3 abs. počet CD4 CD4 Pomocné T Lymfocyty % CD4A CD4+ abs. počet CD8 CD8 cytotoxické T Lymfocyty % C8A CD8+ abs.. počet CD348 CD3+CD4+CD8+ % Lymfocyty % CD19 CD19 B Lymfocyty % CD19A CD19+ abs. počet NK CD3-/CD16+56 NK bunky % NKA CD16+56+ abs. počet C3DR+ CD3+/CDHLA DR+ aktiv. T Ly %

CD3DRA CD3+/CDHLADR+ Abs. počet

Aktivačné znaky subpopulácií

C325 CD3+/CD25+ neskorý aktivačný marker %

EDTA, Heparín


6 color CANTO II

denne

C425 CD4+/CD25+ receptor pre IL 2 %

C369+ CD3+/CD69+ včasný aktivačný marker

C469+ CD4+/CD69+ CD838 CD8+38+ T Ly %

C8DR CD8+/HLA DR+ %

T regulačné lymfocyty

TREG CD3+CD4+CD25highCD127low regulačné T lymfocyty EDTA

Iné subpopulácie - podľa dohovoru CELULÁRNA IMUNITA - FAGOCYTÓZA

Funkčná aktivita fagocytózyFagocytóza - prietoková cytometria - DHR

FG DHR Fagocytová aktivita granulocytov %

Heparín


6color CANTO II

denne

FM DHR Fagocytová aktivita monocytov %

MFI stimulačný koef. granulocytov (oxid.vzplanutie), funkč.aktivita

Fagocytóza -funkčná aktivita BURST Test - len po dohovore s OKIA laboratóriom

BGEC % oxidujúcich granulocytov (E.coli - FACS)

Heparín


6color CANTO II

1/týždeń

BGPMA vysoký stimulans PMA - FACS BGFMLP nízky stimulans FMLP - FACS

OKIA

58

Skratka Názov vyšetrenia Jednotky Vzorka Metóda / prístroj


BMEC % oxidujúcich monocytov E.coli - FACS

BMPMA vysoký stimulans PMA - FACS BMFMLP nízky stimuans FMLP - FACS

Deficit myeloperoxidázy- len po dohovore s laboratóriom s OKIA (vykonáva HTO) MP Deficit myeloperoxidázy Heparín

Stanovenie HLA B27 - FACS - autoimunitné ochorenia

B27

HLA B27

medián FITC

EDTA, Heparín


6color CANTO II

denne

BASO TEST - basofil degranulačný test FACS

rôzne alergény, podľa dohovoru s laboratóriom

Heparín 1/týždeň

HUMORÁLNA IMUNITA (HI)Poruchy HI - podtriedy imunoglobulínov

A1 IgA1 podtriedy IgA mg/l

Sérum RID 1/týždeň

A2 IgA2 podtriedy IgA mg/L

G1 IgG1 podtriedy IgG g/l




Poruchy HI - hyper IgD, IgE IGD IgD mg/L

Sérum

RIDFEIA

2/mesiac

TIGE IgE denne

Poruchy HI - komplement

MBLO MBL - oligomerizovaný mannan-viažúci

ng/ml Sérum ELISA 2/mesiac

MASP2 Funkčný, aktívny MBL U/ml Sérum

C02 C2 zložka komplementu mg/l Sérum RID 1/týždeň

C1I C1 inhibítor (kvantita) mg/l Sérum RID/nefelo-

metria 1/týždeň

C1F C1 INH funkčná aktivita % EDTA ELISA 1/mesiac

C1Q C1q zložka komplementu mg/L Sérum RID 1/týždeň

CH50 CH50/CH100 aktivita klasickej cesty

Sérum ELISA 1/týždeň

Poruchy HI - špecifická protilátková odpoveďTET

Hladina IgG protilátok proti Tetanus toxoid

Sérum

ELISA

2/mesiac

DFT

Hladina IgG protilátok proti Difterickému toxoidu

HIB

Hladina IgG protilátok proti Haemophilus infl.

PCP Hladina IgG protilátok proti Pneumokokovému kapsulárnemu polysacharidu

OKIA

59

Adhezívne molekuly SCD62E sCD62E ľudský solubilný E-selektín pg/ml

Sérum ELISA 1/mesiac SICAM1 solubilná intracelulárna adh ng/ml

SVCAM1 -1 solub.vaskulárna bunková ad ng/ml

Potravinová intoleranciaKMA KMA IgA proti kravskému mlieku IU/ml

Sérum

ELISA

2/mesiac

KMG KMG IgG proti kravskému mlieku IU/ml

KAZA KAZ A IgA proti kazeínu index

KAZG KAZG IgG proti kazeínu index

BLA IgA proti beta-laktoglobulínu index

BLG IgG proti beta-laktalbumínu index

LAKA IgA proti laktóze index

LAKG IgG proti laktóze index

ASCA IgA proti Saccharomyces cerevi IU/ml

ASCG ASCA IgG proti Saccharomyces cerevi

IU/ml

GLIA IgA proti deaminovanému gliadínu IU/ml

GLIAG IgG proti deaminovanému gliadínu IU/ml

SOJA IgA proti sóji index

SOJG IgG proti sóji index

TTGA tTG A IgA proti ľudskej transglutamináze

U/ml

TTGG tTG G IgG proti ľudskej transglutamináze

IU/ml

Gastro panel (kvalitatívny panel 5 autoprotilátok proti ASCA, TTGA, GLIA, Pariet. bunkám, Intrinsic faktor v tr. IgA, IgG)

LIAGG

GASTRO panel IgG ( TTGA, ASCA, GLIA, pariet. bunky, intrinsic f.)

kvalitat.

Sérum

WB

Pp

LIAG

GASTRO panel IgA (TGA, ASCA, GLIA,pariet.bunky, intrinsic f.)

Anti-glykánové protilátkyALCA anti IgG laminaribioside EU

Sérum

ELISA

pp

ACCA anti IgA Ab chitobioside antigens EU

AMCA anti IgG mannobioside antibodies EU

Histamínová intoleranciaDAO Diamino oxidáza - hladina U/ml Sérum ELISA 2/mesiac

DAOF Diaminooxidáza - funkčná aktivita HDU Sérum ELISA 2/mesiac

OKIA

60

AUTOPROTILÁTKY Imunofluorescenčne

ANA anti nukleárne IF

ANCA anti neutrofilné IF

EMA endomyziálne IF

ARA anti retikulínové IF

AMA mitochondriálne IF

ATA štítna žľaza IF

ASMA Ab proti hladkému svalu IF

ASKMA Ab proti priečne pruhovanému svalu IF

ANA typizácia - panel 15 antigénov

EIRNP EI RNP/Sm ribozomálny proteín Kvalita-tívny +/- sérum WB denne

EISM EI Sm

EISSA EI SSA SS-A native

EIRO52 EI Ro-52

EISSB EI SS-B

EISCL70 EI Scl-70

EIPM EI Pm-Scl

EIJO1 EI Jo-1

EICB EI Cb Centromera B

EIPCNA EI PCNA polycyklin

EIDNA EI ds DNA

EINUC EI Nuc nukleozómy

EIHI EI Hi históny

EIRIB EI RIB ribozomálny P proteín

EIM2 antimitochondriálny proteín A

ANCA typizácia

EIPR3 c ANCA a-PR3 (anti proteináza 3) Kvalita-tívny +/-

sérum WB denne

EIMPO p ANCA a-MPO (antimyeloperoxidáza)

Fosfolipidové

ACLA Antikardiolipínové protilátky IgA,IgG,IgM screen Sérum

B2GPIG-T anti - beta2 glykoproteín IgG U/ml ELISA 2/mesiac

B2GPIM-T anti - beta2 glykoproteín IgM U/ml ELISA pp

ACLAG-T anti - Kardiolipín IgG U/ml ELISA

ACLAM-T anti - Kardiolipín IgM U/ml ELISA

PSM-T anti - fosfatidyl serín IgM U/ml ELISA

PSG-T anti - fosfatidyl serín IgG U/ml ELISA

PIM-T anti - fosfatidyl inozitol IgM U/ml ELISA

PIG-T anti - fosfatidyl inozitol IgG U/ml ELISA

PAM-T anti - kyselina fosfatidylová IgM U/ml ELISA

PAG-T anti - kyselina fosfatidylová IgG U/ml ELISA

SPMM-T sfingomyelín IgM U/ml ELISA

SPMG-T sfingomyelín IgG U/ml ELISA

OKIA

61

Spojivového tkaniva

RFC RF Check - reumatoid.faktor IgA/IgM

U/ml Sérum ELISA 2/mesiac

CCP Cyklický citrulínový proteín U/ml ELISA

AMCV IgG Ab proti mutovanému citrulinovaný vimenktín

U/ml ELISA

DNASE aktivita DNAázy AR% ELISA

Autoimúnne ochorenia pečene - panel autoprotilátok AMAM2 mitochondriálny antigén (PBC)

kvalitatí vny +/-

Sérum

WB

denne

M23E (BPO) mitochondriálny antigén (PBC)

SP100 mitochondriálne Ab (PBC)

PML mitochondriálne Ab (PBC)

GP210 mitochondriálne Ab (PBC)

LKM1 mikrozomálne pečeňové Ab (PBC)

LC1 cytosolové pečeňové Ab (AIH)

SLALP pečeňový antigén (AIH)

RO52B nukleárny antigén (AIH, reum.och.)

Autoprotilátky asociované s myozitídou-panelMI2 Mi-2 antigén

kvalitatí vny +/-

Sérum

WB

denne

KU Ku antigén

PM100 PM-Scl 100 antigén

PM75 PM-Scl 75 antigén

JO1M Jo-1 antigén

SRP SRP antigén

PL7 Pl-7 antigén

PL12 Pl-12 antigén

EJ EJ antigén

OJ OJ antigén

RO52M Ro-52 antigén

ŠPECIÁLNE VYŠETRENIA Cytokíny - multiplexový panel Th1/Th2/Th17 cytokínov

Il2 IL2 plazmatický

pg/ml

pp

Il4 IL4 plazmatický

IL6 IL6 plazmatický

IL10 IL10 plazmatický

TNFalfa TNFalfa plazmatický

IFNgama IFNgama plazmatický

TGF b1 TGF- b1 plazmatický

IL 1alfa IL1-alfa plazmatický

IL23 IL12/23 plazmatický

IL17 IL17A plazmatický

TREG-FA funkčná aktiv.Treg (pomer pro a protizápal.cytokínov

IFN alfa IFNa plazmatický

Th1/Th2 pomer cytokínov (IFNgama/IL-4)

Zloženie panelu cytokínov je podľa aktuálnej požiadavky klinika

OKIA

62

Adipocytokíny - prognostický panel ľudských adipocytokínov ADI Adiponektíén

pg/ml

pp

LEP Leptín

REZ Rezistín

LRI Leptín/rezistín index

ŠPECIFICKÉ IgE, IgG, IgG4 – ELISA

ALERGIA A ATOPIA

TIE Celkové IgE IU/ml PhadiaCAP 2/týždenne

TRP Tryptáza µg/l PhadiaCAP pp

Skratka Názov alergénu Liekové alergény a alergény

pomocných látok liekov

antibiotikáC2 C2 V penicilin

C1 c1 G penicilin

C201 c201 cefalosp. mix (cefacor, cefuroxim)

C223 c223 sulfametoxazol

C202 c202 suxamethoninum chloride

C203 c203 ampicilin

C204 c204 amoxicilin

C216 c216 doxycyklin

C211 c211 tetracyklin

C212 c212 erytromycin

C213 c213 gentamycin

C288 aminoglykozidy mix (genta,Linco,Neo)

C306 C306 Clindamycin

C295 c295 streptomycin

C301 c301 rifampicin

C305 c305 kys.klavulánova

C436 c436 spiramycin

C307 C307 Ciprofloxacin

C409 c409 Ofloxacin

analgetiká, NSAC217 c217 kys.acetylsalicylová

C209 c209 paracetamol

C281 c281 diclofenac

C286 c286 ibuprofen

C283 c283 Naproxen

C294 c294 metamizol

C282 c282 Indomethacin

OKIA

63

Skratka Názov alergénu C388 c388 Ketoprofen

C304 C304 Piroxicam

C398 C398 Metronidazol

CX2 CX2 analgetiká (paracet, ASA, diclofenac, indometacin, ibuprofen)

anestetikáC231 c231 articain

C232 c232 lidocain

C233 c233 mepivacain

C811 C811 mesocain

C284 c284 procain

C285 c285 bupivacain (marcain)

ostatné mixC296 C296 propylphenazon

C300 C300 codein v tr. IgE

C338 C338 karbamazepin (antiepileptikum)

C311 c311 diazepam

C70 c70 inzulín prasačí

C71 c71 inzulín bovinný

C73 c73 inzulím ľudský

C202. C202 suxamethonium chlorid Prídavné látky liekov, potravinové

aditíva

C312 C312 laktóza IgE

C713 C713 methylparaben ( E218)

C714 C714 propylparaben ( E216)

C242 C242 trimetoprim

C254 c254 prednison

C350 c350 dexamethasone

C252 C252 Captopril ACE inhibitor

F90 F90 slad

F246 F246 guarová múčka

F296 F296 múčka z svätojánskeho chleba

F257 F257 kokosová múčka

F373 F373 arabská guma

C708 C708 xantánová múčka

C725 C725 amarantová múčka

C717 C717 tartrazín-Food add.

C703 c703 kys. benzoová - Food add.

C706 C706 Yellow orange - Food add.

C707 C707 kyselina glutámová-Food

C726 C726 Cochein red

C470 C470 Lecitín - Food add.

C636 C636 sacharín

C710 C710 Methylen blue

C638 C638 Talok - Food Add.

OKIA

64

Skratka Názov alergénu C704 C704 Chinolová žlť - Food add.

C711 C711 sodium nitrát - Food add.

C712 C712 Siričitan sodný - Food add.

C716 C716 kyselina askorbová - Food

C701 C701 aminobenzoová kyselina

C716 C716 kyselina askorbová v tr. IgE

profesné alergényKX1 KX1 Syntetické textílie mix(akryl,h

KX2 KX2 Prírodné textílie(juta,hodváb,b

KX4 KX4 Drevo ihličnatých stromov (borovica, ...)

KX5 KX5 Drevo listnatých stromov(dub, ...)

KX6 KX6 Desinficiencie (et. oxid, kys. Fta)

KX7 Chemikálie (izokyanát TDI, MDI, HDI)

K80 K80 Formaldehyd

K75 K75 Izokyanát TDI

K1 K1 akryl

C623 kyselina metakrylová MAA

O1 O01 cotton linters-bavlnené vlákna

kovyC628 C628 Ni

C616 C616 jód

C648 C648 Zn

C617 C617 Kobalt

C609 C609 chróm

CX1 kovy (hliník, meď, nikel, striebro)

latex - panel rekombinantných komponent latexu

K82 K82 Latex

K701 rHev b1 latex - rekombinantný

K702 rHevB5 latex-rekombinantný

K703 rHev B6 02 latex-rekombinantný

Inhalačné alergény

EX5 perie z lôžkovín (hus, kačka, ...)

EX71 Perie domácich vtákov (hus, sliepka, ...)

EX1 epitélie mix (mačka, pes, kôń, krava)

EX72 Perie exotických vtákov (Andulka, ...)

GX2 Trávy mix (tomka, matonoh, Timotej)

HX4 Skladové roztoče (Acarus siro, ...)

MX1 MX1 Plesne

TX10 TX10 Stromy mix (jelša, breza, lieska, ...)

