aplicaciones diagnÓsticas de la … · •fibrillas no ramificadas de 7-12 nm Ø •gn fibrilar...
TRANSCRIPT
APLICACIONES DIAGNÓSTICAS
DE LA MICROSCOPÍA
ELECTRÓNICA EN PATOLOGÍA XXVI Congreso Nacional de la SEAP-IAP
XXI Congreso Nacional de la SEC
II Congreso Nacional de la SEPAF
22-24 mayo 2013
Dra Nuria Juanpere
Servicio de Patología
Hospital del Mar, Barcelona
INTRODUCCIÓN
• Ruska y cols. Alemania, 1931-1933
• Comercialización Siemens, 1939
• Aplicación en Ciencias Biológicas y
Médicas, 1950-60
• Gran impacto sobre nuestro conocimiento
de la Biología y la Medicina
INTRODUCCIÓN
• Poder de resolución:
• Distancia más pequeña a la que pueden encontrarse
dos partículas para ser observadas como diferentes
• x1000 respecto al microscopio óptico
0,2 mm 0,2 m 0,2 nm
INTRODUCCIÓN
• Biología celular e investigación
• Herramienta diagnóstica
– Profundiza en el conocimiento aportado por la MO
– Sustrato ultraestructural de la morfología óptica
– Información adicional / mayor precisión en el diagnóstico
– ~ 3% de las biopsias
LIMITACIONES ME
• Infraestructura más compleja
• Entrenamiento más específico
• No sustituye a la MO:
– MO: mayor perspectiva del contexto lesión
– Identificación estructuras benignas y malignas
– Información MO es necesaria para el Dx ME
• ME: técnica complementaria
VENTAJAS ME
• Detecta estructuras muy pequeñas
dentro de las células (organelas) o en la
matriz extracelular
• Estructuras escasas, pero dispersas en el
tejido
• Estructuras específicas de una
enfermedad
VENTAJAS ME
• ME: Identifica estructuras
– Indetectables mediante IHQ • Anomalías estructurales
– Sin técnicas IHQ específicas
– Antígeno muy escaso
• IHQ: varios Ac para visualizar varias estructuras
• IHQ: muchos anticuerpos son relativamente inespecíficos
INDICACIONES ME
• Enfermedades no neoplásicas – Renales
– Ciliares
– Neuromusculares
– Metabólicas
– Infecciosas
– Cutáneas
– Hematológicas
• Enfermedades neoplásicas
ENFERMEDADES RENALES
• Definición patología glomérulo
• MO, IF, ME: protocolo integrado Bx renal
– MO: morfología en conjunto
– IF: composición / localización depósitos inmunes
– ME: Esencial para el Dx: 11-25%
Confirma el Dx
Datos adicionales
a los de IHQ / IF
36%-75%
Nefron.png
CORPÚSCULO RENAL
Alteraciones del epitelio visceral
(podocitos)
• Nefropatía de cambios mínimos
• MO: glomérulo aparentemente normal
• IF: negativa
• ME: borramiento de los procesos
podocitarios o pedicelos
ENFERMEDADES RENALES
Alteraciones de la membrana basal
glomerular
• Síndrome de Alport
• Enfermedad de la membrana basal fina o
hematuria familiar benigna
ENFERMEDADES RENALES
Enfermedades con depósitos inmunes
subepiteliales
• Glomerulonefritis membranosa
• Primaria: autoAc circulantes contra una
proteína podocitaria que activan la vía del
complemento y dañan a los podocitos
• Secundaria: infecciones, neoplasias,
enfermedades autoinmunes, fármacos
ENFERMEDADES RENALES
Enfermedades con depósitos inmunes
subepiteliales
• Glomerulonefritis aguda postinfecciosa
(GN proliferativa endocapilar)
• Jorobas (“humps”), infiltrado inflamatorio
endocapilar (macrófagos, PMN), y
ocasionalmente semilunas
• Nefritis lúpica
ENFERMEDADES RENALES
Enfermedades con depósitos inmunes
subendoteliales
• GN mesangiocapilar
(membranoproliferativa) tipo I
• Crioglobulinemia
• Nefropatía lúpica
• Enfermedad de depósitos densos
(GNMC tipo II)
ENFERMEDADES RENALES
