avance de proyecto del segundo departamental

7/24/2019 Avance de Proyecto Del Segundo Departamental

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Ingeniera de Biorreactores

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SEGUNDO AVANCE DE PROYECTODiseo de un biorreactor tipo Airlift para la produccin de de PHB

mediante Ralsto nia eutro pha.

Docente:M. en C. Diana Ramrez Senz

Equipo:Beatriz Andrea Durn Martnez

Citlali Lpez HernndezNorma Anglica Ramrez RodrguezManuel Alejandro Gonzlez Valadez


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Objetivo general del proyecto Disear un reactor airlift para la produccin de polihidroxibutirato (PHB) mediante

Ralstonia eutropha.Objetivos Especficos.

Generar la ecuacin de la reaccin qumica a llevar a cabo mediante un balance de

electrones. Determinar de manera terica la demanda total de oxgeno, produccin total del

Polihidroxibutirato y el crecimiento mximo del microorganismo en el sistema, ascomo todos los parmetros cinticos

Realizar una simulacin con ayuda Mathcad con los parmetros cinticos obtenidostericamente.

Aplicar los conocimientos adquiridos para el clculo de parmetros cinticos paracultivos por lote alimentado y continuo en un reactor airlift.

Determinar el coeficiente de transferencia de O2. Dimensionar el reactor.

INTRODUCCIN

En los ltimos aos la cantidad de plstico que se produce mundialmente ha incrementado,su popularidad se basa en su multifuncionalidad, resistencia, inalterabilidad a agentesatmosfricos, etc. En Mxico el 39% de la produccin de plstico est dirigida a empaques yalmacenamiento(Gngora, 2014). sta actividad utiliza los polmeros de manera temporallo que provoca una gran cantidad de residuos cuya mayora se va a basureros en vez deser reutilizados o reciclados, perdurando as hasta 500 aos sin descomponerse.

Es por ello que en los ltimos aos se ha implementado el uso de los biopolmeros, loscuales son producidos partir de recursos renovables y/o biodegradables. Estos puedenclasificarse segn su fuente de acuerdo a Ortegn y Uscategui (2013) aquellos que seproducen a partir de la biomasa (polisacridos y protenas), los monmeros,los Bio-derivados (Polilactato, aceites vegetales), y aquellos provenientes de organismos (PHA).En este caso se hablar sobre aquellos biopolmeros producidos por organismos. Los PHAsson sintetizados por algunas bacterias que los acumulan como fuente de reservaenergtica.

El polihidroxibutirato (PHB) es un polmero que es producido de manera de grnulos

intracelulares en los microorganismos como fuente para almacenar energa y carbono.Para que se de la produccin de PHB los microorganismos deben estar sometidos acondiciones limitantes de nutrientes como N, P, Mg, o bien O2 junto con un exceso en lafuente de carbono (Tavares, 2004). Bajo las condiciones de crecimiento antes mencionadasalgunos microorganismos pueden incluso acumular PHB de tal manera que este puedeconstituir hasta un 80% de su peso seco de acuerdo a lo que menciona Khanna (2004)como es el caso de la bacteria Ralstonia eutropha. El PHB adems es un polister alifticocon propiedades mecnicas similares a las del propileno y cabe mencionar que es 100%biodegradable. Aunque el PHB es un polmero prometedor para la produccin debioplstico, los costos de produccin siguen siendo elevados lo que ha llevado a unaexhaustiva investigacin de mtodos, materiales y microorganismos a emplear para que elproceso de produccin sea viable econmicamente (Kahar, 2003).


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La sntesis de PHB ocurre debido a que la enzima ketiolasa comienza a actuar debido ala falta de nutrientes en el medio, permitiendo la acumulacin de Coenzima-A libre. Deacuerdo a la ruta metablica de la bacteria, una baja concentracin de en el mediotambin permite un exceso de coenzimas reductoras como NADH y NADPH. Adems enun flujo alto de carbono podra ser direccionada a la sntesis de PHB para la reoxidacin de

estas coenzimas. Sin embargo muchas limitaciones de oxgeno provocan la formacin deintermediarios del ciclo de Krebs as como de la ruta de biosntesis de PHB. (Tavares, 2003)