WX5 WX5 Astrovité byliny mix (ambrózia, ...)

WX6 WX6 byliny mix (skoroceľ, mrlík, ...)

D1. Dermatophagoides pteronyssinus

E1 E1 Mačka - epitélie

E2. E2 Pes - epitélie

OKIA

65

Skratka Názov alergénu E5 E5 Pes srsť

E6 E6 Morča-epitélie

E3 E3 Kôň - srsť

E80 E80 Kozí epitel

E82 E82 Králik - epitel

E84 E84 Zlatý škrečok - epitel

E73 E73 Potkan - epitel

E74 E74 Potkan - moč

E7 E7 Holubí trus

G5 G5 mätonoh (Lolium perenne)

G6 G6 Timotejka

G12 G12 Raž siata

T47 T47 Borievka

T23 T23 Hlošina

T81 T81 Tis

T96 T96 Topoľ

T9 T009 Oliva

T3. T3 Breza biela

T205 T205 baza (Sambucus nigra)

W1 W1 Ambrózia palinolistá

W6 W6 Palina obyčyjná

W9 W9 skorocel (Plantago lanceolata)

W10 W10 mrlík ( Chenopodium album)

W15 W15 loboda ( Atriplex lentiformis)

W18 W18 štiav ( Rumex acetosela)

W20 W20 Žihľava dvojdomá

W21 W21 Parietária

Potravinové alergényZmesné alergény

K99 K99 HSA hovädzí sérový labumín

FX1 FX1 orechy mix (burský,lieskový,par

FX2 FX2 ryby mix (treska,garnela,slávk

FX4 FX4 mäso – brav.,jahňa, hov.,kura.

FX41 mliečny mix(KM,alaktalb,bla

FX15 ovocie pomaranč,jablko,banán

FX48 citrus mix(pomaranč,citrón,gre

FX7 zelenina mix(hrášok,rajčina,mrk

Mlieko, vajceF232 F232 ovalbumín

F233 F233 ovomukoid

F1 F1 vaječný bielok

F75 F75 vaječný žĺtok

F199 F199 surové kravské mlieko v tr. Ig

F200 F200 sójové mlieko v tr. IgE

F300 F300 Kozie mlieko

OKIA

66

Skratka Názov alergénu

- alegia kravské mlieko, komponenty mlieka - pozri CAP systém F2 F2 proteíny kravského mliekav tr. I

F76 F76 alfa-laktalbumín v tr. IgE

F77 F77 beta-laktalbumín v tr. IgE

F78 F78 kazeín v tr. IgE

Ryby, mäsoF3 F3 treska

F23 F23 krab

F41 F41 losos

F50 F50 makrela

F205 F205 sleď

F308 F308 sardinka

F24. F24 šrimp (garnát)

F88 F88 Jahňacie maso

MúkyF9 F9 ryža

F4 F4 pšeničná múka

F5 F5 ražná múka

F6 F6 jačmeň

F7 F7 ovsená múka

F8 F8 kukuričná múka

F10 F10 sezamové semienko

F11 F11 pohánka

F14 F14 sója

F198 F198 ľanové semienko

F79 F79 glutén/gliadín v triede IgE

Orechy, semenáF14 sója

F13 arašid (búrsky oriešok)

F18 Brazil nut - para (brazílsky)

F20 F20 mandľa

F36 F36 kokosový orech

F202 F202 kešu orech

F203 F203 pistáciový orech

F17 F17 lieskový orech

F256 F256 vlašský orech

F299 F299 jedlé gaštany

F183 F183 slnečnicové semienko

F224 F224 mak

BôbyF15 F15 biela fazuľa

F287 F287 červená fazuľa

F235 F235 šošovica

F309 F309 cícer

HY F12 F12 hrášok

OKIA

67

Skratka Názov alergénu Zelenina

F25 F25 paradajka

F31 F31 mrkva

F216 F216 Kapusta

F35 F35 zemiak

F46 F46 Paprika červená

F47 F47 cesnak

F48 F48 cibuľa

F86 F86 petržlen

FX9 FX9 zmes kapustovej zeleniny

F215 F215 hlávkový šalát a príbuzné

F152 F152 Paprika zelená

F218 F218 Paprika červená -korenie

F85 F85 zeler

Ovocie F44 F44 jahoda

F22 F22 malina IgE

F29 F29 červený (vodový) melón

F102 F102 Cantaloupe - melón

F174 F174 figa

F210 F210 ananás

F293 F293 papája

F294 F294 maracuja

F49 F49 jablko

F52 F52 čokoláda

F84 F84 kiwi

F87 F87 žltý (sladký) melón

F237 F237 marhuľa

F96 F96 avokádo IgE

F92 F92 banán

F94 F94 hruška IgE

F95 F95 broskyňa IgE

F255 F255 slivka IgE

F259 F259 hrozno IgE

F91 F91 mango IgE

KoreninyFX23 Korenie mix(horč.,papr.,čierne

F19 Cayenne pepper-kajanská paprika

F220 F220 Cinnamon - škorica

F234 F234 vanilka

F271 F271 Aniseed - aniz

F279 F279 Chili Pepper- čierne korenie

F280 F280 Black Pepper - čierne korenie

F281 F281 Curry - kari korenie

F273 F273 Thyme-tymian

OKIA

68

Skratka Názov alergénu F274 F274 majorán

F283 F283 oregáno

F310 F310 Allspice-nové korenie

F317 F317 koriander

F324 F324 Chmeľ

F89 F89 Horčica

F340 F340 želatína

F224 F224 mak

Blanokrídly hmyzI01 i01 včela

I02 sršeň(Dovichovespula maculata)

I03 i03 osa (Vespula spp.)

I04 i04 osa (Polistes spp.)

I05 i05 sršeň (Dolichovespula arenaria)

I06 i06 šváb (Blatella germanica)

I08 i08 Moľa

I075 i075 sršeň ( Vespra crabro)

I71 i71 komár

I73 i73 pakomár

Bakteriálne extraktyO2 O2 Escherichi coli v tr.IgE

O51 O51 Streptococus viridans v tr. IgE

O71 O71 Staphylococcus aureus v tr.IgE

STRIPOVÁ ANALÝZA Atopický panel - panel alergénov viazaných na membráne ATOP

CCD cross-reacting carbohydrate detetminant EIGX EIGX trávy mix (g6/g12)

EIT3 EIt3 breza

EIW6 EIw6 palina

EID1 EId1 Dermatophagoides pteronys.

EID2 EId2 Dermatophagoides farinae

EIE1 EIE1 Mačka

EIE2 EIe2 Pes

EIE3 EIe3 Kôň

EIM2. EIM2 Cladosporium herbatum

EIM3 EIM3 Aspergillus fumigatus

EIM6 EIM6 Alternaria alternata

EIF1 EIf1 vaječný bielok

EIF75 EIF75 vaječný žĺtok

EIF2 EIf2 kravské mlieko

EIF3 EIF3 treska

EIF76 EIF76 Alfa-lactalbumin

EIF77 Beta-Lactoglobulin

EIF78 EIf78 casein

EIE204 E204 bsa/bsa

OKIA

69

Skratka Názov alergénu EIF4 EIf4 pšeničná múka

EIF9 F9 Ryža

EIF14 EIF14 Sója

EIF13 EIf13 Burský orech

EIF17 EIf17 lieskový orech

EIF31 EIf31 mrkva

EIF35 EIf35 zemiak

EIF49 EIf49 jablko

Stredoeurópsky panel inhalačných alergénov viazaných na membráne WBI INT3 T3 Peľ brezy

INT2 T2 Peľ jelše

INT4 T4 Peľ liesky

ING12 G12 raž siata

INGX5 Gx5 trávy mix

INW1 W1 Ambrózia palinolistá

INW5 W5 Palina

INW9 W9 skorocel

INW15 W15 Loboda

INI6 i6 šváb

INE2 E2 pes epitélie

INE1 E1 mačka epitélie

INE3 E3 kôň epitélie

INE6 E6 morča epitélie

IND1 D1 D.pteronyssinus

IND2 D2 D. farinae

INHX HX domáci prach mix

INM3 M3 aspergillus fumigatus

INM1 M1 Penicillium notatum

INM6 M6 Alternaria tenius

Potravinové alergény-panel 20 alergénov viazaných na membráne WBN INF17 F17 Lieskový orech

INF13 F13 Burský oriešok

INF256 F256 Vlašský orech

INF20 F20 Mandľa

INF2 F2 Kravské mlieko

INF1 INF1 Vaječný bielok

INF75 INF75 Vaječný žĺtok

INF78 F78 Kazeín

INF85 F85 Zeler

INF31 F31 Mrkva

INF25 F25 Paradajka

INF3 F3 Treska

INF23 F23 Krab

INF95 F95 Broskyňa

INF49 F49 Jablko

OKIA

70

Skratka Názov alergénu INF14 F14 Sója

INF4 F4 Pšeničná múka

INF10 F10 Sézam

INF5 F5 Ražná múka

Detský stredoeurópsky panel inhalačných alergénov WIP INPT3 T3 peľ brezy

INPT2 T2 peľ jelše

INPT4 T4 peľ liesky

INPT7 T7 peľ duba

INPGX5 GX5 trávy mix

INPG12 G12 raž siata

INPW6 W6 palina obyčajná

INPW9 W9 skorocel

INPD1 D1 D.pteronyssinus

INPD2 D2 D.farinae

INPE2 E2 pes epitélie

INPE1 E1 mačka epitélie

INPE3 E3 kôň epitélie

INPE6 E6 morča epitélie

INPE84 E84 škrečok epitélie

INPE82 E82 zajac epitélie

INPM3 M3 Aspergillus fumigatus

INPM2 M2 Cladosporium herbatum

INPM1 M1 Penicilium notatum

INPM6 M6 Alternaria tenius

plesneM2 M2 Cladosporium herbarum

M3 M3 Aspergillus fumigatus

M5 M5 Candida Albicans

M43 M43 Saccharomyces carlsbergensis

M44 M44 Saccharomyces cerevisiae

M207 M207 Aspergillus niger

Skratka Názov alergénuCAP systém - FEIA

- rekombinantné a komponentné zložky inhalačných alergénov, profilínový, tropomyozínový panel

MILKCAP špecifické IgE - mlieko a komponenty mlieka, CAP systém

F2C F2C kravské mlieko sIgE CAP

F76RC F76 nBos d4 alpha-lactalbumín natív. komponent-CAP

F77RC F77 nBos d5 beta-lactoglobulín natív. komponent-CAP

F78 RC F78 nBos d8 Casein natívny komponent-CAP

F334RC F334 nBos d Lactoferín natívny komponent-CAP

OKIA

71

Skratka Názov alergénuROZTCAP špecifické IgE - komponenty roztočov, CAP systém

D202RC d202 nDer p1 Dp-rekombinant CAP

D203RC d203 rDer p2 DP - rekombinant CAP

D205RC d205 rDer p10 tropomyosin DP - rekombinant CAP

HMYZCAP špecifické IgE - komponenty hmyzu, CAP systém

I208RC rApi m1 phospholipase A2,CAP

I209RC rVes v5 Common wasp

I210RC rPol d5 Paper waspSTROMCAP špecifické IgE - komponenty stromov, CAP systém T215RC rBet v1 PR-10 Birch -rekombinant CAP

T216RC t216 rBet v2 Profilin Birch-rekombinant CAP

T220RC t220 rBet v4, Birch-rekombinant CAP

T225RC t225 rBet v6 Birch - rekombinant CAP

T226RC t226 nCup a1 Cypress-natívny komponent CAP

T224RC t224 nOlie e1 Olive-nativny komponent CAP

BYLCAP špecifické IgE - komponenty bylín, CAP systém,

W230RC nAmb a1 Ragweed-natívny komponent CAP

W231RC nArt v1 Mugwort-natívny komponent CAP

W233RC nArt v3 LTP Mugwort-natívny komponent CAP

TRAVCAP špecifické IgE - komponenty tráv, CAP systém

G216RC nCyn d1 Bermuda grass

G205RC r Phl p1 Timothy






G212RC r Phl p12 Profilin, Timothy

G213RC r Phl p 5b Timothy

TROPO špecifické IgE - tropomyozínový panel, CAP systém

D205RC d205 rDer p10 tropomyosin DP - rekombinant CAP

F351RC rPen a1 Tropomyosin, kreveta

I6C i6 šváb (german) CAP systém

I8C I8 moľa CAP systém

PROFILIN špecifické IgE - profilínový panel, CAP systém

K221RC rHev b8 Profilín, latex

F421RC rPru p4 profilín, broskyňa CAP

T216RC t216 rBet v2 Profilin Birch-rekombinant CAP

G212RC r Phl p12 Profilin, Timothy

OKIA

72

Ponuka nových laboratórnych vyšetrení

BAZOTEST - funkčný test aktivácie bazofilov určený na in vitro diagnostiku IgE sprostredkovanej alergickej reakcie na rôzne alergény s využitím prietokovej cytometrie.

Test aktivácie bazofilov s využitím prietokovej cytometrie je alternatívnou metódou

pre in vitro diagnostiku IgE sprostredkovanej alergickej reakcie. Princípom testu je vyvolanie aktivácie bazofilov in vitro v prítomnosti senzibilizujúceho alergénu a následné meranie expresie aktivačného znaku bazofilov (CD63) na bunkovom povrchu, detekovaného monoklónovou protilátkou. Výsledok vyjadrený ako množstvo aktivovaných (degranulovaných) bazofilov v %, prípadne ako stimulačný index (pomer aktivovaných granulocytov/k neaktivovaným). Indikácia:

testovanie precitlivelosti I. typu test dobre koreluje s testom uvoľnenia histamínu (histamín release test HRT) pri sporných (nejasných) výsledkoch kožných testov pri neúspešnej terapii ( skrížená reaktivita niektorých alergénov) k monitorovaniu imunoterapie

Odber a požiadavky laboratória:

laboratórium vykonáva test 2x týždenne, test je potrebné vopred objednať odber sa robí do 2ml skúmavky s heparínom – nutné dodržať odporúčaný objem

(po rysku) po odbere je treba skúmavku 8-10x jemne prevrátiť hore dnom a späť odobranú vzorku krvi uchovávať pri 2 – 8°C, do laboratória dopraviť v deň odberu vo výnimočných prípadoch je možné vzorku odobrať a dopraviť do laboratória deň

vopred odber sa odporúča robiť maximálne 12 mesiacov po akútnej alergickej reakcii najmenej 24 hodín pred odberom je vhodné vysadiť podávané antihistaminiká,

glukokortikoidy a kromony odporúča sa robiť odber pred zahájením kožných alebo provokačných testov

Hodnotenie pozitivity: ≥ 15 % aktivovaných bazofilov pre inhalačné a potravinové alergény ≥ 10% pre jed blanokrídleho hmyzu ≥ 5% pre lieky Poznámka: Hodnotenie testu nie je možné robiť, ak pozitívna kontrola (FMLP, anti IGE) vykazuje menej ako 10% aktivovaných bazofilov. Prečo je zmysluplné testovať aktivitu bazofilov?

bazofily nie sú priamym obrazom žírnych buniek v tkanivách, ale sú kľúčom ku klasickej a alternatívnej dráhe anafylaxie

bazofily sú dobre dostupné pre klinické testovanie bazofily dnes vieme identifikovať aj v malom množstve

(prietoková cytometria - CD63/CD203c/CD123/CDHLADR) bazofily hrajú ďalšie role v imunitnom systéme okrem vyvolania anafylaxie môžeme sledovať pomer špecifického IgE/IgG/IgD/IgM na povrchu bazofilov

vs. v plazme (exbio)

OKIA

73

TRYPTÁZA - špecifický marker mastocytov (žírnych buniek)

Tryptáza je jedna z najvýznamnejších proteáz mastocytov. Celková tryptáza zahŕňa proformy α- a β-tryptázy a taktiež enzymaticky aktívnu zrelú β-tryptázu. Proformy tryptázy sú nepretržite uvoľňované z mastocytov do krvného obehu, odzrkadľujúc tak počet mastocytov. Enzymaticky aktívna zrelá β-tryptáza je uchovávaná v granulách kľudových mastocytov a do krvného obehu je uvoľňovaná po aktivácii mastocytov. Ihneď po aktivácii mastocytov sa koncentrácia tryptázy výrazne zvýši, pričom následne dochádza k poklesu jej koncentrácie. Klinický význam Rizikový marker vzniku vážnych reakcií: Stabilne zvýšená hladina tryptázy v sére indikuje zvýšený počet mastocytov a poukazuje na zvýšené riziko vzniku závažných reakcií:

pri liekovej alergii a bodnutí hmyzom pred a počas SIT (špecifická imunoterapia)

počas anestézy a operácií Anafylaxia Dočasne zvýšená koncentrácia tryptázy po anafylaktickej reakcii:

potvrdzuje aktiváciu mastocytov umožňuje diagnostiku post-mortem

Marker hematologických nádorových ochorení a mastocytózy: Trvale zvýšená alebo rastúca koncentrácia tryptázy je užitočným monitorovacím a prognostickým nástrojom pre:

diagnózu a prognózu sledovanie priebehu liečby

Hodnoty tryptázy v sére: Koncentrácia celkovej tryptázy v sére u zdravých jedincov 1-15 μg/l.