Enfermedades con depósitos
mesangiales
• Nefropatía IgA (enfermedad de Berger)
• GN más frecuente
• Depósito mesangial de complejos inmunes IgA1 +
autoanticuerpo
• GN mesangiocapilar (membranoproliferativa)
tipo I
ENFERMEDADES RENALES
Enfermedades con depósitos
organizados
• Amiloidosis
• Primaria y asociada a MM (amiloide AL y AH)
• Secundaria o reactiva (amiloide AA)
• Fibrillas no ramificadas de 7-12 nm Ø
• GN fibrilar
• GN inmunotactoide
ENFERMEDADES RENALES
CILIOS: especializaciones de la superficie apical de las células epiteliales
• Epitelio bronquial:
– Limpian vías aéreas de moco, microorganismos y partículas
• Epitelio tubárico:
– Propulsan al óvulo hacia la cavidad uterina
ENFERMEDADES CILIARES
MOTILIDAD CILIAR:
9 pares de túbulos periféricos y 1 par central, unidos por proteínas (brazos de dineína)
ENFERMEDADES CILIARES
DISCINESIA CILIAR:
• Pérdida total/parcial de la motilidad ciliar – Congénita (Síndrome de Kartagener):
• Infecciones respiratorias, neumonías de repetición, esterilidad, alteraciones en la posición del corazón
– Secundaria: tabaco, contaminación, infecciones repetidas
• ME: pérdida de componentes del cilio en distintas proporciones
– Único método para el estudio morfológico de los cilios
– DxD entre alteraciones congénitas o secundarias
ENFERMEDADES CILIARES
ENFERMEDADES MUSCULARES
• Músculo: completar estudios de MO e HQ
• Miopatías:
– Inclusiones: nucleares, citoplasmáticas,
mitocondriales
– Acúmulo de proteínas filamentosas
– Alteraciones de la sarcómera
ENFERMEDADES METABÓLICAS
ENFERMEDADES LISOSOMALES:
• Defectos enzimáticos congénitos
• Acumulo anómalo de productos en lisosomas
• ME:
– Inclusiones típicas (Gaucher, Fabry, enfermedad de celulas I)
– Inclusiones inespecíficas (estudio BQ posterior)
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Dx de patógenos no identificables con
métodos tradicionales: – Microorganismos no cultivables
– El tejido disponible no puede ser cultivado (formol)
• Identificación de microorganismos
aunque sean muy escasos
• Distinción de artefactos
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Técnica polivalente
– detección de distintos microorganismos en
una sola determinación
• Visión más amplia: – No es necesaria una sospecha específica
– Identificación de microorganismos en muestras mal preservadas
– Relación del microorganismo con las células y tejidos del huésped
• Técnica de screening
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Virología: principal aplicación
práctica de la ME en el estudio
de las EI
– Visualizar partes del virus
– Infección productiva
– Distinción de especies
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
Bacterias
• Enfermedad de Whipple
• Angiomatosis bacilar
• Espiroquetosis intestinal
52
Cryptosporidium sp.
Ooquiste de Cryptosporidium
Cápsula
Gránulos
mucina
N
Microvellosidade
s intestinales
C
Trofozoíto
ENFERMEDADES NEOPLÁSICAS
• Diferenciación: células tumorales
intentan reproducir la morfología
normal de las células del tejido del
que provienen
• ME: clasifica los tumores en función
del tipo de diferenciación
ENFERMEDADES NEOPLÁSICAS
• Está indicada la ME cuando en la IHQ:
– No se obtiene más información
– Se obtienen resultados contradictorios
– La batería de Ac es demasiado amplia
– Sólo un Ac es positivo
– Todos los Ac son negativos
– Como control de calidad