การจัดการตัวอย าง ส งตรวจ mers-cov ... ·...
Post on 30-Jun-2020
1 Views
Preview:
TRANSCRIPT
การจดัการตวัอยาง สงตรวจ MERS-CoV ทางหองปฏบิตักิาร
กรมวทิยาศาสตรการแพทย
การเกบ็ตวัอย่าง
ผูเก็บตวัอยาง
1. หนากาก N95 ขึ้นไป2. หมวกคลุมผม3. แวนครอบตา (Goggle) 4. ชุดกาวนผาแบบคลุมเต็มตัว5. สวมถุงมือยาง 2 ชั้น
12/12/2012
การเก็บตัวอยาง
ระบบทางเดินหายใจ
ชนิดตวัอยางจาก ผูปวยอาการ/ระบบ ชนิดสิ�งส่งตรวจ คาํแนะนําเพิ�มเตมิ
ท า ง เ ดิ น ห า ย ใ จ
สวนลาง
the must
bronchoalveolar lavage , tracheal aspirate
endotracheal aspirate, plurals fluid, sputum
ใหใสภาชนะปลอดเชื้อไมตองใส VTM ยกเวน
กรณีผูปวยใส tube ใหตัดสาย ET-tube จุมลงใน
หลอด VTM
ควรเก็บตัวอยางจากทางเดินหายใจสวนบนควบคูไปดวย( เพิ่มโอกาสการพบเชื้อ )
ทางเดนิหายใจสวนบน -nasopharyngeal aspirate, nasopharyngeal
wash ใหใสภาชนะปลอดเชื้อไมตองใส VTM
-เก็บnasopharyngeal swab และthroat swab
จุมลงในหลอด VTM(เพื่อเพิ่มปริมาณไวรัส)
ใช rayon หรือ draconswab ที่ไมเคลือบ calcium arginate(ยับยั้งปฏิกิริยา PCR)
ที่มา: BD Diagnostics insert: 2-2452 February 2005
การเก็บตวัอย่าง nasopharyngeal swab
ตัวอย่างจากระบบทางเดนิหายใจส่วนบน
ที�มา: BD Diagnostics insert: 2-2452 February 2005
การเก็บตวัอย่าง nasopharyngeal aspirate
ที�มา: มาตรฐานการปฏิบตัิงาน ตรวจวิเคราะห์เชื �อไข้หวดัใหญ่สายพนัธุ์ใหมช่นิด A(H1N1) ทางห้องปฏิบตัิการชนัสตูรสาธารณสขุ
การเก็บตวัอย่าง throat swab
ตัวอย่างจากระบบทางเดนิหายใจส่วนล่าง
ที่มา: Fremont Laboratory, Policy and Procedure 01/25/2010 version 2
การเก็บตวัอย่าง sputum lavage fluid
ที่มา: Strategies for the Diagnosis of Ventilator-Associated Pneumonia with expanded description of blind bronchoalveolar lavage (mini-BAL) methods
การเก็บตวัอยา่ง endotracheal tube แบบเข้าทางชอ่งปาก lavage fluid
ที�มา: Strategies for the Diagnosis of Ventilator-Associated Pneumonia with expanded
description of blind bronchoalveolar lavage (mini-BAL) methods
การเก็บตวัอย่าง Bronchoalveolar lavage fluid
ตัวอยางอื่นๆ
อาการ/ระบบ ชนิดสิ�งส่งตรวจ คาํแนะนําเพิ�มเตมิ
ทอ้งร่วง เกบ็อุจจาระ10-20 มล. หรือประมาณ 5-10 กรัมใส่ในภาชนะปลอดเชื�อ
-
ไตวาย เกบ็ปัสสาวะ10-20 มล.ใส่ในภาชนะปลอดเชื�อ
-
12/12/2012
ผู ้สั ม ผัส ใ ก ล้ ชิ ด(Asymtomaticcontact)
-nasopharyngeal aspirate, nasopharyngeal wash ให้ใส่ภาชนะปลอดเชื� อไม่ต้องใส่ VTM-เก็บnasopharyngeal swab และthroat swab จุ่มลงในหลอด VTM เดียวกัน(เพืEอ เพิEมปริมาณไวรัส)
ใช ้rayon หรือ dracon swab ทีEไม่เคลือบ calcium arginate (ยบัย ั�งปฏิกิริยา PCR)
การเก็บ ตัวอยาง จากผูสัมผัส
12/12/2012
การนําส่งตวัอย่างการบรรจตุวัอยาง บรรจภุณัฑ 3 ชั้น (ตามวิธกีารสงใน
ประเทศ)
อุ ณ ห ภู มิ ข ณ ะ นํ า ส งตัวอยาง
แชเย็น โดยบรรจุกอนน้ําแข็งพลาสติก (Ice pack) ในกลองนําสง
ติดตอ ได 24 ชั่วโมง
เครือข่ายห้องปฏบิตักิารกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์
10
ห้องปฏิบตัิการ วิธีตรวจ
สวส. Isolation,PCR ,Sequencing
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 1 (ตรัง)
PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 2 (อุดรธานี)
PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 3 (ชลบุรี) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 4 (สมุทรสงคราม) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 5 (นครราชสีมา) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 6 (ขอนแก่น) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 7 (อุบลราชธานี) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 8 (นครสวรรค์)
PCR, Sequencing
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 9 (พิษณุโลก) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 10 (เชียงใหม่) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 11(สุราษฎร์ธานี)
PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 12 (สงขลา)
PCR, Sequencing
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 13 (เชียงราย) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ที( 14 (ภูเก็ต) PCR
ศูนย์วิทยาศาสตร์การแพทย์ 14 แห่ง
ห้องปฏิบัตกิารเคลื(อนที(
สถานที�รับตัวอย่างส่วนกลาง : ศูนยประสานงานทางหองปฏิบัติการ (ศปส.) สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร
สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตรการแพทย จ.นนทบุรี
เวลาใหบริการ : วันทําการ เวลา 08.30-18.30 น. วันหยุดราชการ เวลา 08.30-16.30 น.
