microbiologÍa de alimentos. tÉcnicas de anÁlisis microbiolÓgico en frutas y hortalizas frescas...

MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.

TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA.

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.

Dr. Iván Salmerón.Nolbertha Corral Soriano

Erwinia carotovora.

Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. Siendo estas del grupo de los coliformes. NOM-112-SSA1-1994 Bienes y Servicios. Determinación de

bacterias coliformes. Técnica del numero mas probable (NMP)

Proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente en los tubos con crecimiento

positivo

Densidad esperada es 1 bacteria X 10ml de

liquido o X g de alimento solido

FUNDAMENTO.

Bacterias coliformes Fermentan la lactosa

Incubadas a 35 ± 1°C durante 24 a 48 horas.

Resultando una producción de ácidos y gas el cual es manifestado en forma de turbidez.

Bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos.

REACTIVOS.

Solución reguladora de fosfatos.

Caldo lactosado

Caldo lauril sulfato triptosa

Caldo lactosa bilis verde brillante

Medio selectivo de mayor concentración.

Medio selectivo de enriquecimiento.

Medio confirmativo.

Preparación de muestra

PROCEDIMIENTO.

10 ml de Caldo lactosado.

1ml de la dilución primaria inicial NOM -110

10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa.

Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas

PRUEBA PRESUNTIVA.

10 ml de la dilución primaria inicial (NOM- 110)

Realizar diluciones según se necesite.

PROCEDIMIENTO.

Tubos con presencia de gas

10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante.

PRUEBA CONFIRMATIVA.

Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas

Después del tiempo de incubación de la prueba presuntiva

Dilución 10-1

Dilución 10-2

Dilución 10-3

Índice del

NMP/100ml

0 0 1 3

0 1 0 3

1 0 0 4

1 0 1 7

1 1 0 7

1 1 1 11

1 2 0 11

2 0 0 9

2 0 1 14

2 1 0 15

Los resultados se expresan como numero de bacterias /g o ml

De los tubos positivos, se puede sembrar en el agar selectivo MacConkey e incubar a 37 ºC por 24 h.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos.

Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae en este agar.

FUNDAMENTO DEL AGAR.

Peptona

Lactosa

Sales biliares y cristal violeta

Desarrollo de los microorganismos.

Hidrato fermentable

Inhibidores de Gram positivos

Agar MacConkey

Agar MacConkey con Erwinia carotovora

Pequeñas colonias de color rojo o rosa

profundo