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Figura 1. Ruta metablica de la bacteria Ralstonia eutroph a: (1) isocitrato desidrogenasa; (2)alfa-ketoglutarato deshidrogenasa; (3) succinato deshidrogenasa; (4) citrato sintasa; (5)piruvato deshidrogenasa; (6) beta-ketiolasa; (7) acetoacetil-CoA reductasa; (8) PHA sintasa. Laflecha indica la direccin de la ruta. (Tavares, 2003) Uno de los principales temas a abordar en el presente documento es el diseo y simulacin

de un biorreactor del tipo airlift. El biorreactor airlift es un equipo con sistema de agitadoneumtico que se caracteriza porque el suministro de energa para mantenerhomogeneidad en su interior tiene lugar mediante la expansin isotrmica de la fasegaseosa introducida. (Chisti, 1989). Este tipo de biorreactor cuenta con diversas ventajasfrente a otros reactores como la columna de burbujeo y los tanques agitados, puesproducen un menor dao celular, aceptan mayores tasas de aireacin y los costosenergticos son menores ya que no dependen de un sistema de agitacin mecnico,adems de que establece ambientes internos con esfuerzos de corte aproximadamenteconstantes en todo el contenido del biorreactor. (Chisti y Juregui-Haza, 2002).La aplicacin del biorreactor tipo airlift en tecnologas de biorremediacin ambiental se ha

incrementado, esto ha generado un nicho de bioprocesos que requieren alta transferenciade oxgeno, bajos consumos de potencia y agitacin no mecnica. (Kilonzo y col., 2006). Lahidrodinmica y la transferencia de masa dependen fuertemente de la configuracingeomtrica del reactor.Existen dos configuraciones bsicas de los biorreactores airlift (Figura 1):

Figura 2. Configuraciones en circulacin interna (a) y externa (b)

Circulacin externa: Presenta un brazo de descenso cuyo dimetro es generalmente menoral del cuerpo principal del biorreactor.Circulacin interna: Cuenta con un tubo concntrico que separa el cuerpo principal delbiorreactor.

Una de las desventajas de la configuracin externa es la presencia de su configuracinloop (o brazo de descenso) hacindolos menos verstiles a la hora de llevar a cabo

experimentos, as que de manera convencional la configuracin de circulacin interna es lams recomendable.

Tal como se aprecia en la Figura 2, en un biorreactor tipo airlift se toma las siguientesrelaciones geomtricas: altura del tubo concntrico (L2), altura de operacin (L1), dimetrodel tubo concntrico (D2), dimetro del biorreactor airlift (D1), distancia de la base delbiorreactor al tubo concntrico (fondo) y distancia del tubo concntrico a la altura de

operacin del biorreactor (separador gas-lquido).


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Figura 3. Biorreactor tipo Airlift con circulacin interna

El fin de la relacin de los factores forma es para determinar la velocidad de flujo en laentrada del sistema, as como la eficiencia de este y otros parmetros hidrodinmicos.

FUNDAMENTO DEL PROYECTO

El proyecto a desarrollar tiene como objetivo el diseo de un reactor airlift en el cual sepueda producir polihidroxibutirato (PHB) mediante R. eutropha. La produccin de PHB es degran importancia, ya que es un material 100% biodegradable que bien por sus propiedadesmecnicas podra sustituir al polipropileno de no ser por los altos costos de produccin

hasta ahora desarrollados. Los plsticos han ido formando parte de la vida cotidiana debidoa sus propiedades y resistencia a la degradacin, debido a que son no degradables seacumulan por millones de toneladas cada ao, debido a esto se ha producido una enormecontaminacin de desechos plsticos es por eso que ha surgido la necesidad de desarrollarmateriales con propiedades fsicas y qumicas similares a los de los plsticosconvencionales pero con la ventaja de ser biodegradables. Por tal razn es necesarioutilizar un microorganismo que produzca una gran cantidad de PHB. En este caso setrabajar con un reactor tipo airlift pues tiene como ventaja respecto a otros reactores comola columna de burbujeo y el tanque agitado que su tipo de agitacin es 100% neumtica, loque ayuda a que el dao celular sea menor, haya mejor aireacin y a que sus costos

energticos sean menores.

ANTECEDENTES

En abril del 2003 fue presentado en el Instituto de Investigacin Tecnolgica de Sao Paulo,Brasil el trabajo de investigacin Produccin de 3 Polihidroxibutirato en un reactor airliftmediante Ralstonia eutropha, trabajo que fue presentado por Lana Zanetti Tavares ycolaboradores.