Stabilne zvýšená koncentrácia môže, ale nutne nemusí byť spôsobená mastocytózou. Pri kutánnej mastocytóze je všeobecne hladina tryptázy <20 μg/l. U systémovej mastocytózy je hladina tryptázy vo väčšine prípadov > 20μg/l.

Prechodne zvýšená koncentrácia tryptázy poukazuje na aktiváciu mastocytov, ktorá je výsledkom anafylaxie, alebo alergickej reakcie. Najvyššia koncentrácia tryptázy je detekovateľná v sére 15 až 180 minút od začiatku reakcie. Následne hladina tryptázy pomaly klesá a návrat k pôvodnej, základnej koncentrácii nastáva po 24-48 hodinách.

Odber: na overenie aktivácie mastocytov je potrebné sledovanie koncentrácie tryptázy v sére vpriebehu času. Preto je vhodné nasledovné načasovanie odberu krvi:

1. Prvá vzorka by mala byť odobraná v rozmedzí 15-180 minút od začiatku symptómov 2. Druhá vzorka by mala byť odobraná 3-6 hodín po reakcii

OKIA

74

3. Na potvrdenie návratu na základnú úroveň koncentrácie by mala byť odobraná ďalšia vzorka po 24-48 hodinách

4. Pri podozrení na stabilne zvýšené hodnoty tryptázy alebo mastocytózu je vhodné odobrať ďalšiu vzorku o 1-2 týždne.

Typ odberu: venózna krv, skúmavka s EDTA alebo heparínom. Vzorky doručiť čo najskôr do laboratória. Ak ich nieje možné doručiť ihneď, vzorky scentrifugovať, sérum alebo plazmu zmraziť pri < -20°C a doručiť do laboratória (zabrániť ich rozmrazeniu). Metóda stanovenia: enzymatická imunoanalýza s fluorescenčnou detekciou na analyzátore PHADIA ImmunoCAP.

DAOF - D-HIT® ELISA (diaminooxidáza) - test funkčnej aktivity diaminooxidázy

Diagnostika histamínovej intolerancie D-HIT imunoenzymatické stanovenie (ELISA)

určené na meranie diamínooxidázy u pacientov s histamínovou intoleranciou nie je potrebné izotopové laboratórium

Indikácie

žalúdočno-črevné ťažkosti, hnačky bolesti hlavy, migréna bolesti kĺbov sčervenanie pokožky, svrbenie, opuchy nádcha, alebo podobné symptómy po požití potravín s vysokým obsahom histamínu ťažká únava

Histamínová intolerancia

Milióny ľudí trpí po požití určitých potravín ťažkosťami, akú sú žalúdočno-črevné problémy, migrény, podráždenia nosnej sliznice, alebo iné symptómy podobné alergiám. Za tento rozsiahly obraz príznakov môže byť zodpovedné príliš veľké množstvo histamínu v tele. Histamínová intolerancia (HIT) sa vyskytuje vtedy, keď organizmus nie je schopný dostatočne rýchlo odbúrať histamín prijatý v potrave alebo uvoľnený z vlastných buniek. Histamínovou intoleranciou trpí až 1% populácie.

Histamín, biogénny amín, vzniká dekarboxyláciou histidínu. Ako prenášač (mediátor) je zodpovedný za mnohé alergické a pseudoalergické reakcie. Histamín je prirodzená látka v organizme, ktorá sa však vyskytuje vo veľmi rozdielnych koncentráciách aj v mnohých potravinách, ako napr. červené víno, syr, rajčiny, tuniak alebo kyslá kapusta.

Diaminooxidáza (DAO) je dôležitý enzým vyskytujúci sa v organizme, ktorý je zodpovedný za odbúravanie histamínu. DAO sa prakticky vyskytuje v celom tele, ale najdôležitejšia oblasť pôsobenia je črevo. Enzýmová aktivita DAO určuje rýchlosť odbúrania histamínu. Potravinová intolerancia indukovaná histamínom nie je sprostredkovaná IgE. D-HIT (diaminooxidáza).

V prípade nedostatku enzýmu DAO, resp. ak je inhibovaná aktivita DAO, nemôže sa histamín v potrebnej miere odbúrať. Začnú sa objavovať symptómy histamínovej intolerancie, ktoré zahŕňajú početné prejavy ťažkostí. Ďalšia možnosť redukcie funkcie DAO je pri požití látok, ktoré inhibujú aktivitu enzýmu, ako napr. alkohol alebo niektoré liečivá. Stanovenie histamínu a aktivity diaminooxidázy predstavuje teda optimálny marker na diagnostikovanie histamínovej intolerancie a s tým spojených príznakov ochorenia. Pri novom D-HIT imunoenzymatickom stanovení diaminooxidázy (ELISA) sa jedná o aktivačný marker.

OKIA

75

Meranie spočíva v stanovení odbúrania určitého množstva histamínu aktivitou enzýmu v sére alebo v plazme. DAO, ktorá sa vyskytuje vo vzorke odbúra histamín. Nameraná hodnota je úmerná kapacite odbúrania histamínu. Výsledok sa udáva v HDU (Histamin Degrading Units) na ml a zodpovedá takej aktivite DAO, ktorá histamín vo vzorke odbúra.

DAO ELISA - (kvantitatívne stanovenie DAO)

Diagnostika histamínovej intolerancie imunoenzymatickým testom, v ktorom je stanovené množstvo DAO v sére, alebo v iných telových tekutinách pacienta. Na základe komplexnej diagnostiky histamínovej intolerancie (HIT), dopĺňame dg. HIT o novú diagnostickú metódu – stanovenie hladiny DAO v sére pacienta a v iných telových tekutinách.

Metóda – ELISA Výrobca – Immundiagnostik Vyšetrovaná vzorka – sérum pacienta Odber – ako na biochemické vyšetrenia, bez aditív. Rozdiely medzi aktivitou a koncentráciou DAO:

Aktivita DAO nezávisí od koncentrácie DAO Funkčná aktivita DAO závisí od prítomnosti kofaktorov, ako sú vitamín C, B6,

horečnaté a meďnaté ióny in vivo, alebo in vitro. Preto by bolo vhodné s aktivitou DAO stanovovať aj koncentráciu kofaktorov, aby ich prípadný nedostatok nebol nesprávne diagnostikovaný ako histamínová intolerancia

Kvantita DAO nie je závislá od kofaktorov Aktivitu DAO ovplyvňuje príjem liekov, niektoré lieky inhibujú DAO, alebo

podporujú vylučovanie histamínu. Laboratórnymi výsledkami sa zistila nízka aktivita DAO, aj keď je koncentrácia DAO v norme

Aktivita DAO môže byť falošne nízka – (výsledok dg. HIT falošne pozitívy) – ak došlo k nesprávnemu spracovaniu séra – opakované zmrazenie a rozmrazenie, nevhodné skladovanie vzoriek pri izbovej teplote počas dlhšieho obdobia

Aktivita DAO je vyjadrením množstva produktu enzymatického rozkladu putrescínu, alebo histamínu prostredníctvom DAO. V ľudskom organizme tieto amíny nie sú degradované len prostredníctvom DAO, ale aj prostredníctvom N-metyltransferázy, alebo GABA-dehydrogenázy. Preto pri testoch funkčnej aktivity DAO je potrebné vziať do úvahy, že vysoká aktivita DAO môže byť v dôsledku vysokej degradačnej aktivity, ale koncentrácia DAO môže byť nízka

Hladina DAO (ELISA Immundiagnostik) sa zvyšuje v sére pacienta po podaní heparínu

Zvýšená hladina DAO je aj u tehotných žien Kombinácia stanovení DAO koncentrácie a DAO funkčnej aktivity v sére pacienta

je odporúčanou voľbou testov na diagnostiku histamínovej intolerancie a asociovaných symptómov

Interpretácia výsledkov: < 3 U/ml - vysoká pravdepodobnosť HIT ( Histamínová intolerancia) 3– 10 U/ml - pravdepodobná histamínová intolerancia >10 U/ml - nízka pravdepodobnosť histamínovej intolerancie

OKIA

76

Fikolín 3 – ELISA metóda na stanovenie aktivity FCN3 Fikolíny predstavujú skupinu molekúl štruktúrovo a funkčne podobných kolektínom. Sú schopné opsonizovať mikroorganizmy a aktivovať lektínovú cestu komplementu v kooperácii s proteázami asociovanými s lektínom viažucim manán (Mannan binding lectin, MBL) - MASP1, MASP2, MASP3 - ktoré zohrávajú významnú úlohu v patogenéze ochorení.

Fikolín 1 (fikolín M) sa prevažne asociuje s monocytmi a neutrofilmi, Fikolín 2 (Fikolín L) a Fikolín 3 (Fikolín H – Hataka antigén) sú prevažne sérové molekuly. Charakteristickým znakom fikolínu 2 je súbor väzobných miest usporiadaných tak (do „rázštepu“), aby mohol rozpoznať širokú škálu ligandov – bakteriálne kapsulové polysacharidy, lipoteichová kyselina, 1,3-beta glukány (Kilpartick a Chalmers). Poznatky o mikrobiálnej špecifickosti Fikolínu 3 sa doposiaľ dostatočne nepreskúmali. Preukázala sa interakcia s polysacharidmi Aerococcus viridans (tento patogén sa opísal v súvislosti s výskytom ťažkých infekcií u neutropenických detí po chemoterapii) a s lipopolysacharidmi Hafnia alvei. Je známe, že Fikolín 2 a Fikolín 3 je schopný rozpoznať endogénne ligandy apoptických buniek a môže tak prispieť k ich odstraňovaniu a v dôsledku toho udržať homeostázu tkanív, čo je dôležité pri onkologických ochoreniach. Fikolín 3 sa syntetizuje predovšetkým v pečeni a v pľúcach a zúčastňuje sa na systémovej a lokálnej imunitnej odpovedi.

OKIA

77

Nízka hodnota fikolínu 3 sa asociuje s:

rekurentnými respiračnými infektami

neonatálnymi sepsami vyvolanými predovšetkým Gram pozitívnymi baktériami

ovariálnym karcinómom

SLE a inými autoimúnnymi ochoreniami

spolu s nízkym počtom CD4+ T-lymfocytov s výskytom CMV infekcie

zvýšeným výskytom atypických infekcií u HIV pozitívnych pacientov (mykobakteriálne, CMV, mykoplazmové...)

život ohrozujúcimi infekciami

u pacientov so symptomatickým kardiálnym zlyhaním

aktiváciou C3 a jeho následným poklesom

zvýšenou aktiváciou komplementu (doposiaľ nedostatočne objasnený mechanizmus)

Ďalšie možné oblasti využitia fikolínu 3:

fikolín 3 zohráva významnú rolu v proliferatívnej diabetickej retinopatii – tiež ako potenciálny terapeutický cieľ

v gynekológii – Preeklampsie

inhibuje replikáciu vírusu pandemickej chrípky A

autizmus

perinatálna nekrotizujúca enterokolitída

Odber:

‐ do skúmavky bez protizrážanlivých additív (ako na biochémiu) – napr. červená Vacutainer

‐ po odbere nenechať stáť viac ako 1 h pri teplote do 28°C, aby sa predišlo spontánnej aktivácii komplementu

‐ centrifugovať a sérum uložiť pri -20°C/-70°C dlhodobé uskladnenie

Žiadanka – FCN3 (ako samostatná metóda, v komplexe skríningu komplementu je označená WF3)

Normálne hodnoty: 23 – 176 % aktivity Kontakt: Laboratórium tel. 02/32249595, Ing. Zuzulová 02/32249540, [email protected] Ambulancia tel. 02/32249610, Doc. MUDr. Martin Hrubiško, PhD. [email protected] Dispečing na zvoz materiálu: 02/32249438, p. Luknárová 0905 936 219 Marketing: RNDR. Špaček Ľuboš 02/32248413, RNDr. Jozef Tóth, CsC. 02/32248414

OKIA

78

Ústav patológie SZU a OUSA – ÚP

Ústav patológie SZU a OUSA (ďalej len Ústav patológie) je akreditovaným poskytovateľom zdravotnej starostlivosti v Slovenskej republike na úrovni bioptickej aj cytologickej diagnostickej činnosti. Túto činnosť zabezpečuje pre kliniky a ambulancie OUSA, s.r.o., ako aj pre ďalšie zdravotnícke zariadenia na Slovensku. Ústav patológie sa skladá z histopatologického, imunohistochemického a cytologického úseku. V štádiu prípravy je budovanie úseku tkanivovej biobanky, ktorá bude v súčasnosti jediným zariadením tohto druhu na Slovensku.

Ústav patológie je najväčším pracoviskom v SR zabezpečujúcim komplexnú

diagnostiku karcinómov prsníka vrátane vyšetrenia všetkých relevantných biologických prediktívnych ukazovateľov, najmä stavu ER, PR a HER2. Zhodnotenie nadmernej expresie HER2 proteínu, ako aj amplifikácie HER2 génu poskytuje podľa požiadaviek pre ďalšie onkologické pracoviská v Slovenskej republike. Pracovisko je zároveň jedným z konzultačných centier pre bioptickú diagnostiku neuroendokrinných tumorov GITu a zabezpečuje vyšetrenie stavu EGFR, KRAS a MSI pri kolorektálnych karcinómoch v súčinnosti s Oddelením lekárskej genetiky OUSA.

