Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Biotecnologia da Reprodução Animal

Avaliação Microscópica do Sêmen

Vicente José de F. Freitas

Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução

www.uece.br/lfcr

Plano de Aula

�  Apresentar a importância da realização da técnica.

�  Discutir os diferentes parâmetros macroscópicos

seminais.

�  Apresentar a técnica de avaliação computadorizada.

�  Apresentar considerações finais sobre o tema

Conceito

�  Etapa de avaliação de reprodutores onde são considerados os

parâmetros microscópicos seminais.

�  Faz parte da rotina de centrais de IA quando:

�  da escolha de doadores de sêmen e

�  da manipulação e processamento do sêmen para congelação.

Parâmetros a serem observados 1.  Macroscópicos:

a.  Volume, b.  Cor, c.  Aspecto, d.  Turbilhonamento.

2.  Microscópicos: a.  Motilidade massal, b.  Concentração, c.  Motilidade espermática,

I.  Motilidade individual progressiva II.  Vigor

d.  Morfologia espermática.

Motilidade massal •  Conceito: •  É o movimento em forma de ondas observado em

uma gota de sêmen puro.

•  Técnica: •  10 µl de sêmen puro em uma lâmina. •  Observar no microscópio na objetiva de menor

aumento (4 ✕).

Motilidade massal

Concentração espermática •  Conceito: •  Representa o número total de espermatozoides por

mL.

•  Técnica: •  em câmara de Neubauer, •  em fotocolorímetro.

Motilidade espermática 1.   Motilidade individual progressiva:

1.  Estimativa subjetiva da viabilidade e qualidade espermática.

2.  Análise realizada em microscópio óptico. 3.  Avaliação pode ser dificultada em altas concentrações

espermáticas; 4.  10 a 20µL de sêmen são colocados entre lâmina e

lamínula. 5.  Células móveis são contadas e estimado o percentual.

2.  Vigor: 1.  Velocidade na qual as células atravessam o campo; 2.  Notas entre 1 a 5.

Motilidade espermática

Morfologia espermática

1.  Conceito: 1.  Estimativa do percentual de células normais e patológicas.

2.  Técnica: 1.  Amostra é diluída e conservada em formol salina. 2.  Avaliação através de esfregaço e coloração;

1.  Hematoxilina-eosina ou Giemsa, Rosa de Bengala. 2.  100 a 200 sptz devem ser avaliados.

3.  Espermatozoides morfologicamente normais (%): •  Bovino: 65 – 90 •  Ovino: 80 – 95 •  Caprino: 80 – 95 •  Suíno: 70 – 90 •  Equino: 60 – 90

Classificação das anormalidades espermáticas: • Primárias: associadas a cabeça e acrossomo; • Secundárias: gotas citoplasmáticas; • Terciárias: defeitos de cauda

Análise computadorizada

Sistema de Análise Espermática Computadorizado – CASA

Ø  Sistema automatizado (hardware e software) para visualizar e digitalizar

imagens sucessivas dos espermatozoides.

Ø  Processa, analisa e fornece informações da cinética individual das células

e valores estatísticos.

Ø  Proposto e aplicado na tentativa de minimizar os efeitos da avaliação

subjetiva do sêmen.

Considerações

�  A avaliação dos parâmetros seminais microscópicos é a última etapa da escolha de reprodutores antes de confirmar a fertilidade dos mesmos.

�  Técnicas modernas de avaliação (CASA) podem tornar mais “qualitativa” o exame dos espermatozoides ejaculados.