La investigacin compara el efecto de variar la velocidad de aireacin durante la fase deacumulacin de PHB, tambin se calculan algunos otros parmetros como el tiempo de

mezclado, la transferencia de oxgeno, el oxgeno consumido, la potencia, y tambin secalculan los parmetros cinticos. A su vez se comparan los rendimientos de PHB que se


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obtienen en un reactor airlift y en un tanque agitado, aunque bien se obtiene un mayorrendimiento en el tanque agitado se necesita una potencia mayor en comparacin con elreactor airlift. Tambin es importante mencionar que de acuerdo a los resultados obtenidosen esta investigacin a bajas cantidades de O2 se obtienen mejores rendimientos. Estetrabajo muestra que es posible obtener buenas cantidades de PHB en un reactor airlift y

depende en gran medida de la velocidad de aireacin y la disponibilidad de nutrientes en elmedio.

De igual manera Khanna y colaboradores en el ao 2005 realizaron la investigacin deOptimizacin Estadstica para la produccin de PHB mediante Ralstonia eutropha. Seexpuso a la bacteria a diferentes fuentes de carbono para ver con cual se obtena unamayor productividad, entre las fuentes de carbono utilizadas se encuentran la fructosa, laglucosa, el cido lctico entre otros siendo la fructosa la fuente reportada con la que seobtuvo un mayor rendimiento. El microorganismo fue tambin expuesto a diferentes fuentesde nitrgeno entre los cuales se pueden mencionar a la urea, el sulfato de amonio y elnitrato de amonio. El objetivo de la investigacin era minimizar los gastos de produccin e

incrementar la productividad.

Definicin y justificacin de la seleccin del microorganismo

Ralstonia eutropha es una bacteria no patgena gram negativa capaz de crecer en mediosque contengan fuentes de sustrato orgnicos, o bien en presencia de H2 y CO2 bajocondiciones aerobias (Mller, 2013). R. eutropha es una de las bacterias ms estudiadasdada su capacidad de almacenar grandes cantidades de PHB (hasta un 80% de su pesoseco) a partir de fuentes de carbono simples (Khanna, 2004). Es por ello que se ha elegidoa R. eutropha para la produccin de PHB, pues se esperara obtener altos rendimientos del

producto dado que es uno de los microorganismos lderes en la produccin de PHB.

DIAGRAMA DEL PROCESO DE PRODUCCIN DE PHB

Figura 4. Diagrama general de produccin de PHB


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PARMETROS CINTICOS

De acuerdo a Tavares, et al (2003) Ralstonia eutropha requiere glucosa y fructuosa para laformacin de cido beta-hidroxibutrico (48 )

Adems el medio puede incluir una sal para regular el pH del medio, por lo que se consideraal sulfato de amonio ([NH4]2SO4) como fuente de nitrgeno.

En la reaccin tambin se puede usar la frmula de generacin promedio de biomasa(CH1.87O0.56N0.2), proporcionada por la autora Doran, P. (2013).

En base a los datos obtenidos, la reaccin de produccin del cido beta-hidroxibutrico, conbase de clculo de 1 mol al sustrato fue:

66 + + (4) 4 .79.. + 46 + + 4

Y teniendo en cuenta los siguientes resultados de Tavares, et al.

Tabla 1. Resultados obtenidos por Tavares, et al. (2003)

= 0.05; = 1.125Se obtuvieron parmetros cinticos mediante las siguientes regresiones lineales yecuaciones:Para obtener los siguientes parmetros cinticos.

= ; = 2

; =

; =

;1

= ; = ; = ;

=


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Tabla 2. Parmetros cinticos.

max(h^-1)

tD (h) Yxs(gx/gs)

Yps(gp/ps)

Ypx Ks ms mp

0.2920 2.37 1.764 0.932 0.14 0.749 0.024 0.01

Simulacin de CLA o CC en informe y archivo

Para la simulacin en CLA y CC, se realiz mediante el uso del programa Mathcad, setomaron los valores de parmetros cinticos evaluados en un tiempo de 0 a 12 y despusde 12 a 30 para CLA y CC, as mismo con 50 iteraciones en el codigo adems las frmulasusadas fueron las siguientes:

Matriz de Valores iniciales de Biomasa, Producto y Sustrato

Matriz de ecuaciones diferenciales de Biomasa, Producto y Sustrato respectivamente