Náplňou histopatologického úseku je aj komplexná konzultačná činnosť onkologickej

diagnostiky pre ostatné pracoviská patológie na Slovensku, a to najmä testikulárnych nádorov, nádorov močového mechúra a osteoartikulárneho aparátu. Ústav patológie SZU a OUSA je pracovisko založené na bohatej tradícii onkologickej diagnostiky. Z významných patológov s medzinárodnou autoritou tu pôsobili primári P. Kossey a J. Maťoška. Viac ako 7 rokov bolo Oddelenie klinickej patológie a cytológie (OKPC) súčasťou Ústavu laboratórnych vyšetrovacích metód LF UK, od ktorého sa v roku 2011 OKPC odčlenilo a pretransformovalo na Ústav patológie pod gesciou SZU a OUSA, s.r.o. Súčasné personálne obsadenie pracoviska je zárukou kvalitnej diagnostiky, ktorú Ústav patológie zabezpečuje. Lekársky tím je tvorený uznávanými odborníkmi v oblastiach mamárnej a urogenitálnej patológie, lézií ženského genitálu, neuroendokrinných tumorov a patológie kostných lézií. Zároveň všetci lekári majú bohaté pedagogické skúsenosti z pôsobenia na iných Ústavoch patológie.

V súčinnosti s Oddelením lekárskej genetiky sa Ústav patológie podieľa na realizácii

programu analýzy nádorovej rezistencie, je partnerom Jednotky translačného výskumu NOÚ a spolupracuje v oblasti experimentálnej mammárnej karcinogenézy a jej terapeutického ovplyvnenia s Ústavom lekárskej biológie JLF UK v Martine. Pracovisko je otvorené akejkoľvek spolupráci a vytváraniu partnerských vzťahov umožňujúcich rozvoj biomedicínskeho poznania. Ústav patológie SZU a OUSA je zároveň výučbovou bázou pre potreby postgraduálneho aj pregraduálneho štúdia v lekárskych a nelekárskych odboroch na SZU, čo zabezpečuje v súčinnosti s Ústavom patológie SZU na Kramároch vedenom doc. MUDr. Dušanom Danišom, CSc.

ÚP

79

Pracovníci ÚP

Pracovník: Kategória/ funkcia: Tel. č.: e-mail:

Karol KAJO, doc. MUDr., PhD. prednosta ÚP 3224 9536 [email protected]

Dušan MACÁK, MUDr., PhD. primár 3224 9517 [email protected]

Štefan GALBAVÝ, prof. MUDr.,DrSc. lekár 3224 9579 [email protected]

Katarína MACHÁLEKOVÁ, MUDr., PhD. lekár 3224 9518 [email protected]

Jaroslava JOZEFÁKOVÁ, MUDr., MIAC vedúci lekár úseku

cytológie 3224 9581 [email protected]

Peter KULIFFAY, RNDr. samostat.odborný prac. 3224 9516 [email protected]

Miroslava VALLOVÁ, Mgr. samostat.odborný prac. 3224 9516

Božena BÓDYOVÁ dokumentácia 3224 9515 [email protected]

Jana PAULENOVÁ, AnnaFELDINSZKÁ, Martina ŠTEFEKOVÁ, Andrea TRNKOVÁ, Mgr., Tomáš LABOŠ, Bc.

laboranti - biopsia 3224 9516

Svetlana HUDECOVÁ, Mgr., Helena FUSEKOVÁ, Kristína MELICHERÍKOVÁ, Bc.

laboranti - cytolóia 3224 9583

3224 9580

Terézia BARICOVÁ sanitárka

Zoznam vykonávaných laboratórnych vyšetrení (skúšok):

V nasledujúcej tabuľke je uvedený zoznam všetkých skúšok vykonávaných na OKPC ÚLVM

akreditovaných – A neakreditovaných – N

P.č. A/N Materiál Skratka Názov vyšetrenia Metóda

1. A tkanivo

Histologické vyšetrenie tkaniva : - peroperačná biopsia - histochémia - imunohistochémia (IHC) - spracovanie tvrdých tkanív - mikroskopické hodnotenie

2. A moč, výpotok, odtlačok, ascitická tekutina

Cytologické vyšetrenie negynekologické : - farbenie náterov polychromatickou metódou podľa Papanicolaua - mikroskopické hodnotenie

3. A gynekologický ster

Cytologické vyšetrenie gynekologické: - farbenie náterov polychromatickou metodou podľa Papanicolaua - LBC - mikroskopické hodnotenie v Bethesda systéme

4. N sérum

ANA EMA ARA ASMA ASKMA ATA AMA APCA

Autoprotilátky - proti bunkovým jadrám - proti endomýziu - proti retikulínu - proti hladkému svalu - proti kostrovému svalu - proti štítném žľaze - proti mitochondriám

NIF

5. N tkanivo Laserová skenovacia cytometria LSC 6. N tkanivo Fluorescenčná in situ hybridizácia FISH Vysvetlivky: IHC – Imunohistochémia, LBC – Liquid based cytology , NIF - Nepriama imunofluorescencia , LSC – Laserová skenovacia cytometria , FISH – Fluorescenčná in situ hybridizácia

ÚP

80

Zoznam histochemických farbiacich a impregnačných metód

1. Farbenie Hematoxylin- eozín 2. Farbenie HP podľa Giemsu 3. Farbenie kolagenových vlákien podľa van Giesona 4. Farbenie kolagenových vlákien podľa Massona 5. Dôkaz fibrínových vlákien podľa Malloryho 6. Dôkaz polysacharidov PAS reakciou podľa McManusa 7. Farbenie PAS – diastáza 8. Farbenie kyslých mukopolysacharidov Alciánovou modrou 9. Farbenie lipidov olejovou červeňou 10. Farbenie Mucikarmínu podľa Mayera 11. Dôkaz amyloidu kongočerveňou podľa Puchetlerovej 12. Farbenie na Mastocyty 13. Dôkaz baktérií podľa Gramma 14. Dôkaz Mycobacterium tuberculosis podľa Ziehl- Neelsena 15. Dôkaz železa Perslovou reakciou 16. Dôkaz žlčových pigmentov Fouchetovou reakciou 17. Impregnácia retikulárnych vlákien podľa Gomoriho 18. Dôkaz melanínu podľa Lignaca 19. Dôkaz pliesní modifikovanou metódou podľa Gomoriho 20. Impregnačná metóda podľa Grimeliusa na dôkaz spojivového tkaniva

Zoznam antigénov vyšetrovaných imunohistochemickou metódou

Protilátka proti antigénu Skratka Výrobca

Aktín (smooth muscle) ASM Dako

Aktín sarkometrický ASR Dako

Alfa-1-fetoproteín AFP Dako

Beta-Catenín βCAT Dako

CD10 CD10 Dako

CD20y CD20, L26 Dako

CD30 CD30 Dako

CD31 CD31 Dako

CD34 Class II CD34 Dako

CD44 CD44 Dako

CD45 CD45, LCA Dako

CD45RO CD45RO, UCHL1 Dako

CD56 CD56 Dako

CD68 CD68 Dako

CD99 CD99 Dako

CD117 CD117 Dako

c-erbB-2 onkoproteín CE Dako

Cytokeratín 7 CK7 Dako




Cytokeratín AE1/A3 AE1/3 Dako

ÚP

81

Protilátka proti antigénu Skratka Výrobca

Cytokeratín HMW CKHW Dako

Dezmín DEZ Dako

EGFR EGFR Dako

E-kadherín CAD Dako

Epitelový membránový antigén EMA Dako

Estrogénový receptor ER Dako

FVIII (von Willebrand factor) FVIII Dako

Gastrin GAST Dako

Glukagon GLUK Dako

ľudský choriogonadotropín HCG Dako

Hepatocyte HEP Dako

HER2 HER2 Dako

Chromogranín A CHROM Dako

Inhibín INHIB Dako

Inzulín INZ Dako

Kacitonín KALCIT Dako

Kaldesmon CDES Dako

Kalretinin CRT Dako

Karcinoembryonálny antigén CEA Dako

Ki-67 Ki-67 Dako

Melan A Melan Dako

Melanozóm HMB45 Dako

MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 MMR Dako

Enoláza špecifická pre neuróny NSE Dako

Proliferačný bunkový jadrový antigén PCNA BeckmanCoulter

Placentárna alkalická fosfatáza PLAP Dako

p16 p16 CINtec

p53 p53 Dako

P504S (α-metylacyl CoA racemáza) p504S Dako

Progesterónový receptor PR Dako

Prostatický špecifický antigén PSA Dako

Serotonin SRT Dako

Somatostatin SOM Dako

Survivín SURV Dako

S-100 S-100 Dako

Synaptofyzín SYN Dako

Tyreoglobulín THG Dako

Tyreoidný transkripčný fatkor -1 TTF-1 Dako

Vimentín VIM Dako

ÚP

82

Požiadavky na odber a doručenie vzoriek biologického materiálu

Táto kapitola obsahuje pokyny týkajúce sa správneho odberu, fixácie a manipulácie s materiálom pre cytologické (gynekologické a negynekologické) a bioptické vyšetrenie. Riadia sa nimi ako zamestnanci pracoviska, tak isto sú tieto pokyny poskytnuté aj odosielajúcim lekárom a zdravotníckym pracovníkom zodpovedným za odbery, fixáciu a značenie materiálov a preparátov.

1. Sprievodný list (Žiadanka) Každý materiál určený na cytologické a histologické vyšetrenie musí mať riadne vyplnený

sprievodný list ! Sprievodný list musí obsahovať tieto povinné údaje: meno a priezvisko pacienta rodné číslo, príp. dátum narodenia (novorodenci, cudzinci) kód zdravotnej poisťovne pacienta, resp. informácia o spôsobe úhrady identifikáciu objednávateľa: ústav, klinika, oddelenie, pracovisko, meno lekára,

kód lekára lokalizáciu (tkanivový pôvod vzorky) – predmet vyšetrenia klinickú diagnózu, príp. stručný klinický priebeh požiadavky na rýchlosť uskutočnenia vyšetrenia (CITO) pečiatku a podpis odosielajúceho lekára na origináli a kópii sprievodného listu.

Povinné podmienené údaje: predchádzajúce histologické vyšetrenie popis odobratého materiálu, príp. anatomická špecifikácia miesta odberu dátum a čas odberu adresa miesta pobytu vyšetrovanej osoby v SR telefón alebo iný kontakt na odosielajúceho lekára v prípade urgentného alebo

závažného výsledku Požiadavky na urgentné vyšetrenie: Požiadavky na vyšetrenie CITO (akútne vyšetrenie) sa zasielajú na rovnakých sprievodkách ako pre bežné vyšetrenia, avšak sú navyše označené slovom CITO a zvýraznené červenou farbou. Sprievodka musí obsahovať vyššie uvedené povinné údaje.

2. Odber vzoriek pre gynekologickú cytológiu a) Odber - Odber cytologickej vzorky uskutočňuje lekár – gynekológ najlepšie v prvej

polovici menštruačného cyklu. Je dôleţité odobrať vzorky z tzv. transformačnej zóny. Reprezentatívny ster má obsahovať bunky ektocervixu a endocervixu, t. j. dlaždicový a žľazový epitel. Odber sa uskutočňuje štetcom (brush), príp. vatovou štetkou alebo špachtľou. Za bezpečnú likvidáciu materiálov použitých pri odbere je zodpovedný lekár, ktorý odber vykonal. Odber pre LBC sa robí do špeciálnych odberových súprav, ktoré Vám dodáme na požiadanie.

b) Fixácia - Po odbere gynekológ rovnomerne rozotrie materiál po celej dĺžke podložného skla tak, aby bolo v celom rozsahu pokryté náterom. Potom ho okamžite ponorí do fixačného roztoku (90 % metanol). Takto fixovanú a riadne označenú vzorku je potrebné uložiť tak, aby nedošlo ku kontaktu so žiadnou ďalšou chemikáliou, ktorej prítomnosť by následne mohla ovplyvniť spracovanie vzorky v laboratóriu, napr. dezinfekčné roztoky, osviežovače vzduchu, formaldehyd. Rovnako je dôležité, aby s takýmito chemikáliami neprišli do styku čisté sklá určené na odber materiálu. Na tento účel je možné použiť vhodné uzatvárateľné prepravné škatuľky. Takto uložená fixovaná

ÚP

83

vzorka je v ambulancii uchovávaná pri izbovej teplote a je vhodné, aby sa vzorka spracovala do 1 až 2 týždňov.

c) Označenie - Sklo a sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na sprievodke určuje aspoň jeden z nasledujúcich parametrov:

– meno a priezvisko pacienta – rodné číslo pacienta – poradové číslo alebo označenie pridelené ošetrujúcim lekárom V prípade, že je zhoda v označení, materiál sa spracuje, v opačnom prípade sa sklo spolu

so sprievodkou odkladá do nekompletných vyšetrení a laborant telefonicky alebo písomne informuje odosielajúceho lekára a požaduje doplnenie údajov a spresnenie informácií.

d) Chyby pri odbere Nesprávna fixácia: V prípade, že sa materiál okamžite po odbere nezafixoval, materiál

sa znehodnotí!!! Kontaminácia čistého skla alebo náteru : Podložné sklo, na ktoré sa cytologická

vzorka nanáša, musí byť čisté. V prípade, že sa dostane do styku s akýmkoľvek aerosólom (dezinfekcia, dezodorant a pod.) používaným v ambulancii, dochádza k rozkladu buniek vplyvom zmeny pH prostredia a v takom prípade nie je možné náter v laboratóriu správne ofarbiť a hodnotiť.

Nesprávny odber gynekológom: V prípade, že náter z cervixu neobsahuje endocervikálny alebo ektocervikálny epitel, vzorka je nedostatočná. Medzi ďalšie limitujúce faktory patrí malobunkový odber, masívna prítomnosť erytrocytov alebo ťažký zápal.

3. Odber telových tekutín a ich fixácia pre negynekologickú cytológiu

a) Odber a fixácia moču - Vždy sa vyšetruje stredný prúd moča; pacient o tom musí byť vopred poučený. Určenie minimálneho množstva vzorky je vždy individuálne. V prípade neistoty konzultuje lekár vykonávajúci odber s lekárom z nášho pracoviska. Na sprievodke k materiálu je nutné označiť charakter vzorky: spontánny, katetrizovaný, a iné. Na odber moču sú určené plastové skúmavky s uzáverom. Na fixáciu sa používa roztok 1 % mertiolátu sodného (etylmerkuritiosalicylan sodný). K 10 ml odobratého moču sa pridá 5 kvapiek tohto roztoku.

b) Ostatné telesné tekutiny (výpotok, punktát) - Odbery iných telových tekutín vykonáva vždy lekár. Ide napr. o tenkoihlové biopsie, odber tekutín z telových dutín. Naše pracovisko nemá žiadne špeciálne požiadavky na výkon odberov takýchto telových tekutín. Určenie minimálneho množstva je vždy individuálne. V prípade neistoty konzultuje lekár uskutočňujúci odber s lekárom nášho pracoviska. Ak sa odobraté tekutiny dodávajú v stave, v akom boli odobraté, je nutné ich čo najskôr (do 15min) dopraviť do laboratória na spracovanie. Ak nie je možné ich do tohto času doručiť, je potrebné tekutinu fixovať pridaním 50-70% etanolu v pomere 1:1. Takto fixovanú tekutinu je možné dodať aj neskôr, pričom nemusí byť uskladnená v chladničke.

c) Zhotovenie náterov z telových tekutín a ich fixácia - Nátery na podložnom sklíčku je nutné po odbere označiť číslom, ktoré priradí spolu so svojou identifikačnou značkou v ambulancii lekár. Mierne zasušený náter sa ponorí do roztoku metanolu na čas 10 až 30 min.

d) Označenie vzorky - Skúmavka a sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na sprievodke a vzorke určuje aspoň jeden z týchto parametrov: – meno a priezvisko pacienta – rok narodenia.