โทรศัพท 0-2951-0000 ตอ 99248, 99614 , 0-2591-2153โทรสาร 0-2591-5449, 0-2951-1485
กรณีเรงดวน (24 ชม) ศูนยประสานงานทางหองปฏิบัติการ (ศปส.) โทร. 089-318- 4596, 081-875-2792
วธิีตรวจวเิคราะห์ทางห้องปฏบิตักิาร
12/12/2012
สรุปแนวทางการตรวจวนิิจฉัยผู้ป่วยต้องสงสัยติดเชื&อไวรัสโคโรน่าสายพนัธุ์ใหม่ 2012 กรมวทิยาศาสตร์การแพทย์
ตรวจหา เชื&อ Novel corona 2012 และHouse keeping gene ( คุณภาพของตวัอย่าง)
ด้วยวธิี real time RT-PCR (screening for Upstream E- gene/orf 1a/orf 1b)
ผลการวิเคราะห 6-8 ชม
Neg 3 ยนี Pos 3 ยนีPos 1-2 ยนี
Negative PositiveInconclusiveส่งตรวจซํ� า 1-2 วนั
การตรวจอื่นๆ : การตรวจลําดับเบส : การเพาะแยกเชื้อ : การตรวจหาไวรัสชนิดอื่นๆ
12/12/2012
ตัวอยางการรายงานผล
ผลการวเิคราะห การรายงานผล วิธีรายงานไมพบสารพันธุกรรมของ 3 ยีน
ไมพบสารพันธุกรรม ของไวรัสโรคทางเดินหายใจตะวนัออกกลาง (MERS-CoV)
รายงานปกติ
2. พบสารพันธุกรรม ของ1-2 ยีน(Inconclusive)
Up-E gene NegativeORF 1a gene PositiveORF 1b gene Negativeสรุปผล: ไมสามารถสรุปผลไดแนะนําใหเก็บตัวอยางสงตรวจซ้ํา 1 - 2 วัน
แจง ผอ. รพ / ผอ. สํานักระบาด
3. พบสารพันธุกรรมของ 3 ยีน
พบสารพันธุกรรมของไวรัสโรคทางเดินหายใจตะวนัออกกลาง (MERS-CoV)
แจง ผอ. รพ / ผอ. สํานักระบาด
12/12/2012
การตรวจวเิคราะหตวัอยาสงสยั MERSในหองปฏบิตักิาร โรงพยาบาล
ผูปฏิบัติงาน
12/12/2012
การตรวจวเิคราะหตวัอยาสงสยั MERSในหองปฏบิตักิารโรงพยาบาล
ชนิดตวัอยาง รายการทดสอบ ความปลอดภยัตัวอยางทางเดินหายใจ Flu rapid test
Bacterial culture เตรียมตัวอยาง/ทดสอบ ในหอง DRA (ถาไมมี ทําในหองทีม่ี BSC class II)
ตัวอยางอื่นๆ เชน เลือด ปสสาวะ อุจจาระ
CBC, Blood Chemistry, serology
ทําในหองปฏบิตัิการประจํา
12/12/2012
การทาํลายเชือ้หลงัการวเิคราะห
1. นึ่งดวยความรอน ที่อุณหภูมิ 121°C นาน 20 นาที หรือ
2. น้ํายาฟอกขาว (Clorox®) 0.5% sodium hypochlorite นาน 30 นาที
เผา
ใชครั้งเดียวทิ้งนํากลับมาใชใหม
ทําความสะอาด ผึ่งแหง
วธิีตรวจวนิิจฉัยโรคทางเดนิหายใจตะวนัออกกลาง ตามมาตรฐานองค์การอนามัยโลก
วธิีตรวจวนิิจฉัย MERS รายละเอยีดวธิีวเิคราะห์
วธิีตรวจคดักรอง (Screening) วธิี Real time PCR ต่อ upE, orf 1a assay
วธิีตรวจยนืยนั (Confirmation) 1.วธิี Real time PCR ต่อ ORF1_b gene หรือ2. หาลาํดบันิวคลีโอไทมต์่อ RdRp หรือ N sequencing
top related