Realizando una solucion de ecuaciones con el mtodo de Bulstoer, se muestra el resultadodel crecimiento bacteriano:


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Grafica 1. Simulacin de crecimiento bacteriano de Biomasa, Productoy Sustrato

Para las condiciones de CLA, en la simulacin se trabaj con un Volumen de 1.51 L con unflujo 0.025 L/h y con 35 g/L de sustrato, adems de que se usaron valores de biomasaproducto y sustrato en la iteracin 50 del programa, y se usan las siguientes matrices:

Matriz de valores iniciales con volumen, biomasa, producto y sustrato en la iteracin 50


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Matriz de ecuaciones diferenciales, de Flujo, Biomasa, Producto Sustrato respectivamente

Realizando una solucion de ecuaciones con el mtodo de Bulstoer, se muestra el resultado

del CLA.

Grfica 2. Simulacin de CLA de Biomasa, Productoy Sustrato

Para el de CC, aqu el volumen no es considerado en la matriz, es decir, el volumen esconstante en las ecuaciones y se obtiene la siguiente matriz.

Matriz de ecuaciones diferenciales, de Flujo, Biomasa, Producto Sustrato respectivamente


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Realizando una solucion de ecuaciones con el mtodo de Bulstoer, se muestra el resultadodel CC

Grfica 3. Simulacin de CC de Biomasa, Productoy Sustrato

DIMENSIONAMIENTO DEL REACTOR.Para el dimensionamiento del reactor es necesario especificar el dimetro del tubode arrastrey del reactor, el volumen y altura totales, as como el volumen y la alturade operacin, y su efecto sobre la hidrodinmica. De esta manera se iniciaestableciendo como consideracin inicial el dimetro del tubo de arrastre (D2). Esde suma importancia la adecuada seleccin del dimetrodel tubo de arrastre ya queste tiene un efecto significativo en el dimetro y altura del reactor. Por ejemplo, encaso de un aumento en el dimetro del tubo de arrastre existira una maladistribucin de aire dentro del rea de transferencia, esto se debe a que la mayorade gas permanece mayor tiempo en el canal de ascenso, lo cual aumenta suacumulacin en la parte superior y por ende, la generacin excesiva de espuma. Obien, en el caso de una disminucin, se generara una acelerada distribucin degases en el canal de descenso, lo cual produce turbulencias.

En ste caso se podra determinar el efecto de la geometra del tubo de arrastresobre los Re para el reactor Airlift trifsico ( fase lquida, orgnica y gaseosa).Diversos autores coinciden en que el factor de forma entre la altura del tubo dearrastre (L2) y la altura de operacin del lquido (L1) para Airlift oscila entre 0.6 y 0.9dependiendo de la viscosidad del medio, o bien entre el dimetro del tubo dearrastre (D2) y el dimetro del reactor (D1) de 0.6 a 0.8, (ver tabla --).De sta manera para un reactor Airlift de 10 L (considerando un reactor a escalalaboratorio), se podran evaluar tres relaciones de dimetros (D2/D1)1,2,3de 0.6, 0.7y 0.8 y tres relaciones de alturas (L2/L1)1,2,3de 0.6, 0.77,0.9. As, para cada una de

stas relaciones se obtiene un Re para la fase lquida con la simulacin de un mediobitico.


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Debido a la ausencia de sta experimentacin se toma en cuenta el medio predicho

usado en el proceso (ver tabla --), del cul se conoce la viscosidad , 0.00135

, la

densidad , 1000

, se considera el dimetro de arrastre de 0.13 m y v=0.11

.

Tomando en cuenta los valores predichos se obtiene Re= 10,592.59, lo cual nosindica un flujo turbulento en el tubo de arrastre, como se sabe el aire que circula enel dispositivo tiene una doble funcin, adems de llevar el oxgeno requerido para elmetabolismo microbiano, permite la creacin de la turbulencia necesaria en la faselquida para obtener una aceptable velocidad de transferencia de oxgeno y un buengrado de mezclado, lo cual nos deja ver que se obtuvo el tipo de flujo deseado enbase a las consideraciones realizadas.

Tabla 3. Composicin del medio usado en el proceso.