ÚP

84

V prípade, že je prítomná zhoda v označení, materiál sa spracuje. Pokiaľ tomu tak nie je, sklo a sprievodka sa odložia do nekompletných vyšetrení a laborant telefonicky informuje odosielajúceho lekára a žiada o doplnenie a spresnenie informácií o pacientovi.

4. Manipulácia s materiálom pre peroperačné vyšetrenie

a) Odber a fixácia – Materiál odobratý počas operačného výkonu dopraví okamžite po jeho odbere sanitár na naše pracovisko v označenej nádobe spolu so sprievodným lístkom. Materiál môže byť orientovaný a fixovaný na špeciálnej podložke. Výsledky peroperačného vyšetrenia hlási lekár – patológ telefonicky operujúcemu lekárovi. Po spracovaní zmrazovacou technikou je zvyšok materiálu fixovaný 4 % formaldehydom a spracovaný štandardným spôsobom.

b) Označenie – Spolu s materiálom sanitár prinesie aj vyplnenú sprievodku. Nádoba s materiálom, ako aj sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na žiadanke a vzorke určuje aspoň jeden z týchto parametrov: – meno a priezvisko pacienta – rodné číslo pacienta/rok narodenia.

Akákoľvek nezhoda v označení nádoby s materiálom a sprievodky sa rieši telefonicky.

Požiadavku vykonania rýchlej peroperačnej biopsie oznámi odosielajúce oddelenie jeden deň pred vykonaním rýchlej biopsie doručením operačného plánu. Podľa plánovaného rozpisu služieb v uvedený termín poverený lekár spolu s určeným zdravotníckym laborantom zabezpečí vykonanie rýchlej biopsie. O vykonaní rýchlej peroperačnej biopsie (čas vyšetrenia, počet vyšetrení, orgánová špecifikácia, výsledok) urobí lekár záznam do NIS.

5. Odber a fixácia tkaniva na histologické vyšetrenie a) Odber vykonáva vždy špecializovaný lekár na jednotlivých klinikách, oddeleniach

a ďalších zdravotníckych zariadeniach. Materiál, ktorý ošetrujúci lekár odoberie pri operačnom vyšetrení (ambulantnom a nemocničnom), posiela patológovi celý, a to vždy na jedno pracovisko. Pri väčších vzorkách je vhodné označiť patologické lézie, napr. stehom, farebným tušom. Za bezpečnú likvidáciu materiálov použitých pri odbere zodpovedá lekár, ktorý odber vykonal.

b) Fixácia - Tkanivo určené na histologické vyšetrenie je nutné OKAMŽITE FIXOVAŤ. Ako fixačná tekutina sa používa 4 % formaldehyd.

Upozornenie: Pri nedodržaní nasledujúcich zásad dochádza k autolýze materiálu!!! 1) Odobraté tkanivo musí byť v nádobe s dostatočným množstvom fixačnej tekutiny

(10 násobok objemu vzorky). 2) Fixačná tekutina musí mať v nádobe dostatočný prístup k tkanivu. Najprv je nutné

do nádoby naliať tekutinu a potom vložiť tkanivo, nie naopak! 3) Plošné orgány sa pred vkladaním do nádoby napínajú na polystyrénové podložky,

čím sa zabráni ich pokrúteniu (konizáty). 4) Malé a viacpočetné materiály (b. žalúdka, čreva, čapíka maternice) sa orientujú

na papierik. 5) Väčšie orgány, napr. maternica, je nutné narezať, aby fixačná tekutina rýchlejšie

prenikala tkanivom. 6) Materiály treba ukladať do nádob, ktoré zodpovedajú ich veľkosti, nikdy sa nesmú

do nej natlačiť! 7) Nádoby je nutné riadne uzatvoriť, aby sa fixačný roztok nevylial! 8) Materiál do času prepravy do laboratoria nie je potrebné skladovať v chladničke.

ÚP

85

Takto uložené a fixované tkanivo je z hľadiska času kvalitatívne nemenné až do doby spracovania. Pracovisko uchováva vyšetrený materiál do času konečného stanovenia výsledku. Preparáty a parafínové bločky z jednotlivých vyšetrení sa uchovávajú počas 20 rokov.

c) Špecifické požiadavky na odber a fixáciu Biopsia prsníka: Vzorka musí byť kompaktná, bez narezania, aby bolo možné presne sa vyjadriť k okrajom excízie. Najvhodnejšie je dodať materiál v jednom kuse. V prípade, že je rozdelený na viac vzoriek, musia byť jednotlivé vzorky označené s dôrazom na vzájomnú súvislosť. Vzorky je potrebné pre potreby topografickej orientácie vždy označiť aspoň dvoma stehmi, napr. krátky alebo modrý steh ventrálne a dlhý alebo biely steh laterálne. V prípade tkaniva po predchádzajúcej punkcii musí byť spoľahlivo označené miesto pôvodného výkonu – grafitom, svorkou alebo vodičom. Resekát čreva: V prípade resekátu čreva je nutné ho rozstrihnúť, zbaviť zvyškov stolice a následne vložiť do fixačnej tekutiny. Peroperačná biopsia: Veľkosť lézie pre peroperačnú biopsiu by nemala byť menšia ako 10mm. V praxi to znamená, že peroperačná biopsia by sa mala realizovať len v prípade veľkosti patologickej lézie cca 6 až 7mm, kedy je možné jednu polovicu technicky spracovať a druhú ponechať pre definitívny parafínový blok.

Peroperačne je možné vyšetriť len hmatné lézie!!

Fluorescenčná in situ hybdridizácia (FISH) Metódou fluorescenčnej in situ hybridizácie (FISH) sa vyšetruje HER2 a ALK génu. HER2 HER2 (receptor ľudského epidermálneho rastového faktora 2) je gén, ktorý hrá úlohu pri vzniku rakoviny prsníka. HER2 receptory kontrolujú rast a delenie zdravých buniek mliečnej žľazy. Približne u 25% pacientok s rakovinou prsníka je pozorovaný väčší počet kópií génu HER2 (tzv. amplifikácia HER2 génu), čo vedie k nekontrolovanému deleniu buniek mliečnej žľazy. ALK gén Približne 3-5 % nemalobunkových pľúcnych karcinómov (NSCLC) má prestavbu v ALK géne (kináza anaplastických lymfómov). ALK gén sa spája s ďalšími génmi, čím sa aktivuje a to ovplyvňuje dôležité bunkové procesy. Pacienti s nemalobunkovým karcinómom pľuc a prestavbou v ALK géne reagujú na terapiu inhibítorom ALK kinázy.

ÚP

86

Oddelenie klinickej farmakológie – OKF

OKF na Onkologickom ústave sv. Alžbety v Bratislave pracuje od r. 1996. Jeho úlohou je sledovanie antibiotickej liečby v nemocnici, monitorovanie spotreby antibiotík, sledovanie vývoja rezistencie a na základe výsledkov vypracovanie odporúčaných postupov antimikrobiálnej chemoterapie. Oddelenie analyzuje účinnosť antibiotík podávaných v ústave a vykonáva odbornú konziliárnu činnosť zameranú na liečbu infekcií onkologických pacientov. Aj napriek pokrokom v diagnostike a liečbe predstavujú infekčné komplikácie stále závažnú hrozbu pre pacientov s nádorovou chorobou. Správne a včasné rozpoznanie infekcie, poznanie osobitostí priebehu infekcií u onkologicky chorých a adekvátne diagnostické a terapeutické kroky tak môžu zachrániť životy mnohým pacientom.

Od januára 2004 sa činnosť OKF rozšírila o terapeutické monitorovanie hladín

niektorých liečiv (TDM). TDM zaznamenáva rozvoj v posledných dvadsiatich rokoch a súvisí s rozvojom špecifických laboratórnych metód umožňujúcich stanoviť koncentráciu liečiva v biologických tekutinách. Cieľom monitorovania sérových hladín lieku je dosiahnuť optimálne terapeutické koncentrácie lieku, zlepšiť efektivitu liečby a zredukovať možnú toxicitu na minimum. Aby jej využitie bolo skutočným prínosom pre klinika, musia byť splnené viaceré podmienky – správna indikácia TDM, správne načasovanie odberu vzorky, jej spracovanie, použitie vhodnej analytickej metódy, zhodnotenie výsledku a jeho skoré hlásenie. Prvé 2 podmienky zabezpečuje ošetrujúci lekár. Naše oddelenie potom vzorky spracuje a vyhodnotí, výsledky spojené s farmakologickou konzultáciou hlásime telefonicky ešte v deň odberu, aby sa podľa nich mohla liečba prípadne upraviť. Zo skupiny antibiotík (ATB) na oddelení monitorujeme ATB s nefrotoxickým a ototoxickým účinkom, ako sú aminoglykozidy (amikacín, a gentamicín) a vankomycín, z imunosupresívnych látok monitorujeme cyklosporín.

Pracovníci OKF Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail:

Doc.MUDr. Andrea Demitrovičová,PhD. primár 02/32249585 [email protected]

Doc. Ing. Margaréta Kačmariková,PhD. lab. pracovník 02/32249585

OKF

87

Odporúčania pre terapeutické monitorovanie aminoglykozidov

Indikácie TDM: – 3.deň liečby: reziduálne a píkové sérové koncentrácie sú odporúčané merať u všetkých

pacientov (okrem výnimiek) – len 3. deň liečby: ak je známa kultivácia a citlivosť a ďalšia liečba nebude trvať dlhšie

ako 4 dni – Týždenné monitorovanie: 1 x týždenne sa hladiny odporúča merať:

– vysoká MIC – pacient sa klinicky nezlepšuje – zmeny v obličkových funkciách – pacient dostáva liečbu viac ako 10 dní

Rutinne sa nevyšetrujú pacienti: s nekomplikovanou infekciou močových ciest, nekomplikovanou apendektómiou pri užívanie AMG v synergii s iným ATB liečení menej ako 72 hod pri dávkovaní raz denne sa reziduálna koncentrácia meria 3. deň a raz týždenne

sa monitoruje, či nedochádza k akumulácii liečiva

Opakované merania - každú 3-4 dávku sa odporúča meraťv nasledujúcich prípadoch: známa alebo predpokladaná obličková insuficiencia novorodenci domáca intravenózna liečba febrilná neutropénia cystická fibróza imunodeficientný stav septický šok vysoká horúčka

Odber sa vykonáva do biochemickej skúmavky v presne stanovenom čase!!!! Reziduálna koncentrácia – krv sa odoberá tesne pred podaním nasledujúcej dávky lieku do biochemickej skúmavky, ktorá sa označí ako reziduálna hladina (alebo „pred podaním“) Vrcholová koncentrácia – krv sa odoberá do biochemickej skúmavky:

a) pri intravenóznom podávaní 30-60 min po skončení i.v. infúzie gentamicínu b) pri intramuskulárnom podávaní - 60-90 min po podaní

Skúmavka sa označí ako vrcholová hladina ( alebo „po podaní“) Odobratú krv treba čo najskôr transportovať do príjmu RIA oddelenia na OUSA

(č.d. 157 v bloku K). Ak nie je možný okamžitý transport, vzorka sa uloží do chladničky, kde môže zostať max 24 hodín.

OKF

88

Odporúčania pre terapeutické monitorovanie vankomycínu

Indikácie TDM Pri normálnych funkciách obličiek a krátkodobej liečbe (do 7 dní) nie je

monitorovanie hladiny nevyhnutné. Sérové koncentrácie vankomycínu sa monitorujú:

– pri dlhodobej liečbe – hemodynamicky nestabilného pacienta – pri nelepšení klinického obrazu napriek cielenej liečbe na základe kultivácií – pri súčasnej liečbe inými nefrotoxickými liečivami – u pacientov s porušenou alebo meniacou sa funkciou obličiek – u pacientov s popáleninami – u hemodialyzovaných pacientov – u novorodencov a detí – u tehotných – u pacientov s nádorovou chorobou – u pacientov so zmeneným distribučným objemom – pri podávaní dennej dávky viac ako 2g.

Odber sa vykonáva do biochemických skúmaviek. Hladina sa stanovuje zo séra pacienta

po ustálení hladiny, t.j. po 3. až 4. podaní . Na zabezpečenie optimálneho dávkovania sa stanovuje reziduálna a vrcholová koncentrácia. Pri kontinuálnom podávaní sa stanovuje jedna hladina, odber sa však nesmie urobiť z toho istého venózneho prístupu, ktorým sa antibiotikum podáva.

Čas odberu:

Reziduálna koncentrácia – krv sa odoberá tesne pred podaním nasledujúcej dávky lieku do biochemickej skúmavky, ktorá sa označí ako reziduálna hladina (alebo „pred podaním“) Vrcholová koncentrácia – krv sa odoberá do biochemickej skúmavky 60 min po skončení i.v. infúzie vankomycínu. Skúmavka sa označí ako vrcholová hladina (alebo „po podaní“).

Odporúčania pre terapeutické monitorovanie cyklosporínu Indikácie TDM:

– transplantačné obdobie: každých 24-48 hodín – po transplantácii 3-6 mesiacov : 2-3x týždenne – u stabilizovaných pacientov po Tx - pravidelné časové intervaly – kontrola imunosupresívnej liečby (vybrané hematologické choroby, endogénna

uveitída, nefrotický syndróm, reumatoidná artritída, atopická dermatitída, psoriáza). Odber – Štandardne sa u pacientov liečených cyklosporínom vyšetruje hladina C0, u transplantovaných pacientov sa v po transplantačnom období odporúča vyšetrovať aj C2. Hladiny cyklosporínu sa stanovujú z plnej krvi. Odber cca 1,5 ml krvi sa uskutočňuje do skúmavky s heparínom alebo EDTA. Skúmavku je nutné po odobratí premiešať, aby sa krv nezrazila a označiť C0 alebo C2. Čas odberu: C0: krv sa odoberá nalačno, 12 hodín po podaní poslednej dávky lieku. C2: krv sa odoberá presne 2 hodiny po podaní lieku. Čas je potrebné dodržať!

OKF

89

Uskladnenie vzorky a transport - označenú skúmavku s odobratou krvou a riadne vypísanú žiadanku je treba čo najskôr transportovať do príjmu RIA oddelenia na OUSA (č.d. 157 v bloku K). Ak nie je možný okamžitý transport, vzorka sa uloží do chladničky, kde môže zostať max 24 hodín do vyšetrenia.

Oddelenie klinickej farmakológie – referenčné hodnoty

Gentamicín / vyšetrenie len po dohode /: Reziduálna koncentrácia – ľahšie infekcie < 1 ug/ml ťažšie infekcie < 2 ug/ml dávkovanie raz denne -< 1 ug/ml Vrcholová koncentrácia – ľahšie infekcie 5-8 ug/ml ťažšie infekcie 8-12 ug/ml Vankomycín Reziduálna koncentrácia- 5-10 (12-15) ug/ml Vrcholová koncentrácia – 20-40 ug/ml Podávanie v kontinuálnej infúzii 15-25 ug/ml Cyklosporín - Optimálne sérové koncentrácie pre C0:

Transplantovaný orgán Optimálne rozpätie (ng/ml) Typ liečby Obličky 150- 225

100-150 do 3 mes. po Tx udržiavacia liečba

Pečeň 225-300 100-150

do 3. mes. po Tx udržiavacia liečba

Srdce 250-350125-175

do 3. mesiacov po Tx udržiavacia liečba

Optimálne sérové koncentrácie pre C2: do 3 mesiacov po Tx: 1400-1800 ng/ml, 3-6 mesiacov po Tx: 1000-1400 ng/ml, 6-12 mesiacov po Tx: 800-1000 ng/ml, udržiavacia liečba: 700-800 ng/ml

OKF

90

Oddelenie lekárskej genetiky – OLG

Oddelenie lekárskej genetiky (OLG) vzniklo na Onkologickom ústave sv. Alžbety v roku 1998 pod vedením RNDr. Evy Weismanovej, CSc. Pôvodne sa oddelenie zameralo na genetické analýzy dedičných nádorových syndrómov ako napr. dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov, či medulárny karcinóm štítnej žľazy a dôkaz HPV DNA. Počas desiatich rokov existencie sa oddelenie rozrástlo personálne, priestorovo, prístrojovo a najmä množstvom ponúkaných vyšetrení a testov. V súčasnosti na OLG OUSA pracuje jeden lekár, 7 vysokoškolákov/biológov a 6 laborantiek.