Para la produccin de PHB a partir de Ralstonia eutrophasegn lo mencionado porShilpi Khanna y Ashok K. Srivastava se tiene una mxima produccin en agua ydixido de carbono bajo condiciones aerbicas mientras que en metano bajocondiciones anaerbicas, debido a que el reactor airlift se trabaja totalmente encondiciones aerbicas y tomando en cuenta el medio de cultivo usado, en el cual setiene en mayores cantidades glucosa y fructuosa (ver tabla --.), se toma en cuenta elfactor de forma para la fase lquida sugerido por Cerri y col., presentado en la tabla -

--, en donde diversos autores en base a la viscosidad de cada medio de cultivopresentan relaciones geomtricas para diferentes fases lquidas. Tomando encuenta que la glucosa es derivado del glicerol.


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Tabla 4.Relaciones geomtricas para biorreactores airlift con recirculacin interna.

Las ecuaciones de dimensionamiento permite relacionar las medidas bsicas delreactor. Para obtener el dimetro del reactor se despeja del factor de forma D1.D2= (0.80) D1

D1=

.

.8 = 0.1625 mLa altura total del reactor tambin relaciona dicho factor:H=8D1H=(8)(0.1625m)H= 1.3 mA partir de la relacin de dimetros se calcula el volumen total del reactor, teniendoen cuenta que el volumen de un cilindro se expresa en funcin del rea (A) y la

altura (H) donde A=

41 , organizando algebraicamente se tiene:

VTr=

4

VTr=()(.)(.6)

4

VTr=0.026963 = 26.961 L

El volumen del equipo se determina por la suma del volumen del tanque (V Tr) y lastapas del reactor (Vt):VT=VTr+VtEl volumen de las tapas se calcula dependiendo su geometra y posicin en el

reactor. Para ste caso Vt equivale a 0 ya que las tapas se consideran planas ysuperpuestas a la parte superior del reactor.


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Para el clculo del volumen de operacin (Vop) se considera un intervalo establecidode 0.7 a 0.9 del VT. En ste caso se toma el punto medio del intervalo:Vop=0.8VTVop=(0.8)(26.961 L)

Vop

= 21.568 LAhora bien, se obtiene la altura de operacin (L1), sustituyendo el Vop en laecuacin del VTry despejando H, que en ste caso sera L1:

L1=4

()()

L1=(4)(.68)

()(.6)

L1=1.039 mTomando en cuenta el factor de forma L2/L1, se despeja L2 para obtener la alturadel tubo de arrastre:L2=(0.8)(1.039m)L2=0.8312 mDe la misma manera, se obtiene la dimensin del fondo y separador utilizando susrespectivos factores de forma:Fondo=(1.039m)(0.09)Fondo= 0.09351mSeparador= (1.039m)(0.1)Separador= 0.1039m

Tabla 5. Variables de dimensionamiento.


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DIAGRAMA DEL REACTOR.

Figura 5. Diagrama del reactor Airlift con el dimensionamiento obtenido.

DESCRIPCIN DEL SISTEMA DE AGITACIN, CONDICIONES DEOPERACIN, REOLOGA Y POTENCIA DEL MOTOR, CLCULOS.

En un biorreactor de tipo Airlift, el sistema de agitacin no depende de la presencia de laPotencia mecnica, sino que depender directamente de una Potencia neumtica, esto conel fin de mantener una aceptable velocidad de transferencia de oxgeno, al mismo tiempo, elconsumo de energa es moderado, puesto que slo se consume la cantidad necesaria parala compresin del aire que provoca el mezclado. (Chisti et al., 1988).Por ello el aire juega un papel importante en la determinacin de la agitacin y la potenciaen el sistema, ya que adems de transportar el oxgeno necesario para la transferencia demasa, tambin generar un efecto de turbulencia para el tiempo de mezclado.

El tiempo de mezclado en un biorreactor tipo airlift est relacionado con el tiempo derecirculacin de la configuracin interna (tc), la siguiente ecuacin es una relacinpropuesta por Tavares L. el atl (2003):

Donde:tc: tiempo de recirculacin (s)Ad: rea del downcomer (m2)Ar: rea del tubo de arrastre (m2)Vs: Velocidad superficial del gas (m/s)


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Y el tiempo de mezclado (tm) se define como:

Para determinar la potencia que se necesita suministrar al sistema, se debe conocerprimero la reologa en el sistema.El nmero de Reynolds es el nmero adimensional para describir la reologa de un fluido, laexpresin matemtica para determinar dicho nmero relaciona las fuerzas cinemticas entrela fuerzas viscosas:

Donde:v: velocidad (m/s)

D: Dimetro (m)p: densidad (kg/m3): Viscosidad (kg/m*s)

Existe una variacin de la frmula de Reynolds para tanques agitados en la cual seinvolucra el dimetro del impulsor y la velocidad de este, pero debido a que en unbiorreactor airlift no hay presencia de fuerzas mecnicas para la agitacin, por lo que estavariacin en el nmero de Reynolds no es considerado adecuada y la expresin anteriorpara el Nmero de Reynolds se puede utilizar utilizando las propiedades del medio lquido.

Para obtener la potencia es necesario obtener primero el nmero de potencia (Np), paraellos se determina el nmero de Reynolds, y en base a eso se busca en grficas en las quese relaciona el Nmero de Potencia (Np) y el nmero de Reynolds. Una vez obtenido elNmero de potencia se puede calcular la potencia. Bello R.a, et al (1985), determinaronuna ecuacin para el clculo de potencia gaseada en biorreactores tipo Airlift:

Pg: Potencia Gaseada (W)V: Volumen (m3)

Vs: Velocidad (m/s): Densidad (m3/s)g: gravedad (kg*m/s2)Ad: rea del downcomer (m2)Ar: rea del tubo de arrastre (m2)

Durante la 30 horas del experimento bajo estas condiciones, se logr una velocidadsuperficial de aire de 0.11 ms-1, una densidad de 1000 Kgm-1s-1, un volumen de 21.56x10-3

m3 (volumen de operacin), un rea del downcomer de 6.72x10-3m2y un rea de riser de4.3x10-3 m2, se obtiene la potencia gaseada con un valor de 9.07814 W.


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Utilizando los mismos datos de velocidad superficial y reas de downcomer y riser sedetermin un tiempo de mezclado aproximado a 12.8395 s

Descripcin del(los) mecanismo(s) de transferencia de masa en el reactor (incluyeseleccin y diseo del sistema de aireacin), clculos

Como se explic antes, el sistema de aireacin es el responsable de la agitacin dentro delreactor airlift, pero en trminos de transferencia de masa (que en este caso es el oxgeno),el sistema con recirculacin interna muestra un eficiencia buena para realizar ambosprocesos (agitacin y transferencia). en la Fig. , se pueden observar los patrones de flujo dela aireacin dentro de un tanque airlift con un tubo de arrastre situado en el centro.

Fig 6. Biorreactor tipo Airlift con patrn de flujo (Rojo)

De acuerdo con Torres (2007), la siguiente ecuacin diferencial muestra la velocidadespecfica de consumo de oxgeno incluyendo el tiempo de respuesta del electrodo:

Donde:KLa: Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno (h

-1)C*: Solubilidad de oxgeno en el medio (g/L)CL: Concentracin del oxgeno disuelto en el medio (g/L)QO2: Velocidad especfica de consumo de oxgeno (mmol O2g clulas secas

-1h-1)X: Concentracin de las clulas secas en el medio (g/L)

En este caso para determinar el coeficiente de transferencia de oxgeno, se considera queno ocurre un consumo de oxgeno por parte del organismo, reconsiderando la frmula e

integrando de CL1y CL2, as como de t1 a t2:

En base a esta frmula, se realiza un regresion lineal en donde el valor de la pendiente es elvalor de coeficiente de transferencia de oxgenoEn base a los resultados obtenidos por Fiorese, M. (2008) para el microorganismo R.eutropha se obtiene los siguientes datos:


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Grfica 4. Variacin de la concentracin de Oxgeno Disuelto durante el mtododinmico para R. eutroph a(Fiorese, M., 2008)

Tabla 6. Valores para la determinacin de kLa por regresin lineal obtenidos de(Fiorese, M., 2008)

Concentracin de Oxgeno (g/L) Tiempo (h)

0.0023 0.081

0.0027 0.083

0.0035 0.087

0.0040 0.090

0.0048 0.092

0.0052 0.094

0.0057 0.095

0.0059 0.096

0.0061 0.097

0.0063 0.098


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Fiorese, M. (2008). Estratgias de cultivo e recuperao e caracterizao de poli (3-hidroxibutirato) produzido por ralstonia eutropha.

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