Jednotlivé vyšetrenia a analýzy sa uskutočňujú využitím vysoko špecializovaných zariadení, ako napr. 4-kapilárový automatický genetický analyzátor ABI 3130, Real-Time PCR systém ABI 7500 FAST, Lightcycler 480 či sekvenátor novej generácie Junior GS. Z molekulárno-genetických postupov sa využívajú metódy: PCR amplifikácia, priama sekvenácia DNA, „next generation sequencing analýza, MLPA, SNaPshot analýza, qPCR, in vitro prepis RNA, atď..

Kvalita všetkých vyšetrení na OLG OUSA je garantovaná pravidelnou akreditáciou pracoviska v rámci Ústavu laboratórnej medicíny, a to podľa normy ISO 17025, certifikáciou podľa normy ISO 9001 a každoročnými externými kontrolami kvality vyšetrení. Pracovníci OLG

Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: RNDr. Michal Konečný, PhD. vedúci odd. 322 48 574 [email protected]. Katarína Závodná, PhD. sam. odb. pracovník

zástupca vedúceho odd.322 48 584 [email protected]

RNDr. Eva Weismanová, CSc. sam. odb. pracovník 322 48 582 eweisman @ousa.skRNDr. Zdena Bartošová, CSc. sam. odb. pracovník 322 48 583 [email protected]. Ján Markus, PhD. sam. odb. pracovník 322 48 572 [email protected]. Ľudmila Vavrová,PhD. sam. odb. pracovník 322 48 573 [email protected]. Miriam Milly, PhD. sam. odb. pracovník 322 48 573 [email protected]. Olívia Hamidová lekár - klinický genetik 322 48 575 [email protected] Beatrix Jánošová vedúca laborantka 322 48 579, 576 [email protected] Glozneková laborant

zástupca ved. laborantky322 48 578

Mgr. Jaroslava Gregorová laborant 322 48 578 Jana Štohlová laborant 322 48 578 Ružena Kozlová laborant 322 48 576 Mgr. Žofia Szabóová laborant 322 48 578 Adresa pracoviska: Oddelenie lekárskej genetiky, Ústav laboratórnej medicíny, OUSA, Heydukova 10, 812 50 Bratislava

Ambulancia lekárskej genetiky Ambulancia lekárskej genetiky bola založená na Onkologickom ústave sv. Alžbety

v roku 2011. Ambulancia poskytuje pacientom poradenstvo a konzultácie zamerané na dedičné nádorové ochorenia/syndrómy, ktoré sú geneticky podmienené.

Na genetickú konzultáciu pacienta s viacnásobným výskytom nádorových ochorení v rodine, alebo s výskytom nádorového ochorenia v nízkom veku (napr. pod 50 rokov), odporúča lekár prvého kontaktu, príp. lekár špecialista (napr. gynekológ, mamológ, gastroenterológ, chirurg atď.).

OLG

91

Klinický genetik v ambulancii zhodnotí osobnú a rodinnú anamnézu a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria žiada molekulárne vyšetrenie DNA. Nasleduje samotná molekulárna analýza v genetickom laboratóriu. Po ukončení analýzy DNA je pacient opäť pozvaný na konzultáciu ku klinickému genetikovi, a tu sa mu interpretuje výsledok molekulárnej analýzy. Úlohou klinického genetika je aj spolupráca s inými odbornými lekármi, ktorí sa starajú o pacientov s predispozíciou k nádorovým ochoreniam, pri zostavovaní preventívnych prehliadok. Ambulancia: MUDr. Olívia Hamidová objednávanie denne od 7:30 - 15:00 na tel č.: +421 2 32 248 575, 76, 74, 72, 73, 82-84

Aktuálne genetické vyšetrenia I. Dedičné syndrómy

1. Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov (HBOC, gény BRCA1, BRCA2) 2. Dedičná forma medulárneho karcinómu štítnej žľazy (MEN II, gén RET) 3. Dedičná forma malígneho melanómu (HMM, gén CDKN2A) 4. Vyšetrenie mikrosatelitovej instability pri karcinómoch kolorekta (MSI) 5. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta (Lynchov syndróm, gény MLH1,

MSH2, MSH6) 6. Dedičná chronická pankreatitída (HCP, gény PRSS1, SPINK1) 7. Dedičný difúzny karcinóm žalúdka (HDGC, gén CDH1) 8. Dedičný angioedém (HAE, gén SERPING1) 9. Dôkaz vysokorizikových (HR) HPV vírusov

II. Predikcia onkologickej liečby – sporadické nádory 10. Analýza kodónov 12 a 13 génu KRAS pri metastatických karcinómoch kolorekta 11. Analýza kodónu 600 génu BRAF pri papilárnych nádoroch štítnej žľazy 12. Analýza mutácií génu EGFR v exónoch 18-21 pri nemalobunkovom karcinóme pľúc 13. Analýza prestavieb génu ALK pri nemalobunkovom karcinóme pľúc 14. Analýza génov IDH1 (kodón 132) a IDH2 (kodón 172) u pacientov s glioblastómom 15. Test na predikciu závažnej až letálnej toxicity na liečbu fluoropyrimidínmi (analýza génu

DPYD) 16. Neinvazívny skríning malignít hrubého čreva z periférnej krvi – vyšetrenie metylácie

génu SEPTÍN9. III. Predikcia onkologickej liečby – génová expresia

17. Expresia génov rezistencie na chemoterapiu (MDR) 18. Predikcia odpovede na liečbu antracyklínmi a inhibítormi topoizomeráz

IV. Onkogynekologické genetické markery 19. Dôkaz vysokorizikových HPV vírusov 20. Dôkaz a typizácia HPV vírusov 21. Dôkaz malígnych prekurzorov pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV a génov

molekulového podpisu 22. Dôkaz cirkulujúcich nádorových buniek v lymfovaskulárnom systéme

Všetky žiadanky na genetické vyšetrenia nájdete na našej web stránke:

http://www.ousa.sk/sk/odborna-verejnost/laboratorna-medicina-v-ousa/oddelenie-lekarskej-genetiky/ziadanky-na-vysetrenia

www.ousa.sk/genetika

OLG

92

I. DEDIČNÉ SYNDRÓMY: Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov (HBOC, gény BRCA1, BRCA2)

Dedičná, alebo hereditárna forma karcinómu prsníka a vaječníkov predstavuje okolo 10% zo všetkých diagnostikovaných karcinómov prsníka a vaječníkov. Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je zvýšený výskyt karcinómov prsníka a vaječníkov v rodine a nízky vek nástupu ochorenia (okolo 40-50 rokov).

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch BRCA1 (24 exónov) a BRCA2 (27 exónov). Mutácie génov BRCA1/2 ovplyvňujú funkciu proteínov, ktoré sú dôležité v bunkových procesoch, ako je napr. oprava poškodenej DNA. Vo väčšine prípadov sa genetické testovanie začína analýzou génu BRCA1. V prípade negatívneho výsledku sa pristupuje k analýze génu BRCA2 a následne k analýze dlhých génových delécií v spomínaných génoch.

Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu (predispozíciu na ochorenie). Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení.

Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)

odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza

pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA

3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok

molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 6 mesiacov. Uvedený časový interval sa môže meniť v závislosti od počtu prijatých vzoriek a od použitia metódy sekvenovania novej generácie. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

OLG

93

Dedičný karcinóm prsníka/vaječníkov (HBOC), Li-Fraumeni syndróm, Familiárny karcinóm prostaty (gén CHEK2)

V rodinách so silnou rodinnou anamnézou, t.j. so zvýšeným výskytom karcinómu prsníka, ovárií, prostaty či osteosarkómov, kde nebola nájdená patologická zárodočná mutácia v géne BRCA1/2 (viď. Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov) analyzujeme gén CHEK2.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) vo všetkých exónoch génu CHEK2 (14 exónov).

V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať túto mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne určiť, kto ju zdedil, a tak stanoviť riziko vzniku nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)




molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky trvá približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

OLG

94

Dedičný karcinóm prsníka/vaječníkov (HBOC) – detekcia najčastejších patologických mutácií v génoch BRCA1/2

Uvedené vyšetrenie umožňuje rýchlu a spoľahlivú detekciu najčastejších patologických mutácií v génoch BRCA1/2 vyskytujúcich sa v slovenskej HBOC populácii, pričom dokáže identifikovať až 77% takýchto mutácií. Konkrétne môžeme sledovať prítomnosť 13 rôznych mutácií v géne BRCA1 a 4 v géne BRCA2. Test neposkytuje komplexnú informáciu o všetkých exónoch oboch génov a teda všetkých mutáciách. Vyšetrenie je určené najmä: 1. pre prípady rýchleho skríningu pri urgentnej analýze, a tak môže predchádzať komplexnej

analýze génov 2. pre samoplatcov, t.j. zdravých jedincov bez rodinnej záťaže, ktorý majú záujem o takúto

genetickú analýzu. Upozornenie: V prípade vyšetrenia pre samoplatcov je nutné vyplniť správny typ žiadanky určenej samoplatcom a odoslať vzorku. Po prijatí vzorky v laboratóriu je vystavená faktúra zaslaná vyšetrovanému jedincovi a po jej zaplatení je vykonaný samotný test. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 1 mesiace. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Dedičná forma medulárneho karcinómu štítnej žľazy (MEN 2, gén RET) Mnohopočetná endokrinná neoplázia typu II (MEN2) je zriedkavé dedičné ochorenie

sprevádzané výskytom medulárneho karcinómu štítnej žľazy, feochromocytómov (PHEO) a inými typmi hyperplázií a/alebo neoplázií endokrinných tkanív u jedného pacienta. Rozoznávame sporadickú (náhodne sa vyskytujúcu) a familiárnu formu uvedeného syndrómu. Charakteristickým znakom familiárnej formy je výskyt daného ochorenia v rodine a nízky vek nástupu ochorenia.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne RET (exóny 8, 10, 11, 13-16), ktorý kóduje tyrozín kinázový receptor. Jeho úloha je v dôležitých bunkových procesoch ako je napr. proliferácia, diferenciácia a bunkový transport. Mutácie v géne RET majú za následok neustálu aktivitu spomínaných procesov v bunkách.

Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď..)



3. molekulárna analýza DNA (génu)

OLG

95

4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok molekulárnej analýzy

Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2-3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Dedičná forma malígneho melanómu (HMM, gén CDKN2A)

Malígny melanóm patrí medzi najagresívnejšie nádorové ochorenia kože. Dedičná, alebo hereditárna forma malígneho melanómu predstavuje okolo 10% zo všetkých diagnostikovaných malígnych melanómov. Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je zvýšený výskyt malígnych melanómov, karcinómov pankreasu a nádorov prsníka v rodine a nízky vek nástupu ochorenia.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne CDKN2A (exóny 1A, 2, 3, 1B a promótor).

V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu a stanoviť riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)




molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2-3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno.

OLG

96

Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Vyšetrenie mikrosatelitovej instability pri karcinóme kolorekta (MSI) Pri kolorektálnych nádoroch okrem sporadických foriem rozoznávame aj dedičné

formy (12-15%), z ktorých najznámejší a najlepšie popísaný je hereditárny nepolypózny karcinóm kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm).

Vyše 90% HNPCC nádorov vykazuje MSI pozitivitu v porovnaní s cca 15% sporadických kolorektálnych nádorov. Pacienti s MSI pozitívnym nálezom by mali absolvovať genetickú konzultáciu u klinického genetika za účelom zhodnotenia osobnej a rodinnej anamnézy. V prípade ak klinický genetik zhodnotí, že pacient spĺňa medzinádorné kritéria na testovanie HNPCC syndrómu indikuje molekulárno-genetické vyšetrenie génov MLH1, MSH2, MSH6 (viď. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta).

Na Oddelení patológie OUSA sa vykonáva aj imunohistochemická analýza génov

MLH1, MSH2, MSH6, PMS2. Strata expresie niektorého z uvedených proteínov je tiež znakom, že môže ísť o HNPCC.

Indikujúci lekár: Klinický genetik, klinický onkológ, prípadne patológ Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie sa uskutočňuje cca raz za 2-3 týždne, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA. Ako materiál na vyšetrenie možno prípadne zaslať i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení MSI odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.

Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm, gény

MLH1, MSH2, MSH6) Pri kolorektálnych nádoroch okrem sporadických foriem rozoznávame aj dedičné

formy (12-15%), z ktorých najznámejší a najlepšie popísaný je hereditárny nepolypózny karcinóm kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm). Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je nízky vek nástupu ochorenia (okolo 45 rokov) a zvýšený výskyt nádorov kolorekta v rodine, prípadne výskyt iných extrakolonických nádorov (adenokarcinómy endometria, žalúdka, karcinómy vaječníkov, močového traktu, tenkého čreva, nádory mozgu a kože).

OLG

97

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch MLH1 (19 exónov), MSH2 (16 exónov) a MSH6 (10 exónov). Uvedené gény kódujú proteíny, ktoré majú úlohu v oprave DNA. Vo väčšine prípadov sa pri HNPCC suspektnej rodine začína analýzou MSI (mikrosatelitovej instability) z nádorového tkaniva a v prípade pozitivity, alebo v prípade nedostupného nádorového materiálu a pozitívnej rodinnej anamnézy sa pristupuje k analýze génov MLH1, MSH2, MSH6.

V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu a stanoviť riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)




molekulárnej analýzy Indikujúci leká: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Dedičná forma akútnej/chronickej pankreatitídy Dedičná, alebo hereditárna forma chronickej pankreatitídy predstavuje okolo 10%

zo všetkých diagnostikovaných chronických pankreatitíd. Niektoré formy chronickej pankreatitídy môžu byť asociované so zvýšeným rizikom vzniku karcinómu pankreasu.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch PRSS1 (5 exónov) a SPINK1 (4 exóny). Mutácie génu PRSS1 spôsobujú predčasnú aktiváciu trypsinogénu, čo vedie k poškodeniu pankreasu. Gén SPINK1 kóduje proteín, ktorý inhibuje približne 20% aktivity trypsínu v pankrease a jeho mutácie spôsobujú zníženie inhibície.

Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého chronickou pankeatitídou, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. U pacientov s mutáciu v géne PRSS1 je zvýšené riziko karcinómu pankreasu o 50%.

OLG

98





molekulárnej analýzy Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Dedičná forma difúzneho karcinómu žalúdka (HDGC, gén CDH1) Dedičná forma difúzneho karcinómu žalúdka sa vyskytuje asi u 1% pacientov

postihnutých karcinómom žalúdka. Napriek tomu, že je to veľmi zriedkavé ochorenie, predstavuje pre nositeľov mutácie závažný problém pre problematickú diagnostiku a skorý nástup (priemerný vek nástupu 38 rokov). Okrem karcinómu žalúdka je tento syndróm charakteristický aj výskytom lobulárneho karcinómu prsníka v rodine.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne CDH1 (16 exónov). Mutácie v tomto géne ovplyvňujú funkciu proteínu E-cadherín, ktorý je zodpovedný za vzájomnú interakciu buniek. V prípade negatívneho výsledku sa pristupuje k analýze dlhých génových delécií v tomto géne (v prípravnej fáze).

Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení.





molekulárnej analýzy

OLG

99

Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 6 mesiacov. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Dedičný angioedém (HEA, gén SERPING1) Dedičný angioedém je zriedkavé ochorenie (cca 1:10 000-150 000 obyvateľov), ktoré

sa prejavuje spontánnymi opuchmi kože, hrtana, prípadne tráviaceho systému. Závažným prejavom je hlavne opuch horných dýchacích ciest, ktorý môže spôsobiť asfyxiu a následne ohroziť život pacienta.

Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne SERPING1, ktorý kóduje C1 inhibítor.

Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných ochorení.




3. molekulárna analýza DNA a genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok molekulárnej analýzy

Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 2 týždne. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 1 mesiac. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

OLG

100

II. PREDIKCIA ONKOLOGICKEJ LIEČBY – SPORADICKÉ KARCINÓMY

Analýza kodónov 12 a 13 génu KRAS pri metastatických karcinómoch kolorekta Dôkaz prítomnosti somatických mutácií v géne KRAS (v kodónoch 12, 13) slúži ako

predikčný marker odpovede na biologickú terapiu, inhibítormi tyrozín kináz u pacientov s metastazujúcim karcinómom hrubého čreva (mCRC). Pacienti s mCRC a mutovaným KRAS génom nereagujú na liečbu pomocou EGFR inhibítorov (Panitumumab - Vectibix, Cetuximab - Erbitux), naopak pacienti s nemutovaným KRAS génom, t.j. wild-type sú vhodní na takúto liečbu. Celkovo sa predpokladá, že približne 40% pacientov s mCRC nesie somatické mutácie v géne KRAS.

Indikujúci lekár: Klinický onkológ, príp. patológ. Vyšetrenie je podmienkou pre liečbu pomocou Cetuximabu a Panitumumabu. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), napr. optimálne 10 ks 10 μm rezov do jednej eppendorfky. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG ÚLM, OUSA. Prípadne možno zaslať ako materiál na vyšetrenie i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom narezanie týchto blokov vyriešime interne a vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení KRAS odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky. V prípade zaslania iného typu tkaniva (napr. tukové tkanivo, uzlina, metastáza) nemusia výsledky analýzy kodónov 12, 13 génu KRAS súhlasiť so stavom uvedených mutácií v primárnom tumore.

Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.

Analýza kodónu 600 génu BRAF pri papilárnych nádoroch štítnej žľazy Mutačný status v géne BRAF pri papilárnych karcinómoch štítnej žľazy môže slúžiť

ako prognostický marker. Zistilo sa, že jedinci s mutáciou p.V600E v géne BRAF majú agresívnejšie tumory, pre ktoré je typický vznik metastáz, perzistencia choroby, návrat choroby a celkovo zhoršené prežívanie pacientov. Analýza mutácií v géne BRAF, tak predstavuje dôležitú informáciu o predpokladanom priebehu choroby nielen pre samotného pacienta ale aj pre lekára a môže byť užitočná pri voľbe samotnej iniciálnej terapie a pri následnom monitoringu pacienta.

Indikujúci lekár: Endokrinológ, príp. patológ pričom analýza prebieha pooperačne z parafínových bločkov primárneho tumoru. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, t.j. od pondelka do piatka, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10 μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA.

OLG

101

Ako materiál na vyšetrenie je možné zaslať celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.

Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.

Analýza mutácií v exónoch 18-21 génu EGFR pri nemalobunkovom karcinóme pľúc Prítomnosť mutácií v onkogéne EGFR u pacientov s nemalobunkovým karcinómom

pľúc súvisí s lepšou odpoveďou na inhibítory EGFR. V dôsledku mutácie dochádza k lepšej väzbe malých molekúl k receptoru, čo prináša benefit pacientov s mutovaným EGFR receptorom. V slovenskej populácii sa celkovo nachádza približne 2 600 prípadov karcinómov pľúc ročne, z toho približne 2 000 prípadov pripadá na nemalobunkový karcinóm pľúc. Približne 10% pacientov s nemalobunkovým karcinómom pľúc nesie somatické mutácie v géne EGFR, čiže môžu profitovať z liečby pomocou malých molekúl (napr. Gefitinib).

Indikujúci lekár: Onkológ, pneumológ (bronchoskopista), príp. patológ Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál a transport: Bunkové bronchiálne stery (nátery na sklíčko): Odber materiálu sa uskutočňuje pomocou bronchoskopickej kefky z nádoru počas bronchoskopie, pred odobratím bioptickej vzorky. Po odbere materiálu sa ster rozotrie na cytologické podložné sklíčko. Po nátere sa sklíčka nechajú zaschnúť a následne sa zafixujú 70% etanolom 5 minút. Pre analýzu je vhodné poslať 2-3 nezafarbené zafixované sklíčka. Biopsia: Počas bronchoskopie možno odobrať pomocou bronchoskopiálnych nožničiek natívne tkanivo z miesta nálezu do PBS, alebo fyziologického roztoku, prípadne získanú biopsiu poslať na patológiu, kde dochádza k fixácii materiálu.

Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o cytologickom/histologickom náleze príslušnej vzorky.

Sklíčka sa transportujú na OLG, OUSA bez špeciálnych nárokov na podmienky transportu. Natívne tkanivo v 2 ml skúmavkách sa skladuje a transportuje pri 4°C. Fixované tkanivo alebo rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.

OLG

102

Analýza prestavieb génu ALK pri nemalobunkovom karcinóme pľúc V slovenskej populácii sa celkovo nachádza približne 2 600 prípadov karcinómov

pľúc ročne, z toho približne 2 000 prípadov pripadá na nemalobunkový karcinóm pľúc. Približne 3-5 % nemalobunkových pľúcnych karcinómov (NSCLC) má prestavbu

v ALK géne (kináza anaplastických lymfómov). ALK gén sa spája s ďalšími génmi, čím sa aktivuje a to ovplyvňuje dôležité bunkové procesy. Pacienti s nemalobunkovým karcinómom pľuc a prestavbou v ALK géne reagujú na terapiu inhibítorom ALK kinázy.

Analýza prestavieb prebieha metódou FISH (fluorescenčná in situ hybridizácia) na Oddelení patológie OUSA. Indikujúci lekár: Onkológ, pneumológ (bronchoskopista), príp. patológ . Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál a transport: Biopsia: Počas bronchoskopie možno odobrať pomocou bronchoskopiálnych nožničiek natívne tkanivo z miesta nálezu do PBS, alebo fyziologického roztoku, prípadne získanú biopsiu poslať na patológiu, kde dochádza k fixácii materiálu. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky. Fixované tkanivo alebo rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.

Analýza génov IDH1 (kodón 132) a IDH2 (kodón 172) u pacientov s glioblastómom Gény IDH1 a IDH2 kódujú proteíny, ktoré sa podieľajú na oprave poškodení v bunke.

Mutácie v týchto génoch sa často nachádzajú v nádoroch mozgu, najmä glioblastómoch. Špecifické mutácie sú u tohto typu nádorov dobrým prognostickým markerom. Pacienti, ktorí nesú mutáciu majú výrazne dlhšie prežívanie ako pacienti bez mutácie. Informácia o prítomnosti mutácií v IDH1/2 je dôležitá aj pri diferenciálnej diagnostike mozgových nádorov.

Mutácie môžu postihovať kodón 132 v géne IDH1 a 172 v géne IDH2. V slovenskej populácii je ročne zachytených približne 300 prípadov glioblastómov. Indikujúci lekár: Klinický onkológ, príp. patológ. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10 μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA. Ako materiál na vyšetrenie možno prípadne zaslať i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.

Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.

OLG

103

Test na predikciu závažnej až letálnej toxicity na fluoropyrimidíny (analýza génu DPYD)

Približne u 16% onkologických pacientov sa vytvorí po podaní chemoterapeutických režimov obsahujúcich fluoropyrimidíny (5-FU) a jeho orálny prekurzor kapecitabín (napr. v režimoch Xeloda, Xelox, FUFA, FOLFOX, FOLFIRI, FAM, FAMTX, ELF, atď..) toxicita stupňa GIII-IV, ktorá môže v niektorých prípadoch končiť smrťou. Dôležitú úlohu pri vývoji takejto toxicity zohráva gén DPYD. U pacientov s chýbajúcou funkciou DPD enzýmu je mortalita takmer 100%, pričom smrť môže nastať po podaní jednej dávky fluoropyrimidínu. Výsledok testu selektuje: 1. pacientov, u ktorých by sa s vysokou pravdepodobnosťou vyskytla letálna reakcia na liečbu fluoropyrimidínmi 2. pacientov, ktorým je postačujúce znížiť dávku fluoropyrimidínu na 50% pri zachovaní terapeutickej dávky. Indikujúci leká: Onkológ, klinický genetik pred zahájením liečby fluoropyrimidínmi. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 7-10 dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.

Neinvazívny skríning malignít hrubého čreva z periférnej krvi – vyšetrenie metylácie génu SEPTÍN 9

Nádory kolorekta (CRC) patria medzi najčastejšie nádorové ochorenia na Slovensku. Preventívne kolonoskopické vyšetrenia umožňujú odhaliť nádory CRC v skorom štádiu, ale „ochota“ ľudí podstúpiť kolonoskopiu je pomerne nízka.

Gén SEPTÍN9 kóduje proteín, ktorý má úlohu pri bunkovom delení a funguje ako tumor supresor. V CRC je gén SEPTÍN9 inaktivovaný metyláciou promótora. Metylovaný promótor je možné detegovať v nádorovej DNA izolovanej z krvnej plazmy. Jedná sa o alternatívu skríningu na skorú detekciu asymptomatických nádorov hrubého čreva z periférnej krvi. Prítomnosť metylácie génu SEPT9 je markerom suspektnej kolorektálnej malignity.

- vyšetrenie je primárne určené pre zdravých jedincov a môže v tomto prípade nahradiť kolonoskopické vyšetrenie, a to za priamu platbu 220 Eur.

- V prípade negatívneho výsledku je možné s takmer 90% pravdepodobnosťou vylúčiť prítomnosť kolorektálnej malignity.

- V prípade pozitívneho výsledku vyšetrenia absolvuje pacient následne kolonoskopické vyšetrenie.

Metóda sa vyznačuje špecificitou 88% a senzitivitou 67%. Výhodou testovania je, že prebieha z periférnej krvi, a získanie materiálu je neinvazívne. Vyšetrenie nie je vhodné pre osoby so zvýšeným rizikom CRC (napr. nositeľov dedičnej predispozície pri HNPCC) a pacientov, ktorým bol v minulosti odstránený polyp alebo mali CRC nález.

OLG

104

Indikácia: Osoby, u ktorých je indikovaný preventívny skríning CRC. Dĺžka vyšetrenia: Približne 7-14 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: 10 ml periférnej krvi v EDTA (skúmavky s ružovým vrchnákom), krv musí byť transportovaná a dodaná na OLG čerstvá, max. do 24 hodín pri skladovaní na 4°C. Upozornenie: Aktuálne nie je vyšetrenie hradené zdravotnými poisťovňami. V prípade vyšetrenia pre samoplatcov je nutné vyplniť správny typ žiadanky určenej samoplatcom a odoslať vzorku. Po prijatí vzorky v laboratóriu je vystavená faktúra zaslaná vyšetrovanému jedincovi a po jej zaplatení je vykonaný samotný test.

III. PREDIKCIA ONKOLOGICKEJ LIEČBY – GÉNOVÁ EXPRESIA, SPORADICKÉ NÁDORY:

Dôkaz patologickej expresie génov zodpovedných za vývoj rezistencie na

chemoterapiu (MDR) Jednou z najväčších komplikácií pri liečbe onkologického pacienta je rezistencia

na anti-tumorovú liečbu. Medzi najčastejšie príčiny rezistencie patrí patologicky zvýšená expresia génov patriacich do rodiny ABC a SLC transportérov. ABC transportéry exportujú anti-tumorové látky z bunky von, čo zvyšuje toxicitu pre organizmus a zároveň zvyšuje riziko recidívy choroby a pod. Informácia o type nadexprimovaného ABC transportéra/transportérov dovolí lekárovi vybrať také liečivá, ktoré nie sú vylučované z bunky von, a preto pri liečbe bude možné očakávať benefit pre pacienta. Kedy indikovať dôkaz liekovej rezistencie: 1. v čase prvej a ďalšej recidívy ochorenia 2. v prípade dôkazu MTS v LU a na vzdialených miestach Použitie testu je určené na nasledujúce účely:

1. Dôkaz rizika vývoja rezistencie na určitý typ chemoterapie 2. Dôkaz rizika návratu choroby 3. Sledovanie efektívnosti chemoterapie 4. Umožňuje výber vhodnejšieho typu chemoterapie v prípade možnej voľby medzi

rôznymi typmi terapeutík Indikujúci lekár: Onkológ, hematoonkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: 1. v prípade hematopoetických malignít sa odoberá cca 10 ml periférnej krvi alebo časť kostnej

drene do roztoku EDTA 2. v prípade pokročilého ochorenia s MTS v LU a na vzdialených miestach sa odoberá 15 ml

periférnej krvi do roztoku EDTA (dôkaz liekovej rezistencie v cirkulujúcich nádorových bunkách)

3. tkanivo z tumoru a paralelne časť zdravého tkaniva sa odoberá do ochranného roztoku RNAlater.

OLG

105

Predikcia odpovede na liečbu antracyklínmi a inhibítormi topoizomeráz Kamptotecíny (inhibítory topoizomerázy 1) sa viažu na komplex TOP1-DNA,

čo vedie k bunkovej smrti. Čím je vyšší počet komplexov TOP1-DNA, tým je liečba kamptotecínmi účinnejšia. Zvýšený počet komplexov TOP1-DNA súvisí z nadexpresiou génu pre topoizomerázu 1. Ak je expresia génu pre TOP1 v nádorových bunkách na úrovni zdravých buniek, potom nie je možné očakávať inhibičný účinok liečby a ani benefit pre pacienta. V prípade topoizomerázy 2A a 2B (TOP2A a TOP2B) sa zistilo, že čím je vyššia expresia génov pre TOP2A a TOP2B, tým je efekt liečby vyšší a možno očakávať benefit pre pacienta.

Pri predikcii odpovede na anti-topoizomerázovú liečbu je potrebné sledovať aj expresiu génov pre liekovú rezistenciu, pretože kamptotecíny, epipodofilotoxíny ako aj antracyklíny sú ich substrátom, môžu byť preto z bunky exportované von a liečba nebude optimálna (viď. Sledovanie liekovej rezistencie).

Kedy indikovať analýzu expresie topoizomeráz? Pred podaním liečby založenej na kampotecínoch, epipodofilotoxínoch alebo antracyklínoch. Indikujúci lekár: Onkológ, hematoonkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: 1. v prípade hematopoetických malignít sa odoberá cca 10 ml periférnej krvi alebo časť kostnej

drene do roztoku EDTA 2. v prípade pokročilého ochorenia s MTS v LU a na vzdialených miestach sa odoberá 15 ml

periférnej krvi do roztoku EDTA (dôkaz liekovej rezistencie v cirkulujúcich nádorových bunkách)

3. tkanivo z tumoru a paralelne časť zdravého tkaniva sa odoberá do ochranného roztoku RNAlater.

OLG

106

IV. ONKOGYNEKOLOGICKÉ GENETICKÉ MARKERY:

Dôkaz vysokorizikových HPV vírusov

Karcinóm krčka maternice je jedným z najčastejších nádorových ochorení u žien. V prevažnej väčšine toto ochorenie spôsobujú niektoré typy vírusu ľudských papilomavírusov (HPV). HPV je bežný vírus, ktorý infikuje ženy aj mužov. Z viac ako 100 známych genotypov HPV vírusov je s karcinómom krčka maternice asociovaných doposiaľ 14, nazývaných ako vysoko rizikové (high risk) HR-HPV genotypy.

cobas® 4800 HPV Test: kvalitatívny test na použitie in vitro na detekciu ľudského papilomavírusu v steroch z exocervixu. Test využíva amplifikáciu cieľovej DNA pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) na detekciu všetkých 14 známych vysokorizikových (HR) typov HPV v jednej analýze. Test špecificky identifikuje HPV16 a HPV18, a súčasne deteguje ostatné vysokorizikové typy (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 a 68) na klinicky merateľných stupňoch infekcie. cobas® 4800 HPV test sa používa:

Na detekciu HR-HPV: HP16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59/66/68 pri ktorých bolo dokázané, že sú primárnym príčinným faktorom pre vznik rakoviny krčka maternice.

Ako test pre pacientky so zhoršeným cytologickým nálezom alebo

s cervikánym ochorením.

Na skríning u pacientok s ASC-US (Atypical squamous cells of undetermined significance = atypickými šupinkovitými bunkami neurčeného významu) výsledkami pap testu pre určenie potreby referencie ku kolposkopii.

U žien vo veku nad 30 rokov môže byť test použitý s pap testom na súčasný skríning a odhad prítomnosti alebo neprítomnosti vysokorizikových typov HPV. Táto informácia, spolu s lekárskym ohodnotením cytologického stavu, ostatných rizikových faktorov a profesionálnych postupov môže byť súčasťou manažmentu pacientky.

U žien vo veku nad 30 rokov môže byť test použitý na stanovenie prítomnosti alebo neprítomnosti HPV genotypov 16 a 18. Táto informácia, spolu s lekárskym ohodnotením cytologického stavu, ostatných rizikových faktorov a profesionálnych postupov môže byť súčasťou manažmentu pacientky.

Ako skríningový test všeobecnej populácie.

Cervikálne vzorky, ktoré majú byť testované metódou cobas® 4800 HPV testu musia spĺňať nasledujúce požiadavky:

- vzorky bunkovej suspenzie z krčka maternice v roztoku PreservCyt® (ThinPrep system, Hologic) odoberané s použitím kefky

- vzorky bunkovej suspenzie z krčka maternice v roztoku cobas® PCR Cell Collection Media (Roche) odoberané s použitím kefky

OLG

107

Indikujúci lekár: Gynekológ, onko-gynekológ, urológ Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie HR-HPV trvá približne 1-2 týždne. Materiál na vyšetrenie, transport: Bunkový ster z exocervixu sa odoberá do odberových médií PreservCyt ® alebo cobas® PCR Cell Collection Media pomocou dodávanej kefky, ktorú je potrebné dôkladne vypláchnuť v odberovom médiu aj niekoľkonásobným pritlačením o dno odberovej skúmavky. Vzorky je možné skladovať a transportovať pri teplote 2-30°C a sú stabilné maximálne 6 mesiacov od odberu. O zaslanie skúmavok na vyšetrenie HR-HPV metódou a o zabezpečenie transporu je možné požiadať na OLG OUSA na t. č. 02/32248576.

Dôkaz a typizácia vysokorizikových HPV vírusov Karcinóm krčku maternice je jedným z najčastejších nádorových ochorení u žien.

V prevažnej väčšine toto ochorenie spôsobujú niektoré typy vírusu ľudských papilomavírusov (HPV). HPV je bežný vírus, ktorý infikuje ženy aj mužov. S karcinómom krčka maternice je asociovaných len niekoľko typov HPV vírusov, nazývaných ako vysoko rizikové (high risk) HR-HPV.

Genotypizácia HPV je založená na PCR amplifikácii a je zameraná na stanovenie presného genotypu onkogénnych typov HPV (tzv. HR-HPV) a vírusov asociovaných s vývojom kondylómov a papilómov bez onkogénneho rizika (tzv. LR-HPV). Metódou genotypizácie HPV dokazujeme:

- HR-HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 66, 68 - LR-HPV 6 a 11

Použitie testu je určené na nasledujúce účely: 1. prítomnosť konkrétneho typu HPV infekcie z rôzneho typu materiálu. 2. perzistenciu infekcie rovnakým typom HR-HPV 3. prítomnosť viacerých typov HPV u jednej pacientky 4. prítomnosť minimálnej reziduálnej infekcie po ablatívnom zákroku na krčku 5. prítomnosť HR-HPV 16 a 18 a LR-HPV 6 a 11 pred plánovanou vakcináciou 6. vyšetrenie je možné uskutočniť aj pre samoplatcov

Indikujúci lekár: Gynekológ, gynekológ-onkológ, dermatológ, otolaryngológ, urológ, chirurg-stomatológ, atď.. Dĺžka vyšetrenia: Genotypizácia HPV trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: Odber materiálu pre genotypizáciu HPV sa robí do sterilných skúmavok s vrchnákom so závitom. Skúmavky s roztokom PBS sa do použitia uchovávajú v chladničke. Po odbere materiálu je možné skúmavky krátkodobo (max. 1 deň) uchovávať v chladničke. Ak nie je zabezpečený denný transport vzorky, potom je potrebné vzorky zmraziť do doby transportu aspoň na cca -16°C. Skúmavky s označením genotyp poskytuje OLG OUSA, informácie na telefóne 02/32248576.

Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Pre genotypizáciu HPV je vhodné poznať aktuálny cytologický/histologický nález pre lepšiu klinickú interpretáciu výsledkov genotypizácie.

OLG

108

Dôkaz malígnych prekurzorov pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV a molekulového podpisu

Vírusová DNA sa za určitých okolností môže stať súčasťou bunkového genómu. Takto integrovaný HR-HPV vírus ovplyvňuje bunkový cyklus, čo môže viesť až k malígnej transformácii bunky. Dôkaz integrovaného HPV genómu, ktorý je sprevádzaný expresiou vírusových onkogénov E6/E7, je možné považovať za genetický marker včasnej neoplastickej transformácie bunky a progresie k CIN vyšších stupňov.

V rámci uvedeného testu zisťujeme aj expresiu génov, ktoré majú úlohu v proliferácii bunky, tzv. gény molekulového podpisu (CDKN2A/p16, CDKN1/p21, KI67, TOP2A). Zvýšená expresia uvedených génov súvisí s transformáciou buniek a možno ju považovať za malígne prekurzory karcinómu.

Indikujúci lekár: Gynekológ, gynekológ-onkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Použitie testu je určené na nasledujúce účely:

1. Odhalenie skrytých cervikálnych intraepiteliálnych neoplázií vyšších stupňov (CIN II-III až CIS) u pacientok s perzistujúcim OC nálezom H SIL, prípadne L SIL (ak sa vyskytuje dlhšie ako 24 mesiacov).

2. Odhalenie prítomnosti minimálnej reziduálnej choroby (MRCH) po ablatívnom zákroku.

3. Odhalenie prítomnosti viacerých klonov HR-HPV.

Odber materiálu a transport: Stery z exocervixu sa odoberajú paralelne s onko-cytologickým odberom. Bunky sa eluujú do roztoku RNAlater na ochranu RNA v špeciálnych skúmavkách. Materiál sa do doby transportu uchováva v chladničke alebo mrazničke. Skúmavky s označením „Expresia“ poskytuje OLG OUSA, informácie na telefóne 02/322 485 76. Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Pre dôkaz skrytých CIN vyšších stupňov je potrebné poznať aktuálny cytologický/histologický nález pre lepšiu interpretáciu výsledkov.

OLG

109

Dôkaz cirkulujúcich nádorových buniek (CTC) u pacientok s karcinómom krčka maternice v lymfovaskulárnom systéme

Proces metastázovania karcinómu krčka maternice sprevádza proces uvoľňovania nádorových buniek z primárneho tumoru a cirkulácia nádorových buniek (CTC) v periférnej krvi (PK) pacientky. V prípade generalizácie nádorovej choroby je možné v cca 7,5-10 ml PK dokázať desiatky až tisícky CTC. U zdravého človeka je dôkaz cirkulujúcich epiteloidných buniek sporadický.

Dôkaz genómu HR-HPV je jedinečným genetickým markerom na rozlíšenie CTC z karcinómu krčka maternice od zdravých buniek, ktoré neobsahujú genóm HR-HPV v PK. Detekcia CTC sa uskutočňuje pomocou genotypizácie HR-HPV v imunomagneticky zahustených epiteloidných bunkách s následným potvrdením viability nádorových buniek pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV. Indikujúci lekár: Gynekológ, onkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1 týždeň od prevzatia vzorky. Použitie testu je určené na nasledujúce účely:

1. detekcia CTC na zachytenie generalizácie nádorovej choroby 2. hodnotenie efektívnosti terapie 3. odhalenie možnej rekurencii nádorovej choroby 4. odhalenie možnej rezistencie na terapiu

Odber materiálu a transport: Odber cca 8 ml PK sa robí do jednorázových skúmavok s EDTA (ružový vrchnák, ako pre krvný obraz). PK sa v deň odberu musí transportovať na naše OLG OUSA čerstvá, materiál sa nesmie zmraziť. Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Vyšetrenie je potrebné vopred telefonicky dohodnúť. Pre interpretáciu výsledkov je potrebné poznať aktuálny klinický nález, prípadne aj hodnoty sérových markerov SCCA a CA125.

OLG

Vec: Legislatívne usmernenie k preventívnym zdravotným prehliadkam

Vážený pán doktor/ Vážená pani doktorka,

pre zlepšenie našej vzájomnej spolupráce a vzhľadom k tomu, že zdravotné poisťovne určili pri preplácaní zdravotníckych výkonov isté indikačné obmedzenia, by sme Vás radi informovali, ktoré laboratórne vyšetrenia na Ústave laboratórnej medicíny SZU a OUSA je možné žiadať pri preventívnej starostlivosti (dg. Z00, Z34, Z40, Z41). Zdravotné poisťovne pravidelne kontrolujú laboratórne vyšetrenia indikované pri preventívnych prehliadkach a uhrádzajú len parametre podľa zákona č. 577/2004 Z.z. – zákon o rozsahu zdravotnej starostlivosti uhrádzanej na základe verejného zdravotného poistenia v znení neskorších predpisov určuje náplň preventívnych prehliadok z klinického hľadiska a aj z hľadiska rozsahu laboratórnych vyšetrení.

Preto Vás žiadame, aby ste venovali pozornosť správnemu vypĺňaniu diagnózy, ak si žiadate aj iné, ako sú nižšie uvedené vyšetrenia.

Pre informáciu Vám uvádzame prehľad laboratórnych výkonov podľa odborností, ktoré sú súčasťou preventívnych prehliadok.


111

Preventívna starostlivosť o dorast a dospelých Názov výkonu:

1. Odber kapilárnej krvi 2. Odber venóznej krvi (otvorený aj uzatvorený odberový systém) 3. Kreatinín (PHOT, ENZ)) 4. Kreatinin v kapilárnej krvi (REP) 5. Močový sediment (semikvantitatívne) 6. Základné patologické súčasti moču (nekompletný dôkaz) 7. Okultné krvácanie v stolici INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov starších

ako 50 rokov a u poistencov s pozitívnou rodinnou anamnézou karcinómu hrubého čreva a konečníka

8. Glukóza (ENZ, ECH) 9. Glukóza v kapilárnej krvi (REP) 10. Cholesterol celkový INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom

kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov 11. Cholesterol celkový v kapilárnej krvi (REP) INDIKAČNÉ OBMEDZENIE:

u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov

12. Triacylglyceroly INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov

13. Triacylglyceroly v kapilárnej krvi (REP) INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov

14. Erytrocyty – počet (MICC) 15. Hemoglobín (PHOT) 16. Hemogram 5 parametrový 17. Leukocyty – počet (MICC) 18. Sedimentácia erytrocytov – FW 19. Trombocyty – počet (MICC)

112

Preventívna gynekologická prehliadka Názov výkonu:

1. Tumor marker Ca 125 INDIKAČNÉ OBMEDZENIA: U žien s pozitívnou mutáciou BRCA1 génu raz za 6 mesiacov vo veku do 30 rokov, u žien s pozitívnou rodinnou anamnézou karcinómu ovária raz za rok vo veku od 35 rokov

Preventívna starostlivosť v materstve Názov výkonu:

1. Odber venóznej krvi (otvorený aj uzatvorený odberový systém) 2. Močový sediment (semikvantitatívne) 3. Základné patologické súčasti moču (kompletný dôkaz) 4. Rubeola, protilátky triedy IgG (IMA) 5. Rubeola, protilátky triedy IgM (IMA) 6. Glukóza (ENZ, ECH) 7. Glukóza v kapilárnej krvi (REP) 8. Alfa-fetoproteín v sére 9. Alfa-fetoproteín v plodovej vode 10. Bilirubinoidy v plodovej vode (SPH) 11. Choriogonadotropný hormón 12. L/S pomer v plodovej vode 13. Zrelosť pľúc plodu z plodovej vody 14. Hemogram 5 parametrový 15. Hemogram 8 parametrový 16. Sedimentácia erytrocytov – FW 17. AB0 antigény krvných skupín kvantitatívne (MICC) 18. Rh-antigény (AGL) 19. HBsAg antigén (EIA) 20. Protilátky proti HIV 1+2 (EIA) 21. Protilátky proti Treponema pallidum (HA) 22. Kultivačné vyšetrenie moču kvantitatívne (CULT) 23. HBsAb – jednotlivo (EIA) 24. HBsAb – skupinovo (EIA) 25. HBsAg – kvalitatívny rýchlotest (EIA) 26. HIV protilátky – kvalitatívne (EIA ) 27. HIV protilátky – kvalitatívne (WB) 28. HIV protilátky – kvalitatívny rýchlotest (EIA) 29. HIV protilátky – kvantitatívne (WB) 30. Toxoplasma gondii IgG avidita (EIA) 31. Toxoplasma gondii – protilátky (CFR) 32. Toxoplasma gondii – protilátky (IF) 33. Toxoplasma gondii – protilátky kvalitatívne (LTX) 34. Toxoplasma gondii – protilátky semikvantitatívne (LTX) 35. Toxoplasma gondii IgA (EIA) 36. Toxoplasma gondii IgG (EIA) 37. Toxoplazma gondii IgM (EIA)

113

Preventívna urologická prehliadka Názov výkonu:

1. Odber venóznej krvi (otvorený aj otvorený odberový systém) 2. Odber kapilárnej krvi 3. Kreatinín (PHOT) 4. Kreatinín (ENZ) 5. Kreatinín v kapilárnej krvi (REP) 6. Základné patologické súčasti moču (nekompletný dôkaz) 7. Močový sediment (semikvantitatívne) 8. Prostatický špecifický antigén 9. Prostatický špecifický antigén voľný 10. Sedimentácia erytrocytov – FW

V prípade otázok nás prosím neváhajte kontaktovať

Kontakt:

Oddelenie manažérstva kvality a marketingu

Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o. Heydukova 10

812 50 Bratislava

email: [email protected]

tel: + 421 2 3224 8413 + 421 917 200 225 + 421 918 389 018